Preparación microscópica – Preparación con dos colorantes

✔ Ventajas ✘ Inconvenientes

• Excelente tinción • Exige más tiempo • Requiere secado al aire o fi jación con calor (véase el Anexo A) • Las muestras gruesas u oleosas requieren una fi jación efectiva y un mayor tiempo de tinción.

Técnica

1. Sumergir el portaobjetos en el fi jador (azul-verde claro; bote 1) y, a continuación, en el colorante eosinófi lo (rojo; bote 2) y en el basófi lo (violeta; bote 3) de 5 a 10 veces durante un segundo cada vez (fi g. 74). 2. Lavar con agua; dirigir el agua a la parte trasera del portaobjetos, no directamente sobre la muestra (fi g. 75). 3. Secar con papel absorbente la parte trasera del portaobjetos (no el que contiene la muestra). 4. Secar con suavidad el agua sobrante acumulada en el lado de la muestra con un papel absorbente, con cuidado de no dañarla (también se puede secar con secador; véase la fi gura 70 del

Anexo A) (fi g. 76). 5. Depositar una gota de aceite de inmersión sobre la muestra y colocar el cubreobjetos. Aplicar una cantidad sufi ciente como para formar una capa uniforme, sin burbujas ni zonas secas.

Figura 74. Método con dos colorantes para teñir una preparación por impronta con una tinción de tipo Diff-Quik®. El portaobjetos se sumerge primero en el fijador, luego en el colorante eosinófilo y después en el colorante basófilo (de izquierda a derecha) entre 5 y 10 veces, durante un segundo cada vez.

Figura 75. Tinción con dos colorantes. Lavar la preparación dejando caer el chorro de agua sobre la parte trasera del portaobjetos.

Figura 76. Tinción con dos colorantes. Secar con cuidado el portaobjetos sobre papel absorbente.