14h30 jayane miranda pdfx

Universidade Federal do Vale do São Francisco Centro de Manejo de Fauna – CAATINGA Núcleo de Ecologia Molecular Laboratório de Genética Molecular

ANÁLISE PRELIMINAR DA VARIABILIDADE GENÉTICA INTRA E INTERPOPULACIONAL EM Prochilodus costatus (VALENCIENNES, 1850)

Aparecida Jayane Sampaio Miranda ; Keyla Vitória Marques Xavier ; Liliane Gallindo Dantas de Oliveira ; Patrícia Avelo Nicola Pereira & Kyria Cilene de Andrade Bortoleti Petrolina Junho/2016

INTRODUÇÃO Curimatã- pioa Ø Prochilodus costatus (Prochilodontidae/Characiforme) Ø Endêmica /

Rio São Francisco

Ø Peixe de piracema (Castro e Vari, 2003; Carvalho/ Costa et al.,

2006)

1: Exemplar de P. costatus. Fonte: Arquivo CEMAFAUNA

2

Fig

2

INTRODUÇÃO Curimatã- pioa Ø Prochilodus costatus (Prochilodontidae/Characiforme) Ø Importância econômica e ecológica Melo et al, 2013)

(Barroca, 2012;

Atividade pesqueira Bentopelágico/Detrití voro

PROGRAMAS DE CONSERVAÇÃO Fig. 2: Pescador jogando a tarrafa. Fonte: pbase.com 3

http://www.pbase.com/alexuchoa/image/360199 50

3

INTRODUÇÃO Bacia Hidrográfica do Rio São Francisco Rio São Francisco ØIctiofauna Ø Ø

250 a 300 espécies (ALVES , 2005); 214 nativas e 76 endêmicas (BARBOSA e SOARES, 2009)

Ø Ações antrópicas

Fig. 3: Bacia do Rio São Francisco. Fonte: RIMA (2004)

Ø Ø

Barragens e represas Desmatamento da mata ciliar

Ø

Introdução de espécies exóticas

Ø

PISF 4 4

INTRODUÇÃO PISF

PISF ØCaptação de águas entre Sobradinho (BA) e Itaparica (BA/PE) ØBacias receptoras: PE, CE, PB e RN. (Kosminsky e Zuffo, 2009)

Fig. 4: Bacias receptoras do PISF. Fonte: RIMA (2004)

5 5

INTRODUÇÃO Ictiofauna Ações antrópicas – barreiras Alteração do sistema

Estrutura das comunidades

Comportamen to e composição

(Barbosa e Soares, 2009 )

Novos regimes de seleção Estrutura e diversidade genética Peixes migratórios Conhecimento prévio

Fig. 5 : Peixe em piracema. Fonte: 6 etnews.com

6

INTRODUÇÃO Microssatélites Ø Marcadores moleculares Ø Microssatélites ou SSRs (Repetições de sequências únicas) Sequências (2 – 6 pb) (AG)5

Repetição em tandem

Idênticas ou similares

Características: ü Altamente polimórficos; ü Codominantes; ü Herança mendeliana; ü Distribuição aleatória.

(Boris et al., 2011; Nagpure et al., 2013)

7 7

INTRODUÇÃO Microssatélites Ø Aplicação em peixes Análise de dinâmica e estrutura genética-populacional: Variabilidade genética intra e interpopulacion al

Níveis de fluxo gênico

Tempo de isolamento entre as populações naturais

(Moreira et al., 2007)

8

8

OBJETIVO

ü An á lise preliminar da diversidade gen é tica em popula ç õ es de Prochilodus costatus, mediante a empregabilidade de um locus previamente descrito para a citada espécie (Pcos 14 –Carvalho-Costa et al., 2006), ocorrentes nas Sub-bacias Moxotó (PE), Brígida (PE), Terra Nova (PE) e Apodi (RN), receptoras de águas para a transposição do rio São Francisco.

9 9

MATERIAIS E MÉTODOS Locais de coleta COLETA: auxílio de apetrechos de pesca, identificados por ictiólogos Autorização para captura, coleta e transporte de material biológico n° 94/2012

PM 11- Riacho do Mel (Arcoverde-PE), Sub-bacia do rio Moxotó (33 indivíduos)

Fig 6: Riacho do Mel (Arcoverde/PE). Fonte: Arquivo CEMAFAUNA

PM 16 - Riacho Brígida (Parnamirim-PE), Sub-bacia do rio Brígida (13 indivíduos)

Fig 7: Riacho Br ígida 10 (Parnamirim/PE). Fonte: 10 Arquivo CEMAFAUNA

MATERIAIS E MÉTODOS Locais de coleta PM 17- Açude Terra Nova (Terra Nova-PE), Sub-bacia do rio Terra Nova (cinco indivíduos)

PM 22- Açude Santa Cruz (Apodi-RN), Sub-bacia do rio Apodi (26 indivíduos)

Fig 8: Açude Terra Nova (Terra Nova/PE). Fonte: Arquivo CEMAFAUNA

Fig 9: Açude Santa Cruz (Apodi/RN). Fonte: Arquivo CEMAFAUNA

79 indivíduos - transportados em etanol absoluto para 11 11 o laboratório de Genética Molecular (CEMAFAUNA).

MATERIAIS E MÉTODOS

Prochilodus costatus (79 indivíduos)

Extração de DNA –Tecido muscular da nadadeira dorsal (PEARSON;

Gel de agarose 1% Espectofotome tria

STIRLING. 2003)

12 12

MATERIAIS E MÉTODOS

Prochilodus costatus (79 indivíduos)

Extração de DNA –Tecido muscular da nadadeira dorsal (PEARSON;

Gel de agarose 1% Espectofotome tria

STIRLING. 2003)

PCR - locus Pcos14 95 °C – 5’ 94 °C – 30’’ 35 ciclos 48,5 °C – 30’’ 72 °C – 30’’ 72 °C – 20’

Gel desnaturante de poliacrilamida 6% (CRESTE et al., 2001)

13 13

MATERIAIS E MÉTODOS

Prochilodus costatus (79 indivíduos)

Extração de DNA –Tecido muscular da nadadeira dorsal (PEARSON;

Gel de agarose 1% Espectofotome tria

STIRLING. 2003)

PCR - locus Pcos14 95 °C – 5’ 94 °C – 30’’ 35 ciclos 48,5 °C – 30’’ 72 °C – 30’’ ü 72 °C – 20’

Gel desnaturante de poliacrilamida 6% (CRESTE et al., 2001)

Arlequin v.3.5.2.2 (EXCOFFIER; LICHER, 2010)

Heterozigosidades observada e esperada e índice de diferenciação 14 14 populacional

MATERIAIS E MÉTODOS

Tabela 1: Locus, sequ ê ncias dos primers, motivo de repeti ç ã o, temperatura de anelamento do primer (Ta), para um locus de microssat é lite em Prochilodus costatus.

Locus

Sequência dos primers

Motif Ta (ºC)

F: Pcos14 CGTGAATGTGCTTTATATGC (TC)49 48,5 R: AATGCCATTTCTGATTAAGG

15 15

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Tabela 2 : Tamanho dos fragmentos gerados (TF), número de alelos observados (N) e variação da frequência alélica (VF) para o locus Pcos 14.

TF (pb)

120- 250

176

178

180

182

184

186

188

190

192

194

196

198

200

202

204

206

208

210

0,089

212

216

218

0,006

222

250

N

VF

26

0,006- 0,14

19 Indivíduos 13 Indivíduos Um indivíduo

Tabela 3 : Alelos do locus Pcos 14 120 136 166

0,14

16 16

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Tabela 4 : Índices de Heterozigosidade observada (Ho) e esperada (He) para as populações de P. costatus com número amostral consistente.

Ponto de monitoramento do PISF PM 22

Ho

He

0,884

0,924

PM 11

0,878

0,849

PM 16

1

0,852

PM 17

1

0,8

Carvalho-Costa et al. (2006): Ho e He igual a 0,89 e 0,92, 17 respectivamente 17

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Alto e Médio São Francisco

Diversidade genética similar Sem diferenciação genética Unidade panmítica (CARVALHO-COSTA et al., 2008; MELO et al., 2013)

Rios Paraopeba e Pará –Alto SF Diversidade genética e diferenciação populacional Isolamento de populações

18

18al, 2012b) (BARROCA et al., 2012a;. BARROCA et

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Submédio São Francisco

Diversidade intrapopulacional Fst = 0.009 Populações conectadas

CARVALHO-COSTA et al., 2008; MELO et al., 2013 19 19

CONCLUSÃO

Pcos14 = locus polimórfico Sem diferenciação interpopulaional Inclusão de outros loci microssatélites 20 20

AGRADECIMENTOS

2121

OBRIGADA!