CULTIVO DE MICROOGANISMOS VEGETALES EN CÁMARAS HUMEDAS

UNIDAD EDUCATIVA “JULIO ISAAC ESPINOSA OCHOA”.

Alamor-Loja Ecuador.

Proyecto de cultivo de microrganismos vegetales en cámaras húmedas.

NOMBRE: Lisbeth del Cisne Jumbo Mendoza.

CURSO: Tercero B.G.U. “A”.

DOCENTE: Cecilia Ramírez.

FECHA DE REALIZACIÓN: 20-08-2019.

AÑO ACADEMICO: 2019-2020.

Proyecto de cultivo de microrganismos vegetales en cĂĄmaras hĂşmedas.

2

ÍNDICE 1

PORTADA...........................................................................................................................1

2

TÍTULO...............................................................................................................................2

3

ÍNDICE................................................................................................................................3

4

INTRODUCCIÓN...............................................................................................................4

5

OBJETIVOS........................................................................................................................5 5.1

OBJETIVO GENERAL...............................................................................................5

5.2

OBJETIVOS ESPECÍFICOS.......................................................................................5

6

JUSTIFICACIÓN.................................................................................................................6

7

MARCO TEÓRICO.............................................................................................................7 ¿QUÉ ES UN MICROORGANISMO?........................................................................7

7.2

¿QUÉ ES MICROBIOLOGÍA?....................................................................................8

7.3

¿QUÉ SON CÁMARAS HÚMEDAS?........................................................................9

7.4

¿A QUÉ SE LLAMAN REACTIVOS ?.......................................................................9

7.5

¿CÓMO SE PREPARÓ CADA UNO DE LOS REACTIVOS?.................................10

7.6

HONGO CERCOSPORA SP.....................................................................................10

7.7

HONGO MARSONIA...............................................................................................12

8

7.1

METODOLOGÍA..............................................................................................................13 8.1

MÉTODO EXPERIMENTAL....................................................................................13

8.2

MÉTODO DESCRIPTIVO........................................................................................14

8.3

TÉCNICA DE OBSERVACIÓN DIRECTA...............................................................16

8.4

TÉCNICA DE OBSERVACIÓN DE LABORATORIO..............................................16

8.5

RESULTADOS...........................................................................................................17

9

CONCLUSIONES..............................................................................................................19

10

RECOMENDACIONES....................................................................................................20

11

REFERENCIAS/ BIBLIOGRAFÍAS.................................................................................21

12

ANEXOS...........................................................................................................................22

3

INTRODUCCION. Los estudiantes de Tercero de Bachillerato paralelo “A” realizamos un proyecto escolar el cual permitió observar de una forma directa la aparición de microorganismos en distintas hojas con enfermedades que fueron asignadas a cada uno de los grupos dentro del laboratorio.

Por medio de este proyecto escolar vimos el tipo de microorganismo que contaminó las hojas asignadas a cada una de las cámaras húmedas, además observamos que tipo de hongo o bacteria creció y se desarrolló en ellas y si este microorganismo es fitopatógeno.

Por otra parte, nosotros vamos a adquirir conocimientos por medio de este proyecto escolar realizado con las cámaras húmedas, observando los cambios que se presentaron en las hojas que estaban infestadas con hongos y bacterias, sus cambios físicos como el cambio de coloración, su textura y suavidad. Además, todos pudimos aprender a identificar el microorganismo que encontramos en las hojas su nombre y sus características.

4

OBJETIVOS 5.1.

OBJETIVO GENERAL

Aplicar técnicas de investigación científica que nos ayuden a identificar qué tipo de microorganismo encontramos en las hojas infestadas por distintos hongos y diferentes bacterias.

5.2. 

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Identificar el tipo de hongo o bacteria que infectó a las hojas en cada una de las cámaras húmedas.



Describir las diferentes características encontradas en cada una de las hojas infestadas con hongos y bacterias.

5

JUSTIFICACION Al realizar esta investigación, los que conformamos el Tercero de Bachillerato paralelo “A” pudimos observar las distintas características presentes en el proyecto escolar. Por lo tanto, conoceremos los distintos cambios que se presentaron las hojas que estaban afectadas por hongos y bacterias.

Sabemos que, un microorganismo es un ser vivo o un sistema biológico, que solo puede visualizarse con el microscopio. Son organismos dotados de individualidad (unicelulares) que presentan, a diferencia de las plantas y los animales superiores, una organización biológica elemental.

Además, pudimos aprender un poco más sobre la investigación científica, así mismo, se trata de utilizar las distintas técnicas de investigación y nosotros pudimos observar si es verídico o si es falso mediante la técnica de observación directa a través de la manipulación y descripción de cada resultado que obtuvimos con las hojas enfermas cuando las observamos a través del microscopio.

Así mismo, nosotros utilizaremos el microscopio para identificar el tipo de microorganismo que se desarrolló su nombre y sus características que pudimos identificar en cada una de ellas para su posterior análisis.

6

MARCO TEORICO 7.1.

¿QUÉ ES UN MICROORGANISMO? Un microorganismo también llamado microbio en griego significa “ser vivo

diminuto” éste es un ser vivo o un sistema biológico, que solo puede visualizarse con el microscopio. Son organismos dotados de individualidad (unicelulares) que presentan, a diferencia de las plantas y los animales superiores, una organización biológica elemental. La disciplina científica que estudia los microorganismos es la Microbiología.

Además, el concepto de microorganismo es operativo y carece de cualquier implicación taxonómica o filogenética, dado que engloba organismos unicelulares heterogéneos,

no

relacionados

evolutivamente

como bacterias (procariotas), protozoos (eucariotas,

entre

sí,

tales

algunos filum de algas)

y hongos unicelulares. Incluye también entidades biológicas acelulares de tamaño ultramicroscópico (visibles con microscopio electrónico) como virus y priones, que también se incluyen en el campo de estudio de la Microbiología.

Asimismo, algunos microorganismos son patógenos y causan enfermedades a personas, animales y plantas, algunas de las cuales han sido un azote para la humanidad desde tiempos inmemoriales. No obstante, la inmensa mayoría de los microbios no son en absoluto perjudiciales y bastantes juegan un papel clave en la biosfera al proporcionar oxígeno (algas y cianobacterias), y, otros, descomponer la 7

materia orgánica, mineralizarla y hacerla de nuevo accesible a los productores, cerrando el ciclo de la materia.

7.2.

¿QUÉ ES MICROBIOLOGÍA? La microbiología es la ciencia encargada del estudio y análisis de los microorganismos, seres vivos pequeños no visibles al ojo humano también conocidos como microbios. Se dedica a estudiar los organismos que son sólo visibles a través del microscopio: organismos procariotas y eucariotas simples. Son considerados microbios todos aquellos seres vivos microscópicos, estos pueden estar constituidos por una sola célula (unicelulares), así como pequeños agregados celulares formados por células equivalentes (sin diferenciación celular); estos pueden ser eucariotas (células que poseen envoltura nuclear) tales como hongos y protistas; y procariotas (células sin envoltura nuclear) como las bacterias. Sin embargo la microbiología tradicional se ha ocupado especialmente de los microorganismos patógenos entre bacterias, virus y hongos, dejando a otros microorganismos en manos de la parasitología y otras categorías de la biología.

7.3.

¿QUÉ SON CÁMARAS HÚMEDAS? Definimos como cámara húmeda de laboratorio a un sistema cerrado capaz de

mantener una atmósfera saturada de humedad bajo condiciones estables de temperatura.

Además, una cámara húmeda es un sistema capaz de reproducir una atmósfera saturada de humedad relativa con un punto de rocío tal, que a la temperatura de ensayo se produce la condensación del vapor de agua existente en el interior.

8

7.4.

¿A QUÉ SE LLAMAN REACTIVOS? Un reactivo es una sustancia o compuesto añadido a un sistema para provocar una

reacción química, o añadido a probar si se produce una reacción.

También, en química orgánica, el término "reactivo" denota un ingrediente químico (un compuesto o mezcla, típicamente de moléculas orgánicas inorgánicas o pequeñas) introducido para causar la transformación deseada de una sustancia orgánica.

Además, en preparaciones comerciales o de laboratorio, el grado reactivo designa sustancias químicas que cumplen con los estándares de pureza que garantizan la precisión científica y la fiabilidad del análisis químico, las reacciones químicas o las pruebas físicas. Las normas de pureza para los reactivos son establecidas por organizaciones como ASTM International o la American Chemical Society. Por ejemplo, el agua con calidad de reactivo debe tener niveles muy bajos de impurezas como los iones de sodio y cloruro, sílice y bacterias, así como una resistividad eléctrica muy alta.

7.5.

¿CÓMO SE PREPARÓ CADA UNO DE LOS REACTIVOS? 

PRIMER REACTIVO: HIPOCLORITO AL 5% Ubicar en la probeta asignada a cada uno de los grupos de numeración 100ml añadir hasta el 50% (50ml) de agua proveniente de la botella y luego añadir 5% (5ml) de cloro con mucho cuidado ya que ésta es una sustancia peligrosa si no es tratada con precaución, después de añadir el cloro procedemos a llenar otra vez de agua hasta llegar a los 100ml y como resultado obtendremos el hipoclorito al 5%.

9



SEGUNDO REACTIVO: HIPOCLORITO AL 10% Enjuagamos la probeta que utilizamos anteriormente para elaborar el primer reactivo hasta que este limpio y procedemos a realizar el segundo reactivo primero llenamos de agua de la botella a la probeta hasta llegar a 90ml y luego de que lo hayamos hecho procedemos a llenar con el cloro los 10ml que faltan hasta llegar a 100ml y así obtendremos el reactivo de hipoclorito al 10%.

7.6.

HONGO CERCOSPORA SP

Manchas foliares causadas por Cercospora sp.

A medida que la enfermedad progresa las lesiones se multiplican, coalescen y provocan la desecación total de la hoja afectada. Con tiempo húmedo aparecen sobre las lesiones puntuaciones negras y micelio grisáceo, especialmente en el envés de la hoja, que corresponden a los conidióforos portadores de las conidias del hongo, constituyendo

los

órganos

de

multiplicación

y

reproducción.

Epidemiología La enfermedad causada por Cercospora sp., se desarrolla mejor en tiempo cálido y con alta humedad relativa. A temperatura favorable la infección tarda unas 16 horas.

Síntomas El primer síntoma es una decoloración amarillenta en la superficie posterior de la hoja, la cual después se expande para formar una lesión café rodeada por una aureola amarilla. Cuando la humedad es alta, se presenta una esporulación del hongo que va de negro a gris en la superficie de la hoja. Esta enfermedad se conoce a veces como “mancha negra de la hoja” 10

por la esporulación oscura del hongo. Cuando la enfermedad es severa, las lesiones se unen y causan el colapso de los tejidos de la hoja. Esta enfermedad se ha confundido anteriormente con la Mancha foliar causada por Fulvia fulva por las similitudes en sus síntomas.

Imagen de la cámara R1:

7.7.

HONGO MARSONIA

Marsonia, o "enfermedad de mancha negra", es una enfermedad fúngica muy común en el rosal. Por lo general, comienza en junio y puede continuar durante todo el verano.

El hongo responsable, Marssonina rosae, desarrolla un micelio dentro de las hojas y tallos del rosal, causando manchas en las hojas. Se multiplica gracias a las esporas que se dispersan por el viento o el agua (escorrentía, salpicaduras): la enfermedad es contagiosa.

11

Síntomas y daño

La Marsonia es muy fácil de reconocer: manchas negras o marrones, más o menos circulares, a veces convergentes, aparecen en las hojas, a veces incluso en los tallos de las rosas. El follaje se vuelve amarillento y finalmente cae: a fines de junio, la rosa puede ser completamente deshojada. El daño es principalmente de orden estético; la Marsonia rara vez causa la muerte de su huésped, pero la rosa, debilitada por la caída de sus

hojas,

florece

menos

(es

especialmente

aburrida

para

los

rosales).

Tenga cuidado, la Marsonia se puede confundir con la antracnosis.

Imagen de la cámara R2:

12

METODOLOGÍA. 8.1.

MÉTODO EXPERIMENTAL.

El método experimental implica la observación, manipulación de las hojas enfermas que presentaban hongos y bacterias en nuestro proyecto escolar, viendo los cambios que se dieron en las hojas infestadas de hongos o bacterias.

Además, cada una de las hojas fue introducida en las cámaras húmedas siguiendo varios criterios y condiciones, como resultado pudimos analizarlas detenidamente en el microscopio observando los micelios encontrados en ellas.

Los materiales que utilizamos para realizar este proyecto escolar son:              8.2.

2 tarrinas transparentes con tapa.

1 botella de agua sellada.

1 tijera nueva.

1 rollo de papel de cocina.

1 sachet de cloro.

1 porta y cubre objeto.

5 palillos de dientes Fundas para la basura.

Guantes.

Mascarilla.

1 marcador permanente.

3 vasos precipitados.

1 probeta.

MÉTODO DESCRIPTIVO.

El proyecto escolar tuvo resultados casi notorios y en algunos grupos no obtuvieron los resultados esperados ya que no hubo la presencia de micelios en sus hojas, en

13

cambio, en otros grupos si hubo la presencia de micelios en sus hojas infestadas de hongos o bacterias.

 PROCEDIMIENTO: 1. Todos los estudiantes se ponen la debida protección, es decir, ponerse los guantes y la mascarilla.

2. Preparar las cámaras húmedas.

2.1.

Primero abrimos la tarrina 1 y recortamos con ayuda de la tijera dos círculos, ubicándolos uno en la base y otro en la tapa para luego cerrarla.

2.2.

Realizamos el mismo procedimiento con la segunda tarrina y la tapamos.

3. Con el gotero asignado a cada grupo saturar las dos cámaras húmedas poniendo de 8 a 10 gotas de agua en el papel de cocina de la base y en la tapa hasta que ésta se encuentre saturada en las dos cámaras húmedas.

4. Preparar los reactivos.

4.1.

En la probeta de 100ml preparamos la solución de hipoclorito al 5% (agua y cloro) donde le ponemos 50ml de agua y 5ml de cloro después llenamos hasta llegar a 100ml con el agua.

4.2.

En la probeta de 100ml preparamos la solución de hipoclorito al 10% (agua y cloro) donde le ponemos 50ml de agua y 10ml de cloro después llenamos hasta llegar a 100ml con el agua.

5. Llenamos con los reactivos dos vasos precipitados hasta llegar a la mitad y el resto del reactivo lo botamos en el lavabo.

6. En el tercer vaso precipitado solo lo llenamos con agua de la botella hasta llegar a la mitad.

7. Lavar las muestras.

7.1.

Lavar la primera muestra con el reactivo de hipoclorito al 5% con ayuda de una pinza o con la mano y luego sacarla.

14

7.2.

Seguimos lavando la primera muestra con el segundo reactivo de hipoclorito al 10% con la ayuda de la pinza o de nuestra propia mano y luego la sacamos.

Introducimos la primera muestra en el tercer vaso precipitado que

7.3.

solo contiene el agua y la dejamos reposar por tres minutos allí y luego la procedemos a sacar.

7.4.

Realizamos el lavado a la segunda muestra primero en el primer reactivo (hipoclorito al 5%) y después en el segundo reactivo (hipoclorito al 10%) y luego procedemos a introducirla en el agua por tres minutos para que repose.

8. Introducimos las muestras en sus cámaras correspondientes y luego de ubicarlas dentro de ellas procedemos a taparlas muy bien.

9. Etiquetamos cada una de las cámaras húmedas con ayuda del marcador permanente en el que escribimos R1 (primera cámara húmeda) y R2 (segunda cámara húmeda) además del número del grupo y los nombres de todos los integrantes.

10. En los días siguientes revisamos la cámara húmeda R2 y saturamos la cámara si hace falta en la base y en la tapa ya que esta cámara se encuentra en temperatura ambiente.

11. Con ayuda del palillo de dientes raspar el micelio (lana) luego que hayan pasado las 72 horas y la ubicamos con mucho cuidado en el porta objeto luego de eso le añadimos una pequeña gota de agua y después procedemos a ponerle encima el cubre objeto.

12. Observamos la muestra a través del microscopio observando su forma y además tomamos fotografías del micelio para su posterior análisis.

8.3.

TECNICA DE OBSERVACION DIRECTA.

15

Observamos que las hojas infestadas de hongos y bacterias que estuvieron 72 horas en las cámaras húmedas presentaron cambios físicos como coloración, tamaño, forma y su textura que fueron visibles en las dos muestras.

Con ayuda del microscopio que se nos fue asignado observamos la muestra a través de él para poder observar el micelio su forma y si éste estaba tabicado o no.

8.4.

TÉCNICA DE OBSERVACIÓN DE LABORATORIO Los estudiantes de tercero de bachillerato pudimos observar con ayuda del

microscopio los hongos que infestaron a las hojas que estaban enfermas las cuales fueron asignadas a cada uno de los grupos, es decir, tuvimos la oportunidad de observar a través del microscopio dos hongos que encontramos en las cámaras húmedas.

En la cámara R1 pudimos observar un hongo que infestó a la hoja el cual se llama Cercospora sp cambiando la coloración de la hoja de verde a naranja. En cambio, en la segunda cámara R2 pudimos observar con ayuda del microscopio un hongo que enfermó a la hoja cambiando sus tonalidades de verde a amarillo y manchas circulares de color café ese hongo se llama Marsonia.

Utilizamos instrumentos de laboratorio como el microscopio que se asignó a cada uno de los grupos del proyecto los cuales observaron a través de éste los dos distintos hongos que infestaron las hojas de cada una de las cámaras húmedas. Además, utilizamos mas instrumentos de laboratorio como fueron los vasos precipitados los que nos ayudaron a contener los dos reactivos y la solución, también la pinza la cual nos sirvió de ayuda para lavar cada una de las muestras, así mismo, la probeta milimetrada hasta el número 100 la cual nos sirvió de ayuda para guiarnos en la elaboración de los reactivos y por último el gotero que con este objeto saturamos la cámara húmeda.

INSTRUMENTOS UTILIZADOS DENTRO DEL LABORATORIO: 16

     

8.5.

Microscopio.

Vasos precipitados.

Probeta milimetrada.

Pinza.

Gotero.

Estufa.

RESULTADOS Los resultados fueron notorios ya que al observar nuestro proyecto escolar después

de 72 horas (3 días) pudimos ver cambios significativos en las cámaras húmedas, es decir, nuestras dos muestras presentaron cambios físicos como en su color de verde a café, marrón, y de verde a rosa y naranja ubicadas en los bordes de las hojas.

En la segunda muestra tuvo cabios de coloración de verde a amarillo y café en formas circulares en alrededor de toda la hoja y también pasando de la mitad de la hoja de un color café oscuro.

Con el microscopio vimos la presencia de dos hongos en la cámara R1 hubo la presencia del hongo Cercospora sp. En cambio, en la cámara R2 hubo la presencia del hongo Marsonia, los cuales si correspondían a los microorganismos fitopatógenos.

17

CONCLUSIONES Al final del siguiente proyecto se llega a las siguientes conclusiones:

 El proyecto escolar realizado en el laboratorio tuvo múltiples respuestas que dieron amplios resultados, ya que en algunos grupos si hubo la presencia de hongos o bacterias en las hojas asignadas  Observamos con ayuda del microscopio la presencia de micelios en las hojas infestados de hongos o bacterias y en nuestro grupo encontramos los hongos Cercospora sp y Marsonia.

18

RECOMENDACIONES  Recomiendo tener mucho cuidado al preparar los dos reactivos que pueden ser peligrosos para todos los estudiantes ya que pueden perjudicar la salud.  Finalmente, aconsejo a todos mis compañeros que después de finalizar el proyecto escolar llevar todos los residuos del éste para que no haya dificultades ni problemas dentro del laboratorio.

19

REFERENCIAS/ BIBLIOGRAFIAS Extraído

de:

microorganismo,

2019,

recuperado

de:

recuperado

de:

https://es.wikipedia.org/wiki/Microorganismo

Extraído

de:

microbiología,

2019,

https://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa

Extraído

de:

estudio

de

hongos

fitopatógenos,

2014,

recuperado

de:

http://biodiversidadenhongos.blogspot.com/2014/03/estudio-de-hongos-fitopatogenoscon.html

Extraído

de:

cámara

húmeda,

2018,

recuperado

de:

https://www.monografias.com/docs/camara-humeda-P34LFSUFCDGNZ

Extraído de: reactivo, 2019, recuperado de: https://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo Extraído de: definición de reactivo, 2013, recuperado de: https://definicion.de/reactivo/ Extraído de: http://www.fundesyram.info/biblioteca.php?id=1737 Extraído de: ,2019, recuperado de: https://www.seminis-las.com/recursos/guias-deenfermedades/tomates/cercospora-leaf-mold/

Extraído

de:

Cercospora

,2019,

recuperado

de:

https://web.extension.illinois.edu/focus_sp/cercosporablight.cfm

Extraído

de:

la

temida

mancha

negra,

2011,

recuperado

de:

http://blogs.lanacion.com.ar/jardin/flores-2/la-temida-mancha-negra-del-rosal/

Extraído de: Marsonia, 2018, recuperado de: https://es.esdemgarden.com/marsonia-1255

20

ANEXOS Galería: https://www.flickr.com/photos/183000659@N08/

21