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Enteropatía Proliferativa Porcina: epidemiología y diagnóstico Resumen del trabajo presentado por el Dr. Roberto Guedes en el evento Virbactual 2008 en México, tema de actualiad sobre epidemiología y diagnóstico de la Enteritis Proliferativa Porcina. Tópicos de la enfermedad subclínica sobre el estudio, análisis y experiencias en el proceso de Doctorado del autor.

Prof. Roberto Guedes, DVM, MS, PhD Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais. Brasil. guedes@vet.ufmg.br

La cantidad de nueva información y descubrimientos, durante los últimos seis o siete años, en relación a Lawsonia Intracellularis, el agente etiológico de la Enteropatía Proliferativa, su sensibilidad a diferentes drogas antimicrobianas, su prevención / control basado en el tratamiento y vacunación, su diagnóstico y, finalmente, su genoma, fuera increible. Nuevas moléculas han demostrado ser efectivas contra una infección ...continúa en el interior de L. Intracellularis in vivo e in vitro.

MVZ. Jorge Galaz González Asesor técnico División porcinos Laboratorios Virbac México S.A. de C.V.


Enteropatía Proliferativa Porcina: epidemiología y diagnóstico ..viene de portada

Se ha desarrollado una nueva vacuna viva-modificada y que fué lanzada internacionalmente, ha sido un gran aprendizaje sobre la dinámica de la enfermedad utilizando los perfiles serológicos en las piaras. La secuencia completa del genoma se determinó en el año 2003 en la Universidad de Minnesota USA, y esto abrió una enorme área de investigación y nuevas formas de entendimiento sobre este meticuloso microorganismo. Sin embargo, falta mucho por conocer sobre la epidemiología de esta enfermedad, principalmente en relación a la fuente de infección, resistencia de la bacteria en el ambiente, los posibles vectores biológicos que pudieran diseminar la enfermedad entre las granjas. Nuestra intención en este manuscrito es discutir algunos aspectos relacionados sobre lo que se conoce en relación a la epidemiología y las nuevas pruebas diagnósticas disponibles para detectar la infección y exposición causadas por L. Intracellularis, y lo que es meramente especulación.

Publicación Trimestral de Actualización Científica y Tecnológica No. 13 Guadalajara Jalisco México. Realizado por VIRBAC MÉXICO S.A. de C.V. División Cerdos y Aves


Epidemiología Sabemos que con tan solo 1,000 a 10,000 bacterias es una cantidad suficiente para inducir infección y eliminarse en las heces, dos o tres semanas después de la inoculación. También, sabemos que los organismos L. Intracellularis pueden sobrevivir por lo menos 14 días en heces a temperatura ambiente. Sin embargo, estos experimentos son muy difíciles de realizarse. Por ejemplo: usualmente se cuenta el número total de bacterias, no el número de microorganismos viables. Se especula sobre la transmisión de la infección de la cerda al lechón, como una posible forma de contagio; sin embargo, la detección de las bacterias en las heces de la madre, su cuantificación y evolución de la susceptibilidad de los lechones lactantes nunca ha sido desarrollada. Constantemente, se refieren a los fomites, tales como las botas o los vectores biológicos como las aves y ratones, dentro del ciclo de infección de L. Intracellularis en panfletos publicitarios. A pesar de la posibilidad real de estos eventos, hasta hoy, lo más cerca que hemos llegado en relación a estas conclusiones es la sobrevivencia de las bacterias en las heces por más de dos semanas, la obtención de un reporte de infección natural de una colonia de ratones en US, y otros reportes de infección natural en avestruz y emu. No existe prueba alguna sobre la detección de DNA de L. Intracellularis en botas sucias de granjas positivas, ni tampoco alguna prueba de la posible transmisión de L. Intracellularis proveniente de ratones inoculados experimentalmente a cerdos susceptibles, o bien, averiguar la presencia del microorganismo en aves de vida libre. No niego que este tipo de transmisión suceda, simplemente digo que estas formas de transmisión no han sido demostradas todavía. De hecho, se ha tratado, en colaboración con la Universidad de Minnesota, inocular gorriones, capturados en la zona metropolitana de Brasil, con cultivos puros de L. Intracellularis para evaluar si éstas aves son susceptibles a la infección, y si pueden eliminar microorganismos a través de las heces.

TRANSMISIÓN

No hemos terminado el estudio todavía, sin embargo, hasta hoy, ningún ave ha mostrado un antígeno en alguna de las diferentes secciones intestinales, teñidas mediante inmunohistoquímica, después de tres semanas de inoculación. 2


En muchos estudios se ha demostrado la transmisión fecal – oral de L. Intracellularis, utilizando heces de cerdos contaminados con un número determinado de bacterias totales. Se ha demostrado la eliminación fecal hasta por tres meses, tanto en condiciones experimentales como de campo. Esta eliminación generalmente se presenta en cerdos subclínicos. Como resultado, la probable y más importante forma de transmisión es directa, de cerdo a cerdo a través de material fecal contaminado.

Friendship et al. (2005) Journal Swine Health and Production, 13(3):139-142

Friendship et al. (2005) Journal Swine Health and Production, 13(3):139-142

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Un estudio reciente en Canadá ha mostrado la importancia sobre el conocimiento del estatus de la infección causada por L. Intracellularis durante el reemplazo de hembras. Piaras positivas que recibieron animales de reemplazo provenientes de una granja multiplicadora libre se enfrentaron a problemas recurrentes, en su presentación aguda de la enfermedad; mientras que en piaras comerciales negativas que recibieron a este mismo tipo de animales nunca presentaron signos clínicos. Justo después del brote presentado de forma aguda en la granja multiplicadora el escenario cambió completamente para las granjas comerciales. Las positivas dejaron de tener problemas y las negativas presentaron brotes severos. Los factores de riesgo relacionados con la Enteropatía Proliferativa han sido publicados utilizando la retrospectiva, así como casos de estudios en donde se muestra su control, indicando que la transportación, cambio de alimento, variación significativa en la temperatura, flujo de cerdos y piso son los aspectos más relevantes que deben ser considerados para reducir la infección.


Sin embargo, incluso cuando se aplica todo este conocimiento en asociación con antimicrobianos eficientes, no ha habido forma de erradicar L. Intracellularis de las piaras. El programa Danés de erradicación ha tenido buenos resultados cuando llegan animales a nuevas instalaciones, pero usualmente, los animales se re-infectan, a más tardar, a los dos años. Es claro que falta mucho por aprender acerca de la transmisión y resistencia de la bacteria, para obtener mejores y suficientes conocimientos para establecer un programa de erradicación. Como resultado, se hace necesario conducir más estudios para entender detalles importantes acerca de la epidemiología de L. Intracellularis. Parámetros clínicos, de desempeño y alteraciones histológicas y macroscópicas en lechones inoculados con homogenado de mucosa de animales enfermos

1 Proporción de lechones con lesiones macroscópicas consistentes con PE. 2 Proporción de lechones con antígeno marcador de L intracellularis por IHQ del ilieo. 3 Promedio del score de materia fecal : 0 Normal, 1: Moderado, 2 severo. 4 Ganancia diaria de peso promedio. 5 Kilo alimento/ Kilo ganado.

Valores dentro de una columna con superíndice distinto son significativamente distintas (P<0.05).

Paradis et al (2005)

Diagnóstico Brotes o casos individuales de la forma aguda (hemorrágica) o enteropatía proliferativa en cerdas de reemplazo o cerdos durante la engorda, casi cercanos para irse al mercado, no son difíciles de diagnosticar. Existe una mortalidad significativa involucrada en estas situaciones, y los hallazgos clínicos y macroscópicos son muy específicos de la forma hemorrágica. El desafío radica en el diagnóstico de la forma subclínica y crónica. La diarrea es característica en esta forma de la enfermedad, aunque puede no estar presente. Como resultado, un seguimiento cuidadoso y desarrollo de resultados es un aspecto importante a considerar como primer paso para la obtención de un diagnóstico de la enteropatía proliferativa crónica. Para confirmar la positividad a L. Intracellularis de una piara, y su asociación con el desarrollo del problema, se deben tomar muestras fecales de por lo menos 15 animales enfermos (con diarrea y/o de animales poco desarrollados); deben ser colectadas del recto y congelados de forma individual antes de remitirlas al laboratorio. Se debe solicitar su análisis por PCR. 4


Para acelerar el proceso de diagnóstico, dos o tres de esos animales deben ser sacrificados para obtener una evaluación macroscópica, y se deben tomar muestras para mandarse a histopatología e inmunohistoquímica para L. Intracellularis.

Sin embargo, la gran limitación de esta técnica es la disponibilidad de las pruebas serológicas alrededor del mundo. Después del desarrollo de las pruebas de inmunofluorescencia indirecta (IFA) en placa (Ames, Iowa, USA) y la mejora de la calidad de esta técnica mediante el ensayo La serología es una herramienta diagnóstica que en monocapa de la inmunoperoxidasa (IPMA) debe ser usada para conocer si una piara es positiva (Universidad de Minnesota, USA), los ensayos a Lawsonia. El objetivo de la serología es dibujar un serológicos en US no significaron un problema. perfil serológico de la piara y utilizarla para tener una mejor estimación del tiempo óptimo para inter- Sin embargo, ninguna de estas pruebas pudo venir con la medicación o vacunación. correrse en los diferentes continentes debido a las dificultades en la producción y compra de los Para obtener resultados sobre perfiles serológicos kits. Como resultado, el “ileitest”, una prueba IFA más confiables de un estudio cruzado – seccional, en vidrio, pudo ser distribuida en otros lugares, se deben tomar muestras sanguíneas de por lo y fue desarrollada y distribuida alrededor del menos 20 animales, desde 5 semanas hasta la edad mundo. Sin embargo, incluso esta última prueba de salir al rastro, con intervalo de 3 semanas. estuvo cada vez menos disponible. Tres o cuatro semanas antes del pico de la infección entre los animales muestreados debería ser el tiempo Recientemente, otras dos pruebas serológicas ideal para una medicación estratégica con una droga se desarrollaron: LPS-ELISA desarrollada en Ames, eficaz durante 10 a 14 días. Iowa, y ELISA bloqueantes (blocking-ELISA) desarrollada en Alemania. Ambas pruebas han La idea es dejar a los animales con un tiempo sido validadas, y la segunda (ELISA bloqueante) de exposición suficiente para inducir un impacto está actualmente en el mercado. Sin embargo, en el desarrollo. Si tu opción es vacunar, debe todas estas cinco pruebas serológicas utilizan ser implementada cinco o seis semanas antes del L. Intracellularis como antígeno puro. pico de la seroconversión. La idea es exponer a cada cerdo al mismo tiempo, Como hay pocos laboratorios en el mundo que antes de que estén en contacto con la cepa de disponen de esta bacteria y la cultivan, su costo campo. La serología es una herramienta excelente no es bajo, y es difícil predecir el costo final de de diagnóstico que permite ahorrarnos dinero. dichas pruebas. 5


Consideraciones finales

Metabolismo Procesos celulares Procesamiento de la información Prod. de toxina/Resistencia Adaptación a cond. atipicas Patogénesis Función desconocida

SECUENCIAMIENTO DEL GENOMA

En un futuro cercano, la manera probable de diagnóstico será el desarrollo de un nuevo kit serológico utilizando un antígeno proteico específico recombinante inmunogénico de L. Intracellularis, purificado de una secuencia genética blanco, identificada en el genoma de la bacteria. Aunque los últimos años han sido sumamente productivos en relación al estudio de L. Intracellularis y el conocimiento sobre la enteropatía proliferativa, falta mucho por descubrir para resolver de forma definitiva el problema en campo. Nosotros todavía estamos rascando la información sobre todo lo relacionado a la epidemiología de L. Intracellularis. Hay mucho que hacer en esta área. Se ha dado un gran paso al completar la secuencia completa del DNA de L. Intracellularis. El siguiente paso, será la interpretación del mismo, lo que tomará más tiempo y apuntando, entre otras cosas, el desarrollar mejores pruebas diagnósticas para esta enfermedad. VIRBAC MÉXICO, S.A. DE C.V. Lote 30, Manzana I www.virbac.com.mx

Parque Industrial Guadalajara Tel (01.33) 50.00.25.00

El Salto Jalisco C.P 45690 Fax (01.33) 50.00.25.15

LÍNEA VIRBAC 01 800 024 7575


Publicación Trimestral de Actualización Científica y Tecnológica para Médicos Veterinarios.

Premedox 50% MAXX REG. S.A.G.A.R.P.A. Q-0042-349

DESCRIPCIÓN Premezcla antibiótica a base de hiclato de Doxiciclina con la inclusión de N-acetilcisteina, de amplio espectro y potente expectorante con efecto mucolitico. INDICACIONES Para el tratamiento de los procesos patológicos y alivio sintomatico de las afecciones del tracto respiratorio, provocados por micoplasmas y bacterias. Control de afecciones digestivas y prevalencia de la Enteropatía Proliferativa en porcinos. AVES Control de enfermedades respiratorias causadas por: M. Gallisepticum. M. Synoviae, H. paragallinarum, O. Rhinotracheale y E. Coli.

CERDOS Tratamiento y control de exacerbación de signos clinicos, de las enfermedades provocadas por Pasteurella multocida, Mycoplasma Hyopneumoniae, Actinobacillus Pleuropneumoniae, Bordetella Bronchiseptica y enfermedades entericas causadas por Lawsonia intracellularis ( Ileítis ) . DOSIS En aves administrar de 300 a 400 g de Premedox 50% MAXX por tonelada de alimento. En cerdos administrar de 400 a 500 g de Premedox 50% MAXX por tonelada de alimento TRATAMIENTO La duración del tratamiento será de 8 días. VÍA DE ADMINISTRACIÓN Oral mezclado uniformemente en el alimento.


Virbac Al Día Porcino no.14