uso de plantas bioactivas para el control de la garrapatas Rhipicephalus microplus

LV REUNIÓN NACIONAL DE INVESTIGACIÓN

PECUARIA

C iapas 2019

Reuniones Nacionales de Investigación e Innovación Pecuaria, Agrícola, Forestal y Acuícola Pesquera

Reunión Nacional de Investigación Pecuaria Memoria

Año 5. Volumen 1. Octubre 2019 ISSN electrónico: 24485284

Reunión Nacional de Investigación Pecuaria Memoria. Es una publicación anual.

Octubre de 2018. Compilador: Jorge Fajardo Guel. Editor Responsable: Carlos Mallén Rivera. Número de Certificado de Reserva otorgado por el Instituto Nacional de Derecho de Autor: 04-2016- 092610414100-203. Domicilio: Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP). Av. Progreso Número. 5, Colonia Barrio Santa Catarina, Coyoacán, México, CDMX., C.P. 04010. www.gob.mx/inifap, reunionesnacionales@inifap.gob.mx https://vun.inifap.gob.mx/BibliotecaWeb/_Content?/=5190 Las opiniones expresadas por los autores no necesariamente reflejan la postura del editor de la publicación.

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ISSN 2448-5284

Reunión Nacional de Investigación Pecuaria Memoria.

COMPILADOR Jorge Fajardo Guel

EDITOR Carlos Mallén Rivera Tuxtla Gutiérrez, Chiapas, México.

TABLA DE CONTENIDO PERFIL BIOMÉTRICO E ÍNDICES DE ADAPTACIÓN EN MACHOS CABRÍOS LOCALES EN LA REGIÓN SUROESTE DEL ESTADO DE COAHUILA, MÉXICO. ............................................................................... 1 EFECTO DEL CLAVO EN POLVO SOBRE EL ESTRÉS DURANTE EL TRANSPORTE DE POLLOS Y SU IMPACTO EN CALIDAD DE CARNE. ............................................................................................................................ 6 ATROPELLAMIENTO DE FAUNA SILVESTRE EN TRAMO CARRETERO, PERIFERIA DEL ÁREA NATURAL PROTEGIDA FINCA SANTA ANA, PICHUCALCO, CHIAPAS. ......................................................... 9 EVALUACIÓN DE DOS TÉCNICAS DE DESCOLE EN CORDEROS SOBRE LA ESCALA FACIAL DEL DOLOR Y CONSTANTES FISIOLÓGICAS. .........................................................................................................................12 LA ESTRATIFICACIÓN SOCIAL DE LA CABRA AFECTA SU MANIFESTACIÓN CONDUCTUAL AL DOLOR DEBIDO AL PADECIMIENTO DE ARTRITIS. ................................................................................................15 RESPUESTA CONDUCTUAL DE CORDEROS SANTA CRUZ A DIFERENTE TIPO DE DESTETE .. 19 INDICADORES DE BIENESTAR ANIMAL DURANTE EL ATURDIMIENTO EN MATADEROS DE BOVINOS UBICADO EN DE PICHUCALCO CHIAPAS; MÉXICO. .......................................................................21 DETERMINACION DE LOS PROBLEMAS DE HERRAJE MÁS COMUNMENTE ENCONTRADOS EN LAS REGIONES DEL ALTIPLANO Y ZONAS ADYACENTES. ....................................................................... 24 CARACTERIZACIÓN DE EXTRACTOS DE PLANTAS COMO AGENTES COAGULANTES PARA QUESERÍA ARTESANAL. .......................................................................................................................................................... 28 EVALUACIÓN DEL POTENCIAL PROBIÓTICO DE LEVADURAS AISLADAS DE AMBIENTES MARINOS. ........................................................................................................................................................................................... 32 IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS POTENCIALMENTE PATÓGENAS EN GARRAPATAS Rhipicephalus (Boophilus) microplus. ........................................................................................................................... 36 Salix babylonica UN ÁRBOL CON POTENCIAL ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA. ................................ 39 ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE Tagetes lucida SOBRE BACTERIAS DE IMPORTANCIA PECUARIA. ................................................................................................................ 42 SUSCEPTIBILIDAD DE LARVAS DE Haemonchus contortus AL EXTRACTO HIDROACOHOLICO DE Kalanchoe diagremontiana. ........................................................................................................................................ 45 GOBERNADORA (Larrea tridentata), UNA ALTERNATIVA PARA EL TRATAMIENTO DE LA MASTITIS BOVINA ASOCIADA A BACTERIAS. ............................................................................................................ 48 USO DE PLANTAS BIOACTIVAS PARA EL CONTROL DE LA garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae). ........................................................................................................................52 EXPRESIÓN DEL GEN HSP60 EN BOVINOS RAZA SIMMENTAL EXPUESTOS A ESTRÉS CALÓRICO. ....................................................................................................................................................................................... 56 ANÁLISIS DE UN POLIPEPTIDO DERIVADO DE LA PROTEÍNA RmS17 DE LA GARRAPATA Rhipicephalus microplus EN MÉXICO. .......................................................................................................................... 59 EVALUACIÓN DE NANOPARTÍCULAS DE QUITOSÁN COMO VEHÍCULO DE TREHALOSA PARA UTILIZARLO COMO CRIOPROTECTOR EN LA CONGELACIÓN DEL SEMEN DE CERDO (RESULTADOS PRELIMINARES) ......................................................................................................................................... 63 RELACIÓN DE LAS MEMBRANAS TESTÁCEAS CON LA RESISTENCIA FÍSICA DEL CASCARÓN DEL HUEVO DE GALLINA BOVANS WHITE DE 90 SEMANAS. ....................................................................... 66

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USO DE PLANTAS BIOACTIVAS PARA EL CONTROL DE LA garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae).

USE OF BIOACTIVE PLANTS FOR THE CONTROL OF THE TICK Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae).

Grajales, RJG1, Cruz, DCM1, Ibarra, MCE.2*, Bautista, TGU1, Ruiz, SB2, Mendoza, NP2, Tejeda, CC2, Oliva, LlMA2, Ruiz, SH2, Mandujano, CHO2 e Ibarra, PJC1.

1 Tesista Licenciatura, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Chiapas; 2Cuerpo Académico; Producción animal tropical sostenible, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Chiapas, 3Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Chiapas. Extensión Pichucalco, Chiapas. cibarra1958@gmail.com Palabras claves; extracto vegetal, garrapata, mortalidad.

INTRODUCCIÓN. Según la FAO (2004) el 80% de los bovinos en el mundo están infestados por garrapatas. La garrapata Rhipicephalus (B) microplus es el principal ectoparásito del ganado bovino en zonas tropicales generando grandes pérdidas a la ganadería debido a las lesiones en la piel, disminuir la producción de leche y ganancia de peso en los animales y ser el vector responsable de transmitir enfermedades hemoparasitarias al ganado bovino como son Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina (Rodríguez et al., 2007), en México este impacto económico se estima en pérdidas de $573.61 mdd (Rodríguez-Vivas et al. 2017). Su control se realiza mediante la aplicación de productos químicos, organofosforados (OP), amidinas (AM), piretroides sintéticos (PS) y lactonas macrocíclicas (LM) (Aguilar-Tipacamu y Rodriguez-Vivas, 2003; Fragoso y Soberanes, 2001). Sin embargo, el uso continuo e irracional de estos ha ocasionado la selección de cepas de garrapatas resistentes a la acción de los productos (Rodríguez et al., 2007, Fragoso et al., 1995; Soberanes et al., 2002; Miller et al., 2008; Pérez et al., 2010).

Una de las alternativas para el control de los ectoparásitos es el uso de productos naturales mediante plantas bioactivas que pudieran tener actividad acaricida a través de sus compuestos secundarios. Este mecanismo de control ha mostrado resultados promisorios durante las últimas décadas debido a que generan bajo impacto a los ecosistemas, bajo riesgo de resistencia, baja toxicidad para los animales y humanos (Borges, et al., 2011; Chagas, et al., 2003; Olivo, et al., 2009); a nivel mundial se han evaluado extractos y aceites esenciales de aproximadamente 55 especies de 26 familias botánicas (Borges, et al., 2011), siendo las familias evaluadas la Lamiaceae, Fabaceae, Asteraceae, Piperaceae, Verbenaceae y Poaceae, Myrtaceae, Caesalpiniceae, Ericaceae, Winteraceae, Solanaceae, Phytolaccaceae, Apiaceae, Meliaceae, Rutaceae, Amaryllidaceae, Euphorbiaceae y Bromeliaceae (Adenubi, et al., (2016); Rosado-Aguilar et al., 2017). Annona squamosa (Annonaceae) y Cinnamomum zeylanicum (Lauraceae) son plantas que poseen actividad acaricida, insecticida y parasitida (Chungsamarnyart, et al., 1991; Vongkhamchanh et al., 2014; Monteiro, 2013), Sin embargo no se encontraron datos registrados sobre la actividad ixodicida de Annona squamosa (Annonaceae) y Cinnamomum zeylanicum (Lauraceae) sobre larvas de R. microplus (Adenubi, et al., 2016; Rosado-Aguilar et al., 2017). El objetivo de este estudio fue evaluar bajo condiciones de laboratorio la actividad ixodicida de extractos (acuosos y metanólicos) de A. squamosa y C. zeylanicum sobre larvas de Rhipicephalus microplus (Acari:Ixodidae), considerando como hipótesis que la acción de los extractos (acuoso y/o metanólico) obtenidos de hoja A. squamosa y hoja de C. zeylanicum tienen efecto ixodicida sobre Rhipicephalus microplus en su etapa larval.

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MATERIALES Y METODOS. El estudio fue realizado en la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Autónoma de Chiapas, localizado en las coordenadas 16°41’ 35.38” N; 93°50’ 51.55” O. Recolecta de garrapatas; La recolecta y manejo de las muestras de garrapatas se hicieron tomando en consideración el protocolo sugerido por la FAO (2004), se recolectaron hembras adultas ingurgitadas (teleoginas) procedentes de explotaciones ganaderas en el Municipio de Villaflores, Chiapas, México (16°20´39.8” N; 93°19´30.4” O) con antecedentes de no haber tenido aplicación de productos químicos.

Incubación; las garrapatas adultas se depositaron en cajas Petri bajo condiciones de laboratorio a temperatura de 27± 1.5°C y humedad relativa de 85%-86% para permitir la oviposición (Cen et al., 1998). Los huevos obtenidos se transfirieron a viales de cristal de 10 mL y fueron incubados bajo las mismas condiciones de temperatura y humedad al que estuvieron las teleoginas durante la oviposición. Para los bioensayos se utilizaron larvas de 7-14 días de edad (Soberanes et al., 2002).

Selección y obtención del material vegetal; La recolecta del material vegetativo se llevó a cabo en el ejido Cristóbal Obregón, municipio de Villaflores (16°20´39.8” N; 93°19´30.4” O), Chiapas, México. Las muestras (hojas) se tomaron de plantas adultas. El material se deshidrató y molió en partículas pequeñas.

Preparación Extracto acuoso; se tomó una muestra de 1.5 g de material molido de cada planta, se adicionó 50 mL de agua destilada y se llevó a punto de ebullición (100°C) durante 20 minutos, se reposo durante 24 horas a temperatura ambiente y se filtró con papel filtro Whatman #1, La mezcla obtenida se consideró solución madre 100%, concentración 30,000 ppm. Para los experimentos de dosis-respuesta, las concentraciones se redujeron por adición de agua destilada con las siguientes proporciones 25% (22500 ppm), 50% (15000 ppm) y 75% (7500 ppm) respectivamente. Cada concentración se consideró un tratamiento, el control positivo fue Amitraz, y control negativo agua destilada.

Preparación Extracto metanólico; se tomó una muestra de 50 g de material molido de cada planta, se adicionó 300 mL de metanol y se dejó reposar durante 48 horas a temperatura ambiente. Posteriormente se filtró con papel filtro Whatman #1. La evaporación del metanol se hizo través de un rotovapor BUCHI R300® a baja presión y temperatura de 45ºC. El material obtenido (pasta) se resuspendió con solución de agua destilada: Tween 20 (98:2 v/v). Para los bioensayos se tomó el equivalente a 1 gr de la pasta obtenida y se disolvió en 100 mL de una suspensión de agua destilada:Tween 20 (98:2 v/v), lo obtenido se consideró solución madre 100%, concentración 10,000 ppm, para obtener concentraciones más bajas se redujeron por adición de agua destilada:Tween 20 (98:2 v/v) en diferentes proporciones, 25% (7500 ppm), 50% (5000 ppm) y 75% (2500 ppm) respectivamente, cada concentración se consideró un tratamiento, el control positivo fue Amitraz, y control negativo agua destilada:Tween 20 (98:2 v/v).

Bioensayos; Para evaluar la mortalidad de las larvas de garrapata de Rhipicephalus microplus se utilizó la técnica de inmersión larval modificada (Santamaría y Soberanes, 2001). Se depositaron en paquetes, 20 larvas por paquete, e incubaron durante 48 horas bajo condiciones de laboratorio a una temperatura de 27± 1.5°C y 85%-86% de humedad relativa (Cent et al., 1998). Cada tratamiento tuvo cinco repeticiones, incluyendo el grupo control. El porcentaje de mortalidad (M%) se determinó aplicando de la siguiente formula (FAO, 2004): #ácaros vivos − #ácaros muertos.

M% = ( ) 100 #ácaros vivos La mortalidad corregida (MC) se aplicó la fórmula sugerida por Abbott (1925) y recomendada por la FAO (2004): %mort. Trat − %mort. control.

MC = ( ) 100 100 − %mort. control.

El diseño experimental fue completamente al azar, el análisis de los datos fue mediante ANOVA, la comparación múltiple de medias se hizo mediante la prueba de Tukey, el software

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utilizado fue SAS, versión 9.0 para Windows. La concentración letal media (CL 50) fue calculado mediante análisis Probit, software Polo Plus, versión 1.0 Le Ora. RESULTADOS Y DISCUSIÓN. En el cuadro 1 se muestran los resultados obtenidos por cada tratamiento, la mayoría de los tratamientos tuvieron eficacia de mortalidad alta tomando, esto es con base la clasificación sugerida por Chungsamarnyart, et al. (1991). La toxicidad de los tratamientos se muestra en el cuadro 2.

Estudios reportan mortalidad de 95% y 87% sobre garrapatas adultas con extractos alcohólicos de hoja, semilla de A. squamosa respectivamente (Vongkhamchanh et al., 2014; Magadum, et al., 2009; Chungsamarnyart, et al., 1991). Mientras que Monteiro, (2013) reporta mortalidad de larvas de garrapatas de 100%, 99.8%, 99%, 98.9% con aceite esencial de C. zeylanicum con concentraciones de 50, 25, 10, 5 mg/mL respectivamente. Estudios señalan que el efecto toxico de A. squamosa es atribuible a la presencia de biocomponentes terpenicos (Vongkhamchanh, et al., 2014), siendo el limoneno el más activo (Ferranini, et al., 2008). Mientras que C. zeylanicum su principal biocomponente es el eugenol (Gende et al., 2008).

Control Tratamien to.

Cuadro 1 Media ± error estándar de la mortalidad de larvas de R. microplus por efecto de los extractos de Annona squamosa y Cinnamomum zeylanicum con 48 hr de exposición.

Annona squamosa Cinnamomum Hoja zeylanicum Hoja Acuoso Metanólic Acuoso Metanólic (3% w/v) o (3% w/v) o (10 mg/mL (10 mg/mL abc Extracto Puro (100%) 84 93 ±0.4abc 70±0.32b 94±0.49 1 1 ) ) ab a ±0.68 75% Extracto + 25% disolvente 98 ±0.2 100 ±0.0a 68±0.49b 90±1.05abc 50% Extracto + 50% disolvente 90 98 ±0.24ab 90±0.32ab 94±0.58 abc ab ab abc ±0.45 25% Extracto + 75% disolvente 86 ±0.51 91±0.58 70±0.95b 85±0.89bc Amitraz 82 ±0.37ab 82 ±0.75c Agua destilada 10 ±0.0c Agua destilada+Tween20 13±0.75d (98:2 v/v) Medias con letras diferentes son estadísticamente diferentes (Tukey p≤ 0.05) Cuadro 2 Concentración letal media (CL50) de extractos de A. squamosa y C. zeylanicum sobre la larva de Rhipicephlus microplus después de 48 hrs de exposición.

A. squamosa Hoja C. zeylanicum Hoja E. Acuoso (3% w/v) CL50 (ppm) (IC) n Pendiente SD EE R2

0.16 (0.03.081) 5 0.194 5.143 1.162 0.046

E. Metanólico (10mg/mL-1) 0.001 (0.0-0.614)

E. Acuoso (3% w/v)

5 0.232 4.305 1.364 0.032

5 0.268 3,737 0.755 0,037

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1359.21 (44.97-1082.11)

E. Metanólico (10mg/mL-1) 100.44 (18.81-536.25) 5 0.727 1.376 0.371 0.536

CONCLUSION. A. squamosa y C. zeylanicum poseen actividad larvicida alta, (Chungsamarnyart, et al. 1991), por lo que pueden ser candidatos promisorios para el desarrollo de productos naturales contra el manejo sustentable de la garrapata Rhipicephalus microplus.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA. Borges, L. M. F., de Souza, D. L. A., Barbosa, da Silva, C. (2011). Perspectives for the use of plant extracts to control the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 20:2: 89-96 Chungsamarnyart, N., Jiwajinda, S., Jansawan, W. (1991). Acaricidal effect of plant crude extracts on tropical cattle ticks (B. microplus). Kasetsart Journal Nature Science Supplement. 25: 90-100 FAO. (2004). Guideline resistence management and integrated parasite control in ruminants.

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