Unidad 2. Actividades dentro del laboratorio de biología

Programa de la asignatura:

Técnicas de laboratorio de biología

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Actividades dentro del laboratorio de biología

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Índice Presentación de la unidad ......................................................................................................... 2 Propósitos de la unidad ............................................................................................................. 3 Competencia específica ............................................................................................................ 3 2. Actividades dentro del laboratorio en biología ...................................................................... 4 2.1. Método científico ................................................................................................................ 6 2.1.1. Pasos del método científico ............................................................................................ 6 2.1.2. Importancia del método científico dentro del laboratorio ................................................ 8 2.2. Tipos de mediciones ......................................................................................................... 9 2.2.1. Magnitudes que se miden ............................................................................................. 11 2.2.2. Instrumentos y aparatos que se usan en las mediciones ............................................. 12 2.3. Soluciones ........................................................................................................................ 25 2.3.1. Tipos de soluciones ....................................................................................................... 26 2.3.2. Clasificación de las soluciones ..................................................................................... 30 Actividades .............................................................................................................................. 32 Autorreflexiones....................................................................................................................... 32 Cierre de la unidad .................................................................................................................. 33 Para saber más ....................................................................................................................... 34 Fuentes de consulta ................................................................................................................ 34

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Presentación de la unidad En esta unidad conocerás algunas de las actividades importantes que se realizan dentro de un laboratorio de biología. Por ejemplo: se toman mediciones de volumen y masa o peso, se registran o monitorean temperaturas, se calcinan muestras como parte de una técnica especifica dentro de una investigación, la cual debe seguir una metodología adecuada para llegar a un fin determinado.

En actividades sencillas, como hacer un pastel, tienes que seguir una serie de pasos; si te saltas uno, el resultado no será el mismo. Al realizar una investigación, se debe tener cuidado, más si se están realizando mediciones de volumen o masa para alguna disolución que se va a ocupar posteriormente, ya que si la cantidad es menor o mayor a la requerida, el experimento fallará.

Figura 1. Mediciones.

Tomado de http://www.google.com.mx/imgres?um=1&hl=es&sa=X&biw=1280&bih=929&tbs=isz:m&tbm=isch &tbnid=Ou_Hf1WzMHyZXM:&imgrefurl=

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Propósitos de la unidad

El propósito de esta unidad es describir paso a paso el método científico, el cual es muy importante para realizar las actividades, experimentos, investigaciones y trabajos, dentro de un laboratorio de biología.

Competencia especifica

Describir el método científico, los métodos e instrumentos de medición, así como los resultados de mediciones. Además, se describirán los tipos de soluciones utilizadas en el procesamiento de muestras.

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2. Actividades dentro del laboratorio en biología En el laboratorio de biología se realizan un sinfín de actividades, las cuales forman parte de diversas investigaciones. Se utilizan instrumentos, aparatos, sustancias, reactivos, para procesar animales, plantas, microorganismos (vivos o muertos), y biomoléculas, así como componentes abióticos de un ecosistema (Gaviño de la T. G., Juárez, L. C. y Figueroa, T. H. H., 1985).

Las actividades dentro de un laboratorio con aplicaciones en la biología pueden ser muy sencillas, cuya duración puede tardar segundos o minutos; por ejemplo, medir el pH de una muestra, calcular la masa de una planta, contabilizar el número de microorganismos en una gota de agua encharcada. Sin embargo, hay tareas más complejas, cuyo tiempo de realización puede ser de horas, días, incluso hasta años. Un ejemplo así se da en la industria farmacéutica, para la elaboración de medicamentos: primero se realizan las pruebas en animales y se espera cierto tiempo para observar las reacciones que tiene en el organismo (Gaviño et al, 1985).

Las actividades se pueden llevar a cabo en simples aulas de clase o en modernos laboratorios, como los de las universidades o las grandes industrias. Ellas son la parte complementaria del aprendizaje, al aplicar los conocimientos adquiridos en clase.

Todas las carreras deben de partir de una base teórica del tema que se esté llevando en ese momento y, dado el caso, aplicar los conocimientos, simulando en el laboratorio las condiciones para complementar lo más relevante del tema.

Te acordarás que en la primaria te pedían, por ejemplo, frotar un globo inflado en tu cabello para corroborar la estática (atracción de cargas). Este se te erizaba al pasarlo sobre ciertas texturas y podías observar qué materiales atraía.

O quizás elaboraste un álbum con hojas de plantas, describiendo la forma que tenían. O recordarás cuando llevaste a cabo el experimento de germinar una semilla de frijol dentro de un frasco con algodón y agua.

Figura 2. Método científico.

Tomado de http://www.profeblog.es/2009/03/16/prevencion-de-riesgos-laborales-eneducacion-i/

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A las actividades que se van a realizar a cabo dentro de un laboratorio comúnmente se les denomina prácticas, las cuales deben de llevar un cierto formato, tal y como ya se hablaba en los lineamientos que se deben de cumplir para trabajar dentro del laboratorio. El formato de una práctica es como sigue:   



 

 

Tema o título: Es de lo que va a tratar la práctica, puede denotarse con un nombre analógico llamativo que defina al tema.

Objetivo: Pueden ser uno o varios objetivos, enfocados a lo que se quiere saber del tema.

Introducción y antecedentes: Es la base teórica que se consulta en libros para encontrar diferentes puntos de vista en orden cronológico acerca del tema de la práctica. La extensión es a criterio de la persona que esté elaborando el documento.

Metodología: En esta sección se van a colocar los instrumentos y aparatos utilizados para llevar a cabo la actividad; así como el procedimiento que se seguirá para obtener los resultados.

Resultados: En este apartado se colocan los resultados obtenidos (datos), tal y como marcan los equipos utilizados en el o los procedimientos.

Análisis de resultados: Se hace sobre los datos obtenidos anteriormente para explicar lo obtenido en gráficas, tablas o en alguna fórmula.

Conclusiones: Es plasmar las ideas principales que se obtuvieron en la realización de la práctica.

Bibliografía o referencias: Son las fuentes de consulta utilizadas en el desarrollo de la práctica.

Las actividades dentro del laboratorio de biología están diseñadas en función del enfoque que se requiera (medicinal, alimenticio e industrial). Es muy diferente trabajar con organismos vivos, muertos, animales, plantas, tamaño macroscópico o microscópico (para microorganismos), biomoléculas. Por lo tanto, el uso del instrumental, los aparatos, sustancias y reactivos, depende de la técnica que se ocupará para procesar las muestras.

Para trabajar dentro del laboratorio debes leer con anterioridad la metodología para el procesamiento de las muestras y verificar que el material esté disponible al momento de realizar la actividad (práctica). No hacer esto último te puede generar problemas.

Tampoco debes de trabajar bajo presión, acelerando las técnicas, porque los resultados que se obtengan no serán confiables y mucho menos verídicos, además de que puede resultar peligrosa su aplicación.

Respecto a la técnica que se va a aplicar, se recomienda manejar tres o cuatro repeticiones por cada muestra que se esté procesando. La primera será un control o testigo; la segunda será la que procesarás y de la que obtendrás resultados que podrás comparar con tu muestra testigo, para ver cómo afecto la técnica que aplicaste. Si es el caso, se puede volver a repetir la técnica para obtener mejores resultados.

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Al trabajar dentro del laboratorio procura que una persona experta se encuentre supervisando las actividades, ya sea el encargado técnico laboratorista o el profesor, para que si ocurriese un percance, él pueda actuar inmediatamente y evitar que se cause más daño o un peligro mayor.

2.1. Método científico El método científico es una serie de pasos que se deben seguir para hacer una investigación, por muy sencilla que esta sea. Mediante este método, los investigadores y científicos pueden explicar los fenómenos o incógnitas que suceden a su alrededor y proponer teorías o leyes que ayuden a dar una respuesta.

Desde la antigüedad, los grandes filósofos (científicos) se dieron a la tarea de explicar, principalmente, los fenómenos naturales que ocurrían en su época: por qué llovía, cómo era el universo, qué causaba las muertes, la clasificación de los organismos, entre otras.

Al principio se decían que eran producto de un ser supremo, pero poco a poco, con las investigaciones, observaciones y experimentaciones, llegaron a dar una respuesta lógica de los fenómenos.

En la actualidad, por diversas técnicas mejoradas con la ayuda de los avances tecnológicos, se sigue comprobando la veracidad de sus afirmaciones y/o descubriendo más cosas acerca de esos fenómeno (Solomon, P. E., Berg, R. L. y Martin, W. D., 2008).

Figura 3. Método científico.

Tomado de http://imaginario-nopensar.blogspot.mx/2011/08/metodo-cientifico-para-ninos-4.html

2.1.1. Pasos del método científico El método científico consta de los siguientes pasos (Solomon, et al. 2008): 

Observación: Es lo que primero que se hace. Observa a tu alrededor y analiza todo lo que pasa; pueden registrarse cosas cualitativas (el color de la sangre, la textura de los troncos de los árboles, el olor de un líquido, el sabor de una sustancia) y cuantitativas (el tamaño de los huevos de una rana, la altura de una montaña).

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  





Planteamiento del problema: Después de haber observado, piensa qué es lo que quieres saber o conocer.

Hipótesis: Es dar una o varias posibles respuestas al problema que te planteaste; es una idea o explicación que se va a comprobar, a retar, mediante la experimentación.

Experimentación: Debes utilizar las técnicas necesarias para analizar la problemática. Se recomienda llevarla a cabo con dos grupos (uno control y otro experimental) que se compararan para ver las diferencias.

Resultados: Es lo que obtuviste con los experimentos que se llevaron a cabo. Pueden formularse en una teoría, la cual no es ampliamente aceptada (las teorías del origen de la vida o la del origen del universo) o en una ley, que es universalmente conocida y aceptada (la ley de la gravitación universal, las leyes de la herencia o las leyes de los gases).

Conclusión: Es la comprobación de la hipótesis, ya sea la que fue verdadera o la que resultó falsa.

Existen otros pasos más que te ayudan a planear la organización de la investigación, como una buena revisión bibliográfica o el debate de las hipótesis.

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Figura 4. El método científico. Tomado de: http://imaginarionopensar.blogspot.mx/2011/08/metodo-cientifico-para-ninos-1.html

Figura 5. Método científico.

Tomado de: http://www.cientec.or.cr/ciencias/metodo/metodo.html

2.1.2. Importancia del método científico dentro del laboratorio En la biotecnología, llevar a cabo el correcto uso del método científico es muy importante para la elaboración de investigaciones, experimentos y trabajos dentro del laboratorio.

Todo lo que se conoce de la vida partió de una serie de investigaciones, es decir, tuvieron un origen en la antigüedad para llegar a descubrirse. Los científicos llegaron a la obtención de resultados acerca de las incógnitas que los rodeaban, mediante observaciones, hipótesis y experimentos. Por ejemplo, por la inquietud de observar cómo era el sistema solar, Galileo Galilei fabricó los primeros telescopios. Lo mismo pasó con las primeras lentes para visualizar organismos pequeños. Con el paso del tiempo, estos artefactos se fueron perfeccionando hasta llegar a los que en la actualidad se conocen.

La necesidad de conocer la verdad o falsedad de algo conlleva a la formulación de hipótesis, las cuales se tienen que comprobar mediante una serie de experimentos para obtener un resultado verídico, principalmente sobre temas relacionados con las ciencias (Física, Química, Biología, entre otras).

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Dentro del método científico, la forma de obtener la verdad puede ser mediante el uso, primero, de un método deductivo, es aquel que deduce lógicamente, mediante demostraciones la obtención de la verdad de un problema). En segundo lugar, el método inductivo, que mediante la observación propone leyes que se van a demostrar. Y tercero, el hipotético deductivo, combinación del método deductivo con la creación de posibles respuestas a los problemas.

El método científico presenta algunas características que lo hacen único e infalible:           

Resultados: Lo que se obtuvo con los experimentos que se llevaron a cabo y que pueden formularse en una teoría o en una ley.

Conclusión: Es la comprobación de la hipótesis, ya sea la que fue verdadera o la que resultó falsa.

Es objetivo: El fin es otorgar el conocimiento de manera que se apegue a la realidad de lo que se está preguntando, que describa sus características que tiene al momento.

Es racional: Que anteponga la razón lógica y objetiva para la obtención de resultados.

Inventivo: Deja volar la creatividad e imaginación en el planteamiento de problemas, predecir hipótesis, ponerlas a prueba y comprobarlas.

Es sistemático: Para buscar y dar resultados de manera coherente y lógica.

Generaliza: El conocimiento obtenido de forma particular e individual lo extrapola para comprender un todo.

Es falible: Puesto que es manipulada por el ser humano, es susceptible a sufrir errores, los cuales se pueden corregir y superar.

Es verificable: Porque se comprueba la verdad o falsedad de la hipótesis planteada.

Es perfectible: Porque el método puede ser modificado, mejorado o perfeccionado.

Es normativo: Ya que sigue una serie de pasos, que proporciona los principios y las bases de las técnicas para llegar a la investigación.

2.2. Tipos de mediciones Dentro de las actividades que se realizan en el laboratorio están aquellas que se caracterizan porque requieren llevar a cabo mediciones, que pueden ser (Gaviño, et al.

1985; Chang, R. y College, W., 2002): 

Cuantitativas: Son aquellas donde, al procesarse las muestras, se van a obtener datos numéricos que se van a medir y analizar mediante escalas o clasificaciones ya establecidas. Por ejemplo, realizar la lectura de pH a una muestra, medir la longitud de un organismo, medir la temperatura de un cuerpo, entre otras cosas.

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

Cualitativas: Son aquellas donde las muestras no pueden arrojar datos numéricos cuantificables y el resultado se expresa tal y como se obtiene. Es el caso del color, sabor, olor, textura, forma, consistencia, dureza, permeabilidad, el sonido que efectúa, entre otras cosas.



Directas: Aquellas cuyo resultado se obtiene de manera inmediata, mediante la utilización de instrumentos o aparatos que miden alguna característica y arrojan un valor numérico cuantificable. Por ejemplo, el pH con la ayuda del potenciómetro; la temperatura con el termómetro; el peso de un organismo con una balanza; el peso de un cuerpo con un dinamómetro; la conductividad de un material con un conductímetro; la longitud de un organismo con un metro, entre otras.

Figura 6. Potenciómetro digital y electrónico.

Tomado de http://www.testmark.com.mx/index.php?main_page=product_info&cPath=2_19&products_id=79 http://www.calibramossa.com/ws/index.php?option=com_content&view=article&id=11&Itemid=15

Otro caso es cuando se requiere medir 500 ml de agua para preparar un medio de cultivo para bacterias; si la cantidad de agua medida es menos, o en su defecto es mayor, el medio de cultivo no solidificará adecuadamente. Es como si prepararás una gelatina, la bolsa que la contiene dice “polvo para preparar un litro de gelatina de agua sabor fresa” y justamente se debe medir un litro, puesto que si es menos, quedará muy rígida y, si es más, quedará muy aguada. 

Indirectas: Son aquellas donde el resultado no se obtiene de manera directa con algún aparato, sino que se tienen que utilizar otros recursos (como el empleo de fórmulas donde intervienen diferentes valores que servirán para calcular el resultado final).

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Figura 7. Medida indirecta, la densidad de un cuerpo.

Tomado de: http://www.kalipedia.com/popup/popupWindow.html?anchor=klpcnafyq&tipo=imprimir&titulo=Im primir%20Art%EDculo&xref=20070924klpcnafyq_25.Kes

Un ejemplo de medición indirecta es calcular la velocidad de una reacción, donde interviene la concentración de los reactivos y el tiempo que tardan en generar el producto; o el registro de la densidad de una sustancia, cuya fórmula involucra su masa y volumen, entre otras cuyos valores se sustituyen en una fórmula.

2.2.1. Magnitudes que se miden Una magnitud es aquella propiedad o propiedades que tiene un cuerpo, sustancia o muestra, y que se puede medir (como su masa, peso, longitud, temperatura, velocidad, entre otras). El termino medición significa comparar la o las magnitudes que presenta el objeto de estudio con otra similar, denominada unidad, para determinar las veces que cabe en ella. La unidad de medida es la cantidad patrón que se ubica para comparar cantidades de una misma especie (Chang y College, 2002).

Una unidad medida comúnmente se escribe como un número, con una unidad apropiada.

Existen siete unidades básicas de medida (magnitudes) que se encuentran en el sistema internacional de unidades (Chang y College, 2002): a. Longitud: Cuya unidad de medida es el metro, siendo su símbolo m. b. Masa: Su unidad de medida es el kilogramo y su símbolo es Kg. c. Tiempo: Unidad de medida segundo y su símbolo es s. d. Corriente eléctrica: Su unidad de medida es el ampere, cuyo símbolo es A. e. Temperatura: En escala absoluta cuya unidad es el Kelvin y su símbolo K. f. Cantidad de sustancia: Cuya unidad es el mol y su símbolo es mol. g. Intensidad luminosa: Su unidad es la candela y su símbolo es cd.

De acuerdo con Chang y College (2002), también suelen utilizarse prefijos para designar la magnitud de alguna muestra, objeto u organismo, como se muestra en la Tabla 1:

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Prefijo Tera

Símbolo T

Potencia 1012

Giga Mega

G M

109 106

Kilo

k

103

Deci

d

102

Centi Mili

c m

101 10-3

Micro Nano Pico

µ n p

10-6 10-9 10-12

Tabla 1. Prefijos básicos.

Existen otras magnitudes que son derivadas y que se obtienen utilizando fórmulas:     



Velocidad: Se mide en metros por segundo, cuya simbología es m/s.

Volumen: Es la relación del espacio que ocupa un cuerpo, se denota como metro cúbico, cuyo símbolo es m3.

Superficie: Es el área de extensión que ocupa un cuerpo, se designa como metro cuadrado y su símbolo es m2.

Densidad: Es la relación de la masa con el volumen, se denomina kilogramo sobre metro cúbico y su símbolo es Kg/m3.

Fuerza: Mide la intensidad de intercambio lineal de un momento entre dos cuerpos, se designa newton N (kilogramo por metro sobre segundo cuadrado), cuya simbología es Kg.m/s2.

Energía: Capacidad para realizar trabajo, que es la energía necesaria para desplazar un cuerpo. Ambas se designan como julio J (kilogramo por metro cuadrado sobre segundo cuadrado), cuya simbología es Kg.m2/s2.

2.2.2. Instrumentos y aparatos que se usan en las mediciones Existe una gran variedad de mediciones que se pueden llevar a cabo dentro de un laboratorio, sin importar el enfoque de estudio al que este dedicado. Por ejemplo, las mediciones de masa y volumen son importantes no solo a nivel de laboratorio sino también en el industrial, como es el caso del llenado de envases con alimentos, para que cumplan con los requerimientos de calidad debe estar certificado que el contenido es justamente lo que indica la etiqueta (Gaviño, et al. 1985; Chang y College, 2002).

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En la industria farmacéutica, si la cantidad sobrepasa el contenido en g del medicamento, puede resultar mortal para las personas que la ingieran. En la industria automotriz, la elaboración de piezas de aluminio, plástico, fibra de vidrio para el armado de los automóviles, deben de cumplir con la cantidad especificada en el contenido de los moldes para elaborar las piezas (Gaviño, et al. 1985; Chang y College, 2002).

Existen algunos instrumentos o utensilios que sirven para medir directamente volúmenes.

Unos son muy exactos (las probetas, las pipetas, buretas y jeringas), y otros no tan precisos (los vasos de precipitado, los matraces), aunque también existen aparatos que auxilian en la medición de volúmenes (las pipetas y buretas digitales).

Figura 8. Volumen.

Tomado de http://www.uco.es/~ma1marea/Medidas/Volumen/Volumen0.html http://blog.append.es/2011/03/21/los-refrescos-light/

Para la medición de peso necesariamente te debes de auxiliar de aparatos para llevarlas a cabo, es el caso de las balanzas y básculas, que pueden ser manuales o digitales, en las cuales se coloca la muestra, sustancia o reactivo para procesarlo.

Figura 9. Masa o peso.

Tomado de http://www.aplicaciones.info/decimales/siste03.htm y http://www.hkzingueria.com.ar/foto%20productos%20siloc.htm



Determinación de masa y peso

La masa es la cantidad de materia que comprende una sustancia o cuerpo, por ejemplo, un niño de 10 años tendrá menos masa que la de un adulto de 45 años, el algodón y el

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plomo tienen diferente masa cada uno, en dos vasos de precipitado de 500 ml uno de plástico y otro de vidrio, obviamente este último contiene mayor cantidad de masa, por el material del que está hecho. Tampoco es la misma masa de una caja de cartón a una de plástico (Gaviño, et al. 1985).

La unidad de medida de la masa en el Sistema Internacional de Medidas (SI) es el kilogramo (Kg) y se mide con balanzas o básculas. Para obtener la masa de un material se tiene que revisar que la báscula marque cero (0.000) y ya luego se coloca la muestra (Chang y College, 2002).

Figura 10. Masa.

Tomado de http://balanzas-digitales.com/comerciales/que-son-balanzas-digitalescomerciales.html y http://www.avancestecnologicos.org/smart-baby-scale-de-withingsbalanza-muy-tecnologica-ces-2012.html

Simulador donde se aplique la forma de realizar mediciones de masa de diferentes objetos, sustancias o muestras. Basado en la siguiente liga: http://concurso.cnice.mec.es/cnice2005/93_iniciacion_interactiva_materia/curso/material es/propiedades/masa.htm

Y entonces te preguntarás ¿qué es el peso? Es la fuerza de la gravedad que atrae una masa al centro de la Tierra. Para entender mejor, sabes que en nuestro planeta hay más gravedad que en la Luna, por eso todo material, objeto o persona, no se cae, porque se está ejerciendo gravedad hacia el centro de la Tierra. Por otro lado, en la Luna la gravedad es mucho menor, lo que provoca que las masas de objetos, aparatos o personas se mantengan flotando, como si fueran una pluma en el aire.

El peso es equivalente a multiplicar la masa por la gravedad (P = m x g). El peso se mide en newtons (N) o gramos (g); la masa, en kilogramos (Kg). La gravedad es un valor universalmente conocido, que equivale a 9.8 Kg.m/s. El aparato utilizado para medir el peso de una masa es el dinamómetro, que fue inventado por Isaac Newton, autor de la Ley de Gravitación universal (ley de la gravedad). No debe confundirse con una balanza o una báscula, ya que ellas solo miden masa de sustancias o cuerpos (Chang y College, 2002).

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Figura 11. Dinamómetro.

Tomado de http://conozcamoslasmedidas2.wordpress.com/instrumentos-de-medicion2/ y http://www.qualites.net/html/Dinamometros.htm

La forma de usar el dinamómetro es colgarlo de una superficie alta y sujetar la masa a la que se le va a determinar el peso, con ayuda de un resorte o gancho que cuelga de la parte inferior del equipo.

Para medir masas existen dos tipos de aparatos que se diferencian de acuerdo a la magnitud en la precisión del valor obtenido: básculas y balanzas. 

Báscula: Es un aparato que se utiliza para determinar o medir masas y pesos.

Constan de una platina sobre la que coloca el cuerpo que se va a medir. Pueden ser muy pequeñas, como las que encuentras en los consultorios médicos, el centro comercial, en la tienda de las tortillas o la recaudería; o pueden ser muy grandes, como las que se utilizan para pesar el contenido de las cajas de tráileres.

Figura 12. Tipos de básculas.

Tomado de http://www.lacasadelabascula.com/familias.aspx

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

Balanza: Son consideradas como palancas de primer género que miden la fuerza de un cuerpo ejercida hacia una base. Consta de dos platinas, para medir cantidades en Kg o g. No son muy precisas respecto a la cantidad de masa que miden. Las hay desde las más sencillas, con la que te pesan las tortillas, hasta las complejas, como las que se utilizan en los laboratorios (Gaviño, et al. 1985).

Figura 13. Balanza.

Tomado de http://www.rusttico.com/0701022148.htm

Balanza granataria: Es un equipo que se utiliza dentro del laboratorio para determinar la masa de sustancias, muestras u objetos. Su capacidad máxima suele ser de dos a 2.5 kg y la precisión que maneja es baja, siendo de 0.1 g a 0.01 g.

Figura 14. Balanza granataria.

Tomado de http://www.iecsaenlinea.com/producto2.asp?prod=621&cat=18 y http://conocimientosabio6.blogspot.mx/2011/01/practicas-de-laboratorio.html

Balanza analítica: Es un equipo con mucha precisión, cuya lectura puede variar de 0.1µm a 0.1 mg. Son muy sensibles a la manipulación, por lo que deben de colocarse en un lugar no muy transitado, sin muchas ventanas, e instalarse sobre una mesa especial, rígida, que esté fija al piso y que nunca se vaya a mover para evitar que vibre y se descalibre. Presenta una burbuja que indica la precisión con la que se está trabajando. No debes trabajar con ella cuando existan corrientes de aire o la luz solar le dé directamente, puesto que eso interfiere en las mediciones que se estén realizando.

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Figura 15. Balanza analítica.

Tomado de http://www.distribuidoraquimicajag.com/productos.php http://www.hellopro.es/images/produit-2/6/8/4/balanzas-analiticas-serie-xb-10486.jpg



Determinación de volumen

Son muy importantes los materiales con los que se lleven a cabo las mediciones de volumen de líquidos, sólidos y gases. Este se define como la cantidad de espacio que ocupa un cuerpo.

Cuando al coche se le pone gasolina, ¿estás seguro que la bomba da la cantidad exacta de lo que marca en la pantalla? O en el refresco y las cajas de leche, los ml de contenido corresponden a lo que dice la etiqueta; resulta imposible saberlo con precisión, pero por cuestiones de calidad deben de contener la cantidad marcada para evitar que se les sancione por no estar calibrados los aparatos con los que se despacha o mide el líquido (Gaviño, et al. 1985).

Figura 16. Medición de volumen.

Tomado de http://misactividadesdeprimaria.blogspot.mx/2012/02/propiedades-de-losmateriales-masa-y.html

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Como te imaginarás, en el laboratorio esto es de vital importancia, porque si los reactivos no están volumétricamente bien medidos en la solución que se va a preparar, la actividad resultara peligrosa, ya que puede reaccionar violentamente, ocasionando que explote, desprenda vapores tóxicos, entre otras cosas.

A los instrumentos que miden volumen de manera más precisa y exacta se les denomina volumétricos, entre ellos se encuentran los matraces aforados, las probetas, pipetas y buretas, las cuales son de vidrio, están graduadas y las hay en diferentes presentaciones, que van desde 1 ml hasta 5 L. También existen micropipetas, que miden volúmenes en cantidades pequeñas, como microlitros (µl).

Figura 17. Material volumétrico.

Tomado de http://thales.cica.es/rd/Recursos/rd99/ed99-0677-02/tema1.htm

Los materiales volumétricos están graduados, es decir, presentan una escala (como si fuera una cinta métrica) y, dependiendo de la capacidad del utensilio, la forma adecuada o correcta en la que se determina la medición del volumen de un líquido es: llenar primero la mitad del equipo; después vertir poco a poco la muestra hasta antes del nivel deseado; y, por último, con un gotero, jeringa o pipeta con poca capacidad, seguir llenando hasta observar que se forme una cuneta alrededor de la marca.

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Figura 18. Forma de lectura del volumen.

Tomado de: http://www.fq.uh.cu/dpto/qf/uclv/infoLab/practics/laboratorio/Volumetr%EDa/VOLUM_31.HTM

Existen otros equipos que realizan mediciones de volumen demasiado pequeñas, como las pipetas digitales, que miden líquidos en cantidades como los microlitros (µl).

Figura 19. Micropipetas electrónica y digitales.

Tomado de http://www.rubilabor.com/productos-y-servicios/categoria/liquid-handling/9/pipetasautomticas/55/ http://www.directindustry.es/prod/socorex-isba/micropipetas-electronicas-15374-54750.html http://www.reactivosyequipos.com.mx/producto/3843-pipeta-digital-1-canal-research-pro-de-1005000-ul

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Simulador donde se aplique la forma de realizar mediciones de volumen de diferentes objetos, sustancias o muestras. Basándose en la siguiente liga: http://concurso.cnice.mec.es/cnice2005/93_iniciacion_interactiva_materia/curso/material es/propiedades/volumen.htm 

Determinación de la temperatura

La temperatura es una magnitud con la que se mide el calor, no debe confundirse con calor, que es la transferencia de energía térmica de un cuerpo de mayor temperatura hacia otro con menor, mediante los procesos de conducción, convección y radiación. La temperatura es un término utilizado para determinar qué tan frio o tan caliente está un cuerpo, sustancia o muestra. El instrumento con el que se determina es el termómetro, que existen de diferentes materiales y escalas, según la actividad que se vaya a realizar (Gaviño, et al. 1985).

Figura 20. Calor y temperatura.

Tomado de http://www.quimicaweb.net/grupo_trabajo_ccnn_2/tema3/index.htm

Por ejemplo, en el norte del país los días calurosos de verano llegan a alcanzar hasta los 45 °C, y el invierno llega a niveles inferiores a 0 °C, hasta los -6 °C. ¿Te pasa que prefieres un refresco frío que uno al tiempo cuando hace calor? Es porque necesitas disminuir la temperatura de tu cuerpo. O, ¿en noches muy frías te duermes con más cobijas que las de costumbre? Es para que se produzca calor al subir la temperatura.

Un termómetro es un instrumento, en algunos casos elaborado de vidrio, que en su interior contiene mercurio, elemento químico que se dilata (expande) al aumentar la temperatura, por lo que asciende sobre el tubo de vidrio. Existen otros que son electrónicos y digitales. Recordarás que cuando te da un resfriado y acudes al médico, al momento de realizar su chequeo de rutina te toma (mide) la temperatura, colocándote debajo de la axila el termómetro y después de unos minutos realiza la lectura.

La escala que conoces para medir la temperatura es la centígrada (° C, grados centígrados), pero en el Sistema internacional de unidades de medida se utiliza la escala absoluta (° K, grados kelvin). Basándonos en la escala Celsius (°C), la temperatura a la que hierve el agua (punto de ebullición) es 100 °C a nivel del mar, serían 373 °C en la

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escala kelvin. El nivel en el que se congela (punto de fusión) es 0 °C, mientras que en la escala K serian -273 °C (Chang y College, 2002).

Figura 21. Equivalencia de la escala centígrada, fahrenheit y kelvin.

Tomado de http://teleformacion.edu.aytolacoruna.es/FISICA/document/fisicaInteractiva/Calor/Temperatura/T emperatura.htm

Además de las escalas centígradas y kelvin, existen otras que se llaman fahrenheit y rankin, para realizar las conversiones de las escalas de temperatura tenemos las siguientes fórmulas:    

°F = 9/5 °C + 32 o 1.8 °C +32 °C = (° F – 32) x 5/9 °K = °C + 273 ° C = °F -273

Simulador donde se aplique la forma de realizar mediciones de temperatura de diferentes objetos, sustancias o muestras. Basándose en la siguiente liga: http://concurso.cnice.mec.es/cnice2005/93_iniciacion_interactiva_materia/curso/material es/propiedades/temperatura.htm 

Determinación de la longitud

Generalmente las actividades de medición de la magnitud de longitud se determinan con una cinta métrica o flexómetro, en el caso de longitudes mayores a 20 cm; para las de cinco a 15 cm, con un vernier; y, si son demasiado pequeñas (menores a cinco cm), con un tornillo micrométrico, que determina milésimas de milímetro.

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Por ejemplo, si se desea medir la longitud de un biorreactor donde se está llevando a cabo el tratamiento de aguas residuales se ocupará un flexometro. Pero dentro de él existen conglomerados de bacterias, que son las que ayudan a la biorremediación formando biopelículas; en este caso, el espesor de dichas bacterias se medirá con un vernier (Chang y College, 2002).

Figura 22. Vernier digital y tornillo micrométrico.

Tomado de http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/sedes/manizales/4070002/contenido/capitulo1_3.html y http://mecanica-unahvs.blogspot.mx/2009/08/el-micrometro-o-tornillo-micrometrico.html

El vernier también se usa en el caso de medir el espesor de una hoja de árbol que es parasitada por microorganismos y se necesita procesarla para elaborar un plaguicida. 

Determinación del tiempo

El tiempo es una magnitud que antiguamente se medía a gran escala, registrando si era de mañana, mediodía, tarde, noche o madrugada. En la actualidad se determina más específicamente con un reloj o cronómetro, midiendo el tiempo transcurrido al procesar un organismo mediante alguna técnica.

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Figura 23. Medición del tiempo.

Tomado de http://www.basculasbalanzas.com/instrumentos-de-medicion/medicion-deltiempo.html



Determinación de la densidad

El densímetro o hidrómetro es un instrumento que sirve para determinar la densidad de un cuerpo o sustancia mediante la división de la masa entre su volumen. La temperatura y el estado influyen mucho en la densidad.

Figura 24. Densímetro o hidrómetro.

Tomado de http://es.wikipedia.org/wiki/Dens%C3%ADmetro http://www.labotienda.com/es/catalogo/densidad-temperatura_densimetros_densimetros.aspx

El hidrómetro se sumerge dentro de recipiente que contiene un volumen conocido de una muestra, desplazando parte del líquido. Por medio de una escala que tiene el instrumento, sustituyendo el valor en una fórmula, se obtiene la densidad de lo que se está procesando.

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Simulador donde se aplique la forma de realizar mediciones de densidad de diferentes cuerpos, sustancias o muestras. Basándose en la siguiente liga: http://concurso.cnice.mec.es/cnice2005/93_iniciacion_interactiva_materia/curso/material es/propiedades/densidad.htm Existen otro tipo de mediciones o determinaciones que se pueden realizar a las muestras mediante la utilización de equipos sofisticados como: 

Espectrofotómetro: Es un aparato que sirve para medir diferentes registros dentro del espectro electromagnético, mediante la absorción de la luz a través de un cuerpo, objeto o sustancia.

Destacan las longitudes de los rayos cósmicos, rayos gamma, rayos X (radiografías y rayos láser), luz ultravioleta (daña la piel causando cáncer al exponerse a la fuente que la produce, que es el Sol), la luz visible (los colores que percibes), luz infrarroja (proveniente del sol o de cuerpos que producen calor), las ondas de microondas (sirve para el funcionamiento de los radares, microondas) y las ondas de radio (ondas sonoras para comunicación telefónica, radio y televisión).        

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

 

Potenciómetro: Determina el pH de una muestra o sustancia.

Conductímetro: Determina la conductividad eléctrica de una muestra.

Voltímetro: Determina el voltaje de un cuerpo.

Velocímetro: Determina la velocidad a la que va un cuerpo.

Destilador: Ayuda en el destilado de sustancias o muestras que se estén procesando, de tal forma que se obtienen sustancias puras.

Agitadora: mueve agitando a 300 rpm continuamente las muestras.

Estufa o incubadora: En ella se colocan muestras que necesitan mantenerse a una temperatura tal para visualizar actividad como parte de la técnica.

Centrifuga: Auxilia en la separación de componentes de acuerdo al peso molecular de una muestra en solución, da giros mecánicamente desde tres mil rpm, o ultracentrífugas, con más de 15 mil rpm Baño maría: Es un contenedor al que se le agrega agua y se regula la temperatura. Sirve para llevar a cabo procesos en los que se requiera disolver reactivos, calentar muestras indirectamente o para agilizar una reacción.

Desecador: Recipiente de vidrio o plástico que contiene silica, que es un material que absorbe la humedad del medio circundante, evitando la concentración de humedad en la muestra dentro del contenedor.

Cronómetro: Es un reloj que se puede manipular de acuerdo a la actividad que se lleve a cabo para contabilizar el tiempo que requiere algún proceso o técnica.

Contador de células: Sirve para contar células sanguíneas; en una muestra de agua contaminada, cuenta microorganismos que son móviles o inmóviles; en un

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cultivo de bacterias, cuántas son cocos, diplococos, bacilos, espirales, entre otras cosas.

Homogeneizador o agitador simple: Permite mover, mezclar, agitar y homogeneizar una muestra contenida generalmente en tubos. Estos se colocan encima del aparato, que los empuja hacia debajo de tal manera que vibren, lo que permitirá agitar la sustancia o muestra.

Mufla: Sirve para calentar o calcinar muestras, sustancias, a elevadas temperaturas, pudiendo alcanzar hasta 2000°C. Autoclave: Sirve para realizar esterilizaciones de material y medios de cultivo al eliminar agentes contaminantes de los instrumentos. Es el medio para promover la siembra de microorganismos.

Refrigerador: Sirve para conservar muestras, sustancias y reactivos. Así como la comida en casa, que se guarda en él para evitar que se eche a perder, el material que se coloque dentro debe de estar perfectamente cerrado (sellado) y etiquetado para evitar confusión y prevenir algún accidente.

Campana de extracción: Útil al realizar actividades con reactivos sólidos o líquidos que desprenden olores tóxicos, que sean volátiles. Estos se eliminan por medio de la aspiración del aire con ayuda de la campana extractora, como una cocina integral, que elimina los malos olores al momento de estar cocinando.

2.3. Soluciones Una solución también es denominada disolución química, y consta de dos o más componentes o materia (aquello que ocupa un lugar en el espacio), los cuales se mezclan de manera homogénea o heterogénea. Puede presentarse en los estados de la materia (líquido, solido, gaseoso y plasma). Las soluciones constan de un solvente o disolvente y un soluto (Chang y College, 2002).

Soluto: Es la sustancia que está presente en menor cantidad en una disolución.

Solvente: También conocido como disolvente, es la sustancia en la que se va a disolver el soluto, siempre está presente en mayor cantidad en la solución y la mayoría son líquidos. El disolvente universal conocido hasta el momento es el agua (H2O), en ella se pueden realizar un sinfín de combinaciones (disoluciones) Las soluciones son de gran importancia para trabajar dentro del laboratorio, ya que con ellas se pueden procesar las muestras biológicas en aplicaciones hacia la biotecnología.

Debes de tener cuidado cuando estés trabajando con disoluciones, ya que para llevarlas a cabo necesariamente se debe trabajar mezclando diferentes sustancias y reactivos para su elaboración. Es de gran importancia utilizar la vestimenta y accesorios para elaborarlas, pues recordarás que los reactivos y soluciones que se emplean en su elaboración son químicos, con diferentes características, según la clasificación de la ONU, la NFPA o CRETIB.

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Todos los productos que conoces y que has utilizado son ejemplos de disoluciones: el agua de limón, los jugos, el agua de mar, el refresco, un café capuchino, el gel, etcétera.

2.3.1. Tipos de soluciones Las disoluciones se preparan mezclando un solvente o disolvente con un soluto y pueden encontrarse en cualquiera de los estados de la materia. Entre los tipos de soluciones que se pueden realizar o encontrar dentro de un laboratorio de biología, destacan (Chang y College, 2002):

Figura 25. Solución sólida.

Tomado de http://anitatorresanhueza.blogspot.mx/2010/04/unidad-i.html

Dependiendo de sus componentes. a. Solución homogénea: Es aquella cuyos componentes van a ser siempre los mismos y es fácil de distinguirla, como el agua en aceite, el café con azúcar, el carbonato con sal. b. Solución heterogénea: Es una mezcla de compuestos que no se pueden distinguir, por ejemplo si mezclas agua y alcohol, cloro con formol o aceite con glicerina.

De acuerdo a la estructura molecular de sus átomos. a. Sólidas: Es la combinación de dos sustancias o reactivos sólidos, como la sal (NaCl) con el azúcar o sacarosa (C12H22O11), harina y carbonato.

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Figura 26. Solución sólida.

Tomado de http://www.elportaldechari.com/sal-y-azucar-en-su-justa-medida/2008/09 http://mariadelcarmenhernandez71.blogspot.mx/

b. Liquidas: Es la mezcla de dos sustancias líquidas, como la el alcohol en agua, el éter en formol, aceite con glicerina, los ácidos en agua (el ácido cítrico en agua, es igual al agua de limón).

Figura 27. Solución líquida.

Tomado de http://solucionesqumicas.blogspot.mx/ http://www.saludalia.com/Saludalia/web_saludalia/farmacia/doc/usar_medicina.htm

c. Gaseosas: Son mezclas en estado gaseoso, como el aire que es una mezcla de oxígeno y nitrógeno; el gas de las chimeneas de las fábricas o industrias; el vapor de agua, que se produce cuando te bañas.

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Figura 28. Solución gaseosa el aire.

Tomado de http://www.tecamgroup.com/ http://bogotacity.olx.com.co/carros-y-carretillas-para-empresas-cerveceras-y-de-gaseosas-iid65805387

En el agua encuentras los tres estados de la materia: sólida al estar en forma de hielo; líquida cuando se va derritiendo; y gaseosa cuando la pones a calentar y genera vapores al hervir. d. Coloidal o plasma: Es la combinación del estado líquido con el sólido, como la mayonesa, la sangre, las salsas que se preparan en casa para acompañar los alimentos, las cremas para la cara o el cuerpo, entre otras.

Figura 29. Solución coloidal mayonesa y sangre.

Tomado de http://recetasdecocinablog.com/receta-de-mayonesa-casera/ http://los-suenos.org/sonar-con-sangre/

Dependiendo de su concentración. a. Solución insaturada o diluida: Es cuando se agrega poca cantidad de soluto al solvente. Por ejemplo, cuando a tu taza de café solo le pones una cucharada de azúcar.

Figura 30. Solución insaturada.

Tomado de: http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/ocw/mod/resource/view.php?inpopup=true&id=154

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b. Solución concentrada o saturada: Se agrega suficiente cantidad de soluto al solvente.

Por ejemplo, cuando le colocas de dos a tres cucharadas de azúcar a la taza de café y no queda ni muy dulce ni muy insípido, la concentración del soluto está a punto de precipitarse.

Figura 31. Solución saturada.

Tomado de: http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/ocw/mod/resource/view.php?inpopup=true&id=154

c. Solución sobresaturada: Se agrega demasiada cantidad de soluto al solvente. Por ejemplo, cuando se coloca un puñado de sal en agua, obviamente la concentración del soluto (sal) es tal que se induce la cristalización, hasta formarse un precipitado.

Figura 32. Solución saturada.

Tomado de http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/ocw/mod/resource/view.php?inpopup=true&id=154

En recapitulación de lo visto, una disolución de acuerdo a los componentes puede ser homogénea o heterogénea; según el estado de la materia molecular puede ser coloidal, sólida, líquida o gaseosa; y, de acuerdo a la concentración es diluida, concentrada y sobresaturada.

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Existen soluciones donde, dependiendo del estado en el que se encuentre el soluto y el solvente, forman otro tipo de disoluciones. Por ejemplo: líquido en sólido (azúcar o sal en agua), el gas en líquido (el vapor de agua, los aerosoles o el gas que se usa en casa).

La mayoría de las disoluciones son líquidas y se preparan generalmente con reactivos. Es de suma importancia analizar las características que posean cada uno de ellos, para tomar las precauciones adecuadas.

Después, con precaución y dependiendo de la concentración requerida, se pesa el reactivo en un recipiente. La balanza debe de marcar ceros al colocarle el recipiente vacío (tarar) y poco a poco, con una espátula o pipeta, se va a agregando el reactivo hasta que en la pantalla aparezca la cantidad deseada que se va a mezclar con otro reactivo previamente pesado.

Posteriormente, se vacía en otro recipiente para agregarle el disolvente, poco a poco, sobre un agitador, para homogeneizar la mezcla hasta llegar a la cantidad requerida, que puede ser desde ml hasta L, para su posterior utilización en una actividad para procesar muestras biológicas dentro del laboratorio.

2.3.2. Clasificación de las soluciones En una solución las características químicas de los componentes no van a resultar afectados o alterados, pero sus características físicas sí como el punto de fusión (congelación), el punto de ebullición (cuando hierve), presión de vapor, entre otros. Aparte de la concentración de un soluto dentro de una solución, la cual forma soluciones insaturadas, saturadas y sobresaturadas, existe otro término relacionado con la concentración del soluto: la solubilidad, esto es la máxima cantidad de soluto que se puede disolver en una determinada cantidad de disolvente a una temperatura específica.

Figura 33. Componentes proporcionales de las soluciones.

Tomado de http://mezclolucionrey.blogspot.mx/

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Para constatar lo anterior, se requiere conocer la relación en porcentaje que existe entre el soluto y el solvente, como se enuncia a continuación (Chang, R. y College, W., 2002): 

Porcentaje masa-masa o peso–peso (%m/m o P/P): La proporción indica la masa del soluto en g que está disuelta en cada 100 g del solvente. Se calcula:

Fórmula para calcular porcentaje masa-masa 

Porcentaje volumen a volumen (%V/V): La proporción indica el volumen de soluto (mL) disuelto en cada 100 mL del solvente. Se calcula mediante:

Fórmula para calcular porcentaje volumen-volumen 

Porcentaje peso a volumen o masa-volumen (%P/V o m/V): La proporción indica la masa del soluto (g) disuelto en cada 100 mL del solvente. Se obtiene:

Fórmula para calcular porcentaje masa-volumen 

Partes por millón (ppm): Son los mg de soluto que contiene 1 kg o 1L de la solución y se calcula mediante:

Fórmula para calcular partes por millón 

Molaridad (M): Número de moles de soluto que están en 1 L de solución y se calcula mediante:

Fórmula para calcular la molaridad 

Fracción molar (Xi): Se define como las moles que componen el soluto o el solvente divido entre las moles totales de la solución y se calcula mediante:

Fórmula para calcular la fracción molar

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

Molalidad (m): Número de moles del soluto que contiene 1 Kg de solvente y se calcula mediante:

Fórmula para calcular la molalidad 

Normalidad (N): Número de equivalentes en g de soluto que contiene 1 L de solución y se calcula mediante:

Fórmula para calcular la Normalidad

Actividades La elaboración de las actividades estará guiada por tu docente en línea, mismo que te indicará, a través de la Planeación didáctica del docente en línea, la dinámica que tú y tus compañeros (as) llevarán a cabo, así como los envíos que tendrán que realizar.

Para el envío de tus trabajos usarás la siguiente nomenclatura: BTLB_U2_A1_XXYZ, donde BTLB corresponde a las siglas de la asignatura, U2 es la etapa de conocimiento, A1 es el número de actividad, el cual debes sustituir considerando la actividad que se realices, XX son las primeras letras de tu nombre, Y la primera letra de tu apellido paterno y Z la primera letra de tu apellido materno.

Autorreflexiones Para la parte de autorreflexiones debes responder las Preguntas de Autorreflexión indicadas por tu docente en línea y enviar tu archivo. Cabe recordar que esta actividad tiene una ponderación del 10% de tu evaluación.

Para el envío de tu autorreflexión utiliza la siguiente nomenclatura: BTLB_U2_ATR _XXYZ, donde BTLB corresponde a las siglas de la asignatura, U2 es la unidad de conocimiento, XX son las primeras letras de tu nombre, y la primera letra de tu apellido paterno y Z la primera letra de tu apellido materno.

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Cierre de la unidad En esta unidad pudiste darte cuenta que se puede realizar una gran variedad de actividades dentro del laboratorio de biología con diversos enfoques. Principalmente se trata de llevar a cabo mediciones de diferente índole, ya sea cuantitativas o cualitativas, procesando diferentes organismos, tanto vivos como muertos, y a su vez de animales, plantas, microorganismos o biomoléculas.

También el tiempo de procesamiento de las muestras puede variar de acuerdo a la técnica que se use, por lo que debes de tener el tiempo necesario para trabajar y evitar realizar actividades acelerando los procesos, ya que estas pueden tardar desde simples segundos y minutos, hasta horas, días o meses.

Es muy importante que la metodología de las técnicas a ocupar para procesar las muestras sea la adecuada para esa actividad, puesto que en la mayoría de los casos se trabaja con reactivos y esto es muy peligroso; además de que algunos son muy costos y no sería correcto desperdiciarlo. Se recomienda trabajar siempre bajo la supervisión de un experto para que en caso de algún percance, él te auxilie.

Paulatinamente estamos llegando a la mitad del curso de la asignatura de Técnicas de laboratorio en biología, por lo que ya te has dado cuenta cómo es que los instrumentos y aparatos que hay dentro son importantes en las actividades que se llevan a cabo en procesos con aplicaciones biotecnológicas. En la siguiente unidad conocerás cómo el microscopio evolucionó y en la actualidad es pieza fundamental para observar muestras diminutas de diferente índole, así como sus componentes estructurales que, a simple vista, no es posible llevar a cabo.

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Para saber más

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Se te recomienda ver las películas de Armageddon o Apolo 13, donde se visualiza cómo el hombre viaja al espacio y observarás mejor la forma en que las personas y objetos flotan, para evidenciar la diferencia de peso y masa.

Se te recomienda que les des un vistazo a tus apuntes de Química para reafirmar los conocimientos de las soluciones.

Fuentes de consulta

Bibliografía básica  García, S. J. (2009). Fisiología de microorganismos. Manual de laboratorio.

México, D. F.: Trillas.  Gaviño de la T. G., Juárez, L. C. y Figueroa, T. H. H. (1985). Técnicas biológicas selectas de laboratorio y de campo. México, D. F: Limusa.

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Todd, S. (2007). Laboratorio. Madrid: Marbán.

Bibliografía complementaria  Barthelemy, E. R., Dawson, R. J. y Lee, A. E. (1976). Técnicas de laboratorio de biología. México: CECSA.  Chang, R. y College, W. (2002). Química. 7a. ed. D.F, México: Mc Graw-Hill.  Solomon, P. E., Berg, R. L. y Martin, W. D. (2008). Biología, 8a. ed. México: Mc Graw Hill.  Zarco, R. E. (1998). Seguridad en Laboratorios, 2a. ed.

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