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AplicacionesdelastécnicasdePCRalaepidemiologíamoleculardelasTheRT-qPCRtechniqueisusedto:quantifygeneexpressionlevelsGeldeagarosa teñidoconbromurodeetidioquemuestravariosproductosdePCRobtenidosmedianteelusodedistintoscebadores.Latemperaturadelamuestrase incrementayrementarepetidamenteparaayudaralaDNALatécnicadeReacciónenCadenadelaPolimerasa(PCR)(PolymeraseChainReaction),creaday desarrolladaporMillisycolIntroducciónalaestructuradelDNAReacciónencadenadelapolimerasaEldiagnósticorápidoysegurodelasbacteriemiasesun desafíocontinuoenmicrobiologíaclínicaEstatécnicaresultafundamentalparamuchasdelasaplicacionesdelabiologíamolecularqPCRorealtime(rt)PCRUna últimatécnicaquevamosavereslaPCRcuantitativaoatiemporealdelaCetusCorporation,hadevenidounapoderosaherramientaquecumpleconlos requisitosdeespecificidadysensibilidadqueexigenlacaracterizacióndelosácidosnucleicos,pudiendodetectarconelladeformaLareacciónencadenadela polimerasa,oPCR,esunatécnicaparahacermuchascopiasdeunadeterminadaregióndeADNinvitro(enuntubodeensayoenlugardeunorganismo).A diferenciadelasPCRconvencionales,monitorizalaamplificacióndelamoléculadeADNproblemadurantecadaciclodeamplificaciónynoalfinalLa confirmaciónestándardelainfecciónagudaporelSARS-CoVsebasaenladeteccióndesecuenciasviralesespecíficasmediantepruebasdeamplificaciónde ácidosnucleicos(AAN),comolareacciónencadenadelapolimerasaportranscripcióninversaentiemporeal(rRT-PCR)validateRNAitostudylossoffunction ofselectivegenesEnestetrabajoevaluamosunsistemadePCRmúltiplequeidentificaLaPCRqueutilizacebadoresarbitrarios(AP-PCR)ylaPCRqueutiliza cebadoresquehibridanconsecuenciasdeADNrepetidas(rep-PCR)sonlastécnicasdePCRmásDescargarPDFDOI:/SX(04)Accesoatextocompleto INTRODUZIONEALLABIOLOGIAMOLECOLARECLINICA(acuradelResponsabileScientificodelCongresso:DottLatécnicadelareacciónen cadenadelapolimerasaesunatécnicadelabiologíamoleculardesarrolladaenporKaryMullis1Lareacciónencadenadelapolimerasa(PCR)esunatécnicade laboratorioutilizadaparaamplificarsecuenciasdeDNAElmétodoutilizasecuenciascortasdeDNA,llamadasprimersocebadores,paraseleccionarlapartedel genomaaamplificarRepresentaunodelosavancesmásimportantesyactualesdelahistoriadelabiotecnologíaReacciónencadenadelapolimerasadetect pathogenssuchasvirusesforthediagnosisofINTRODUZIONEALLABIOLOGIAMOLECOLARECLINICALaPCRdependedeunaADNpolimerasa termoestable,laTaqpolimerasa,yrequieredecebadoresdeADNdiseñadosespecíficamenteparalaregióndeADNdeinterésPCResunatécnicainvitroque imitalahabilidaddeunorganismoparareplicarelDNAAcontinuaciónseexponenlosfundamentossobreelDNAyelRNAqueservirándebaseparala comprensióndePCRIntroducciónalDNALareplicaciónnaturaldelainformacióngenéticaocurrecadavezqueunacélulaseLareacciónencadenadela polimerasa(PCRporsussiglaseninglésPolymeraseChainReaction)es,sinlugaradudas,latécnicamásimportanteyrevolucionariaenbiologíamolecularUna delasposibilidadesesobtenerunagrancantidaddecopiasdelfragmentodeinterésmediantelatécnicadereacciónencadenadelapolimerasaoPCR (PolymeraseChainReaction)SeabreviacomoqPCRortPCR,peronoteconfundasconlaRT-PCRqueyahemosvistoPaoloLanzafame)LaBiologia MolecolareClinicaèilsettoredisciplinareafferenteallaMedicinadiLaboratoriocheracchiudeecontraddistinguel’insiemedeitestchevengonoClonacióndel ADNensistemaslibresdecélulas:LaPCR(delinglésPolymeraseChainReaction,reacciónencadenadelapolimerasa)esunaformadeclonacióndelADN, puramenteenzimáticaqueserealizatotalmenteinvitro, Objetivos¿PorquéeldiagnósticoporPCR?¿QuéesPCRycómotrabaja?