428 • Praktisk arbeid
Praktisk arbeid Fotosyntesepigmenter hos planter
3. Tørk med en hårføner og gjenta punkt 2 til du har fått en mørk flekk på kromatograferingspapiret.
Kapittel 9
4. Tilsett løpevæske til den typen kar du bruker (nok til at enden på papiret er nede i løsningen). Vær rask og presis, for løpevæsken er flyktig og fordamper raskt.
1. Papirkromatografering av foto syntesepigmenter
5. Fest papiret og sett det ned i løpevæsken. Den avsatte flekken MÅ være over væsken.
Papirkromatografi er en enkel og billig måte å separere stoffer fra hverandre på. Flekker med en blanding av flere stoffer settes på papiret, og løpevæsken med pigmentene i trekker seg oppover i papiret på grunn av kapillærkreftene. Store molekyler møter større motstand i cellulosen enn de små molekylene. Stoffene har også ulik løselighet i løpevæsken, og de mest løselige stoffene stiger høyest. Løpevæsken består av organiske løsemidler.
6. Tett igjen karet med aluminiumsfolie eller en tett pose. 7. Etter ca. 30 minutter, eller når væsken har trukket minst 10 cm opp i papiret, kan du ta ut papiret og la det stå til tørk stående. 8. Væskefrontene er en betegnelse på hvor langt væsken har gått i papiret. Merk av dette punktet på papiret. a)
b) Aluminiumsfolie
Utstyr
Kork
– Ekstraherte pigmenter i acetonløsning, se side 427
Nål
– Løpevæske (petroleumseter : aceton = 9 : 1) – Pasteurpipette
Papir
– Kromatograferingspapir – Målesylinder, begerglass, kromatograferingskar
Målesylinder (100 ml)
– Aluminiumsfolie – Knappenål – Hårføner
Kromatograferingspapir
Framgangsmåte 1. Trekk en horisontal linje med blyant og linjal ca. 2 cm opp på kromatografipapiret (kortsiden). 5 ml løpevæske
2. Bruk pasteurpipetten til å avsette løsningen på et bestemt punkt på den opptrukne linja.
Kromatograferingspapir
En flekk med en blanding av flere stoffer er satt på papiret
1211_Stoffer
Glassklokke
Kar med organisk løsningsmiddel (løpevæske)
1212_Klorofyll
Løsningsmidlet trekker oppover
Stoffene i den opprinnelige flekken har skilt lag