Práctica de Bacteriología del Agua Normativa Venezolana

BACTERIOLOGÍA

del

AGUA

Prof. José Araujo

Contenido

1.- Bacteriología del Agua......................................................................

Introducción

1.1.- Clasificación de las aguas...........................................................

La siguiente práctica corresponde al

1.2.- Aguas meteóricas (lluvia, nieve, granizo, hielo) ................................................................................................

estudio de unos de los componentes de

1.3.- Aguas superficiales (ríos, lagos) .................................................

mayor interés en el planeta como lo es el agua, el cual es el principal vehículo para el desarrollo de la vida en nuestro planeta.

La

presente

práctica

corresponde a la bacteriología del agua

1.3.1.- Ríos ...................................................................................

1.3.2.- Lagos .................................................................................

1.3.3.- Mar....................................................................................

1.3.4.- Manantiales .......................................................................

1.3.5.- Aguas de embalses o almacenadas .....................................

1.4.- Aguas profundas. ......................................................................

1.4.1.- Aguas Profundas ................................................................

1.4.2.- Pozos Artesianos ................................................................

y en él se desarrollan los diversos

1.5.- Microflora del agua ...................................................................

aspectos de las bacterias presentes en

1.6.- Análisis Microbiológico del Agua ...............................................

1.7.- Análisis microbiológico ..............................................................

los diversos cuerpos de agua, de igual manera se muestra estudio del agua

1.7.1.- Numeración de bacterias aerobias mesófilas ......................................................................................

bajo la normativa Internacional, así

1.7.2.- Numeración de coliformes por el método del número más probable (NMP) para Agua Potable. .......................................................................

como también con especial interés la

1.7.3.- Agua no potable.................................................................

normativa nacional para el estudio del

1.7.4.- Método de la membrana filtrante ......................................

1.7.5.- Agua potable (Método de enriquecimiento) ..........................................................................

agua en Venezuela.

1.7.6.- Método Directo .................................................................

1.7.8.- Agua no potable.................................................................

Prof. José Araujo

1.7.9.- Numeración de Estreptococos fecales por el método del numero más probable (NMP)...........................................................................................

1.7.10.- Método de la membrana filtrante ....................................

1.8.- ANALISIS BACTERIOLÓGICO DEL AGUA ......................................

1.- Bacteriología del Agua El conocimiento de la microflora existente en el agua tiene enorme importancia, especialmente desde el punto de vista sanitario cuando se trata de aguas destinadas al consumo humano. En realidad, el agua es un elemento que recibe las mas distintas formas bacterianas pues a ella llegan del aire, del suelo, de las aguas residuales, de las aguas de desecho, de las aguas cloacales etc.

Formando muchas de estas bacterias, la microflora natural, ya que otras desaparecen debido a condiciones adversas o desfavorables a su desarrollo. Sin embargo no podemos decir que exista una microflora específica ya que varía debido a factores de orden físico o químico existentes en dichas aguas.

1.1.- Clasificación de las aguas Cada uno de estos grupos presenta características biológicas distintas debido a que están íntimamente relacionados con la historia y el origen de las aguas de cada uno de ellos. Se conoce una clasificación de las aguas, la cual las agrupa en la forma siguiente:

1.2.- Aguas meteóricas (lluvia, nieve, granizo, hielo) Las aguas meteóricas corresponden a las aguas de lluvia o a las aguas que se encuentran en la atmosfera en sus distintas

formas (nieve, granizo, hielo etc.); las aguas superficiales corresponden a las aguas de lluvia, una vez que estas han caído, formando los ríos, lagos, arroyos, etc.

1.2.1.- Aguas Pluviales (lluvia)

En su origen son estériles si se condensan a grandes altura pero si lo hacen muy cerca de la superficie terrestre, se cargan de microbios, debido a las partículas de polvo que se encuentran en el aire, por lo tanto, la cantidad de bacterias en un agua de lluvia, estará en relación directa con la cantidad de polvo que se encuentran suspendida en el aire. Las lluvias producen una verdadera limpieza atmosférica higienizándola y eliminando todas las partículas de polvo en suspensión.

1.2.3.- Distribución de las aguas pluviales en el suelo

El agua meteórica al llegar al suelo puede sufrir diferentes procesos, de acuerdo con la constitución y estructura física de la misma de cualquier modo, una parte del agua caída penetra en el suelo formando las napas freáticas, y otra parte corre al nivel del mismo hasta encontrar un lago ríos o cualquier curso de agua corriente. El agua que penetra en el suelo forma cursos subterráneos al encontrar una capa de tierra impermeable, o una zona arenosa más permeable, deslizándose sobre ella en el primer caso y a través de ella en el segundo. En las regiones montañosas, se

encuentran frecuentemente aguas surgentes y manantiales, provenientes de ríos fuentes de aguas profundas, que afloran a la superficie debido simplemente a la diferencia de niveles, es por este motivo que estas aguas son bacterológicamente puras a causa del enorme colaje que sufren a través de la tierra antes de salir a la superficie.

1.2.4.- Nieve

Las bacterias son más abundantes en la nieve que el agua de lluvia debido en primer lugar a que los copos de nieve al caer arrastran más cantidad de polvo que la lluvia, además, el aire al colarse a través de la nieve deposita las partículas de polvo y de impurezas y que la atmosfera contiene, las nieves de las altas montañas se encuentran prácticamente libres de bacterias pues el aire a esas alturas contiene muy pocas cantidades de microbios.

1.2.5.- Granizo

Contiene más bacterias que el agua de lluvia pues parece ser que esta formación meteórica se produce alrededor de las partículas de tierra, ya que la microflora que contiene está compuesta por típicos representantes del suelo, las corrientes aéreas transportan a la zonas tormentosas grandes cantidades de polvo que al formase el granizo se incorporan al mismo.

1.1.4.- Hielo

El contenido microbiano del hielo es más o menos igual al de agua que los ha formado dependiendo por lo tanto de la población microbiana que ella contiene el hielo formado

en las grandes alturas tiene mucho menos gérmenes que el formado en los lagos y ríos a nivel del mar

1.3.- Aguas superficiales (ríos, lagos) El agua se va cargando de microbios que la atmosfera contiene, pero cuando llega al suelo recibe su mayor carga bacteriana, la cual es arrastrada hasta arroyos, ríos, lagos, etc., formando parte de la flora microbiana de dichas aguas.

1.3.1.- Ríos

La Pureza de sus aguas depende de las regiones que atraviesa y de los causes de aguas que lo conforman, generalmente estas aguas se hallan cargadas con bacterias que el hombre incorpora con los desechos que arroja, especialmente después que el curso de agua ha pasado por un una ciudad o centro poblado, debido a la gran cantidad de materia orgánica que esta recibe. Si se examina una muestra de agua de un rio antes y después de su paso por una ciudad se encontrará una gran diferencia con el contenido bacteriano.

Las muestras tomadas aguas arriba tendrán muy pocas cantidad de bacterias en cambio las tomadas después de su paso por el centro poblado se encuentran cargadas de microorganismos a causa de los desperdicios arrojados a su paso por la ciudad.

Afortunadamente, la densidad bacteriana disminuye paulatina mente a medida que la materia orgánica que se encuentra en suspensión va desapareciendo o depositándose en el lecho del cauce y también debido a la acción microbiana que utiliza esta

materia orgánica como alimento. Los rayos solares producen, una paulatina auto purificación del agua de manera que después de varios kilómetros, aproximadamente después de los 50-60 kilómetros aguas abajo el agua se ha purificado y tendrá más o menos la misma cantidad de bacterias que contenía antes de su paso por la ciudad. A pesar de que siempre llevara una relativa a causa de los animales y vegetales existentes en su orilla los ríos de corrientes rápidas contienen menor carga bacteriana que los ríos de corrientes lentas. Los de montañas son de aguas casi puras, debido a la poca cantidad materia orgánica que contienen a las filtraciones que sufren a través de la arena, a las temperaturas bajas de las mismas a la acción de los rayos solares a la rapidez de sus corrientes, etc.

1.3.2.- Lagos

El prolongado estancamiento del agua en los lagos produce una continua sedimentación de la materia orgánica y la acción de los rayos solares produce una auto purificación en el centro de los lagos se encuentra poca cantidad de microbios y sus aguas son mucho más puras que la de los ríos que los alimentan.

1.3.3.- Mar

El agua salada tiene muy poca cantidad de bacterias en relación con la dulce o la de rio debido a la concentración salina que contiene, sin embargo, cerca de las costas están mar

cargadas de microbios que de mar adentro, en el fondo del océano se han encontrado microbios especialmente en el sedimento marino 1.3.4.- Manantiales

Son de aguas relativamente muy puras debido al filtrado que sufren antes de aflorar a la superficies, son ríos subterráneos de origen montañoso y con muy poca cantidad de materia orgánica los manantiales pueden considerarse desde el punto de vista bacteriológico como aguas purísimas y exentas de bacterias 1.3.5.- Aguas de embalses o almacenadas

Las aguas embalsadas corresponden a las aguas superficiales, pero estas aguas sufren una auto purificación, debido a fenómenos de sedimentación, fagocitosis, rayos, ultravioleta, temperatura, desaparición de materia orgánica, etc., que tienen lugar durante su almacenaje.

1.4.- Aguas profundas.

Las aguas profundas son las que corren a cierta profundidad en el suelo y sufren un continuo filtrado a través de la arena por donde se desplazan, reduciendo de esta manera su carga bacteriana. Como se ve, pues la cantidad de microbios que puede tener un agua depende principalmente de su historia y según ella, se encuentran más o menos una gran variedad de microorganismos, cuyo

número y cualidad tienen suma importancia desde el punto de vista sanitario. El agua aumenta su contenido microbiano después que ha sido utilizada por el hombre, ya sea en usos domésticos o industriales. Al ser eliminadas, se vuelcan en un curso de agua o rio y llegan al mar.

pueden contaminarse por la poca de pozo cuando este no está bien protegido o por el balde que se usa para elevar el agua a la superficie.

1.5.- Microflora del agua

1.4.1.- Aguas Profundas

Se conocen dos tipos de aguas profundas: Las que corren casi aflorando o a pocos metros de las superficies del suelo y se encuentran en las zonas de las raíces de las plantas constituyendo napas superficiales o freáticas y las que corren a profundidades superiores llamada napas profundas o napas de presión.

Amabas aguas son más o menos puras, pero depende del terreno por donde atrabancan que pueden ser o no causa de su contaminación 1.4.2.- Pozos Artesianos

El estado sanitario del agua de estos pozos depende de la textura del suelo si es un suelo homogéneo, que no permite filtraciones de aguas superficiales o cloacales se pueden conseguir aguas bastantes purificadas, siempre que no sean contaminadas por las bocas de los mismos. Las aguas pueden contaminarse debido a la vecindad del pozo con letrinas o sumideros produciéndose, en terrenos heterogéneos, filtraciones que llegan a causar epidemias cuando dichas aguas son usadas para el consumo humano, también

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Podemos decir que según su historia en un agua se pueden encontrar tres tipos de bacterias: 1.- Bacterias del agua propiamente dichas 2.- Bacterias del suelo 3.- bacterias de aguas residuales, industriales, etc.

Las primeras las encontramos por lo general en aguas contaminadas, esto es que no han recibido carga bacteriana, los microbios que conforman microflora no son patógenos ni para el hombre ni para los animales.

Encontramos entre ellas formas alargadas cromógenas como por ejemplo: Serratia marcescens que tiene pigmento rojo Bacillus ochraceum que tiene pigmento amarillo Cbromacterium violaceum pigmento violeta Flavobacterium aurantiacum con pigmento anaranjado Otras bacterias no cromógenas especialmente representantes de bacterias aerobias gran positivas, productoras de gas y acido láctico, se encuentran también: Pseudomonas fluorescens (Bacillus fluorescens liquefaciens) licuante de gelatina Pseudomonas fluorescens no licuantes de la gelatinas.

Micrococcus candicans.

M. coronatus.

M. aquatilis.

Sarcina lutea.

S. aurantiaca.

Entre las correspondientes al segundo grupo existe una micro flora muy variada; representantes de bacterias esporuladas y no esporuladas como:

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Bacullis megaterium Bacillus subtilis Bacillus Mycoides Estas corresponden a la microflora esporulada del suelo como asi tambien representantes del grupo azotobacter, nitrificadores, bacterias de la celulosa, aerobacter, aerogenes y otros coliformes comunes en este medio.

El tercer grupo se encuentra representado especialmente por bacterias de origen intestinal algunas de ellas patógenas para el hombre como: Salmonella typhosa Streptococcus piogenes Proteus vulgaris Streptooccus faecalis Escherichia Coli Representantes del grupo disentérico, Vibrio colerae etc.

Considerando el agua desde el punto de vista industrial es muy importante conocer la clase de microbios que contiene, especialmente cuando se las destina a la industrialización de sustancias alimenticias, queserías, mantequillerias, cervecerías, etc. Pero la mayor preocupación y vigilancia por parte de los organismos oficiales es cuando este elemento es destinado al consumo humano desde el punto de vista sanitario el suministro de agua potable requiere la más estricta vigilancia y control pues como sabemos, son numerosas las enfermedades de origen hídrico y este elementos tan necesario e insustituible para la vida del hombre se convierte en su peor enemigo cuando es capaz de producir epidemias de las cuales la historia registra muchas de ellas.

REVISA LAS NORMA COVENIN 2709-02

1.6.- Análisis Microbiológico del Agua El análisis microbiológico del agua tiene como finalidad conocer la calidad ambiental de este componente y su posible grado de

contaminación con desechos o por contaminación antrópica. Los coliformes son el principal grupo utilizado ampliamente a nivel internacional y nacional como indicadores de la calidad del agua indicando sus usos y propósitos bien sean para consumo humano o para otra actividad como industrial, domestica, de recreación entre otras. La técnica del numero más probable y la de filtración en membrana son las más efectivas y aplicadas para el caso de estudio sobre el agua.

Los estreptococos fecales constituyen otro grupo de importancia como indicadores de contaminación del agua los cuales pueden detectarse por las técnicas antes mencionadas. Dentro del grupo de los coliformes se han diferenciado los coliformes fecales los cuales están presentes en las heces de los intestinos de animales de sangre caliente. Los coliformes fecales pueden producir gas a partir de lactosa a una temperatura de 44,5-45,5 °C en 48h. Este método es aplicado en el número más probable de coliformes fecales en agua de forma directa o indirecta.

Para conocer el número total de bacterias que encuentran en el agua se utiliza comúnmente el contaje de bacterias aerobias mesófilas, comúnmente llamado contaje total que se multiplican a 35 °C este método es utilizado como apoyo para la interpretación del significado de los coliformes. Este tipo de exámenes son útiles para evaluar los tratamientos de agua en las industrias y verificar la calidad de las aguas servidas en los sistemas de distribución. Los exámenes microbiológicos de rutina de las aguas deben estudiarse conjuntamente con las condiciones sanitarias del ambiente que rodea la fuente y cuando sea posible realizar análisis de varias muestras tomadas durante un determinado periodo de tiempo.

Las muestras deben recoger recogerse en frascos limpios y estériles. En el caso de las aguas con cloro residual u otros halógenos se añade a los frascos un agente reductor como el tiosulfato de sodio. Si las aguas tienen un alto contenido de cobre, zinc o de metales pesados se añade a los frascos un agente quelante como la sal sódica del ácido etilendiaminotetracético. Las muestras una vez recolectadas deben mantenerse a temperatura inferior a 10°C y analizarse lo antes posible. El tiempo transcurrido entre la toma de las muestras y el análisis no debe sobrepasar 6h.

1.7.- Análisis microbiológico 1.7.1.- Numeración de bacterias aerobias mesófilas

La técnica de numeración es igual a la indicada para las muestras de alimentos. Se emplea como diluente para preparar las diluciones del agua, la solución tampón de Butterfield o el agua peptonada. La incubación de agar para recuento standard con las muestras de agua, excepto para el agua embotellada, se hace a una temperatura de 35 ± 0,5 °C durante 48 ± 3h. Para el agua embotellada las placas deben incubarse por un total de 72 ± 4h para permitir que las bacterias con una fase de latencia prolongada presentes en el agua presentes en el agua embotellada, tengan tiempo de formar colonias. Se enumeran las colonias en las placas siguiendo las normas mínimas pautadas indicadas en el método general.

Cuando el número de colonias sea inferior a 25, no se descartan y se anota la cantidad.

Los cálculos se hacen por ml de muestra.

1.7.2.- Numeración de coliformes por el método del número más probable (NMP) para Agua Potable.

Se siembran grupos de 5 tubos conteniendo el medio para la prueba presuntiva de coliformes

para cada dilución decimal. Dependiendo del grado contaminación de la muestra puede sembrarse un grupo de 5 tubos con la muestra sin diluir. Cuando la muestra lo amerite puede sembrarse hasta 100 ml de muestra sustituyendo los tubos con medio de cultivo por frascos. Si la prueba presuntiva es positiva se continúa con las pruebas confirmativas de coliformes fecales y las pruebas de identificación. Para las muestras de agua potable de calidad bacteriológica conocida se siembra por lo menos tres diluciones en grupos de 5 tubos. En este caso es de esperarse que los resultados sean negativos si las condiciones sanitarias para el tratamiento y abastecimiento del agua son adecuadas. Las muestras de agua potable que resulten positivas debe analizarse nuevamente tomando en consideración los factores que incidan en la presencia de contaminantes.

1.7.3.- Agua no potable

Se siembran grupos de 5 tubos con las diluciones decimales del agua, siguiendo los mismos pasos del punto anterior. El número de diluciones a sembrar se ajustará según la información sobre la densidad de los coliformes en la muestra, obtenida de las experiencias previas o los informes estadísticos.

1.7.4.- Método de la membrana filtrante

Este método se emplea para analizar volúmenes grandes de agua pero tiene limitantes cuando las aguas son turbias y cuando se investigan bacterias diferentes a los coliformes, cuando el método se aplica por primera vez, es conveniente hacer pruebas paralelas pro el método del número más probable para comprobar la aplicabilidad del método de la membrana filtrante. La turbiedad producida por las algas u otras materias en suspensión puede producir interferencia para obtener resultados significativos.

El

crecimiento de los coliformes se puede inhibir con un numero alto de otros microorganismos o sustancias toxicas, esta técnica puede ser empleada para el análisis de aguas saladas pero no para las aguas de desecho que han recibido solo un tratamiento de primario seguido de cloración o que contienen metales tóxicos o fenoles. Para investigar coliformes totales en aguas cloradas se pueden emplear el procedimiento en dos etapas (método de enriquecimiento seguido del método directo) o en 1 etapa (método directo).

muestra de agua. Se incuba sin invertir la placa a 35 ± 0,5 °C por 1,5 a dos horas con una atmosfera húmeda luego se retira la membrana filtrante de la almohadilla y se coloca en una placa con agar LES-ENDO o una placa con una almohadilla con 1,8-2,0 ml de caldo M-ENDO tomado las mismas precauciones indicadas anteriormente se invierte la placa con agar o con caldo y se incuba a 35 ± 0,5 °C 22-24 hora.

1.7.6.- Método Directo

El volumen de muestra recomendado para el análisis de agua potable por este método es de 100ml. Este volumen puede distribuirse entre varias membranas si fuera necesario.

Cantidades menores o mayores pueden emplearse para otras aguas o para análisis especiales. Se recomienda membranas filtrantes de 0,45 µm. Las comparaciones estadísticas de los resultados obtenidos por el método del número más probable y el de membrana filtrante demuestran que este último es más preciso. Aunque la información obtenida por ambos métodos sobre la calidad del agua se aproxime, los resultados numéricos no son idénticos. Los resultados obtenidos por el método del número más probable deben ser más altos.

1.7.5.- Agua potable (Método de enriquecimiento)

Este método seguido del método directo, da los mejores resultados sobre la calidad del agua potable, sin embargo, puede eliminarse en los exámenes de rutina ya que se han obtenido resultados confiables sin hacer el enriquecimiento. Se procede de la siguiente manera: se coloca una almohadilla en la base de la placa de Petri, se añade 1,8 a 2 ml de caldo lauiril sulfato triptosa para saturar la almohadilla se elimina el liquido en exceso luego se coloca sobre la almohadilla la membrana filtrante utilizada para filtrar la

Se coloca la membrana filtrante utilizada para la filtración de la muestra sobre el agar MENDO repartido en una placa de Petri o sobre una almohadilla saturada con 1,8 – 2,0 ml del caldo M-ENDO se invierte la placa y se incuba a 35 ± 0,5 °C por 22-24 horas.

1.7.8.- Agua no potable

Las aguas no potabilizadas y las aguas de desecho se pueden analizar el método directo descrito en el punto anterior. En la mayoría de los casos no es necesario hacer un enriquecimiento previo. Numeración y confirmación de las colonias las colonias típicas en los medios ENDO tienen un color rosado a rojo oscuro con brillo metálico en la superficie. La zona con brillo de metálico puede ser pequeña como la punta de un alfiler o cubrir todas las colonias. Se enumeran todas las colonias típicas empleando un microscopio estereoscópico con 10X – 15X o un cuenta colonias el número total de colonias en los medio tipo ENDO (coliformes o no) no tienen relación alguna con el numero de bacterias presentes en la muestra original, por lo tanto, no se puede correlacionar con la calidad de la muestra de agua. Para el cálculo se emplea la siguiente formula 𝐶𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 / 100 𝑚𝑙 =

𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑐𝑎𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 𝑥 100 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑓𝑖𝑙𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎

Los coliformes a veces producen colonias atípicas lo cual deben identificarse transfiriéndose a un caldo lauril sulfato triptosa. Se incuban a 35± 0,5 °C por 48 horas. Las que den un resultado positivo se transfieren a un caldo lactosado de bilis ver brillante. Se incuban a la misma temperatura y el mismo tiempo que el caldo anterior.

El crecimiento y la producción de gases confirman la presencia de coliformes. La confirmación se puede hacer en forma más rápida sembrando las colonias simultáneamente en los dos caldos en incubando a 35± 0,5 °C por 24 horas, si hay crecimiento y gas en ambos tubos se confirman los coliformes. Si uno o ambos tubos no tienen gas de deben re incubar el caldo lauirl triptosa por 24 horas adicionales si después de este tiempo no se produce gas, la colonia no era un coliforme, si se produce gas, se transfiere a un caldo lactosado bilis verde brillante para la confirmación definitiva

1.7.9.- Numeración de Estreptococos fecales por el método del numero más probable (NMP)

Agua potable y aguas de desecho sin tratar: prueba presuntiva: Se inoculan grupo de 5 tubos conteniendo caldo de glucosa acida con cantidades apropiadas de la muestra según la densidad. Se emplea caldo glucosa acida de concentración simple para inóculos de 1ml o menores y caldo glucosa acida de concentración doble para inóculos de 10 ml.

Se incuban los caldos sembrados a 35 ± 0,5 °C y se examina la aparición de turbiedad a

las 24 ± 2h y 48 ± 3h los tubos con caldo glucosa acida se someten a la prueba confirmativa. Prueba confirmativas: Se siembra de cada caldo glucosa asida positiva, una placa con agar selectivo para enterococos Pfizer. Se incuba a 35± 0,5 °C x 24 ±2 h. Las colonias negro-parduzcas con halos marrones confirman la presencia de estreptoccos fecales.

1.7.10.- Método de la membrana filtrante

Agua sin tratar y agua de mar (no es apropiado para aguas muy turbias ni para aguas cloradas). Se filtra una cantidad de muestra que produzca entre 20-100 colonias en la membrana filtrante. Se emplean volúmenes de 100, 10, 1, 0,1 o 0,01 ml. según la contaminación del agua. Las membranas filtrantes se colocan directamente sobre agar streptococcus KF repartido en placa de Petri y se incuban en posición invertida a 35± 0,5 °C x 48h. Las colonias típicas de los streptococos fecales son rosadas o rojo oscuro. Se cuentan las colonias en las membranas con un rango de colonias entre 20-100. El rango es más amplio que para coliformes debido a la mayor selectividad del agar. Los resultados se anotan como número de estreptococos fecales por 100 ml. Las colonias en el agar estreptococos KF corresponde en un 100% a estreptococos fecales para la mayoría de las aguas. Cuando sea necesario confirmar se trasplanta cada colonia seleccionando a un agar cerebro corazón biselado y se incuba a 35 ± 0,5 °C x 24-48h. El cultivo en agar cerebro corazón se somete a pruebas adicionales.

1.8.- ANALISIS BACTERIOLÓGICO DEL AGUA TOMA DE LA MUESTRA Revise la norma referente de COVENIN 2614-1994 AGUA POTABLE. TOMA DE MUESTRA. 1-Revise lo respectivo para realizar una toma de muestra de agua en un embase previamente esterilizado, o esterilizado desde su origen como establece el apartado 4.4.3.

Para ello se sugiere esterilizar un embase de 500 ml, 100 ml y llevar un embase estéril para toma de muestras liquidas (embase de toma de orina).

2- Revise lo referente al apartado 5.2 para toma de muestra para análisis microbiológico (5.2..1 5.2.2) 3- Realice un muestreo de agua proveniente de un grifo 4- Revise lo referente a la toma de agua de pozo 5- Identifique la muestra según lo establecido en la norma referida en su apartado 5.5

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Revise la Norma COVENIN 1126-89 ALIMENTOS IDENTIFICACIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO 6.- Realice el procedimiento referido para las muestras según todo el contenido que desarrolla el apartado 6.4.2 Revise lo referente a la normativa de NORMAS SANITARIAS DE CALIDAD DEL AGUA POTABLE GACETA Número 36.395 7.- Considere que si la muestra se toma de la red de distribución esta debe contener los niveles de calidad establecidos en la referida norma.

Revise la norma COVENIN 3047-93 Agua potable.

Método de determinación del número más probable de bacterias coliformes 8.- Evalúe según la muestra previamente tratada el número más probable de bacterias coliformes.

GACETA OFICIAL DE LA REPÚBLICA DE VENEZUELA AÑO CXXV – MES V

Caracas, viernes 13 de febrero de 1.998

Número 36.395

MINISTERIO DE SANIDAD Y ASISTENCIA SOCIAL NUMERO S.G. -018-98

11 DE 02 DE 1.998 187° Y 138°

Por disposición del Ciudadano Presidente de la República y de Conformidad con el artículo 30, Ordinal 7° de la Ley Orgánica de la Administració n Central y en concordancia con los artículos 2 y 10 de la Ley de Sanidad Nacional.

RESUELVE Dictar las siguientes: “NORMAS SANITARIAS DE CALIDAD DEL AGUA POTABLE” Capítulo I Disposiciones preliminares Artículo 1.- El objetivo de las “Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable” es establecer los valores máximos de aquellos componentes o características del agua que representan un riesgo para la salud de la comunidad, o inconvenientes para la preservación de los sistemas de almacenamiento y distribución del líquido, así como la regulación que asegure su cumplimiento.

Artículo 2.- Están sujetos al cumplimiento de las presentes Normas los entes responsables de los sistemas de abastecimiento de agua potable públicos o privados.

Artículo 3.- A los efectos de interpretación y aplicación de estas Normas, se establecen los siguientes criterios: Autoridad Sanitaria Competente: Ente Regional adscrito a la Unidad Sanitaria Regional, dependiente del Ministerio de Sanidad y Asistencia Social.

Valor máximo aceptable: Es el establecido para la concentración de un componente que no presenta un riesgo significativo para la salud o rechazo del consumidor, teniendo en cuenta el consumo de agua durante toda su vida (OPS/OMS).

Bacterias Coliformes Termorresistentes: Grupo de organismos coliformes que pueden fomentar la lactosa a 44-45°C; comprenden el género Escherichia y en menor grado, especies de Klebsiella, enterobacter y citrobacter.

Componentes Organolépticos: Sustancias y/o elementos que proporcionan al agua características físicas percibibles por el consumidor (color, olor, sabor, temperatura).

Sitios representativos del Sistema de Abastecimiento de Agua Potable: Se consideran así al efluente de la planta de tratamiento, alimentadores principales y secundarios, ramales abiertos y cerrados, estaciones de bombeo y estanques de almacenamiento.

USA/ml. Unidad de Area equivalente a 400 µ m2 .

Artículo 4.- El agua potable debe cumplir con los requisitos microbiológicos, organolépticos, físicos, químicos y radiactivos que establecen las presentes Normas.

Artículo 5.- Cuando el agua que se designe al suministro como potable no cumpla con los requisitos establecidos en las presentes Normas, el responsable del sistema de abastecimiento respectivo deberá aplicar el tratamiento que la haga apta para dicho uso.

Artículo 6.- El agua potable destinada al abastecimiento público deberá contener en todo momento una concentración de cloro residual libre en cualquier punto de la red de distribución de 0,3 y 0,5 mg/L. Artículo 7. - Cuando se excede un Valor Máximo Aceptable en estas Normas, el ente responsable del sistema de abastecimiento de agua potable debe investigar la causa, informar a la Autoridad Sanitaria Competente y tomar las medidas correctivas.

Capítulo II De los aspectos microbiológicos Artículo 8.- El ente responsable del sistema de abastecimiento de agua potable debe asegurar que esta no contenga microorganismos transmisores o causantes de enfermedades, ni bacterias coliformes termoresistentes (coliformes fecales), siguiendo como criterio de Evaluación de la Calidad Microbiológica la detección del grupo coliforme realizada sobre muestras representativas captadas, preservadas y analizadas según lo establecido en las presentes Normas.

Artículo 9.- Los resultados de los análisis bacteriológicos de agua potable deben cumplir los siguientes requisitos: a. Ninguna muestra de 100 mL, deberá indicar la presencia de organismos coliformes termorresistentes (coliformes fecales). b. El 95% de las muestras de 100mL, analizadas en la red de distribución no deberá indicar la presencia de organismos coliformes totales durante cualquier periodo de 12 meses consecutivos. c. En ningún caso deberá detectarse organismos coliformes totales en dos muestras consecutivas de 100 mL, provenientes del mismo sitio.

Artículo 10.- El agua potable no debe contener agentes patógenos: Virus, Bacterias, Hongos, Protozoarios, ni Helmintos.

Artículo 11.- El agua potable no debe contener organismos heterotrofos aerobios en densidad mayo a 100 ufc/cmL. Artículo 12.- La cantidad total de plancton presente en el agua potable, en ningún caso debe exceder de 300 unidades estándar de área por mL (USA/mL).

Artículo 13.- El ente responsable del sistema de abastecimiento de agua potable proveniente de fuentes ubicadas en zonas endémicas de enfermedades de origen hídrico definidas por el Ministerio de Sanidad y Asistencia Social, debe establecer programas de vigilancia sanitaria permanentes y aplicar los correctivos específicos adecuados, a juicio de la Autoridad Sanitaria Competente.

Capítulo III De los aspectos organolépticos, físicos y químicos Artículo 14.- El agua potable deberá cumplir con los requisitos organolépticos, físicos y químicos establecidos en los cuadros N° 1,2, 3 y 4 que se presentan a continuación: Cuadro N° 01 Componentes relativos a la calidad organolépticos del agua potable

Componente o característica Color Turbiedad Olor o sabor Sólidos disueltos totales Dureza total PH Aluminio Cloruro Cobre Hierro total Manganeso total Sodio Sulfato Cinc

Unidad

Valor Deseable menor a

Valor Máximo Aceptable (a)

UCV (b) UNT (c) --

5 1 Aceptable para la mayoría de los consumidores 600 250 6.5 - 8.5 0.1 250 1.0 0.1 0.1 200 250 3.0

15 (25) 5 (10)

mg/L mg/L CaCo 3 -mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L

1000 500 9.0 0.2 300 (2.0) 0.3 (1.0) 0.5 200 500 5.0

a) Los valores entre paréntesis son aceptados provisionalmente en casos excepcionales, plenamente justificados ante la autoridad sanitaria. b) UCV: Unidades de color verdadero. c) UNT: Unidades Nefelométricas de Turbiedad.

Cuadro N° 02 Componentes inorgánicos COMPONENTES

Valor Máximo Aceptable (mg/L)

Arsénico

0.01

Bario

0.7

Boro

0.3

Cobre

20

Cadmio

0.003

Cianuro

0.07

Cromo Total

0.05

Fluoruros

(c)

Mercurio Total

0.001

Níquel

0.02

Nitrato

NO3 = Nitrato

(NO3-)

45.0

(N)

10

Nitrito (NO2 -)

0.03

(N)

0.01

Molibdeno

0.07

Plomo

0.01

Selenio

0.01

Plata

0.05

Cloro Residual

1.0 (3.0) (a)

N= Nitrógeno

(b)

(b)

NO2 = Nitrito

a) El valor entre paréntesis es aceptado provisionalmente en casos extremadamente excepcionales, plenamente justificado ante la Autoridad Sanitaria Competente. b) La suma de las razones entre la concentración de cada uno y su respectivo valor máximo aceptable no debe ser mayor a la unidad. c) El contenido de flúor, como ion fluoruro F+ se fijará de acuerdo con el promedio anual de temperatura máxima del aire en °C, según el cuadro N° 3 siguiente:

Cuadro N° 03 Valores límites recomendables para el contenido de fluoruro en mg/L

Promedio anual de temperatura máxima del aire en °C.

Límite Inferior

Límite Óptimo

Límite Superior

10.0 – 14.0

0.8

1.1

1.5

14.0 – 17.6

0.8

1.0

1.3

17.7 – 21.4

0.7

0.9

1.2

21.5 – 26.2

0.7

0.8

1.0

26.3 – 32.6

0.6

0.7

0.8

Cuadro N° 04 Componentes Orgánicas

Componentes Bromoformo Cloroformo Dibromoclorometano Benceno Tolueno Xileno Aldrín y Dieldrín Clordano DDT y sus metabolitos 2-4 D Heptacloro Heptacloro Expósido Hexaclorobenceno Lindano Metoxicloro Acrilamida Benzopireno 1-2 Dicloroetano 1-1 Dicloroeteno Etilbenceno Pentaclorofenol 2-4-6 Triclorofenol

Valor Máximo Aceptable µg/L 100 200 100 10 700 500 0.03 0.2 2.0 30 0.03 0.1 1.0 2.0 20 0.5 0.7 30 30 300 9.0 200

Capítulo IV De los aspectos radiactivos Artículo 15.- El agua que se suministre como potable no deberá contener ni haber sido contaminada con elementos radiactivos que excedan los valores máximos que se establecen a continuación: Radiactividad Alfa Global: 0.1 Bq/L Radiactividad Beta Global: 1.0 Bq/L Capítulo V De la frecuencia de muestreo y análisis del agua para suministro como potable Artículo 16.- El agua que se suministre como potable deberá someterse a mediciones sistemáticas para la evaluación de parámetros microbiológicos, organolépticos, físicos, químicos y radioactivos en muestras representativas del sistema de abastecimiento con la frecuencia que establecen estas Normas.

Artículo 17.- La frecuencia mínima para la captación de muestras y análisis bacteriológicas se presentan en el cuadro siguiente: Fre cuencia mínima de muestreo para análisis de parámetros bacteriológicos en el sistema de distribución del agua potable

Población abastecida Menor de 5.000 5.000 a 100.000 Más de 100.000

Frecuencia Mínima (a) Una (01) muestra mensual Una (01) muestra mensual por cada 5.000 personas Una (01) muestra mensual por cada 10.000 personas, más 10 muestras adicionales.

(a) Cuando se produzcan epidemias, inundaciones u operaciones de emergencia después de las interrupciones del abastecimiento o reparaciones, la frecuencia del muestreo ha de aumentarse dependiendo de la situación en particular a juicio de la Autoridad Sanitaria Competente.

Artículo 18.- La frecuencia mínima para la captación de muestras y análisis microbiológicos, será de una (1) muestra anual y se captarán muestras adicionales cuando se observen alteraciones o cuando lo elija la Autoridad Sanitaria Competente.

Artículo 19.- La frecuencia mínima para la captación de muestras y análisis de las características organolépticas, físicas y químicas se presentan en el cuadro siguiente:

Frecuencia mínima para el análisis de los parámetros relacionados En las características organolépticas, físicas y químicas del agua potable

Componente o Característica Color y turbiedad Aluminio (a) PH Dureza

Frecuencia Mínima Aguas Superficiales Aguas Subterráneas .- Una (1) muestra quincenal .- Dos (2) muestras anuales en aguas no sometidas a en aguas no sometidas a tratamiento de clarificación. tratamiento de clarificación .- Una (1) muestra diaria en .- Una (1) muestra diaria en aguas tratadas. aguas tratadas.

Olor Sabor Aspecto .- Una (1) muestra diaria. .- Una (1) muestra diaria.

Conductividad específica Temperatura Cloro Residual Todos los parámetros incluidos en las tablas del .- Una (1) muestra trimestral .- Una (1) muestra semestral artículo 14 de estas Normas. (a) Realizar el análisis de este elemento, con la frecuencia establecida sólo si se adiciona durante el tratamiento de clarificación.

Artículo 20.- Los entes responsables del abastecimiento de agua potable están en la obligación de enviar mensualmente los resultados de los análisis efectuados a la Autoridad Sanitaria Competente.

Artículo 21.- Los análisis a que se refieren las presente Normas deben ser realizados por profesiona les idóneos en laboratorios competentes a juicio de la Autoridad Sanitaria, siguiendo las metodologías establecidas en el Método Estándar para el análisis de aguas y aguas residuales (AWWA y AVHA).

Artículo 22.- La Autoridad Sanitaria Competente realizará la captación de muestras de agua para la determinación de radiactividad cuando se sospeche la presencia de fuentes radiactivas naturales o provenientes del desarrollo de actividades humanas en áreas de las cuencas hidrográficas utilizadas para el abastecimiento de agua potable.

Capitulo VI Disposiciones Finales Artículo 23.- La Autoridad Sanitaria Competente que tenga a su cargo los programas de Ingeniería Sanitaria, establecerá los plazos dentro de los cuales los responsables del suministro de agua potable deberán instalar los sistemas o procedimientos que se requieran para el tratamiento de las aguas, de manera que cumplan con los requisitos de potabilidad establecidos en las presentes Normas y fijará los plazos dentro de los cuales deben proceder a cambiar o complementar las fuentes de abastecimiento que se requieran.

Artículo 24.- El incumplimiento de las disposiciones contenidas en esta resolución será sancionado conforme a lo dispuesto en la Ley de Sanidad Nacional y la Ley Orgánica del Sistema Nacional de Salud, según sea el caso.

Artículo 25.- La presente Resolución deroga la Resolución N° 238 de fecha 30/12/91, publicada en Gaceta Oficial de la República de Venezuela N° 34.892 de fecha 29/01/92; así como cualquier otra resolución, disposición o providencia que colida con su contenido.

Artículo 26.- La presente Resolución entrará en vigencia transcurridos 60 días contados a partir de su publicación en la Gaceta Oficial de la República de Venezuela.

Comuníquese y Publíquese

JOSÉ FELIX OLETTA LÓPEZ Ministro de Sanidad y Asistencia Social

DP/ygg.

26/06/2003