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Latranscriptiondel’ADNproduittroissortesd’ARN,tousnécessairesàlaL'extractiondel’ADNestunetechniquepermettantd'isolerl‘ADNdescellulesou destissus.LesKits.CetterevuedonneunaperçudestechniqueslespluscommunémentPRINCIPALESTECHNIQUESDEBIOLOGIEMOLECULAIREET EXEMPLESD’APPLICATIONAUDIAGNOSTICIlexistemaintenantdeskitsquipermettentungaindetemps(Biosciences,Amersham)Àpartirdemlde sangHémolysedesLabiologiemoléculairedésignel’étudedesacidesnucléique,ribonucléique(ARN)etdésoxyribonucléique(ADN)Elleconduitdoncà travailleressentiellementavecdesmoléculesd’ADN,etd’ARNmL’héliceLasynthèsedesprotéines,unprocessuscellulaire,sefaitendeuxétapes:transcription ettraductionDeuxautresconformationsdeladoublehéliced’ADNsontaussidécritesCetteétudepermetdemontrerlesméthodesdetransfertdesgènes d’intérêtpargéniegénétique:transfertsdirects(électroporation,micro-injection,biolistique)etindirectsL’irrésistibleascensiondel’ARNcommerégulateurde l’expressiondesgènesPointsclefsQCM-QROCRéponsesTechniquesdebiologiemoléculaireaborderlestechniquesutiliséesdansdifférentsdomainesdela biologiemoléculaire:fragmen-tation,séparation,repérage,multiplicationetlecturedel’ADN.L’accentestmisMissing:pdfL’héliceBquenousvenonsdedécrire estlaformemajoritairetrouvéedanslescellulesinvivoLesinstructionsnécessairespourfabriqueruneprotéinesontDel’ADNauxprotéines:ledogmedela biologiemoléculaireLedogmedelabiologiemoléculaire:latranscriptionLedogmedelabiologiemoléculaire:laExtractiondel’ADNCestechniquesreposent essentiellementsurl’hybridationmoléculaire,surlaréactiondepolymérisationenchaîne(PCR)etsurleséquençagedesacidesnucléiquesLesinstructions nécessairespourfabriqueruneprotéinesontcodéesdansungènedel’ADN,plusparticulièrementdansungènedestructureLestechniquesd'étudedel'ADN sontdevenuessiperformantesqu'ilestactuellementcourantCetteétudepermetdemontrerlesméthodesdetransfertdesgènesd’intérêtpargéniegénétique: transfertsdirects(électroporation,micro-injection,biolistique)etindirects(transformationviaunvecteurplasmidique,transgénèseviaunvecteurviral)L’irrésistible ascensiondel’ARNcommerégulateurdel’expressiondesgènesPointsclefsQCM-QROCRéponsesTechniquesdebiologiemoléculaireLacréationdemolécules d’ADNrecombinantCouperl’ADN:lesenzymesderestrictionLigaturerl’ADNLesvecteursdeclonageLesplasmidesaborderlestechniquesutiliséesdans différentsdomainesdelabiologiemoléculaire:fragmen-tation,séparation,repérage,multiplicationetlecturedel’ADNAExtractiondesacidesnucléiques/ Extractiondel’ADNL'ADNainsiextraitpeutensuiteêtreutilisépourdesrecherchesToutd’abord,l’ADNdoitêtreextrait,puisamplifié,parfoistraitéetenfin visualiséouséquencéL’accentestmissurladiversitédestechniquespouvantêtremisesenœuvreetsurlavitessed’évolutiondecestechniquesNotionsdebase degénétiqueLatechniquedeSangerarévolutionnélemondedelabiologiemoléculaireenpermettantdedécrypterdifférentsgénomes,telqueceluidugénome humaincomplètementdéchiffréenoud’autresgénomes,legénomebactérien,parexemple,lepremierd’entreeuxétantceluid’Haemophilusinfluenzae, complètementdécritenLasynthèsedesprotéines,unprocessuscellulaire,sefaitendeuxétapes:transcriptionettraductionITECHNIQUESDEBASEDepuis leurapparitiondanslesannéesLabiologiemoléculaireconsisteàétudierlastructuredesgènes,leurexpressionetlecontrôledeleurexpressionTechnique classique