5.4.2 - Parametri relativi alla TLC Le prestazioni della TLC ed i suoi risultati analitici possono essere espressi attraverso una serie di parametri caratteristici: 1. Selettività: è la capacità del sistema di separare i componenti della miscela; dipende dalla diversa distanza percorsa dai componenti della miscela durante l'eluizione, e viene espressa dal fattore di ritenzione (RF – Ritenction Factory) o di ritardo RF, definito come:
dove di è la distanza percorsa sulla lastra dall'i-esimo componente della miscela rispetto alla linea di semina e del è la distanza percorsa dall'eluente (fronte del solvente). Pertanto RF < 1 A volte si definisce un fattore di ritenzione relativo Rrel, facendo riferimento ad una sostanza della miscela scelta come standard di riferimento:
dove dST è la distanza percorsa dallo standard, RFi è il fattore di ritenzione del componente i-esimo ed RFST è il fattore di ritenzione dello standard. Il fattore di ritenzione relativo viene usato quando è necessario, per completare la separazione, spingere la corsa del solvente oltre il bordo superiore della lastrina e quindi non potrebbe più essere individuato più il fronte del solvente. A tale scopo la lastrina viene incisa vicino al bordo superiore e parte della fase solida viene asportata: in questo modo l’eluente arriva all’incisione e qui evapora, ma continua a trascinare le sostanze che ancora non hanno raggiunto l’incisione, permettendo la separazione di sostanze che hanno RF molto simili. Con questa tecnica è come se la lastrina utilizzata avesse una lunghezza maggiore anche se, naturalmente, le sostanze che migrano maggiormente vanno perse all’interno dell’incisione. In questo caso Rrel potrà essere minore o maggiore di 1, a seconda della posizione sulla lastrina della sostanza scelta come standard.
Il fattore di ritenzione, per una data sostanza ed in generale per il sistema cromatografico, dipendono da vari fattori, tra cui: natura della fase stazionaria (composizione chimica, porosità, granulometria, ecc.), spessore dello strato, temperatura, composizione della fase mobile 2. Efficienza: è la capacità del sistema a mantenere compatta la macchia fino al termine dell'eluizione; talora accade infatti che durante l'eluizione le macchie diffondano lateralmente, diventando larghe e con i bordi sfumati che rendono difficile la misurazione del RF. Questo fenomeno dipende dall'omogeneità della fase stazionaria, che dovrebbe essere impaccata in modo uniforme e con particelle perfettamente sferiche Nel disegno a fianco sono confrontate due macchie cromatografiche: quella ideale ha una forma circolare, quella irregolare manifesta deformazioni dovute ad una scarsa efficienza del sistema cromatografico, che ha causato un trascinamento non omogeneo della sostanza da parte dell’eluente. 3.
Risoluzione: è la capacità del sistema cromatografico di produrre macchie ben separate e quindi non sovrapposte, nemmeno parzialmente
ITIS “G.C.FACCIO” - Dipartimento di Chimica - 2010
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