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A linhagem celular 3T3 (camundongo) possui a forma de fibroblasto quando mantida em baixa densidade populacional, adquirindo, porém, a forma epitelial quando a cultura se encontra em fase estacionária. Células de rim de hamster (BHK) ou humanas (pulmão e pele) quando subconfluentes, possuem forma de fibroblasto multipolar. Ao alcançarem a confluência, tornam-se bipolares e se distribuem em uma forma alongada de feixes paralelos. Pelos motivos descritos anteriormente, alguns pesquisadores preferem a designação epitelioide e fibroblastoide para distinguir estas formas celulares. Entretanto, apesar do valor limitado, a identificação morfológica das células cultivadas in vitro é ainda de uso corrente nos laboratórios. Atualmente, além da morfologia, outros métodos são utilizados para a identificação e autenticação de determinada linhagem celular, entre os quais incluímos o cariótipo;5 análise de isoenzimas; imunocitoquímica e análise de DNA por enzimas de restrição.4
Migração e inibição por contato A técnica de microcinematografia mostra que as células cultivadas in vitro, particularmente os fibroblastos, se movimentam alcançando distâncias significativas na extensão do substrato. A migração é mais acentuada em culturas com baixo número de células e estimulada pela presença de fatores de crescimento presentes no soro, podendo, entretanto, ser interrompida quando as células fazem contato umas com as outras.6,7 No processo de migração, as células passam da forma achatada para a cúbica, assumindo polaridade morfológica (Figura 4.1A). Apesar de este mecanismo não estar ainda totalmente esclarecido, sabe-se que o movimento celular se faz à custa da formação de lâminas (lamelopódio), que consistem em uma projeção do citoesqueleto e do filamento de actina direcionados para a membrana celular.8 O lamelopódio gerado pela polimerização da actina se estende e adere ao substrato.9 A porção da membrana plasmática situada no lado oposto da célula se retrai, causando o movimento. Quando duas células se encontram, a polaridade é revertida e a migração é modificada para a direção oposta.10,11 Observa-se também que, quando as células atingem a confluência, ocorre parada do movimento e da proliferação celular. Este processo, originalmente descrito
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C o p y r i g h t ©2 0 1 4E d i t o r aR u b i oL t d a . R e b e l l o . F u n d a me n t o sd aC u l t u r ad eT e c i d oeC é l u l a sAn i ma i s . Al g u ma sp á g i n a s , n ã os e q u e n c i a i s , ee mb a i x ar e s o l u ç ã o .
Biologia das Células em Cultura
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