ARCHITECT ci 4100науката като работеща реалност Д-р Веселина Колева Токуда Болница София
Abbott Forum, Sofia/ Bulgaria Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
1
September 4, 2010
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
2
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
Инсталиран в клинична лаборатория на Токуда Болница през месец Декември 2009 година Инсталирани 67 Теста, с капацитет за още 162 Месечно извършва около 15000 анализа, от които 3000 имунометрични. Възможност за зареждане с реактиви в хода на работа на апарата, диалогов режим на софтуера, лесни процедури за поддръжка – само част от причините Architect ci 4100 да бъде предпочитан анализатор за работа
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
3
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
КОЛИЧЕСТВЕНО ИЗМЕРВАНЕ НА HBsAg : Приложение на съвременните технологии в рутинната практика Количествено измерване на HBsAg QT: “Прилагане на нови технологии в рутинната практика”
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
4
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност ARCHITECT HBsAg QT – Принцип на теста Хемилуминисцентен микрочастичков имунометричен тест за количествено определяне на HBsAg в човешки серум или плазма Твърда фаза с 2 моноклонални антитела Конюгат: Поликлонално антитяло
Cut off: 0.05 IU/ml Време до 1-ви резултат: 28 минути Капацитет : 100 теста на час
Sample with HBsAg
Anti-HBs Coated magnetic microparticle
(G145R) “ Нова генерация тест”- подобрена чувствителност и възможност за откриване на повече мутации, вкл. Thr123-Ala
Commitment To Science May 2010
After washing, the pre-triger solution is added
After washing, the acridinium labelled goat anti-HBs is added
Acridinium labelled Ab-Ag microparticle complex
Откриване на най-честите мутации
Trigger solution is added
Company Confidential © 2010 Abbott
HBsAg binds to magnetic microparticle
5
The Ab-Ag bond is broken and the magnetic microparticle are pulled to the magnet
The generated light is measured without microplarticle interference
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Детекция на мутациите ARCHITECT HBsAg H B sA g M utante
A R C H IT EC T
Tipo Selvagem
+
Thr 126 > Ser
+
Gln129>His
+
M et133>Leu
+
A sp144>Ala
+
Gly145>Arg
+
Thr126>Ser + Gly145>A rg
+
P ro142>Leu + Gly145>Arg
+
P ro142>Ser + Gly145>Arg
+
A sp144>Ala + Gly145>Arg
+
ARCHITECT HBsAg: Открива HBsAg мутации
Мутация gly-145-arg
Технология за антиген-антитяло свързване с два епитопа на антигена с цел сигурна детекция на най-често съобщаваните мутации на HBsAg
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
6
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност ARCHITECT HBsAg QT - Калибрация 2 Калибратора (CAL 1= 0.50 IU/ml и CAL 2= 250.00 IU/ml) Калибрационен обхват от 0 до 250 IU/ml Протокол за мануално разреждане – до 125 000 IU/ml Негативен контрол(0.00 IU/ml), две положителни контроли (0.25 IU/ml and 175.00 IU/ml) Чувствителност : 99.52% (418/420) или ≤ 0.05 IU/ml Специфичност : 99.87% (6001/6009) Възпроизводими резултати: %CV : 7,2- 11,9 (според данни от брошурата на производителя)
WHO
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
7
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност ARCHITECT HBsAg стандартна крива
ARCHITECT HBsAg QT (RLU) アーキテクト・
Cutoff: 0,05 IU/mL
< 0.05 IU/ml ,
10,000,000
≥ 0.05 IU/ml, 1,000,000 100,000
Лот1 Лот2 Лот3
10,000 1,000 100 0.01
0.10
1.00
10.00
100.00
1,000.00
抗原濃度 (IU/mL) HBsAgHBs Концентрация (IU/mL) Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
8
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
HBsAg Сравнение на аналитичната чув
HBsAg subtype ad (ng/mL)
CIA HBsAg
MEIA HBsAg
CLEIA HBsAg
CMIA HBsAg
RIA HBsAg
HBsAg subtype ay (ng/mL)
CIA HBsAg
MEIA HBsAg
CLEIA HBsAg
CMIA HBsAg
RIA HBsAg
PHA-01 ad (2.5)
0.93
8.26
9.4
0.90
2.00
PHA-11 ay (2.4)
0.85
6.72
2.3
0.67
1.60
PHA-02 ad (1.5)
0.50
5.12
5.2
0.48
1.30
PHA-12 ay (1.3)
0.54
4.11
1.2
0.34
1.10
PHA-03 ad (1.0)
0.35
3.92
3.6
0.31
1.10
PHA-13 ay (0.9)
0.40
3.22
1.0
0.24
0.90
PHA-04 ad (0.8)
0.28
3.40
2.9
0.26
1.00
PHA-14 ay (0.8)
0.36
3.00
0.7
0.20
0.80
PHA-05 ad (0.6)
0.20
2.84
2.3
0.19
0.80
PHA-15 ay (0.6)
0.32
2.54
0.6
0.15
0.60
PHA-06 ad (0.5)
0.12
2.61
1.8
0.15
0.70
PHA-16 ay (0.5)
0.30
2.38
0.5
0.13
0.70
PHA-07 ad (0.4)
0.11
2.40
1.5
0.12
0.50
PHA-17 ay (0.4)
0.27
2.32
0.5
0.10
0.70
PHA-08 ad (0.3)
0.11
2.15
1.2
0.08
0.50
PHA-18 ay (0.3)
0.19
2.11
0.4
0.08
0.60
PHA-09 ad (0.2)
0.10
1.99
0.8
0.06
0.60
PHA-19 ay (0.2)
0.19
1.82
0.3
0.06
0.50
PHA-10 ad (0.1)
0.07
1.57
0.5
0.03
0.50
PHA-20 ay (0.1)
0.18
1.57
0.2
0.03
0.40
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
9
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
ARCHITECT HBsAg QT (IU/ml) HBsAg QT (IU/mL) アーキテクト・
ARCHITECT HBsAg QT – Линейност след разреждане 100000 10000 1000 100
Sample 1 Sample 2 Sample 3
10 1 0.1
Cutoff
0.01 0.001 0.0000001
0.000001
0.00001
0.0001
0.001
0.01
希釈倍率
Фактор на разреждане Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
10
0.1
1
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност
Може ли HBsAg сероконверсията да стане нов стандарт при провеждане на клинични проучвания и в клиничната практика?
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
11
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Количествено определяне наHBsAg – Ключови терапевтични точки Хистологично Anti-HBs+ подобрение Загуба на Anti-HBe+ HBsAg
Подобрена преживяемост
Загуба на HBeAg Загуба на HBV DNA
ВРЕМЕ Терапевтичните точки се различават при антивирална и имуномодифицираща терапия
Commitment To Science Company Confidential 12 May 2010 © 2010 Abbott Prof. Marcellin, France Communication/ presentation “Clinical strategies to CHB – matching the treatment to patients”
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Abbott Architect HBsAg QT - Клинично Приложение 1. За мониторинг в хода на ранна или остра фаза на инфекция с Хепатит В. “В ранните стадии на остър Хепатит В, количественото определяне на HBsAg може да бъде полезно, защото ранен спад в титъра на HBsAg е индикация за възстановяване, а костантно високата концентрация на HBsAg насочва към хронифициране на инфецията.” Rani Moucari et al., Hepatology 2009, Vol 49, 1151 – 1159
3. За терапевтичен мониторинг като допълнение към изследването на HBV DNA (определяне на изчистването на HBsAg). “HBsAg QT би трябвало да стане рутинен маркер при проследяване на пациентите на продължителна терапия и аз горещо препоръчвам изследването му на всеки 6 месеца” Prof Dr H. Wedemeyer, president of EASL, Germany 2009
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
13
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност 2007 AASLD Pegasys (PEG) Симпозиум
Изводи от работна среща : Интерферон следва да е първа линия терапия за постигане излекуване на пациента,последван от антивирусна терапия, която може да е с продължителност до края на живота. Едно 2-4 log понижение на HBsAg концентрацията предсказва отговор към интерферон и излекуване на инфекцията. В такива случаи терапията следва да бъде удължена. Серумните нива на HBV DNA не са предиктор за излекуване на инфекцията при пациенти на антивирусна или интерферонова терапия. Тест на избор за мониториране на лекувани с интерферон пациенти е Architect HBsAg QT. Abbott Diagnostics работи в тясно сътрудничество с Roche Pegasys Pharma за разработване на нови диагностични
алгоритми
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
14
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност ARCHITECT HBsAg Quantitative Клиничен ход на хроничен хепатит В при пациенти, пациенти лекувани с Lamivudine 350
HBsAg HBV-DNA HBeAg ALT
25,000
Lamivudin
20,000
4,000
15,000
10,000 2,000 5,000
ARCHITECT HBsAg QT (IU/mL)
6,000
5,000
4,000
300
250
3,000
200
Lamivudin 150
2,000
100 1,000 50
-
0
90
180
270
-
0
90
day
180
day
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
15
270
IMx HBeAg (S/N) ALT (Ｉ U/L) HBV-DNA(LGE/10^4)
30,000
HBsAg HBV-DNA HBeAg ALT
IMx HBeAg (S/N^100) ALT (IU/L^100) HBV-DNA (LGE/10^4)
ARCHITECT HBsAg QT (IU/mL)
8,000
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Роля на количественото определяне на HBsAg
Лечение с PEG IFN +/- LMV Week 12 HBsAg on PEG IFN alfa 2a ± LMV
HBV DNA
HBV DNA
≤ 10000 copies/ml
≤ 400 copies/ml
HBsAg loss
6 months
4 years
6 months
4 years
6 months
4 years
≤ 1500 IU/mL
59%
39%
39%
31%
7%
23%
> 1500 IU/mL
34%
12%
9%
8%
2%
4%
HBeAgnegative
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
16
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Проучвания, оценяващи клиничната приложимост на количествения HBsAg тест Публикации
Ключови резултати
Werle-Lapostolle et al., Gastro 2004;126:1750-1758
Намаляването на cccDNA по време на антивирусната терапия корелира с намаляването на серумния титър на HBsAg (Monolisa AgHBs).
Kohmoto M et al., J Med Virol 2005;75:235-239
Мониторирането на серумната HBsAg концентрация с ARCHITECT HBsAg QT, в допълнение към измерване нивата на HBV DNA, е полезно за оценка отговора към Lamivudine и за ранно откриване на резистентност.
Chan H et al, Clin Gastro Hepatol 2007;5:1462-68
Количествения серумен HBsAg (ARCHITECT HBsAg QT) е добър заместителен маркер за cccDNA и интрахепатална HBV DNA. Ниски изходни нива на HBsAg (10,000 IU/ml ) са предиктор за добър отговор.
Deguchi M et al., J Virol Meth 2004;115:217-222
Серумните нива на HBsAg измерени с ARCHITECT HBsAg QT корелират добре с нивата на серумната HBV DNA.
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
17
ARCHITECT ci 4100 - науката като работеща реалност Проучвания, оценяващи клиничната приложимост на количествения HBsAg тест – част II Публикации
Ключови резултати
Ozaras R et al., Dig Dis Sci 2008;53(11):2995-8
Серумните нива на HBsAg измерени с ARCHITECT HBsAg QT корелират добре с нивата на серумната HBV DNA.
Manesis E et al., Antiviral Therapy 2007:12:73-82
Това проучване използва адаптиран качествен тест за HBsAg, ADVIA Centaur, за количествена оценка на HBsAg. Серийни измервания на HBsAg могат да са полезни за предсказване изчезването на HBsAg.
Gish R et al., Am J Gastro. 2007;102:1-6.
В тази студия е използван адаптиран метод за HBsAg с полистиренови частици. При повечето пациенти резултатите не корелират тясно със серумните нива на HBV DNA ,но въпреки това дългосрочно отговарящите на терапия имат значимо поизразено понижение в серумните нива на HBsAg спрямо неотговарящите.
Brunetto et al., 2008 Annual Meeting of EASL
Пациенти, лекувани с peginterferon са изследвани с ARCHITECT HBsAg тест. HBsAg нива <10 IU/ml в края на терапията и понижение на нивата след старт на терапията >2 log IU/ml са сигнификантно свързани с продължителен клирънс на HBsAg за 3 години след края на терапията. Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
18
БЛАГОДАРЯ ЗА ВНИМАНИЕТО!
Tokuda Winter.jpg
Commitment To Science May 2010
Company Confidential © 2010 Abbott
19