UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA ANÁLISIS DE MEDICAMENTOS Nombre: José Luis Gomezcoello Quichimbo Curso: 9no Semestre “B” Catedrática: Bioq. Farm. Carlos Alberto García González
DIARIO DE CLASE N° 28 UNIDAD V: Bases matemáticas y estadísticas en el control de calidad Determinación de Cloruro de Magnesio por espectrofotometría (MgCl2) Preparación del Reactivo de Trabajo
Tomar 500 µL de R1 Cromógeno y 500 µL de R2 con una pipeta automática de 500 µL.
Mezclar el R1 con el R2 y colocarlo en un tubo eppendorf hasta análisis.
Preparación del Calibrador
Abrir el vial cuidadosamente evitando la pérdida de material,
El Multicalibrator CC/H estará entonces listo para su uso.
Reconstituir el liofilizado con exactamente con 5 mL de agua destilada a 20-25ºC.
Antes de su uso, mezclar el contenido por inversión del vial. Evitar la formación de espuma.
Cerrar el vial y esperar 30 minutos, protegido de la luz.
Agitar suavemente varias veces en el tiempo de espera, evitando la formación de espuma, hasta que esté totalmente disuelto.
Preparación de la Muestra de Cloruro de Magnesio Natural
Se pesa 0.165 mg de cloruro de sodio.
El cloruro de sodio de disolverá en 50 mL de agua purificada.
Agitar bien hasta que haya una disolución completa.
El cloruro de sodio está listo para utilizar. Procedimiento para la determinaciòn de Cloruro de Magnesio por epectrofotometría UV-visible Equilibrar los reactivos y muestras a temperatura ambiente. Pipetear en tubos (eppendorf) rotulados de la siguiente manera. Tubos R1 Reactivo Muestra CAL Patrón
Blanco 1.0 mL -
Muestra 1.0 mL 10 µL -
CAL Patrón 1.0 mL 10 µL
Mezclar y dejar reposar los tubos durante 2 minutos a temperatura ambiente. Calibrar el espectrofotómetro para hacer la lectura a una absorbancia de 520 nm. Colocar en una cubeta el blanco (reactivo de trabajo) para encerar el equipo. Luego poner el patrón ya preparado en otra cubeta y hacer la lectura del mismo. Y por último colocar en otra cubeta la muestra problema. Hacer la lectura de cada una de las muestras que se vaya a analizar.
Fórmula utilizada para la determinación del Cloruro de Magnesio 𝑨 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 𝒙 𝑪𝒑𝒂𝒕𝒓𝒐𝒏 𝑨 𝒑𝒂𝒕𝒓𝒐𝒏 Dónde: A muestra: representa la absorbancia de la muestra A patrón: representa la absorbancia del patrón C patrón: la concentración del patrón (0,412mmol/L)
Resultados Obtenidos después del Análisis en el Espectrofotómetro NUMERO DE MUESTRA
Abs EN UVMINI
SPECTRONIC
Muestra 1 (Cl2Mg natural) Muestra 2 (Cl2Mg Fibeca) Muestra 3 (Cl2Mg Laturi) Muestra 4 (Cl2Mg natural concentrado) MAX MIN MEDIA DESV. STA
0,881 1,307 1,326
2,596 2,585 2,584
1,6
2,608
1,6 0,881 1,2785 0,29689336
2,608 2,584 2,59325 0,0112361
REACTIVOS
Absorbancia en Uvmini
Patrón
0,188
Absorbancia spectronic 2,411
Concentración de patrón 0.412mmol/L Ejemplo en Equipo Uvmini Muestra 1 (Cl2Mg natural):
0,881 𝑥 0,412 = 1,9307 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙 0,188
Ejemplo en Equipo Spectronic Muestra 1 (Cl2Mg natural):
2,596 𝑥 0,412 = 0,4436 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙 2,411
Jose Luis Gomezcoello Quichimbo CI. 07060245 44