3 estrutura e replicação do dna resumido

Estrutura e replicação do DNA Professor: Felipe Vieira de Souza

Replicação do DNA

• Procariotos • 1 replicon

• Eucariotos • Diversos

• Replicons • 1 vez por ciclo

Origem • Separação das fitas • DNA

• Parental – molde • 1 fita filha • Semiconservativo

• Forquilha de replicação • Origem

• Replicação • Unidirecional • 1 forquilha de replicação

• Bidirecional • 2 forquilhas de replicação

• Origem • OriC

• Bactérias • Replicação • Controlada – metilação • Adenina • Dam metilase

• 11 cópias GATC

CTAG

• Reconhecimento – Origem

• Fitas parentais separadas • Estabilizadas

• “bolhas de replicação” • Início da replicação • Forquilhas de replicação

• DNA polimerase • Síntese de DNA • Replicação

• Reparo

• Add nucleotídeos • 3’

• Diferentes tipos

• Eucariotos e Procariotos • DNA polimerase • Antiparalela

• Semiconservativa • 5’ – 3’ • Parental

dNTPs

• Funções DNA polimerase • Síntese • Catalisa crescimento

• 5’ – 3’

• Exonuclease • Remoção de bases – mal pareamento • 3’ – 5’

• Exonuclease • Degradação • 5’ – 3’

DNA Polymerase

Procariotos

• DNA Polimerase – Eucariotos • Polimerase δ • Replicação nuclear

• Polimerase ε • Replicação nuclear

• Polimerase α • Iniciação – priming

• Filamento contínuo • Leading

• Sentido da forquilha

• Filamento lagging • Fragmentos de Okazaki

• DNA polimerase III • Estende a fita

• Primer • 8 a 10 nucleotídeos • RNA • Primossomo • Primase • RNA polimerase

• DNA polimerase III – estende • DNA polimerase I – remoção de primers •

Exonuclease

• Ligase

Replicação • Precisão • 1 erro por 1010 nucleotídeos • Tautomerização • Add bases erradas • Mal pareamento • Formas • Ceto • Imino • Enol

• Replissomo • Montado na Origem

• Complexo nucleoproteico • DNA pol III – holoenzima pol III • Proteínas acessórias

• Enzimas processivas • Add milhares de nucleotídeos • Ligada à forquilha

• Enzimas distributivas • Add poucos nucleotídeos

• Replissomo • 2 classes de proteínas: Dupla hélice • Helicases • Abrem a hélice

• Topoisomerases • Mantenedora estrutural

• Impedem maior helicoidização

• Proteínas SSB (Single Strand Binding) • Ligação à fita simples

Distributiva Processiva

• Proteínas DnaA • Ligam-se a DnaA box

• Deselicoidização • Região A e T

• Proteínas DnaA se ligam • Proteínas DnaB • Helicases • 5’ – 3’

• Primase • DNA polimerase III

Replicação • Procariotos x Eucariotos • Genomas maiores • Replissomos similares – ↑ ou ↓ complexidade Procarioto

Eucarioto Ex. CAF-1

• Mais simples • Replissomo • 13 componentes

• Genoma maior • Replissomo • 27 componentes • Demonstar o nucleossomo

Eucariotos – Leveduras • 400 origens • 16 cromossomos • Regiões Ricas • AT

• Milhares de forquilhas • 23 cromossomos

• ORC – Complexo de Reconhecimento da Origem • Recruta Cdc6 e Cdt1 • Recrutam a Helicase

Região telomérica • DNA linear • Replicação • Fita leading • Contínua – ok

• Fita lagging • Descontínua

• Primers • Perda de sequências

Região telomérica

• Células somáticas • Pouca produção • Telomerase • Senescência

• Mais curtos – cada divisão

Obrigado!

Professor: Felipe Vieira de Souza Felipe.souza@unifacs.br