UNIVERSIDAD DEL QUINDIO SISTEMA INTEGRADO DE GESTIÓN
Código: M.IN.04.01.F.01 Versión: 01 Fecha: 16/05/2012 Página 1 de 14 FORMATO PRESENTACIÓN DE PROYECTOS
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN PRESENTADO BAJO LA MODALIDAD:
**INVESTIGACION EN CLASE**
Facultad : CIENCIAS DE LA SALUD
Programa: MEDICINA
OBTENCION Y CRECIMIENTO BACTERIANO APARTIR DE MUESTRAS DE GRIFOS
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DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO SAN JUAN DE DIOS DE LA CIUDAD DE ARMENIA QUINDIO. Armenia-Quindío, mayo 15 de 2012
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FICHA RESUMEN
Título: OBTENCION Y CRECIMIENTO
BACTERIANO APARTIR DE MUESTRAS DE
GRIFOS DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO SAN JUAN DE DIOS DE LA CIUDAD DE ARMENIA QUINDIO. Investigadores: Maria Isabel Ossa García Facultad: Ciencias de la Salud Total de Investigadores: 1 Entidad: Universidad del Quindío Lugar de Ejecución del Proyecto: Universidad del Quindío Ciudad: Armenia Duración del Proyecto: 1 Semana Resumen: Las Infecciones Nosocomiales son contagios que se desarrollan dentro de una unidad hospitalaria, donde se ha encontrado que estas infecciones están relacionadas con microorganismos que pueden desarrollar resistencia a los antibióticos. Pueden presentarse en los pacientes a las 48 a 72 horas luego de su ingreso al servicio prestador de salud es 3
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decir que se adquieren dentro de la estancia en el hospital y no es el motivo de ingreso hospitalario. La inoculación puede darse microorganismos
patógenos
cuando hay un contacto con una colonia de
establecidos
en
una
instalación
hospitalaria;
Los
microorganismos más frecuentes en las infecciones nosocomiales son: Sthaphylococcus aureus, Klebsiella spp, Enterobacter spp y Eschericha coli. En Colombia se ve altamente afectado el área de la UCI por este tipo de infecciones, mostrando una tasa de morbilidad y mortalidad bastante grande. Por lo anterior va a tomar y realizar el crecimiento bacteriano Tipo de Proyecto: Experimental
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FICHA DEL PROYECTO
TITULO: OBTENCION Y CRECIMIENTO BACTERIANO APARTIR DE MUESTRAS DE GRIFOS DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO SAN JUAN DE DIOS DE LA CIUDAD DE ARMENIA QUINDIO. INVESTIGADOR PRINCIPAL: FACULTAD:
Ciencias de la Salud
Aceptamos asumir COMO INVESTIGADORES la responsabilidad por la conducta científica del proyecto y entregar los informes escritos requeridos. Estudiantes participantes en el proyecto Nombre Maria Isabel Ossa García
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Programa Académico Medicina
Identificación 1094915643
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PROYECTO DE INVESTIGACIÓN PRESENTADO BAJO LA MODALIDAD: INVESTIGACION EN CLASE a. Título del Proyecto: OBTENCION Y CRECIMIENTO BACTERIANO APARTIR DE MUESTRAS DE GRIFOS DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO SAN JUAN DE DIOS DE LA CIUDAD DE ARMENIA QUINDIO. b. Nombre de los Investigadores: Investigador principal:
MARIA ISABEL OSSA GARCIA
Tutor:
LUIS MIGUEL ARREDONDO LEONARDO PADILLA
c. Objetivos 1. General: Realizar el crecimiento de microrganismos de muestras tomadas en la superficie de un grifo en el Hospital Universitario San Juan de Dios de la Ciudad de Armenia Quindío. 2. Específicos 1. Realizar técnicas de conteo de microrganismos. 2. Determinar la carga microbiana de los grifos hospitalarios como factor potencial en enfermedades nosocomiales. 3. Confirmar las fuentes de agua como posible causa de enfermedades intrahospitalarias.
d. Estado General del Tema. Marco Teórico: Las infecciones asociadas a cuidados de la salud, conocidas también como infecciones nosocomiales (IN), son un problema relevante de salud pública de gran trascendencia económica y social y constituyen un desafío para las
instituciones de salud y el personal médico responsable de su atención. Las IN se asocian con altas tasas de morbilidad y mortalidad, lo que se traduce no sólo en un incremento en los días de hospitalización y los costos de atención, sino también en
un incremento en DALYS
(años de vida ajustados de
discapacidad) en la población. Debido a que las infecciones nosocomiales son complicaciones en las que se conjugan diversos factores de riesgo que en su mayoría pueden ser susceptibles de prevención y control, resulta fundamental la evaluación continua sobre los programas y políticas establecidas para su control a nivel nacional. En México se ha estimado que la frecuencia de infecciones en unidades hospitalarias varía desde 2.1 hasta 15.8%. En las unidades de cuidados intensivos (UCI) la situación es más preocupante: un estudio realizado en 895 pacientes de 254 UCI en México encontró que 23.2% de éstos tenía una infección nosocomial.
La neumonía fue la
infección más común (39.7%),
seguida de la infección urinaria (20.5%), la de herida quirúrgica (13.3%) y la del torrente sanguíneo (7.3%) (Secretaria de salud México D.F 2011). De acuerdo a los informes entregados por las unidades primarias generadoras de datos (UPGD), el número de casos de infección nosocomial notificados por los hospitales de Cundinamarca en el primer trimestre de 2007; fueron 64 casos de endometritis por parto y 23 casos de endometritis pos parto. Sabemos entonces que las infecciones nosocomiales son de distribución mundial y que se presentan en todos los niveles hospitalarios de alto y bajo nivel de complejidad. Son muchos los microorganismos responsables de infecciones extrahospitalarias, pero a nivel intrahospitalarios los más frecuentes son: Sthaphylococcus aureus, Klebsiella spp, Enterobacter spp y Eschericha coli (Bonilla 2008). Tenemos que el mayor índice de infecciones nosocomiales se presentan por adquisición de microorganismos en diferentes lugares de los Hospitales y que la presencia de los microorganismos está generalmente asociada a antibiótico resistencia y que de igual manera la circulación de patógenos intrahospitalarios permite la infección facilitada por medio de implementos hospitalarios tal y como lo demuestra Navarrete (2004) la cual identifica posibles nichos de
microorganismos nosocomiales, realizó un plan de estudio, que involucró al paciente (secreción traqueal) y los sistemas de ventilación, humidificadores, tubo endotraqueal, tubo en Y, mangueras del sistema de ventilación. Se estudió por microscopia de barrido las mangueras de ventilación para precisar características del material. Se observó, al cabo de 7 días, tiempo de recambio establecido por el Comité Nacional de IIH, colonización por A. baumannii, Pseudomonas aeruginosa y Klebsiella pneumoniae, agentes asociados a NAVH en 2 pacientes. Se estudió el circuito de ventilación mecánica perteneciente a un paciente con NAVM tanto preesterilización como postesterilización,
aislándose
en
ambos
cultivos
microorganismos
multiresistentes. Al analizar porciones del circuito por microscopia de barrido se observó un desgaste de las mangueras con múltiples grietas con formas cocoides y bacilares incluidas en la trama. Al estudiar diferentes circuitos pre y posesterilización, se observó en 2 circuitos cultivos positivos con posterioridad a la esterilización en oxido de etileno. Nuestros datos dan énfasis a la necesidad de incorporar en forma rutinaria dentro de las normas de control de IIH las relacionadas a material reutilizable. Aunque numerosas fuentes pueden causar infecciones nosocomiales como hemos descrito anteriormente, tal vez la mas olvidada, pero no poco importante fuente de patogenos nosocomiales es el agua del hospital y sus reservorios, tales como grifos, duchas, cisternas, sanitarios, lavamanos, etc. En un estudio realizado en el hospital universitario de Dublin, donde se realizo un conteo de microrganismos hecho en 15 grifos de diferentes partes del hospital,demostró una alta contaminación por bacterias heterótrofas aerobicas, el promedio de conteo de bacterias fue de de 482.5 ufc/ mL en grifos de agua caliente, y 5022 ufc/mL, en grifos de agua fría, en donde se probo la efectividad del Ecasol para minimizar la carga microbiana presente en estos grifos.(Boyle MA, Irlanda 2012). Varias bacterias no coliformes se pueden replicar en agua relativamente pura, incluyendo
Pseudomonas
aeruginosa,
Burkholderia
cepacia,
Serratia
marcescens, Acinetobacter calcoaceticus, Flavobacterium meningosepticum, Aeromonas hydrophilia, y algunas mycobacterias no tuberculosas. Reportes de altas concentraciones de estos y otros microrganismos que deberían ser de
menos de 1 coliforme por 100 Ml, en ocasiones son fuentes de infecciones nosocomiales, dado que los equipos son enjuagados con agua potable, dando como resultado infecciones en equipos otológicos (por Mycobacterium chelonae), materiales para discectomias (contaminados con Mycobacterium xenopi), y equipos endoscópicos (contaminados por P. aeruginosa). Numerosos reportes de infecciones nosocomiales demuestran la necesidad de hacer controles seriados sobre la cantidad de microrganismos presentes y maximizar el tratamiento que se debe tener con el agua, para minimizar el impacto económico y de salud que acarrean este tipo de infecciones que pueden ser prevenibles en la mayoría de los casos.
e. MATERIALES Y MÉTODOS Para alcanzar los objetivos propuestos en este trabajo se utilizara la siguiente metodología.
1.1 Esterilización: Se utilizará un autoclave en la cual serán esterilizados los hisopos con los cuales tomaremos las muestras, los beakers y las cajas de Petri en los cuales prepararemos el medio de cultivo. Los materiales anteriores se envolverán en papel y cinta para autoclave, que servirá como marcador del proceso de esterilización. 1.2 Preparación De Un Medio De Cultivo Se preparará un medio de cultivo enriquecido debido a que no se conocen las bacterias que se harán crecer, de esta manera podremos ofrecer todos los
requerimientos necesarios para el crecimiento de todas las bacterias presentes en la muestra tomada del grifo del HUSJD. Revisar el método de preparación del medio de cultivo. 1. Pesar la cantidad de medio (si el preparado contiene agar debemos añadirlo a una Concentración de 15 g/l.) Y rehidratarlo con agua destilada, hidratar la suspensión hasta que se mezcle homogéneamente, retirar el agitador y cubrir. 2. Autoclavar la botella sin cerrar totalmente el tapón de rosca. 3. Sacar del autoclave, enroscar del todo el tapón e introducir la botella en un baño a 40ºC al menos durante 30 minutos. 4. Distribuir el medio en las placas de Petri que están estériles dentro de una campana de flujo laminar o en las proximidades del mechero, flameando bien la boca de la Botella para evitar las contaminaciones. 5. Dejar que el medio solidifique a 4 ºC, se etiqueta se guarda. 1.3 Toma De La Muestra Se utilizarán hisopos esteriles previamente previamente autoclavados para la toma de las muestras y con los elementos de protección correspondientes (guantes, tapaboca, gorro y bata.) Con un hisopo esteril, previamente humedecido en caldo peptonado de cultivo esteril, se tomará la muestra rotando el hisopo sobre si mismo y recorriendo la superficie a tomar la muestra, después de esto se pasará directamente al caldo para incubarlo y luego pasarlo al medio de cultivo correspondiente. 1.4 Siembra En Medio De Cultivo Por Agotamiento 1. Se tomará el asa curva, y se pondrá en la llama del mechero hasta observar que se pone roja, posteriormente se dejará enfriar directamente en el medio de cultivo.
2. Del caldo peptonado se tomara una pequeña cantidad de la muestra con ayuda del asa cuerva, la cual anteriormente se ha esterilizo y poder realizar así la siembra en el medio del cultivo.
3. Para realizar la siembra en el medio de cultivo, se levantara la tapa de la caja de Petri y se extenderá el inoculo en forma de estrías muy juntas, en una pequeña área de la superficie de la placa del agar, teniendo cuidado de no realizar mucha presión para evitar daños en el agar. Se repetirá el proceso rotando la caja de Petri, pero tocando un extremo de la siembra anterior que sea accesible para ser tocado por el asa en la próxima extensión
1.5 Conteo De Microorganismos Se realizara inicialmente un recuento microrganismos por medio de la cámara de Neubauer, con una muestra de cultivo diluida y un volumen pequeño conocido, se contaran los MO en los cuadrados de la cámara y se realizará el promedio
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES:
ACTIVIDADES Esterilización Preparación del método de cultivo Toma de la muestra Siembra del medio de cultivo Conteo de micro organismos
I
DIAS II
X
III X
X X X X
RESULTADOS ESPERADOS directos e indirecto •
Recolectar la muestra de grifos del Hospital Universitarios San Juan de Dios de la Ciudad de Armenia.
•
Brindar informacion sobre la presencia de microorganismos patogenos.
•
Disminuir los costos en al tratemiento de enfermedades que pueden sufrir complicaciones intrahospitalarias.
•
Mejorar la calidad de la asintencia hospitalaria.
PRESUPUESTO: Descripción
Valor Unitario
Guantes esterilizados Tapabocas hisopos de algodón Autoclave Papel craft Papel de filtro Espátulas Cinta termolábil Agua destilada Nevera M de cultivo (agar sangre Asas de siembra Mecheros Alcohol Pinzas Material de vidrio
$
800,00
5
$
4.000,00
$
400,00
5
$
2.000,00
$
500,00
20
$ 10.000,00
$ 15.000,00
5
$ 75.000,00
$
300,00
5
$
1.500,00
$
7.000,00
1
$
7.000,00
$
1.000,00
5
$
5.000,00
$ 15.000,00
1
$ 15.000,00
$
5.000,00
1
$
$ 10.000,00
24
$ 240.000,00
$ 60.000,00
1
$ 60.000,00
$
1.000,00
9
$
$ 10.000,00
7
$ 70.000,00
$ 10.000,00
1
$ 10.000,00
$
1.000,00
6
$
$
1.000,00
40
$ 40.000,00
Agua destilada
$ 1.500,00 $ 87.000,00
1 1
$ 1.500,00 $ 87.000,00
Agua peptonada
Bibliografía
Cantidad
Valor Total
5.000,00
9.000,00
6.000,00
Maritza Navarrete C, Mario Calvo A. Fatiga del material de los sistemas de ventilación mecánica como factor de riesgo en neumonía asociada a ventilación mecánica. Revista Chilena de Infectologia. 2004; 21 (1): 9-16 ISSN 0716-1018
Bonilla Cardejas Ana Jasbleidi, Perez Mantilla Jaisinio. “Aislamiento y caracterización fenotípica de microrganismos presentes en sala de partos de un hospital de primer nivel de cundinamarca” Director: Esperanza Silva Montoya. Universidad Javeriana Facultad de ciencias, Bacteriologia Bogotá D.C 2008
“Medicion de la prevalencia de infecciones nosocomiales en hospitales generales de las principales instituciones publicas de salud”. Informe documental extenso. Secretaria de salud. 2011 Mexico D.F
Boyle MA, O'donnell MJ, control of bacterial contamination of washbasin taps and output water using ecasol: a one-year study. The journal of hospital infection. 2012 apr;80(4):288-92. Epub 2012 feb 29. Anaissie EJ, Penzak SR, the hospital water supply as a source of nosocomial infections: a plea for action. Archives of internal medicine. 2002 jul 8;162(13):1483-92. Hr bagheri,1 r shafiei,2* f shafiei. Isolation of acanthamoeba spp. From drinking waters in several hospitals of iran. Iranian society of parasitology & tehran university of medical sciences. 2010 june; 5(2): 19–25.