New insights on the antiviral effects of chloroquine against coronavirus: what to expect for covid-1

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New insights on the antiviral effects of chloroquine against coronavirus: what to expect for COVID-19?

Christian A. Devaux a,b,c,∗ , Jean-Marc Rolain a,c , Philippe Colson a,c , Didier Raoult a,c

a Aix-Marseille Université, IRD, APHM, MEPHI, IHU–Méditerranée Infection, Marseille, France

b CNRS, Marseille, France

c IHU–Méditerranée Infection, 19–21 boulevard Jean Moulin, 13005 Marseille, France

a r t i c l e i n f o

Article history: Available online xxx

Editor: Jose Fernando Oliveira

Keywords: COVID-19 SARS-CoV-2 Coronavirus Chloroquine

a b s t r a c t

Recently, a novel coronavirus (2019-nCoV), officially known as severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), emerged in China. Despite drastic containment measures, the spread of this virus is ongoing. SARS-CoV-2 is the aetiological agent of coronavirus disease 2019 (COVID-19) characterised by pulmonary infection in humans. The efforts of international health authorities have since focused on rapid diagnosis and isolation of patients as well as the search for therapies able to counter the most severe effects of the disease. In the absence of a known efficient therapy and because of the situation of a publichealth emergency, it made sense to investigate the possible effect of chloroquine/hydroxychloroquine against SARS-CoV-2 since this molecule was previously described as a potent inhibitor of most coronaviruses, including SARS-CoV-1. Preliminary trials of chloroquine repurposing in the treatment of COVID19 in China have been encouraging, leading to several new trials. Here we discuss the possible mechanisms of chloroquine interference with the SARS-CoV-2 replication cycle.

©2020 The Author(s). Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license. (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)

1. Introduction

Chloroquine is an amine acidotropic form of quinine that was synthesised in Germany by Bayer in 1934 and emerged approximately 70 years ago as an effective substitute for natural quinine [1,2] Quinine is a compound found in the bark of Cinchona trees native to Peru and was the previous drug of choice against malaria [3] For decades, chloroquine was a front-line drug for the treatment and prophylaxis of malaria and is one of the most prescribed drugs worldwide [4]. Chloroquine and the 4-aminoquinoline drug hydroxychloroquine belong to the same molecular family. Hydroxychloroquine differs from chloroquine by the presence of a hydroxyl group at the end of the side chain: the N-ethyl substituent is βhydroxylated. This molecule is available for oral administration in the form of hydroxychloroquine sulfate. Hydroxychloroquine has pharmacokinetics similar to that of chloroquine, with rapid gastrointestinal absorption and renal elimination. However, the clinical indications and toxic doses of these drugs slightly differ. In

∗ Corresponding author. Present address: IHU–Méditerranée Infection, 19–21 Boulevard Jean Moulin, 13385 Marseille, France. Tel.: +33 4 13 73 20 51; fax: +33 4 13 73 20 52.

E-mail address: christian.devaux@mediterranee-infection.com (C.A.Devaux).

malaria, the indication for chloroquine was a high dose for a short period of time (due to its toxicity at high doses) or a low dose for a long period of time. Hydroxychloroquine was reported to be as active as chloroquine against Plasmodium falciparum malaria and less toxic, but it is much less active than chloroquine against chloroquine-resistant P. falciparum owing to its physicochemical properties. What is advantageous with hydroxychloroquine is that it can be used in high doses for long periods with very good tolerance. Unfortunately, the efficacy of chloroquine gradually declined due to the continuous emergence of chloroquine-resistant P. falciparum strains [5] Chloroquine is also utilised in the treatment of autoimmune diseases [6] Yet the activity of the molecule is not limited to malaria and the control of inflammatory processes, as illustrated by its broad-spectrum activity against a range of bacterial, fungal and viral infections [7–10]. Indeed, in the mid-1990s, due to its tolerability, rare toxicity reports, inexpensive cost and immunomodulatory properties [11], chloroquine repurposing was explored against human immunodeficiency virus (HIV) and other viruses associated with inflammation and was found to be efficient in inhibiting their replication cycle [12].

Recently, a novel coronavirus emerged in the Chinese city of Wuhan in December 2019. After human coronavirus 229E (HCoV229E) (classified in the genus Alphacoronavirus) and HCoV-OC43

https://doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2020.105938 0924-8579/©2020TheAuthor(s).PublishedbyElsevierB.V.ThisisanopenaccessarticleundertheCCBY-NC-NDlicense. (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)

Please cite this article as: C.A. Devaux, J.-M. Rolain and P. Colson et al., New insights on the antiviral effects of chloroquine against coronavirus: what to expect for COVID-19? International Journal of Antimicrobial Agents, https://doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2020.105938

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International

(Betacoronavirus lineage 2a member) described in the 1960s, SARSCoV-1 (Betacoronavirus lineage 2b member) that emerged in March 2003, HCoV-NL63 (Alphacoronavirus lineage 1b member) described in 2004, HCoV-HKU1 (Betacoronavirus lineage 2a member) discovered in 2005, and finally MERS-CoV that emerged in 2012 (classified in Betacoronavirus lineage 2c), the novel coronavirus is the seventh human coronavirus described to date as being responsible for respiratory infection. Evidence was rapidly reported that patients were suffering from an infection with a novel Betacoronavirus tentatively named 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) [13,14]. Despite drastic containment measures, the spread of 2019-nCoV, now officially known as severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), is ongoing. Phylogenetic analysis of this virus indicated that it is different (~80% nucleotide identity) but related to SARS-CoV-1 [15] Because the world is threatened by the possibility of a SARS-CoV-2 pandemic, the broad-spectrum antiviral effects of chloroquine warranted particular attention for repurposing this drug in the therapy of the disease caused by SARS-CoV-2, named coronavirus disease 2019 (COVID-19).

2. Antiviral properties of chloroquine

In vitro, chloroquine appears as a versatile bioactive agent reported to possess antiviral activity against RNA viruses as diverse as rabies virus [16], poliovirus [17], HIV [12,18–20], hepatitis A virus [21,22], hepatitis C virus [23], influenza A and B viruses [24–27], influenza A H5N1 virus [28], Chikungunya virus [29–31], Dengue virus [32,33], Zika virus [34], Lassa virus [35], Hendra and Nipah viruses [36,37], Crimean–Congo hemorrhagic fever virus [38] and Ebola virus [39], as well as various DNA viruses such as hepatitis B virus [40] and herpes simplex virus [41].The antiviral properties of chloroquine described in vitro have sometimes been confirmed during treatment of virus-infected patients but have not always been reproduced in clinical trials depending on the disease, the concentration of chloroquine used, the duration of treatment and the clinical team in charge of the trial.

Regarding coronaviruses, the potential therapeutic benefits of chloroquine were notably reported for SARS-CoV-1 [11,42]. Chloroquine was also reported to inhibit in vitro the replication of HCoV229E in epithelial lung cell cultures [43,44] In 2009, it was reported that lethal infections of newborn mice with the HCoV-O43 coronavirus could be averted by administering chloroquine through the mother’s milk. In vitro experiments also showed a strong antiviral effect of chloroquine on a recombinant HCoV-O43 coronavirus [45] Although chloroquine was reported to be active against Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) in vitro [46], this observation remains controversial [47]

3. Potential antiviral effect of chloroquine against SARS-CoV-2

Because of its broad spectrum of action against viruses, including most coronaviruses and particularly its close relative SARSCoV-1, and because coronavirus cell entry occurs through the endolysosomal pathway [48], it made sense in a situation of a publichealth emergency and the absence of any known efficient therapy to investigate the possible effect of chloroquine against SARS-CoV2. A recent paper reported that both chloroquine and the antiviral drug remdesivir inhibited SARS-CoV-2 in vitro and suggested these drugs be assessed in human patients suffering from COVID-19 [49]. Recently, the China National Center for Biotechnology Development indicated that chloroquine is one of the three drugs with a promising profile against the new SARS-CoV-2 coronavirus that causes COVID-19. Chloroquine repurposing was investigated in hospitals in Beijing, in central China’s Hunan Province and South China’s Guangdong Province. According to preliminary reports [50,51] from the Chinese authorities suggesting that approxi-

mately 100 infected patients treated with chloroquine experienced a more rapid decline in fever and improvement of lung computed tomography (CT) images and required a shorter time to recover compared with control groups, with no obvious serious adverse effects, the Chinese medical advisory board has suggested chloroquine inclusion in the SARS-CoV-2 treatment guidelines. As a result, chloroquine is probably the first molecule to be used in China and abroad on the front line for the treatment of severe SARSCoV-2 infections. Although the long use of this drug in malaria therapy demonstrates the safety of acute chloroquine administration to humans, one cannot ignore the minor risk of macular retinopathy, which depends on the cumulative dose [52], and the existence of some reports on cardiomyopathy as a severe adverse effect caused by chloroquine [53,54] A survey of SARS-CoV2-infected patients for adverse effects of chloroquine therapy remains to be performed. However, chloroquine is currently among the best available candidates to impact the severity of SARS-CoV-2 infections in humans. Currently, at least ten clinical trials are testing chloroquine as an anti-COVID-19 therapy [55]

4. Mode of action of chloroquine

Chloroquine has multiple mechanisms of action that may differ according to the pathogen studied.

Chloroquine can inhibit a pre-entry step of the viral cycle by interfering with viral particles binding to their cellular cell surface receptor. Chloroquine was shown to inhibit quinone reductase 2 [56], a structural neighbour of UDP-N-acetylglucosamine 2epimerases [57] that are involved in the biosynthesis of sialic acids. The sialic acids are acidic monosaccharides found at the extremity of sugar chains present on cell transmembrane proteins and are critical components of ligand recognition. The possible interference of chloroquine with sialic acid biosynthesis could account for the broad antiviral spectrum of that drug since viruses such as the human coronavirus HCoV-O43 and the orthomyxoviruses use sialic acid moieties as receptors [58]. The potent anti-SARS-CoV-1 effects of chloroquine in vitro were considered attributable to a deficit in the glycosylation of a virus cell surface receptor, the angiotensinconverting enzyme 2 (ACE2) on Vero cells [59]

Chloroquine can also impair another early stage of virus replication by interfering with the pH-dependent endosome-mediated viral entry of enveloped viruses such as Dengue virus or Chikungunya virus [60,61] Due to the alkalisation of endosomes, chloroquine was an effective in vitro treatment against Chikungunya virus when added to Vero cells prior to virus exposure [30] The mechanism of inhibition likely involved the prevention of endocytosis and/or rapid elevation of the endosomal pH and abrogation of virus–endosome fusion. A pH-dependant mechanism of entry of coronavirus into target cells was also reported for SARS-CoV1 after binding of the DC-SIGN receptor [62] The activation step that occurs in endosomes at acidic pH results in fusion of the viral and endosomal membranes leading to the release of the viral SARS-CoV-1 genome into the cytosol [63]. In the absence of antiviral drug, the virus is targeted to the lysosomal compartment where the low pH, along with the action of enzymes, disrupts the viral particle, thus liberating the infectious nucleic acid and, in several cases, enzymes necessary for its replication [64] Chloroquinemediated inhibition of hepatitis A virus was found to be associated with uncoating, thus blocking its entire replication cycle [22].

Chloroquine can also interfere with the post-translational modification of viral proteins. These post-translational modifications, which involve proteases and glycosyltransferases, occur within the endoplasmic reticulum or the trans-Golgi network vesicles and may require a low pH. For HIV, the antiretroviral effect of chloroquine is attributable to a post-transcriptional inhibition of glycosylation of the gp120 envelope glycoprotein, and the neosynthesised

ARTICLE IN PRESS

Table 1

Human coronavirus (HCoV) receptors/co-receptors as possible targets for chloroquine-induced inhibition of the virus replication cycle

Coronavirus Receptora May also bind

Alphacoronavirus

HCoV-229E Aminopeptidase N (APN)/CD13

Replication cycle inhibited by chloroquineb

Yes

HCoV-NL63 Angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) ? Heparan sulfate proteoglycansc

Betacoronavirus

HCoV-OC43 HLA class Id , IFN-inducible transmembrane (IFITM) proteins in endocytic vesiclese

Sialic acid ( O-acetylated sialic acid)f

SARS-CoV-1 Angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) DC-SIGN/CD209, DC-SIGNr, DC-SIGN-related lectin LSECting

HCoV-HKU1 HLA class Ih

MERS-CoV i Dipeptidyl peptidase 4 (DPP4)/CD26

SARS-CoV-2 ACE2i

HLA, human leukocyte antigen.

a Adapted from Graham et al. [91]

Yes

Yes

Sialic acid ( O-acetylated sialic acid) ?

Sialic acid?

b Chloroquine could interfere with receptor (ACE2) glycosylation and/or sialic acid biosynthesis.

c According to Milewska et al. [92]

d According to Collins [93]

e According to Zhao et al. [94]

f According to Vlasak et al. [95]

g According to Huang et al. [96]

h According to Chan et al. [97]

Yes

Yes

i It is worth noting that different host cell proteases are required to activate the spike (S) protein for coronaviruses, such as SARS-CoV-1 S protein that requires activation by cathepsin L [89], or MERS-CoV that requires furin-mediated activation of the S protein [98].

virus particles are non-infectious [19,65]. Chloroquine also inhibits the replication Dengue-2 virus by affecting the normal proteolytic processing of the flavivirus prM protein to M protein [32] As a result, viral infectivity is impaired. In the herpes simplex virus (HSV) model, chloroquine inhibited budding with accumulation of noninfectious HSV-1 particles in the trans-Golgi network [66] Using non-human coronavirus, it was shown that the intracellular site of coronavirus budding is determined by the localisation of its membrane M proteins that accumulate in the Golgi complex beyond the site of virion budding [67], suggesting a possible action of chloroquine on SARS-CoV-2 at this step of the replication cycle. It was recently reported that the C-terminal domain of the MERS-CoV M protein contains a trans-Golgi network localisation signal [68].

Beside affecting the virus maturation process, pH modulation by chloroquine can impair the proper maturation of viral protein [32] andthe recognitionofviralantigenbydendritic cells, which occurs through a Toll-like receptor-dependent pathway that requires endosomal acidification [69]. On the contrary, other proposed effects of chloroquine on the immune system include increasing the export of soluble antigens into the cytosol of dendritic cells and the enhancement of human cytotoxic CD8+ T-cell responses against viral antigens [70] In the influenza virus model, it was reported that chloroquine improve the cross-presentation of non-replicating virus antigen by dendritic cells to CD8+ T-cells recruited to lymph nodes draining the site of infection, eliciting a broadly protective immune response [71]

Chloroquine can also act on the immune system through cell signalling and regulation of pro-inflammatory cytokines. Chloroquine is known to inhibit phosphorylation (activation) of the p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) in THP-1 cells as well as caspase-1 [72]. Activation of cells via MAPK signalling is frequently required by viruses to achieve their replication cycle [73] In the model of HCoV-229 coronavirus, chloroquine-induced virus inhibition occurs through inhibition of p38 MAPK [44] Chloroquine is a well-known immunomodulatory agent capable of mediating an anti-inflammatory response [11]. Therefore, there are clinical applications of this drug in inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis [74–76], lupus erythematosus [6,77] and sarcoidosis [78] Chloroquine inhibits interleukin-1 beta (IL-1β ) mRNA expression in THP-1 cells and reduces IL-1β release [72] Chloroquine-induced reduction of IL-1 and IL-6 cytokines was also

found in monocytes/macrophages [79]. Chloroquine-induced inhibition of tumour necrosis factor-alpha (TNFα ) production by immune cells was reported to occur either through disruption of cellular iron metabolism [80], blockade of the conversion of pro-TNF into soluble mature TNFα molecules [81] and/or inhibition of TNFα mRNA expression [72,82,83] Inhibition of the TNFα receptor was also reported in U937 monocytic cells treated with chloroquine [84]. In the Dengue virus model, chloroquine was found to inhibit interferon-alpha (IFNα ), IFNβ , IFNγ , TNFα , IL-6 and IL-12 gene expression in U937 cells infected with Dengue-2 virus [33]

5. Conclusion

Chloroquine has been shown to be capable of inhibiting the in vitro replication of several coronaviruses. Recent publications support the hypothesis that chloroquine can improve the clinical outcome of patients infected by SARS-CoV-2. The multiple molecular mechanisms by which chloroquine can achieve such results remain to be further explored. Since SARS-CoV-2 was found a few days ago to utilise the same cell surface receptor ACE2 (expressed in lung, heart, kidney and intestine) as SARS-CoV-1 [85,86] (Table 1), it may be hypothesised that chloroquine also interferes with ACE2 receptor glycosylation thus preventing SARS-CoV2 binding to target cells. Wang and Cheng reported that SARS-CoV and MERS-CoV upregulate the expression of ACE2 in lung tissue, a process that could accelerate their replication and spread [85] Although the binding of SARS-CoV to sialic acids has not been reported so far (it is expected that Betacoronavirus adaptation to humans involves progressive loss of hemagglutinin-esterase lectin activity), if SARS-CoV-2 like other coronaviruses targets sialic acids on some cell subtypes, this interaction will be affected by chloroquine treatment [87,88] Today, preliminary data indicate that chloroquine interferes with SARS-CoV-2 attempts to acidify the lysosomes and presumably inhibits cathepsins, which require a low pH for optimal cleavage of SARS-CoV-2 spike protein [89], a prerequisite to the formation of the autophagosome [49] Obviously, it can be hypothesised that SARS-CoV-2 molecular crosstalk with its target cell can be altered by chloroquine through inhibition of kinases such as MAPK. Chloroquine could also interfere with proteolytic processing of the M protein and alter virion assembly and budding (Fig. 1). Finally, in COVID-19 disease this drug could act in-

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Fig. 1. Schematic representation of the possible effects of chloroquine on the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) replication cycle. SARS-CoV2, like other human coronaviruses, harbours three envelope proteins, the spike (S) protein (180–220 kDa), the membrane (M) protein (25–35 kDa) and the envelope (E) protein (10–12 kDa), which are required for entry of infectious virions into target cells. The virion also contains the nucleocapsid (N), capable of binding to viral genomic RNA, and nsp3, a key component of the replicase complex. A subset of betacoronaviruses use a hemagglutinin-esterase (65 kDa) that binds sialic acids at the surface of glycoproteins. The S glycoprotein determines the host tropism. There is indication that SARS-CoV-2 binds to angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expressed on pneumocytes [85,99] Binding to ACE2 is expected to trigger conformational changes in the S glycoprotein allowing cleavage by the transmembrane protease TMPRSS2 of the S protein and the release of S fragments into the cellular supernatant that inhibit virus neutralisation by antibodies [100] The virus is then transported into the cell through the early and late endosomes where the host protease cathepsin L further cleaves the S protein at low pH, leading to fusion of the viral envelope and phospholipidic membrane of the endosomes resulting in release of the viral genome into the cell cytoplasm. Replication then starts and the positive-strand viral genomic RNA is transcribed into a negative RNA strand that is used as a template for the synthesis of viral mRNA. Synthesis of the negative RNA strand peaks earlier and falls faster than synthesis of the positive strand. Infected cells contain between 10 and 100 times more positive strands than negative strands. The ribosome machinery of the infected cells is diverted in favour of the virus, which then synthesises its non-structural proteins (NSPs) that assemble into the replicase-transcriptase complex to favour viral subgenomic mRNA synthesis (see the review by Fehr and Perlman for details [101]). Following replication, the envelope proteins are translated and inserted into the endoplasmic reticulum and then move to the Golgi compartment. Viral genomic RNA is packaged into the nucleocapsid and then envelope proteins are incorporated during the budding step to form mature virions. The M protein, which localises to the trans-Golgi network, plays an essential role during viral assembly by interacting with the other proteins of the virus. Following assembly, the newly formed viral particles are transported to the cell surface in vesicles and are released by exocytosis. It is possible that chloroquine interferes with ACE2 receptor glycosylation, thus preventing SARS-CoV-2 binding to target cells. Chloroquine could also possibly limit the biosynthesis of sialic acids that may be required for cell surface binding of SARS-CoV-2. If binding of some viral particles is achieved, chloroquine may modulate the acidification of endosomes thereby inhibiting formation of the autophagosome. Through reduction of cellular mitogen-activated protein (MAP) kinase activation, chloroquine may also inhibit virus replication. Moreover, chloroquine could alter M protein maturation and interfere with virion assembly and budding. With respect to the effect of chloroquine on the immune system, see the elegant review by Savarino et al. [11] ERGIC, ER-Golgi intermediate compartment.

Please cite this article as: C.A. Devaux, J.-M. Rolain and P. Colson et al., New insights on the antiviral effects of chloroquine against coronavirus: what to expect for COVID-19? International Journal of Antimicrobial Agents, https://doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2020.105938

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directly through reducing the production of pro-inflammatory cytokines and/or by activating anti-SARS-CoV-2 CD8+ T-cells. Already in 2007, some of us emphasised in this journal the possibility of using chloroquine to fight orphan viral infections [10]. The worldwide ongoing trials, including those involving the care of patients in our institute [90], will verify whether the hopes raised by chloroquine in the treatment of COVID-19 can be confirmed.

Acknowledgment

The figure was designed using the Servier Medical Art supply of images available under a Creative Commons CC BY 3.0 license.

Funding: This study was supported by IHU–Méditerranée Infection, University of Marseille and CNRS (Marseille, France). This work has benefited from French state support, managed by the Agence nationale de la recherche (ANR), including the ‘Programme d’investissement d’avenir’ under the reference Méditerranée Infection 10-1AHU-03.

Competing interests: None declared.

Ethical approval: Not required.

References

[1] Winzeler EA Malaria research in the post-genomic era. Nature 2008;455:751–6

[2] Parhizgar AR, Tahghighi A Introducing new antimalarial analogues of chloroquine and amodiaquine: a narrative review. Iran J Med Sci 2017;42:115–28

[3] Bruce-Chwatt LJ, editor. Chemotherapy of malaria. 2nd ed. WHO, Geneva, Switzerland; 1981. WHO Monograph Series 27

[4] White NJ, Pukrittayakamee S, Hien TT, Faiz MA, Mokuolu OA, Dondorp AM. Malaria. Lancet 2014;383:723–35. doi:10.1016/S0140- 6736(13)60024- 0

[5] Wellems TE, Plowe CV Chloroquine-resistant malaria. J Infect Dis 2001;184:770–6

[6] Lee SJ, Silverman E, Bargman JM. The role of antimalarial agents in the treatment of SLE and lupus nephritis. Nat Rev Nephrol 2011;7:718–29. doi:10. 1038/nrneph.2011.150.

[7] Raoult D, Drancourt M, Vestris G. Bactericidal effect of doxycycline associated with lysosomotropic agents on Coxiella burnetii in P388D1 cells. Antimicrob Agents Chemother 1990;34:1512–14. doi:10.1128/aac.34.8.1512

[8] Raoult D, Houpikian P, Tissot DH, Riss JM, Arditi-Djiane J, Brouqui P. Treatment of Q fever endocarditis: comparison of 2 regimens containing doxycycline and ofloxacin or hydroxychloroquine. Arch Intern Med 1999;159:167–73. doi:10.1001/archinte.159.2.167

[9] Boulos A, Rolain JM, Raoult D Antibiotic susceptibility of Tropheryma whipplei in MRC5 cells. Antimicrob Agents Chemother 2004;48:747–52

[10] Rolain JM, Colson P, Raoult D Recycling of chloroquine and its hydroxyl analogue to face bacterial, fungal and viral infection in the 21st century. Int J Antimicrob Agents 2007;30:297–308

[11] Savarino A, Boelaert JR, Cassone A, Majori G, Cauda R Effects of chloroquine on viral infections: an old drug against today’s diseases? Lancet Infect Dis 2003;3:722–7

[12] Boelaert JR, Piette J, Sperber K The potential place of chloroquine in the treatment of HIV-1-infected patients. J Clin Virol 2001;20:137–40

[13] Huang C, Wang Y, Li X, Ren L, Zhao J, Hu Y, et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet 2020;395:497–506. doi:10.1016/S0140-6736(20)30183-5

[14] Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J, et al. A novel coronavirus from patients with pneumonia in China, 2019. N Engl J Med 2020;382:727–33

[15] Zhou P., Yang X.L., Wang X.G., Hu B., Zhang L., Zhang W., et al. Discovery of a novel coronavirus associated with the recent pneumonia outbreak in humans and its potential bat origin. bioRxiv 2020 Jan 23. doi:10.1101/2020.01.22.914952.

[16] Tsiang H, Superti F Ammonium chloride and chloroquine inhibit rabies virus infection in neuroblastoma cells. Arch Virol 1984;81:377–82

[17] Kronenberger P, Vrijsen R, BoeyéA Chloroquine induces empty capsid formation during poliovirus eclipse. J Virol 1991;65:7008–11

[18] Tsai WP, Nara PL, Kung HF, Oroszlan S. Inhibition of human immunodeficiency virus infectivity by chloroquine. AIDS Res Hum Retroviruses 1990;6:481–9. doi:10.1089/aid.1990.6.481

[19] Savarino A, Gennero L, Sperber K, Boelaert JR The anti-HIV-1 activity of chloroquine. J Clin Virol 2001;20:131–5

[20] Romanelli F, Smith KM, Hoven AD Chloroquine and hydroxychloroquine as inhibitors of human immunodeficiency virus (HIV-1) activity. Curr Pharm Des 2004;10:2643–8

[21] Superti F, Seganti L, Orsi W, Divizia M, Gabrieli R, Pana A. The effect of lipophilic amines on the growth of hepatitis A virus in Frp/3 cells. Arch Virol 1987;96:289–96. doi:10.1007/bf01320970

[22] Bishop NE Examination of potential inhibitors of hepatitis A virus uncoating. Intervirology 1998;41:261–71

[23] Mizui T, Yamashina S, Tanida I, Takei Y, Ueno T, Sakamoto N, et al. Inhibition of hepatitis C virus replication by chloroquine targeting virus-associated autophagy. J Gastroenterol 2010;45:195–203

[24] Miller DK, Lenard J. Antihistaminics, local anesthetics, and other amines as antiviral agents. Proc Natl Acad Sci U S A 1981;78:3605–9. doi:10.1073/pnas. 78.6.3605

[25] Shibata M, Aoki H, Tsurumi T, Sugiura Y, Nishiyama Y, Suzuki S, et al. Mechanism of uncoating of influenza B virus in MDCK cells: action of chloroquine. J Gen Virol 1983;64:1149–56. doi:10.1099/0022- 1317- 64- 5- 1149

[26] Ooi EE, Chew JS, Loh JP, Chua RC In vitro inhibition of human influenza A virus replication by chloroquine. Virol J 2006;3:39.

[27] Paton NI, Lee L, Xu Y, Ooi EE, Cheung YB, Archuleta S, et al. Chloroquine for influenza prevention: a randomised, double-blind, placebo controlled trial. Lancet Infect Dis 2011;11:677–83

[28] Yan Y, Zou Z, Sun Y, Li X, Xu KF, Wei Y, et al. Anti-malaria drug chloroquine is highly effective in treating avian influenza A H5N1 virus infection in an animal model. Cell Res 2013;23:300–2. doi:10.1038/cr.2012.165

[29] De Lamballerie X, Boisson V, Reynier JC, Enault S, Charrel RN, Flahault A, et al. On Chikungunya acute infection and chloroquine treatment. Vector Borne Zoonotic Dis 2008;8:837–40. doi:10.1089/vbz.2008.0049

[30] Khan M, Santhosh SR, Tiwari M, Lakshmana Rao PV, Parida M Assessment of in vitro prophylactic and therapeutic efficacy of chloroquine against Chikungunya virus in Vero cells. J Med Virol 2010;82:817–24

[31] Delogu I, de Lamballerie X Chikungunya disease and chloroquine treatment. J Med Virol 2011;83:1058–9

[32] Randolph VB, Winkler G, Stollar V. Acidotropic amines inhibit proteolytic processing of flavivirus prM protein. Virology 1990;174:450–8. doi:10.1016/ 0 042-6822(90)90 099-d

[33] Farias KJ, Machado PR, de Almeida Junior RF, de Aquino AA, da Fonseca BA Chloroquine interferes with dengue-2 virus replication in U937 cells. Microbiol Immunol 2014;58:318–26

[34] Delvecchio R, Higa LM, Pezzuto P, Valadao AL, Garcez PP, Monteiro FL, et al. Chloroquine, an endocytosis blocking agent, inhibits Zika virus infection in different cell models. Viruses 2016;8:E322. doi:10.3390/v8120322

[35] Glushakova SE, Lukashevich IS Early events in arenavirus replication are sensitive to lysosomotropic compounds. Arch Virol 1989;104:157–61.

[36] Porotto M, Orefice G, Yokoyama CC, Mungall BA, Realubit R, Sganga ML, et al. Simulating Henipavirus multicycle replication in a screening assay leads to identification of a promising candidate for therapy. J Virol 2009;83:5148–55

[37] Freiberg AN, Worthy MN, Lee B, Holbrook MR. Combined chloroquine and ribavirin treatment does not prevent death in a hamster model of Nipah and Hendra virus infection. J Gen Virol 2010;91:765–72. doi:10.1099/vir.0. 017269-0

[38] Ferraris O, Moroso M, Pernet O, Emonet S, Ferrier Rembert A, ParanhosBaccala G, et al. Evaluation of Crimean–Congo hemorrhagic fever virus in vitro inhibition by chloroquine and chlorpromazine, two FDA approved molecules. Antiviral Res 2015;118:75–81. doi:10.1016/j.antiviral.2015.03.005

[39] Dowall SD, Bosworth A, Watson R, Bewley K, Taylor I, Rayner E, et al. Chloroquine inhibited Ebola virus replication in vitro but failed to protect against infection and disease in the in vivo guinea pig model. J Gen Virol 2015;96:3484–92

[40] Kouroumalis EA, Koskinas J Treatment of chronic active hepatitis B (CAH B) with chloroquine: a preliminary report. Ann Acad Med Singapore 1986;15:149–52

[41] Koyama AH, Uchida T Inhibition of multiplication of herpes simplex virus type 1 by ammonium chloride and chloroquine. Virology 1984;138:332–5

[42] Keyaerts E, Li S, Vijgen L, Rysman E, Verbeeck J, Van Ranst M, et al. Antiviral activity of chloroquine against human coronavirus OC43 infection in newborn mice. Antimicrob Agents Chemother 2009;53:3416–21

[43] Blau D, Holmes K Human coronavirus HCoV-229E enters susceptible cells via the endocytic pathway. In: Lavi E, Weiss SR, Hingley ST, editors. The nidoviruses (coronaviruses and arteriviruses). New York, NY: Kluwer; 2001. p. 193–7

[44] Kono M, Tatsumi K, Imai AM, Saito K, Kuriyama T, Shirasawa H. Inhibition of human coronavirus 229E infection in human epithelial lung cells (L132) by chloroquine: involvement of p38 MAPK and ERK. Antiviral Res 2008;77:150–2. doi:10.1016/j.antiviral.2007.10.011

[45] Shen L, Yang Y, Ye F, Liu G, Desforges M, Talbot PJ, et al. Safe and sensitive antiviral screening platform based on recombinant human coronavirus OC43 expressing the luciferase reporter gene. Antimicrob Agents Chemother 2016;60:5492–503. doi:10.1128/AAC.00814-16

[46] de Wilde AH, Jochmans D, Posthuma CC, Zevenhoven-Dobbe JC, van Nieuwkoop S, Bestebroer TM, et al. Screening of an FDA-approved compound library identifies four small-molecule inhibitors of Middle East respiratory syndrome coronavirus replication in cell culture. Antimicrob Agents Chemother 2014;58:4875–84. doi:10.1128/AAC.03011-14

[47] Mo Y, Fisher D A review of treatment modalities for Middle East respiratory syndrome. J Antimicrob Chemother 2016;71:3340–50

Please cite this article as: C.A. Devaux, J.-M. Rolain and P. Colson et al., New insights on the antiviral effects of chloroquine against coronavirus: what to expect for COVID-19? International Journal of Antimicrobial Agents, https://doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2020.105938

ARTICLE IN PRESS

C.A. Devaux, J.-M. Rolain and P. Colson et al. / International

[48] Burkard C, Verheije MH, Wicht O, van Kasteren SI, van Kuppeveld FJ, Haagmans BL, et al. Coronavirus cell entry occurs through the endo-/lysosomal pathway in a proteolysis-dependent manner. PLoS Pathog 2014;10:e1004502

[49] Wang M, Cao R, Zhang L, Yang X, Liu J, Xu M, et al. Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro. Cell Res 2020;30:269–71. doi:10.1038/s41422- 020- 0282- 0

[50] Gao J, Tian Z, Yang X. Breakthrough: chloroquine phosphate has shown apparent efficacy in treatment of COVID-19 associated pneumonia in clinical studies. Biosci Trends Feb 2020 [Epub ahead of print]. doi:10.5582/bst.2020.01047

[51] Multicenter Collaboration Group of Department of Science and Technology of Guangdong Province and Health Commission of Guangdong Province for chloroquine in the treatment of novel coronavirus pneumonia Expert consensus on chloroquine phosphate for the treatment of novel coronavirus pneumonia [in Chinese]. Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi 2020;43:E019. doi:10.3760/cma.j.issn.10 01-0939.2020.0 019

[52] Bernstein HN. Ocular safety of hydroxychloroquine. Ann Ophthalmol 1991;23:292–6.

[53] RatliffNB, EstesML, MylesJL, ShireyEK, McMahonJT Diagnosisof chloroquine cardiomyopathy by endomyocardial biopsy. N Engl J Med 1987;316:191–3

[54] Cubero GJ, Rodriguez Reguero JJ, Rojo Ortega JM Restrictive cardiomyopathy caused by chloroquine. Br Heart J 1993;69:451–2

[55] Harrison C. Coronavirus puts drug repurposing on the fast track. Nature Biotechnology 2020 Feb 27. doi:10.1038/d41587- 020- 0 0 0 03-1

[56] Kwiek JJ, Haystead TA, Rudolph J Kinetic mechanism of quinone oxidoreductase 2 and its inhibition by the antimalarial quinolines. Biochemistry 2004;43:4538–47

[57] Varki A Sialic acids as ligands in recognition phenomena. FASEB J 1997;11:248–55

[58] Olofsson S, Kumlin U, Dimock K, Arnberg N Avian influenza and sialic acid receptors: more than meets the eye? Lancet Infect Dis 2005;5:184–8

[59] Vincent MJ, Bergeron E, Benjannet S, Erickson BR, Rollin PE, Ksiazek TG, et al. Chloroquine is a potent inhibitor of SARS coronavirus infection and spread. Virol J 2005;2:69. doi:10.1186/1743- 422X- 2- 69

[60] Tricou V, Minh NN, Van TP, Lee SJ, Farrar J, Wills B, et al. A randomized controlled trial of chloroquine for the treatment of dengue in Vietnamese adults. PLoS Negl Trop Dis 2010;4:e785. doi:10.1371/journal.pntd.0 0 0 0785

[61] Gay B, Bernard E, Solignat M, Chazal N, Devaux C, Briant L. pH-dependent entry of Chikungunya virus into Aedes albopictus cells. Infect Genet Evol 2012;12:1275–81. doi:10.1016/j.meegid.2012.02.003

[62] Yang ZY, Huang Y, Ganesh L, Leung K, Kong WP, Schwartz O, et al. pHdependent entry of severe acute respiratory syndrome coronavirus is mediated by the spike glycoprotein and enhanced by dendritic cell transfer through DC-SIGN. J Virol 2004;78:5642–50. doi:10.1128/JVI.78.11.5642-5650. 2004

[63] Wang H, Yang P, Liu K, Guo F, Zhang Y, Zhang G, et al. SARS coronavirus entry into host cells through a novel clathrin- and caveolae-independent endocytic pathway. Cell Res 2008;18:290–301. doi:10.1038/cr.2008.15

[64] Cassell S, Edwards J, Brown DT Effects of lysosomotropic weak bases on infection of BHK-21 cells by Sindbis virus. J Virol 1984;52:857–64

[65] Savarino A, Lucia MB, Rastrelli E, Rutella S, Golotta C, Morra E, et al. Anti-HIV effects of chloroquine: inhibition of viral particle glycosylation and synergism with protease inhibitors. J Acquir Immune Defic Syndr 1996;35:223–32

[66] Harley CA, Dasgupta A, Wilson DW Characterization of herpes simplex virus–containing organelles by subcellular fractionation: role for organelle acidification in assembly of infectious particles. J Virol 2001;75:1236–51

[67] Klumperman J, Locker JK, Meijer A, Horzinek MC, Geuze HJ, Rottier PJ Coronavirus M proteins accumulate in the Golgi complex beyond the site of virion budding. J Virol 1994;68:6523–34

[68] Perrier A, Bonnin A, Desmarets L, Danneels A, Goffard A, RouilléY, et al. The C-terminal domain of the MERS coronavirus M protein contains a trans-Golgi network localization signal. J Biol Chem 2019;294:14406–21

[69] Diebold SS, Kaisho T, Hemmi H, Akira S, Reis e Sousa C Innate antiviral responses by means of TLR7-mediated recognition of single-stranded RNA. Science 2004;303:1529–31

[70] Accapezzato D, Visco V, Francavilla V, Molette C, Donato T, Paroli M, et al. Chloroquine enhances human CD8+ T cell responses against soluble antigens in vivo. J Exp Med 2005;202:817–28.

[71] Garulli B, Di Mario G, Sciaraffia E, Accapezzato D, Barnaba V, Castrucci MR. Enhancement of T cell-mediated immune responses to whole inactivated influenza virus by chloroquine treatment in vivo. Vaccine 2013;31:1717–24. doi:10.1016/j.vaccine.2013.01.037

[72] Steiz M, Valbracht J, Quach J, Lotz M. Gold sodium thiomalate and chloroquine inhibit cytokine production in monocytic THP-1 cells through distinct transcriptional and posttranslational mechanisms. J Clin Immunol 2003;23:477–84. doi:10.1023/B:JOCI.0000010424.41475.17

[73] Briant L, Robert-Hebmann V, Acquaviva C, Pelchen-Matthews A, Marsh M, Devaux C The protein tyrosine kinase p56lck is required for triggering NF-κ B activation upon interaction of human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoprotein gp120 with cell surface CD4. J Virol 1998;72:6207–14

[74] Fuld H, Horwich L. Treatment of rheumatoid arthritis with chloroquine. Br Med J 1958;15:1199–201. doi:10.1136/bmj.2.5106.1199

[75] Mackenzie AH Antimalarial drugs for rheumatoid arthritis. Am J Med 1983;75:48–58

[76] Sharma TS, Do EJ, Wasko MCM. Anti-malarials: are there benefits beyond mild disease? Curr Treat Options Rheumatol 2016;2:1–12. doi:10.1007/ s40674- 016- 0036- 9

[77] Wozniacka A, Lesiak A, Narbutt J, McCauliffe DP, Sysa-Jedrzejowska A Chloroquine treatment influences proinflammatory cytokine levels in systemic lupus erythematosus patients. Lupus 2006;15:268–75

[78] Sharma OP Effectiveness of chloroquine and hydroxychloroquine in treating selected patients with sarcoidosis with neurological involvement. Arch Neurol 1998;55:1248–54

[79] Jang CH, Choi JH, Byun MS, Jue DM Chloroquine inhibits production of TNF-α , IL-1β and IL-6 from lipopolysaccharide-stimulated human monocytes/macrophages by different modes. Rheumatology 2006;45:703–10

[80] Picot S, Peyron F, Donadille A, Vuillez J-P, Barbe G, Ambroise-Thomas P Chloroquine-induced inhibition of the production of TNF, but not of IL-6, is affected by disruption of iron metabolism. Immunology 1993;80:127–33

[81] Jeong JY, Jue DM. Chloroquine inhibits processing of tumor necrosis factor in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages. J Immunol 1997;158:4901–7

[82] Zhu X, Ertel W, Ayala A, Morrison MH, Perrin MM, Chaudry IH Chloroquine inhibits macrophage tumour necrosis factor-α mRNA transcription. Immunology 1993;80:122–6

[83] Weber SM, Levitz SM. Chloroquine interferes with lipopolysaccharide-induced TNF-α gene expression by a nonlysosomotropic mechanism. J Immunol 20 0 0;165:1534–40. doi:10.4049/jimmunol.165.3.1534

[84] Jeong JY, Choi JW, Jeon KI, Jue DM. Chloroquine decreases cell-surface expression of tumour necrosis factor receptors in human histiocytic U-937 cells. Immunology 2002;105:83–91. doi:10.1046/j.0 019-2805.20 01.01339.x

[85] Wang P.H., Cheng Y. Increasing host cellular receptor—angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expression by coronavirus may facilitate 2019-nCoV infection. bioRxiv 2020 Feb 27. doi:10.1101/2020.02.24.963348

[86] Li R, Qiao S, Zhang G. Analysis of angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) from different species sheds some light on cross-species receptor usage of a novel coronavirus 2019-nCoV. J Infect 2020 Feb 21 [Epub ahead of print]. doi:10.1016/j.jinf.2020.02.013

[87] Zeng Q, Langereis MA, vanVlietALW, HuizingaEG, deGroot RJ.Structureof coronavirus hemagglutinin-esterase offers insight into corona and influenza virus evolution. Proc Natl Acad Sci U S A 2008;105:9065–9

[88] Bakkers MJG, Lang Y, Feistsma LJ, Hulswit RJG, de Poot SAH, van Vliet ALW, et al. Betacoronavirus adaptation to humans involved progressive loss of hemagglutinin-esterase lectin activity. Cell Host Microbe 2017;21:356–66. doi:10.1016/j.chom.2017.02.008.

[89] Simmons G, Bertram S, Glowacka I, Steffen I, Chaipan C, Agudelo J, et al. Different host cell proteases activate the SARS-coronavirus spike-protein for cell–cell and virus–cell fusion. Virology 2011;413:265–74. doi:10.1016/j.virol. 2011.02.020

[90] Colson P, Rolain JM, Lagier JC, Brouqui P, Raoult D. Chloroquine and hydroxychloroquine as available weapons to fight COVID-19. Int J Antimicrob Agents 2020 Mar 4:105932. doi:10.1016/j.ijantimicag.2020.105932

[91] Graham RL, Donaldson EF, Baric RS A decade after SARS: strategies to control emerging coronaviruses. Nat Rev Microbiol 2013;11:836–48

[92] Milewska A, Zarebski M, Nowak P, Stozek K, Potempa J, Pyrc K Human coronavirus NL63 utilizes heparan sulfate proteoglycans for attachment to target cells. J Virol 2014;88:13221–30

[93] Collins AR HLA class I antigen serves as a receptor for human coronavirus OC43. Immunol Invest 1993;22:95–103

[94] Zhao X, Guo F, Liu F, Cuconati A, Chang J, Block TM, et al. Interferon induction of IFITM proteins promotes infection by human coronavirus OC43. Proc Natl Acad Sci U S A 2014;111:6756–61

[95] Vlasak R, Luytjes W, Spaan W, Palese P Human and bovine coronaviruses recognize sialic acid-containing receptors similar to those of influenza C viruses. Proc Natl Acad Sci U S A 1988;85:4526–9

[96] Huang X, Dong W, Milewska A, Golda A, Qi Y, Zhu QK, et al. Human coronavirus HKU1 spike protein uses O-acetylated sialic acid as an attachment receptor determinant and employs hemagglutinin-esterase protein as a receptor-destroying enzyme. J Virol 2015;89:7202–13

[97] Chan CM, Lau SKP, Woo PCY, Tse H, Zheng BJ, Chen L, et al. Identification of major histocompatibility complex class I C molecule as an attachment factor that facilitates coronavirus HKU1 spike-mediated infection. J Virol 2009;83:1026–35

[98] Millet JK, Whittaker GR Host cell entry of Middle East respiratory syndrome coronavirus after two-step, furin-mediated activation of the spike protein. Proc Natl Acad Sci U S A 2014;111:15214–19

[99] Zhao Y., Zhao Z., Wang Y., Zhou Y., Ma Y., Zuo W. Single-cell RNA expression profiling of ACE2, the putative receptor of Wuhan 2019-nCov. bioRxiv 2020 Jan 26. doi:10.1101/2020.01.26.919985

[100] Glowacka I, Bertram S, Müller MA, Allen P, Soilleux E, Pfefferle S, et al. Evidence that TMPRSS2 activates the severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein for membrane fusion and reduces viral control by the humoral immune response. J Virol 2011;85:4122–34

[101] Fehr AR, Perlman S. Coronaviruses: an overview of their replication and pathogenesis. Methods Mol Biol 2015;1282:1–23. doi:10.1007/ 978- 1- 4939- 2438- 7 1

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veto del governatore non aveva limiti e riesciva a rimettere quasi intere nelle sue mani le sorti delle elezioni[391]. Ma anche in quei casi, in cui ciò non avveniva, la qualità stessa e la pratica consueta dei suoi poteri tramutava qualsiasi disposizione liberale in una feroce ironia. Anzi tutto (è Cicerone stesso ad avvertircene) l’ordinamento dato alla provincia non aveva, come impropriamente si esprimevano i provinciali[392] , valore di legge, nè le ulteriori disposizioni del senato, che parevano regolarne le sorti, esercitavano, rispetto al governatore, alcuna efficacia coattiva. Questi, inoltre, possedeva il supremo ius edicendi, che, assai più delle generiche norme del lontano governo della Repubblica, aveva di fatto il peso di una vera e propria autorità governativa e legislativa[393]. Così Verre, che, lo ripetiamo, non bisogna considerare quale esempio isolato, ma come rappresentante, sia pure cospicuo, di tutto un sistema; Verre aveva facilmente potuto convertire, tutte le norme e le consuetudini elettorali della Sicilia in mirabili strumenti di lucro e di oppressione.

Ad Halaesa, ove non si poteva essere senatore che a trent’anni, furono per prezzo — egregio espediente di tirannide — creati senatori fanciulli di diciassette o sedici anni, senza riguardo, senza preoccupazione d’ogni altro limite di censo o di condizione personale[394]. Ad Agrigento, ove i posti senatorii dovevano essere egualmente ripartiti fra gli antichi ed i nuovi coloni, ne vennero — sempre per prezzo — mescolate e confuse indifferentemente le proporzioni[395]. Da per tutto poi i censori, la cui nomina, in forza della loro qualità di compilatori del ruolo delle imposte, era, pei provinciali, cosa d’interesse assai delicato[396] , furono direttamente creati da Verre, anzi la loro elezione, messa senz’altro all’incanto. E, usciti dal mercato di Siracusa, ove il nuovo genere di asta venne bandito, i nuovi censori, stimolati dal pungolo del dispendio enorme, che loro era costata la carica, non tardarono a volersene rifare sulle viscere degli amministrati[397].

La cosa non andava diversamente riguardo all’ordinamento giudiziario.

È inutile, anche a tale proposito, svolgere i particolari teorici del lacunoso ed oscuro ordinamento giudiziario della Sicilia, che aveva preceduto il dominio romano e che questo si diceva avesse rispettato. La teoria non contava nulla; contava moltissimo la pratica; e la pratica di Roma repubblicana fu, di solito, assai poco esemplare. Il governatore poteva ciò che voleva, o, meglio, giudicava a priori in luogo di quelli che ne avevano il diritto, imponendo a costoro il proprio giudizio, che, novantanove volte su cento, corrispondeva al soddisfacimento dell’interesse proprio o dei propri accoliti. Ma la sua fertile fantasia sapeva escogitare anche di meglio; sapeva, nel solenne editto, comminare delle pene a chi indebitamente si fosse attribuita la funzione di giudicare[398] , salvo a far dipendere la decisione sulla legalità o meno della carica dalle disposizioni del giudicante. E poteva anche di più: se la prima sentenza, per sciagura, tutt’altro che consueta, non fosse andata a suo genio, il governatore invitava nuovamente coloro che erano stati assolti o condannati a convenirgli dinanzi a giudizio[399]. Era il colmo, ma era, pur troppo, la realtà!

La Sicilia fu governata atrocemente; ma essa fu anche, con l’Asia Minore e con la Grecia, il Paese nel quale la concorrenza dei dominatori agli indigeni fu più crudele e fortunosa. Non per nulla i timocratici comizi centuriati del 242 avevano deliberatamente forzato il senato romano a iniziarne la conquista! Così tutto quanto di vitalità indigena, morale, intellettuale, economica, vi era fin allora fiorita, la conquista romana si affrettò a soffocare, a stroncare o a confiscare a vantaggio di gente d’oltre mare. Questa invadenza forestiera riescì all’Isola non meno fatale della soffocazione o dell’esaurimento impostole dal governo. Il passaggio dei campi e delle aziende agricole, ai più cospicui cittadini romani, portò direttamente al latifondo, all’impiego su larga scala del lavoro servile, cioè ad un nuovo esaurimento del suolo, alla provocazione di torbide e cruente discordie, fra cui, non ultime, le Guerre servili.

Della decadenza della Sicilia, e, in conseguenza, delle città greche, che vi sorgevano e vi avevano gloriosamente brillato, noi abbiamo prove eloquenti. In soli tre anni, dal 73 al 71 a. C., a detta di Cicerone, gli agricoltori di Leontini erano discesi da 84 a 32; quelli di Mutyca da 187 ad 86; quelli di Agyrrium da 250 ad 80; quelli di Herbita da 252 a 120[400]. In quattordici anni, dal governo di C. Norbano a quello di Verre, la produzione dell’isola, era scemata in misura tale, da riescire impossibile, anche con mezzi straordinari, l’esazione di tutto quanto altra volta s’era potuto ricavare con la mitezza e la legalità[401]. «Il Paese sembrava» oramai «desolato dai torbidi di una guerra lunga e crudele. Le pianure e le colline, per l’innanzi sì floride e ridenti, erano precipitate nell’abbandono e nella devastazione. La terra stessa sembrava piangere ed invocare i perduti coltivatori.... Il territorio di Etna, un tempo ben coltivato e fonte principale degli approvvigionamenti romani, e la piana di Leontini, che mai aveva saputo o fatto sapere cosa significasse carestia, apparivano allora così orridi e sfigurati da costringerci a ricercare invano in quelle — tra le più ubertose regioni della Sicilia — l’aspetto della Sicilia medesima....». Tutto un’esercito di agricoltori era fuggito, rinunziando, non solo alla terra, ma al focolare della patria.[402]. «L’incendio attizzato dalla violenza dei decumani, aveva distrutto, non solo le proprietà, ma tutti i beni dei contadini; dai beni era passato a violare le guarentige dei liberi.... Alcuni erano stati impiccati, altri flagellati a verghe, altri imprigionati.... altri condannati dall’Esculapio o dall’usciere del pretore.... Neanche la furia di schiavi ribelli e fuggiaschi avrebbe osato altrettanto!»[403].

Le altre città greche.

Tutto quanto è stato detto della Sicilia, è mestieri ripetere dell’Asia greca, l’una e l’altra, ed in pari misura, territorî classici della decima e della devastazione romana[404]. Ivi, l’abbiamo notato, sterminata fu la copia degli speculatori, romani e italici, piccoli e grandi, che l’invasero[405]: i massacri, ordinati da Mitridate nell’88, costarono la

vita a 80.000, fors’anche a 150.000, Italici[406] , e molti dovettero essere gli scampati alla strage. Ivi stesso più colpevole che in Sicilia fu la condotta dei magistrati della Repubblica, e, giacchè il bottino era più abbondante, più sottile il meccanismo e più intensi gli armeggii delle loro clientele[407].

Quelle terre infelici, che, sotto il piede di Roma, venivano d’un tratto a scontare la felicità conquistata sotto il governo dei Seleucidi, o dei loro successori, toccarono anche la mala sorte di essere, nel lungo periodo di Roma repubblicana, teatro di taluna fra le più grandi guerre del tempo: la triplice mitridatica e la seconda e la terza guerra civile, le quali, se apportarono al tesoro romano, o a quello privato dei singoli generali romani, immense ricchezze, determinarono colà la più tremenda delle catastrofi. Pur troppo, anche in questa contingenza, essa fu, il maggior numero di volte, consapevolmente organizzata dai conquistatori.

Qui, nella terra sacra ai grandi Vespri asiatici dell’88 a. C., una tassa straordinaria imposta da Sulla, quattro anni dopo (84 a. C.), e che a lui venne anticipata dai capitalisti romani, salì, nel giro di pochi anni, in forza degl’interessi pagati, al sestuplo dell’importo originario[408]. Per saldarla, le città dovettero cedere ai creditori gli edifizi pubblici, le riserve metalliche, i capolavori d’arte, gli schiavi, gli oggetti preziosi; e i privati, dopo aver subìto per lunghi anni torture, capestri e prigionie, e, dopo essere stati costretti a giacere all’aria aperta, bruciando d’estate per l’arsura, gelando d’inverno, immersi nel fango e nel ghiaccio, per il freddo, dovettero sacrificare all’ingordigia romana, le loro case, le loro terre e fin la libertà delle mogli, dei figli, di se stessi[409]. A rammentare quanto avevano sofferto, la schiavitù, esclama Plutarco[410] , segnava un’ora di tregua e di pace! Più tardi, nel 63, la provincia subì lo sgoverno del pretore L. Valerio Flacco. Egli — si disse — addossava alle città delle somme enormi per l’equipaggiamento di flotte immaginarie, e a ciascuna, altre somme per i suoi personali bisogni[411]. Il suo governo oscurò la trista fama di quello di Verre in Sicilia, ma non gli fu impossibile trovare, quale suo difensore, lo stesso implacabile accusatore del

famigerato pretore siciliano, nè difficilissimo ottenere dai tribunali romani l’assoluzione! Più tardi ancora, Bruto e Cassio si faranno anticipare da tutte le città asiatiche il tributo di ben dieci annate e il triumviro Antonio, entusiasta del suggestivo precedente, reclamerà subito dopo, quale doverosa obbligazione, un nuovo anticipo decennale....[412].

Cicerone, che pure più volte aveva cooperato ai danni delle province asiatiche[413] , era nondimeno costretto a riconoscere le terribili responsabilità, che gravavano sui metodi romani. «Io so», egli scriveva al fratello, proconsole nella provincia d’Asia, subito dopo il suo cliente L. Flacco, «io so che l’opinione pubblica apprezza e loda il tuo grande interessamento. Le città non contraggono più debiti, e molte sono state in grazia tua liberate dall’enorme fardello degli antichi. Moltissime, quasi deserte, tra cui due, una la più gloriosa della Ionia, l’altra della Caria — Samo ed Alicarnasso — ti sono debitrici della propria resurrezione.... L’onore, le fortune e la tranquillità dei cittadini più agiati hanno cessato di essere alla mercè della calunniosa delazione, tremenda ministra dell’ingordigia dei pretori. Gli oneri sono equamente ripartiti.... Immenso è il beneficio che tu hai arrecato all’Asia con l’abolizione dell’iniquo e gravoso tributo che essa pagava agli edili.... Un alto personaggio si è lagnato pubblicamente in Roma perchè il tuo editto contro ogni percezione di imposte straordinarie a titolo di giuochi pubblici, gli aveva impedito di risparmiare circa 200.000 sesterzi (50.000 lire). Figurarsi un po’ l’ammontare dell’imposta, allorquando chiunque bandiva a Roma dei giuochi poteva permettersi un simile salasso!» Io mi spiego gli scatti d’ira e di protesta del tuo primo anno di governo: «l’iniquità, l’ingordigia, l’insolenza, avevano trasceso ogni misura, e ti rivoltavano....»[414].

Ma la realtà era più eloquente della calda prosa ciceroniana. Abbiamo più innanzi riferito la imposta straordinaria, con cui Sulla volle castigare il paese, e gli utili enormi, che dalla sventura ebbero a ritrarre i finanzieri romani. Ebbene, senza i loro anticipi usurarî, gli Asiatici, più tardi, non saranno in grado di corrispondere l’eguale e regolare imposta, istituita — sia pure per breve tempo — da Sulla

medesimo. Il male era così radicato da impedire che le vittime facessero a meno del cancro che le divorava!

Analoga era la condizione delle rimanenti città, sparse pei territori, che più tardi costituirono la provincia di Bitinia e del Ponto, e, più tardi ancora, l’altra della Tracia. E per quanto esse siano state, talora, trattate con una certa mitezza, fino a ricevere il titolo di libere[415] (ma non per questo, il più delle volte, di esenti da tributo)[416] , le necessità di Roma e della sua politica estera non valsero a raddolcirne la sorte. Più interessante è, per la serie delle nostre osservazioni, il destino delle città greche di Creta e della Cirenaica, di cui la prima, per quanto, in età storica, decaduta dall’originaria grandezza, non discese mai così basso come dopo la conquista romana, che seguì a un lungo periodo di astiosa protezione. Dopo fiera, tenace resistenza, le principali città caddero, l’una dopo l’altra, in mano dei conquistatori, e la devastazione e il saccheggio, che ne accompagnarono la resa, non permisero che mai più si rilevassero (67 a. C.)[417]. Delle città cretesi, la sola Cnosso potè d’ora in avanti dirsi in certo modo degna di tal nome; ma nel 36 a. C., la sua popolazione era così rada, da dover essere ricolmata dalla colonizzazione romana[418]

La Cirenaica, la cui storia costituisce qualcosa d’indipendente dagli altri Paesi greci, da cui ebbe diverse le cause dello sviluppo e della decadenza, fu, nel 96 a. C., lasciata in eredità a Roma dai principi dell’Egitto, i Tolomei. I fortunati eredi non credettero, per motivi loro particolari, di farne una nuova provincia; essi si affrettarono però a confiscare in favore del demanio pubblico i beni degli antichi sovrani[419] , a stabilire un’imposta sui principali prodotti del Paese[420] , ad obbligare la popolazione alle consuete requisizioni militari[421]. Più tardi la contrada divenne senz’altro provincia, e per l’appunto stipendiaria[422]. Ma il Paese venne tosto depredato, oltre che dai barbari, dai pubblicani. Il sylphium, che aveva costituito un tempo la sua ricchezza e la sua specialità, era, nell’età di Plinio (sec. I-II d. C.), disparso: i pubblicani vi avevano sostituito le colture armentizie, e, più tardi, gli abitanti medesimi, incapaci di resistere

alla pressione tributaria («ob intolerandam vectigalis nimietatem»)[423] , avevano sradicato gli ultimi campioni di quel prezioso prodotto locale.

Gran che di diverso non avvenne, o, almeno, nella enorme oscurità che c’ingombra, possiamo arguire non avvenisse, dei confiscati exdemanî regi della Cirenaica. Questi furono in sulle prime concessi in fitto ai pubblicani, i quali vi introdussero, come nel resto del Paese, la pastorizia. Poscia, trascurati dal governo, divennero preda del primo occupante, e possiamo essere sicuri che tali furono, assai più che i Cirenesi, i barbari invasori ed i cittadini romani[424].

Ma al pari delle province consorelle, la felice Cirene ebbe a patire, oltre che dai pubblicani, dallo sgoverno dei magistrati. La guerra civile fra Cesare e Pompeo arrecò alla provincia disastri incalcolabili. La successiva amministrazione del triumviro M. Antonio fece quanto poteva per aggravarli, e, sempre di lì a poco, in seguito al passaggio della regione dal governo di Antonio a quello di una figliuola di Cleopatra, spettò ai ministri egiziani il tristo vanto di completarne la rovina[425]. Neanche l’Impero le portò pace. Nel 21 d. C., il proconsole della Cirenaica, Cesio Cordo, veniva accusato, e quindi condannato, per concussione. Trentasei anni dopo, nel 59, un tal Pedio Bleso, rinnovando, in questi primi tempi, relativamente tranquilli, dell’età imperiale, le gesta di Verre, osò violare il tesoro di Esculapio e far pubblico mercato dell’arrolamento militare. Ancora, undici anni dopo, troviamo, per colpe analoghe, condannato all’esilio e alla restituzione del mal tolto, un tale Antonio Flamma[426].

Anche Cipro, al pari di Cirene, antico dominio dei Tolomei, veniva, nel 58, occupata da Roma, e riunita in provincia unica alla Cilicia. M. Porcio Catone, che ne era stato il conquistatore, poteva, con la confisca e la vendita all’asta del tesoro regio, raccogliervi ben 7000 talenti (L. 40.000.000)[427]. Ma assai peggio toccò a Cipro con l’annessione alla Cilicia. Nel 56 a. C. gli abitanti di Salamina, non più in grado di saldare con mezzi propri le imposte, dovettero ricorrere a dei prestatori romani, i quali non mancarono di far ascendere ad altezze vertiginose la somma prestata. I 106 talenti (L. 700.000

circa), cui infatti, nel 52-51, calcolati gl’interessi di legge, il debito sessennale ammontava, rappresentavano, a giudizio dei creditori, appena la metà della somma dovuta. Il pagamento ne riusciva impossibile[428]. Ma costoro non si scoraggiarono e, ottenuto dal governatore dell’isola uno squadrone di cavalleria, assediarono l’aula senatoria, e vi fecero perire per fame cinque dei componenti l’augusto consesso[429]. Il nuovo governatore romano, Cicerone, giunse in tempo a interrompere quell’orgia di rapacità e di ferocia. Ma non per questo ebbe uguale fortuna nell’imporre il rispetto della legge. I creditori, temendo che il loro ineseguibile debito divenisse nullo in virtù di una legge Gabinia, ottennero un decreto del senato, che lacerava senz’altro le clausole di tal legge. E, siccome ciò non bastava a garantire il pagamento delle usure pretese, ne ottennero un secondo, con cui venne regolata l’incostituzionalità del primo. Intermediario, anzi promotore dell’uno e dell’altro fu, per colmo d’ironia, M. Giunio Bruto, il futuro vendicatore della maestà delle leggi romane, oltraggiate da Cesare!

Cicerone alla lettura dei decreti del senato non ritrovò l’energia che occorreva per resistere, ma non si sentì da tanto da consegnare agli usurai, mani e piedi legata, una città, alla quale era legata tanta parte della gloria ellenica nell’epica guerra nazionale contro la Persia di quattro secoli innanzi. Invocò un temperamento: che il debito venisse saldato, ma gli interessi non esorbitassero dal tasso legale. I creditori, forti delle patrie influenze, non accettarono; i più ragguardevoli personaggi dell’aristocrazia romana gli si sferrarono contro, e l’affare rimase in tronco. Evidentemente, non tutti i governatori avrebbero nudrito gli scrupoli di Cicerone, e la sua prossima dipartita avrebbe risolto la vertenza in modo ben diverso di come egli aveva sperato[430].

Così, anche per volontà e per opera di uomini, periva la Grecia antica. Appiano, il più dedicato degli storiografi dell’età classica, narra come, durante la campagna d’Africa, a Cesare, attendato a piè delle ruine di Cartagine, fosse apparso in sogno un esercito infinito di doloranti, e come egli, destatosi di un tratto, coll’occhio ancora gravido di tanta simbolica visione, avesse affidato alle sue tavolette il

proposito di colonizzare Cartagine[431]. «Quell’esercito in lagrime», commenta una squisita anima di storico moderno (Amedeo Thierry), «quell’esercito, che nel sogno, reale o immaginario, implorava pietà, era l’esercito infinito delle nazioni conquistate»[432] Ricreare Cartagine, ricreare l’Italia, ricreare la Grecia, l’Asia, la Sicilia, l’Occidente, l’Oriente: ecco la grande riparazione, di cui Roma era debitrice alla civiltà umana. E fu il nobilissimo compito, che l’Impero raccolse, in espiazione, dalla Repubblica, e che mirabilmente eseguì.

N .

292 Su questa fase della politica romana cfr G F e C B, Roma antica, Firenze, Le Monnier, 1921, I, cap XI

293 Questa trasformazione dell’economia sociale romana, cui risponde una parallela rivoluzione spirituale in senso imperialistico, è stata per primo ed egregiamente messa in luce da G F nel vol I della sua Grandezza e decadenza dei Romani (Milano, Treves), di che la maggior parte dei suoi critici non si accorse. Il lettore può confrontare anche G. F e C. B, op. cit., cap. X.

294. P., 6, 17: «.... Tutte queste cose sono esercitate dal popolo e, per dir così, tutti sono legati ai guadagni e agli affari che ne derivano: alcuni geriscono per proprio conto le concessioni; altri stanno in società con costoro; altri garantiscono per i concessionari; altri, a nome di questi, impegnano, in concessioni e intraprese pubbliche, le loro sostanze....».

295. Cfr. C., De bello civ., 3, 3, 1-2; 5, 1-2; L., Phars., 3, vv. 181 sgg.

296. D. C., 48, 39, 2.

297. P., Anton., 62, 1.

298. I., op. cit., 68, 4.

299. C., Ad fam., 5, 20, 9.

300 C E , Il processo di Verre, Milano, 1895, pp 231 sgg e J C, La loi de Hiéron et les Romains, Paris, De Boccard, 1919, pp. 283 e passim.

301. C., In Verr. A. I, 18, 56; A. II, 1, 10, 27.

302 D C , 43, 9

303 De Imperio Cn Pomp , § 65

304 C , Pro Font , §§ 30 sgg e 33 sgg

305. J., B. J., I, 11, 2; Cfr. P, L’administration des provinces romaines sous la République, Paris, 1878, pp. 148, 167-69.

306. C, Il processo di Verre, 31-33; P, op. cit., 264 sgg.

307. Cfr. C., In Verr. A. II, 3, 32, 75.

308. D., 36, 3, 1-2; C., In Verr. A. II, 3, 32, 75.

309. In C., De Orat., I, 225.

310. C., De Prov. Cons., 12, 31.

311. Ad Q. fr., I, 1, 10, 33.

312. L., 45, 18, 4-5.

313. C. J, La Gaule romaine, IV (1913), 30 sgg.

314. C., De rep., 3, 9, 16.

315 S , Dom , 7; M, op cit , p 46; W, Beiträge zur Gesch d rom Weinbaues in Gallien und an der Mosel, Hamburg, 1901, pp. 3-5, 8.

316 M, op cit , 49-50

317 Cfr E B, Hist des chevaliers romains, Paris, 1873, II, 154 sgg

318 C , Ad fam , 13, 9, 3; 55, 1-2; 65

319 Ad fam , 5, 10, 1-2

320 Ad fam , 5, 10, 2

321 P, op cit , 144; cfr C , Pro M Font , 5, 11 sgg

322 C , Ad Q fr , I, 11, 32

323 Cfr T , Ann , 15, 21

324. In Verr. A. I, 14, 41.

325. P., 7, 16, 9; cfr. M, De l’organisation financière des Romains, 242-43; B, Achaia, in P-W, Realencyclopädie ecc., coll. 190-91, 194.

326. D, Sylloge Inscriptionum graecarum, n. 300; Eph. Epigr., I, pp. 278 sgg.

327. P., 7, 16, 9; cfr. D, Sylloge ecc., 242 (= C. I. G., 1543).

328. B, Achaia, in P-W, Realencyclopädie, I, col. 193.

329. M, Organisation de l’Empire, I, 105 sgg.

330. M, op. cit., I, 103; P, op. cit., 154 sgg.

331. T., Ann., 15, 45.

332. Cfr. C., Pro Balbo, 16, 35-36.

333. Cfr. M, op. cit., I, 104 sgg. Si vegga per altro ciò che fu fatto della libera Ambracia durante la Terza macedonica (L., 38, 43, 3; 42, 67, 9), allorchè la Grecia non era ancora divenuta provincia romana.

334. M, op. cit., I, 105 sgg.

335. S., 9, 1, 20.

336. M, op. cit., I, 309 sgg.

337. I, op. cit., I, 102.

338 Cfr l’esempio tipico di Chio (F C, Mémoire sur l’Ile de Chio, pp 300 sgg., in Questions historiques, Paris, 1893).

339 F C, La cité ant , p 457

340 C , In Verr A II, 1, 17, 44 sgg ; 18, 47-48; 5, 72, 184 sgg ; 48, 126 sgg Cfr H, Die Gesch Griechenlands unter d Herrschaft der Römer, Halle, 1866-75, I, 422-23; C, Il processo di Verre, Milano, 1896, 87 sgg.

341. C., In Pis., 35, 86; 87; 90; I, Pro Sest., 43: De prov. cons., 4, 6-7.

342 C , Pro Sest , 43, 93 sgg e In Pis , 40, 96; cfr De prov cons , 2, 3-4 e In Pis., 17, 40.

343. C., De prov. cons., 3, 5-6; 4, 6 sgg.; In Pis., 40, 96.

344 C , In Pis , 35, 86 e passim

345. C., De imperio Cn. Pompeii, 5, 13; Ad Att., 5, 16, 2.

346. C., Ad fam., 15, 1, 5. Circa la devastazione delle città libere greche, cfr. eziandio T., Ann., 15, 45; J., Sat., 8, vv. 98 sgg.

347. A., Mithr., 28.

348. C., De bello civ., 3, 4, 1.

349. C., op. cit., 3, 4, 2 e passim.

350. C., op. cit., 3, 103, 1.

351. C., op. cit., 3, 4, 2.

352. Cfr. l’Appendice alla monografia del K, De civibus rom. in provinciis imp. consist., Berolini, 1891, pp. 98 sgg. e tutto il volume di J. H, Les trafiquants italiens dans l’Orient hellénique, Paris, 1919.

353. K, op. cit., pp. 25 sgg.; H, op. cit., 193 sgg.

354. Cfr. J. G., XII, 2, 860 passim.

355. P, op. cit., 115-16.

356. Ad Att., 6, 2, 9; 5, 21, 12; 6, 1, 5.

357 Cfr G F, Grandeur et décadence de Rome (trad fr ), Paris, Plon-Nourrit, 1907, V, pp. 158 sgg.

358 T , Ann , I, 76 Circa la situazione in genere della Grecia nell’età di Roma repubblicana, cfr. eziandio H, op. cit., I, pp. 323-27, 334 sgg., 386 sgg., 416 sgg.

359. Su quanto segue cfr. M, Organ. pol. ecc., II, 52 sgg.; I., Org. fin. ecc., 237 sgg.; C, Il processo di Verre, pp. 60 sgg. e il recentissimo citato volume di J. C, La loi de Hiéron et les Romains.

360. C., In Verr. A. II, 3, 7, 18.

361. La difficoltà di fissare il numero delle colonie greche di Sicilia proviene dallo stato lacunoso delle nostre notizie circa la loro distruzione e le successive fondazioni. Cfr. P, Alcune osservazioni sulla storia e

sull’amministrazione della Sicilia durante il dominio romano (estr.), Palermo, 1888, pp. 108.

362. È stato motivo di vivace discussione (cfr. H, Storia della Sicilia, trad. it., III, p. 153, n. 33), se oggetto della locazione fossero la terra o le sue imposte La maggiore difficoltà della seconda ipotesi, che noi abbiamo implicitamente scartata, sta nel fatto, riconosciuto dai suoi medesimi sostenitori (H, op cit , III, 153), che le città in parola non avrebbero soggiaciuto a condizioni peggiori delle decumanae, mentre, quasi con certezza, erano state conquistate con la forza (cfr P, op cit , p 63)

Del resto, l’origine della questione ci sembra assai poco legittima C (In Verr A II, 3, 6, 13) parla espressamente di locazione del territorio (is ager a censoribus locari solet) e la restituzione del medesimo, cui poco prima egli aveva accennato, può benissimo intendersi come una vera e propria locazione, una delle tante bizzarre sedicenti forme di restituzione, di cui Roma soleva compiacersi.

363. M, Org. fin., 239-40.

364. C., In Verr. A. II, 3, 98, 227.

365. Cfr. C, op. cit., 86 sgg.

366 I, 106-07

367 C, op cit , 231 Del resto, nelle sue Verrine, C era costretto a concludere: «Se poi volete far credere che le mie accuse cadono su più di un pretore e interessano più di una provincia, non io paventerò la vostra difesa, ma mi dichiarerò patrocinatore di tutte le province». (In Verr. A. II, 3, 93, 217; cfr. 89, 207).

368. C., op. cit., A. II, 3, 63, 147.

369. I., op. cit., A. II, 3, 43, 102, 32; 75, 45, 106.

370. I., op. cit., A. II, 3, 10, 25.

371 C , In Verr A II, 3, 29, 70

372 I , op cit , A II, 3, 13, 33

373 I , op cit , A II, 3, 21, 53-54; 23, 57; 56

374 C , In Verr A II, 3, 42, 99; 37, 84 sgg ; 42, 100

375. C., In Verr. A. II, 3, 73-77, 170-79.

376. P, op. cit., 178-79.

377. C., In Verr. A. II, 3, 78, 181.

378. C., In Verr. A. II, 3, 81, 189; cfr. P, op. cit., 179-81.

379. C., In Verr. A. II, 3, 85, 196-97.

380. In Verr. A. II, 2, 53, 131; 56, 139.

381. C, Les impôts indirectes chez les Romains, Paris, 1882 (trad. it. in Bibl. storia econ., vol. V), 81.

382. C, op. cit., 77-78.

383. I., op. cit., 65-66.

384. M, Org. pol., II, 317.

385 Circa l’ordinamento finanziario della Sicilia, cfr anche H, op cit , III, 136 sgg.

386 L , 25, 31, 11; cfr H, op cit , III, 105-6

387 Cfr H, op cit , III, 110

388 L , 24, 39, 1 sgg

389 D , 23, 9, 5

390 P, op cit , pp 10-11; M, Org pol , II, 49

391 C, op cit , 66 sgg

392 C , In Verr A II, 2, 13, 32

393 C, op cit , pp 75-76

394. C., In Verr. A. II, 2, 49, 122.

395. I., op. cit., A. II, 2, 50, 124.

396. I., op. cit., A. II, 2, 53, 131.

397. C, op. cit., 116-18; H, op. cit., III, 272 sgg.

398. C., In Verr. A. II, 2, 13, 33.

399. Cfr. H, op. cit., III, 153 sgg.; C, op. cit., 109 sgg.

400. C., In Verr. A. II, 3, 51, 120.

401. Ibid., A. II, 3, 49, 117; 53, 124.

402. Ibid., A. II, 3, 18, 46, 47.

403. Ibid., A. II, 3, 26, 66.

404. M, Org. polit., II, 242.

405. H, op. cit., 45 sgg., 101 sgg., 160 sgg.

406 V M , 9, 2, 3; P , Sulla, 24, 5

407 Cfr C , Ad Q fr , 1, 14, 40; F J , A J , 16, 2, 2

408 P , Lucull , 20, 4

409 I , op cit , 20, 1-2; cfr A , Mithr , 63

410 I , op cit , 20, 2

411 Cfr C , Pro Flacco, 12, 27 sgg ; 15, 34 sgg ; 18, 42 sgg

412 A , De bell civ , 5, 5

413. Cfr. Ad fam., 13, 56, 1 sgg.; 65, 1 sgg. e passim; Ad Att., II, 16, 4.

414. Ad Q. fr., I, 1, 8-9, 25-26; 13-14, 39-40.

415. M, op. cit., 1, 114.

416. C, op. cit., 79-80.

417. H, Kreta, Göttingen, 1823-29, III, 506 sgg.

418. S., 10, 4, 9.

419. M, Org. pol., II, 429.

420. Noi troviamo infatti prelevata sui pascoli di Cirene la nota imposta di scriptura (M, Org. fin., 317).

421. R, Quaestiones de rebus Cyrenarum prov. rom., Frankebergae, 15.

422. M, Org. fin., 243: pagava, cioè, non la decima, ma un tributo fisso in danaro (stipendium).

423. S, 27, 48, ed. M (1895).

424. R, op. cit., 17-19.

425. R, op. cit., 52 sgg.

426. R, loc. cit.

427. P., Cato, 38, 1.

428. C., Ad Att., 5, 21, 12.

429. I., op. cit., 6, 1, 6; 2, 8.

430. Cfr. su Cipro, E, Kypros, Berlin, 1841, 1, 451 sgg.; B, Der Zinswucher d. M. Brutus, Berlin, 1898 (progr.); S, Der Zinswucher d. M. Brutus, Dortmund, 1900 (progr.).

431. A., Punic., 136.

432. Tableau de l’Empire romain, Paris, 1876, pp. 65-66.

CAPITOLO QUARTO.

FINIS GRAECIAE

Il mondo greco in sui primi dell’êra volgare.

Finora, noi siamo venuti indagando le conseguenze più dirette dei fatti o dei processi storici, a cui, nella fatale decadenza della Grecia antica, abbiamo assegnato una parte principale. Ma non è dagli effetti isolati di ciascuno, sibbene dalle molteplici, infinite, reciproche combinazioni, che il lettore deve attendersi spiegata la fine del Paese, di cui in queste pagine andiamo indagando le cause dell’ultima ruina.

Il regime a schiavi poteva essere sollecitato verso una rapida e benefica trasformazione; controbilanciati da altre influenze, gli effetti perniciosi dell’imperialismo e della guerra incessante potevano diventare motivi di prosperità, materiale e morale; il rivolgimento economico del mondo antico poteva ispirare, agli Elleni della Grecia classica, nuove audacie, ridestare le secolari, dormienti energie della razza; fin la conquista straniera poteva essere scossa o riparata. Ciascuna, insomma, delle cause, che abbiamo successivamente illustrate, poteva ritrovare, in sè o fuori di sè, un limite alla propria azione demolitrice. Ma questa doveva riescire completa ed insanabile, allorquando, come di fatto avvenne, il pericolo minacciò da tutte le parti, ed il popolo, che vi soggiacque, ne vide gli effetti più semplici e più immediati crescere di forza e di virulenza e suscitare e propagare nuove, interminabili serie di sciagure.

Quale adunque era la sorte, che tanto avverse fortune avevano procurata alla Grecia, negli anni, in cui, a forze unite, erano riescite a batterla in breccia come muraglia crollante? Quali furono, in una parola, le condizioni, morali e materiali, del mondo ellenico nell’ultimo secolo, o giù di lì, dell’êra cristiana, allorchè il processo di decadenza della Grecia può dirsi consumato?

Volgevano i primi lustri dell’Impero, la battaglia di Azio aveva segnato un termine all’orrore delle guerre civili, e il geografo Strabone, reduce da un mesto pellegrinaggio in molti dei Paesi, che avevano costituito il vario e vasto impero della civiltà ellenica, segnava sulle sue tavolette cerate quei ricordi, coi quali egli doveva tramandarci la più interessante illustrazione della Grecia antica[433].

L’Epiro, un tempo fiorente di uomini e di prodotti naturali, è adesso in massima parte deserto, e fra i villaggi rompenti le distese dei ruderi degli antichi centri cittadini, il silenzio pende fin sull’oracolo di Dodona, come ogni altra cosa, già spento. Deserte sono le montuose contrade fra la Macedonia, la Tessaglia e l’Epiro[434]; deserta la regione sacra dell’Olimpo, impero indisturbato di bande di malfattori[435]; deserte l’Atamania e la Dolopia[436]. L’Etolia e l’Acarnania sono traversate, anzichè da uomini, da branchi fuggiaschi di cavalli pascenti; e la gloriosa Ambracia, che Pirro aveva fatta capitale del suo regno, e i centri urbani limitrofi riescono a stento a formare una sola città.[437]. Tra le città focesi, mietute dalla sventura, la memoria di Delfo è testimonio eloquente del precipitare delle umane grandezze[438]. In Beozia, Tanagra, Tespia, Tebe sopra ogni altra, non sono più che borghi appena degni di menzione[439]. Dalle macerie dei borghi e delle antiche ridenti cittadine, l’Attica reca i segni dei tempi mutati. Il Pireo è un villaggio sparso di poche abitazioni[440] e visitato dagli stranieri solo a motivo delle sue mirabili collezioni artistiche, ma di cui è caso strano se qualche grande nave egizia si accinge a turbare le acque. La Messenia — la sempre infelice Messenia — non è più. Quello, a cui la crudeltà di Sparta non era riuscita, ha fatto il Destino onnipossente distruggitore d’ogni cosa: «il Paese è ora in grandissima parte

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