UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA ANÁLISIS DE MEDICAMENTOS Nombre: José Luis Gomezcoello Quichimbo Curso: 9no Semestre “B” Catedrática: Bioq. Farm. Carlos Alberto García González
DIARIO DE CLASE N° 27 UNIDAD V: Bases matemáticas y estadísticas en el control de calidad Determinación de la Capacidad Antioxidante (DPPH) Preparación de Reactivo DPPH
Pesar 2.5mg de reactivo DPPH
Disolverlos en 100ml de metanol absoluto (0.025mg/ml)
Preparación del Extracto
Pesar 0,025g de muestra (ají), disolverlos en 4ml de metanol absoluto
Llevar a incubación a 60°C por 1 hora con agitación constante
Filtrar con jeringa de 1ml y microfiltros millipore 0.45 µm
El extracto filtrado debe ponerse en tubos sellados herméticamente
AnĂĄlisis de la Muestra con el Reactivo DPPH
Hacer un blanco con metanol y encerar el equipo a 515 nm
Tomar 1000 ÂľL de reactivo DPPH preparado (0.025mg/ml) y medir en el espectrofotĂłmetro 4 (por lo general no debe sobrepasar los 0.800 (A) de Absorbancia, caso contrario repetir la preparaciĂłn o revisar la concentraciĂłn de los reactivos)
Dejar reposar protegido de la luz por 30 minutos
Utilizar un espectrofotĂłmetro UV con longitud de onda de 515nm
Poner en una cubeta metanol absoluto para encerar, luego colocar una cubeta con reactivo DPPH (0.025mg/ml) y por ultimo una cubeta con la muestra problema.
Para el cĂĄlculo se utilizĂł la siguiente fĂłrmula
Tomar 1755 ÂľL de reactivo DPPH preparado (0.025mg/ml) y 45 ÂľL de extracto de muestra (ajĂ)
FĂłrmula %DPPH reducido = ((A0-Am) /A0) x 100 Donde: Ao= Absorbancia del reactivo DPPH (0,784) Am= Absorbancia de la muestra (promedio muestra 1 Ej.) Ejemplo: %đ?‘Ťđ?‘ˇđ?‘ˇđ?‘Ż đ?’“đ?’†đ?’…đ?’–đ?’„đ?’Šđ?’…đ?’? =
đ??´đ?‘?đ?‘ . đ?‘&#x;đ?‘’đ?‘Žđ?‘?đ?‘Ąđ?‘–đ?‘Łđ?‘œ đ??ˇđ?‘ƒđ?‘ƒđ??ť − đ??´đ?‘?đ?‘ . đ?‘šđ?‘˘đ?‘’đ?‘ đ?‘Ąđ?‘&#x;đ?‘Ž đ?‘Ľ 100 đ??´đ?‘?đ?‘ . đ?‘&#x;đ?‘’đ?‘Žđ?‘?đ?‘Ąđ?‘–đ?‘Łđ?‘œ đ??ˇđ?‘ƒđ?‘ƒđ??ť
% ���� =
0,784 − 0,403 đ?‘Ľ 100 0,784
% ���� = 48,60 %
Ejercicio número 1 Cod 23
Abs 1 0,470
Abs 2 0,300
Abs 3 0,600
Abs 4 0,500
%𝑫𝑷𝑷𝑯 𝒓𝒆𝒅𝒖𝒄𝒊𝒅𝒐 =
Abs 5 0,467
Abs 6 Media Desv Stand Min Max 0,470 0,468 0,09662451 0,300 0,600
𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻 − 𝐴𝑏𝑠. 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑥 100 𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 =
0,784 − 0,468 𝑥 100 0,784
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 = 40.31 % Ejercicio número 2 Cod 24
Abs 1 0,232
Abs 2 0,200
Abs 3 0,100
Abs 4 0,300
%𝑫𝑷𝑷𝑯 𝒓𝒆𝒅𝒖𝒄𝒊𝒅𝒐 =
Abs 5 0,200
Abs 6 Media Desv Stand Min Max 0,232 0,211 0,0653687 0,100 0,300
𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻 − 𝐴𝑏𝑠. 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑥 100 𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 =
0,784 − 0,211 𝑥 100 0,784
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 = 73.08 % Ejercicio número 3 Cod 26
Abs 1 0,448
Abs 2 0,200
Abs 3 0,500
Abs 4 0,600
%𝑫𝑷𝑷𝑯 𝒓𝒆𝒅𝒖𝒄𝒊𝒅𝒐 =
Abs 5 0,433
Abs 6 Media Desv Stand Min Max 0,448 0,438 0,13187379 0,200 0,600
𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻 − 𝐴𝑏𝑠. 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑥 100 𝐴𝑏𝑠. 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐷𝑃𝑃𝐻
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 =
0,784 − 0,438 𝑥 100 0,784
% 𝑫𝑷𝑷𝑯 = 44.13 %
Jose Luis Gomezcoello Quichimbo CI. 07060245 44