Diagnóstico de Rotavirus Licda. Massanet de Ramírez, QB, MSc Licdas. Argón, Aldana, Guarán, Del Cid. Y todo el equipo de trabajo del laboratorio del Sanatorio Nuestra Señora del Pilar 2,007
Introducción
Entre los virus que causan diarrea están: Rotavirus, astrovirus, adenovirus, calcivirus. Los rotavirus están relacionados con el grupo de los reovirus. Hay 7 grupos (A-E) que se distinguen por modelos antigénicos y de diferentes RNA. El grupo A es el que afecta a los lactantes y niños menores.
Los rotavirus del grupo A se dividen en 2 subgrupos: I y II, son clínicamente indistinguibles, salvo en que el segundo está asociado con menor cantidad de vómitos y más fiebre. El serotipo que predomina es el G1P8 Los anticuerpos producidos por los rotavirus pueden ser detectados por lo menos 1 año después de la infección natural y probablemente persiste más tiempo.
Estacionalidad En climas templados la prevalencia máxima de enfermedad corresponde al invierno, y la infección no es común en el verano.
18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 2,004 ene
Temp min °C
agos
mar
Transmisión La transmisión es por vía feco-oral y la prevención de la transmisión nosocomial es muy importante.
Periodo de incubación y excreción del virus El período estimado de incubación es de 24 a 48 horas. La cantidad máxima de virus se encuentra en las heces del 3° al 5° día después de iniciarse la enfermedad. La excreción del virus es mucho menor o falta después del 8° día.
Microfotograf铆a electr贸nica de Rotavirus en muestra de heces
Síntomas La diarrea de 5 a 8 días de duración es el rasgo principal de la enfermedad, acompañada de vómitos y deshidratación. La gastroenteritis por rotavirus es una de las enfermedades más comunes en los niños de todo el mundo y es causa de muerte de lactantes en países en desarrollo.
Diagnóstico El diagnóstico se ha desarrollado por las técnicas como enzimoinmunoanálisis, fijación de complemento, contrainmunoelectroforesis y hemoaglutinación por inmunoadherencia. El uso de anticuerpos monoclonales específicos contra el virus mejora la sensibilidad y especificidad de la detección del virus.
Hallazgos de laboratorio Como varias de las infecciones virales, el conteo de glóbulos blancos revela neutrofilia al principio de la enfermedad seguido después de 4 o 5 días de linfocitosis. Habrá presencia de grasa en heces por la deshidratación.
Datos interesantes
El Clinitest, para azúcares reductores puede ser positivo porque hay daño de las células epiteliales del intestino, que son el blanco de los rotavirus impidiendo la absorción de la glucosa. La presencia o ausencia de leucocitos polimorfonucleares en las heces no marca una regla.
Objetivos Establecer parámetros que sirvan de ayuda en el Departamento de Pediatría del Hospital para el seguimiento de los pacientes durante la epidemia de rotavirus esperada al final de cada año con el descenso de la temperatura. Analizar las diferencias entre los datos de laboratorio como recuentos de glóbulos blancos, fórmulas leucocitarias, resultados en las muestras de heces, coprocultivos.
Metodología Se analizaron todos los resultados de las muestras enviadas al laboratorio para examen de Rotavirus durante el año 1999, al cual se le llamará grupo 1. Las muestras de la epidemia de 2,001 al 2,005 (del 1 de enero a mayo de 2,005), al cual se le llamará grupo 2. Y las muestras de la epidemia de finales de 2,006-2,007, grupo 3
En el grupo 1 fueron enviadas 95 muestras de heces durante el año, de éstas 52 (54.7%) fueron positivas. El grupo 2 comprendido por 2,054 pacientes de enero de 2,001 a mayo de 2,005. De éstos fueron positivos 1,054 (51.2%). El grupo 3, presenta 162 casos, 90% positivos.
Grupo 1: La edad de la mayoría de los pacientes fue de 0 a 40 meses. Grupo 2: La edad de la mayoría de los pacientes es de 0 a 48 meses, notándose el grupo más importante en niños de 12 a 23 meses. Grupo 3: De 12 a 35 meses fue 58%.
El método diagnóstico que se usó en el grupo 1 fue Rotavirus Abbott Testpack ®, que es un ensayo inmuno enzimático para la detección rápida del antígeno de Rotavirus de los especimenes de heces fecales humanas. El grupo 2 fue analizado con: RIDA QUICK ® Rotavirus/Adenovirus Kombi de R- Biopharm, es un test inmunocromatográfico rápido para la identificación cualitativa del antígeno. (y el de ARQUISA) El grupo 3: Operon ®, stick rotavirus. Test inmuno ensayo cromatográfico para la detección cualitativa in vitro del antígeno.
La sensibilidad reportada por la casa comercial del método utilizado es de 93.1%, con especificidad de 95.8%, comparados contra Microscopía electrónica. Para los otros grupos 2 y 3: Sensibilidad de 99% y especificidad de 97.8%. Valor predictivo positivo: 85.7%, Valor predictivo negativo: >99%
Resultados Grupo 1 El total de muestras de heces enviadas a lo largo del año para análisis de rotavirus fueron 95. De éstas 52 (54.7%) fueron positivas y 43 (45.3%) negativas. La mayoría de los pacientes con resultado positivo estuvo comprendida entre los 16 a 20 meses de edad.
Resultados grupo 1 53% Neutrofilia > 81% Presencia de grasa 18% Clinitest o azĂşcares en heces 0% Sangre oculta positiva Coprocultivo Negativos
Resultados Grupo 2
Neutrofilia >65
Presencia de gasa Clinitest o azĂşcares en heces Sangre oculta positiva
2,001
2,002
2,003
2,004
2,005
42%
76%
75%
81%
86%
38.5
54 %
63 %
69.2 %
3.84%
1.66%
1.36%
0.76%
25%
24.9%
51.7%
43%
Negativos
1 positivo para Sh. sonnei
Negativos
Negativos
6-7
6-7
6-7
6-7
Coprocultivos 1 positivo para Sh. sonnei pH
56.4 %
6
0.35%
38%
Resultados Relevantes del Grupo 2 90 80 70 60 Neutrofilia Grasa Clinitest
50 40 30 20 10 0
2,001
2,002
2,003
2,004
2,005
Resultados grupo 3 Neutrofilia >
27%
Presencia de grasa
63%
Clinitest o azĂşcares en heces
1.23
Sangre oculta positiva
14%
Coprocultivo
Negativos
1999-2000
2000-2001
2001-2002
2002-2003
2003-2004
2004-2005
95
102
318
351
747
536
180
Análisis positivos (%) para Rotavirus
52 (54,7%)
52 (51%)
165 (52%)
147 (42%)
392 (52,5%)
278 (52%)
162 (90%)
Neutrofilia: màs de 65 neutròfilo s en la fòrmula leucocitari a
53%
42%
76%
75%
81%
86%
Total de anàlisis
Presencia de grasa en muestra de heces Promedio pH
27% 80.90%
38.50%
56.40%
54%
63%
69.20%
63.00% 6
Clinitest o detección de azúcares en heces: POSITIVO
18.00%
Sangre oculta: POSITIVO
0%
Coprocultivos
2,006-2,007
6 (15%)7(17%) 3.84%
6(15%)7(26%) 1.66%
6 (16%)7(53 %) 1.36%
6(18.6%)7(31.6%)
6(29%)7(46%) 6(27%)-7(43%)
0.76%
0.35%
1.23% 25.00%
24.90%
51.70%
43.00%
38.00%
14% Negativos
1 positivo para Sh.son nei
Negativos
1 positivo para Sh.so nnei
Negativos
Negativos
Negativos
Total de anĂĄlisis 800 1999
700
2001
600
2002
500
2003
400
2004
300
2005
200 100
2,006-2,007
0 Total de anĂ lisis
Estadística del año 2,006 ROTAVIRUS 250 200 # PACIENTES
150
POSITIVOS NEGATIVOS
100
% POSITIVOS 50 0 ENERO
MAYO
SEPTIEMBRE
Comportamiento general Neutrofilia: màs de 65 neutròfilos en la fòrmula leucocitaria
100% 90% 80% 70%
Presencia de grasa en muestra de heces
60% 50% 40%
Clinitest o detección de azúcares en heces: POSITIVO
30% 20%
Sangre oculta: POSITIVO
10% 0% 1
2
3
4
5
6
7
8
Discusión de resultados El total de análisis realizados en los seis años fue: 2,329 El número de positivos fue: 1,248 (53.5%) Grupo 1: se conocía poco de la enfermedad. Hubo poca consulta. La mitad de los pacientes presentaron neutrofilia, el clinitest y la presencia de grasa indica el daño de la mucosa intestinal. Grupo 2: Neutrofilia en aumento: más pronto la consulta, grasa en aumento: probable deshidratación, Clinitest disminuye: menos daño a nivel de la mucosa intestinal (dieta). Grupo 3:Es el grupo de pacientes que acudió al laboratorio, después que apareció la vacuna en el mercado, notándose un cambio en el comportamiento: Menos niños acuden a consulta. Baja neutroflia relacionada con los días de consulta, clinitest aumenta (dieta), grasa disminuye: relacionada con la deshidratación, sangre disminuye: menos daño a nivel tisular.
Conclusiones y Recomendaciones
Los datos informados al Departamento de Pediatría del Hospital desde 1999 han sido aplicados y han aportado excelente ayuda para el manejo de los pacientes. En la epidemia 2,004-2,005 solo se llevó un niño a la Unidad de cuidados Intensivos, los demás niños fueron tratados en trabajo en equipo dando las medidas recomendadas y estudiadas en las epidemias anteriores. La epidemia 2,006-2,007 fue menos agresiva. Y consultaron menos niños. Del total de niños, 105 fueron hospitalizados, ninguno llevado a UCIP.
Los análisis post vacuna aún están por estudiarse internacionalmente, pero a priori podemos decir: que la epidemia fue menos agresiva que menos niños consultaron: la educación sigue siendo un factor importante. Neutrofilia baja: tardaron más días en consultar Clinitest aumentado: hay daño en la mucosa intestinal pero no a nivel tisular: sangre disminuída.
Las medidas adoptadas en el Hospital son: Pediatría: Rutina para medición de electrolitos en suero para manejar adecuadamente la deshidratación. Insistir en la neutrofilia (errática por supuesto) para que no se usen antibióticos que solo complican el cuadro (como una colitis pseudomembranosa) así como antisépticos intestinales y antidiarreicos. Cuidado de glúteos Ayuno para que el intestino se recupere (siempre que el niño tenga sus soluciones intravenosas).
Educación: En la epidemia de 2,0005 se notó más educación en salud de parte de los padres de familia, notándose en consultas a tiempo y capacidad para detectar los signos y síntomas de sus hijos.
Departamento de Nutrición: Ha preparado un suero de arroz, sin azúcar para hidratarlos despacio y que toleren poco a poco los líquidos.
DSH (Comité de Vigilancia Epidemiológica): Se establece toda la cadena de DSH (desechos sólidos hospitalarios) para el buen manejo de pañales y material que los niños usen y evitar la infección nosocomial. El CVE da asesoramiento y supervisión en el área de Pediatría e Intensivo Pediátrico En la puerta de la habitación se coloca un rombo de color verde que es indicativo de aislamiento entérico
Medidas del CVE Se coloca basurero con bolsa roja para depositar los pañales usados y que se mandarán a incinerar Se coloca basurero con bolsa de color negro, donde se deposita la basura común. A los padres se les da docencia sobre el comportamiento de este virus y la posible contaminación a otros miembros de la familia Se hace énfasis en la importancia del lavado de manos a los padres y personal multidisciplinario.
Recomendaciones La clínica y los datos del laboratorio ayudan en el diagnóstico temprano de la enfermedad, lo cual ayuda para el mejor manejo del paciente. El manejo de los DSH debe de monitorearse constantemente para romper la cadena de contaminación. El trabajo en equipo debe ser una forma constante de trabajar.
MUCHAS GRACIAS!!