Revista FECYT Ciencias y Tecnología, Vol. 30, No. 2, 2016.
Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud Carrera de Bioquímica y Farmacia
“Control de medicamentos” “Determinación de Ácido ascórbico en pimiento rojo por HPLC de fase inversa”
Integrantes: • •
Patricia Álvarez Cada Jonathan Pesantez Herrera
Docente: Bioq. Carlos García
Revista FECYT Ciencias y Tecnología, Vol. 30, No. 2, 2016.
Curso: QUINTO AÑO “B”
Fecha: 21 de Enero del 2016
2015-2016
Revista FECYT Ciencias y TecnologĂa, Vol. 30, No. 2, 2016.
Revista FECYT Ciencias y TecnologĂa, Vol. 30, No. 2, 2016.
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Jonathan M. Pesantez; Patricia E. Álvarez
Determinación de Ácido ascórbico en pimiento rojo por HPLC de fase inversa Revista FECYT. Ciencias Y Tecnología, vol. 30, núm. 2, 2016, pp. 74-81 Fundacion Español de Ciencia y Tecnología El Oro- Ecuador
Disponible en: http://www.fecytciencienciatecnologia.org=17071417
Determinación de Ácido ascórbico en pimiento rojo por HPLC de fase inversa Patricia Elizabeth Álvarez Cada; Jonathan Manuel Pesantez Herrera
RESUMEN En el siguiente artículo se presenta el método cromatografico por medio de la fase inversa para determinar el contenido de ácido ascórbico presente en el pimiento rojo. Para lo cual el método por HPLC nos permite la extracción del principio activo (vitamina), su purificación y sobre todo la separación de sus componentes. El método por HPLC en fase inversa esta validado por estándares de referencia para alimentos y control microbiológico.
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Palabras clave: Ácido Ascórbico; HPLC; validación ABSTRACT In the following article the chromatographic method is presented by means of reverse phase to determine the content of ascorbic acid present in red peppers. For which the HPLC method allows the extraction of the active ingredient (vitamin), its purification and especially the separation of its components. The method by reverse phase HPLC validated by this reference standards for food and microbiological control. Key words: Riboflavin; HPLC; validation. INTRODUCCION La vitamina C se la considera una de los potentes antioxidantes que presentan algunas funciones como absorber el hierro en el organismo, previene infecciones y además en la cicatrización de heridas así como en la formación de constituyentes del colágeno. El pimiento es, una bomba de vitamina C
su contenido para cada
100 gramos supera
simultáneamente a las frutas tales como el de la naranja o kiwi, por lo tanto hemos de esperarnos que el pimiento rojo tiene casi 3 veces más de vitamina C (139mg) que frutas como la naranja (50mg). El método analítico a desarrollarse debe validarse y así mismo confirmar que los resultados que se den sean por si confiables. Todos los métodos deberán ser codificados y evaluados por la USP (Farmacopea de los Estados Unidos) para lo cual cada monografía deberá cumplir con las condiciones evaluadas en cada monografía. Nuestro objetivo de la presente investigación es presentar como los resultados correspondientes al porcentaje de la cantidad de ácido ascórbico (vitamina c) presentes en el pimiento rojo. Los parámetros que se analizaron son el control microbiológico y las pruebas biológicas. MATERIAL Y MÉTODOS Reactivos y materiales • • • • • • •
Hidroxido de Potasio Etanol Metanol Pirogalol(antioxidante) Éter dietílico, tertbutil metil éter, n-hexano (solvente). Butilhidroxitolueno Sulfato de sodio
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•
Agua destilada
Materiales • • • • • •
Vaso de precipitación 500 ml Pipeta volumétrica Agitador Espatula Soporte mechero
Muestra: Pimiento Rojo Equipo • •
HPLC Balanza analitica
Método La actividad de la vitamina C se realiza por medio de pruebas biológicas) en la cual se desarrollan los procedimientos de cromatografía de gas que incluían una saponificación, extracción del material no saponificable, remoción de las interferencias mediante precipitación seguida por una cromatografía, luego la conversión de la vitamina C .Un procedimiento muy largo y laborioso. Cuando se determinaba la vitamina C en la muestra, se agregaba el antioxidante como estándar interno y viceversa. La HPLC ofrece actualmente el método de análisis más adecuado para la determinación de vitamina C en un amplio rango de alimentos incluso a bajos niveles de concentraciones naturales.
RESULTADOS Para lograr tener al analito listo para su análisis que se encuentra en el pimiento rojo, se propuso un procedimiento muy complejo para la determinación de ácido ascórbico por medio del equipo de HPLC. En este se consideró la metodología adecuada .Se realiza un proceso de saponificación para la extracción de componentes. No obstante, fijando este intervalo de tiempo como el seleccionado para análisis posteriores 139 mg
Fig de control de ácido
1.Selectividad calidad del
ascórbico.Análisis del pimiento rojo
DISCUSIÓN
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Las vitaminas C (ácido ascórbico) se determinó mediante el equipo HPLC, La mayoría de los procedimientos de análisis están utilizando una etapa de saponificación antes de la extracción con un solvente orgánico adecuado. Se saponifican preferentemente bajo nitrógeno utilizando una mezcla de hidróxido de potasio acuoso, etanol o metanol, agua y con la adición de un antioxidante como ácido ascórbico, pirogalol o BHT. Mediante la observación de la lectura del equipo de HPLC de la vitamina C se comprobó que el pimiento rojo presenta un rango adecuada en su intervalo.Siendo útil para ser tomado en cuenta en la elaboración de cualquier producto farmacéutico.en la cual tiene casi 3 veces más de vitamina C (139mg) que otros alimentos cítricos y con mejores propiedades curativas.
CONCLUSIONES El método analítico y cromatografico para determinar la concentración de principio activo (vitamina C) fue de 139 mg . Para tener una referencia más sobre la actividad antioxidante total no se encuentra suficientes contenidos en manera general no hay mucha información con relación a un estudio relevante en el pimiento rojo.
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el:
16
de
Enero
de
2016.]
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Este trabajo fue recibido el 17 de Enero del 2016 y aceptado para ser publicado el 24 de Marzo del 2017. Dirigir la correspondencia a: Bioq. Carlos García Universidad Técnica de Machala #91 - Oficina 1204 – El Oro El Oro- Ecuador Tel. /Fax: (56-1) 2939089
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