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Lavorazione del sangue intero Laboratorio di produzione degli emocomponenti

Il sangue : scomposizione Scopo è ottimizzare l’uso delle donazioni ●Ogni componente del sangue è utile per certe patologie, ma superfluo per altre ●Con la scomposizione si ricavano da una singola donazione → 1 unità di globuli rossi, 1 unità di plasma, 1 unità di piastrine ●Si ottiene con l’utilizzo per il prelievo di un circuito sterile con sacche multiple collegate tra loro e che contengono gli opportuni conservanti ed anticoagulanti ●

Produzione emocomponenti Sangue intero

Centrifugazione leggera

Globuli rossi concentrati

Plasma ricco di piastrine

Centrifugazione spinta Piastrine

Plasma povero

Crioprecipitato, fattori coagulazione, albumina, immunoglobuline

Scomposizione della donazione di sangue intero UnitĂ donata: sangue intero Dispositivo di sacche multiple

Buffy coat

Emazie concentrate

Piastrine

Plasma

Conservazione del sangue Prevenire la coagulazione ●Rallentare l’invecchiamento ●Mantenere uno stato funzionale il più fisiologico possibile (p.es. trasporto e cessione di O2) ●Preservare dalla contaminazione ●

Prevenire la coagulazione Utilizzo di anticoagulanti nelle sacche ●Una volta si utilizzava l’eparina ●Oggi si utilizza il citrato trisodico, che chela gli ioni calcio indispensabili alla cascata coagulativa ●Il citrato rimane nella sacca e viene quindi trasfuso al paziente insieme all’ emocomponente ●

Rallentare l’invecchiamento Conservazione a 2 – 6°C ●Utilizzo di fattori nutritivi nelle sacche: ●Destrosio + acido citrico che mantiene un ph acido ed inibisce la glicolisi → risparmio di ATP ●Soluzione ACD (ac. citrico, citrato, destrosio) o CPD (ac.citrico, citrato, destrosio, fosfato) ●Conservazione per 21 gg ●

Mantenere lo stato funzionale più fisiologico possibile Aggiunta di additivi alle soluzioni : ●Adenina → mantiene concentrazioni più alte di ATP → CPD-A → conservazione per 35gg ●SAG → salina, adenina, glucosio → solo per emazie concentrate → conservazione per 35gg ●ADSOL → salina, mannitolo, adenina, glucosio → solo emazie concentrate → conservazione per 41gg ●Gli additivi rimangono nella sacca e vengono quindi trasfusi al paziente insieme all’emocomponente ●

Preservare dalla contaminazione Sterilità del prelievo ●Sistemi a circuito chiuso ●Conservazione a 2 – 6°C ●

Altri emocomponenti: Plasma: congelato a –30°C → conservato 1 anno a – 40°C; 6 mesi a – 25°C; 3 mesi a – 18°C . Una volta scongelato va utilizzato entro 6 ore. ●Piastrine: raccolte in sacche di materiale poroso per garantire lo scambio gassoso (mantenimento del ph) e conservate a 22+/2°C in agitazione continua → si devono utilizzare entro 5gg ●Globuli bianchi: vanno utilizzati immediatamente dopo la raccolta (max. 12 ore) ●

Il sangue intero (ABO ed Rh compatibile): Non viene più utilizzato come tale ●Sacche da ca. 450 ml +/- 10% ●Conservante CPD in rapporto 1/7 (ca. 63 ml) ●Ht : 35 – 40% ●Durata 35 gg a T° 2 – 6°C ●Unica indicazione → emorragia massiva > 30% della massa corporea ●Dosaggio : 20 – 30 ml/Kg ●

Le emazie concentrate (ABO ed Rh compatibili): Sacche da ca. 250 ml +/- 10% ●Conservante SAG mannitolo ●Ht : 45% ●Durata 41 gg a T° 2 – 6°C ●Indicazioni → anemia Hb < 8 gr/dl; Ht < 24% o perdita acuta > al 15% della volemia ●Velocità di infusione iniziale 10 – 15 gtt/min ●Dosaggio : (Hb d – Hb a)x volemia/23 → ca. 10 – 20 ml/Kg ●

“Altre” emazie concentrate (ABO ed Rh compatibili): Emazie concentrate senza buffy-coat ●Emazie concentrate povere di leucociti ●Emazie congelate in glicerolo 20% a –80°C ●Emazie lavate: sistema aperto ●Emazie filtrate : sistema aperto ●Emazie filtrate e lavate 1 o più volte : sistema aperto ●

Il plasma fresco congelato (ABO compatibile): Sacche di ca. 200 ml ●Conservante della sacca madre (CPD) ●Indicazioni: difetti di produzione di fattori della coagulazione (insufficienza epatica, malattia emorragica del neonato), coagulopatie da consumo (CID), trasfusioni massive (CEC), plasmaexchange ●Dosaggio: 10 – 20 ml/Kg ●

Le piastrine (ABO compatibili): Sacche da pool di buffy-coat con min. 2,5 x 10e11 (4 – 8 donatori) ●Sacche da aferesi con min. 3 x 10e11 (1 solo donatore) ●Conservante sacca madre o ACD (x aferesi) ●Indicazioni: difetti di produzione → aplasie, post chemioterapia, invasione midollare o aumentata distruzione → cause immunologiche (PTI), CID, CEC ●Dosaggio: 1 unità/10 Kg ●

I globuli bianchi: Sacche da aferesi con min. 1 x 10e10 granulociti ●Conservante ACD ●Indicazioni: esclusivamente in pazienti con GB < 500 / mm3, con ipertermia > 38° C per 48 h e possibilità di ripresa midollare ●

Il crioprecipitato (ABO compatibile):

Ricavato dalla frazione crioglobulinica del plasma fresco ●Sacche di 10 – 20 ml ●Contiene F. VIII, F. von Willebrand, fibrinogeno, F. XIII, fibronectina ●Indicazioni: malattia di von Willebrand, ipofibrinogenemia, carenza di F. XIII ●Dosaggio: 1 sacca / 6 Kg ●

I fattori della coagulazione Concentrati puri di F. VIII ●Concentrati puri di F. IX ●Concentrati ad intermedia purezza di F. VIII e von Willebrand ●Concentrati puri di F. VII ●Concentrati puri di fibrinogeno ●Concentrati di complesso protrombinico (IX; II; VII; X; VIIa; Xa) ●Concentrati di fattori VII, VIII e IX ricombinanti ●

Altri derivati Albumina ●Immunoglobuline ●Antitrombina III ●

Le lavorazioni speciali (descrizione): Filtrazione → elimina i globuli bianchi residui ●Filtrazione e lavaggio singolo (NaCl)→ elimina i GB e diluisce plasma e citochine residue ●Filtrazione e lavaggio multiplo (NaCl) → elimina i GB e elimina quasi totalmente il plasma residuo ●Irradiazione (Cesio 137 ) → blocca la capacità di moltiplicazione dei linfociti T residui ●

Le lavorazioni speciali (razionale dell’utilizzo): Eliminare i GB → evitare il rischio di immunizzazione verso Ag leucocitari (anti – HLA) ●Diluire le citochine → evitare le reazioni avverse legate alle citochine (febbrili) ●Eliminare il plasma residuo → evitare le reazioni legate alle proteine plasmatiche (allergiche) ●Bloccare la moltiplicazione dei linfociti T → evitare la GVHD ●

Le lavorazioni speciali (problemi di conservazione): Filtrazione → sistema aperto → scadenza dopo 24 h ●Lavaggio → sistema aperto → scadenza dopo 24 h ●Irradiazione → sistema chiuso → scadenza dopo 14 gg ●