La importancia del análisis de micotoxinas

IMPORTANCIA del ANÁLISIS DE MICOTOXINAS Jog Raj, Hunor Farkaš y Marko Vasiljević PATENT CO., Serbia

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El análisis de las materias primas para pienso para detectar la contaminación con micotoxinas es de vital importancia, dado que el pienso puede verse afectado por el clima, las prácticas agrícolas y la legislación local sobre micotoxinas.

En un estudio realizado en 2017 sobre maíz cosechado en Serbia y Bosnia-Herzegovina se descubrieron altos niveles de aflatoxina B1, fumonisina B1 y fumonisina B2.

El uso global de materias primas en la producción de piensos destinados a la alimentación animal aumenta el riesgo de que aparezcan contaminantes químicos y microbianos en los animales destinados al consumo humano.

El pienso puede estar

Esta contaminación del pienso tiene

La amplia variedad de micotoxinas

contaminado con:

efectos negativos, tanto en la salud

hace que sea cada vez más

animal como en la humana, y las

importante analizar las materias

micotoxinas se están convirtiendo

primas antes de que entren a la

en uno de los contaminantes más

cadena alimentaria.

Microorganismos Micotoxinas Subproductos animales Contaminantes orgánicos Metales tóxicos.

importantes en el pienso y los alimentos.

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MICOTOXINAS Las micotoxinas son metabolitos secundarios producidos por varios hongos (mohos) entre los que destacan Aspergillus, Fusarium y Penicillium.

Las aflatoxinas, ocratoxina A, las fumonisinas, el deoxinivalenol, toxina T-2 y la zearalenona son las micotoxinas detectadas con mayor frecuencia en las muestras de alimento y pienso.

Muchas muestras de alimento y pienso pueden contaminarse con micotoxinas antes de la cosecha, durante el transporte y durante el almacenamiento.

INGREDIENTES Y PRODUCTOS FRECUENTEMENTE CONTAMINADOS Entre los ingredientes y productos empleados en la fabricación de piensos, y que se encuentran frecuentemente contaminados con micotoxinas se incluye: El maíz El trigo La cebada El arroz La avena Las nueces La leche El queso Los cacahuetes La semilla de algodón, etc.

PÉRDIDAS ECONÓMICAS

Las micotoxinas provocan una amplia variedad de efectos adversos y tóxicos en los animales, afectando a su salud general y a su productividad. Las micotoxinas provocan Micotoxicosis y conducen a significativas pérdidas económicas asociadas a : Reducción en la productividad de los animales Incremento en la incidencia de enfermedades

MICOTOXINAS MÁS PREOCUPANTES Las micotoxinas más preocupantes, debido a su toxicidad e incidencia son: La aflatoxina (AFB1) El deoxinivalenol (DON) la ocratoxina (Ochra A) La zearalenona (ZEA) La fumonisina (FB1 y FB2) las toxinas T-2.

Descenso en el rendimiento reproductivo.

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Hay regulaciones para las principales micotoxinas en productos alimentarios y pienso en al menos 100 países, la mayoría de los cuales hacen referencia a las aflatoxinas, existiendo grandes diferencias en los niveles máximos tolerados entre los distintos países.

Esta variabilidad en los niveles de micotoxinas tolerados y la falta de regulación de otros micotoxinas en otros países supone un gran reto para la industria de los piensos, cobrando cada vez mayor importancia el análisis de las materias primas para la detección de micotoxinas

Análisis de micotoxinas Para poder determinar si las materias primas y otros productos están contaminados con micotoxinas deben ser analizados.

Teniendo en cuenta la distribución heterogénea de las micotoxinas en los granos y demás productos, un muestreo adecuado es un prerrequisito para poder obtener resultados fiables.

MÉTODOS DE DETECCIÓN DE MICOTOXINAS Existen muchos métodos disponibles para la detección de micotoxinas.

Los métodos convencionales incluyen:

La mayoría de estos métodos emplean columnas en fase sólida de limpieza de extractos y técnicas de inmuno-afinidad para eliminar

antes de que pasen a la cadena

ELISA

las interferencias, mejorando así

alimentaria o de fabricación de pienso.

Cromatografía en

la detección de las micotoxinas.

Capa Fina (CCF) Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) Cromatografía de Gases (GC).

La técnica ELISA es el método de elección cuando se requiere un análisis rápido pero requiere de un análisis mediante LC-MS/ MS para la confirmación.

La LC-MS/MS es el método preferido y más sensible para la detección de micotoxinas en muestras de alimento y pienso.

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Métodos multi-micotoxinas Dado que es necesario analizar la presencia de micotoxinas en las muestras de pienso, Patent Co está utilizando un método UHPLC multi-micotoxina rápido y sencillo para la determinación y cuantificación precisa de todas las micotoxinas (aflatoxina B1, B2, G1 y G2, deoxinivalenol, zearalenona, fumonisina B1 y B2, toxinas T- y HT-2, ocratoxina A) reguladas en el pienso, mediante cromatografía

Este método de basa en el principio de “diluir y disparar” e incluye una extracción en dos pasos y la centrifugación de los extractos.

líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS).

Para compensar los efectos matriciales de la ionización por electro-spray, los extractos se mezclan con [13C]

RESULTADOS

marcado según los estándares internos para cada grupo de micotoxinas (13C AB1, 13C DON, 13C ZON, 13C OTA, 13C FB1 y 13C T-2) previa inyección en la LC-MS/MS. El método se ha validado con éxito en:

Las muestras en blanco incluyeron una mezcla de 11 micotoxinas estándar a dos niveles (LOQ y 10 x LOQ) en 12 réplicas. La RSDr (desviación estándar relativa de repetibilidad) del método se situó entre 2,5% y un 13,4%, y las recuperaciones aparentes oscilaron entre un 62% y un 115% para todos los analitos.

Maíz Pienso compuesto Trigo Cebada Harina de soja

CONCLUSIONES

Salvado de trigo Harina de girasol Ración total mezclada (TMR,

Se concluyó, por tanto, que el método de “diluir y disparar”

por sus siglas en inglés).

con la adición del [13C] de marcaje interno estándar es capaz de determinar todas las micotoxinas reguladas en la UE en

PARÁMETROS

alimentos para animales y en piensos compuestos.

Los parámetros de rendimiento se obtuvieron mediante validación interna.

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Estudio sobre maíz de los Balcanes en 2017 En un estudio reciente, se

Se recibió un total de 113 muestras

Se detectó aflatoxina B1 (AB1),

analizaron unas muestras de

para el análisis, 53% de las cuales

fumonisina B1 (FB1), fumonisina

maíz procedentes de Serbia y

resultaron estar contaminadas y un

B2 (FB2) y HT-2 en el 13%, 44%,

Bosnia-Herzegovina entre

28% de las muestras contaminadas

24% y 8% de las muestras,

agosto y noviembre de 2017.

contenían más de una micotoxina.

respectivamente (figura 1).

Figura 1.

13%

Aflatoxina B1 (AB1)

HT-2

8%

Fumonisina B2 (FB2)

24%

44%

Fumonisina B1 (FB1)

CONCLUSIONES Los niveles de estas micotoxinas detectadas en las muestras de maíz fueron:

Aflatoxina B1: 0,59-5.644 ppb Toxina HT-2: 9-66 ppb Fumonisina B2: 53-2.540 ppb Fumonisina B1: 48-8.623

El verano de 2017 fue muy seco y caluroso en los Balcanes. Las condiciones climáticas tienen un enorme efecto sobre la producción de micotoxinas, ya que podrían influir en la interacción entre los patógenos y las plantas.

Factores como la temperatura, humedad, ataque de insectos y condiciones estresantes para las plantas afectan a la capacidad de los hongos de producir micotoxinas. Por ello, los cambios de temperatura afectan directamente al crecimiento del hongo y, en consecuencia, su capacidad para producir micotoxinas.

Las temperaturas elevadas y la sequía pueden incrementar el riesgo de contaminación del maíz con aflatoxina y fumonisina. En este estudio se vieron efectos similares, al encontrarse que el maíz estaba contaminado con aflatoxinas y fumonisina B1 y B2.

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