Corporación Universitaria Empresarial Alexander Von Humboldt Facultad de ciencias de la salud Programa de medicina 2018-I ________________________________________________________________________________
CUANTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
Autores: Mejía Bermúdez Leidy Johanna Bioquímica Semestre II
Introducción La cuantificación de proteínas es una técnica de gran precisión para la obtención de información concreta sobre los diferentes mecanismos de cada una de las proteínas que se desea estudiar, ya sea para realizar diagnósticos, con fines científicos, para resaltar sus utilidades y limitaciones. A lo largo del escrito iremos mostrando cada uno de los métodos de cuantificación mas usados para la determinación de las ya mencionadas proteínas. ¿Qué son proteínas? Las proteínas constan de cadenas largas de subunidades llamadas aminoácidos. Como su nombre lo indica, cada aminoácido contiene un grupo amino (NH2) en un extremo de la molécula, y un grupo carboxilo (COOH) en el otro extremo. Hay alrededor de20 diferentes aminoácidos, cada uno con estructura y con propiedades químicas distintas, que se usan para formar proteínas. Métodos de cuantificación de proteínas Absorbancia ultravioleta (UV) a 280 nm (rango: 0.1-100 ug/ml) Los aminoácidos aromáticos tirosina y triptófano le dan a las proteínas su característico espectro de absorción ultravioleta (UV) a 280 nm. Fenilalanina y puentes disulfuro también pueden contribuir a la absorción en esa longitud de onda, aunque ligeramente. Este método es simple y requiere de un volumen de muestra extremadamente pequeño ya que los nuevos espectrofotómetros emplean un sistema de retención de muestra durante la medición. Sin embargo, la muestra proteica debe encontrarse pura y no contener componentes no proteicos con el mismo espectro de absorción, tales como ácidos nucleicos contaminantes(1). Se debe conocer la secuencia exacta de aminoácidos de la proteína analizada y se debe calcular el coeficiente de absorción específico de esa proteína previo a la
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