Praktisk arbeid • 427
Fotosyntesepigmenter Kapittel 9
1. Ekstrahering av pigmenter fra blad En fotosyntetiserende organisme vil inneholde ulike pigmenter for å kunne fange lyset og bruke energien derfra til å eksitere et elektron i fotodelens reaksjonssenter. Disse pigmentene vil særlig være til stede i bladene hos planter. Dere kan undersøke dem ved at dere løser dem opp i en væske. Denne væskeløsningen kan brukes i øvelsene på de neste sidene.
Utstyr – Blader fra ulike planter (men unngå svært saftige blader og blader med mye voks) – Aceton – Morter – Begerglass – Tesil
Framgangsmåte 1. Riv opp bladene i småbiter og ha dem i morteren. 2. Tilsett ca. 5 ml aceton til løsningen og knus bladene så godt du kan. Jo grundigere du knuser bladene, desto mer pigment får du løst ut i løsningen. 3. Hell løsningen over i et lite begerglass og press ut så mye som mulig av væsken fra det plantematerialet som ligger igjen i morteren. 4. Løsningen kan nå helles over i en liten glassbeholder med tett lokk og oppbevares noen dager i kjøleskap dersom du ikke skal bruke den i øvelsen på side 428 og 429, del 1 eller del 2 med en gang.
2. Ekstrahering fra en algekultur Du kan også ekstrahere klorofyllpigmenter fra grønnalger. Algekulturen bør ha høy konsentrasjon og mørk grønnfarge.
Utstyr – Grønnalge, Chlamydomonas reinhardtii eller Scenedesmus quadricauda – Sentrifuge – Aceton
Framgangsmåte 1. Bruk 4 ml 100 % aceton til 1 ml algekultur (husk glassrør). 2. Vent i 5 minutter. 3. Spinn så ned kulturen ved 10 000 rpm i 5 minutter. 4. Dekanter fra supernantanten til test-tubene. Test-tubene kan nå brukes til papirkromatografi, eller til spektrofotometer/kolorimeter (neste øvelse). Til læreren: Se www.gyldendal.no/bi for forslag til dyrking av alger. Elevene kan ekstrahere fra både alger og blader og deretter skanne disse prøvene i et spektrofotometer i bølgelengdene 350 nm til 730 nm.