Metabolitos secundarios en callos de café
Objetivo
Optimizar las condiciones de cultivo in vitro para maximizar la producción de los metabolitos secundarios en los callos de café.
Introducción
Este manual cientí co muestra los pasos a para la producción de metabolitos secundarios en callos de café tipo
Explantes esterilizados
Hojas jóvenes de planta de café tipo on tejido vascular. Placa petri con segmentos de la hoja de 1 x 1 cm y auxina 2,4-D para provocar la desdiferenciación de las células.
Suspención celular
Se forman los callos de café y se colocan en la placa petri. Separar 0.1 gr de callo de café. Colocarlo en el erlenmeyer que tiene un medio líquido.
Escalamiento celular
Tomar el erlenmeyer y colocarlo 3 meses en el agitador orbital. Se da el escalamiento celular, se muestra primero a 1 semana del proceso y luego 1, 2 y 3 meses.
Resultado
Filtrar y lavar
Filtrar los callos de café. Lavar 3 veces con agua destilada. En esta etapa los callos se convierten en una biomasa.
Clasificación de biomasa
Biomasa no friable, no se usa, es de color café se oxida y se endurece. Biomasa friable, se usa y es de color amarillo naranja esta no se endurece. Se colocan 6 biomasas friables de 1 gr en la placa petri.
Inducción de estrés
Placa petri con 6 gr de biomasa. Métodos CP y Texeira, 25 placas c/u se colocan 5 placas petri para cada longitud de onda (blanca, oscuridad, roja, azul, roja/azul) son 45 días por cultivo con 24 horas de luz u oscuridad.
Se procuden metabolitos secundarios en callos de café ( ) en respuesta a un factor de estrés o inductor (longitud de onda).
Ilustración y Diseño Je Guzmán, 2024
Proyecto de Andrés Gatica y Gustavo Solano 2024 Universidad de Costa Rica. Escuela de