834
R. Olewiński i wsp.
obrazowej postać tradycyjnych preparatów mikroskopowych, co pozwala na zachowanie mikroskopowej anatomii tkanki. Umożliwia to porównanie danych uzyskanych metodą cytometrii obrazowej z histologicznymi cechami analizowanych komórek i ich stosunku do sąsiednich tkanek (np. naciekania w przypadku nowotworów). Materiał analizowany metodą cytometrii obrazowej może być z łatwością przechowywany, jego ocena zaś histologiczna i cytometryczna wielokrotnie powtarzana. Sprzęt stosowany w pomiarach metodą cytometrii obrazowej obejmuje mikroskop optyczny sprzężony z kamerą oraz odpowiednie oprogramowanie, które może być zainstalowane praktycznie na każdym komputerze osobistym. Najnowsze dostępne oprogramowanie umożliwia nawet całkowicie automatyczną komputerową analizę różnorodnych elementów obrazu mikroskopowego w obszarze wcześniej ustalonym przez osobę prowadzącą pomiary. Celem badania była ocena możliwości zastosowania cytometrii obrazowej do określenia ploidii DNA w raku gruczołowym jelita grubego. Ploidię DNA określano w komórkach nowotworu i w komórkach prawidłowej błony śluzowej jelita grubego. Metoda pomiaru została opracowana we współpracy z Instytutem Zoologii Uniwersytetu Wrocławskiego. MATERIAŁ I METODYKA Wszystkie pomiary przeprowadzono na materiale uzyskanym dzięki uprzejmości Zakładu Anatomii Patologicznej AM we Wrocławiu. Obejmował on preparaty pooperacyjne 20 pacjentów wybranych losowo z dużej grupy chorych, którzy w latach 1999-2002 przebyli w I Katedrze i Klinice Chirurgii Ogólnej, Gastroenterologicznej i Endokrynologicznej AM we Wrocławiu zabieg resekcyjny z powodu raka okrężnicy lub odbytnicy. W grupie tej znalazło się 11 mężczyzn i 9 kobiet w wieku od 48 do 83 lat. Poniżej przedstawiono podział badanej grupy pod względem lokalizacji guza pierwotnego oraz stopnia zaawansowania klinicznego w zmodyfikowanej skali Dukesa. Lokalizacja guza pierwotnego: – prawa połowa okrężnicy – 3 pacjentów, – lewa połowa okrężnicy – 4 pacjentów, – esica – 8 pacjentów, – odbytnica – 5 pacjentów. Stopień zaawansowania wg Dukesa:
ter. Latest software offers even the possibility of automatic analysis of different features of microscopic view in the picture area chosen by the researcher. The study was designed to examine DNA ploidy in cases of colorectal adenocarcinoma by means of image cytometry. DNA ploidy was established in adenocarcinoma cells and normal colonic mucosa cells from areas outside the malignant lesion. The method of analysis was designed in cooperation with the Institute of Zoology, Wrocław University. MATERIAL AND METHODS All analyses were performed on material kindly delivered by the Department of Pathology, Medical University in Wrocław. The above-mentioned consisted of postoperative specimens from 20 patients subject to surgical intervention, due to colorectal adenocarcinoma. All patients were randomly chosen from a large group of patients, who during the period between 1999-2002 underwent surgical resection procedures, at the I-st Department of General, Gastroenterological and Endocrine Surgery, Medical University in Wrocław. The study group comprised 11 men and 9 women, aged between 48 and 83 years. The localization of the primary tumor and clinical staging, according to modified Dukes’ classification was presented below. Tumor localization: – right side of the colon – 3 patients, – left side of the colon – 4 patients, – sigmoid colon – 8 patients, – rectum – 5 patients. Dukes’ classification (staging): – Dukes B – 11 patients, – Dukes C – 6 patients, – Dukes D – 3 patients. In all cases the histological diagnosis of adenocarcinoma was accompanied by TNM staging and degree of histological differentiation (G). Material collected during the surgical procedures was routinely fixed in 10% formaldehyde and histological assessment was based on standard hematoxylin and eosin staining (H+E). In case of genetic analysis two paraffin-embedded tissue sections were prepared at the Department of Pathology, Medical University in Wrocław. One section comprised a fragment of the malignant lesion and the other, a frag-