Pruebas bioquímicas para identificación de Enterobacterias, Staphylococcus, Streptococcus y Pseudomo

PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA IDENTIFICACIÓN DE ENTEROBACTERIAS, STAPHYLOCOCCUS, STREPTOCOCCUS Y PSEUDOMONAS

CONTENIDO

Pruebas bioquímicas………………………….……03 Enterobacteriácea……………………………...…..04 Estaphylococcus………………………………....22 Pseudomona……………………………………..26 Estreptococos……………………………………30

PRUEBAS BIOQUIMICAS Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos en los cuales es conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.

Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no Se emplean para identificar de forma clara y precisa, la presencia o ausencia de una enzima, de un grupo de enzimas, o de una vía metabólica completa en uno o más microorganismos.

Son

empleadas

principalmente

identificación y clasificación de bacterias y hongos.

la

Enterobacteriácea Son bacterias Gram negativas que contiene más de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener morfología de cocos o bacilos. Los miembros de este grupo forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos.

PUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS: I.

Agar-hierro-triple azúcar

II.

Agar LIA (Lisina Hierro

III.

Agar citrato de Simmons

IV.

Agar urea

V.

Agar MIO

Agar-hierro-triple azúcar El Agar-hierro-triple azúcar es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de enterobacterias según: ▪ Fermenten o no glucosa.

▪ Fermenten o no lactosa o sacarosa.

▪ Produzcan o no ácido sulfhídrico.

▪ Produzcan o no gas.

Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son: 1. Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo virar a amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de color rojo.

2. Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que, si no lo es, la superficie del medio continuará de color rojo.

3. Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de las sales de hierro), se presentará un ennegrecimiento del tubo. La producción de sulfhídrico y el consiguiente ennegrecimiento pueden impedir ver la fermentación de la glucosa (fondo amarillo), pero este hecho implica

directamente que la bacteria es fermentadora de glucosa.

4. Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria es productora de gas.

COMPUESTO Peptona Extracto de levadura

CANTIDAD 159 g 3 9.9g

Extracto de carne Sacarosa Sulfato de hierro

3g 10 g 0,20 g

Cloruro sรณdico Tiosulfato de sodio Rojo fenol

5g 0,30 g 0,024 g

Limitaciones La prueba de TSI se debe leer entre 18 a 24 horas de incubaciรณn. Una lectura antes de este tiempo puede dar un falso positivo de fermentaciรณn A/A. En tanto que, una lectura posterior a este tiempo, puede dar lugar a una imagen falsa negativa de no fermentador, debido al consumo de las peptonas que alcalinizan el medio

Sembrado El medio TSI debe ser

colonia e inocular un medio

inoculado

TSI.

con

colonias

puras, aisladas en cultivos

El sembrado se realizará con

primarios o selectivos. Si la

un ansa recta o aguja. Se

colonia se toma de medios

realizará

selectivos

fueron

cuidando que sea por el

muestras

centro del medio hasta llegar

con flora mixta, se debe

al fondo, y luego se termina

tener el cuidado de tomar

el sembrado inoculando la

solo de la superficie, ya que

superficie

en la parte inferior de la

zigzag.

colonia pueden existir cepas

punciones.

viables inhibidas en ese

Incubar a 37°C en aerobiosis

medio.

por 18-24 horas. Interpretar

Por tanto, no se debe jamás

en este tiempo, ni antes, ni

enfriar el asa en un medio

después.

sembrados

que con

selectivo para luego tomar la

una

en No

punción,

forma hacer

de dos

Agar LIA (Lisina Hierro) El agar LIA (Lisina Hierro) es una prueba bioquímica utilizada para

la

identificación

de

bacterias

de

la

familia

Enterobacteriaceae. Este medio fue creado por Edwards y Fife, basados en la fórmula de Falkow.

Originalmente esta prueba era un caldo que contenía peptonas, extracto de levadura, glucosa, L-lisina, púrpura de bromocresol y agua destilada. Edwards y Fife le agregaron agar-agar, citrato férrico de amonio y tiosulfato sódico.

La prueba consiste básicamente en demostrar la presencia de la enzima lisina descarboxilasa, capaz de reaccionar con el grupo carboxilo del aminoácido L-lisina. También puede ocurrir una desaminación del aminoácido por la presencia de la enzima lisina desaminasa.

Adicionalmente, la composición del medio permite evidenciar la capacidad de algunos géneros bacterianos de producir sulfuro de hidrógeno. Finalmente, también es posible observar la generación o no de gas en el medio.

Interpretación de la prueba I.

Descarboxilación de la lisina

Los tubos deben leerse después de culminadas las 24 horas de incubación, de lo contrario se corre el riesgo de malinterpretar la reacción, reportando falsos negativos.

Hay que recordar que la primera reacción que ocurrirá será la fermentación de la glucosa, por tanto todos los tubos al cabo de 10 a 12 horas virarán a color amarillo.

Si al finalizar el tiempo de incubación (24 horas) se observa un fondo amarillo con una superficie morada o púrpura, la reacción es negativa. El color púrpura de la superficie corresponde a la alcalinización del medio por el uso de las peptonas.

Una reacción positiva es aquella en donde el fondo y la superficie del tubo son completamente púrpuras, es decir, vuelve al color original.

Por tanto, quien determina la positividad de la prueba es la base o fondo del medio. Si se tiene duda sobre el color se puede comparar con un tubo de LIA no inoculado.

II.

Desaminación de la lisina

Un tubo que evidencia la desaminación de la lisina tendrá una superficie color rojiza granate y un fondo amarillo (ácido), o todo el tubo color rojizo granate.

Esta

reacción

se

interpreta

como

negativa

para

la

descarboxilación de la lisina, pero positiva para desaminación de la lisina.

Esta reacción se define e interpreta en el bisel.

Producción de sulfuro de hidrógeno (H2S)

Una reacción positiva se observa por la aparición de un precipitado negro en todo el medio o parte de él. Generalmente entre el límite del bisel y la base.

Si el precipitado se da en todo el tubo no dejará ver las otras reacciones que ocurren en el medio.

Registro de los resultados Al interpretar la prueba los resultados se registran de la siguiente manera: 1. Primero se lee el bisel, luego el fondo o taco, después la producción de H2S, y finalmente la producción de gas.

Ejemplo: K/A + (-). Esto significa: ▪ K: Bisel alcalino (color morado) ▪ A: Fondo ácido (amarillo), es decir, reacción de descarboxilación negativa y desaminación negativa.

▪ +: Producción de sulfuro de hidrógeno ▪ (-): Sin gas.

Usos Esta prueba, junto a otras pruebas bioquímicas, se utiliza para la identificación de bacilos de la familia Enterobacteriaceae.

El medio se siembra con un ansa recta o aguja, se realizan una o dos punciones hasta el fondo del tubo, y luego se estría la superficie del medio en zigzag.

Se incuba por 24 horas a 35-37°C en aerobiosis. Si es necesario se deja incubando por 24 horas más.

Es principalmente útil para diferenciar especies de Citrobacter lactosa negativos de Salmonellas sp.

Agar citrato de Simmons El agar Citrato de Simmons es un medio sólido utilizado como prueba bioquímica de identificación de microorganismos, especialmente de bacilos Gram negativos. El medio original fue creado por Koser en 1923.

Algunas bacterias tienen la capacidad de sobrevivir en ausencia de fermentación o producción de ácido láctico, necesitando conseguir energía a través de la utilización de otros sustratos. En esta prueba la única fuente de carbono ofrecida es el citrato.

Las bacterias que son capaces de sobrevivir bajo estas condiciones metabolizan el citrato de forma rápida por una vía alterna a la tradicional, utilizando el ciclo del ácido tricarboxílico o el ciclo de fermentación del citrato.

El catabolismo del citrato por parte de las bacterias comprende un mecanismo enzimático sin la intervención de la coenzima A. Esta enzima se conoce con el nombre de citricasa (citrato oxalacetato-liasa) o citrato desmolasa. La reacción requiere la presencia de un catión bivalente, que en ese caso es suministrado por el magnesio.

La reacción genera oxaloacetato y piruvato, que luego dan origen a ácidos orgánicos en medio de un pH alcalino formado por la utilización de la fuente de nitrógeno. Estos ácidos

orgánicos son usados como fuente de carbono generando carbonatos y bicarbonatos, alcalinizando aun más el medio.

Modo de sembrado El medio citrato de Simmons debe ser ligeramente inoculado en cola de pescado usando ansa recta o aguja, e incubarse durante 24 horas a 35-37°C. Culminado el tiempo se observan los resultados. El sembrado se realiza únicamente en la superficie del agar. No hacer punción.

Interpretación Si el medio queda del color original (verde) y no hay crecimiento visible, la prueba es negativa, pero si el medio cambia a color azul, indica la presencia de productos alcalinos, que es detectado por el indicador de pH. En este caso la prueba es positiva.

Esto sucede porque si la bacteria utiliza el carbono del citrato también es capaz de tomar el nitrógeno del fosfato de amonio con el cual libera amoníaco, alcalinizando el medio.

Por otra parte, si se observa crecimiento de la bacteria en el medio, pero no hay cambio de color, también la prueba debe considerarse positiva, ya que si hay crecimiento quiere decir que la bacteria fue capaz de utilizar el citrato como fuente de carbono, aunque no haya un cambio del pH en el momento (en ocasiones puede tardar). Si existe duda en la interpretación del

color final, se puede comparar con un tubo de citrato no inoculado.

Uso El agar citrato de Simmons es usado para la identificaciรณn de ciertos

microorganismos,

en

especial

los

bacilos

pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae y otros bacilos no fermentadores de glucosa.

Intensidad del color Debe tenerse en cuenta que la intensidad del color producido cuando la prueba es positiva puede variar de acuerdo a la casa comercial.

Ademรกs, hay microorganismos que dan positivo a las 24 horas, pero hay otras cepas que requieren 48 horas o mรกs para producir un cambio del pH.

Agar urea El caldo urea es un medio de cultivo líquido, utilizado para evidenciar la presencia de la enzima ureasa en ciertos microorganismos. La ureasa es una enzima microbiana que se produce de manera constitutiva, es decir, es sintetizada independientemente de estar o no presente el sustrato sobre el que actúa.

La

función

de

la

ureasa

está

relacionada

con

la

descomposición de los compuestos orgánicos. No todos los microorganismos son capaces de sintetizar esta enzima, por tanto, su determinación en el laboratorio permite identificar ciertas cepas bacterianas e inclusive diferenciar entre especies de un mismo género.

Existen dos tipos de prueba de la urea: Stuart y Christensen.

Se diferencian en su composición y en la sensibilidad. La primera es especial para evidenciar gran cantidad de ureasa producida por especies del género Proteus.

La

segunda es más sensible y puede detectar pequeñas

cantidades de ureasa generadas tardíamente por otros géneros bacterianos, tales como Klebsiella, Enterobacter, Staphylococcus, Brucella, Bordetella, Bacillus, Micrococcus, Helicobacter y Mycobacterium.

El caldo urea de Stuart está compuesto por urea, cloruro de sodio, fosfato dipotásico, fosfato monopotásico, extracto de levaduras, rojo de fenol y agua destilada. .

Usos La prueba de la urea es extremadamente efectiva para distinguir el género Proteus de otros géneros de la Familia Enterobacteriaceae, dada la rápida reacción que brinda Proteus.

Si se usa la composición de Christensen, la prueba ayuda a diferenciar entre especies de un mismo género. Por ejemplo, S. haemolyticus y S. warneri son Staphylococcus coagulasa negativos y betahemolíticos, pero se diferencian en que S. haemolyticus es urea negativo y S. warneri es urea positivo.

Por otra parte, McNulty empleó con éxito el caldo de urea de Christensen al 2% para estudiar la presencia de Helicobacter pylori en muestras de biopsias tomadas del la mucosa gástrica (región antral).

La presencia de H. pylori se pone en evidencia con una prueba de urea positiva. El tiempo de duración para observar los resultados es directamente proporcional a la cantidad de microorganismos presentes.

Por último, esta prueba también es útil para diferenciar especies de los géneros Brucella, Bordetella, Bacillus, Micrococcus y Mycobacterias.

Sembrado Los dos métodos requieren

a 37°C o a temperatura

un inóculo microbiano fuerte

ambiente por 24 a 48 horas

para

de incubación.

optimizar

resultados.

Las

bacterianas preferiblemente

los colonias

En el caso del caldo urea de

toman

Christensen se incuba a 37

agar

ºC por 24 horas. Si la prueba

se del

sangre y las levaduras del

es

agar

incubar hasta por 6 días. Si

algunas

Sabouraud,

salvo

excepciones.

negativa

se

puede

El

la prueba da positiva antes

inóculo se emulsiona en el

de las 6 horas, indica que se

medio líquido.

trata de una cepa del género Proteus.

Para el caldo urea de Stuart

En el caso del agar urea de

se incuba a 37 ºC por 24 a 48

Christensen,

horas, sabiendo que solo se

fuertemente el bisel del agar,

está en busca de cepas del

sin

género Proteus cuando la

incuba e interpreta de la

cepa es una bacteria. Para

misma manera al caldo.

levaduras se puede incubar

realizar

se

inocula

punción.

Se

Agar MIO El medio MIO es una prueba bioquímica que se utiliza para ayudar en la identificación de especies de bacterias pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae. Es bastante nutritivo y está compuesto por glucosa, extracto de levadura, peptona, tripteína, clorhidrato de L-ornitina, púrpura de bromocresol y agar.

El significado de sus siglas (MIO) describe cada uno de los parámetros que se pueden observar en este medio; motilidad, indol

y

ornitina.

La

motilidad

es

la

capacidad

del

microorganismo de moverse por la presencia de flagelos. Para que esta propiedad pueda ser observada la consistencia del medio debe ser semisólida, por lo que la preparación lleva menos cantidad de agar.

La producción de indol evidencia la presencia de la enzima triptofanasa que actúa sobre el aminoácido triptófano, siendo necesario el uso de un reactivo revelador para hacer visible la producción de indol.

Finalmente, la ornitina determina si la bacteria es capaz de descarboxilar el aminoácido, es decir, si cuenta con la enzima orinitina descarboxilasa.

Técnica de sembrado y revelado

Para sembrar el medio MIO

Es aconsejable sacar de

se utiliza un ansa recta o

forma aséptica 2 ml del

aguja y con ella se recoge

medio, trasvasarlo a un tubo

una porción de la colonia a

estéril y realizar allí la prueba

estudiar.

del indol, de manera que si

Se

hace

una

punción

da

negativa

se

pueda

profunda en el medio MIO en

incubar el resto del tubo

línea

original durante 24 horas

recta.

No

es

recomendable realizar doble

más,

punción, ya que puede dar

nuevamente el indol.

falsa imagen de motilidad si

El revelado del indol se

las punciones no se realizan

realiza

en el mismo sitio.

manera: se agregan 3 a 5

Incubar durante 24 a 48

gotas del reactivo de Kovacs

horas a 37°C en aerobiosis.

en el medio MIO y se agita

Observar los resultados en

fuertemente. Se observa si

este

aparece o no un anillo de

orden:

descarboxilación

motilidad, de

la

ornitina y por último revelar el indol.

para

de

la

color rojo fucsia.

revelar

siguiente

Uso Este medio es una prueba que complementa una batería de pruebas bioquímicas para la identificación de las bacterias pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae.

El dato de la descarboxilación de la ornitina sirve para diferenciar a Shigella sonnei, que da positiva, de Shigella boydii, Shigella flexneri y S. dysenterieae, que dan negativas.

También diferencia el género Klebsiella, que da negativa, del género Enterobacter, donde la mayoría de sus especies dan positiva.

Control de calidad Cada vez que se prepare un lote de medio MIO se puede realizar una prueba control. Para ello se usan cepas conocidas o certificadas para observar el comportamiento del medio.

Las cepas que pueden utilizarse son ▪ Escherichia coli ▪ Morganella morganii ▪ Klebsiella pneumoniae ▪ Enterobacter aerogenes ▪ Proteus mirabilis

Los resultados esperados son: ▪ E. coli y M. morganii. Dan M: +, I: + y O: +.

â–Ş Klebsiella pneumoniae da todo negativo (M:-, I:-, O:-). â–Ş Proteus mirabilis y Enterobacter aerogenes dan M:+ I:- y O: +.

Staphylococcus Los estafilococos son cocos Gram positivos, catalasa positiva y el diamino acido en el peptidoglicano es L-lisina. El genero Staphylococcus posee alrededor de 30 especies.

Los cocos se asociaron por primera vez a enfermedades humanas cuando fueron observados en materiales purulentos provenientes de abscesos humanos.

En 1880 el cirujano escoses Sir Alexander Ogston demostro que cocos agrupados en forma de racimos. En 1882 Ogston llamo a estos “Staphylococcus”, derivado el nombre de los términos griegos sthapile (racimo de uvas) y kokkus (frutilla).

PUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS: I.

Prueba catalasa

VI.

Prueba reduccion de

II.

Prueba de citrato

III.

Prueba de la coagulasa

VII.

Prueba de indol

IV.

Prueba oxidasa

VIII.

Prueba roja de metilo

V.

Prueba de urea

nitratos

Prueba catalasa Objetivo: separar Staphylococcus y micrococcus (catalasa positiva) de los generos Streptococcus y Enterococcus (catalasa negativos) La enzima catalasa descompone el peroxido de hidrogeno (H2O2) en agua y oxigeno bajo la formla 2 H2O2 ------- 2 H2O +O2 . De esta manera las bacterias se protegen del efecto toxico del H2O2 que es un producto final del metabolismo aerobio de los azucares.

Prueba de citrato Estudia la capacidad de utilizar el citrato como unica fuente de carbono.

Prueba de la coagulasa Objetivo: permite separar S. aureus, que posee coagulasa de las otras especies de estafilococos que genericamente se denomina estafilococos coagulasa negativos (ScoN).

S. aureus posee dos tipos de coagulasa; 1.- endocoagulasa o coagulasa ligada o clumping factor, que esta unida a la pared celular.

esta

actua

directamente

sobre

el

fibrinogeno

provocando la formacion de coagulos o grumos cuando se

mezcla una suspension bacteriana con plasma citratado (test en lamina). 2.- una exocoagulasa o coagulasa libre que actua mediante la activacion de un factor serico (CRF) formandose un complejo coagulasa-CRF, el cual reacciona con el fibrinogeno produciendose un coagulo de fibrina (test en tubo).

Prueba oxidasa La oxidasa estudia la presencia de la enzima citocromo c oxidasa que actua en la cadena respiratoria del organismo.

Prueba de ureas Estudia si el mricoorganismo posee la enzima ureasa que cataliza la hidrolisis de la urea.

Prueba reduccion de nitratos Estudia la capacidad de los microorganismos para reducir los nitratos por la presencia de un conjunto de enzimas denominado nitrato reductasa

Prueba de indol Estudia la capacidad de degradar el triptofano con produccion de indol y metolitos indolicos.

Prueba rojo de metilo Estudia la fermentacion acido mixto con produccion de acidos estables en el tiempo.

pseudomonas Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Pseudomonadales Familia: Pseudomonadaceae Son un género que está totalmente constituido por Gram negativos, son de aspecto recto o ligeramente curvos.

Son patógenos

oportunistas de aparición normal en la naturaleza, los cuales pueden ser aislados de varios medios, así como de seres vivos. ➢ No forman esporas ➢ Poseen metabolismo aerobio o anaerobio con un metabolismo altamente adaptable ➢ No están encapsulados ➢ Poseen movilidad continua ➢ Son oxidasa positivos Dentro de las pruebas bioquímicas, las especies mayormente aisladas son: ▪ Pseudomonas Aeruginosa ▪ Pseudomonas Fluorescens ▪ Pseudomonas Putida ▪ Pseudomonas Stutzeri

PUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS:

Oxidasa Que está basada en la identificación de Citocromo C oxidasa, el cual es una de las enzimas precursoras en la formación del ATP bacteriano que activa la oxidación del citocromo el cual es reducido por el oxígeno produciendo agua o peróxido de hidrogeno dentro del proceso llamado cadena respiratoria, el cual se lleva a cabo en la membrana de la bacteria. La producción de oxidasa generalmente está ligada a la producción de catalasa ya que esta degrada el peróxido de hidrogeno que se produce como consecuencia de la reducción del oxígeno y cuya acumulación se vuelve toxica.

Catalasa Esta también es una enzima presente en la mayoría de los microorganismos que poseen citocromos. Esta prueba está basada en la identificación de una enzima llamada catalasa, formada por las bacterias con el fin de degradar el peróxido de hidrogeno toxico en agua y oxigeno gaseoso en forma de burbujas, que es formado como desecho al finalizar la vía metabólica aerobio-oxidativa.

Prueba de oxidación y fermentación (OF) Este es el nombre en el que se basan para la identificación de bacterias dentro de las pruebas ya mencionadas, según la vía metabólica de la glucosa que estas sigan, debido a que el metabolismo de las Pseudomonas puede ser oxidativo (presencia de oxigeno o aerobio) o fermentativo (ausencia de oxigeno o anaerobio).

Estreptococos El género Streptococcus es un grupo de bacterias formado por cocos gram -positivos pertenecientes al filo firmicutes y al grupo de las bacterias ácido lácticas. Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde cada división celular ocurre a lo largo de un eje.

PUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS: I.

Agar sangre

II.

Agar soya tripticaseína

III.

Agar BHI

Agar sangre El agar sangre es un medio de cultivo sólido enriquecido, diferencial pero no selectivo. Es utilizado para la recuperación y crecimiento de una gran variedad de microorganismos provenientes de muestras clínicas o para subcultivos.

El agar sangre clásico debe ser incluido para el sembrado de la mayoría de las muestras clínicas recibidas en el laboratorio; a excepción de las muestras de heces en el que no es útil, a menos que se prepare con ciertas modificaciones.

Este medio de cultivo se compone básicamente de un agar base enriquecido y 5% de sangre. La base de agar puede variar de acuerdo a las necesidades, pero principalmente estará compuesto por peptonas, aminoácidos, vitaminas, extracto de carne, cloruro de sodio, agar, entre otros.

En cuanto a la sangre, normalmente se requiere tener contacto con un bioterio para la obtención de sangre de animales, tales como carnero, conejo o caballo. Sin embargo, esto no siempre es posible y en ocasiones se usa sangre humana.

El medio agar sangre puede ser preparado en el laboratorio o puede comprarse ya listo a empresas que se dedican a ello. La preparación de este medio es uno de los más delicados,

cualquier descuido en su elaboraciĂłn darĂĄ como resultado un lote contaminado.

Es por ello que deben tomarse todas las precauciones posibles y al final debe realizarse un control de calidad incubando a 37 °C 1 placa por cada 100 que se preparen.

agar soya tripticaseína El agar soya tripticaseína o agar soya tripticasa es un medio de cultivo sólido, no selectivo y nutritivo. Se designa con las letras TSA por sus siglas en ingles Trypticase Soy Agar. Está compuesto por tripteína, peptona de soya, cloruro de sodio y agar-agar.

Por su alto poder nutritivo es ideal para el cultivo de microorganismos moderadamente exigentes y no exigentes. El medio sin suplementos adicionales no es recomendable para cultivos primarios, pero es muy útil para subcultivar cepas puras y mantenerlas viables, entre otros usos.

También, este agar sirve como base para la preparación de medios enriquecidos como el agar sangre, especialmente cuando se requiere observar los patrones de hemólisis y para montar los taxos de optoquina y bacitracina, requeridos en el diagnóstico de Streptococcus pneumoniae y Streptococcus pyogenes respectivamente.

Por otra parte, cuando se combina con antibióticos es útil para aislar microorganismos anaerobios facultativos y estrictos de importancia clínica provenientes de muestras con flora mixta.

Finalmente, la composiciĂłn del agar soya tripticaseĂ­na y su rendimiento cumple con las exigencias establecidas por las distintas farmacopeas (europea, japonesa y norteamericana).

Agar BHI El agar BHI o agar Brain Heart Infusión es un medio de cultivo sólido nutritivo. En español nos referimos a él como agar infusión cerebro corazón. Es un medio de cultivo no selectivo, lo que quiere decir que pueden desarrollarse todo tipo de bacterias Gram positivas y Gram negativas, así como algunos hongos levaduriformes y filamentosos.

Está compuesto por infusión de cerebro y corazón de ternera, hidrolizado péptico de tejidos animales, hidrolizado pancreático de caseína, cloruro sódico, glucosa, fosfato disódico y agar.

Cabe destacar que el agar BHI es uno de los medios de cultivo de uso más frecuentes en los laboratorios de bacteriología.

Puede utilizarse sin suplementos como cultivo primario, subcultivo de colonias obtenidas en otros medios selectivos o para el mantenimiento de cepas en el laboratorio.

Por otra parte, es un medio ideal para ser utilizado como base en la preparación de medios enriquecidos, como el agar sangre y

el

agar

chocolate.

Ambos

ideales

para

aislar

microorganismos exigentes desde el punto de vista nutricional.

Sin embargo, debe tenerse en cuenta que como contiene

glucosa no es adecuado para observar los patrones de hemólisis.

Así mismo, el agar BHI puede ser utilizado para la preparación de medios especiales para el aislamiento de microorganismos patógenos de difícil crecimiento en los medios comunes, entre ellos: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae e Histoplasma capsulatum.

Con el aditivo de antibióticos el agar BHI se convierte en un medio selectivo para el aislamiento de hongos.