Rosco Diagnostica 1.
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Comparar la zona de inhibición de la tableta de Meropenem 10 µg con la zona de inhibición de cada tableta de Meropenem 10 µg + tablatea de inhibidor. Si todas las zonas están dentro de 3mm de las demás, registrar el organismo como no representante de actividad KPC ni MBL. Mida la zona de inhibición alrededor de Meropenem 10 µg (MRP10) y compare con la zona alrededor de Meropenem 10 µg + Cloxacillin (MRPCX). Si la zona para la tableta combinación es ≥ 5mm que la zona del disco simple y la zona alrededor de Meropenem + Boronic es >= 4mm, el organismo demuestra sólo actividad AmpC. AmpC es probablemente hiper-producida y/o asociada con pérdidad de porina y/o bombas de eflujo. Mida la zona de inhibición alrededor de Meropenem 10 µg (MRP10) y compare con la zona alrededor de Meropenem 10 µg + Ácido Borónico (MRPBO) y Meropenem 10 + Cloxacillin (MPRCX). Si la zona para MRPBO es ≥ 4mm y la zona alredeodor de MRPCX es <5mm que el disco simple y los valores de los pasos 2) y 4) son < 5 mm, el organismo demuestra sólo actividad KPC. Si la zona alrededor de MRPBO es ≥ 4mm que la zona alrededor de MRPCX el organismo es KPS positivo. Medir la zona de inhibición alrededor de Meropenem 10 µg (MRP10) con respecto de Meropenem 10 µg + DPA (MRPDP). Si MRPDP – MRP10 es ≥ 5 mm y los valores de los pasos 2) y 3) son < 5mm, el organismo es positiva para la actividad Metallo-β-Lactamasa solamente. Es posible que un organismo sea positivo para más de un mecanismo de resistencia. Si esto sucede, por ejemplo, si el valor del paso 4) es ≥ 5mm y en el paso 3) es también ≥ 4 mm, entonces el organismo es positivo para ambas actividades MBL y KPC. Sin embargo en la mayoría de los casos MBL puede enmascarar KPC dificultando la detección de la presencia de actividad MBL. Ninguna combinación de mecanismos de resistencia es imposible y más de un Kit de Confirmación puede ser testeado en la misma placa. Utilice la tabla 1 como asistente para la interpretación. Procedimientos aislados para KPC y MBL en el mismo aislamiento han sido descriptos en Grecia y Alemania. Rosco Diagnostica ha desarrollado una combinación triple de tabletas: Meropenem + Phenylboronic + Dipicolinic que permite la identificación de ambas enzymas (zonas de inhibición comparadas con Meropenem + DPA and Meropenem + Phenylboronic, respectivamente) El disco triple (68912) está disponible para la detección de KPC+MBL en el mismo aislado.
CONTROL DE CALIDAD: A pesar que ROSCO Diagnostica A/S produce, los discos de difusión (tabletas) más estables, es necesario realizar controles de calidad. Los mismos, deben ser realizados con un organismo como mínimo para demostrar la reacción positiva y un organismo como mínimo para demostrar la reacción negativa. Las zonas de inhibición obtenidas utilizando las tabletas de combinación más la tableta carbapenem sola contra el control negativo (i.e. E. coli ATCC 25922), debe estar entre los 3 mm. Como control de calidad positivo, deben utilizarse cepas de: Klebs. pneumoniae NCTC 13438, KPC positivo Klebs. pneumoniae NCTC 13439, MBL positivo Klebs. pneumoniae ATCC BAA-1705, KPC positivo Klebs. pneumoniae ATCC BAA-2146, MBL positivo
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