Mycobacterias

Mycobacterias AUTORES DOCENTES MICROBIOLOGIA

CLAUDIA FAJARDO URIBE MARCELA GOMEZ GARZON ADRIANA JIMENEZ ROJAS PATRICIA TRUJILLO ROMAN

Práctica # 13 MYCOBACTERIAS OBJETIVO DE LA PRÁCTICA: Estudiar las características del género Mycobacterium Conocer la morfología microscópica del genero Mycobacterium en Coloración de Zielh Neelsen Conocer los medios de cultivo selectivos utilizados en el laboratorio para el aislamiento de Mycobacterium tuberculosis

INTRODUCCION Los microorganismos pertenecientes al Género Mycobacterium son bacilos aerobios, no formadores de esporas, inmóviles y muy delgados con una estructura celular característica ya que su pared contiene un alto contenido de peptidoglicolipidos: acido meso-diaminopimelico, ácido glutámico, ácido murámico, glucosamina, alanina, arabinosa y galactosa que junto con los ácidos micólicos y los lípidos libres proveen una barrera hidrofobica fuerte para la mayoría de los colorantes.

El ácido micólico constituye per se un importante factor de virulencia ya que permite a la bacteria sobrevivir de forma intracelular mediante la inhibición de la fusión fagosoma-lisosoma.

Debido a esta estructura especial de la pared celular, es difícil teñir las bacterias con las coloraciones frecuentemente usadas en el laboratorio de rutina, como la coloración de Gram, ya que estas bacterias son parcialmente impermeable a la penetración del colorante y resisten la decoloración con alcohol acidificado (3% de acido clorhídrico). Esta propiedad, que depende de su pared celular, se denomina ACIDO ALCOHOL RESITENCIA y permite diferenciarla en el laboratorio de otros géneros.

El género Mycobacterium tiene otra característica importante y es que en general, crecen lentamente en los medios de cultivo debido a que poseen un tiempo de generación superior a 24 horas y a que su pared hidrófoba impide la entrada óptima de nutrientes. Las colonias son macroscópicamente visibles después de quince días de incubación. M. fortuitum y M. chelonae son la excepción porque son de crecimiento rápido (5-7 días). Las colonias varían de color desde el amarillo, naranja y rosado debido usualmente a sus pigmentos carotenoides.

Existen más de 71 especies de Mycobacterium reconocidas, asociadas a infecciones en humanos y animales, se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza y habitan en el suelo y en el agua.

Para clasificar a las micobacterias se tiene en cuenta la velocidad de crecimiento, morfología de la colonia, la producción de pigmento y el tipo de patología que presentan.

Taxonomía de las micobacterias:

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M. chelonae-M. abscessus group o

M.chelonae

o

M.abscessus

o

M.inmunogenum

M. smegmatis o

M.semgmatis

o

M.goodii

o

M.wolinskyi

M. fortuitum o

M.fortuitum

o

M.peregrinum I y II (M.senegalense)

o

M.fortuitum third biovariant complex

M. tuberculosis complex o

M.tuberculosis

o

M.bovis

o

M.africanum

o

M. caprae

o

M.microti

o

M.canettii

o

M.pinnipedii

M. leprae

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M. avium complex o

M. avium (serovars 1-6,8-11,21) 

M.avium subsp.avium, M.avium subsp. paratuberculosis, M.avium subsp.silvaticum, M.chimaera,M colombiense, M vulneris, M marselleinse, M timonense, M bouchedurhonense.

o

M. intracellullare (serovars 7,12-20,22-28)

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M.scroful aceum complex ( antiguos serovars 41-43 del M.avium complex)

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M.kansasii

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M.marinum

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M.ulcerans

Mycobacterium tuberculosis: es el principal agente causal de la tuberculosis. Accede a los alveolos pulmonares por inhalación de los microorganismos en gotitas respiratorias. Primariamente la TBC es una infección pulmonar pero hasta en un tercio de los casos puede diseminarse a otros órganos.

El diagnóstico de TBC pulmonar se realiza por la demostración de bacilos ácido- alcohol resistente, (BAAR) en preparaciones de muestras respiratorias coloreadas con tinción de Ziehl-Neelsen. Además puede realizarse cultivo en medios selectivos agar base de huevo o albumina estos son: Ogawa-Kudoh, Lowestein Jensen.

Mycobacterium leprae: es el agente causante de la Lepra. Fue descrito por hansen en 1873. La lepra es una enfermedad infecciosa crónica producida por M. leprae. Esencialmente es una enfermedad de los nervios periféricos, pero también afecta la piel y otros órganos (mucosas, ojos, testículos, tracto respiratorio alto, músculos y huesos).

Este microorganismo es netamente intracelular y además el tiempo de generación se ha estimado en 30 días por lo cual no se puede cultivar in vitro (medios sin células). El diagnóstico de la lepra se hace con base en 1) examen clínico, 2) presencia de M. leprae en las baciloscopías de muestras de linfa obtenidas en mucosa nasal, lóbulo de la oreja y lesión cutánea, 3) presencia de M.leprae en las biopsias de tejido, 4) Reacción intradérmica a la lepromina (permite clasificar el tipo de lepra)

ACTIVIDADES

1. Observe las baciloscopias coloreadas con Zielh Neelsen e identifique morfol贸gicamente los BAAR.

BACILOSCOPIA DE ESPUTO POSITIVA

BACILOSCOPIA DE ESPUTO NEGATIVO

2. Observe cuidadosamente un cultivo positivo de Mycobacterium, en un medio selectivo utilizado en el laboratorio.

3. Observe los BAAR en una baciloscopia realizada a un paciente con Lepra.

Visualice los empaquetamientos de bacilos AAR, denominados globias.

Mycobacterium leprae