血清电泳、血清免疫固定、尿 蛋白和冷球蛋白
电泳图集
全国总代：威士达医疗设备上海有限公司 联系电话：021-50806386 电泳
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目录 1． 引言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4
4.14 α 脂蛋白（APO B）„„„„„„„„„„„„„„94
2． 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„18
4.15 胆红素：胆红素电泳区带„„„„„„„„„„„97
3．目测和电泳结果模型„„„„„„„„„„„„„„„47
4.16 转铁蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„102
4． 特定蛋白的血清蛋白图谱„„„„„„„„„„„„„50
4.17 冷球蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„107
4.1 前蛋白/甲状腺素运载蛋白„„„„„„„„„„„51
4.18 C4„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„111
4.2 白蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„„55
4.20 C3„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„113
4.3 白蛋白，无白蛋白血症状况„„„„„„„„„„58
4.21 C1 q 抑制剂蛋白„„„„„„„„„„„„„„„117
4.4 白蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„„59
4.22 β 2 微球蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„119
4.5 α 脂蛋白（APO A）„„„„„„„„„„„„„67
4.23 纤维蛋白原蛋白„„„„„„„„„„„„„„„121
4.6 α 1 酸性糖蛋白„„„„„„„„„„„„„„„69
4.24
4.7 α 1 抗胰蛋白酶蛋白„„„„„„„„„„„„„71
4.25 免疫球蛋白 IgG„„„„„„„„„„„„„„„125
4.8 甘油三酸酯„„„„„„„„„„„„„„„„„76
4.26 免疫球蛋白 IgA„„„„„„„„„„„„„„„126
Gc 特定蛋白组„„„„„„„„„„„„„„„78
4.27 免疫球蛋白 IgM„„„„„„„„„„„„„„„127
4.9
电泳
C 反应蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„123
4.10 α 2 巨球蛋白„„„„„„„„„„„„„„„81
5．在参考范围内的多克隆免疫结构„„„„„„„„„„„128
4.11 结合珠蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„87
6. 低于参考范围下限的多克隆免疫结构：低丙球蛋白血症„131
4.12 交联纤维蛋白„„„„„„„„„„„„„„„90
7. 高于参考范围上限的多克隆免疫结构：高丙球蛋白血症„136
4.13 C3„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„93
8. 单克隆组分的多克隆免疫球结构„„„„„„„„„„141 2
9. 单克隆组分„„„„„„„„„„„„„„„„„„„153
12. 冷球蛋白免疫固定的图集„„„„„„„„„„„„„218
10. 血清蛋白的图谱„„„„„„„„„„„„„„„„„203
13. 免疫固定„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„226
11. 某些血清蛋白的电泳图谱疑似有单科隆组分存在
14. 评价：一个单克隆组分下的多克隆免疫结构„„„„„269
„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„210
15. 尿蛋白：直接观察和电泳图谱„„„„„„„„„„„281
电泳
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和风险性,能够给予必要的解释，因为有互相重叠的疾病的作用
引言
机制， 在没有临床提供诊断信息时，(个别情况例外)会带来错误
多年来， 研究血浆蛋白的热情始终贯彻我的专业兴趣。
的判断分析。
在电泳领域里，对分离蛋白质所涉及到的， 如电泳、缓冲
与此同时，临床医生必须认识到目前实验室研究方法的局限
液、介质、分辨率、聚集、敏感度、精确性和准确性等已经讨论
性以及结果错误的可能性。
了数十年。
当然，我们不能只用蛋白质分离技术简单的分析是否有单克
有时候，在一个追求“完美”的尝试中，这些方法被认为不
隆组分。
能达到的，因为他们有明确限制。事实上，像 Robert F. Ritchie 陈
基于这些客观前提，本图集的目的在于通过图片和简要的评
述的（Clin chem Lab Med 2001,39(11)1045-1053）①：
论来强调出“阅读电泳图片的方法”是与看 X 光片、心电图报告
“血清蛋白具有独特的功能，在其他测试中是很少有的：它
一样的形式，让实验室工作人员有机会对比病人体内蛋白质水平
们是相关的。换句话说，影响其中一种血清蛋白, 会改变其他血
的临床信息。
清蛋白。
以上的建议依据了医学研究所（1992）的指南：
事实上, 血清蛋白的分析是一个多用途的检测，不是一系列
“任何类型的文件，必须有在临床中采用特定的诊断治疗
的独立检测。
方案的客观说明。”
因此，只测量一个蛋白，例如：只鉴定溶血的结合珠蛋白，
即使是附加注释，一份详尽的电泳报告，和医学实验室其他
会极大地降低诊断能力。”
的报告有同样的价值，如：
因此，为了能充分利用血清蛋白诊断的潜在价值，，实验室 和临床之间要有密切的合作。 我们的目的是希望提醒实验室工作人员对于结果的复杂性
电泳
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采取的行动的回应。” CP Price 2000 “适用性是任何对病人有益的事情” “在一个越来越复杂的医学领域里，必须避免出现病人没 “病理实验室（或者临床）是生物、微生物、免疫、化
有得到其应有治疗，或是接受不必要治疗的情况” RH Brook 1994
学、免疫血液学、血液、细胞、病理解剖实验和其他为预防
血清—尿蛋白电泳测试的目的是：
和治疗疾病或者评估人体健康信息提供诊断的实验室。”
1） 半定量检测
“„„它可以提供实验室研究方面的所有内容，包括适
2） 定性检测
当的结果和建议诊断分析。”
3） 单克隆检测（三个目的中最适用的）A.Burlina 1992
国际标准 ISO 15189:2003(E)3.8[2]
许多读者会发现，“半定量电泳”的定义是不恰当的，因
其他服务：
为他们觉得应该相信的是 Nefelometric/Turbimetric 浊度方
“实验室除了负责提供准确的结果之外，还必须最大程
法去测定特定蛋白浓度。
度的阐释和确保病人的利益。”
这是完全正确。
“专业地对选择和解释实验是实验室提供服务的一部分
作者所说的“半定量电泳”是指一个能“自动化和统计控
(准则)。”
制下的电泳系统”
实验室医学伦理学附件 C 的 C6.3
可以随着时间的推移，统计和比较同类数据。这种统计可
国际标准 ISO15189:2003(E)[3]
以收集大量电泳数据来建立正常值，异常值，有较高的统
“国际标准 ISO”的定义支持电泳测试适用性的定义；
计学意义。
“适用性是指在测试中, 给予临床问题、允许保留决定或
由下列章节进一步说明上述内容： 电泳
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a) 电泳系统，“自动化和统计控制下的电泳系统”
有效诊断的意义
适用性：合适和适用 „„适用性是指在测试中给予临床问题、允许保留决定或采 取的行动的回应。 CP Price 2000
电泳有效诊断的目的
电泳
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询证检验医学及其执行
独立金标准
对询证检验医学的实践需要整合个人的临床经验与实验 室的系统研究
（电泳方法选择的）最大目的是（给临床）提供最有用的信息。 例如：尿蛋白必须用琼脂糖凝胶以及敏感的染液。
个人金标准
分离金标准
避免先入为主的观念，着重在膜片上，并与实验室技术人员和医生全面合 作回答以下问题：
知识积累：持续学习
a)
实验的准确性和精密度？
实验执行和解释是否正确？
电泳
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b)
验前概率是什么？
c)
试验后改变疾病治疗的可能性？
d)
有意义的报告是否是有医生报告的？
如何保证电泳的质量控制
质量控制 精密度： 每月对同一个样本最少进行 21 次的重复检测（室内质控）
细节决定成败！
Tonkx 实验建议，变异系数的最大值仍然是重要的 质量控制
实验室必须用自己的测试人群建立参考范围
制造商的参考范围 VS 实验室的参考范围
实验的诊断意义
参考范围的解释：由同一个制造商生产的光密度计&仪器 A 和 B 判读相同 介质的琼脂糖。它有助于评价制造商和实验室自己制备的区别，各个实验 室建立自己参考范围的必要性
电泳
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图 1.=理想的或者特异性诊断测试，100%敏感性和临床特
Acland Lipton 实验计算 Tonks 数据的临床误差百分比 γ ：最大 Max=6%
异性都有诊断能力【4】。 图 2.=毫无意义的测试，50%的敏感性和特异性（像抛硬
γ
币）
正常范围=11-20% 13%的重复实验误差成为正常的概率是多少？ 概率=5%
图 3.=普通的测试，具有一定的重叠区域，敏感性和特异 【5】
性的中间区域有诊断价值
。
Tonkx 实验功能 A=健康区域 B=疾病区域 C=由两个部分重叠得到， 宽度限定在第二象限， 包括假阴性和假阳性。
Tonks 数据结论 Acland Lipton 实验计算 Tonks 数据的临床误差百分比 Tonks 数据的每次
白蛋白：最大 Max=2%
还原都会导致一个 白蛋白 正常范围=56-66% 54%的重复实验误差成 为正常的概率是多 少？ 概率=1.5%
电泳
小误差，数据可能 会从正常到异常， 反之亦然。
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◆用 Kolmogorov-Smirnov[6]实验和平行度测试来研究电
Acland Lipton 实验计算 Tonks 数据的临床误差百分比
泳群体数据（转化成 1 到 5 评估数字）和浊度数据（g/L）
γ
◆在图形中，绿色曲线是电泳数据，红色曲线是浊度数据。
正常范围=11-20% 13%的重复实验误差成为正常的概率是多少？ Tonksγ =4% 概率=2.5%
b)电泳数据显示正常、增加、减少 ◆材料与方法 ◆选择 20 例血清样本进行电泳白蛋白浊度调整 ◆12 例血清样本多克隆 IgA 的浓度在 100-600mg/dL ◆100 例血清样本（年龄在 18 到 75 岁之间，包括健康人 和非健康人，55 名女性，45 名男性） ◆总蛋白用双缩脲的方法进行测定，同时测定空白样本 ◆100 例血清样本的特定蛋白 Behring 浓度计测定 ◆Microgel 琼脂糖电泳系统支持酸蓝染液 ◆2 名技术人员，目测膜片直接观察，对结果进行评估并 打分（1 是减少、2 是稍微减少、3 正常。。。5 增加）
电泳
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到 3.8g/L 的动态电泳
到 49g/L 的动态电泳 有效级>0.05
平行实验阳性
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F
平行实验阳性
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F
到 4.9g/L 的动态电泳
到 3.5g/L 的动态电泳
电泳
有效级>0.05
有效级>0.05
平行实验阳性
有效级>0.05
平行实验阳性
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F
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这种差异有可能是由以下两点引起的： 1）由于免疫球蛋白抗体的亲和力不同（上述不涉及染色 和氨基酸的化学计） 2）电泳中 IgA 的百分比，没有被计算因为它包含在 C3 和转铁蛋白中 对于第二点，进行了一项研究，用三次方程式可以画出γ 到 1.7g/L 的动态电泳 有效级>0.05
平行实验阳性
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F
区域。 因为三次方程式【7】【83】是多项式回归方程，所以可以画出 γ 对于 C3 和转铁蛋白曲线。如果原点是γ 与 C3 之间的极小值 点和γ 与转铁蛋白之间的极小值点，图形将无限接近于基线。 第一个图形显示一个一部分免疫球蛋白怎么迁移在 C3 以 下或转铁蛋白以上
到 26g/L 的动态电泳 有效级>0.05
平行实验阳性
人口分布相同
估算 F<3.96 统计 F 第二个图形显示低丙种球蛋白血症的病人的免疫球蛋需
两种方法测定免疫球蛋白的平均差在 2 到 3g/L 之间浮动 电泳
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要重新考虑百分比，因为它有很大一部分迁移在 C3 以下
三次方程式的运用就能得到免疫球蛋白的计算值，如下表 不计算密度的
不计算 C3 的结
不计算转铁蛋白
总结果
果
的结果
mg/dL
mg/dL
mg/dL
600
184
99
85
500
136
73
63
400
108
58
50
300
80
43
37
200
50
27
23
100
20
11
9
标准 IgA mg/dL
第三个图形显示在 C3 和转铁蛋白下的免疫球蛋白应该引
以上的数据显示，电泳系统可以在“控制下”（自动化和
起注意。
统计控制下）提供半定量的数据，并与浊度数据有相关性。 这说明，“在控系统”是很好的用于测定特定蛋白增高、 降低的方法，不需要使用散射比浊/比浊法来测定。 为了以下三个要实现的“测定” 1） 半定量测定： 白蛋白/α 抗胰蛋白酶/转铁蛋白/C3 补体/结合珠蛋白 的杂合/纯和情况。 2） 定性测定： C3 补体/结合珠蛋白-血红蛋白/单克隆组分的化学物理 电泳
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金标准：
修饰 （Burlina 1992)被认 3） 单克隆的测定（三种中最适合的） 为是最基本的，建议每个实验室都应该根据下文的询证医学
“金标准”的概念是一个持续发展的概念，而不应该是 一个停滞不前的概念。
（EBM）和询证检验医学（EBLM）升级它们的电泳系统 询证医学（EBM）：
这个概念是持续寻找最佳的为了特定目的和最终为病人 服务的方法。
“有责任心，明确和明智地利用现有最好的证据为病人的
在电泳领域目前的金标准是琼脂糖电泳。
诊疗作出决定”
谁证明这些(按时间排列一些机构和会议）：
上述 Sackett 等定义内容，特别包括了实验室是医生决定
1. College of American Pathologists Arch. Pathol. Lab. Med. Vol. 123 page 126 February 1999[9]
诊疗过程的重要组成部分。 询证医学也被定义为一个完整生命所要经历的完整过程。
2. 36th national SIBioC Conference in Padua 2004
从这个描述里，医学是持续发现、进化和改变的领域，因
3. XV Editon of “Proteins from the Laboratory to the Clinic” CEFAR 2006
此，基于最佳证据的实践和有机会采用新的技术是很重要的。
4. Am J Clin Pathol 2008;129:451-458 “Performance
询证检验医学（EBLM）：
Comparison
对询证检验医学的实践需要个人的临床经验和来自系统
Electrophoresis
整合研究的实验室证据。
the
Agarose
Identification
Gel and
如果 Meta-分析是一个“对一个问题从不同角度研究得到 信息从进行结构化和系统化的整合„„血清尿蛋白琼脂糖分 析系统有能力为临床提供改善诊断/干预治疗目标的实验。
作时间和金钱。 电泳
for
and
5. Clin Chem Lab Med 2009;47:1021-1022 2009[11]
在实验室中引入循证医学的原则，是指实现连续的试验鉴
另一方面，可以导致较低的风险和减少病人的不便以及节省工
Capillary
Characterization of Monoclonal Immunoglobulins”[10]
询证检验医学和金标准：
定过程中，一方面可以提供最高的诊断效率和可靠性（金标准），
of
14
使用了最佳实验方法并不是说实验室的任务就完成了。
膜片通过判读器直接检查。”
电泳作为一个诊断的过程，必须考虑如何描述以及解释：
目测检查不受判读器光密度度数的干扰
a) 蛋白条带目测检查 （需要描述蛋白缺乏、特殊蛋白的出现、正常蛋白的增加或者， 还需要指出单克隆组分，寻找减少本周氏蛋白，还可以进行特 定蛋白的定量检测以保障目测法的正确。） b) “电泳症状”阶段 在电泳中小的条带（箭头指出）密度监测器检查不出
（通过描述电泳目测结果以后，解释该结果与生理病理以及临 床的相关性。这个过程必须先收集到病人的临床资料) c) 详尽的报告 d)多克隆条带的目测检查， 可以很好的鉴别多克隆蛋白的变化，对病人生理变化有知道意 义： 单克隆丙球蛋白血症临床指南和实验室评价
David F. Keren, MD; Raymond Alexanian, MD; James A. Goeken, MD; Peter D. Gorevic, MD; Robert A Kyle, MD;
电泳图谱中显示的两条均匀的条带，在峰型图中是看不到 的（箭头）
Russell H. Tomar, MD
b) “电泳符号”阶段
（病理实验室医学 1999；123:106-107）“血清和尿电
通过“认识蛋白质结构的状态”提供了结论
泳„„
电泳
15
通过 CP price，定义 全球金标准
C）详尽的报告
不同类型的实验室结果是可以被接受
为了保证对患者采取适当的步骤，需要给临床提供详尽的
²分析参数
报告。
²室内和室间质量控制数据
关于这个报告必须显示结果，结果是只需要检查一次(1)
²与实验敏感性和特异性有关的数据
还是需要后续的重复检查(2)。 电泳
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我们意识到，对于一个特定的患者，实验室的测试可以进
d) 报告结果是否是通过医生检查的？
行修正对于诊断或治疗的临床行为。 基于以下原因实验室必须：
编写此图集的主要目的是为了给读者提供一种明显和详 尽的影像资料。
²提供同质化结果
A．Ciapini
²改进方法的有效性 ²提供新的方法的数据 诊断的过程结构基于四个主要参考模型： 实验室任务 1）条带的分析鉴定 医生的任务 1) 条带的识别 2）病因 3）可能给出的诊断 所有的这一切必须全球的金标准，个人能力必须完全遵守 A) 人员：个人成长知识和培训 B) 独立：首要的目标是做到能做的最好 C) 分离：行为没有先入为主且集中到以下问题： a) 测试时准确且有重复性吗？ b) 它将被正确执行和解释吗？ c) 测试后会修改疾病的治疗吗？ 电泳
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前言
白蛋白—α 1 抗胰蛋白酶区域（阳极—阴极） 蛋白
每种蛋白和每种蛋白组改变的解释都应该考虑其合成、分布、
分子量大小
脂蛋白 A
“目测检测”【14】和“电泳图形”的结果需要涉及多克隆机制 的相关研究。
α 1 酸性糖蛋白
30000
41000
下面的表格简述了蛋白质在电泳后的形态和功能：
扩散时有起伏的
组成高密度脂蛋
条带
白
浓度>200mg/dl,扩
急性期
散时的条带浅染
能被染色的蛋白
FF 基因型α 1 抗胰蛋
54000
条带清晰
蛋白酶抑制剂
54000
记号清晰
蛋白酶抑制剂
67000
MM 基因型α 1 抗
类似胎儿胚胎蛋
胰蛋白酶增加与
白
白酶
白蛋白区域（从阳极到阴极） 分子量大小
形状或者
（道尔顿）
位置
前白蛋白
55000
条带浅染
转运
白蛋白
66000
条带深染
转运和胶体渗透压
MM 基因型α 1 抗胰蛋
功能
白酶 α 1 甲胎蛋白
其量有关
功能
电泳
功能
（道尔顿）
代谢，而病理生理过程会改变一种或多种代谢过程。
蛋白
形状或者位置
18
α 1 抗胰蛋白酶—α 2 巨球蛋白区域（阳极—阴极） 蛋白
分子量大小
形状或者位置
α 2 巨球蛋白—转铁蛋白区域（阳极-阴极）
功能
蛋白
（道尔顿） MS 基因型α 1 抗
54000
胰蛋白酶
分子量大小
形状或者位置
功能
和结合珠蛋白表型结
蛋白酶抑制剂、聚
合，位置可能不准确
集、溶解、组成纤
（道尔顿） 有两种，一种在中间，
α 2 巨球蛋白
蛋白酶抑制剂
800000
另外一种朝向α 2 巨 球蛋白
MZ 基因型α 1 抗
54000
胰蛋白酶
有两种，一种在中间，
维蛋白 蛋白酶抑制剂
54000
蛋白酶 ZZ 基因型α 1 抗胰
分散型朝向α 2 巨球
2：2 型结合珠蛋白
54000
条带靠近α 2 巨球蛋
160000
蛋白酶抑制剂
蛋白
蛋白酶 α -胰蛋白酶抑制
120000
另外一种靠近α 2 巨 球蛋白
SS 基因型α 1 抗胰
1:2 型结合珠蛋白
脂蛋白 B
250000
蛋白酶抑制剂
白 170000
剂
位于基因型α 1 抗胰
迁移
氧化特性
阴极朝向α 2 巨球蛋
血红蛋白出现过
白
氧化特性
可以迁移到转铁蛋白
低密度/极低密度
阳极或者阴极。可见
脂蛋白成分
弧状。
蛋白酶抑制剂 C3
180000
区域 位于基因型α 1 抗胰
血红蛋白出现过
图形一般呈现起伏的
蛋白酶的扩散的浅染
特定组分
在α 2 巨球蛋白区域
体内体外激活，阳极
活化 C3 的补体
朝向转铁蛋白 载体蛋白
转铁蛋白—转铁蛋白区域（阳极-阴极）
蛋白酶的扩散的浅染
蛋白
区域 1：1 型结合珠蛋白
80000
覆盖α 蛋白酶抑制剂
分子量大小
形状或者位置
功能
（道尔顿）
与血红蛋白结合
区域，阴极在α 2 巨
独立的条带。突出慢
最大的运输铁的
球蛋白前面一点点的
转铁蛋白
80000
速和快速的变化。出
蛋白
浅染条带
现两条同样深染的杂 合子条带。
电泳
19
蛋白
分子量大小
形状或者位置
功能
蛋白
（道尔顿） 冷球蛋白
可变的
分子量大小
形状或者位置
功能
六聚体 IgM 的游
经常出现在γ 区域的
多发性骨髓瘤
离轻链片段
不同的或者浅染的条
（道尔顿） 记号是淡染的。有时
冷球蛋白血症
单克隆组分
候，如果存在单克隆
C3
185000
组分，会迁移到γ 区
带，迁移的位置从α 1
域。
区域到γ 后区
作为不同的条带出现
过敏毒素 C3a 调理
免疫复合物
可变的
C3b,趋化性 C3b C4
纤维蛋白原或者
200000
340000
FDP
验证时，会在 C3 阳极
补体反应的第四
位置出现细的条带。
组成部分
在 C3 和γ 开始区域
纤维蛋白前体
为了使读者能更好的理解电泳中出现的蛋白质，将以下两张图片作为
带，凝血时血浆中
最常出现的蛋白组分
FDP 有问题或者轻微 凝集
免疫球蛋白区域（阳极-阴极） 蛋白
分子量大小
形状或者位置
功能
从 160000 到
阳极位于β 区域，阴
抗体
970000
极向后迁移，扩散区
（道尔顿） 免疫球蛋白
域长。 活化 C 蛋白
135000
在γ 中间区域有不同
激活补体
或者浅染的条带
电泳
冷球蛋白血症？
条不同的浅染条带
例子供读者认识。
出现一条淡染的条
通常在γ 区域出现 2
20
不常出现的蛋白组分
蛋白质
异常
可能引起的原因
前白蛋白
减少
肝脏生物活性减少，不良 炎症反应，发育异常
白蛋白
增加
肾病
减少
炎症反应，浸润性肿瘤， 减肥，肾病肝病水滞留， 弥散性恶病质肠病
α 脂蛋白
α 1 抗胰蛋白酶
这些蛋白可以用特殊的抗血清进行免疫固定的实验确认[15]。
增加
脱水
阳极桥扩散强度增加，强
药物，肝损伤，雌激素水
度减少
平升高，绝经
多聚体减少、增加
遗传变异，遗传缺陷，雌 激素作用，炎症，坏死，
这样可以记住特殊蛋白的位置和形态。
发育异常，肝病 α 2 巨球蛋白
减少
纤溶，类风湿关节炎，子 痫，没有症状的肾病，肝 病，糖尿病
结合珠蛋白
增加
妊娠第三个月，早衰
减少
先天性缺陷，肝病，血管 内溶血，贫血，炎症
转铁蛋白
增加
发育异常，坏死
多聚体减少
遗传变异，肝病，肾病，
增加
慢性感染，营养不良，缺 铁性贫血，肝炎，妊娠， 雌激素
最后我们举一个通过“目测检测”报告对临床提供建议的例子。 电泳
β 脂蛋白
21
迁移率增加
高胆固醇血症，胆道梗阻
蛋白质 C3
异常
可能引起的原因
减少
自身免疫性疾病，肝病，
迁移率增加
肾小球肾炎，膜增生性，
考虑所有的情况，电泳包括两个阶段： 1）第一阶段：用“正确”的方法进行电泳得到电泳条带 “Official recommendation of the SIBioC Commission
慢性炎症，胆道梗阻，体 内、体外转化 1C 到 1A 多克隆免疫球蛋白
减少
遗传性和获得性免疫缺
增加
乏，婴儿，慢性感染，酗
05-Periodical IT.Chem.Clin.15(1) 1990”【16】。 “正确”类型的血清蛋白电泳迁移如下：
酒，肝硬化，慢性肝炎， 自身免疫性疾病，胆汁性 肝硬化
γ 区本身没有特定 C3 蛋白。事实上，多克隆免疫球蛋白 的迁移位置可以到α 2 区域，如下图所示（正常样本的多克隆 【17】
免疫固定） 。
电泳
22
用确认的目测结果解释，如果所有特定的蛋白都表现出来，例 如如下面所示： 急性炎症过程：C 反应蛋白、α 1 抗胰蛋白酶、结合珠蛋 白、C3 这种“图片”有定量分析、“急性周期”的检测和血管内 溶血。α 1 抗胰蛋白酶、结合珠蛋白会依据炎症的变化增加和 减少，雌激素也会增加。正常的结合珠蛋白和α 1 抗胰蛋白酶 增加提示是溶血。 贫血：结合珠蛋白、转铁蛋白、α 1 抗胰蛋白酶 或者在 C3 下面出现（见 3 种免疫球蛋白的图形）
贫血时铁的缺乏会引起转铁蛋白增加。血管内溶血会引起 结合珠蛋白的减少。急性炎症的时候，这两种蛋白的变化截然 相反。α 1 抗胰蛋白酶是急性炎症的指标，因为在急性炎症时， α 1 抗胰蛋白酶增加。 免疫型简介：IgG、IgA、IgM、C3、C4、α 1 抗胰蛋白酶 急性炎症的时候，α 1 抗胰蛋白酶的量会刺激 C3 和 C4 的 合成，从而掩盖 C3、C4 消耗的量。 自身免疫性疾病：C3、C4、IgA、IgM、结合珠蛋白、α 1
2）第二阶段：根据电泳图谱的分析结论，我们用那些个
抗胰蛋白酶
别蛋白质的量或者临床感兴趣的有问题案例的“蛋白图谱”，
结合珠蛋白和α 1 抗胰蛋白酶是血管内溶血的指标（例如，
或者如果电泳系统测定浓度的重复性和准确性良好的情况下，
在急性炎症的时候。）
电泳
23
肾脏疾病：白蛋白、α 2 巨球蛋白、C3、C4、转铁蛋白、
的 M 组分似乎是“良性”的。 这个定义是由 Waldenstrom 一次性通过的，通常用来表示
IgG 在血清或者尿液中测定转铁蛋白和 IgG，能辅助判断是否
所有和单克隆免疫球蛋白改变有关的情况。
是选择性蛋白尿。在任何情况下，白蛋白和α 2 巨球蛋白的测
对下列试验来说，首选使用免疫固定技术检测：
定能辅助判断蛋白质的是否流失。
下列问题的样本 1）
确定低浓度的单克隆免疫球蛋白
2）
通过正常电泳条带确定单克隆免疫球蛋白“记号”
α 抗胰蛋白酶能辅助判断是否是先天不足。在肝癌发生过
3）
确定单克隆轻链
程中，α 抗胰蛋白酶会增加，α 1 抗胰蛋白酶和结合珠蛋白会
4）
电泳后确定单克隆免疫球蛋白种类
减少。胆囊炎会引起急性时相反应。胆道堵塞时 C3 增加。酒
5）
确定所有的特殊蛋白质
精性肝硬化会引起 IgA 增加。原发性胆汁性肝硬化 IgM 会增加。
目前发表的文献都认为免疫固定是“金标准”
慢性肝病会引起 IgG 增加。
自从 C.A.P(美国病理学家学会)规定后，电泳的方法就没
肝脏疾病：α 1 抗胰蛋白酶、结合珠蛋白、C3、C4，IgG、 IgA、IgM
多克隆条带：
有改变：
单克隆组分或者异常蛋白的蛋白质是由孤立的浆细胞产
“鉴定单克隆组分的实验是免疫固定电泳（IFE）。”
生的。
Arch.Pathol.Lab.Med-Vol 123,February 1999
由于同质化的结构会使它们在电泳时形成均匀的条带，这 种条带很容易被识别。
Characterization
gammopathies
【7】
。
有两种以上厂家生产的抗血清可以使实验室得到更多单 克隆组分的信息。
电泳作为筛查被广为流传，在大量的案例中，健康样本中 电泳
monoclonal
Immunofixation;Page 129，1st section
单克隆组分或者异常蛋白的蛋白质缺乏生物活性，而不应 该认为其是具有抗体活性的蛋白质。
of
实验室工作人员的必须面对的困难是单克隆组分的研究 24
必须遵循下列要点：
蛋白质的种类。
²疑似异常的鉴定
²单克隆组分的形状会呈现特定的发面
²对结果的解释
²多克隆 IgD 由于在体内或体外的降解，会使其出现一
²本周氏尿蛋白
条模糊的区带。
检测到一个单克隆组分可能是偶然现象（经常发生在电泳 执行过程中）或者实验室确认临床的怀疑。 偶然情况下，合适的电泳分离不会丢失必不可少的单克隆 组分。（SIBioC：正确的电泳）【18】。
²重链疾病会有单克隆组分，该单克隆组分鉴定，理由 有二：涉及的免疫球蛋白种类含量是可变的（在α 区域从 50% 到 75%），但其电泳的变化往往不明显。当有重链病的时候， 电泳的条带会呈现出扩散的形状，误导成单克隆组分增加。
单克隆组分会以位置和形状都不同的方式出现在电泳的 条带中。
²由于有δ 链，导致每个病人蛋白质的分子量不同，再 会形成二聚体和稳定的碳水化合物。
事实上，他们所处的位置通常没有其他可见的蛋白，如果
²IgM 的单克隆组分在电泳或者免疫固定的时候会引起特
我们使用高浓度的单克隆组分并且/或者使用多克隆γ 球蛋白
别的问题，这是由于其聚合物复杂的结构和复合物在电泳的
的相关抑制，这个条件使得检测不存在问题。
时候不迁移或者迁移的轨道扭曲导致的。
由于电泳的扩散，单克隆组分可以出现的范围是α 1 区域 （参见图集图像）到γ 阴极区域，甚至是γ 区后面。
²这经常会出现在以醋酸作为介质的膜片上， 因为醋酸 的孔径比琼脂糖的小。
更加困难的是我们如何鉴别单克隆组分，如果它电泳的位 置正好和正常蛋白的位置重合，例如： ²结合珠蛋白、转铁蛋白、补体不正常的增加或者低球
²由于一些血浆细胞克隆或者合成后修饰，如聚合或者 有相同类型的免疫球蛋白游离轻链异常增殖，几种异常的条 带也并不少见。
蛋白血症样本，必然会导致单克隆组分被掩盖。 ²这种情况下，用免疫化学的方法来鉴定蛋白的量或者 电泳
²此外，寡克隆γ 球蛋白可能是由于长期抗原刺激引起 的。 25
现在，让我们看看不是有单克隆组分引起的异常条带。
²关节瘤，特别是肠道、胆道和乳腺肿瘤
这些定义都涉及到蛋白质的概念，如：
²脂肪代谢障碍，特别是戈谢病、家族性高胆固醇血症和
²同分异构蛋白血症，杂合的α 1 抗胰蛋白酶，转铁蛋白
黄瘤病
和Ｃ３
易变的γ 球蛋白病，通常伴有如下情况：
有些蛋白，和免疫球蛋白不同，会形成一条类似于单克隆
²药物，苯妥英和磺胺类药物过敏
组分的条带：
²与病毒感染有关
²甲胎蛋白浓度非常高的情况下
²人工瓣膜心脏手术
²α １抗胰蛋白酶和蛋白酶络合
B）临床表现形式为肿瘤克隆增生
²体外溶血后有血红蛋白结合珠蛋白复合物或者游离血
²多发性骨髓瘤
红蛋白。
²孤骨髓瘤
²不是新鲜的血清导致 C3 转换
²髓外浆细胞
²在缓慢的凝集情况下的纤维蛋白原
²血浆细胞白血病
²在多发性骨髓瘤和单核细胞白血病中的溶菌酶
²华氏巨球蛋白血症
²C 反应蛋白，特别使用巴比妥缓冲液处理过的
²γ 重链病
²单克隆γ 球蛋白病：临床图谱
²α 重链病
A） 临床隐藏方式：无症状或症状前
²μ 重链病
意义未明的单克隆γ 球蛋白（MGUS）和以下情况有关：
电泳
²δ 链轻链和重链病
²慢性炎症和感染过程，如骨髓炎，肺结核，慢性胆道感
C)临床变现形式受单克隆组分的病理影响
染，肾盂肾炎，风湿性关节炎等等。
²淀粉样病变
²Karpof 肉瘤和艾滋
²免疫球蛋白或者链沉积病 26
电泳
²粘液水肿性苔藓（皮症性粘性蛋白增多症）
范科尼氏综合征会伴有糖尿。磷酸盐尿等，这种病会先
²成人范科尼氏综合征
检测出有单克隆γ 球蛋白，且病程发展缓慢。
²精神病
游离κ 轻链有可能会损伤肾小管。
²POMES 综合征
4）溶血性贫血（冷凝集素）
²全身毛细管渗漏综合征
它的单克隆 IgM 的浓度通常是低的。它们可以通过红细
实验室查找单克隆组分的问题
胞的吸附和洗脱被识别出来。
1)淀粉样病变
5）重链沉积病
为了查找游离轻链或者它们的片段，特别是λ 片段，需
在有α 重链的情况下，单克隆峰不明显。临床通常会建
要研究浓缩尿样本。
议进行游离重链的检测，或者通过测定免疫球蛋白和电
在β 区域沉积，偏振光的双折射。
泳图谱来比较确定。IgA 的浓度高但是条带上没有峰值。
2）轻链沉积病
γ 重链可能会有单科隆峰，但不是所有的都有。
不同于淀粉样病变，因为轻链不在β 区域沉积，不是晶
6）粘液水肿性苔藓（皮症性粘性蛋白增多症）
体颗粒不会引起偏振光的双折射。
这与位于阴极位置的 IgGλ 单克隆组分有关。
不同于淀粉样病变，轻链经常出现在κ 区域。
7）POMES 综合征
沉积位置的两种形式很类似。
一种罕见的变异血浆细胞恶质液的变化特点是：
浓缩尿游离轻链的浓度经常是很低的。
²内分泌失调，多发性神经病
通常会用免疫固定检测游离轻链的结果进行诊断。
²骨硬化
3）成人范科尼氏综合征
²红细胞增多症
这与有本周氏κ 型蛋白尿的 IgGκ 型单克隆γ 球蛋白有
²肝脾肿大
关（IgGλ 很少见）。
²淋巴结肿大 27
²皮肤色素沉着
根据 Brouet 分型，Ⅰ型冷球蛋白血症
²多毛症
²大颗粒分子的静电作用
单克隆组分的浓度很小（IgG 出现的概率大于 IgA）,出
²单克隆免疫球蛋白，由于化学物理原因，会形成比自
现的几乎都是λ 轻链,是这种情况下，病程的特点是无痛
身分子量大的复合物。
的。
²经常出现 IgMκ 型
8）精神病
²也会出现 IgG 类及其亚型 G1，G2,G3
渐进性多发性神经病（感觉、运动或者混合型）和 G、M
²很少出现 IgA 类
有关，越来越多关于这方面的报道。
²冷沉淀组织
和多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淀粉样变性或者多发
非晶体的，或者不是管状的分子组织，或者是和水结晶
性神经病变有关的是最重要且唯一的临床表现。
的组织，或者是很紧凑的具有破坏性的组织：低温晶体
9）全身毛细管渗漏综合征
中的 IgG3
这种病很少见（说明 9 种案例），是由于 IgG（κ 或者λ ）
根据 Brouet 分型的Ⅱ“a”型冷球蛋白血症
和周期性增加血管通透性导致低血容量冲击和全身血管
²免疫复合物
性水肿。
²免疫球蛋白的生物活性
特别解释
² 单克隆免疫球蛋白，通常是对多克隆 IgG（很少对 IgA）
在某些情况下，存在免疫固定的结果判读、解释方面的
有抗体活性的 M
问题。
²有与类风湿因子形成复合物的多克隆免疫球蛋白
典型的例子就是血清中有冷球蛋白。
²类风湿因子通常激活聚合免疫球蛋白
冷球蛋白类型
²单克隆类风湿因子来源于异常增殖的血浆细胞
不同类型冷球蛋白的情况如下： 电泳
28
电泳
根据 Brouet 分型的Ⅱ“b”型冷球蛋白血症
²有寡克隆 M
²免疫复合物
²与多克隆免疫球蛋白条带结合
²免疫球蛋白的生物活性
以下是临床上的区分
² 寡克隆免疫球蛋白，通常是对多克隆 IgG（很少对 IgA）
a)冷球蛋白血症会引起其他疾病，且它与其他疾病的病
有抗体活性的 M
程有关：
²有与类风湿因子形成复合物的多克隆免疫球蛋白
²淋巴组织增生性疾病（Waldemstrom’s 多发性骨髓瘤，
²类风湿因子通常激活聚合免疫球蛋白
慢性淋巴细胞性白血病，淋巴瘤）
²单克隆类风湿因子来源于异常增殖的血浆细胞
²自身免疫性疾病（系统性红斑狼疮，类风湿关节炎，
根据 Brouet 分型的Ⅲ型冷球蛋白血症
结节性多动脉炎等）
²多克隆免疫球蛋白
²传染性疾病（传染性单核细胞增多症，病毒性肝炎，
²由 1 个或多个免疫球蛋白组成
梅毒，疟疾
²类风湿因子来源于在参与反应的抗原中微扰和放大的
²各种病因的慢性疾病（慢性肝炎，慢性肾小球肾炎）
省里面以调解程序。
b)混合的冷球蛋白血症，不伴有其他疾病显示
根据 Brouet 分类【22】【23】的“异常”冷球蛋白血症
²以特发性血小板减少性紫 癜、雷诺综合症、关节瘤以
²有两种或两种以上单克隆轻链
及肾功能改变的为代表样本有冷沉淀的现象，体现在膜
²存在多克隆
片上。
²有大量 M 和 G
多克隆免疫球蛋白在电泳中如何分布
根据 Tissot 分类的Ⅱ/Ⅲ冷球蛋白血症和Ⅱ/Ⅲv 型
²多克隆免疫球蛋白
²有单克隆免疫球蛋白和多克隆 M
G、M、A、D、E 和κ 、λ 免疫球蛋白被认为是多克隆的，
²有和 IgG 结合的多克隆 M
因为它们是由不同的遗传型多克隆组成。它们也有不同 29
的等电点。
有如下例外：
在电泳过程中，它们会迁移到不同的位置，染色后，它
a) 重链病（通常是 IgA）
们有长且扩散的γ 区：
这种疾病下，重链和轻链不会对应聚集。 这种样本如果进行电泳，会产生一条宽且深染的条带。
²单克隆免疫球蛋白 b) 一些单克隆组分，即使是由独立的克隆产生的，也可
这些免疫球蛋白，是由单一的恶病质克隆产生的，其特 征在于有一个重链（G、A、M、D 或者 E）和一种轻链（κ
以电泳出几个条带。这是由于它的聚合现象导致的。
或者λ ）。因此，它们有唯一的独特型和等电点。
这种现象经常发生在 IgA（单体、二聚体和三聚体），IgM
在电泳过程中，它们会迁移到同一个位置，染色后，会
（三聚体、五聚体和六聚体）和本周氏蛋白上：
在多克隆免疫球蛋白那产生一条窄的（均匀的）条带：
电泳
30
c)一些单克隆组分，即使是有相同的克隆产生的，也会
国病理学家协会）在 1998 年芝加哥公约的三十二页创建
产生两条区带。这两条区带，其中一条是重链，另外一
一个单克隆组分的%值是有一个有意义研究课题，在病人
条是游离轻链：
的随访中，这应该被重视。 这个值，在随后的会议确认文件中被认为等于 20%。 “记录先前样本的 M 蛋白增加或减少。在我们的实验室， 在我注意到先前样本增加或者减少之前，我喜欢看到 M 成分 20%的变化” 对单克隆成分评价程序 David F.Keren,医学博士
单克隆组分的量
Arch.Pathol.Lab.Med-123 期,1999 年 2 月
所有的问题与免疫固定系统有关，最关键的是和一个单 克隆组分有关的量。
132 页 ： Quality assurance for evaluation of a
无症状的单克隆组分都是不确定的。只有在 4 年的不断
monoclomal component.
随访中才可能区分固定形式和进化形式。
我们知道，目前单克隆组分的量是从总蛋白测定得来的，
因为一个可靠的测试是不可能区分是良性还是恶性肿瘤，
将样本执行电泳程序，得到单克隆组分的百分比含量，
生物体液的临床（密度剂量）进展仍然是最有效的特定
通过总蛋白的质量乘以其百分比含量的得到质量。
标准。
现在让我们分析一下这个测定过程中的误差【9】。
随访有不同单克隆组分的病人是为了确认有相同的进化
1）琼脂糖电泳根据 Tonks 原则，有天间误差，这个值在
阶段？
6%。
所有在免疫固定（电泳）上操作委员会，只有 CAP（美
2）总蛋白量的误差在 3%-6%。 3）总蛋白的量是不定的。我们用 CEFAR2005 中的缩二脲
电泳
31
和浊度的方法证明了下面的结果： ²0.5g/L 的白蛋白没有被检测到 ²从 1g/L 到 2.5g/L 的白蛋白被检测到从 0.1-0.2g/L 增 加到 0.5-0.8g/L ²0.5g/L 的 IgG-A-M 没有被检测到 ² 0.5g/L 到 1.0g/L 的 IgG-A-M 被检测到增加到 0.3g/L。 ²从 1.0g/L 到 2.5g/L 的 IgG-A-M 被检测到从 0.3g/L 增 加到 1.5g/L 因此，没有检测到单克隆的变化，使总蛋白值不改变， 单克隆组分误差的平均值在 2%。
²同一个操作者在不同时间划定单克隆组分的误差=15%
4）单克隆组分最小值的设定是一个大的误差因素。我们
²不同操作者划分单克隆组分的误差=28%
的实验表明（CEFAR2005）一个操作者和不同操作者之间
犯错的总误差为 21.45%（用全局误差定理计算从第一点
划定小的单克隆组分是有误差的，如下图所示：
到第四点）。 这个值比 CAP 认为的单克隆组分的变化值还要大。 由于有这些原因，随着单克隆组分的量的临床意义，进 行了一项研究，使得误差相对减少了 15%。 统计学上的数学算法可预测分布单克隆组分的多克隆免 疫球蛋白的曲线变化趋势，可以消除我们提到的 2、3、 4 点误差，是电泳系统的误差等于 6%。
电泳
32
2）执行电泳 3）执行电泳确认有单克隆组分的区域
软件程序叫“Cubic spline（三次函数）”，在 2005CEFAR 被介绍过，在所有的实验室仪器中使用。 程序可以自动查询图形的条带，该条带有假设的均匀的 条带存在（单克隆组分）。
4）观察图形，目测哪有单克隆组分的区域可被看见
该功能支持单克隆组分的查询，取代电泳的迁移的目测 检查，不管怎样，都由专家进行统计。 如果有均匀的条带存在（单克隆组分），该程序可以自动 进行查询，对操作者没有经验要求。 三次函数程序可以将 512 的图形分辨率转变为 10688， 这样可以搜寻及其敏感的图形曲线变化（剖面）。 该功能支持单克隆组分的查询，取代目测检查，不管怎 样，都由专家进行统计。 实验室操作必须按照如下序列： 软件计算大约需要两个最小值的限制
1）确认第一次检测阳性样本，总蛋白中带有单克隆组分 电泳
33
gr/L 和单克隆组分所在的面积的积分值。
6）积分值是系统的重点。这个值不是别的而正是单克隆
5)该软件有助于搜寻单克隆组分（和其他峰）的拐点，
组分的 O.D.（光密度值或是和染料结合的单克隆吸收的 光子数）。 7）阳性样本记录的单克隆组分的值：%、gr/L、单克隆 组分的积分值。 8）在后续病人的随访中，要知道单克隆组分是否稳定， 实验室需要再运行一次电泳。 9）将会读取电泳图谱的光密度值，并要求软件计算单克 隆组分（三次函数）。操作者必须确认单克隆组分的积分 值。如果该值在±5%波动，则该单克隆组分是稳定的。
计算出单克隆组分的坡度，描述单克隆组分曲线的%、 电泳
34
如果该值超过幅度，则要考虑单克隆组分的增加或者减 少。， 10）如果该值的变化超过±5%，一个简单的比例积分值 关系（以前和之后的积分值乘以第一个 gr/L 的值之间的 比率）会提供一个新的单克隆组分的 gr/L 的值。 11）作为替代方案，实验室可以检查总蛋白的量，交叉 检查数据的积分值。 通过这些简单的程序避免误差（通过计算全局误差定理 计算出全局误差为 15%）： 1）总蛋白量的重复性误差 2）总蛋白和其他蛋白对免疫球蛋白变化不敏感的量 3）不同操作者对单克隆组分的位置定位 实例： 电泳的目测检查认为γ 中间区域条带均匀。 光密度扫描发现，在右边和左边的区域有问题。 软件识别单克隆组分的拐点和单克隆组分的斜率（角系
在同一病人的随访中，确定积分值。会出现三种情况：
数），用绿色表示有单克隆组分存在。
1）积分值在 430-478 之间不变化（454±5%）,单克隆组
总面积的 7.16%*70g/L 的总蛋白=5.0g/L 的单克隆组分；
分稳定在 5.0g/L。
积分值=454，参见下图：
电泳
2）积分值变化到 590：单克隆组分变化。计算单克隆组 35
分 g/L 的值：590/454=1.3；1.3*第一个值 5.0g/L=6.5g/L。 3）积分值变化到 300,：单克隆组分变化。计算单克隆 组分 g/L 的值：300/454=0.66；0.66*第一个值 5.0g/L=3.30g/L。 根据描述，1,2,3 点误差可以被避免。 作为这个例子的第一个结论，用新的和原有的方法进行 单克隆组分量的测定，我们想用积分值的不变（单克隆 组分值）来表明病人蛋白结构的变化。 我们假设病人的单克隆免疫球蛋白和以前比逐渐减少， 我们会将模拟图形中的区域消除。 通过正常的计算程序，在本报告开始给出的不敏感的检 测总蛋白的方法显示总蛋白的值不变，但是总蛋白中的 单克隆免疫球蛋白的质量降低，单克隆组分占据更大的 比例，这种情况下，当它的量是一样的话，看起来是增 加的。在我们的模拟中，消除了γ 区域。 我们可以观察到，单克隆组分的%从 7.1-7.7，当积分值 维持在 454。 由此表明，积分值不受其他参考值影响，是一个绝对的 值。 作为第二个和最后一个结论，我们显示用通过定义最小 电泳
36
位置的传统方法计算单克隆组分的量。
读者会意识到，这种由操作者来判断的方法有多大的误
第一位操作者计算，如下图，单克隆组分=5.3%
差。 三次函数使用的最大优势在于数据的再现性。 例如： 第一位操作者在图形中定义单克隆组分的位置：
第二位操作者计算，单克隆组分=3.4%
单克隆组分平均值=3.0g/L 第二位操作者在图形中定义单克隆组分的位置：
电泳
37
例 1： 人工定义 N=10
单克隆组分 平均值 g/L
三次函数 CV%
单克隆组分 平均值 g/L
CV%
平均积分 CV%166
操作者 1
2.10
15.1
2.41
7.82
6.2
操作者 2
1.24
33.2
2.41
7.82
6.2
操作者 3
1.24
34.5
2.41
7.82
6.2
最大不同
大约为 1
0
例 2： 定义不同位置的单克隆组分，三次函数软件计算平均值
人工定义
=3.0g/L。
N=10
单克隆组分
事实上，无论那一位操作者，得到的结果是一样。 我们用如下两个图表来作为例子说明以上功能。 10 天连续电泳试验（模拟随访实验），三个操作者（随 机）来计算单克隆组分的量。 显示电泳变化的统计值【24】。
平均值 g/L
三次函数 CV%
单克隆组分 平均值 g/L
CV%
平均积分 CV%587
操作者 1
13.0
6.14
10.28
2.49
3.5
操作者 2
11.1
12.8
10.28
2.49
3.5
操作者 3
9.0
5.58
10.28
2.49
3.5
最大不同
4.0
0
基本推断，在这两种情况下，不同的操作者，单克隆组 分的平均值，用传统的计算方法在同一个阶段下是增加 的（记住，样本是一样的，变量只是操作者和测试的重 复性）！
电泳
38
另一方面，三次函数计算的单克隆组分的平均值，不随
study of protein polymorphism.Vox Sang 1969；
操作人员的变化而变化！！
17:445-452[26]”和后续修改提及的经典免疫固定方法，
在国际电泳中，Interlab 是第一个用“三次函数”软件
在蛋白质电泳后在其表面形成 8 中颜色分层的抗血清只
来协调用同一中设备的实验室内和实验室间的不同。
是为了提供更好的解释：
另外一个误差的来源和单克隆组分免疫固定使用的抗原 浓度有关。 这种情况下，操作者必须稀释典型的样本，重新进行实 验来确定单克隆组分的类型，这是由于聚合的原发性单 克隆组分溶解会使得抗原过剩，导致该条带无法显示。 基于稀释的倍数，重新计算单克隆组分。这部分对于蛋 白质和抗体反应后染色、蛋白质本身的染色和与单克隆 组分凝胶单元数量减少相关的渗透空间有很大的误差。
从它派生的抗血清和抗体处于平衡或非平衡
为了解决这些问题，避免重复实验，节约人力物力成本，
（Hedelberger-Kendall 曲线）【27】：
Interlab 从以下的工作结果中设想一个“反向”的免疫 固定类型： “A.Ciapini,C.Ciaiolo,G.Marietti,R.Deiana,G.Marl etto Biochimica Clinica Vol.12 1998 年 7 月 12 日。” 【25】
根据“Alper CA,johnson AM. Immunofixation electrophoresis: A technique for 电泳
39
该抗血清是能够传播（简单的免疫放射 Mancini）和扩 散的,对底层的蛋白质，它会积极自动稀释：
在非平衡下，例如来自于，总的再溶解的抗原过剩。 在 Interlab 系统中，电泳后抗血清在略窄于电泳条带宽 度的表面进行分层。 与此同时，抗血清通过蛋白质内部低于平均值的点扩散、 运行和贯彻。
电泳
40
当抗血清的扩散达到平衡时，抗血清和蛋白质的聚合物会沉淀 形成一个弧形。 如果单克隆组分的左、右边缘达到平衡，将会出现一个经典的 沙漏状图形：
因为单克隆着色和浓度之间有关系（见三维图），所以在同一 个病人进行免疫固定试验时应该避免出现“抗原过剩”的现象。 抗血清的扩散速度和免疫球蛋白的浓度相关。
如果单克隆超过了线性的最高浓度，如图所示沉淀会出 现在单克隆的阴阳两极：
以下情况产生“反向免疫固定”。“反向免疫固定”存在 当抗血清处于平衡时，会发生相切的圆弧扩散，从而产
两种单克隆组分的特征：
生点状的圆弧沉淀（见上图右边）
中间呈条状横向呈沙漏型。
最终的效果会形成沙漏状的平衡。 电泳
小的单克隆组分呈现微弱的沙漏型条带。下面的图形可 41
以看到“反向的免疫固定”。事实上，同时存在两种单克 隆组分浓度的多样性，有两种沉淀模式： 1）IgGκ 沉淀呈“沙漏状” 2）IgMκ 沉淀呈“条状：。
单克隆组分 IgA，在 27g/L 下呈线性。 如果不稀释有高浓度单克隆组分的样本，最终效果如下：
单克隆组分 IgM,在 30g/L 以下呈线性。 单克隆组分 IgG，在 35g/L 以下呈线性。
电泳
42
参考平均值
血清中的蛋白
参考范围 g/L(SI)
测定方法
前白蛋白
小于等于 4 岁：0.2；
CRM 470
大于 4 岁：0.2-0.4
在表格（比浊法）中显示的电泳的参考均值（实验室最 好建立自己的参考范围）是由 WHO 推荐的。
白蛋白
新生儿：38-42
溴甲酚绿
成人：35-50 血清中的蛋白
参考范围 g/L(SI)
前白蛋白
0.2-0.4
白蛋白
35-52
α 1 抗胰蛋白酶
0.9-2.0
α 2 巨球蛋白
1.3-3.0
结合珠蛋白
0.3-2.0
转铁蛋白
2.0-3.6
C3(在新鲜样本中)
0.9-1.8
IgG
7.0-16.0
IgA
0.7-4.0
IgM
0.4-2.3
α 1 酸性糖蛋白
0.5-1.2
血浆铜蓝蛋白
0.2-0.6
C4
0.1-0.4
活化蛋白 C
可达 0.005
α 1 抗胰蛋白酶
小于 3 岁：0.8-2.0 大于三岁：0.9-2.0
α 2 巨球蛋白
1.3-3.0
免疫比浊法和 CRM 470
结合珠蛋白
成人独立型:0.3-2.0;
浊度测定法
Hp1-1:0.7-2.3; Hp2-1:0.9-2.60; Hp2-2:0.60-2.90 转铁蛋白
2 周：1.03-3.23；
浊度测定法
6 个月：1.52-3.52； 1 岁：2.15-3.99； 2-14 岁:2.40-3.60； 成 人 ： 2.0-4.0 ； 1.3-3.6； C3( 在 新 鲜 样 本
小于 3 个月：0.6-1.5； CRM 470
中)
4 到 6 个月：0.7-1.6； 大于 6 个月：0.9-1.8
电泳
CRM 470
43
新生儿:0.11-0.35；
IgM IgG
新生儿：7.0-16.0；
CRM 470
CRM470
1-3 个月:0.12-0.87
1-3 个月：2.5-7.5；
4-6 个月:0.25-1.20
4-6 个月：1.8-8.0；
7-12 个月:0.26-1.04
7-12 个月:3.0-10.0
6 岁：0.55-1.20
2 岁：3.5-10.0；
11 岁：0.66-1.55
3-5 个月:-13.0
成人女性：0.6-3.7
6-9 个月：6.0-13.0
成人男性：0.5-3.2
10-13 个月:7.0-14.0
IgA
成人：7.0-16.0
血浆铜蓝蛋白
0.15-0.6
浊度测定法
新生儿：无法确定
C4
0.20-0.50
CRM470
1-3 个月：0.05-0.5
活化蛋白 C
<0.005
CRM470
4-6 个月：-0.8；
总蛋白
66-87
双缩脲法
7-12 个月：-1.4； 2 岁：-1.2；
平均参考值采用“金标准”方法。在此，我们列一份健康人的
3-5 岁：0.4-1.8；
蛋白平均值的表格（参考值有适当方法检测出来）。
6-9 岁:0.6-2.2
常见干扰因素
10-13 岁：0.7-2.3
为了使电泳膜片的视觉效果更好，在下表中我们列明最常
成人：0.7-4.0
电泳
见干扰剂的浓度。
44
蛋白
这些差异会更大。
达到以下浓度开始影响结果 溶血
甘油三酸酯
胆红素
前白蛋白
400
400
500
α 1 康胰蛋白
500
1500
250
600
1500
650
4） 止血带：长期瘀滞（5 分钟）会导致蛋白浓缩达到 20%。 止血带应适用于短时间（1 分钟）的张力，该张力又引 起约 60mmHg 的压力。
酶 α 1 酸性糖蛋
5） 体外活动：这种情况会提高 10%-15%的蛋白浓度。 6） 日常饮食：清淡的早餐不会影响蛋白质的测定。
白 结合珠蛋白
150
700
600
7） 昼夜节律和功能的因素：后续的蛋白质研究中，最好
转铁蛋白
1600
1800
850
能做到在同一时间的重复采样。例如，上午，总蛋白
C3
300
300
400
质浓度相对比较低。为本周氏尿蛋白研究收集的新鲜
C4
100
150
300
尿液最好是上午 9 点到下午 1 点之间的。 （第二次排尿）
C 反应蛋白
1000
5000
700
IgG
1100
2000
350
IgA
1100
1500
300
IgM
1100
1500
400
轻链
400
800
450
8） 生命周期节律：白蛋白的浓度秋天比夏天高 3%。 9） 高海拔的影响：居住在山上的病患的有相当数量的人 的α 1 抗胰蛋白酶，α 2 巨球蛋白，活化蛋白 C 和转帖 蛋白会增高。 10）吸烟：吸烟者的α 1 糖蛋白，活化蛋白 C，尿液里的
可以改变结果的影响因素（需要建立自己的参考值）
白蛋白和铁比较高，同时，白蛋白，IgG 和 IgA 的浓
1） 病人年龄（注意：平均参考值与金标法有关）
度比较低。
2） 性别（注意：平均参考值与金标法有关）
11）孕期：α 1 康胰蛋白酶、α 2 巨球蛋白、C3、IgD、C4、
3） 姿势：健康测试者站直蛋白的浓度（血清，血浆或者
铜蓝蛋白、尿微量白蛋白和转铁蛋白处于高浓度，同
内部血液）比卧位的高 10%。有水肿倾向的测试者，
时α 1 酸性糖蛋白、前白蛋白、白蛋白、IgG、IgA 和 电泳
45
α 2 酸性糖蛋白
2月
1月
7天
结合珠蛋白
3月
3天
4天
转铁蛋白
6月
8天
8天
C3
8天
8天
4天
C4
1月
4天
4天
本周氏κ -λ
5月
2月
7天
IgG
6-12 月
3月
3月
白蛋白、转铁蛋白、α 2 巨球蛋白、α 1 抗胰蛋白酶
IgA
6-8 月
3月
3月
的浓度。
IgM
6月
3月
7天
IgD
6月
10 天
7天
IgE
6月
7天
7天
铁的浓度会降低。（例如，怀孕的妇女早上 7-8 点的 时候循环铁的量低于 10:26 时的 50%-60%） 12）绝经后：这种情况下α 1 酸性糖蛋白的浓度甚至会增 高 50%。 13）口服避孕药：雌激素一般会降低α 1 酸性糖蛋白和急 性反应蛋白的浓度，同时，这也会增加铜蓝蛋白、前
14）输液： 不同温度下血清和尿样的稳定期 血清电泳 蛋白电泳
-20°C
4-8°C
20-25°C
保存时间
3周
3天
1天
尿液中的蛋白质
血清中的蛋白质
蛋白
-20°C
4-8°C
20-25°C
总蛋白
1月
7天
5天
白蛋白
3月
3月
1月
蛋白质
-20°C
4-8°C
20-25°C
稳定剂
α 1 微球蛋白
6月
1月
7天
总蛋白
1天
1年
4周
6天
α 2 巨球蛋白
3月
7天
7天
白蛋白
3月
3月
1周
EDTA
免疫球蛋白
不稳定
5月
1月
α 1 抗胰蛋白酶
3月
3月
7天
肝素
本周氏κ -λ
6月
1月
7天
蛋白质
-20°C
4-8°C
20-25°C
稳定剂
电泳
46
稳定剂
0．1%叠氮钠
目测和电泳结果模型
电泳
47
血清和尿蛋白琼脂 糖电泳的图集
各种特定蛋白在电泳后的的位置图示
尿蛋白使用酸紫染色 后琼脂糖介质上的位置。 通过静电荷分离。【28】
电泳
48
电泳
49
特定蛋白和单克隆组分片 段的血清蛋白图谱
电泳
50
蛋白 前白蛋白/甲状腺素转运蛋白
临床意义：前白蛋白是一种色氨酸含量高、半衰期短（2 天）、血液中浓度低的蛋白，它 是炎症反应、营养不良（与 PCR 联合检测）、肝功能损坏的快速检测指标。 有超过 50 种不同的基因变异被确定是淀粉样病变。
▲霍金森病、酗酒、肢端肥大等使用皮质类固醇、合成代谢类固醇的治疗。 ▼急性相反应、肝病、肾病、遗传性淀粉样变性、甲亢、静脉输液。
电泳
51
蛋白 前白蛋白/甲状腺素转运蛋白
常用染液有：酸蓝、氨基黑和立春红。这些染液对前白蛋白的亲和度比较低。 高分辨率的光密度计能够检测出结合在上述染料上微量前白蛋白。 这也许是用仪器检测取代肉眼电泳图谱分析的唯一情况。
电泳
52
蛋白 前白蛋白/甲状腺素转运蛋白
电泳
53
蛋白 前白蛋白/甲状腺素转运蛋白
使用亲和力高的染液，如酸紫，能显示出甲状腺素转运蛋白
电泳
54
蛋白 白蛋白
临床意义：以前认为，白蛋白是机体的综合指标： ●半衰期长（19 天） ●炎症状态下合成减少 现在认为，对慢性病患者有预后价值 ▲血液浓度 ▼急性相反应、肝病、肾病综合症、营养不良、妊娠、早产新生儿、 先天性无白蛋白血症
电泳
55
蛋白 白蛋白
左边的样本白蛋白减少，右边的样本是白蛋白正常。
电泳
56
蛋白 白蛋白
卧床引起的低白蛋白血症。 左边的样本：住院/卧床病人因为血管外空间的白蛋白再分配出现低蛋白血症。
电泳
57
蛋白 白蛋白，无白蛋白血症
电泳
58
蛋白 白蛋白
右边的样本是使用药物的正常白蛋白图形。
电泳
59
蛋白 白蛋白
左边的样本是由于脱水导致的白蛋白增高的图形。
电泳
60
蛋白 白蛋白
左边的样本是白蛋白运输功能超载的案例，这是由于在高胆红素存在的情况下（黄疸样本）表现出的“快”白蛋白现象。 在β 靠近阳极的区域内存在的小“区带”也是由胆红素引起的。
电泳
61
蛋白 白蛋白
右边的样本是同分异构的双白蛋白血症（在正常白蛋白上面出现区带）。
电泳
62
蛋白 白蛋白
右边的样本是同分异构的双白蛋白血症。
电泳
63
蛋白 白蛋白
左边的样本是同分异构的双白蛋白血症（在正常白蛋白下面出现区带）。
电泳
64
蛋白 白蛋白
由胰腺炎导致或使用药物引起的双白蛋白血症（在正常白蛋白之前出现的区带）。
电泳
65
蛋白 白蛋白
由药物引起的双白蛋白血症（在正常白蛋白之前出现区带）。
电泳
66
蛋白 α 脂蛋白（APO A）
脂蛋白电泳是一种非常简单的方法，用于研究血脂异常。 脂蛋白的差异是根据电泳的迁移率来区分的。 α 脂蛋白即高密度脂蛋白（HDL）是最快的部分。 它们是主要的脂蛋白，位于在白蛋白和α 1 抗胰蛋白酶之间。
电泳
67
蛋白 α 脂蛋白（APO A）
右边的样本没有α 脂蛋白存在。 左边的样本有模糊区带（α 脂蛋白）。出现在白蛋白和α 1 抗胰蛋白酶之间（见 IFE 图片）。
电泳
68
蛋白 α 1 酸性糖蛋白
临床意义：早期急性相反应的检测（24 小时），用于鉴别诊断炎症和雌激素治疗的过 程。 ▲急性相反应正常值的 2-4 倍、AR、肺炎、肿瘤（肾、肺等）、肾功能不全、糖皮质 激素治疗、使用激素。 ▼肾病综合症、妊娠、雌激素治疗、新生儿、肝病、营养不良。
电泳
69
蛋白 α 1 酸性糖蛋白
炎症初期下，样本缺乏α 1 酸性糖蛋白（酸蓝染色）。 正常情况下用如下染液：酸蓝、氨基黑、立春红对这种蛋白的亲和力比较低。 当血液浓度>150mg/dL 时，如上染液都可以使该蛋白显示出来。如果使用亲和力更高的染色剂如酸紫，即使是该蛋白浓度较低时，也能显示。
电泳
70
蛋白 α 1 抗胰蛋白酶
临床意义：先天性缺陷与肝肿大、早期肝硬化、慢性阻塞性肺病、肺气肿有关；在北欧，证实它增加了肝癌的发生率。 ▲急性相反应正常值的 4 倍（10 小时），妊娠，雌雄激素治疗，急性肝炎，急性肝脏疾病（包括酗酒），肿瘤。 ▼先天性缺陷，肾病综合症，晚期肝脏/胰脏疾病，营养不良和恶病质。
电泳
71
蛋白 α 1 抗胰蛋白酶
右边的样本是正常的抗胰蛋白酶图形。 左边的样本有一个杂合子抗胰蛋白酶变异的图形。 杂合子的形式不能诊断任何疾病，但它可以评价电泳系统的分辨能力【17】。
电泳
72
蛋白 α 1 抗胰蛋白酶
右边的样本是正常的抗胰蛋白酶图形。 左边的样本有一个杂合子抗胰蛋白酶变异的图形。 杂合子的形式不能诊断任何疾病，但它可以评价电泳系统的分辨能力。
电泳
73
蛋白 α 1 抗胰蛋白酶
右边的样本是正常的抗胰蛋白酶图形。 左边的样本缺乏抗胰蛋白酶的图形。
电泳
74
蛋白 α 1 抗胰蛋白酶
左边的样本是正常的抗胰蛋白酶图形。 右边的样本是中度增高抗胰蛋白酶的图形。
电泳
75
甘油三酯
各种研究证明，甘油三酯与冠心病的发生有密切关系，无论是前瞻性研究，还是病例对照，其研究结果有部分是不一致的。虽然甘油三酯的 水平和冠心病的发生成正相关，但与其他高风险指标，如高血压、吸烟、高胆固醇血症、低水平的高密度脂蛋白胆固醇比较，甘油三酯不能 心血管疾病的预测指标。 甘油三酯的检测在诊断高脂蛋白血症和家族性脂蛋白血症仍起着关键性作用。 在电泳过程中，α 1 和α 2 巨球蛋白区域可以看到甘油三酯模糊的区带。
电泳
76
甘油三酯
右边的样本没有甘油三酯的存在。 左边的样本在α １－α ２巨球蛋白之间有甘油三酯。
电泳
77
蛋白 Gc 特定蛋白组
临床意义：Gc 是维生素 D 的载体【31】。血管性疾病和用肝素治疗的病人，Gc 浓度 会增高。它在血栓形成中起了抗凝作用。
电泳
78
蛋白 Gc 特定蛋白组
右边的样本在α 2 上面区域有 Gc。 左边的样本没有 Gc。
电泳
79
蛋白 Gc 特定蛋白组
左边的样本在α 2 上面区域有 Gc 区带，该病人肝素治疗 1 天； 右边的样本肝素治疗 3 天，在α 2 巨球蛋白和转铁蛋白之间有 Gc 区带。
电泳
80
蛋白 α 2 巨球蛋白
临床意义：在循环血液中快速控制和及时清除蛋白酶活化具有重要作用（凝血级联反应、纤维蛋白降解、补体激活、白细胞胶原酶、溶酶体 组织蛋白酶活化等），参与细胞因子、激素和金属（特别是锌）的运输；是血清和其他体液的细胞膜通透性标志。 ▲ 肾病综合症（明显增高），糖尿病、肝硬化（中度增高），妊娠、雌激素治疗。 ▼
重症病人晚期（明显减低），急性胰腺炎，溶栓（尿激酶和链激酶治疗）、应激、术后、肝病、类风湿关节炎、先兆子痫、青春期开始（明
显下降）。
电泳
81
蛋白 α 2 巨球蛋白
左边的样本是正常的α 2 巨球蛋白的图形。 右边的样本α 2 巨球蛋白中度增加的图形。
电泳
82
蛋白 α 2 巨球蛋白
左边的样本是正常的α 2 巨球蛋白的图形。 右边的样本α 2 巨球蛋白低于平均值。
电泳
83
蛋白 α 2 巨球蛋白
左边的样本是正常的α 2 巨球蛋白。 右边的样本α 2 巨球蛋白减少，在α 1 抗胰蛋白酶-α 2 巨球蛋白区域有特定的成分。
电泳
84
蛋白 α 2 巨球蛋白
左边的样本α 2 巨球蛋白明显的增高。 右边的样本α 2 巨球蛋白正常。
电泳
85
蛋白 α 2 巨球蛋白
左边的样本α 2 巨球蛋白明显降低。 右边的样本α 2 巨球蛋白正常。
电泳
86
蛋白 结合珠蛋白
临床意义：无效的红细胞生成和血管内溶血导致快速消耗结合珠蛋白。结合珠蛋白的水平结合α 1 酸性糖蛋白的水平，可以评价急性相反应 和溶血是否同时存在。 ▲急性相反应（24 小时），阻塞性黄疸，肾炎，溃疡性结肠炎，再生障碍贫血，糖皮质激素治疗，激素使用。 ▼无效的红细胞生成，血管内溶血，先天性球结合珠蛋白缺乏，，肝癌和骨髓瘤，严重肝病，妊娠，雌激素治疗，新生儿。
电泳
87
蛋白 结合珠蛋白
左边的样本结合珠蛋白正常（Track No.26）。 中间的样本结合珠蛋白轻度降低（Track No.25）。 右边的样本结合珠蛋白中度增加(Track No. 24)。
电泳
88
蛋白 结合珠蛋白
左边的样本结合珠蛋白正常。 右边的样本结合珠蛋白缺乏中间表型 2：1 和 1：1 中度增加。
电泳
89
蛋白 纤维结合蛋白
临床意义：纤维结合蛋白：存在于血浆、血液和血小板中，分子量大小为 440000 道尔顿。 促进细胞间的粘附和纤维蛋白凝块的收缩。在血管内皮素和巨噬细胞内最多。 它与 C1q 结合，并且它是免疫复合物的一部分。
电泳
90
蛋白 纤维结合蛋白
左边的样本有纤维结合蛋白（在转铁蛋白上方有模糊的区带）。
电泳
91
蛋白 纤维结合蛋白
左边的样本（Track No.10）有结合珠蛋白表型存在。 中间的样本（Track No.11）是参考的样本。 右边的样本（Track No.12）有纤维结合蛋白
电泳
92
体外活化 C3
左边的样本：在冰箱中保存三天的血清样本，C3 补体减少，在转铁蛋白上方有一条微弱部分活化的区带。 右边的样本：在冰箱中保存五天的血清样本，C3 补体明显下降，在转铁蛋白上方有一条较宽的活化的区带。 上述两种情况表明， C3 的活化能过减少单克隆组分。
电泳
93
蛋白 β 脂蛋白（APO B）
临床意义：脂蛋白电泳是个简单、实用的研究血脂异常的方法。 它们的差别是根据电泳的分辨率来区分的。 这种分类使我们能迅速的制定饮食疗法。 β 脂蛋白和低密度脂蛋白：通常向阴极位置或者β -1 球蛋白阳极位置迁移。 当蛋白质成分达到染料的敏感程度时，它可以被检测出来。
电泳
94
蛋白 β 脂蛋白（APO B）
左边的样本在转铁蛋白的阴极位置有β 脂蛋白；由于其形状呈花括号型或者锯齿形，较容易被识别。 右边的样本没有β 脂蛋白。
电泳
95
蛋白 β 脂蛋白（APO B）
右边的样本没有β 脂蛋白。 左边的样本在阴极位置存在β 脂蛋白条带。
电泳
96
胆红素 胆红素电泳区带
临床意义：血清样本在电泳过程中，出现了一条异常的胆红素的区带，这种现象比较少见，并与肝肿瘤、胆结石等疾病有关。 这种情况，往往是超出了白蛋白的运输能力，会出现异常的胆红素条带。
电泳
97
胆红素 胆红素电泳区带
肝肿瘤【32】【33】【34】【35】 总胆红素=18.5mg/dL
电泳
98
胆红素 胆红素电泳区带
胆结石病人（左边）总胆红素=11.8mg/dL，结合胆红素=6.9mg/dL。 同一个病人（右边）结石治疗后总胆红素=1.9mg/dL，结合胆红素=1.1mg/dL。
电泳
99
胆红素 胆红素电泳区带
左边的样本在转铁蛋白和 C3 补体之间有均匀的胆红素区带。 右边的样本没有胆红素存在。
电泳
100
胆红素 在电泳中有均一的区带
右边的样本在转铁蛋白的阴极位置有高浓度胆红素均匀的条带的存在。 左边的样本没有胆红素存在。
电泳
101
蛋白 转铁蛋白
临床意义: 铁转运糖蛋白通常是三价铁离子起作用。在缺铁的情况下，铁转运蛋白会在贫血发生几天或数月之前会增加。通常用来鉴别贫血 的类型和鉴别病人是否处于铁超载状态。
▲缺铁、肝炎、妊娠、雌激素治疗和甲状腺功能减低。 ▼急性像反应、肿瘤、肝病、肾病综合征、恶病质、营养缺乏、铁超载、先天性转铁蛋白缺乏症、透析和慢性肾功能不足的病。
电泳
102
蛋白 转铁蛋白
左边的样本是正常的转铁蛋白。 右边的样本转铁蛋白降低。
电泳
103
蛋白 转铁蛋白
左边的样本转铁蛋白正常。 右边的样本转铁蛋白增高。
电泳
104
蛋白 转铁蛋白
左边的样本转铁蛋白正常。 右边的样本转铁蛋白轻度降低。
电泳
105
蛋白 转铁蛋白
左边的样本转铁蛋白正常。 右边的样本在β 脂蛋白阳极位置转铁蛋白轻度降低，转铁蛋白覆盖了部分的β 脂蛋白，通过转铁蛋白左右两端的弧度可以发现它本身的存在。
电泳
106
冷球蛋白
冷球蛋白血症（SC），是免疫紊乱的标志性产物，是长期受抗原刺激的结果，它是由多种病理因素引起的。 近几年的研究证明，冷球蛋白血症与丙肝病毒的感染（HCV）和冷球蛋白复合物（CRG）的存在有着紧密的关系，其发病基础被认定为，是 由冷球蛋白免疫复合物引起的系统性白细胞破裂性血管炎；这种免疫复合物在患者样品的电泳中会出现一条清晰区带。 在靠近点样位置端，表现出一条清晰的带。 因为该条带的着色深且明亮，所以很容易被识别。
电泳
107
冷球蛋白
左边的样本没有免疫复合物。 右边的样本有冷球蛋白免疫复合物。
电泳
108
冷球蛋白
冷球蛋白在电泳中的分离取决于冷球蛋白所带的静电荷数。 冷球蛋白血症的分类必须在 37°的条件下进行第二次静脉穿刺。
电泳
109
冷球蛋白
冷球蛋白在电泳中的分离取决于冷球蛋白所带的静电荷数。 冷球蛋白血症的分类必须在 37°的条件下进行第二次静脉穿刺。
电泳
110
蛋白 补体 C4
临床意义：C4 是经典的 C3 激活途径的一个重要组分。 C4 是一个由二硫键链接的三条不同肽链组成的分子量大小为 206Kd 的β 1 球蛋白。 丝氨酸蛋白酶裂解一段生物活性肽（C4a），分子量剩余的部分（C4b）有粘附细胞膜或细菌壁的能力。
电泳
111
蛋白 补体 C4
左边的样本没有 C3 和 C4。 右边的样本在转铁蛋白（增加）和很少的 C3 蛋白之间存在 C4。
电泳
112
蛋白 补体 C3
临床意义：蛋白质的合成降低、丢失增多和大量消耗，如各种免疫性疾病。C3 全部或者部分缺乏与经常性感染和系统性红斑狼疮有关。对一 些自身免疫性疾病的动态监测比较有用（如急性肾小球肾炎）。 ▲急性相反应（延迟），胆道梗阻，梗阻性黄疸的治疗，糖尿病，痛风，结缔组织疾病（不包括系统系红斑狼疮）。 ▼自身免疫性疾病，免疫复合型疾病，冷球蛋白血症，肝病，慢性肾功能不全，溶血尿毒综合症，血栓性血小板减少性紫癜，先天性缺陷。
电泳
113
蛋白 补体 C3
左边的样本 C3 增加。 右边的样本 C3 正常。
电泳
114
蛋白 补体 C3
右边的样本 C3 减少。 左边的样本 C3 轻微增加。
电泳
115
蛋白 补体 C3
左边的样本因消耗而减少 C3。 右边的样本 C3 正常。
电泳
116
蛋白 C1q 抑制剂
已知的体液补体系统的因子是 C1。C1 是由三个亚基组成的：C1q,C1r,C1s。 C1 是相对分子量大小为 750,000 的糖蛋白；C1q 的相对质量为 410kD，它的活性部位位于羧基端的球状部分。
电泳
117
蛋白 C1q 抑制剂
左边的样本没有 C1q 抑制剂。 右边的样本有 C1q 抑制剂（在 C3 的阴极位置）。
电泳
118
蛋白 β 2 微球蛋白
该蛋白由于以下两个原因引起广泛兴趣：与免疫球蛋白序列同源性和人类白细胞抗原的组织相容性有关。 分子量 11.812。
电泳
119
蛋白 β 2 微球蛋白
左边的样本没有β 2 微球蛋白。 右边的样本有β 2 微球蛋白（在β 2 区域的阴极位置）。
电泳
120
蛋白 纤维蛋白原
在筛选调查中，正确的使用血浆样本比使用血清样本能获得更多的临床信息，因为纤维蛋白原是一个非常敏感的炎症指标。 在一张完整的电泳条带图谱上， 如果出现一条清晰的纤维蛋白区带，很可能是炎症。 从临床诊断疾病的角度分析，电泳检测纤维蛋白原提供的信息比单独检测纤维蛋白原提供的信息更多。 由于毛细血管通透性增加而不是炎症引起的纤维蛋白原的增加，在电泳图谱中不会出现条带。 另一方面，炎症综合征的病人在电泳上出现了一条微弱的条带，也足以引起我们怀疑患者有急性或亚急性的炎症感染，这种炎症感染是伴随 纤维蛋白的消耗或者纤溶活性的增加。特别是纤维蛋白原的电泳形态具有诊断价值。 正是如此，例如，在急性胰腺炎病人中，电泳时纤维蛋白原的区带边缘会变得模糊不清。
电泳
121
蛋白 纤维蛋白原
左边的血清样本没有纤维蛋白原。 右边的血浆样本有纤维蛋白原。
电泳
122
蛋白 C 反应蛋白
各种炎症感染的早期确诊（脑膜炎球菌病、泌尿道感染、创伤、烧伤、肿瘤、坏死等等）。 对急性阑尾炎、在破水后引起的子宫内感染（铁蛋白也增高）有很高的阴性预示值。 鉴别诊断系统性红斑狼疮的活动期和继发性感染。
电泳
123
蛋白 C 反应蛋白
左边的血清样本没有 C 反应蛋白。 右边的样本有 C 反应蛋白，我们可以在γ 区域的阴极位置看到一条深染的条带。
电泳
124
免疫球蛋白 IgG
临床意义：IgG 占总免疫球蛋白的 75%-80%，通过经典路径（IgG1，IgG2，IgG3）、可选路径（IgG4）来固定补体，并构成一个特异的免疫应 答。它们是唯一的可以通过胎盘的免疫球蛋白。严重的缺乏 IgG 和感染密切相关。 ▲自身免疫性疾病（系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，系统性硬化症，干燥综合症等等），慢性肝病，反复或慢性感染，结节病，一些寄 生虫病，子宫内避孕装置。 寡克隆：淋巴组织瘤样病变、病毒感染、自身免疫性疾病。 单克隆：IgG 骨髓瘤、MGUS，淋巴瘤。 ▼婴儿期、妊娠（中期）、低丙球蛋白血症、无丙种球蛋白血症、肾病综合症、无 IgG 骨髓瘤。 电泳
125
免疫球蛋白 IgA
临床意义：IgA 通过可选路径来固定补体;多克隆免疫球蛋白在呼吸道、胃肠道包括肝的慢性炎症中会怎家。约 1/4 的患者 IgA 缺乏是因为有 IgA 抗体，在输全血或输血浆时有可能引起严重过敏。 ▲慢性肝病、肝硬化、慢性呼吸道感染、直肠癌、胃肠道疾病（克罗恩病、溃疡性结肠炎等等）、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、神经病变、 血小板减少；IgA 骨髓瘤、MGUS（单克隆的）。 ▼婴儿期，选择性 IgA 缺乏（约 1/700），巨球蛋白血症或者无 IgA 骨髓瘤。
电泳
126
免疫球蛋白 IgM
临床意义：IgM 通过经典路径来固定补体，是感染的主要反应。病毒 IgM——特别是在新生儿，是由于先天性感染（不能通过胎盘）。 ▲病毒感染、寄生虫病、慢性肝病、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎； 单克隆：原发性巨球蛋白血症。恶性淋巴瘤、白血病、冷球蛋白、冷凝集素病。 ▼婴儿期、免疫机能丧失（Wiskott-Aldrich 综合症）、无 IgM 骨髓瘤。
电泳
127
免疫球蛋白多克隆结构 参考值的范围
电泳
128
正常结构多克隆免疫球蛋白
电泳
129
19 号样本：免疫球蛋白结构完全正常，IgG1 亚型在阴极减少。 20 号样本：IgA 的结构轻微增加而 IgG4 亚型正常结构，IgG1 亚型在阴极减少。 21 号样本：免疫球蛋白多克隆结构正常。
电泳
130
免疫球蛋白多克隆结构 限于或者小于参考范围 低丙球蛋白血症
电泳
131
在限定参考范围下的免疫球蛋白多克隆结构
电泳
132
左边的样本（3 号）在低值参考区域有多克隆结构的免疫球蛋白。 中间的样本（4 号）在平均参考区域有多克隆结构的免疫球蛋白。 右边的样本（25 号）在高值参考区域有多克隆结构的免疫球蛋白，但其 I 和 III 型免疫球蛋白减少。
电泳
133
免疫球蛋白多克隆结构 低丙球蛋白血症
左边的样本在参考范围下有多克隆免疫球蛋白。 右边的样本表现出是一个中度减少的低丙球蛋白血症。
电泳
134
免疫球蛋白多克隆结构 低丙球蛋白血症
左边的样本是低丙球蛋白血症的样本。 右边的样本在电泳中变现为三种免疫球蛋白缺陷。
电泳
135
免疫球蛋白多克隆结构 更大的参考范围 低丙球蛋白血症
电泳
136
免疫球蛋白多克隆结构 高于参考范围 高丙球蛋白血症
左边的样本多克隆免疫球蛋白正常均值范围内，但是 IgG I 和 III 亚型减少。 右边的样本免疫球蛋白多克隆结构轻度增加。
电泳
137
免疫球蛋白多克隆结构 高于参考范围 高丙球蛋白血症
样本的免疫球蛋白多克隆结构的 IgG II 亚型、III 亚型和 IgA 增加。
电泳
138
免疫球蛋白多克隆结构 高于参考范围 高丙球蛋白血症
左边的样本有多克隆免疫球蛋白，IgA 中度增高，其他正常。 右边的样本有多克隆免疫球蛋白，且形成β —γ 桥。 注释：样本显示，IgG 类的 III 亚型明显增加，其他的 IgG 亚型和 IgM 也增加。
电泳
139
免疫球蛋白多克隆结构 高于参考范围 高丙球蛋白血症
左边样本的多克隆免疫球蛋白正常。 右边样本的多克隆免疫球蛋白增加但其 IgA、IgM、IgGII 亚型和 IgG IV 亚型减少，IgG 异质性降低。
电泳
140
免疫球蛋白多克隆结构 和单克隆组分的表达
电泳
141
多克隆结构 重要性
多克隆结构和病人的单克隆组分的重要性。 C.A.P（美国病理学家学会）“根据既往研究，实验室如果在血清中检测出不相关的免疫球蛋白（？）低于正常范围，应引起重视。”
Procedures for the evaluation of monoclonal components David F. Keren, MD Arch. Pathol. Lab. Med.- Vol 123, February 1999 Page 132 Quality assurance for evaluation of a monoclonal component。
电泳
142
多克隆结构 重要性
左边的样本是正常的多克隆免疫球蛋白的图谱。 右边的样本在γ 区中间有均匀的电泳区带（可能是单克隆组分）。
电泳
143
多克隆结构 重要性
左边的样本（10 号）缺乏免疫球蛋白。 中间的样本（11 号）在靠近阴极端的γ 区有均匀的深染电泳区带（可能是单克隆组分）， 且表现出免疫球蛋白多克隆结构减少。 右边的样本（12 号）是在正常的免疫球蛋白多克隆结构。
电泳
144
多克隆结构 重要性
左边的样本是在正常的免疫球蛋白结构。 右边的样本在靠近阴极端的γ 区有均匀的深染电泳区带（可能是单克隆组分），而其他三种免疫球蛋白明显减少。
电泳
145
多克隆结构 重要性
左边的样本有正常的免疫球蛋白多克隆结构的，但是 IgA 减少。 右边的样本有两条均匀的电泳区带（可能是单克隆组分），其中一条是 C3，另外一条在 C3 下方。 免疫球蛋白多克隆结构，明显低于其他三种免疫球蛋白的正常范围（IgA 含量最少）。
电泳
146
多克隆结构 重要性
左边的样本有正常的免疫球蛋白多克隆结构。 右边的样本有三条均匀的电泳区带（可能是单克隆组分），其中一条（小的）在补体下方区域，另外一条（小的）在γ 区中间，第三条，也 是小的，在γ 区阴极区。多结构的免疫球蛋白，明显低于其他三种免疫球蛋白的正常范围。
电泳
147
多克隆结构 重要性
右边的样本有正常的免疫球蛋白多克隆结构，但是免疫球蛋白多克隆异质性减少。 左边的样本在 C3 周围、γ 的阴极边缘有几条均匀区带（可能是单克隆组分）；免疫球蛋白的多克隆结构中度降低。
电泳
148
多克隆结构 重要性
左边的样本有正常的免疫球蛋白多克隆结构。 左边的样本有两条均匀的去带（可能是单克隆组分），其中一条在γ 区中间，另外一条在阴极区域边缘；免疫球蛋白的多克隆结构，明显低 于其他三类免疫球蛋白的。
电泳
149
多克隆结构 重要性
左边的样本有正常的免疫球蛋白多克隆结构。 右边的样本在γ 阴极位置有一条均匀的区带（可能是单克隆组分）；可以见到部分的 IgG 的多克隆结构（参见阴极区域）均匀区带，IgM 和 IgA 降低。
电泳
150
溶菌酶
溶菌酶是一种低分子量的蛋白质（15000KD）。 它能水解细菌壁上的黏多糖，溶菌酶是机体天然防御机制的重要成分。事实上，在所有的分泌液中它都存在（眼泪、唾液、支气管粘液„„）。 它主要来源于中性粒细胞。血液和细胞之间，在早期中性粒细胞和成熟的中性粒细胞中，溶菌酶含量特别丰富，在早幼粒细胞、中幼粒细胞、 单核细胞和组织巨噬细胞中也很多。 当肾小管受到损伤的时候，即使血液中的溶菌酶是正常的，也能够在尿里面检测到有溶菌酶；当泌尿系统的管道被堵塞时，血液中的溶菌酶 大量增加，同时在原尿中能检测到高浓度的溶菌酶。 在肾病和血液病中，溶菌酶在血浆和尿中的量是需要关注的。
电泳
151
溶菌酶
左边的样本免疫球蛋白的量偏低。 右边的样本在靠经阴极的位置有一条均匀的电泳区带是溶菌酶（可用免疫固定的方法加以验证）。
电泳
152
单克隆组分 在电泳的位置
单克隆组分的定义：是由 B 淋巴细胞产生的。
电泳
153
单克隆组分 在电泳的位置
在抗原刺激后，淋巴细胞会很快增殖；而这个过程是伴随着形状的改变，含有高尔基体和内质网的成熟血浆淋巴细胞会产生，在随后的细胞 分裂中，当 H 区域从 D 到 M 到 G 再到 A 转移时，V 区得以表达。
电泳
154
单克隆组分 在电泳中出现的百分比
研究 1654 例有单克隆组分的样本。在γ 区域，能看到 88%的单克隆组分。
电泳
155
单克隆组分 α 1 区域
左边的样本和右边的样本相比，在α 1 区域有相同的蛋白。
电泳
156
单克隆组分 α 2 区域
左边的样本是正常的。 右边的样本在α 2 阳极区域有单克隆组分的 IgAκ 区带。
电泳
157
单克隆组分 α 2 区域
左边的是正常样本。 右边的样本在α 2 和转铁蛋白区域有单克隆组分的 IgAλ 区带。
电泳
158
单克隆组分 α 2 区域
右边的样本显示α 2 增加，结合珠蛋白减少。 左边的样本在α 2 和转铁蛋白之间有 IgAκ 区带。
电泳
159
单克隆组分 γ 区域 α 2 和转铁蛋白区间
右边的样本正常。 左边的样本在α 2 和转铁蛋白中间有均匀的电泳区带（IgA λ ）。
电泳
160
单克隆组分 转铁蛋白
右边的样本没有异常。 左边的样本具有较弱的转铁蛋白区域，且在转铁蛋白和 C3 区域存在清晰地游离的单克隆λ 链。白蛋白和 C3 减少，低丙球蛋白血症。
电泳
161
单克隆组分 转铁蛋白
右边为一个正常样本，但转铁蛋白略微增加。 左边的样本在转铁蛋白阳极区域有一个模糊的区带，该区带是单克隆轻链（λ ）。
电泳
162
单克隆组分 转铁蛋白
左边的样本存在特定蛋白组。 右边的样本转铁蛋白增加，着色变深，是由于阴极位置存在有单克隆 IgA κ 。
电泳
163
单克隆组分 转铁蛋白-C3 区间（γ ）
左边的样本正常。 右边的样本显示了一个拓宽了的转铁蛋白和一个模糊的游离的单克隆κ 区带。
电泳
164
单克隆组分 转铁蛋白-C3 区间（γ ）
左边的样本正常。 右边的样本在阳极位置有均匀的电泳区带（IgA K），C3 的位置由于存在一个单克隆球状组分阻碍，使其位置后移。
电泳
165
单克隆组分 C3 区域中的转铁蛋白（γ ）
左边的样本正常。 右边的样本在阳极位置有一条均匀的电泳区带(IgA λ)，还有在单克隆组分的阳极端，C3 区带和 B2 脂蛋白紧靠在一起。
电泳
166
单克隆组分 C3 区域
左边的样本正常。 右边的样本在靠近阳极位置有一条均匀的电泳区带（IgA λ)，且 C3 区带模糊不清。
电泳
167
单克隆组分 C3 区域
左边的样本正常。 右边的样本在 C3 区域出现单克隆成分（IgA κ ）区带。
电泳
168
单克隆组分 C3 区域
右边的样本正常。 左边的样本显示 C3 减少，并且由于游离轻链κ 的存在而显得阳极端宽且模糊不清。
电泳
169
单克隆组分 γ 区域
左边的样本正常。 右边的样本在靠近 C3 阴极位置存在均匀的电泳区带（单克隆组分 IgG κ ）。
电泳
170
单克隆组分 在 C3 阴极γ 区
左边的样本正常。 右边的样本在靠近 C3 阴极位置存在均匀的电泳区带（IgG κ ）。
电泳
171
单克隆组分 在 C3 阴极γ 区
左边的样本正常。 右边的样本有一条均匀的电泳区带，且该区带向 C3 的阴极轻微移动(IgG λ)。
电泳
172
单克隆组分 在γ 区中间
右边的样本正常。 左边的样本白蛋白减少，伴随着在γ 区中间的存在两条比较典型的宽且均匀的单克隆组分 IgG K 区带。
电泳
173
单克隆组分 γ 区中间
左边的样本免疫球蛋白减少。 右边的样本是低丙球蛋白血症的样本，在γ 区中间有均匀的电泳区带。
电泳
174
单克隆组分 在γ 区中间
左边的样本正常。 右边的样本是低丙球蛋白血症样本，在γ 区中间有均匀的电泳区带。
电泳
175
单克隆组分 在γ 区中间
左边的样本正常。 右边的样本在γ 区中间有均匀的条带，靠近阴极区出现模糊的现象是由于（IgM κ ）聚集的结果。
电泳
176
单克隆组分 在γ 区中间
左边的样本有免疫球蛋白中度增高。 右边的样本在在γ 区中间有均匀的电泳区带，注意：1、在相对于阴极端的阳极边，该区带的浓度更高并呈锯齿状；2、由于 IgM 的多聚集， 在电泳迁移的过程中会出现一条异常的沉积带。
电泳
177
单克隆组分 在γ 区中间
左边的样本正常。 右边的样本是低丙球蛋白血症样本，在γ 中央阳极区有均匀淡染的电泳带。
电泳
178
单克隆组分 在γ 区中间
左边的样本正常。 右边的样本是低丙球蛋白血症样本，在γ 中央阴极区有弱的均匀的电泳区带。
电泳
179
单克隆组分 在γ 阴极区
左边的样本正常。 右边的样本在γ 阴极区有弱的均匀的电泳区带。
电泳
180
单克隆组分 在γ 阴极区
左边的样本正常。 右边的样本在多克隆区域有分散的电泳区带，特别在γ 阴极区 IgG 增加。
电泳
181
单克隆组分 在γ 阴极区
左边的样本正常。 右边的样本在γ 阴极区有弱均匀的电泳区带，特别在多克隆区域 IgG 增加。
电泳
182
单克隆组分 在γ 阴极区
左边的样本多克隆中度增长。 右边的样本是低丙球蛋白血症样本，在γ 阴极区有均匀的电泳区带。
电泳
183
单克隆组分 在γ 阴极区
左边的样本正常。 右边的样本在γ 阴极区后端有均匀的电泳区带，且有 IgGⅠ减少和异质性 IgG Ⅱ、Ⅲ的减少。
电泳
184
单克隆组分 在γ 阴极区后端
左边的样本正常。 右边的是低丙球蛋白血症的样本，在γ 阴极区后端有均匀的电泳区带。
电泳
185
单克隆组分 在γ 阴极区后端
左边的样本免疫球蛋白不均匀的中度增高。 右边的样本在γ 阴极区后端有均匀的电泳区带，是严重的低丙球蛋白血症，尤其是缺乏 IgG。
电泳
186
单克隆组分 在γ 阴极区后端
右边的样本正常。 右边的样本在γ 阴极区更后端有均匀的电泳区带， 是严重的低丙球蛋白血症。
电泳
187
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在靠近阳极区中间和γ 阴极区有 3 条均匀的电泳区带。
电泳
188
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在与免疫球蛋白有关的γ 区，有 2 条均匀的电泳区带。
电泳
189
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在γ 区中间有 3 条均匀的区带，并伴随有多克隆组分的减少。
电泳
190
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在γ 区有 2 条很后滞的均匀的区带，并伴随有多克隆组分的减少。
电泳
191
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在γ 区有 2 条很后滞的均匀的区带，并伴随有多克隆组分的减少。
电泳
192
多种单克隆组分
左边的样本是低球蛋白血症。 右边的样本有 2 条均匀的区带，其中一条在 C3 上面，另外一条靠近阴极着色很浅。 在低白蛋白血症中缺乏多克隆免疫球蛋白。
电泳
193
多种单克隆组分
左边的样本是存在有 B 脂蛋白的正常标本。 右边的样本在γ 阴极区有 2 条均匀的区带，同时伴有多克隆组分的中度减少。 注意观察 B 脂蛋白和低白蛋白血症的存在。
电泳
194
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本在γ 区的中间和靠近阴极有 2 条均匀的区带。 多克隆免疫球蛋白减少。 需要注意低白蛋白血症和 a1 抗胰蛋白酶的存在。
电泳
195
多种单克隆组分
左边的正常样本多克隆免疫球蛋白中度减少。 右边的样本在γ 区的阳极端和阴极端有 2 条均匀的区带。 提示有轻度的低蛋白血症的存在。
电泳
196
多种单克隆组分
右边的是低丙球蛋白血症样本。 左边的样本有 2 条均匀的区带，其中一条是位于 C3 位置（IgA κ ），另外一条位于多克隆的 IgG 和 C3 阴极端（IgA λ ）区域。
电泳
197
多种单克隆组分
左边的正常样本多克隆免疫球蛋白轻度减少。 右边的样本有 2 条均匀的区带，其中一条在γ 区中央着色较浅，另外一条在很滞后的阴极端。 存在免疫球蛋白减少和低蛋白血症。
电泳
198
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本有 3 条均匀的区带，一条在转铁蛋白位置（注意转铁蛋白着色深浅和形态），另外两条在γ 区的中央和靠近阴极区。
电泳
199
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本有 3 条均匀的区带，非常弱的一条在γ 区中间，另外两条在γ 阴极端。 多克隆免疫球蛋白有所减少。
电泳
200
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本有 4 条均匀的区带，一条在γ 区中央朝向 C3，另外 3 条在γ 区中央按顺序排列朝向阴极区。
电泳
201
多种单克隆组分
左边的样本正常。 右边的样本，多克隆免疫球蛋白减少，有 4 条均匀的区带，一条在 C3 下面靠近阳极断，另外 3 条从 r 阳极区向阴极去排列。
电泳
202
某些血清蛋白的电泳特征 图形
电泳
203
特征图形 一些血清蛋白图像
存在 3 种结合珠蛋白
电泳
双白蛋白血症
204
同分异构的α 1 抗胰蛋白酶
特征图形 一些血清蛋白图像
肾病综合症
电泳
高转铁蛋白血症
205
在β 区域的单克隆区带
特征图形 一些血清蛋白图像
无白蛋白血症
电泳
溶血样本
206
寡克隆样本
特征图形 一些血清蛋白图像
高丙球蛋白血症
电泳
低丙球蛋白血症中的单克隆组分
207
多克隆免疫球蛋白中的单克隆成分中度增加
特征图形 一些血清蛋白图像
低丙球蛋白血症
电泳
双克隆样本
208
α 1 抗胰蛋白酶缺乏
特征图形 一些血清蛋白图像
β -γ 桥
电泳
急性炎症
209
慢性炎症
某些血清蛋白的电泳图谱有形似单 克隆组分的异常条带
电泳
210
INTER α 1 白蛋白
INTER α 1 白蛋白
α 1 异性抗胰蛋白酶
甲胎蛋白
左边的样本 AAT 轻度增加。 1）AAT 不是异性的，因为这两个条 带的大小和形态是不同的。 2）这有可能是一个单克隆组分免疫 固定的检测鉴定了这条区带是肝癌 里的甲胎蛋白。 甲胎蛋白：由于甲胎蛋白含量较少， 在电泳中很少发现。 右边的样本在白蛋白和 AAT 之间有均匀的条带。
电泳
211
INTER α 1-α 2
INTER α 1-α 2
α 1 酸性糖蛋白
特定蛋白组
特定蛋白组的球蛋白是一种系统蛋白（肌动蛋白清除系统），Gc 蛋白有能防止由聚合形式的肌动蛋白诱导形成的弥散性血管内 凝血，因为它能绑定循环中细胞肌动蛋白释放的坏死细胞【31】。
电泳
212
电泳
INTERα 2 转铁蛋白
INTERα 2 转铁蛋白
纤维结合蛋白
体外活化 C3
213
电泳
INTER 转铁蛋白-C3
INTER 转铁蛋白-C3
C4
β 脂蛋白（APO B）
214
INTERC3-γ C1 q 抑制剂
电泳
215
INTERC3-γ 纤维蛋白原
INTERC3-γ β 2 微球蛋白
电泳
216
INTERC3-γ C 反应蛋白
γ 后区 溶解酵素
电泳
217
冷球蛋白血症免疫固定 图集
电泳
218
冷球蛋白血症
定义：是一组具有冷沉淀特性，并能在 37°恢复溶解的免疫球蛋白。
Lerner A.B. and others 1947 冷球蛋白血症的种类：Brouet Ⅰ、Brouet Ⅱ、Brouet Ⅲ、Ⅱ/Ⅲ混合型和异基因 Musset 型（Musset microheterogens）。 冷沉淀纤维蛋白原：类似于存在有冷球蛋白血症的这种状况。 如果怀疑出现上述情况，必须同时做血清和血浆的检查。如果两个测试都是阳性的，就是冷球蛋白血症，如果仅仅是血浆样本阳性表示是冷沉淀纤 维蛋白原
电泳
【21】【23】
。
219
根据 Brouet 分类
Ⅰ型：单克隆免疫球蛋白 Ⅱ型 a 和 b ：单克隆免疫球蛋白和多克隆组分 Ⅱ型 a=在多克隆免疫球蛋白中具有类风湿因子活性的单克隆免疫球蛋白 Ⅱ型 b=在多克隆免疫球蛋白中具有类风湿因子活性的寡克隆免疫球蛋白 Ⅲ型：多克隆免疫球蛋白
Ⅱ/Ⅲ混合型冷球蛋白血症 大量的研究表明，在丙肝病毒慢性感染的过程中，会出行混合型的冷球蛋白血症，这种混合型冷球蛋白血症出现的变异很大（从 20%到 60%）。 在意大利，西班牙和法国，也有可能在其他地中海国家，冷球蛋白血症综合症的患者率是高的（有丙肝病毒感染的病例从 30%到 50%）。在 Anglo-Saxon 国家（英国，美国）这个发生率是非常低的（约为 2%）。
电泳
220
根据 Musset 分类
微异基因 a) 不完整的单克隆免疫球蛋白 b) 完整的单克隆免疫球蛋白和游离轻链 c) 游离轻链 d) a+b+c
电泳
221
图集 冷球蛋白免疫固定电泳
冷球蛋白免疫固定电泳
Ⅱ型冷球蛋白，根据 Brouet IgM FR 和多克隆 IgG
Ⅰ型冷球蛋白，根据 Brouet IgGκ 并缺乏多克隆
电泳
图集
222
图集
图集
冷球蛋白免疫固定电泳
冷球蛋白免疫固定电泳
冷球蛋白微异基因
Ⅲ型冷球蛋白，根据 Brouet 多克隆免疫球蛋白。
根据 Musset IgGκ 和多克隆组分+IgMκ +游离κ +多克隆λ
电泳
223
图集 冷球蛋白免疫固定电泳
左边的冷球蛋白血症阴性（血清） 右边的冷沉淀纤维蛋白原阳性（血浆）
电泳
224
图集 冷球蛋白免疫固定电泳
左边冷球蛋白血症是 Brouet Ⅰ型（血清） 右边冷球蛋白血症是 Brouet Ⅰ型（血浆）
电泳
225
免疫固定【7】【15】【25】【50】【51】【52】
电泳
226
图集 阴性血清免疫固定电泳
有单克隆的免疫固定电泳阴性的图形
电泳
227
图集 阴性血清免疫固定电泳
有单克隆的免疫固定电泳阴性图形 左边的免疫固定显示了 IgG 及其亚型 I 多克隆异质性降低。IgA 和 IgM 正常。 右边的免疫固定显示 IgG 多克隆中度减少（任然在正常范围内），并在 IgA 旁边通过。 电泳
228
图集 血清免疫固定：IgG 不同的血清样本
存在一条单克隆 IgG 区带和大λ 区带。多克隆
存在一条单克隆 IgG 去带和中度大小κ 条带。
存在一条单克隆 IgG 区带和中度大小的λ 区
降低。
缺乏多克隆。
带。缺乏多克隆。
电泳
229
图集 血清免疫固定：IgG
存在 2 条单克隆 IgG 和κ 。 阴极端浓度较低，在阳极端转铁蛋白位置有一条浓度较高的条带。 电泳
230
图集 血清免疫固定：IgG 不同的血清样本
存在 2 条单克隆 IgG 区带和κ 区带。有多克隆
存在 2 条单克隆 IgG 区带和κ 条带。
免疫球蛋白存在。
电泳
存在 2 条单克隆 IgG 区带和κ 区带。有低浓度 的多克隆 IgG。
231
图集 血清免疫固定：IgG 不同的血清样本
存在一条很窄的单克隆 IgG 区带和λ 区带。
存在单克隆 IgG 区带和λ 区带。
免疫球蛋白明显减少。
存在高浓度多克隆κ 区带，这可能会误判为 有轻链。
电泳
存在 2 条单克隆 IgG 区带和κ 区带。多克隆
232
图集 血清免疫固定：IgG
存在 2 条单克隆 IgG 区带和λ 区带； 在阴极端浓度低，而在阳极端浓度更低。 图谱提示，IgA 多克隆异质性明显减少，注意和单克隆 IgA 的图形加以区别。
电泳
233
图集
图集
血清免疫固定：IgA
存在 3 条单克隆 IgA 条带和λ 条带，单克隆λ 条带的存在需要确认是否
该样本有一条单克隆 IgA 条带和λ 条带。注意：不同类型抗血清反应性 （亲和力）的差异。
是游离的轻链（本周氏蛋白阳性）。
电泳
血清免疫固定：IgA
234
图集 血清免疫固定：IgA
该样本在γ —C3 位置有 2 条 IgG 区带和λ 区带。
电泳
图集 血清免疫固定：IgM
该样本在γ 区域中间位置有 2 条 IgM 条带，并分别对应κ 和λ 。
235
图集 血清免疫固定：IgM
该样本有一条 IgM 条带和κ 条带。
电泳
236
图集 血清免疫固定：IgM
左边的样本有 IgM 条带和κ 条带。 右边的样本有 2 条 IgM 条带和 2 条κ 条带。
电泳
237
图集 血清免疫固定：IgM
该样本存在单克隆 IgM 条带和κ 条带。
电泳
图集 血清免疫固定：IgD
样本有一条单克隆 IgD 条带和λ 条带。
238
图集 血清免疫固定：IgE
该样本存在单克隆 IgE 条带和λ 条带。
电泳
239
图集 血清免疫固定：单克隆游离轻链κ
样本在 C3 位置存在单克隆κ 条带。 使用血清中的游离κ 可以是否是有本周氏游离κ 的存在。
电泳
240
图集 血清免疫固定：单克隆游离轻链κ
样本中存在有κ 单抗区带（本周氏阳性），它是由抗游离κ 链的抗血清鉴别的。
电泳
241
图集 血清免疫固定：单克隆游离轻链λ
样本中存在有λ 单抗区带（本周氏阳性），它是由抗游离λ 链的抗血清鉴别的。 样本中存在有 2 条λ 单抗区带（本周氏阳性），它是由抗游离λ 链的抗血清鉴别的。
电泳
242
本周氏蛋白 在血清和尿中存在
一旦在血清和尿中确认存在本周氏蛋白（本案例是κ 型），不仅需要报告它的位置，也需要说明使用的抗血清的量。
电泳
243
本周氏蛋白
本周氏蛋白
在血清和尿中存在
在血清和尿中存在
该样本存在一条单克隆 IgA 条带和λ 条带。需要进一步来确认本周氏κ
该样本存在一条单克隆 IgA 和λ 区带。需要进一步来确认本周氏λ 链是
链是否存在。
否存在。
电泳
244
本周氏蛋白 在血清和尿中存在
在尿样本的免疫固定电泳中显示本周氏λ 型存在。
电泳
245
本周氏蛋白 在血清和尿中存在
该样本显示有 IgAλ 型的存在（几乎和所用的抗体等量），需要鉴别κ 型和游离λ （本周氏）。
电泳
246
本周氏蛋白 在血清和尿中存在
该样本显示有一条单克隆 IgG 条带和κ 条带、游离κ 条带（？)；尿样本免疫固定电泳中显示存在 IgGκ 和一条单克隆双κ （本周氏）。报告时必须 考虑到单克隆抗体量的消耗。
电泳
247
本周氏蛋白 在血清和尿中存在
左边的免疫固定电泳显示有一条单克隆 IgG 条带和κ 条带；在右边的尿蛋白本周氏电泳图谱中，在免疫固定电泳的中间，发现在尿液中有一条 IgG κ 。 这这个案例中，如果有游离的单克隆轻链，在与整个免疫球蛋白共同电泳这种特定的情况下，最好要用抗游离抗血清来验证。
电泳
248
图集 血清免疫固定：共存类别的差异
左边的样本有单克隆 IgGλ ，IgAλ 和 2 条单克隆 IgMκ 存在。 右边的样本有单克隆 IgGλ ，单克隆 IgMλ 和最后在免疫固定中确认有游离λ 的存在（本周氏）。
电泳
249
图集 血清免疫固定：共存类别的差异
左边的样本是肝移植病人。 在α 1 抗胰蛋白酶的位置有两条 IgGλ 存在，在 C3 位置有一条淡染的 IgGλ 条带，一条 IgG 的重链和两条单克隆游离κ 轻链。 右边的样本有两条单克隆 IgG 条带和λ 条带，一条单克隆 IgM 和λ 条带。 在 C3 和转铁蛋白之间存在в 脂蛋白。
电泳
250
图集 血清免疫固定：共存类别的差异
血清免疫固定：共存类别的差异
该样本有双单克隆条带，靠近阴极端是 IgGκ ，靠近阳极端是 IgAκ 。
该样本有单克隆 IgGκ 条带和单克隆 IgAλ 条带。
电泳
图集
251
图集
图集
血清免疫固定：共存类别的差异
血清免疫固定：共存类别的差异
该样本有单克隆 IgGλ 和单克隆游离λ 轻链（本周氏阳性），是由抗自
该样本有单克隆 IgAκ 和单克隆游离κ 轻链（本周氏阳性），是由抗自
由轻链的抗血清来确定的。
由轻链的抗血清来确定的。
电泳
252
图集 血清免疫固定：共存类别的差异
该样本有双单克隆 IgG 和 IgM，且这两种单克隆都在κ 轻链出显示较高 的浓度。
电泳
253
图集 血清免疫固定：共存类别的差异
该样本有两条单克隆 IgGκ 和 IgMκ 。
图集
图集
血清免疫固定：案例分析
该样本存在 IgDλ 。
样本为肝移植病人。 在α 1 抗胰蛋白酶的位置有 2 条 IgGλ ，在 C3 位置有一条淡染的 IgGλ ， IgG 重链和 2 条单克隆游离λ 轻链。
电泳
血清免疫固定：案例分析
254
图集 血清免疫固定：案例分析
有 2 条单克隆游离λ 区带，IgG、IgA、IgM 与
使用抗结合型抗血清来显示有本周氏存在。
存在。
抗血清无反应。
电泳
该样本使用抗 D、E 抗血清测定出有 IgDλ 的
255
图集 血清免疫固定：案例分析
该样本存在 IgEλ 。
电泳
图集 血清免疫固定：案例分析
该样本在α 1 抗胰蛋白酶位置有单克隆游离λ 。
256
图集 血清免疫固定：案例分析
血清免疫固定：案例分析
该样本由免疫固定确定有 IgG 重链病。
该样本由免疫固定确定是 IgA 重链病。
电泳
图集
257
图集
图集
血清免疫固定：案例分析
该样本由免疫固定确认为 IgM 重链病。
血清免疫固定：案例分析
这个样品是带有冷球蛋白的：确定是否有冷球蛋白需要将标本加热到 37°，并在电泳过程中保持不冷凝。
电泳
258
图集 血清免疫固定：案例分析
在这种情况下，不需要加还原剂。 在某些文献中也有类似的情况：使用还原剂，如в 巯基乙醇和二硫苏糖醇等将样本进行前处理后再进 行免疫固定，可以发现有 IgMκ 。但是这种操作方式是错误的。因为只能说沉淀线中包含了 IgM。正 确的方法是加热以证明冷球蛋白的存在。 ——这个诊断与只证明 IgM 的存在是不同的。
电泳
259
图集 血清免疫固定：案例分析
将前面的标本加热处理后，发现了冷球蛋白的存在。如果我们错误的信任了通行的解决的方法，我们将会诊断它存在 IgMκ 单克隆免疫球蛋白。
电泳
260
图集 血清免疫固定：案例分析
含冷球蛋白血症样本，在免疫固定时，预稀释的样本在沉积线位置会有冷沉淀。 在这个样本中，可以理解是 IgM 聚合物（三聚体、五聚体和六聚体）。 但是真正的解决方案应该是用加热的方式先找出是否存在冷球蛋白，如果没有冷球蛋白才考虑是 IgM 聚合物。
电泳
261
图集 特定情况下血清免疫固定：聚合物
左边的样本有 2 个 IgMκ 条带，不知道是同源的单克隆还是有不同起源的寡克隆。用二硫苏糖醇预处理标本，可以得到结果。 处理后的右边的免疫固定结果可以看到只有一个条带，则表明两条单克隆组分是同源的。
电泳
262
图集 特定情况下血清免疫固定：解聚
左边的样本有 2 个 IgGκ 条带，不知道是同源的单克隆还是有不同起源的寡克隆。用二硫苏糖醇预处理标本，可以得到结果。 处理后的右边的免疫固定结果可以看到只有一个条带，则表明两条单克隆组分是同源的。
电泳
263
图集 特定情况下血清免疫固定：解聚
由于有相同的电泳迁移率，会有超过一个不同的单克隆抗体泳动到相同的位置（左边的膜片）。样本用二硫苏糖醇预处理后再做免疫固定（右边的膜 片）。它可以识别出有三种单克隆抗体：IgGκ ，IgMκ 和一条单克隆游离λ 。
电泳
264
图集 特定情况下血清免疫固定：反应时间
λ 位置显示有条带，而游离的λ 链位置没有显示条带，另外一方面，IgD 和 IgE 位置没有条带可以排除 IgD 和 IgE 的存在。 问题要归结于单克隆游离抗λ 的最少反应量（亲和性、活性和总量）；为了证明它的存在，我们将抗血清的孵育时间延长为 20 分钟，获得了预期的 结果（最右边的图）：游离λ 为阳性。
电泳
265
图集 特定情况下血清免疫固定：低丙球蛋白血症
图集 特定情况下血清免疫固定：低丙球蛋白血症时间
低丙球蛋白血症的样本做免疫固定经常出现不显示单克隆的存在，因为
有时候，低丙球蛋白血症的样本在免疫固定中显示非常浅的单克隆如上
它们没有临床症状。
图所示。单克隆 IgGκ 。
这种情况建议少稀释样本并延长一半的抗血清孵育时间。
这种情况建议少稀释样本并延长一半的抗血清孵育时间。
电泳
266
图集 特定情况下血清免疫固定：低丙球蛋白血症和非分泌型骨髓瘤
最后一种情况，在低丙球蛋白血症或非分泌型骨髓瘤中，存在唯一的异常蛋白。 在这种情况下，由于不存在单克隆组分，因此通过对в 2 微球蛋白量的检测来弥补。 由于单克隆不是由浆细胞分泌的，且在生物体液中检测不到单克隆组分，只有通过研究才能确定淋巴浆细胞的存在。
电泳
267
图集 特定情况下血清免疫固定：HIV 阳性样本中的寡克隆
艾滋病毒对淋巴细胞 T4（CD4+）有倾向性，会侵入和修改 T4 淋巴细胞， 而 T4 的反应对免疫防御系统的调节是非常重要的，其减少会引起囊依 赖性淋巴细胞的异常调节。这种患者经常会有病毒性感染（EBV，CMV） 导致淋巴增生综合征。 这类样本中经常会发现寡克隆蛋白。 电泳
268
图集 特定情况下血清免疫固定：α 胎蛋白
评价 在样本中的有单克隆组分的多克隆免疫蛋白结构
电泳
269
预后评估 含单克隆组分的标本中的多克隆免疫球蛋白结构
“检测单克隆蛋白需要使用凝胶高分辨电泳和免疫固定电泳„„” “如果在血清中除了γ 球蛋白以外的其他成分下降到低于实验室正常范围，那需要注意”
电泳
270
样本预稀释
携带有单克隆免疫球蛋白的病人在随访中，必须提供免疫固定的比较结果以评估球蛋白中的多克隆结构的变化。因此，免疫固定前，样本需要预稀 释。 单克隆浓度不同的时候，对样本要进行不同比例的稀释。换句话说，尽量避免使用过量的抗原，如下图所示。
电泳
271
样本预稀释 单克隆浓度和着色之间的关系
IgG 单克隆免疫球蛋白，在 35g/L 以下呈线性。
电泳
IgA 单克隆免疫球蛋白，在 27g/L 以下呈线性。
272
IgM 单克隆免疫球蛋白，在 30g/L 以下呈线性。
样本预稀释 单克隆浓度和着色之间的关系
在 Interlab 系统中，加抗血清的宽度比实际电泳的宽度 窄，如图所示。
抗血清的扩散速度和免疫球蛋白的浓度相关。
电泳
273
样本预稀释 单克隆浓度和着色之间的关系
抗血清在单克隆峰上的扩散图。
上图是单克隆组分的密度表示图。
电泳
274
样本预稀释 单克隆浓度和着色之间的关系
当抗血清的扩散达到平衡时，抗血清和蛋白质的聚合物会沉淀形成一个弧形。 如果单克隆组分的左、右边缘达到平衡，将会出现一个经典的沙漏状图形。
因为单克隆着色和浓度之间有关系（见三维图），所以在同一个病人进行免疫固定试验时应该避免出现“抗原过剩”的现 象。 如果单克隆超过了线性的最高浓度，如图所示沉淀会出现在单克隆的阴阳两极。
电泳
275
预后评估 含单克隆组分的标本中的多克隆免疫球蛋白结构
“目测没有单克隆组分的多克隆结构” 正常的多克隆免疫结构
电泳
276
预后评估 含单克隆组分的标本中的多克隆免疫球蛋白结构
电泳
预后评估 含单克隆组分的标本中的多克隆免疫球蛋白结构
“目测没有单克隆组分的多克隆结构”
“目测没有单克隆组分的多克隆结构”
有三种免疫球蛋白的多克隆免疫结构
有三类免疫球蛋白的多克隆免疫结构
高球蛋白血症的样本
低丙球蛋白血症的样本。
277
电泳
预后评估
预后评估
有单克隆组分的多克隆免疫组分
有单克隆组分的多克隆免疫组分
“目测没有单克隆组分的多克隆结构”
“目测没有单克隆组分的多克隆结构”
有三类免疫球蛋白的多克隆免疫结构
有三类免疫球蛋白的多克隆免疫结构
IgG 有较低浓度多克隆
IgG 多克隆在正常范围内异质性减少
IgA 多克隆异常
IgA 多克隆减少
IgM 有正常的多克隆
IgM 多克隆正常 278
评价 有单克隆组分的多克隆免疫组分
“目测没有单克隆组分的多克隆结构” 有三类免疫球蛋白的多克隆免疫结构 IgG 多克隆低于正常范围 IgA 多克隆减少 IgM 多克隆减少
电泳
279
评价 有单克隆组分的多克隆免疫组分
跟踪：6 个月后检测相同的样本。 单克隆组分无差异指出没有单克隆组分浓度没有变化，没有额外的单克隆组分，但是多克隆 IgG 的减少需要注意。需要在报告中强制指出。
电泳
280
蛋白尿 目测检测及电泳符号
在琼脂糖上使用用酸紫染液的蛋白尿条带 由静电荷分离的单一血浆蛋白的位置
电泳
281
蛋白尿
1）来自于血浆的蛋白尿 a) 选择性&非选择性的肾小球 b) 完整&不完整的肾小管 c) 肾前性 2）来自于肾组织的蛋白尿 a) 肾源性 3）肾后性蛋白尿 我们根据尿蛋白的来源不同把它进行不同分类（进一步信息请见附件 2）
电泳
282
尿蛋白电泳
非浓缩尿样本： 样本 1：初始阶段的非选择性肾小球性蛋白尿 样本 3：非选择性和不完整的混合型蛋白尿 样本 8：存在尿类粘蛋白的肾源性蛋白尿 样本 11 和 12：生理性蛋白尿
电泳
283
尿蛋白电泳
非浓缩尿样本（4 号 5 号样本浓度 4 倍）： 样本 1：非选择性肾小球型蛋白尿和有本周氏蛋白（血浆溢出性）不完整的肾小管型蛋白尿。 样本 4：非选择性肾小球蛋白尿和有本周氏蛋白（血浆溢出性）、в 2 微球蛋白和α 1 微量蛋白的完整的肾小 管型蛋白尿。 样本 6：初始阶段的非选择性肾小球型蛋白尿和有视黄醇结合蛋白存在的不完整肾小管型蛋白尿。 样本 10：有浓度为 2.34mg/L 的в 2 微球蛋白的不完整肾小管型蛋白尿（建议做尿免疫固定来确认是否有本 周是蛋白，见下一页图片）。 样本 13：作为参考的稀释血浆样本。
电泳
284
尿蛋白电泳
尿蛋白免疫固定显示存在本周氏κ 型蛋白尿。 血清样本显示这是个低丙球蛋白血症样本。这通常是免疫功能紊乱的警告。
电泳
285
尿蛋白电泳 查找本周氏蛋白的指南
（见附录 6） 电泳
286
尿蛋白电泳
非浓缩尿样本： 样本 2：选择性肾小球型蛋白尿和存在本周氏（血浆溢出性）的不完整肾小管型蛋白尿。 样本 6：非选择性肾小球型蛋白尿和存在本周氏蛋白，两条в 2 微球蛋白条带（血浆溢出性），视黄醇结合 蛋白和α 1 微量蛋白的完整肾小管型蛋白尿。 样本 11：存在本周氏蛋白（血浆溢出性）不完整的肾小管型蛋白尿。
电泳
287
尿蛋白电泳 图例
电泳
288
尿蛋白电泳 图例
电泳
289
尿蛋白电泳 图例
4 倍浓缩结果
电泳
290