Tổng quan về các kỹ thuật phân tích sử dụng trong thiết lập chất chuẩn gốc (primary standard)

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

BỘ Y TẾ

10 00

B

TÍCH SỬ DỤNG TRONG THIẾT LẬP

Ó

A

CHẤT CHUẨN GỐC

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

(PRIMARY STANDARD)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

TỔNG QUAN VỀ CÁC KỸ THUẬT PHÂN

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

VÕ THỊ TÚ QUYÊN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

HÀ NỘI - 2018

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

BỘ Y TẾ

U Y

TR ẦN

TÍCH SỬ DỤNG TRONG THIẾT LẬP

B

CHẤT CHUẨN GỐC

H

Ó

A

10 00

(PRIMARY STANDARD)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

Người hướng dẫn:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP ẠO Đ

H Ư

N

G

TỔNG QUAN VỀ CÁC KỸ THUẬT PHÂN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Mã sinh viên: 1301348

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

VÕ THỊ TÚ QUYÊN

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

N

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NCS.ThS. Nguyễn Lâm Hồng Nơi thực hiện: Bộ môn Hóa phân tích & Độc chất

HÀ NỘI - 2018

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ từ thầy cô, gia đình và bạn bè. Đến nay khi khóa luận đã hoàn thành, tôi xin phép được bày

Ơ

N

tỏ sự biết ơn sâu sắc và chân thành nhất đến họ.

N

H

Lời đầu tiên, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc và sự kính trọng đến NCS.ThS.

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến các thầy cô trong Bộ môn Hóa phân tích

H Ư

N

& Độc chất, Trường Đại học Dược Hà Nội đã quan tâm, giúp đỡ tôi trong thời gian vừa qua.

TR ẦN

Nhân đây, tôi xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu, toàn thể các thầy cô giáo và cán bộ nhân viên Trường Đại học Dược Hà Nội, những người đã luôn tận tình chỉ bảo,

10 00

B

giúp đỡ tôi trong suốt thời gian học tập tại đây.

Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân, bạn bè - những

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

người đã luôn đồng hành, cổ vũ và động viên tôi trong học tập và trong cuộc sống.

Hà Nội, ngày 18 tháng 05 năm 2018 Sinh viên

Võ Thị Tú Quyên

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

cứu, hỗ trợ tôi rất nhiều trong quá trình tìm tài liệu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

thành khóa luận. Tôi cũng xin cảm ơn HVCH. Đào Tú Anh vì đã dành thời gian tra

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

tiếp tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và giúp đỡ tôi từ những bước đầu tiên cho đến khi hoàn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Nguyễn Lâm Hồng - Giảng viên Bộ môn Hóa phân tích & Độc chất, người thầy đã trực

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

N

DANH MỤC CÁC BẢNG

N

H

Ơ

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ

.Q

Đ

1.2.1. Chất chuẩn đối chiếu hóa học gốc (primary chemical reference standards -

G

PCRS) ....................................................................................................................2

H Ư

N

1.2.2. Chất chuẩn đối chiếu hóa học thứ cấp (secondary chemical reference standards - SCRS) .................................................................................................3

TR ẦN

1.3. Hướng dẫn quy trình thiết lập chất chuẩn gốc ................................................... 4 CHƯƠNG 2. TỔNG QUAN CÁC KỸ THUẬT XÂY DỰNG BỘ DỮ LIỆU NHẬN

10 00

B

DẠNG CHẤT CHUẨN GỐC .......................................................................................10 2.1. Mô tả vật lý ...................................................................................................... 10

A

2.1.1. Kiểm tra cảm quan ....................................................................................10

H

Ó

2.1.2. Kính hiển vi quang học .............................................................................10

Í-

2.1.3. Xác định điểm chảy ...................................................................................10

-L

2.1.4. Góc quay cực riêng....................................................................................10

ÁN

2.2. Bộ phổ nhận dạng về cấu trúc.......................................................................... 11

TO

2.2.1. Kỹ thuật quang phổ hồng ngoại (IR) .........................................................11

D

IỄ N

Đ

ÀN

2.2.2. Kỹ thuật quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến (UV-VIS) ........................12 2.2.3. Kỹ thuật phổ khối lượng (MS) ..................................................................13

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

1.2. Phân loại chất chuẩn đối chiếu hóa học:............................................................ 2

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

1.1. Khái niệm về chất chuẩn đối chiếu .................................................................... 2

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

CHƯƠNG 1. KHÁI NIỆM VỀ CHẤT CHUẨN GỐC...................................................2

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

ĐẶT VẤN ĐỀ ................................................................................................................. 1

2.2.4. Kỹ thuật phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) ..........................................15 2.2.5. Phân tích nguyên tố ...................................................................................16 2.2.6. Nhiễu xạ tia X............................................................................................16

CHƯƠNG 3. TỔNG QUAN CÁC KỸ THUẬT XÁC ĐỘ TINH KHIẾT NGUYÊN LIỆU THIẾT LẬP CHẤT CHUẨN GỐC ....................................................................17 3.1. Nguồn gốc và phân loại tạp chất trong nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc . 17

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.1.1. Nguồn gốc tạp chất ....................................................................................17 3.1.2. Phân loại tạp chất ......................................................................................17 3.2. Các kỹ thuật xác định tạp chất trong nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc .... 19 3.2.2. Kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp ...................................................37

H

Ơ

3.2.3. Kết hợp cả 2 kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp và gián tiếp ..........39

N

3.2.1. Kỹ thuật xác định gián tiếp: ......................................................................19

.Q

4.1. Tình hình thiết lập chất chuẩn gốc trên thế giới .............................................. 40

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

1.1. Kết luận ............................................................................................................ 43

H Ư

N

1.2. Đề xuất ............................................................................................................. 43

TR ẦN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

PHỤ LỤC

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT .......................................................................................... 43

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

4.2. Tình hình thiết lập chất chuẩn gốc tại Việt Nam ............................................. 41

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ở VIỆT NAM ................................................................................................................40

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

CHƯƠNG 4. TÌNH HÌNH THIẾT LẬP CHẤT CHUẨN GỐC TRÊN THẾ GIỚI VÀ

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

Tên tiếng Anh

Tên tiếng Việt

AAS

Atomic Absorption Spectrometry

Quang phổ hấp thụ nguyên tử

ACN

Acetonitrile

Acetonitril

APCI

Atmospheric Pressure Chemical

Ion hóa hóa học ở áp suất khí

Ionization

quyển

Association of Southeast Asian

Hiệp hội các quốc gia Đông Nam

Nations

Á

Ơ H

CIEF

Capillary Isoelectric Focusing

Điện di mao quản hội tụ đẳng điện

CITP

Capillary Isotachophoresis

CZE

Capillary Zone Electrophoresis

Điện di mao quản vùng

DAD

Diode Array Detector

Detector mảng diod

DMF

N,N-dimethylformamide

N,N-dimethylformamid

DMI

1,3-dimethyl- 2-imidazolidinone

1,3-dimethyl- 2-imidazolidinon

DSC

Differential Scanning Calorimetry

EDQM

European Directorate for the

G

N

H Ư

TR ẦN

B

10 00

A

Ó

H Í-

-L ÁN

Điện di mao quản đẳng tốc

Quét nhiệt vi sai Hội đồng Châu Âu về chất lượng thuốc Ion hóa bằng dòng electron

Electroendosmotic Flow

Dòng điện thẩm

European Pharmacopeia Reference

Chất chuẩn đối chiếu Dược điển

Substances

Châu Âu

ESI

Electrospray Ionization

Ion hóa bằng tia điện

FAAS

Flame Atomic Absorption

Nguyên tử hóa bằng ngọn lửa

TO

Electron Impact

ÀN

EPRS

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Điện sắc ký mao quản

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Capillary Electrochromatography

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

CEC

EI

Đ

N U Y

Điện di mao quản

Quality of Medicine -HealthCare

IỄ N

.Q

Capillary Electropherosis

Đ

CE

EOF

D

Chất chuẩn đối chiếu

ẠO

CCĐC

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

ASEAN

N

Kí hiệu

Spectrometry GC

Gas Chromatography

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Sắc ký khí

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Good Manufacturing Practices

Thực hành tốt sản xuất thuốc

HL

Hàm lượng

HĐDĐ

Hội đồng Dược điển Sắc ký lỏng hiệu năng cao

High Performance Liquid

yêu cầu kỹ thuật để đăng ký dược

Requirements for Registration of

phẩm sử dụng cho con người

N

U Y

.Q

Spectroscopy

phổ khối lượng

International Chemical Reference

Chất chuẩn đối chiếu quốc tế

International Pharmacopoeia

IR

Infrared Radiation

ISO

International Organization for

Dược điển quốc tế Quang phổ hồng ngoại Tổ chức tiêu chuẩn hóa quốc tế

B

10 00

Standardization

TR ẦN

IP

H Ư

N

Substances

Limit of Detection

Giới hạn phát hiện

LOQ

Limit of Quantitation

Giới hạn định lượng

MEKC

Micellar Electrokinetic

A

LOD

H

Ó

Sắc ký mixen điện động

Í-

Chromatography Mass Spectroscopy

Phổ khối lượng

Nuclear Magnetic Resonance

Cộng hưởng từ hật nhân

-L

MS

TO

ÁN

NMR

Đ

ÀN

NP-HPLC Normal Phase-High Performance

PCRS

Sắc ký lỏng hiệu năng cao pha

Liquid Chromatography

thuận

Primary Chemical Reference

Chất chuẩn đối chiếu hóa học gốc

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

Quang phổ plasma cảm ứng kết nối

ẠO

Inductively Coupled Plasma- Mass

Đ

ICRS

Ơ

Harmonisation of Technical

H

Hội nghị quốc tế về hài hòa các

G

ICP-MS

IỄ N D

International Conference on

Pharmaceuticals of Human Use

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

ICH

N

Chromatography

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

HPLC

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

GMP

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Standards PDE

Permitted daily exposure

Liều phơi nhiễm cho phép mỗi ngày

Ph.Eur

European Pharmacopoeia

PTN

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Dược điển Châu Âu Phòng thí nghiệm

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

qNMR

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Quantitative Nuclear Magnetic

Cộng hưởng từ hạt nhân định

Resonance

lượng

RP-HPLC Reversed Phase-High Performance

Sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo

Liquid Chromatography Diện tích

TLC

Thin Layer Chromatography

Sắc ký lớp mỏng

TOF

Time- of- Flight Analyser

Bộ phân tích thời gian bay

USPRS

United States Pharmacopeia

Chất chuẩn đối chiếu Dược điển

Reference Substances

Mỹ

10 00

B

VKNTTƯ

World Health Organization

ẠO

Đ

Quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung Ương Tổ chức y tế thế giới

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

WHO

G

N

H Ư

Ultraviolet - Visible Spectroscopy

TR ẦN

UV-VIS

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Phân tích nhiệt trọng lượng MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Thermogravimetric Analysis

TP

TGA

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Tiêu chuẩn cơ sở

TCCS Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

U Y

N

Standards

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

Chất chuẩn đối chiếu thứ cấp

Secondary Chemical Reference

H

SCRS

N

S

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC BẢNG

Ơ

N

Bảng 4.1 So sánh kết quả độ tinh khiết thu được thông qua DSC với kết quả độ tinh

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

khiết thu được thông qua sắc ký và các kỹ thuật phân tích khác ..................................11

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ

Ơ

N

Hình 3.1 Hình ảnh phân tích MEKC của một mẫu muối natri amoxicillin .............PL-2

N

H

Hình 4.1 Phổ IR của 1,5 mg Indinavir số kiểm soát 105231 ……………………...PL-3

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ẠO Đ G N H Ư TR ẦN B 10 00 A Ó H Í-L ÁN TO

D

IỄ N

Đ

ÀN

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Hình 4.3 Sắc ký đồ của Indinavir số 105231 được theo dõi ở bước sóng 220 nm....PL-7

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

Hình 4.2 Phổ UV của Indinavir số kiểm soát 105231……………………………...PL-4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

ĐẶT VẤN ĐỀ

Chất chuẩn nói chung và chất chuẩn gốc nói riêng có vai trò rất quan trọng trong

N

lĩnh vực kiểm tra chất lượng, giám sát chất lượng nguyên liệu làm thuốc và chế phẩm

H

Ơ

thuốc của ngành Dược. Ngoài ra nó còn được dùng để đánh giá thử nghiệm thành thạo

U Y

trong các chương trình hợp tác thiết lập chất chuẩn của Trung tâm hợp tác về CCĐC của

Hiện nay, các chất chuẩn sử dụng cho công tác kiểm nghiệm và nghiên cứu ở Việt

G

Đ

Nam thường được mua từ các nguồn chất chuẩn nước ngoài như Hội đồng Dược điển

H Ư

N

Mỹ, Anh, Châu Âu,… (USPRS, BPCRS, EPCRS, ICRS), các hãng hóa chất lớn (Merck, Sigma Aldrich,…); chất chuẩn quốc gia được thiết lập trong nước tại VKNTTƯ và Viện

TR ẦN

Kiểm nghiệm thuốc TP.HCM, chất chuẩn làm việc do các phòng thử nghiệm tự thiết lập. Nhu cầu sử dụng chất chuẩn trong nước ngày càng lớn, tuy nhiên chất chuẩn được

10 00

B

thiết lập trong nước chủ yếu là chuẩn thứ cấp được nối với chuẩn quốc tế và công tác thiết lập chất chuẩn gốc trong nghiên cứu và phát triển thuốc mới và chất chuẩn có nguồn

A

gốc từ dược liệu trong trường hợp không có chuẩn gốc để nối đang còn rất hạn chế. Do

Ó

vậy, công tác kiểm tra, giám sát chất lượng thuốc đặc biệt thuốc có nguồn gốc từ dược

Í-

H

liệu đang gặp khó khăn do thiếu chất chuẩn.

-L

Để chủ động hơn trong thiết lập chất chuẩn và trong trường hợp nghiên cứu phát

ÁN

triển thuốc mới, chưa có chất chuẩn nối, khóa luận “Tổng quan về các kỹ thuật phân

TO

tích sử dụng trong thiết lập chất chuẩn gốc (Primary Standard)” được thực hiện với

ÀN

mong muốn đem đến một cái nhìn tổng quan về thiết lập chất chuẩn gốc cũng như cung

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Châu Âu [41].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

WHO hay Hội đồng Dược điển Mỹ, Ủy ban đối chiếu của ASEAN, Hội đồng Dược điển

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

cho các kiểm nghiệm viên của các PTN muốn đăng kí tham gia làm PTN thành viên

D

IỄ N

Đ

cấp những hiểu biết cơ bản, khả năng phát triển và ứng dụng của nó trong ngành Dược tại Việt Nam với ba mục tiêu chính sau: 1. Khái niệm về chất chuẩn gốc và các bước trong quy trình thiết lập chất chuẩn gốc.

2. Tổng quan các kỹ thuật xây dựng bộ dữ liệu nhận dạng chất chuẩn gốc.

3. Tổng quan các kỹ thuật xác định độ tinh khiết của chất chuẩn gốc.

1

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 1. KHÁI NIỆM VỀ CHẤT CHUẨN GỐC 1.1. Khái niệm về chất chuẩn đối chiếu Nguyên liệu đối chiếu là những nguyên liệu có sự đồng nhất và ổn định về một

N

hoặc một số tính chất, được thiết lập để phù hợp với một quá trình sử dụng hoặc đo

N

H

Ơ

lường đã định sẵn [12], [43], [45], [59].

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

chất của chất cần thử, với độ tinh khiết phù hợp với mục đích sử dụng” [5], [83].

H Ư

N

Trong lĩnh vực kiểm tra chất lượng của ngành Dược, các phương pháp phân tích trong các Dược điển hiện hành có thể yêu cầu CCĐC trong các phép thử sau [14], [69],

TR ẦN

[73], [80], [85]: Đo phổ IR để định tính, đo phổ UV để định lượng, định lượng bằng các phương pháp so sánh màu, các phương pháp sắc ký để định tính và định lượng, các kỹ

10 00

B

thuật tách để định lượng, các phương pháp định lượng vi sinh, các thử nghiệm hóa học - miễn dịch, hiệu chuẩn thiết bị.

Ó

A

1.2. Phân loại chất chuẩn đối chiếu hóa học:

H

1.2.1. Chất chuẩn đối chiếu hóa học gốc (primary chemical reference standards -

-L

Í-

PCRS)

ÁN

Khái niệm: “Chất chuẩn đối chiếu hóa học gốc là chất được công nhận rộng rãi, có các chỉ tiêu chất lượng phù hợp với tài liệu công bố, cụ thể và giá trị ấn định của nó được sử dụng làm tiêu chuẩn phân tích mà không cần phải so sánh với chất hóa học

D

IỄ N

Đ

ÀN

khác” [83], [85].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

trong các phép thử vật lí, hóa học mà ở đó các tính chất của nó được so sánh với các tính

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

“Chất chuẩn đối chiếu hóa học là nguyên liệu đồng nhất, xác thực, được sử dụng

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

hay “chất đối chiếu hóa học” được WHO định nghĩa như sau:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Thuật ngữ “chất chuẩn đối chiếu hóa học” hay còn gọi là “chất chuẩn đối chiếu”

Theo ICH Guideline Q7 định nghĩa: Chất chuẩn gốc là một chất được đưa ra bởi

một loạt các phân tích để trở thành nguyên liệu đáng tin cậy có độ tinh khiết cao. Chất chuẩn này có thể: •

Thu được từ nguồn được công nhận chính thức;

•

Được bào chế bằng tổng hợp độc lập (independent synthesis); 2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

–

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

•

Thu được từ nguyên liệu sản xuất có độ tinh khiết cao;

•

Được bào chế bằng cách tinh chế tiếp các nguyên liệu sản xuất có sẵn [37].

Các chuẩn gốc - PCRS chính thức: Các chất chuẩn gốc chính thức có thể tìm được từ các nguồn sau: Trung tâm hợp

Ơ

N

tác về chất chuẩn đối chiếu của WHO, Hội đồng Dược điển Châu Âu, các phòng thí

U Y

Chất chuẩn quốc tế (ICRS) là một chất chuẩn gốc được thiết lập tại Trung tâm

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

các chuyên luận dược phẩm được công bố trong IP [40], [85].

H Ư

N

Chuẩn theo Dược điển Châu Âu (EPRS): Được thiết lập và cung cấp bởi Ban thư

TR ẦN

ký Kỹ thuật thuộc Hội đồng Dược điển Châu Âu [26].

Chuẩn theo Dược điển Mỹ (USPRS): Được thiết lập và phân phối bởi Hội đồng

Các chuẩn gốc-PCRS tiêu chuẩn nhà sản xuất: Trong trường hợp chưa có chất

10 00

–

B

chất đối chiếu Dược điển Mỹ [80].

chuẩn gốc chính thức, nhà sản xuất có thể được xây dựng chất chuẩn gốc của cơ sở

Ó

A

(in-house primary reference standard) bao gồm số lô và đầy đủ đặc tính của chất

Í-

H

chuẩn gốc.

-L

1.2.2. Chất chuẩn đối chiếu hóa học thứ cấp (secondary chemical reference

ÁN

standards - SCRS)

Khái niệm: Chất chuẩn thứ cấp là một chất chuẩn đối chiếu hóa học mà các tính

ÀN

chất hay chỉ tiêu chất lượng của nó được xác định bằng cách so sánh với một chất chuẩn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

định. ICRS được sử dụng chủ yếu trong các phép thử vật lý, hóa học, định lượng của

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

của các chế phẩm dược dụng. Các tổ chức tham gia hợp tác đánh giá ICRS do WHO chỉ

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

hợp tác về các chất chuẩn của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) về tiêu chuẩn chất lượng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

nghiệm trực thuộc của Hội đồng Dược điển Anh và Mỹ [21], [67], [81].

của phòng thí nghiệm [37], [83], [85].

Phân loại chất chuẩn thứ cấp:

D

IỄ N

Đ

gốc. Chuẩn thứ cấp được dùng làm chất chuẩn đối chiếu cho các phân tích thường ngày

–

Chuẩn thứ cấp - SCRS “chính thức” là một chuẩn thứ cấp khu vực hay quốc gia.

•

Chuẩn thứ cấp - SRCS ASEAN: do các PTN của các HĐDĐ, viện kiểm nghiệm quốc gia thiết lập, trong quá trình thiết lập chuẩn có sử dụng chuẩn gốc PCRS để 3

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

so sánh. Quá trình thiết lập, phân phối chất chuẩn Dược điển do các HĐDĐ thực hiện và tuân theo các hướng dẫn của ISO guide 35 – 2017 [44].

•

Chuẩn quốc gia - VNRS: Được thiết lập tại Viện Kiểm Nghiệm thuốc Trung ương - Bộ Y tế hoặc Viện Kiểm Nghiệm thuốc Thành phố Hồ Chí Minh - Bộ Y tế;

N

được đánh giá bởi ít nhất hai khoa thử nghiệm là khoa Thiết lập chất chuẩn &

H

Ơ

chất đối chiếu và một khoa thử nghiệm khác trong Viện; được liên kết với chất

N

G

phải được ban hành bởi các tổ chức có thẩm quyền và tuân thủ nghiêm ngặt.

H Ư

Quy trình thiết lập chất chuẩn gốc gồm 6 bước như sau [20], [83]:

TR ẦN

 Bước 1: Đánh giá nhu cầu thiết lập chất chuẩn gốc Sản xuất, xác nhận, duy trì và phân phối các chất chuẩn gốc là việc tốn nhiều chi

10 00

B

phí và thời gian, do đó vấn đề đầu tiên cần được đánh giá là liệu có một quy trình nào đó có thể thay thế bởi một quy trình khác thỏa mãn yêu cầu tương đương mà không cần

A

phải dùng đến chất chuẩn gốc hay không.

H

Ó

 Bước 2: Thu thập nguyên liệu nguồn

-L

Í-

Nguyên liệu nguồn có chất lượng đạt yêu cầu có thể được lựa chọn từ lô nguyên

ÁN

liệu sản xuất có chất lượng tốt nhất và được cung cấp bởi các nhà sản xuất dược phẩm.

TO

Các kỹ thuật tinh chế là cần thiết để nguyên liệu được chấp nhận sử dụng như một chất

Các yêu cầu về độ tinh khiết cho một chất chuẩn gốc phụ thuộc vào mục đích sử

Đ

ÀN

chuẩn gốc.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

Chất chuẩn gốc được công nhận rộng rãi do đó quy trình thiết lập chất chuẩn gốc

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP ẠO

1.3. Hướng dẫn quy trình thiết lập chất chuẩn gốc

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

.Q

Chuẩn làm việc (Working standard): Là một chuẩn thứ cấp do một nhà sản xuất hoặc một PTN tự thiết lập [66].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

–

N

chuẩn gốc.

•

D

IỄ N

dụng: Một chất chuẩn gốc đề xuất cho một phép thử định tính không đòi hỏi sự tinh khiết quá cao, bởi sự hiện diện của một tỷ lệ nhỏ tạp chất thường không ảnh hưởng đáng chý ý đến phép thử.

•

Các chất chuẩn gốc được sử dụng trong các phép định lượng nên có độ tinh khiết cao. Theo nguyên tắc cơ bản hướng dẫn, độ tinh khiết 99,5% trở lên là cần thiết, 4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

tính trên nguyên liệu dạng khan hoặc không chứa các chất dễ bay hơi.

Khi nguyên liệu nguồn sử dụng làm chất chuẩn gốc được lấy từ nhà cung cấp, cần cung cấp các tài liệu sau: Chứng chỉ phân tích với đầy đủ thông tin về các phương pháp thử, giá trị được

N

•

Ơ

tìm thấy và số lượng bản sao được sử dụng (nếu có), và quang phổ và/hoặc sắc

H

•

Thông tin về điều kiện bảo quản tối ưu cần thiết để đảm bảo độ ổn định (cân nhắc

H Ư

ứng liên quan được xác định bằng những phương pháp rút gọn liên quan đến •

TR ẦN

thành phần chính, và/hoặc phần trăm khối lượng tạp chất; Bảng dữ liệu an toàn nguyên liệu cập nhật.

B

 Bước 3: Đánh giá nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc

10 00

Cơ quan ban hành cần phải xem xét tất cả các dữ liệu thu được từ những kiểm tra nguyên liệu thiết lập chuẩn bằng nhiều phương pháp phân tích khác nhau. Mức độ và

Ó

A

phạm vi phân tích được yêu cầu phụ thuộc vào mục đích sử dụng chất chuẩn gốc.

H

Sử dụng trong phép thử định tính

Í-

i.

-L

Để sử dụng cho phép thử định tính, một lô nguyên liệu có chất lượng tốt (đạt yêu

ÁN

cầu về độ tinh khiết) được lựa chọn từ một quy trình sản xuất. Điều quan trọng nhất là

TO

kiểm tra được năng lực của nguyên liệu thông qua việc thử nghiệm trên các phép thử dự

ÀN

định. Thông thường chỉ cần kết quả đánh giá từ một phòng thí nghiệm đủ tiêu chuẩn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Sự xác định của các tạp chất được phát hiện và/hoặc thông tin cụ thể về hệ số đáp

N

•

Đ

nguyên liệu nguồn;

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Kết quả của bất kỳ nghiên cứu về tính hút ẩm và/hoặc công bố về tính hút ẩm của

ẠO

•

TP

về nhiệt độ và độ ẩm);

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Kết quả của bất kỳ nghiên cứu độ ổn định nào;

U Y

•

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

ký đồ thích hợp;

D

IỄ N

Đ

[83]. ii.

Sử dụng trong các phép thử tinh khiết Yêu cầu về độ tinh khiết của chất chuẩn gốc sử dụng với mục đích thử độ tinh

khiết sẽ cao hơn so với mục đích định tính. Nếu sử dụng kỹ thuật sắc ký lớp mỏng (TLC), độ tinh khiết tối thiểu có thể là 90%, tuy nhiên đối với kỹ thuật sắc ký lỏng (LC) hoặc sắc ký khí (GC) thì ít nhất là 95%. Thông thường chỉ cần một phòng thí nghiệm 5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

tham gia đánh giá chất chuẩn gốc dùng cho phép thử tinh khiết. Nếu chất chuẩn gốc được phân lập lần đầu tiên, phải áp dụng các phép thử hóa học và vật lý thích hợp như cộng hưởng từ hạt nhân (NMR), phổ khối lượng (MS) và phân tích nguyên tố để mô tả đặc tính cấu trúc [85].

N

Sử dụng trong các phép định lượng

Ơ

iii.

N

H

Nếu chất chuẩn gốc được sử dụng trong một phép định lượng, mức độ và phạm

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

và tạp chất có mặt. Khi sử dụng một phương pháp chọn lọc điều quan trọng là xác định

N

G

chính xác số lượng tạp chất. Trong trường hợp này, tốt nhất nên kiểm tra chất chuẩn đề

H Ư

xuất bằng nhiều phương pháp nhất có thể, bao gồm phương pháp tuyệt đối [83], [85].

Sử dụng trong hiệu chuẩn dụng cụ, thiết bị

TR ẦN

iv.

Mức độ kiểm tra tương tự như đối với chất chuẩn sử dụng trong các phép định

B

lượng. Một số phòng thí nghiệm cần hợp tác để đánh giá chất chuẩn được đề xuất bằng

A

là phù hợp.

H

Ó

 Bước 4: Các phương pháp hóa học và vật lý được sử dụng để đánh giá chất chuẩn

-L

Í-

gốc

ÁN

Các phương pháp lựa chọn được chia thành hai nhóm lớn:

TO

 Nhóm các phương pháp nhận dạng: •

Đ IỄ N D

10 00

cách sử dụng nhiều kỹ thuật phân tích để xác nhận độ tinh khiết của chất chuẩn đề xuất

•

Các mô tả vật lý: Cảm quan, kính hiển vi quang học, nhiệt độ nóng chảy, góc quay cực riêng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

như đo quang phổ UV hay so màu, cần phải kiểm tra đáp ứng tương đối giữa hoạt chất

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

phương pháp được quy định trong Dược điển. Khi áp dụng phương pháp không đặc hiệu

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

đánh giá chất đề xuất, sử dụng nhiều kỹ thuật được thiết lập và thẩm định bao gồm cả

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

vi kiểm tra sẽ rộng và nghiêm ngặt hơn. Tối thiểu ba phòng thí nghiệm cần hợp tác để

Bộ phổ: Nếu chất chuẩn gốc được đề xuất có cấu trúc đã được xác định rõ ràng thì có thể nhận dạng thông qua bộ dữ liệu phổ IR, NMR, MS, UV bằng cách so sánh. Nếu chất chuẩn được đề xuất là chất có cấu trúc mới hoặc thiếu dữ kiện mô tả về tính chất thì ngoài việc sử dụng bộ phổ (IR, NMR, MS, UV) thì cần phải sử dụng thêm các kỹ thuật phân tích hiện đại dùng để mô tả các hợp chất mới như phân tích nguyên tố, nghiên cứu tinh thể học, phân tích nhóm chức,… để mô tả 6

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

đầy đủ đặc tính của chất chuẩn được đề xuất [85].  Nhóm các kỹ thuật xác định độ tinh khiết: •

Xác định tạp chất liên quan bằng các kỹ thuật: HPLC/DAD, LC/MS, CE.

•

Xác định tạp chất vô cơ bằng phương pháp: tro toàn phần, tro sulfat, AAS, ICP-

N

MS.

Ơ

Xác định lượng nước và các chất dễ bay hơi bằng mất khối lượng do làm khô,

H

•

.Q TP

[80].

Xác định độ tinh khiết trực tiếp bằng các kỹ thuật: qNMR, DSC.

Đ

Theo hướng dẫn của USP một số phương pháp phân tích thường được sử dụng [79]: Cảm quan;

-

Kiểm tra nhận dạng (NMR, IR, UV,…);

-

Kiểm tra độ tinh khiết gián tiếp (khoảng nóng chảy, góc quay cực riêng,…);

-

Kiểm tra độ tinh khiết trực tiếp (Độ tinh khiết sắc ký, xác định tạp chất vô cơ,

TR ẦN

H Ư

N

G

-

xác định tạp chất bay hơi gồm nước và dung môi bay hơi); Phân tích nhóm chức (chuẩn độ, UV/VIS, phân tích nguyên tố,…);

-

Định lượng dựa vào lô chất chuẩn đặc tính tốt khác trước đó.

10 00

B

-

A

 Bước 5: Xác định giá trị ấn định

H

Ó

Giá trị ấn định được xác định dựa trên kết quả đánh giá liên phòng trong đó các

Í-

PTN sử dụng phương pháp phân tích khác nhau. Thông thường các giá trị này được tập

-L

hợp từ ít nhất 3 PTN độc lập tham gia thiết lập chuẩn gốc. Giá trị thực nghiệm thu được

ÁN

này đại diện tốt nhất cho ước tính giá trị thực [83].

TO

Khi tất cả các phép thử độ tinh khiết đã được hoàn thành và các phương pháp đã

ÀN

được thẩm định đầy đủ, độ tinh khiết của chất chuẩn gốc được tính theo công thức sau: Độ tinh khiết = 100% – % tạp chất hữu cơ - % tạp chất vô cơ - %

Đ IỄ N D

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

•

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

kỹ thuật chuẩn độ Karl Fischer, lượng dung môi dễ bay hơi xác định bằng GC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

phân tích nhiệt trọng lượng TGA; ngoài ra lượng nước có thể được xác định bằng

nước - % dung môi tồn dư [79], [85].

Hay:

Độ tinh khiết = [100% - (nước + dung môi tồn dư + tạp chất vô cơ) × độ tinh khiết sắc ký/điện di] (%) [75].

Giá trị ấn định được xác lập bằng cách so sánh kết quả phân tích giữa các PTN thông qua việc sử dụng phương pháp kiểm định thống kê ANOVA [7], [42].

7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

 Bước 6: Xử lý và phân phối các CCĐC Sự nguyên vẹn (về mặt đặc tính) phải được đảm bảo và duy trì trong suốt thời gian sử dụng.

N

Hoạt động đóng gói: Phải tuân thủ các yêu cầu GMP. Lọ chứa chất chuẩn gốc

Ơ

phải tránh độ ẩm, ánh sáng, oxy và phải được kiểm tra tính thấm ẩm. Các chất đắt tiền

N

H

hoặc chỉ có sẵn với lượng rất nhỏ có thể được pha thành dung dịch sau đó đông khô

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

chuẩn mới được thiết lập. Lưu trữ ở nhiệt độ khoảng 2℃ - 8℃ với các biện pháp chống

H Ư

N

G

hấp thụ độ ẩm thích hợp đã được chứng minh phù hợp cho hầu hết các chất chuẩn [83]. Độ ổn định: Độ ổn định của các chất chuẩn gốc nên được theo dõi bằng cách kiểm

TR ẦN

tra lại thường xuyên và nên được thay thế ngay khi xuất hiện một sự thay đổi đáng kể một đặc tính. Việc lựa chọn phương pháp phân tích thích hợp để theo dõi sự ổn định phụ

10 00

B

thuộc vào tính chất và mục đích sử dụng của chất chuẩn.

Thông tin được cung cấp với các chất chuẩn gốc: Trên nhãn của chất chuẩn gốc

Ó

A

cần cung cấp các thông tin sau [41], [83]: Tên thích hợp: tên quốc tế (International Nonproprietary Name – INN);

•

Tên của cơ quan ban hành;

•

Số lượng của nguyên liệu trong bao bì;

•

Số lô hoặc số đăng ký.

ÁN

-L

Í-

H

•

Phân phối và cung cấp: việc phân phối trong cùng một quốc gia thường không

ÀN

gây ra vấn đề tuy nhiên khi các mẫu được gửi đi các nước khác, cả bên gửi và bên nhận

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc và nên được yêu cầu thường xuyên khi một chất

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Bảo quản: Thông tin về các điều kiện bảo quản thường có thể lấy từ nhà sản xuất

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

kiện độ ẩm được kiểm soát.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

hoặc bay hơi. Một số chất chuẩn gốc phải được đóng gói trong khí trơ hoặc trong điều

D

IỄ N

Đ

đều có thể gặp khó khăn do sự khác nhau về quy định bưu chính, hải quan. Vì vậy cần phải tìm cách giải quyết các rào cản đối với phân phối chất chuẩn gốc.

Thời hạn sử dụng: Các chất chuẩn gốc không có “hạn sử dụng” theo nghĩa thông thường. Để tránh việc loại bỏ lãng phí các chất đạt yêu cầu, cơ quan ban hành có thể sử dụng cơ chế kiểm soát chung của mẻ chất chuẩn gốc. Nếu đặc biệt cần thiết phải xác 8

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

định ngày hết hạn hoặc ngày kiểm tra lại, cần ghi lại trên nhãn và/hoặc trong một số tài

liệu kèm theo chất chuẩn gốc và phải lưu lại hồ sơ [83].

9

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CHĆŻĆ NG 2. Táť”NG QUAN CĂ C K᝸ THUẏT XĂ‚Y Dáť°NG Báť˜ Dᝎ LIᝆU NHẏN Dáş NG CHẤT CHUẨN Gáť?C 2.1. MĂ´ tả váş­t lĂ˝

Ć

N

2.1.1. Kiáťƒm tra cảm quan

N

H

CĂĄc đạc Ä‘iáťƒm nhĂŹn thẼy đưᝣc nhĆ° mĂ u sắc, káşżt cẼu (texture), hĂŹnh thĂĄi háť?c

.Q

G

Ä?

KĂ­nh hiáťƒn vi quang háť?c liĂŞn quan Ä‘áşżn viᝇc kiáťƒm tra nguyĂŞn liᝇu thiáşżt láş­p chuẊn

N

vĂ xĂĄc Ä‘áť‹nh sáťą káşżt tinh dĆ°áť›i kĂ­nh hiáťƒn vi. Máť™t Ä‘ĂĄnh giĂĄ ban đầu váť hĂŹnh thĂĄi chẼt chuẊn,

H ĆŻ

tĂ­nh Ä‘áť“ng nhẼt, máť™t khĂ­a cấnh Ä‘áť‹nh tĂ­nh cᝧa khĂşc xấ ĂĄnh sĂĄng báşąng tinh tháťƒ cĂł tháťƒ dáť…

TR ẌN

dĂ ng quan sĂĄt báşąng káťš thuáş­t nĂ y. CĂĄc hất tinh tháťƒ sáş˝ xuẼt hiᝇn sáťą thay Ä‘áť•i tᝍ sĂĄng Ä‘áşżn táť‘i (hoạc thay Ä‘áť•i mĂ u sắc), dấng vĂ´ Ä‘áť‹nh hĂŹnh sáş˝ khĂ´ng thay Ä‘áť•i khi xoay bĂ n soi cᝧa

2.1.3. XĂĄc Ä‘áť‹nh Ä‘iáťƒm chảy

10 00

B

kĂ­nh hiáťƒn vi phân cáťąc [71].

A

Ä?iáťƒm chảy cᝧa máť™t chẼt lĂ nhiᝇt Ä‘áť™ Ä‘ĂŁ hiᝇu chᝉnh, tấi Ä‘Ăł hất chẼt rắn cuáť‘i cĂšng

H

Ă“

cᝧa chẼt tháť­ nghiᝇm chuyáťƒn thĂ nh trấng thĂĄi láť?ng, bắt đầu biáşżn mĂ u, hĂła than hoạc sᝧi

Ă?-

báť?t. Ä?áťƒ xĂĄc Ä‘áť‹nh Ä‘iáťƒm chảy, tĂšy theo tĂ­nh chẼt lĂ˝ háť?c cᝧa tᝍng chẼt mĂ ĂĄp d᝼ng phĆ°ĆĄng

-L

phĂĄp xĂĄc Ä‘áť‹nh Ä‘iáťƒm chảy phĂš hᝣp [5]. Ä?iáťƒm chảy lĂ máť™t háşąng sáť‘ váş­t lĂ˝ biáťƒu tháť‹ sáťą nháş­n

TO

Ă N

dấng và đ᝙ tinh khiết cᝧa nguyên liᝇu [14], [85].

Theo Dưᝣc Ä‘iáťƒn Viᝇt Nam V- PL 6.4: GĂłc quay cáťąc lĂ gĂłc cᝧa mạt pháşłng phân

Ä?

Ă€N

2.1.4. GĂłc quay cáťąc riĂŞng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

áş O

2.1.2. KĂ­nh hiáťƒn vi quang háť?c

MáťŒI YĂŠU CẌU GᝏI Vᝀ Háť˜P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

tra cảm quan lĂ máť™t biᝇn phĂĄp quan tráť?ng Ä‘áťƒ kiáťƒm tra cĂĄc chẼt chuẊn [66].

NĆĄi báť“i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť…n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Tᝉnh BĂŹnh Ä?áť‹nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

sắc hoạc káşżt cẼu khi tiáşżp xĂşc váť›i cĂĄc tĂĄc nhân nhĆ° ĂĄnh sĂĄng hoạc Ä‘áť™ Ẋm. Do Ä‘Ăł, kiáťƒm

Dáş Y KĂˆM QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U Y

(morphology) cŊng như s᝹ nhiᝅm bẊn nhÏn thẼy đưᝣc. Cåc chẼt hầu như sẽ thay đ᝕i mà u

D

Iáť„ N

cáťąc khi báť‹ quay Ä‘i khi ĂĄnh sĂĄng phân cáťąc Ä‘i qua chẼt Ä‘Ăł náşżu lĂ chẼt láť?ng hoạc qua dung dáť‹ch chẼt Ä‘Ăł náşżu lĂ chẼt rắn. Náşżu khĂ´ng cĂł hĆ°áť›ng dẍn riĂŞng, gĂłc quay cáťąc Îą đưᝣc xĂĄc Ä‘áť‹nh áť&#x; nhiᝇt Ä‘áť™ 20℃ vĂ váť›i chĂšm tia Ä‘ĆĄn sắc cĂł bĆ°áť›c sĂłng ᝊng váť›i vấch D (589,3 nm) cᝧa đèn natri qua láť›p chẼt láť?ng hay dung dáť‹ch cĂł báť dĂ y 1 dm. GĂłc quay cáťąc riĂŞng [Îą]20 đ??ˇ cᝧa máť™t chẼt láť?ng lĂ gĂłc quay cáťąc Ä‘o đưᝣc khi chĂšm ĂĄnh sĂĄng D truyáť n qua láť›p chẼt láť?ng ddĂł cĂł báť dĂ y lĂ 1 dm áť&#x; 20℃ chia cho tᝡ tráť?ng tĆ°ĆĄng Ä‘áť‘i cᝧa chẼt áť&#x; cĂšng nhiᝇt Ä‘áť™.

10

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť…n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

GĂłc quay cáťąc riĂŞng [Îą]20 cᝧa máť™t chẼt rắn lĂ gĂłc quay cáťąc Ä‘o đưᝣc khi chĂšm ĂĄnh sĂĄng đ??ˇ D truyáť n qua láť›p dung dáť‹ch cĂł báť dĂ y 1 dm vĂ cĂł náť“ng Ä‘áť™ lĂ 1 g/ml, áť&#x; 20℃ (gĂłc quay cáťąc riĂŞng cᝧa chẼt rắn luĂ´n đưᝣc biáťƒu tháť‹ cĂšng váť›i dung mĂ´i vĂ náť“ng Ä‘áť™ dung dáť‹ch Ä‘o)

N

[5], [14]. GĂłc quay cáťąc riĂŞng đưᝣc sáť­ d᝼ng Ä‘áťƒ xĂĄc nháş­n chẼt chuẊn [14], [66].

H

Ć

2.2. B᝙ ph᝕ nhận dấng vᝠcẼu trúc

.Q

Ä?

th᝼ váť›i nhᝯng năng lưᝣng nhẼt Ä‘áť‹nh trong vĂšng bᝊc xấ cĂł sáť‘ sĂłng 4000 - 670 cm-1.

G

VÚng nà y cung cẼp nhᝯng thông tin quan tr�ng vᝠcåc dao đ᝙ng cᝧa cåc liên kết trong

H ĆŻ

N

cĂĄc loấi nhĂłm chᝊc do Ä‘Ăł lĂ cĂĄc thĂ´ng tin váť cẼu trĂşc cᝧa cĂĄc phân táť­ [85]. VĂŹ máť—i mᝊc năng lưᝣng tấi đᝉnh bẼt káťł trong pháť• hẼp th᝼ IR xuẼt hiᝇn tĆ°ĆĄng ᝊng tần sáť‘ dao Ä‘áť™ng

TR ẌN

cᝧa máť™t phần trong phân táť­ chẼt phân tĂ­ch. VĂŹ máť—i dấng liĂŞn káşżt cĂł tần sáť‘ dao Ä‘áť™ng khĂĄc nhau vĂ hai dấng liĂŞn káşżt nhĆ° nhau trong hai hᝣp chẼt khĂĄc nhau áť&#x; trong mĂ´i trĆ°áť?ng

10 00

B

khĂĄc nhau, nĂŞn hai phân táť­ cĂł cẼu trĂşc khĂĄc nhau sáş˝ khĂ´ng tháťƒ cĂł pháť• IR giáť‘ng nhau [6].

Ă“

A

Ä?áťƒ cĂł thĂ´ng tin cẼu trĂşc chĂ­nh xĂĄc tᝍ pháť• IR, cần tĂŹm hiáťƒu cĂĄc tần sáť‘ mĂ tấi Ä‘Ăł

H

cĂĄc nhĂłm chᝊc khĂĄc nhau hẼp th᝼. CĂł tháťƒ sáť­ d᝼ng bảng tĆ°ĆĄng quan IR (cung cẼp cĂĄc

-L

Ă?-

thông tin vᝠhẼp th᝼ cᝧa cåc nhóm chᝊc khåc nhau) [6].

Ă N

2.2.1.2. ĆŻu nhưᝣc Ä‘iáťƒm

TO

ĆŻu Ä‘iáťƒm: Pháť• IR là đạc trĆ°ng cho cĂĄc nhĂłm chᝊc cĂł trong hᝣp chẼt hᝯu cĆĄ (trᝍ

Ă€N

trĆ°áť?ng hᝣp Ä‘áť“ng phân quang háť?c) [6], [85] vĂ pháť• IR thĆ°áť?ng khĂ´ng báť‹ ảnh hĆ°áť&#x;ng nhiáť u

D

Iáť„ N

Ä?

báť&#x;i sáťą cĂł mạt cᝧa máť™t lưᝣng nháť? tấp chẼt (lĂŞn Ä‘áşżn vĂ i phần trăm) trong chẼt tháť­ [85].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

áş O

trong phân t᝭ khi cho tia bᝊc xấ IR đi qua mẍu phân tích và xåc đᝋnh phần tia t᝛i bᝋ hẼp

MáťŒI YĂŠU CẌU GᝏI Vᝀ Háť˜P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ph᝕ hᝓng ngoấi là m᝙t k᝚ thuật d᝹a và o s᝹ dao đ᝙ng và quay cᝧa cåc nguyên t᝭

NĆĄi báť“i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť…n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Tᝉnh BĂŹnh Ä?áť‹nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

2.2.1.1. Nguyên tắc

Dáş Y KĂˆM QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U Y

N

2.2.1. K᝚ thuật quang ph᝕ hᝓng ngoấi (IR)

Nhưᝣc Ä‘iáťƒm: ᝨng d᝼ng váť Ä‘áť‹nh tĂ­nh cᝧa pháť• IR trong trĆ°áť?ng hᝣp Ä‘áť“ng phân quang háť?c báť‹ hấn cháşż [6], [85].

2.2.1.3. ᝨng d᝼ng Ph᝕ IR đưᝣc s᝭ d᝼ng chᝧ yếu như m᝙t phÊp xåc đᝋnh cẼu trúc và nhận dấng chẼt phân tích thông qua cåc đᝉnh đạc trưng cho cåc nhóm chᝊc đạc biᝇt trong phân t᝭ hᝣp 11

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť…n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

chất [3], [85]. Bằng cách so sánh phổ IR của hai hợp chất ta có thể xác định chúng có giống nhau hay không [6]. Phổ IR là kỹ thuật nhận dạng được sử dụng phổ biến nhất cho các chất chuẩn gốc [66], [85]. Có thể nhận dạng chất chuẩn gốc bằng cách so sánh với dữ liệu phổ đã công bố trong nghiên cứu trước đây [14], [26].

Ơ

N

Trong các Dược điển, phổ IR thường được sử dụng để xác định cấu trúc các

N

H

nguyên liệu thuốc như: Trong IP (Allopurinol, Artemisinin, Atenolol, Atropin sulfat,

.Q

G

Đ

chuẩn đối chiếu) [5].

H Ư

N

2.2.2. Kỹ thuật quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến (UV-VIS) 2.2.2.1. Nguyên tắc:

TR ẦN

Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến (UV-VIS) là một trong các phương pháp phân tích dựa trên sự hấp thụ bức xạ điện từ từ 200 - 800 nm [5]. Thông

10 00

B

thường phổ tử ngoại được đo trong dung môi, với nồng độ xấp xỉ 10-4 mol/l [8]. Có thể định tính một số chất bằng cách so sánh vị trí các cực đại và cực tiểu hấp thụ và tỷ lệ

A

mật độ quang giữa các bước sóng đó phải nằm trong một giới hạn cho phép; quang phổ

H

Ó

đạo hàm; chồng phổ [3], [66], [85].

-L

Í-

2.2.2.2. Ưu nhược điểm

ÁN

Nhược điểm: Chỉ một số dạng cấu trúc trong các hợp chất hữu cơ mới có sự hấp

TO

thụ như vậy nên trên thực tế việc ứng dụng phổ UV bị giới hạn trong một số hợp chất nhất định, chủ yếu là các hợp chất có cấu trúc nối đôi liên hợp [4]; không áp dụng được

ÀN

khi hợp chất chưa biết rõ cấu trúc, khi hợp chất hấp thụ kém/không hấp thụ UV. Tại

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

(Albendazol, Allopurinol, Ampicilin, Haloperidol,… yêu cầu phải phù hợp với phổ IR

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Benzocain,… yêu cầu phải phù hợp với phổ chuẩn) [80], trong Dược điển Việt Nam V

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

[85], trong USP (Abacavir, Acetaminophen, Amikacin, Amitriptylin hydrochlorid,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Betamethason, Caffein, Cloramphenicol,… yêu cầu phổ phải phù hợp với phổ chuẩn)

D

IỄ N

Đ

vùng bước sóng dưới 200 nm xảy ra sự hấp thụ UV không chọn lọc [65].

2.2.2.3. Ứng dụng Phổ UV-VIS là một kỹ thuật cung cấp thêm thông tin để nhận dạng chất phân tích [80]. Bên cạnh đó phổ UV-VIS có thể định tính một số chất bằng cách so sánh vị trí các

12

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

cực đại và cực tiểu hấp thụ và tỷ lệ mật độ quang giữa các bước sóng đó phải nằm trong một giới hạn cho phép [3], [66], [85].

Trong các Dược điển đã áp dung quang phổ UV-VIS để định tính được các hợp chất: USP (Albuterol, Atenolol, Budesonid, …) [80], IP (Aciclovir, Stavudin,

H

Ơ

N

Zidovudin,…) [85].

.Q

C) hay Dalton (1Da = khối lượng

H Ư

N

nguyên tử hydro) [3], [5], [14], [26].

12

G

lượng nguyên tử (1 a.m.u = 1/12 khối lượng của

Đ

m và điện tích z của ion chất phân tích. Tỷ số này được trình bày dưới dạng đơn vị khối

TR ẦN

Trong máy phổ khối, các ion được tạo thành trong nguồn ion, được gia tốc rồi được tách trong bộ phận phân tích trước khi đến detector. Tất cả các quá trình trên được thực hiện trong một buồng hút chân không đến khoảng 10-3 đến 10-6 Pa. Phổ thu được

10 00

B

biểu diễn cường độ tương đối của các ion khác nhau phụ thuộc vào tỷ số m/z của các ion đó [3]. Tín hiệu tương ứng với một ion là một nhóm các pic tương ứng với phân bố

Ó

A

thống kê của các đồng vị khác nhau của ion đó. Đó là hình ảnh đồng vị ion và trong đó

Í-

H

pic của đồng vị có cường độ lớn nhất của một nguyên tử được gọi là pic đơn đồng vị.

-L

Trong phổ MS của các hợp chất hữu cơ, không thể phân loại các phân tử hữu cơ

ÁN

khác nhau như hydrocarbon, alcohol, ester,… nhưng cần phải chú ý đến phân tử nguyên

TO

vẹn được ion hóa trước khi phân mảnh mà không phải là nhóm chức đặc trưng bị tách

ÀN

ra khỏi phần còn lại của phân tử [6].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

âm. Phương pháp phổ khối dựa trên việc đo trực tiếp tỷ số m/z, là tỷ số giữa khối lượng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Chất phân tích được chuyển sang thể khí và ion hóa, tạo thành các ion dương hoặc

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

2.2.3.1. Nguyên tắc

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

2.2.3. Kỹ thuật phổ khối lượng (MS)

D

IỄ N

Đ

2.2.3.2. Ưu điểm của kỹ thuật MS Ưu điểm: •

Với lượng mẫu nhỏ nhất có thể xác định được khối lượng tương đối của phân tử và thậm chí thành phần các nguyên tố của một hợp chất.

•

Qua việc phân mảnh trong khối phổ có thể suy ra thông tin về cấu trúc hoặc thông tin về xác định khối lượng phân tử [3], [5], [6], [8].

13

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

•

Có thể dùng MS để xác định thành phần đồng vị của các nguyển tố trong mẫu [3]

•

Kỹ thuật bắn phá nhanh bằng nguyên tử (FAB) rất đơn giản, đặc hiệu và độ nhạy cho phép phân tích trong khoảng picogram, thích hợp để ion hóa các chất phân cực và dễ phân hủy nhiệt [3], [65].

Kỹ thuật ion hóa bằng tia điện (ESI) thích hợp để ion hóa các chất phân cực (khác

N

•

H

Ơ

với kỹ thuật EI). Kỹ thuật ion hóa hóa học ở áp suất khí quyển (APCI) thích hợp

Chế độ SIM (Single-ion monitoring, chọn tín hiệu của một ion) hoặc chế độ MIM

TP

.Q

•

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

N

Để phân tích trực tiếp các hỗn hợp sinh học phức tạp, kết hợp 2 kỹ thuật sắc ký

H Ư

•

G

[3], [65].

lỏng và phổ khối lượng cho thấy hiệu quả. Ion hóa bằng giải hấp lazer (MALDI)

TR ẦN

kết hợp với bộ phân tích thời gian bay (TOF) đã chứng tỏ là một công cụ mạnh và nhạy. Kỹ thuật này có khả năng phân tích hỗn hợp của peptid và protein trong

B

một khoảng nồng độ rộng từ picomol (10-12 mol) đến attomol (10-18 mol), đây là

10 00

một lợi thế của kỹ thuật này với ứng dụng rộng trong hóa hữu cơ, nghiên cứu dược

A

phẩm và công nghệ sinh học.

H

Ó

Nhược điểm: Phổ MS không phân biệt được các đồng phân. Trong ion hóa bằng

Í-

dòng electron (EI), độ nhạy cỡ nanogram [65]; kỹ thuật EI thường tạo ra nhiều mảnh

-L

nhỏ, ít hoặc thậm chí không có ion phân tử cho nên đôi khi khó biện giải phổ. Trong

ÁN

trường hợp đó người ta dùng kĩ thuật ion hóa “mềm” hơn. Mặt khác, kỹ thuật này đòi hỏi phải hóa hơi mẫu nên ít thích hợp với các chất phân cực hoặc dễ bị nhiệt phân

ÀN

hủy [3].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

tích) cho độ nhạy cao hơn, phát hiện hợp chất khi nồng độ dưới ngưỡng pictogram

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

(multiple-ion monitoring, chọn tín hiệu của một số ion đặc trưng của chất phân

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

cơ ở mức pictogram [2], [65].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

để kết nối HPLC/MS [22]. Hai kỹ thuật này cho phép phát hiện các hợp chất hữu

D

IỄ N

Đ

2.2.3.3. Ứng dụng Phổ khối lượng là công cụ hiệu quả để định tính và định lượng các hợp chất hữu cơ như protein, peptid, các hoạt chất, các sản phẩm chuyển hóa, tạp chất hay các sản phẩm phân hủy khác [80].

14

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.4. Kỹ thuật phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 2.2.4.1. Nguyên tắc Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) là một kỹ thuật nghiên cứu cấu trúc phân tử

N

bằng sự tương tác của bức xạ điện từ tần số radio với tập hợp hạt nhân được đặt trong

Ơ

từ trường mạnh. Các hạt nhân này là một phần của nguyên tử và các nguyên tử lại được

N

H

tập hợp lại thành phân tử và do đó phổ có thể cung cấp thông tin chi tiết về cấu trúc phân

Đ

ẠO

2.2.4.2. Ưu nhược điểm

G

Ưu điểm: Phổ NMR cung cấp thông tin về cấu trúc phân tử rất chi tiết do đó nó

H Ư

N

có tính đặc hiệu cao [6], [27]. Tính hữu ích của phân tích NMR phát sinh từ quan sát thấy rằng cùng một loại hạt nhân, khi nằm trong các môi trường phân tử khác nhau thì

TR ẦN

có tần suất cộng hưởng khác nhau. Phổ NMR là một kỹ thuật mạnh để xác định cấu trúc vì tính đặc hiệu của nó trong việc phát hiện một số hạt nhân nhất định như 1H, 13C, 31P

10 00

B

và 19F. Cơ sở xác định là so sánh các tín hiệu từ mẫu thử với các tín hiệu dự kiến từ một tiêu chuẩn tham chiếu đủ tiêu chuẩn. Các cấu trúc tương đối đơn giản có thể được xác

A

định bằng cách sử dụng các thay đổi hóa học, mô hình ghép nối và cường độ thu được

H

Ó

từ Phổ 1H và 13C một chiều. Đối với các cấu trúc phức tạp hơn, các nhà phổ học có thể

Í-

phải có được phổ hai chiều từ các thí nghiệm đã được phát triển để xác định kết nối đồng

-L

nhất hoặc kết nối hạch nhân [80].

ÁN

Nhược điểm: Kỹ thuật NMR có độ nhạy tương đối thấp do sự khác biệt nhỏ về

TO

năng lượng giữa các trạng thái liên kết dẫn đến kết quả là sự khác biệt số lượng hạt nhân

ÀN

giữa 2 mức của chỉ có một phần triệu. Ngoài ra, tuổi thọ dài của hầu hết các hạt nhân

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

mặt từ tính có mặt trong phân tử nghiên cứu [6].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

carbon là chung nhất. Phổ NMR cung cấp thông tin về số lượng nguyên tử khác biệt về

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

tử. Có nhiều hạt nhân có thể dùng để nghiên cứu bằng kỹ thuật NMR nhưng hydro và

D

IỄ N

Đ

trong trạng thái kích thích ảnh hưởng đến thiết kế của kiểm tra phân tích NMR đặc biệt trong các thí nghiệm xung có tính lặp lại.

2.2.4.3. Ứng dụng Phổ NMR là một kỹ thuật hiệu quả trong xác định cấu trúc hóa học của các phân tử hữu cơ bằng cách giải phổ. Để xác định cấu trúc thường đo phổ 1D NMR là đủ còn trong các trường hợp phức tạp cần sử dụng thêm phổ 2D. Phổ NMR có thể được sử dụng 15

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

cho mục đích định tính và định lượng [14], [26], trong trường hợp định tính phổ của nguyên liệu chất chuẩn phải luôn được ghi lại dưới cùng một điều kiện với chất phân tích. Khi không có sẵn dữ liệu tham chiếu cần bổ sung thêm một kỹ thuật phổ MS [27],

N

[53].

Ơ

2.2.5. Phân tích nguyên tố

U Y

định bởi phương pháp phân tích đốt cháy (combustion analysis). Phân tích đốt cháy cung

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

có thể xác định sự có mặt của dung môi và tạp chất vô cơ [66].

H Ư

N

2.2.6. Nhiễu xạ tia X

Nguyên tắc: Mỗi pha tinh thể của một chất nhất định tạo ra một mô hình nhiễu xạ

TR ẦN

tia X đặc trưng. Ba loại thông tin thu được từ nhiễu xạ tia X là vị trí góc cạnh của đường nhiễu xạ, cường độ đường nhiễu xạ và các mặt cắt nhiễu xạ. Kết quả về vị trí góc cạnh

10 00

B

và cường độ của các đường có thể sử dụng cho giai đoạn định tính [80].

Khi áp dụng cho các tinh thể đơn, kỹ thuật này gọi là nhiễu xạ tia X đơn tinh thể;

Ó

A

khi áp dụng cho bột, kỹ thuật gọi là nhiễu xạ tia X bột (X-ray powder diffraction -

H

XRPD). Nhiễu xạ đơn tinh thể cung cấp thông tin cấu trúc cuối cùng về độ dài và góc

-L

Í-

liên kết cho chất chuẩn, trong khi XRPD cho thông tin về mức độ kết tinh của nguyên

TO

ÁN

liệu cũng như giúp xác định dạng thù hình [31], [32], [70].

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

hoặc sự khác nhau giữa công thức phân tử lý thuyết và thực tế. Phân tích nguyên tố cũng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

giữa thành phần nguyên tố lý thuyết và thực nghiệm thường là dấu hiệu của một tạp chất

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

cấp thông tin về công thức phân tử và độ tinh khiết của chất chuẩn. Sự kém phù hợp

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Hàm lượng các nguyên tố carbon, hydro và nitơ của chất chuẩn có thể được xác

16

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 3. TỔNG QUAN CÁC KỸ THUẬT XÁC ĐỘ TINH KHIẾT NGUYÊN LIỆU THIẾT LẬP CHẤT CHUẨN GỐC 3.1. Nguồn gốc và phân loại tạp chất trong nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc

Ơ

N

3.1.1. Nguồn gốc tạp chất

N

H

Các tạp chất hoặc các sản phẩm phân hủy trong các thuốc có thể sinh ra trong quá

Đ

và được giới hạn với một tiêu chuẩn chấp nhận riêng trong một chuyên luận hoặc trong

N

G

đặc tính một thuốc mới. Một tạp chất lý thuyết có thể được nhận biết hoặc chưa được

H Ư

nhận biết.

TR ẦN

Tạp chất chưa được nhận biết (unidentified impurity) là một tạp chất mà một đặc tính cấu trúc chưa hoàn thành và nó được xác định chỉ bằng các tính chất phân tích định

10 00

B

tính (ví dụ thời gian lưu sắc ký).

Tạp chất không xác định (unspecified impurity) là một tạp chất mà được giới hạn

A

bởi một tiêu chuẩn chấp nhận chung nhưng không được liệt kê riêng biệt với tiêu chuẩn

H

Ó

chấp nhận riêng của nó [14], [39].

-L

Í-

3.1.2. Phân loại tạp chất

ÁN

Tạp chất có thể được phân loại thành các loại sau [65], [80],[47]: Tạp chất hữu cơ

–

Tạp chất vô cơ

–

Tạp chất bay hơi

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

–

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Tạp chất xác định (specified impurity) là một tạp chất mà được liệt kê riêng biệt

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

môi trường, với một tá dược hoặc với hệ thống bao bì trực tiếp [80].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

phẩm thuốc có thể phát sinh từ các thuốc hoặc các sản phẩm phản ứng của thuốc với

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

trình sản xuất hoặc trong quá tình lưu trữ thuốc. Các sản phẩm phân hủy trong các sản

 Tạp chất hữu cơ: Tạp chất hữu cơ có thể phát sinh ra trong quá trình sản xuất và/hoặc lưu trữ nguyên liệu thiết lập chất chuẩn. Chúng có thể được xác định hoặc không xác định, dễ bay hơi hoặc không bay hơi, và bao gồm: •

Nguyên liệu ban đầu;

•

Sản phẩm phụ;

•

Sản phẩm trung gian; 17

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

•

Sản phẩm phân hủy;

•

Thuốc thử, phối tử, các chất xúc tác;

•

Các đồng phân lập thể.

Việc xác định tạp chất hữu cơ là vấn đề thách thức nhất trong phát triển một

Ơ

N

phương pháp phân tích phù hợp bởi vì những tạp chất hữu cơ này là duy nhất cho

N

H

chất chuẩn gốc và có nhiều con đường thoái hóa có thể dẫn đến các tạp chất khác

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

•

Kim loại nặng hoặc kim loại còn dư;

•

Muối vô cơ;

•

Các chất khác (ví dụ: thiết bị lọc, than hoạt) [80].

G N H Ư

Cụ thể nguồn gốc tạp vô cơ có thể xuất phát từ [35], [65]: Nguyên liệu, thuốc thử và dung môi sử dụng trong quá trình sản xuất/ tổng hợp.

B

•

10 00

Chúng có thể là ion vô cơ: clorua, sunfat, phosphat… Hoặc có thể là các kim loại nặng.

A

Các kim loại nặng có thể bắt nguồn từ các bình phản ứng và ống dẫn được sử

Ó

•

H

dụng trong quá trình sản xuất [35].

Í-

Bộ lọc, thiết bị lọc và chất hấp phụ được sử dụng trong quá trình tinh chế và kết

-L

•

•

ÁN

tinh cũng có thể giải phóng các kim loại nặng và muối của axit vô cơ.

Vết của một số chất phản ứng vô cơ hoặc các sản phẩm biến đổi của chúng cũng

TO

có thể là tạp chất. Ví dụ, trong phản ứng các sản phẩm oxy hóa với các chất oxy

Đ IỄ N D

hóa như selen dioxit, chromium trioxit, muối permanganat và thủy ngân (II) có

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Thuốc thử, phối tử và các chất xúc tác;

Đ

•

TR ẦN

–

ẠO

được biết và nhận diện và bao gồm :

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

 Tạp chất vô cơ: Tạp chất vô cơ có thể là kết quả của quá trình sản xuất, chúng thường

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

và lưu trữ phải được xác định và định lượng [21].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

nhau. Các tạp chất hữu cơ hiện tại và tiềm ẩn phát sinh trong quá trình tổng hợp, lọc

thể phát hiện được các vết của selen, crom, mangan hoặc thuỷ ngân…vv.

•

Các chất xúc tác dị thể như palladium và niken có thể tồn tại dưới dạng ion hóa.

•

Sự phân hủy hoạt chất: ví dụ như muối phosphat từ quá trình thủy phân của este photpho, hydrazin từ sự phân ly hoặc hydrazon thủy phân [65].

 Tạp chất bay hơi: –

Tạp chất bay hơi bao gồm nước và dung môi tồn dư.

18

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Dung môi tồn dư là chất lỏng hữu cơ được sử dụng làm phương tiện để pha chế các dung dịch hoặc hỗn dịch trong tổng hợp thuốc. Vì chúng thường có độc tính đã biết nên việc lựa chọn các biện pháp kiểm soát thích hợp được thực hiện dễ dàng [80].

Ơ

Dung môi để kết tinh hoạt chất: thường là dung môi sử dụng trong những giai

.Q TP

Dung môi do hấp phụ: Nếu hoạt chất là chất dễ hút ẩm nó có thể liên kết các thành phần dễ bay hơi trong không khí bằng cách hấp phụ hay gặp nhất là nước.

Đ

Bắt nguồn từ quá trình bào chế thuốc: nước, cồn, 2-propanol, chloroform,

G

•

H Ư

N

dichloromethan và các dung môi khác được sử dụng trong kỹ thuật bào chế.

Các tạp chất nên được kiểm soát trong suốt quá trình sản xuất. Các tạp chất liên

TR ẦN

quan đến quy trình sản xuất nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc nên được giữ ở mức tối thiểu để tránh sự xuống cấp và tác dụng về dược lý không mong muốn. Các hợp chất

B

dễ bị thủy phân, ví dụ nên được làm khô hoàn toàn để loại bỏ ẩm và sau đó được lưu trữ

10 00

trong máy sấy hút ẩm. Các chất chuẩn đối chiếu có chứa một tỉ lệ cao các tạp chất hữu cơ dễ bay hơi có thể bị thay đổi độ tinh khiết theo thời gian khi dung môi bay hơi. Ví

Ó

A

dụ, tạp chất trong aceton, dung môi loại 3, được cho phép lên tới 5000 ppm hoặc 0,5%

Í-

H

[21].

-L

3.2. Các kỹ thuật xác định tạp chất trong nguyên liệu thiết lập chất chuẩn gốc

ÁN

Nhìn chung có hai hướng chính để xác định độ tinh khiết của nguyên liệu thiết

TO

lập chất chuẩn gốc là xác định trực tiếp hoạt chất chính và xác định gián tiếp qua hàm

ÀN

lượng từng loại tạp chất [85], [87].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

•

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Dung môi chạy sắc ký: Nếu bước cuối cùng hoạt chất được tinh chế bằng sắc ký cột, thì dung môi sắc ký cũng có thể có mặt.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

•

N

đoạn tinh chế cuối cùng.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

•

N

Nguồn gốc của tạp chất bay hơi:

H

–

D

IỄ N

Đ

3.2.1. Kỹ thuật xác định gián tiếp: Khi thiết lập bất kỳ một chất chuẩn gốc nào nhằm sử dụng trong định lượng thì phải xác định độ tinh khiết. Độ tinh khiết được xác định thông qua việc xác định hàm lượng tạp chất bằng cách sử dụng các kỹ thuật phân tích phù hợp [14], [26].

19

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Thử tinh khiết là tập hợp các phép thử nhằm phát hiện những tạp chất nhiễm vào nguyên liệu thiết lập chất chuẩn. Để kiểm tra độ tinh khiết, phải thử xác định sự có mặt của các tạp chất, số lượng và giới hạn của chúng cũng như những yêu cầu khác tùy theo mỗi chuyên luận [5].

Ơ

N

Độ tinh khiết của nguyên liệu thiết lập chất chuẩn được tính theo công thức

U Y

Độ tinh khiết = (100 - % tạp chất liên quan) × (100 - % tạp bay hơi - % tạp

Đ

Trong đó:

Độ tinh khiết: hàm lượng phần trăm của chất chuẩn đối chiếu (đơn vị %);

•

% tạp chất liên quan: phần trăm tổng tạp chất liên quan tính thep phương pháp

TR ẦN

chuẩn hóa diện tích.

H Ư

N

G

•

3.2.1.1. Các kỹ thuật xác định tạp chất hữu cơ

10 00

B

a. Các kỹ thuật xác định tạp chất liên quan

a.1. Kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)

Ó

A

Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một kỹ thuật tách trong đó các chất phân tích di

H

chuyển qua cột chứa các hạt pha tĩnh. Tốc độ di chuyển khác nhau liên quan đến hệ số

-L

Í-

phân bố của chúng giữa hai pha tức là liên quan đến ái lực tương đối của các chất này

ÁN

với pha tĩnh và pha động. Thứ tự rửa giải các chất ra khỏi cột vì vậy phụ thuộc vào các

TO

yếu tố đó. Thành phần của pha động đưa chất phân tích di chuyển qua cột cần được điều

Sắc ký lỏng hiệu năng cao có thể thực hiện theo nhiều kỹ thuật khác nhau tùy

thuộc vào đặc điểm cấu tạo của chất cần phân tích và yêu cầu của công việc. Có thể thống kê các kỹ thuật sắc ký lỏng theo mức độ phổ biến trong thực tế như sau:

D

IỄ N

Đ

ÀN

chỉnh để rửa giải các chất phân tích với thời gian hợp lý [3].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

= Độ tinh khiết sắc ký × (100- % tạp bay hơi - % tạp vô cơ)/100

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

vô cơ)/100

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

[75],[58], [85]:

–

Sắc ký phân bố hiệu năng cao: sử dụng phổ biến nhất hiện nay là sắc ký pha liên kết.

Pha tĩnh có liên kết hóa học với bề mặt chất mang rắn: silica, alumina… Trong loại này, dựa vào cấu tạo của pha liên kết mà chia ra thành 2 dạng pha tĩnh đó là: 20

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn •

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Sắc kĂ˝ pha đảo (RP-HPLC): Khi cĂĄc nhĂłm –OH cᝧa silicagel Ä‘ĂŁ đưᝣc silan hĂła báť&#x;i cĂĄc chuáť—i Carbon (C8, C18, phenyl‌) tĂ­nh phân cáťąc cᝧa pha tÄŠnh báť‹ giảm Ä‘i hoạc mẼt háşłn, khi Ä‘Ăł dĂšng pha Ä‘áť™ng phân cáťąc.

•

Sắc kĂ˝ pha thuáş­n (NP-HPLC): CĂĄc nhĂłm –OH cᝧa silicagel đưᝣc thay tháşż báť&#x;i

N

cåc nhóm –NH2, –CN‌ là m thay đ᝕i đ᝙ phân c᝹c cᝧa pha tĊnh, dÚng pha đ᝙ng

H .Q

TP

G

Ä?

dung môi đᝑi v᝛i chẼt hẼp ph᝼ là alumina và silica. Trᝋ sᝑ ξo cà ng l᝛n thÏ sᝊc r᝭a

H ĆŻ

N

giải cĂ ng mấnh. Náşżu pha Ä‘áť™ng gáť“m nhiáť u dung mĂ´i, dáťąa vĂ o phân sáť‘ mol cᝧa tᝍng dung mĂ´i Ä‘áťƒ tĂ­nh tráť‹ sáť‘ Îľo cᝧa hᝇ [3], [46], [82].

TR ẌN

Hiᝇn nay, phần láť›n cĂĄc phĂŠp tháť­ tấp chẼt liĂŞn quan đưᝣc tháťąc hiᝇn báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp HPLC/DAD (detector mảng diod) do phĆ°ĆĄng phĂĄp cĂł Ä‘áť™ nhấy phĂš hᝣp Ä‘áťƒ xĂĄc

10 00

B

đᝋnh tấp chẼt dư᝛i dấng vết và t᝹ đ᝙ng hóa cao. M᝙t loất cåc loấi pha tĊnh và chế đ᝙ hoất đ᝙ng khåc nhau là m cho HPLC åp d᝼ng cho đa phần cåc loấi hᝣp chẼt tᝍ không

A

phân cáťąc Ä‘áşżn phân cáťąc trung bĂŹnh. Giáť›i hấn phĂĄt hiᝇn Ä‘iáťƒn hĂŹnh Ä‘áť‘i váť›i cĂĄc tấp chẼt liĂŞn

H

Ă“

quan thư�ng là 0,1% hoạc thẼp hƥn 0,01%.

-L

Ă?-

CĂł 2 phĆ°ĆĄng phĂĄp chĂ­nh Ä‘áťƒ Ä‘áť‹nh lưᝣng tấp chẼt báşąng HPLC lĂ :

Ă N

ďƒ˜ PhĆ°ĆĄng phĂĄp 1: ChuẊn hĂła diᝇn tĂ­ch

TO

Trong cåch tiếp cận nà y hà m lưᝣng cᝧa m᝙t tấp chẼt liên quan riêng lẝ đưᝣc tính

Iáť„ N

Ä?

Ă€N

theo phưƥng trÏnh sau: % tấp đƥn =

đ??’đ??Šđ??˘đ??œ (đ??­áşĄđ??Š Ä‘ĆĄđ??§) đ?šşđ??’đ??Šđ??˘đ??œ

Ă— 100%

% t᝕ng tấp chẼt liên quan = Σ% tấp đƥn =

D

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

cĂł sᝊc ráť­a giải khĂĄc nhau, đạc trĆ°ng báť&#x;i giĂĄ tráť‹ Îľo - tháťƒ hiᝇn sᝊc ráť­a giải cᝧa cĂĄc

MáťŒI YĂŠU CẌU GᝏI Vᝀ Háť˜P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Pha tĊnh thư�ng s᝭ d᝼ng là silic oxyd (silica) và nhôm oxyd (alumina). Pha đ᝙ng

áş O

•

Dáş Y KĂˆM QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

Pha tÄŠnh lĂ chẼt rắn phân cáťąc. ChẼt phân tĂ­ch tranh chẼp váť›i pha Ä‘áť™ng áť&#x; cĂĄc váť‹ trĂ­ hẼp ph᝼ trĂŞn báť mạt pha tÄŠnh. LĆ°u giᝯ chẼt phân tĂ­ch do láťąc hẼp ph᝼.

NĆĄi báť“i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť…n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Tᝉnh BĂŹnh Ä?áť‹nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

•

N

Sắc kĂ˝ hẼp ph᝼ hiᝇu năng cao:

U Y

–

Ć

không phân c᝹c hoạc ít phân c᝹c hƥn so v᝛i pha tĊnh.

đ?šşđ??’đ??Šđ??˘đ??œ (đ??­áşĄđ??Š Ä‘ĆĄđ??§) đ?šşđ??’đ??Šđ??˘đ??œ

Ă— 100%

Trong đó: •

Spic (tấp đƥn): diᝇn tích cᝧa pic sắc ký tưƥng ᝊng v᝛i tấp đƥn đó;

•

ΣSpic: t᝕ng diᝇn tích pic sắc ký cᝧa hoất chẼt và tẼt cả cåc tấp chẼt có liên quan.

21

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť…n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Đây là một trong những cách đơn giản nhất để định lượng tạp chất liên quan vì không cần chất chuẩn đối chiếu. Phương pháp được áp dụng khi đáp ứng các tiêu chí sau: •

Khoảng nồng độ tuyến tính: Do các hàm lượng các tạp chất liên quan thường

N

dưới 1% và hoạt chất trên 95% do đó điều quan trọng là phải có sự tuyến tính từ

H

Ơ

ngưỡng nồng độ các chất liên quan (ví dụ 1%) đến nồng độ của hoạt chất (ví dụ

Độ nhạy của phương pháp: Trong một số trường hợp, hình dạng pic của hoạt chất

G

Đ

có thể không hoàn toàn đối xứng ở nồng độ cao nên có thể dẫn đến sự mất tuyến

H Ư

N

tính. Do đó, để duy trì tính tuyến tính ở nồng độ của hoạt chất, các nhà khoa học có thể cố gắng giảm nồng độ mẫu để cải thiện hình dạng pic của hoạt chất. Tuy

TR ẦN

nhiên, nếu nồng độ mẫu quá thấp, nó sẽ ảnh hưởng đến độ nhạy của phương pháp, và khả năng phát hiện các tạp chất liên quan thấp có thể không đầy đủ.

Hệ số đáp ứng: Các hệ số đáp ứng tương đối của các chất liên quan với hoạt chất

B

•

10 00

nên gần với 1. Nếu không, phải xác định hệ số hiệu chỉnh để tính toán. Tuy nhiên, khi xác định độ tinh khiết của hoạt chất tự nhiên, bỏ qua sai số xuất phát từ sự

Ó

A

chênh lệch về đáp ứng là không thể tránh khỏi do thành phần phức tạp ngăn cản

Í-

H

việc xác định và định lượng tất cả các thành phần [19], [75].

-L

 Phương pháp 2: Pha loãng dung dịch thử (Low-high)

ÁN

Phương pháp này sử dụng có thể khắc phục hạn chế của khoảng tính trong phương

TO

pháp chuẩn hóa diện tích. Mẫu được chuẩn bị ở cả nồng độ cao và nồng độ thấp. Mục

ÀN

đích tiêm mẫu nồng độ cao nhằm phát hiện tất cả các tạp thông qua những pic nhỏ này

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

•

ẠO

tích có thể không còn thích hợp.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

không tuyến tính trong phạm vi nồng độ rộng như vậy, và việc sử dụng tỷ lệ diện

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

thể không hoàn toàn đối xứng ở nồng độ cao như vậy. Do đó, đáp ứng có thể

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

95%). Tuy nhiên, trong một số trường hợp, hình dạng pic sắc ký của hoạt chất có

D

IỄ N

Đ

có thể phát hiện được, từ đó tăng độ nhạy của phương pháp. Tiêm mẫu ở nồng độ thấp được sử dụng để đảm bảo tuyến tính trong đáp ứng của hoạt chất. Mặt khác, đáp ứng của hoạt chất trong mẫu nồng độ thấp tương tự như tạp liên quan có trong mẫu nồng độ cao. Do đó chỉ cần một khoảng tuyến tính hẹp để định lượng. Hạn chế của phương pháp là tổng thời gian phân tích tăng lên gấp đôi và có thể mắc sai số do pha loãng.  Phương pháp 3: Sử dụng chất chuẩn tạp 22

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

So với phương pháp chuẩn hóa diện tích, phương pháp chất chuẩn tạp có một số ưu điểm như sau: •

Giảm khoảng tuyến tính: Phương pháp chuẩn ngoại sử dụng một đường chuẩn.

Do đó, phương pháp này chỉ yêu cầu dải tuyến tính nhỏ.

N

Cải thiện độ nhạy của phương pháp: Trong cách tiếp cận này, chỉ tính riêng các

Ơ

•

N

H

đáp ứng của các chất liên quan riêng lẻ. Vì diện tích pic hoạt chất trong mẫu tiêm

.Q

Chất chuẩn tạp: Cần thiết phải có một chất chuẩn tạp tốt. Ngoài ra, mỗi phép

G

•

Đ

Tuy nhiên, phương pháp này vẫn còn một số hạn chế nhất định:

H Ư

N

phân tích đòi hỏi phải cân chính xác một lượng nhỏ chuẩn tạp. Vì vậy, sai số khi cân có thể ảnh hưởng đến độ chính xác của phương pháp và độ đúng.

TR ẦN

Một điểm lưu ý quan trọng khi thu thập dữ liệu là phải có một “ngưỡng”- đó là một giá trị mà khi diện tích pic dưới giá trị này sẽ bị bỏ qua. “Ngưỡng” thường bằng

10 00

B

0,1% hoặc 0,05% chất đang phân tích [19], [65].

Trong đa số các chuyên luận nguyên liệu hóa dược của Dược điển Việt Nam V,

A

tạp chất liên quan được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng (Phụ luc 5.3): Cefdinir,

H

Ó

Cefixim, Cefpodoxim proxetil, Ceftriaxon natri, Cefuroxim axetil, Cefuroxim natri,…

-L

Í-

a.2. Kỹ thuật sắc kí lỏng khối phổ (LC/MS) Kết hợp kỹ thuật sắc ký lỏng – khối phổ: vừa khai thác được hiệu lực phân tách

ÁN

mạnh của kỹ thuật sắc ký vừa khai thác được độ nhạy cao của khối phổ trong việc xác

TO

định hợp chất tách ra. Ngoài ra, khi kết hợp hai kỹ thuật thì có thể phân biệt được các

ÀN

đồng phân lập thể và đồng phân vị trí của chất [22]. Bất lợi của phương pháp tiếp cận

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

bằng cách tăng nồng độ mẫu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

đặc biệt hữu ích khi các nhà khoa học muốn cải thiện độ nhạy của phương pháp

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

cần lo lắng về đáp ứng ngoài khoảng tuyến tính của hoạt chất. Cách tiếp cận này

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

không cần thiết cho việc tính toán nên có thể sử dụng nồng độ mẫu cao mà không

D

IỄ N

Đ

này là không chỉ các hợp chất quan tâm mà cả sự nhiễm từ những dung môi được sử dụng cho HPLC cũng sẽ được tích lũy. Các hợp chất từ dung môi thậm chí có thể ngăn chặn các hợp chất được phân tích, đặc biệt là trong ion hóa FAB nếu chúng dễ ion hóa hơn. Sự ngăn chặn này được khắc phục bằng cách sử dụng dòng chảy liên tục FAB hoặc ESI và ion hóa APCI riêng.

Kỹ thuật phối hợp HPLC/MS có độ nhạy cao đến mức pictogram hoặc nanogram.

23

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Hiện nay xu hướng kết hợp mới đòi hỏi sự ứng dụng tự động hóa cao các phương pháp khác như GC/MS, LC/MS, CE/MS, CEC/MS,… cũng được khai thác cả về định tính và mô tả đặc tính định tính của hỗn hợp phức tạp [65].

N

a.3. Kỹ thuật điện di mao quản (CE)

Ơ

Điện di mao quản (CE) là một kỹ thuật tách các chất trong mao quản silica dài

N

H

25-100 cm, đường kính trong 25-100 µm, đường kính ngoài 300-400 µm. Điện thế một

ẠO

Việc đo vận tốc điện di động chỉ có ý nghĩa khi điều kiện thí nghiệm được xác

Đ

định chính xác. Sự di chuyển của ion trong điện trường phụ thuộc vào bản chất của chất

N

G

phân tích, tính chất, kích cỡ, hình dạng và điện tích. Nó cũng phụ thuộc vào thành phần

H Ư

của chất dẫn điện, tính chất, nồng độ, độ pH, sự có mặt của dung môi bổ sung và độ

TR ẦN

nhớt. Hướng di chuyển của ion phụ thuốc vào dấu điện tích của hạt khi nó di chuyển về phía điện của dấu đối diện. Sự di chuyển điện di được đo trực tiếp hoặc so sánh với chất tham chiếu.

–

10 00

B

Phân loại các kiểu điện di mao quản (Theo Dược điển Việt Nam V-PL158): Điện di mao quản vùng (CZE): Quá trình tách được kiểm soát bằng sự khác nhau

A

về linh độ tương đối của từng thành phần trong mẫu thử hoặc dung dịch thử. Linh

Í-

phương pháp.

H

Ó

độ là hàm số của điện tích chất phân tích và kích thước trong điều kiện nhất định của Sắc ký mixen điện động (MEKC): Các chất hoạt động bề mặt được thêm vào dung

-L

–

ÁN

dịch đệm làm việc ở nồng độ lớn hơn nồng độ mixen tới hạn. Các chất phân tích có

TO

thể phân bố trong pha tĩnh giả do mixen tạo thành. Kỹ thuật này thường được ứng

ÀN

dụng để tách các chất trung tính và các ion.

IỄ N

Đ

–

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

một đầu mao quản nhờ một detector thích hợp [3].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

500 V/cm) tạo ra quá trình chia tách: các chất phân tích được phát hiện khi di chuyển về

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

chiều áp vào hai đầu mao quản 10-30 KV (cường độ điện trường tạo ra có thể lên đến

Điện di mao quản gel (CGE): Tương tự như lọc gel, sử dụng các mao quản chứa gel để tách các phân tử, dựa trên cơ sở sự khác nhau tương đối về khối lượng phân tử

D

hay kích thước phân tử.

–

Điện di mao quản hội tụ đẳng điện (CIEF): Các chất được tách trên cơ sở sự khác nhau tương đối về điểm đẳng điện.

24

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn –

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Điện di mao quản đẳng tốc (CITP): Sử dụng hai đệm bao quanh các vùng chất phân tích. Cả anion và cation có thể tách thành những vùng rõ rệt. Ngoài ra, nồng độ chất phân tích như nhau trong mỗi vùng. Như vậy, chiều dài của mỗi vùng sẽ tỉ lệ thuận với lượng chất phân tích.

N

Hai kỹ thuật điện di mao quản thường được sử dụng nhiều nhất là điện di mao

H

Ơ

quản vùng và sắc ký mixen điện động.

.Q

liên quan đến pha đảo (RP) với hiệu quả cao và tính điện di của CE [65]. Trong CEC,

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

điện thẩm (EOF). Do không dùng áp suất đẩy pha động qua cột nên không có hiện tượng

H Ư

N

sụt áp liên quan đến kích thước hạt. Có thể nói CEC là một kỹ thuật sắc ký trong đó pha động đi qua cột nhờ EOF nên tạo cho kỹ thuật này tách rất hiệu quả, khắc phục giới hạn

TR ẦN

dung lượng pic của HPLC.  Ứng dụng:

Phân tích dược: dùng phân tích dược chất thuộc nhiều nhóm khác nhau.

•

Phân tích các phân tử sinh học, các đồng phân quang học. Thường kết nối CEC

10 00

B

•

với MS và quang phổ [3].

A

Ví dụ: CEC với phát hiện huỳnh quang bằng laze đã được nghiên cứu để phân

Ó

•

Í-

H

tích tạp chất có tính acid và trung tính trong heroin [54].

-L

Sau khi tách các thành phần, vị trí của các chất không màu có thể được xác định

ÁN

bằng cách xử lý bằng một phản ứng tạo dẫn chất có màu hoặc huỳnh quang. Đối với

TO

mục đích định lượng tại chỗ có thể được tách cẩn thận, tách rửa với một dung môi thích hợp và sau đó được xác định bằng một phương pháp đủ độ nhạy chẳng hạn như phương

D

IỄ N

Đ

pháp đo quang phổ trực tiếp hoặc sau phản ứng hóa học [65].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Nhưng nhờ có thế áp vào mao quản nên pha động di chuyển qua mao quản nhờ dòng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

mao quản được nhồi một pha tĩnh thật, thường là silica C18 như trong sắc ký lỏng.

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

nhằm khai thác những ưu điểm kết hợp của độ chọn lọc sắc ký (pha tĩnh và pha động)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Điện sắc ký mao quản (CEC): CEC là một kỹ thuật tách lai tạo của CE và HPLC

Ba cơ chế tách chính được sử dụng là pH thấp (trong phân tích các thuốc cơ bản),

độ pH cao (trong phân tích các thuốc có tính acid) và điện di mao quản micellar. Các chất phụ thêm vào khác nhau như methanol hoặc ACN, có thể được thêm vào hệ đệm chính để cải thiện tính chọn lọc bằng cách thay đổi độ nhớt và độ phân cực của đệm.

Kết quả là dòng chảy điện động và sự di động điện di của chất phân tích có thể bị ảnh hưởng. Bổ sung cyclodextrins (CDs) có thể cải thiện độ phân giải [11], [57].

25

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Nguyên tắc định lượng tạp chất tương tự như phương pháp chuẩn hóa diện tích trong HPLC [65]. Ưu điểm: Thời gian phân tích giảm, độ bền được cải thiện, giảm các yêu cầu xử lý mẫu trước và tiết kiệm dung môi hơn so với phương pháp HPLC [11].

Ơ

N

b. Xác định tạp phân hủy hữu cơ

N

H

Định nghĩa: Sản phẩm phân hủy của nguyên liệu thiết lập chất chuẩn được coi

.Q

Đ

Trên cơ sở định nghĩa này, một sự chồng chéo đáng kể có thể được quan sát giữa

N

G

tạp chất liên quan và sản phẩm phân hủy: các tạp chất liên quan của loại sản phẩm phân

H Ư

hủy thường được hình thành trong quá trình tổng hợp và phân lập nguyên liệu thiết lập

TR ẦN

chất chuẩn với số lượng lớn [65].

“Phân hủy bắt buộc” là một quá trình liên quan đến sự phân hủy của các các

B

nguyên liệu thiết lập chất chuẩn ở điều kiện cấp tốc và do đó tạo ra các sản phẩm phân

10 00

hủy có thể được nghiên cứu xác định sự ổn định của phân tử nguyên liệu thiết lập chất

A

chuẩn [13], [17].

H

Ó

Kết hợp các kỹ thuật sắc ký và quang phổ đã được chứng minh là công cụ có giá

Í-

trị cho “phân hủy bắt buộc” và ước lượng cho mô tả tạp chất trong nguyên liệu thiết lập

ÁN

-L

chất chuẩn [72].

TO

3.2.1.2. Các kỹ thuật định lượng tạp vô cơ

ÀN

Lý do thiết lập giới hạn tạp chất vô cơ một mặt vì độc tính của một số tạp vô cơ

Đ

(thủy ngân, arsen, hydrazin…). Mặt khác, mức độ của các tạp chất vô cơ trong nguyên

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

[50].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

nhân oxy hóa, các chất phản ứng hóa học khác, độ ẩm, ánh sáng, bao bì,…[38] [17],

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

chế, bảo quản bởi ảnh hưởng của nhiệt, dung môi (bao gồm cả pH cao và pH thấp), tác

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

như là sản phẩm biến đổi hóa học được tạo thành trong quá trình sản xuất, phân lập, tinh

D

IỄ N

liệu thiết lập chất chuẩn cũng là một chỉ số đánh giá cho phương pháp sản xuất/ tinh chế [65]. a. Xác định tro toàn phần Theo Dược điển Việt Nam V- PL 9.8:

26

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Tiến hành: Lấy một chén sứ hoặc chén platin nung tới đỏ trong 30 phút. Để nguội trong bình hút ẩm rồi cân. Nếu trong chuyên luận riêng không có hướng dẫn gì khác thì lấy 1 g mẫu thử rải đều vào chén nung, sấy 1h ở 100℃ đến 105℃ rồi đem nung trong lò nung ở 600℃ ± 25℃. Sau mỗi lần nung, lấy chén nung cùng cắn tro đem làm nguội trong

N

bình hút ẩm rồi cân. Trong quá trình thao tác không được để tạo thành ngọn lửa. Nếu

H

Ơ

sau khi đã nung lâu mà vẫn chưa loại hết carbon của tro thì dùng nước nóng để lấy cắn

Đ

 Nguyên tắc: Phương pháp sử dụng một quy trình để đo lượng chất còn lại không bay

N

G

hơi từ mẫu khi mẫu được nung trong sự có mặt của acid sulfuric theo mô tả biện

H Ư

pháp sau đây [5], [80].

TR ẦN

 Biện pháp: Bao gồm 2 phương pháp như sau

Phương pháp 1: (Theo Dược điển Việt Nam-PL 9.9, IP-2.3 Sulfated ash)

B

Nung một chén sứ hoặc một chén platin tới đỏ trong 10 phút, để nguội trong bình

10 00

hút ẩm rồi cân. Nếu không có chỉ dẫn gì đặc biệt gì trong chuyên luận riêng thì cho 1 g mẫu thử vào chén nung, làm ẩm với acid sulfuric (TT), đốt cẩn thận rồi làm ẩm với acid

Ó

A

sulfuric (TT) và nung ở 800℃. Làm nguội rồi cân. Nung lại 15 phút, làm nguội rồi cân

Í-

H

nhắc lại. Lặp lại quá trình này cho đến khi 2 lần cân liên tiếp, khối lượng không chênh

-L

nhau quá 0,5 mg [5],[65], [85].

ÁN

Phương pháp 2: (Theo Dược điển Việt Nam V-PL 9.9, USP 40 <281> residue

ÀN

TO

on ignition, IP-2.3 Sulfated ash, Ph.Eur-5.6, JP-2.44) Phương pháp cắn sau nung/tro sulfat sử dụng một quy trình để đo lượng chất còn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

b. Phương pháp xác định tro sulfat

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

không đổi [5].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

dịch lọc vào tro ở trong chén, làm bốc hơi cẩn thận tới khô rồi nung đến khối lượng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

ra, lọc qua giấy lọc không tro rồi lại nung cắn và giấy lọc trong chén nung. Tập trung

D

IỄ N

Đ

lại không bay hơi từ mẫu khi mẫu được nung trong sự có mặt của acid sulfuric theo mô tả dưới đây. Phương pháp này thường được sử dụng để xác định hàm lượng các tạp chất vô cơ trong một chất hữu cơ [80].

Nung một chén nung sứ hoặc platin ở 600℃ ± 50℃ trong 30 phút, để nguội trong bình hút ẩm rồi cân. Cho vào chén nung một lượng mẫu thử như chỉ dẫn trong chuyên luận và cân. Làm ẩm mẫu bằng một lượng nhỏ acid sulfuric (TT) (khoảng 1ml), đốt 27

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

nóng ở mức độ nhẹ nhất có thể đến khi mẫu hóa tro hoàn toàn. Để nguội, làm ẩm cắn bằng một lượng nhỏ acid sulfuric (TT), đốt nóng nhẹ đến khi bay hơi hết khói trắng và nung ở 600℃ ±50℃ đến khi cắn thành tro hoàn toàn. Trong khi đốt và nung không được để tạo thành ngọn lửa. Để nguội trong bình hút ẩm, cân và tính khối lượng của cắn. Nếu

N

khối lượng cắn vượt ngoài giới hạn cho phép thì lại làm ẩm cắn bằng acid sulfuric (TT)

H

Ơ

và nung như trên đến khối lượng không đổi nếu không có chỉ dẫn gì khác. Lượng mẫu

Đ

trong 2 phương pháp.

N

G

Ứng dụng: Phương pháp xác định tro sulfat đã được ứng dụng để xác định các tạp

H Ư

chất vô cơ trong các nguyên liệu hóa dược trong Dược điển Việt Nam V. Ví dụ như

TR ẦN

Amlodipin besilat (không quá 0,2%; dùng 1,000 g chế phẩm; phương pháp 2), Amodiaquin hydroclorid (không quá 0,2%; dùng 1,0 g chế phẩm; phương pháp 2),

10 00

B

Amoxicilin natri (không quá 3,0%; dùng 4,000 g chế phẩm),… c. Kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS)

A

Nguyên tắc: Kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử là kỹ thuật xác định nồng độ

H

Ó

các nguyên tố trong một chất bằng cách đo độ hấp thụ bức xạ bởi hơi nguyên tử tự do

Í-

của nguyên tố đó được hóa hơi từ chất thử. Phương pháp được tiến hành ở bước sóng

ÁN

-L

của một trong những vạch hấp thụ của nguyên tử cần xác định [3], [5].

Khi nguyên tử ở trạng thái hơi có thể hấp thụ các bức xạ có bước sóng xác định.

TO

Phổ hấp thụ các nguyên tử là phổ vạch. Vì vậy muốn thực hiện được phép đo quang phổ

-

D

IỄ N

Đ

ÀN

hấp thụ nguyên tử cần phải có các quá trình sau:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

Nếu không có hướng dẫn khác trong chuyên luận riêng thì có thể áp dụng một

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

[61], [69], [78], [85].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

lượng tro sulfat (khoảng 1 mg) có thể cân được để đảm bảo độ chính xác [5], [80],[26],

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

thử thường dùng (từ 1 g - 2 g) được tính từ giới hạn tro sulfat đã quy định sao cho khối

Chọn các điều kiện và trang thiết bị phù hợp để chuyển mẫu phân tích từ trạng thái ban đầu thành trạng thái hơi của nguyên tử tự do.

-

Chiếu chùm tia sáng thích hợp (với nguyên tố cần phân tích và còn được gọi là bức xạ cộng hưởng) qua đám hơi nguyên tử vừa tạo ra ở trên. Các nguyên tử của nguyên tố cần phân tích trong đám hơi sẽ hấp thụ một phần bức xạ và tạo ra phổ

28

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

hấp thụ nguyên tử. Phần bức xạ bị hấp thụ phụ thuộc vào nồng độ của nguyên tử đó trong môi trường hấp thụ.

-

Nhờ các bộ phận của máy quang phổ mà người ta thu, phân ly và chọn vạch phổ của nguyên tố cần nghiên cứu và đo cường độ của nó [3].

Ơ

N

Trong AAS người ta có thể tiến hành nguyên tử hóa mẫu theo 2 cách: kỹ thuật

luận riêng sao cho nồng độ của nguyên tố cần xác định nằm trong khoảng nồng độ của

G

Đ

các dung dịch chuẩn. Chuẩn bị không ít hơn ba dung dịch chuẩn của nguyên tố cần xác

H Ư

N

định có nồng độ nằm trong khoảng tuyến tính giữa nồng độ và độ hấp thụ của nguyên tố cần phân tích. Bất kỳ thuốc thử nào được dùng trong việc chuẩn bị các dung dịch thử

TR ẦN

đều phải được thêm vào các dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu trắng ở cùng nồng độ. Đưa dung dịch mẫu trắng vào máy, điều chỉnh tín hiệu đọc được về "0". Đưa lần lượt

B

dung dịch thử và từng dung dịch chuẩn vào máy, ít nhất mỗi dung dịch làm 3 lần, ghi

10 00

lại kết quả đọc ổn định. Rửa máy bằng dung dịch mẫu trắng sau mỗi lần đo cho đến khi

A

tín hiệu trở về giá trị đọc ban đầu của mẫu trắng. Nếu sử dụng kỹ thuật nguyên tử hóa

Ó

không ngọn lửa, lò graphit phải được đốt lại giữa các lần phân tích. Từ cường độ vạch

Í-

H

hấp thụ đọc được của các dung dịch chuẩn, thiết lập đường chuẩn biểu thị sự thay đổi

-L

cường độ vạch hấp thụ theo nồng độ nguyên tố cần xác định và từ đường chuẩn này xác

ÁN

định nồng độ nguyên tố trong dung dịch thử [5].

TO

Ứng dụng: Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử có thể định lượng được

ÀN

hầu hết các nguyên tố kim loại và một số á kim nếu như có nguồn bức xạ cộng hưởng

D

IỄ N

Đ

[3].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Chuẩn bị dung dịch chất để thử (dung dịch thử) như được mô tả trong chuyên

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Sử dụng phương pháp xác định trực tiếp trừ khi có chỉ dẫn khác.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

nguyên tử hóa mẫu khác nhau [3], [80].

U Y

N

H

ngọn lửa (FAAS) và không ngọn lửa. Tương ứng với 2 kỹ thuật đó có các dụng cụ

Nhược điểm: Mỗi lần đo chỉ xác định được một kim loại; không xác định được

các anion [65]. d. Kỹ thuật phổ plasma cảm ứng kết nối khối phổ (ICP-MS) Nguyên tắc của ICP: Plasma là một luồng khí ion hóa mang năng lượng cao, trong đó có chứa các cation và electron. Các khí trơ như argon thường được dùng để tạo 29

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

plasma. Có thể coi plasma như một ngọn lửa có nhiệt độ khoảng 1000-6000 0K. Khi đưa mẫu vào plasma sẽ xảy ra các quá trình nguyên tử hóa, ion hóa và kích thích như khi đưa vào ngọn lửa. Nguyên tử chất phân tích bị kích thích sẽ phát ra bức xạ và tạo nên phổ phát xạ plasma [3].

Ơ

N

Theo Dược điển Việt Nam V- PL 4.6: ICP-MS là một phương pháp phổ khối với

U Y

ICP-MS là một công cụ tốt có thể được sử dụng để sàng lọc nhanh các tạp chất

hiện bất kì phân tích nào thông qua ICP-MS. Mẫu được đưa vào ngọn lửa plasma dưới

G

Đ

dạng sol khí bằng cách hút mẫu lỏng hoặc rắn hòa tan vào ống phun. Thường ưu tiên sử

TR ẦN

môi này là tối thiểu so với các dung môi khác.

H Ư

N

dụng dung dịch nước hoặc dung dịch acid nitric loãng, bởi vì sự ảnh hưởng của các dung

Quy trình: Làm theo quy trình như được chỉ dẫn trong chuyên khảo riêng cho chế độ phát hiện và thông số thiết bị. Dữ liệu được thu thập từ các lần đọc kết quả tuần tự

10 00

B

lặp lại theo mỗi lần đưa mẫu và được tính trung bình. Nồng độ mẫu được tính toán so với đường cong làm việc được tạo ra bằng cách vẽ sơ đồ đáp ứng detector so với nồng

Ó

A

độ chất phân tích trong các dung dịch chuẩn [80].

H

Ưu điểm: Kỹ thuật có thể xác định được tổng các ion kim loại trong một lần đoo.

-L

Í-

Giới hạn phát hiện của nguyên tố rất thấp, vùng tuyến tính rộng hơn, độ ổn định và lặp

ÁN

lại tốt, độ chọn lọc cao hơn, khả năng phân tích đồng vị, khả năng phân tích nhanh và ít

TO

nhiễu [3], [55], [56], [65].

ÀN

Nhược điểm: Không phân tích được các anion như Cl-, SO42-,…

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Chuẩn bị mẫu: chuẩn bị mẫu là rất quan trọng và là bước đầu tiên trong việc thực

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

vô cơ của mẫu trước khi định lượng [65].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

nguồn ion hóa là plasma kết hợp cảm ứng [5].

Đ

3.2.1.3. Xác định tạp chất bay hơi

D

IỄ N

Tạp chất bay hơi bao gồm gồm nước và dung môi tồn dư.

Phân loại dung môi tồn dư theo mức độ nguy hiểm •

Nhóm 1: Các dung môi tránh sử dụng

30

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Các chất gây ung thư cho người hay có khả năng gây ung thư cho người rõ rệt. Các chất gây nhiễm độc môi trường.

•

Nhóm 2: Các dung môi phải hạn chế sử dụng

N

Các chất gây ung thư trên động vật, không độc cho gen hoặc các tác nhân

H

Ơ

có thể gây độc không hồi phục như độc tính trên thần kinh hoặc gây quái thai.

H Ư

N

G

a. Kỹ thuật xác định mất khối lượng do làm khô (Loss on drying)

TR ẦN

Theo Dược điển Việt Nam V- Phụ lục 9.6, USP <731> Loss on drying: Định nghĩa: Mất khối lượng do làm khô là sự giảm khối lượng của mẫu thử biểu thị bằng phần trăm (khối lượng/khối lượng) khi được làm khô trong điều kiện xác định

10 00

B

ở mỗi chuyên luận. Phương pháp này được dùng để xác định hàm lượng nước, một phần hoặc toàn bộ lượng nước kết tinh và lượng chất dễ bay hơi khác trong mẫu thử như tồn

Ó

A

dư dung môi [5].

H

Yêu cầu: Việc xác định mất khối lượng do làm khô không được làm thay đổi tính

-L

Í-

chất lý hóa cơ bản của mẫu thử, vì vậy mỗi chuyên luận sẽ có quy định cách làm khô

•

ÁN

theo một trong các phương pháp sau:

•

Trong chân không (điều kiện áp suất 1,5 kPa - 2,5 kPa có mặt chất hút ẩm

•

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Trong bình hút ẩm (với những chất hút ẩm như phosphor pentoxyd, silica gel…); phosphor pentoxyd và ở nhiệt độ phòng;

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ngày (PDE) ≥ 50mg/ngày [5], [28], [36], [65], [80].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ẠO

hại cho sức khoẻ. Các dung môi nhóm này có liều phơi nhiễm được phép mỗi

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y .Q

Nhóm 3: Các dung môi độc tính thấp

Các dung môi có độc tính thấp trên người: không cần xác định liều gây tác

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

•

N

Các dung môi nghi có độc tính quan trọng, nhưng hồi phục được.

Trong chân không ở điều kiện nhiệt độ xác định (điều kiện áp suất 1,5 kPa-2,5

D

kPa có mặt chất hút ẩm phosphor pentoxyd và ở điều kiện nhiệt độ quy định trong chuyên luận riêng); •

Trong tủ sấy ở điều kiện nhiệt độ xác định (trong tủ sấy ở điều kiện nhiệt độ quy định trong chuyên luận riêng); 31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn •

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Trong chân không hoàn toàn (điều kiện áp suất không quá 0,1 kPa có mặt chất hút ẩm phosphor pentoxyd và ở điều kiện nhiệt độ quy định trong chuyên luận riêng) [5].

Ơ

có nắp mài làm bì đựng mẫu thử; làm khô bì trong thời gian 30 phút theo phương pháp

N

Cách tiến hành: Dùng dụng cụ dùng để sấy bằng thủy tinh rộng miệng đáy bằng

N

H

và điều kiện quy định trong chuyên luận rồi cân để xác định khối lượng bì. Cân ngay

.Q

Đ

làm khô trong điều kiện quy định của chuyên luận. Nếu dùng phương pháp sấy thì nhiệt

G

độ thực cho phép chênh lệch ± 2℃ so với nhiệt độ quy định. Sau khi sấy phải làm nguội

H Ư

N

tới nhiệt độ phòng cân trong bình hút ẩm có silica gel rồi cân ngay. Nếu chuyên luận không quy định thời gian làm khô có nghĩa là phải làm khô đến khối lượng không đổi,

TR ẦN

tức là sự chênh lệch khối lượng sau khi sấy thêm 1 giờ trong tủ sấy hoặc 6 giờ trong bình hút ẩm so với lần sấy trước đó không quá 0,5 mg. Nếu mẫu thử bị chảy ở nhiệt độ

10 00

B

thấp hơn nhiệt độ sấy quy định thì trước khi đưa lên nhiệt độ đó, cần duy trì từ 1-2 giờ ở nhiệt độ thấp hơn nhiệt độ nóng chảy của mẫu thử từ 5℃ đến 10℃ [5], [14], [34], [80],

Ó

A

[85].

H

Với kỹ thuật này, lượng mẫu cần dùng lớn, tốn kém nguyên liệu thiết lập chất

-L

Í-

chuẩn gốc.

ÁN

Kỹ thuật mất khối lượng do làm khô được ứng dụng trong các chuyên luận

TO

nguyên liệu hóa dược của Dược điển Việt Nam V để xác định hàm lượng nước và dung

ÀN

môi tồn dư. Thường mất khối lượng do làm khô không quá 0,5%. Nếu đã sử dụng kỹ

Đ

thuật này thì sẽ không cần sử dụng các kỹ thuật xác định hàm lượng nước khác. Ví dụ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

kích thước lớn thì phải nghiền nhanh tới kích thước dưới 2 mm trước khi cân. Tiến hành

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

lượng mẫu thử được dàn mỏng thành lớp có độ dày không quá 5 mm. Nếu mẫu thử có

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

luận với sai số ± 10% (thường là 1-2 g, theo USP). Nếu không có chỉ dẫn gì đặc biệt thì

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

vào bì này một khối lượng chính xác mẫu thử bằng khối lượng quy định trong chuyên

D

IỄ N

như Felodipin- mất khối lượng do làm khô không được quá 0,5% (1,000 g; 105℃, 3 giờ), Fluconazol- không được quá 0,5% (1,000 g; 105℃), Glibenclamid- không quá 1,0% (1,000 g; 100℃ đến 105℃), Gliclazid – không quá 0,25% (1,000 g; 100℃ đến 105℃), Acid acetylsalicylic- không quá 0,5% (1,000 g; trong chân không)…

32

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

b. Kỹ thuật phân tích nhiệt trọng lượng (TGA) Nguyên tắc: Tương tự phương pháp mất khối lượng do làm khô. Trong TGA chất phân tích được kiểm soát bởi một chương trình nhiệt độ và khối lượng của nó được xác

N

định liên tục như một hàm số của nhiệt độ/thời gian [14], [64], [80]. Hai thông số thực

Ơ

nghiệm được xác định đồng thời là mất khối lượng và khối lượng còn lại. Tổng “mất

.Q

trong mạng tinh thể chỉ có thể giải phóng khi nóng chảy hoặc tại nhiệt độ phân hủy tinh

G

Đ

thể hoặc nhiệt độ rất cao. Trường hợp xảy ra sự chồng chéo các quá trình thì việc định

H Ư

N

lượng các thành phần riêng có thể mắc nhiều sai số. Khắc phục bằng cách lựa chọn các điều kiện tối ưu: giảm tốc độ gia nhiệt và lượng mẫu, hoặc dùng một khí dẫn nhiệt tốt

TR ẦN

(ví dụ khí Heli) độ phân giải tăng lên [65].

Cũng như các kỹ thuật xác định độ tinh khiết khác, thông tin thu được từ TGA

10 00

B

nên được so sánh với thông tin từ những kỹ thuật khác như GC [66].

A

Ưu điểm: Lượng mẫu cần dùng nhỏ (Lượng mẫu thường sử dụng trong USP là

H

Ó

10-20 mg) [80]=> Phù hợp trong thiết lập chất chuẩn gốc.

-L

Í-

Nhược điểm: Có thể xảy ra sự không đồng nhất mẫu, lượng mẫu nhỏ có thể không

ÁN

mang tính đại diện cho chất phân tích. Khối lượng mẫu nhỏ thì lượng dung môi tồn dư chứa trong đó chỉ rơi vào khoảng một vài microgram và có thể gây sai số tương đối lớn

TO

khi độ nhạy giới hạn của thiết bị (0,1-1,0 μg). Nếu lò nóng lên, mật độ khí của môi

ÀN

trường trong lò sẽ giảm, khi đó giảm sự gia tăng khối lượng do môi trường tác động.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

lượng giảm đi là của nước hay của dung môi khác. Ngoài ra, phần dung môi nằm sâu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

khác ở dạng tự do hoặc liên kết [65], [80]. Tuy nhiên, không cho biết cụ thể phần khối

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Phương pháp cho phép xác định tổng hàm lượng của nước và/hoặc các dung môi

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

khối lượng” và “khối lượng còn lại” cộng lại bằng 100% [64].

D

IỄ N

Đ

Thay đổi thể tích mẫu trong quá trình gia nhiệt cũng làm thay đổi trọng lượng ảo. Ảnh hưởng của khí trơ cũng không thể bỏ qua [65]. c. Định lượng nước bằng thuốc thử Karl-Fischer Theo Dược điển Việt Nam V- Phụ lục 10.3, IP- 2.8 Determination of water by the Karl Fischer method: 33

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Nguyên tắc: Phương pháp định lượng nước này dựa trên phản ứng toàn lượng của nước với lưu huỳnh dioxyd và iod trong dung môi khan chứa một chất base hữu cơ thích hợp. Dung môi hữu cơ thông dụng là methanol khan nước, cũng có khi được thay bằng dung môi hưu cơ khác thích hợp để hòa tan chế phẩm. Chất base hữu cơ là pyridin,

Ơ

N

nhưng hiện nay người ta đã dùng những chất base hữu cơ khác để thay thế như imidazol,

N

H

2-methyl-aminopyridin [5], [14], [21], [26], [34], [80], [85].

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

nắp hoặc miệng bên cạnh có nút mài. Trong quá trình chuẩn độ, khuấy bằng máy khuấy

N

G

từ hoặc bằng luồng khí nitrogen khô đi qua dung dịch. Điểm kết thúc phản ứng được

H Ư

xác định bằng điện kế gắn trong mạch có biến trở 2000 Ω, nối với một nguồn pin 1,5

TR ẦN

vôn. Lúc bắt đầu kim điện kế chỉ điểm không, vì dòng điện chạy qua 2 điện cực platin không đáng kể. Khi nhỏ thuốc thử Karl Fischer vào dung dịch, do hiện tượng khử cực nên kim điện kế lệch đi nhưng lập tức trở về vị trí ban đầu, chỉ khi đến điểm dừng thì

10 00

B

một giọt thuốc thử thừa sẽ làm kim lệch đi và duy trì ít nhất 30 giây.

Chuẩn bị mẫu thử: Nếu không có chỉ dẫn gì khác trong chuyên luận riêng, cân

Ó

-

A

Tiến hành định lượng:

Í-

H

hoặc lấy chính xác một lượng chế phẩm ước lượng chứa khoảng 10 mg đến 50

-L

mg nước đem định lượng. Thao tác phải nhanh và thực hiện trong phòng có độ Phương pháp định lượng trực tiếp:

TO



ÁN

ẩm thấp để tránh ẩm ở ngoài ảnh hưởng đến chất phân tích.

Nếu không có chỉ dẫn gì khác trong chuyên luận riêng, cho khoảng 20 ml methanol

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

lỗ cắm ống thông hơi chứa chất hút ẩm. Chế phẩm cho vào bình chuẩn độ qua lỗ trên

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

60 ml, có nắp gắn điện cực kép platin, một ống dẫn khí nitrogen, có lỗ cắm với buret và

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

cho thao tác thuận tiện và tránh ẩm. Dụng cụ gồm có một cốc chuẩn độ dung tích khoảng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Thiết bị: Hiện nay có nhiều loại dụng cụ, nhưng nguyên tắc đều phải cấu tạo sao

D

IỄ N

Đ

khan (TT) hoặc dung môi thích hợp dùng cho thuốc thử Karl Fischer vào cốc chuẩn độ, chuẩn độ bằng thuốc thử Karl Fischer đến điểm dừng. Cho nhanh một lượng chế phẩm đã chỉ dẫn trong chuyên luận riêng vào cốc chuẩn độ, đóng nút ngay, khuấy đều để phản ứng tác dụng trong khoảng 1 phút rồi tiếp tục chuẩn độ bằng thuốc thử Karl Fischer đến điểm dừng. Tính hàm lượng nước X (tính bằng mg) của chế phẩm theo công thức: X=N×F 34

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Trong đó: •

N là thể tích thuốc thử Karl Fischer đã dùng cho lần chuẩn độ sau khi cho chế phẩm (tính bằng ml);

•

N

Phương pháp định lượng gián tiếp:

H

Ơ



F là hệ số đương lượng nước của thuốc thử Karl Fischer (tính bằng mg/ml).

U Y

hoặc dung môi thích hợp thành 1000 ml. Lấy chính xác 25,0 ml dung dịch này cho vào

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

V là thể tích thuốc thử Karl Fischer đã dùng (ml);

•

F là hệ số đương lượng nước của thuốc thử Karl Fischer (tính bằng mg/ml).

TR ẦN

H Ư

•

Tiến hành: Nếu không có chỉ dẫn gì khác trong chuyên luận riêng, cho một

B

methanol khan (TT), hoặc dung môi được chỉ dẫn trong chuyên luận riêng vào cốc định

10 00

lượng vừa đủ ngập điện cực, chuẩn độ bằng thuốc thử Karl Fischer đến điểm dừng. Cho

A

nhanh một lượng chế phẩm đã chỉ dẫn trong chuyên luận riêng vào cốc, đóng nút ngay,

Ó

thêm tiếp một lượng chính xác thuốc thử Karl Fischer vào cốc sao cho thừa khoảng 1

Í-

H

ml, hoặc theo một thể tích đã chỉ dẫn trong chuyên luận riêng. Đóng nút để yên 1 phút,

-L

tránh ánh sáng, thỉnh thoảng khuấy. Chuẩn độ phần thuốc thử Karl Fischer thừa bằng

ÁN

dung dịch nước chuẩn vừa mới pha ở trên. Tính hàm lượng nước A (tính bằng mg) có

TO

trong chế phẩm theo công thức:

Đ

A = F × V1 - W × V2

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

Trong đó:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ

W = V × F/25

IỄ N D

ẠO

TP

Tính hàm lượng nước W (tính bằng mg/ml) của dung dịch nước chuẩn theo công thức:

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

cốc định lượng và chuẩn độ bằng thuốc thử Karl Fischer vừa mới xác định độ chuẩn.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Dung dịch nước chuẩn: Pha loãng 2 ml nước tinh khiết với methanol khan (TT)

Trong đó:

•

F là đương lượng nước của thuốc thử Karl Fischer (tính bằng mg/ml);

•

V1 là thể tích thuốc thử Karl Fischer đã thêm vào (ml);

•

V2 là thể tích dung dịch nước chuẩn đã dùng (ml);

•

W là hàm lượng nước của dung dịch nước chuẩn ở trên (tính bằng mg/ml) [5].

35

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Định lượng nước bằng Kark Fischer đã được ứng dụng trong các chuyên luận nguyên liệu hóa dược của trong Dược điển Việt Nam V để xác định lượng nước trong các chế phẩm.Ví dụ như Acid folic (từ 5,0% đến 8,5%; dùng 0,150 g chế phẩm), Aminophylin (không quá 1,5% với dạng khan và 3,0% - 8,0% với dạng ngậm nước;

Ơ

N

dùng 0,50 g chế phẩm), Amlodipin besilat (không quá 0,5%; dùng 1,000 g chế phẩm),…

U Y

.Q

Nguyên tắc: Tương tự phương pháp định lượng nước bằng thuốc thử Karl Fischer,

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

ứng. Hàm lượng nước trong chế phẩm tỷ lệ thuận với lượng điện tích tăng thêm cho đến

N

khi kết thúc chuẩn độ. Điểm kết thúc đạt được khi toàn bộ nước phản ứng hết và iod dư

H Ư

xuất hiện. 1 mol iod tương ứng với 1 mol nước, 10,71℃ điện tích tương ứng với 1mg

TR ẦN

nước. Độ ẩm bị loại khỏi hệ thống bằng quy trình trước điện phân. Độ đúng và độ chính xác chủ yếu phụ thuộc vào mức độ loại bỏ được độ ẩm của môi trường ra khỏi hệ thống.

10 00

B

Phương pháp chỉ áp dụng được với những mẫu có hàm lượng nước nhỏ, khoảng từ 10 µg đến 10mg nước [5].

Ó

A

e. Kỹ thuật sắc ký khí (GC)

Í-

H

Trong sắc ký khí, pha động là một chất khí thường là khí trơ. Mẫu phân tích được

-L

đưa vào đầu cột và quá trình rửa giải được thực hiện nhờ dòng khí trơ qua cột sắc ký.

ÁN

Trong GC, pha động không tương tác với chất phân tích mà chỉ làm chức năng vận chuyển chất phân tích qua cột.

ÀN

Trong sác ký khí - lỏng (GLC), chất phân tích chỉ có thể di chuyển theo pha động

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

tạo thành ở anod phản ứng ngay với nước và lưu huỳnh dioxyd có trong buồng phản

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

tuy nhiên iod được tạo ra bằng cách oxy hóa ion iodid tại buồng phản ứng điện hóa. Iod

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

Theo Dược điển Việt Nam V- PL10.3:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

d. Phương pháp chuẩn độ đo điện tích

D

IỄ N

Đ

qua cột khi nó ở thể khí. Vì vậy kỹ thuật GC được dùng để tách các chất tan bền với nhiệt. Quá trình tách phụ thuộc vào tính bay hơi của các chất tan – tức là điểm sôi của chất phân tích. Do áp suất hơi phụ thuộc vào tính bay hơi của chất tan nên quá trình rửa giải theo thứ tự điểm sôi tăng dần. Pha động đưa chất tan ra khỏi cột đến detector. Nhiệt độ cột dao động trong khoảng 50 – 350 ℃ đảm bảo chất tan bay hơi và đẩy nhanh quá trình rửa giải [3].

36

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ứng dụng: Sắc ký khí là kỹ thuật sử dụng phổ biến nhất để xác định dung môi tồn dư [65].

Ví dụ về kỹ thuật xác định độ tinh khiết gián tiếp bằng phương pháp cân bằng khối lượng: Trong nghiên cứu của tác giả Hui Gong đã sử dụng phương pháp cân bằng

Ơ

N

khối lượng để xác định độ tinh khiết của ứng viên chất chuẩn acid folic (xác định tạp

N

H

liên quan bằng HPLC/DAD, xác định dung môi bay hơi bằng GC, hàm lượng nước bằng

ẠO

3.2.2. Kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp

G

Đ

Với kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp thì % độ tinh khiết = % hoạt chất

H Ư

N

chính.

Các phương pháp điển hình cho kỹ thuật này như: chuẩn độ, sử dụng phản ứng

TR ẦN

có hệ số tỷ lượng đã biết, phân tích độ hòa tan, quét nhiệt vi sai… Tuy nhiên, các phương pháp này chỉ đóng vai trò hỗ trợ để xác nhận lại giá trị độ tinh khiết thu được sau khi

10 00

B

định lượng bằng các phương pháp khác [14], [20], [83].

3.2.2.1. Kỹ thuật quét nhiệt vi sai (DSC)

Ó

A

Nguyên lý: Dựa trên hiện tượng trong các hệ eutectic nhiệt nóng chảy của các

Í-

H

tinh thể bị giảm dưới ảnh hưởng của tạp chất. Khi đó độ tinh khiết được xác định dựa

-L

trên phương trình cơ bản của định luật Van Hoff:

ÁN

1/Fs = [H0/R] × [T0-Ts]/ T02 × [1/X2]

TO

Trong đó: Fs là phân số mẫu tan chảy tại thời điểm Ts, T0 là điểm nóng chảy của chất tinh khiết, Ts là nhiệt độ mẫu ở trạng thái cân bằng tức thời và nhiệt độ nóng chảy

Đ

ÀN

(°K), X2 là phân số mol của tạp chất trong mẫu, H0 là nhiệt độ nóng chảy của chất tinh

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

diosgenin [60].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Gong cũng đã ứng dụng phương pháp cân bằng khối lượng trong phát triển chất chuẩn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Karl Fischer và xác định tro bằng TGA) [33]; trong một nghiên cứu của tác giả Ningbo

D

IỄ N

khiết (J/g) và R là hằng số khí (J/mol) 8,314 [15], [68].

Yêu cầu: Nguyên liệu thiết lập chất chuẩn phải có độ tinh khiết cao > 95% và tốt nhất nên > 97% [62].

Chuẩn bị mẫu: •

Sử dụng một lớp mẫu mỏng để giảm thiểu gradient nhiệt độ trong mẫu;

37

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn •

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Mẫu phải được phân bố đồng đều trên đĩa cân để đảm bảo tiếp xúc tốt với đáy đĩa cân;

•

Mẫu nên được dàn phẳng để đảm bảo các đặc tính truyền nhiệt giữa mẫu và cảm biến;

N

Mẫu nên được tiếp xúc với nắp đĩa cân để tăng nhiệt nhanh và tiếp xúc nhiệt

Ơ

•

.Q

trị tham khảo tốt bên cạnh giá trị ấn định của chất chuẩn thiết lập được khi sử dụng kỹ

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

chất chuẩn gốc được xác định giá trị ấn định bằng kỹ thuật sắc ký hoặc phổ cần được

H Ư

N

xác minh độc lập bằng kỹ thuật DSC [26], [58].

Một số ví dụ ứng dụng DSC trong xác định độ tinh khiết chất chuẩn: trong một

TR ẦN

nghiên cứu của tác giả Kestens V. đã áp dụng phương pháp DSC để xác định độ tinh khiết của các hợp chất hydrocarbon thơm đa vòng (2 chất chuẩn được chọn là 6-

B

methylchrysen và benzo[α] pyren) và hai lô khác của chất chuẩn chloramphenicol có độ

10 00

tinh khiết cao [49]; tác giả Haifeng Wang cũng đã xác định độ tinh khiết của nhôm 8-

A

hydroxyquiolin bằng kỹ thuật DSC [30], hay nghiên cứu xác định độ tinh khiết đa hình

Ó

của chất chuẩn nateglinid bằng kỹ thuật DSC của tác giả Bruni G. [16], nghiên cứu phát

Í-

H

triển ứng viên chất chuẩn gốc natri diclofenac bằng cách sử dụng kỹ thuật 1H qNMR để

-L

xác định độ tinh khiết và xác nhận lại dữ liệu bằng cách sử dụng phương pháp cân bằng

ÁN

khối lượng của tác giả Raquel Nogueira [63].

TO

3.2.2.2. Kỹ thuật phổ cộng hưởng từ hạt nhân định lượng (qNMR) Phổ NMR định lượng các tạp chất dựa trên sự tuyến tính giữa cường độ của một

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

thiết lập chất chuẩn đối chiếu. Theo Ph.Eur trong chuyên luận chung, độ tinh khiết của

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

thuật định lượng bằng HPLC. Phương pháp này được khuyên sử dụng trong nghiên cứu

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

DSC là kỹ thuật phân tích không phải sử dụng đến chất đối chiếu, vì vậy có giá

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Tác giả Paul Gabbott khuyến cáo lượng mẫu thường từ 1 mg – 3 mg [62].

H

tốt.

Đ

cộng hưởng nhất định với số hạt nhân tham gia cộng hưởng đó.

D

IỄ N

Có hai kỹ thuật định lượng là: –

Định lượng tương đối: Việc xác định tỉ lệ các thành phần trong hỗn hợp dựa trên sự so sánh cường độ tương đối giữa các cộng hưởng xuất hiện trên phổ đồ, giống như cách tính trong phương pháp chuẩn hóa diện tích. Có thể không cần sử dụng đến chất chuẩn nội tuy nhiên cần phải chứng minh không có sự chồng chéo giữa các tín hiệu 38

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

với nhau. Khi tạp có cấu trúc hoặc khối lượng phân tử chưa xác định thì việc bổ sung một lượng chính xác chất chuẩn sẽ cho phép tạo đường chuẩn để xác định.

–

Định lượng tuyệt đối: Cần dùng chất chuẩn nội. Khối lượng chất được xác định như

U Y

mB là khối lượng đã biết của một chất (B) được thêm vào dung dịch theo tiêu

Đ

chuẩn cường độ, có hàm lượng phần trăm (PB) đã biết.

MA, MB là phân tử khối của chất A và B.

•

NA, NB là số hạt nhân tạo ra tín hiệu quan tâm trong A và B.

•

IA, IB là cường độ tín hiệu của A và B.

TR ẦN

H Ư

N

G

•

Trong qNMR, số lượng điểm dữ liệu thu được phải đủ lớn để mô tả hình dạng của tín hiệu một cách chính xác. Lý tưởng nhất là hơn 10 điểm phải ở trên một nửa chiều

10 00

B

cao đỉnh [27], [29], [77].

Vậy ưu điểm của phương pháp là: không phân hủy mẫu và cần ít thời gian. Tín

Ó

A

hiệu cộng hưởng tỉ lệ với số hạt nhân cộng hưởng tại tần số đó cho phép xác định tỉ lệ

H

tương đối giữa các thành phần trong hỗn hợp. Nếu có chất đối chiếu có thể xác định

-L

Í-

được nồng độ các chất [3].

ÁN

Ví dụ: ứng dụng qNMR trong nghiên cứu acetanilid (được thiết lập và được sử

TO

dụng là một chất chuẩn gốc) [76].

D

IỄ N

Đ

ÀN

3.2.3. Kết hợp cả 2 kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp và gián tiếp

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

•

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

mA là khối lượng của chất cần phân tích (A).

TP

•

ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Trong đó:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

N

sau [14], [27]:

Cách tiếp cận này có thể cung cấp một sự đánh giá chéo các kết quả thu được từ

hai kỹ thuật xác định độ tinh khiết trực tiếp và gián tiếp. Nếu kết quả khác biệt nhau nhiều, cần tiến hành đánh giá lại để tìm nguyên nhân. Điều này đảm bảo rằng tất cả các tạp chất đã được phân tích hợp lý trong quá trình đánh giá.

39

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 4. TÌNH HÌNH THIẾT LẬP CHẤT CHUẨN GỐC TRÊN THẾ GIỚI VÀ Ở VIỆT NAM 4.1. Tình hình thiết lập chất chuẩn gốc trên thế giới

N

Trên thế giới có các trung tâm thiết lập chất chuẩn gốc lớn như Hội đồng Dược

H

Ơ

điển quốc tế, Hội đồng Dược điển Mỹ, Hội đồng Dược điển Châu Âu,… và một số công

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

cho sự phù hợp hệ thống, Efavirenz, Nevirapin [86]. Theo báo cáo năm 2014, Ban ICRS

N

G

đã xét các báo cáo thiết lập và giám sát ICRS dẫn đến thông qua các chất chuẩn gốc mới

H Ư

(Biperiden HCl ICRS 1, Clofazimine ICRS 1, Cytarabine ICRS 1, Dextromethorphan,

TR ẦN

Hydrobromide ICRS 1, Gallamine triethiodide ICRS 1, Glibenclamide ICRS 1, Quinidine sulfate ICRS 1, Salbutamol sulfate ICRS 1, Vimolol maleate ICRS 1, Valproic acid ICRS 1, Verapamil HCl ICRS 1) [84]. Một ví dụ về thiết lâp chất chuẩn

10 00

B

Indinavir năm 2005 của WHO xem phụ lục 3.

Hội đồng Dược điển Châu Âu cung cấp chất chuẩn Dược điển Châu Âu cho tất

Ó

A

cả các phép thử và phép định lượng trong các chuyên luận được đề cập trong Dược điển

H

Châu Âu, ngoài ra còn tham gia chương trình hợp tác phát triển CCĐC của Trung tâm

-L

Í-

hợp tác về chất chuẩn gốc của WHO [26]. Từ 16/04/2010, EDQM chịu trách nhiệm thiết

ÁN

lập, lưu trữ và phân phối các ICRS của WHO từ Apoteket AB (trung tâm cộng tác WHO trước đây về ICRS) [23]. Trong năm 2015, EDQM đã triển khai 26 dự án trong các lĩnh vực như khác nhau dẫn đến việc thiết lập 5 chất chuẩn gốc mới; 8 dự án tiến hành để

ÀN

thiết lập các lô thay thế cho chác chất chuẩn gốc trước đó; 5 dự án tiến hành để xây dựng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

832, năm 2005, WHO đã thiết lập thêm bốn chất chuẩn gốc mới là Didanosin, Didanosin

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

thiết lập chất chuẩn của WHO. Theo báo cáo số 32 của WHO trong loạt báo cáo kỹ thuật

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

Một trong những trung tâm thiết lập chất chuẩn lớn trên thế giới là Trung tâm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

ty Dược phẩm lớn khác như Merk, LGC standards,…

D

IỄ N

Đ

các CCĐC cho các chuyên khảo mới hoặc các yêu cầu mới trong các chuyên khảo đã có. Cũng trong năm 2015, Ban ICRS đã thông qua 5 báo cáo thiết lập được đưa ra bởi PTN của EDQM (Abacavir sulfate ICRS 2; Paracetamol ICRS 3; Artemether ICRS 2, Rifampicin ICRS 3 và Stavudine impurity F ICRS 1). Vào cuối năm 2015, đã có 2.708 CCĐC trong Ph.Eur [24]. Trong năm 2016, EDQM đã thiết lập được 4 chất chuẩn gốc, tiến hành 7 dự án nhằm thiết lập các lô thay thế cho các CCĐC hiện hành và 8 dự án để 40

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

xây dựng các chất chuẩn cho các chuyên luận mới hoặc các yêu cầu mới trong chuyên luận hiện hành [25]. Hiện tại theo danh sách cập nhật tháng 05/2018, EDQM cung cấp hơn 2.800 CCĐC và giá của các chất chuẩn dao động trong khoảng 79-1000 € [23].

Hội đồng Dược điển Mỹ cung cấp CCĐC Dược điển Mỹ cho tất cả các dược chất,

Ơ

N

tá dược, tạp chất, sản phẩm phân hủy và thực phẩm chức năng có đề cập trong các

N

H

chuyên luận của Dược điển Mỹ. Việc thiết lập USPR được thực hiện bởi ít nhất 3 PTN

.Q

Đ

cấp hơn 3.500 CCĐC của hợp chất thuốc, tá dược, tạp chất, sản phẩm phân huỷ, thực

N

G

phẩm chức năng,… Giá của các CCĐC này dao động từ 125,00 - 2.875,00 $ theo thống

H Ư

kê cập nhật vào tháng 05/2018 [74].

TR ẦN

Bên cạnh các hội đồng dược điển cung cấp các chất chuẩn gốc thì các trung tâm nghiên cứu và các nhà phát minh thuốc mới cũng đã nghiên cứu và công bố các kết quả

B

của mình, ví dụ như thiết lập chất chuẩn gốc Glibenclamid [51], Itraconazol [18],… và

10 00

một số nghiên cứu của các tác giả [48], [58] (Xem phần phụ lục 4,5,6).

A

4.2. Tình hình thiết lập chất chuẩn gốc tại Việt Nam

H

Ó

Hiện nay ở Việt Nam chưa có báo cáo về hoạt động thiết lập chất chuẩn gốc mà

Í-

chủ yếu chỉ có hoạt động thiết lập chất chuẩn thứ cấp. Hai đơn vị cung cấp chất chuẩn

-L

chính thức là Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung Ương (48 Hai Bà Trưng, Hoàn Kiếm, Hà

ÁN

Nội) và Viện Kiểm nghiệm Thuốc TP.HCM (200 Cô Bắc, Quận 1, TP.HCM) [5].

TO

Năm 2008 - 2010, VKNTTƯ đã phối hợp với các cơ sở nghiên cứu trong nước

ÀN

như Trường Đại học Dược Hà Nội, Viện Dược liệu,… thực hiện đề tài nghiên cứu cấp

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

trong các giai đoạn khác nhau của phát triển thuốc mới [79]. Hiện nay USP đang cung

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

và danh sách chất chuẩn gốc lên tới hơn 3000 chất chuẩn với hơn 400 chất chuẩn mới

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1936 danh sách chất chuẩn gốc chỉ có 6 chất nhưng đến năm 2013 đã phát triển mạnh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

đáp ứng tiêu chuẩn [80]. Lịch sử phát triển về thiết lập chất chuẩn gốc của USP từ năm

D

IỄ N

Đ

Nhà nước thiết lập 10 chất chuẩn đối chiếu quốc gia có nguồn gốc dược liệu và thành phẩm thuốc có nguồn gốc dược liệu [1].

Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung Ương hiện cung cấp 10 chất chuẩn thứ cấp từ dược liệu bên cạnh hàng trăm chất chuẩn tân dược. Viện Kiểm nghiệm Thuốc TP. HCM cung cấp 213 chất chuẩn tân dược và 18 chất chuẩn từ dược liệu (8/2013) [9], [10].

41

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả dự án cấp Sở (Sở KH&CN TP.HCM): “Điều chế chất chuẩn đối chiếu phục vụ kiểm nghiệm dược liệu và đông dược” (2008-2012) -

Đã chiết xuất, phân lập, điều chế được 10 hợp chất tinh khiết từ dược liệu gồm acid oleanolic, asiaticosid, berberin chlorid, curcumin I, damnacanthal, diosgenin,

Ơ

N

hesperidin, ginsenosid-Rb1, ginsenosid-Rg1 và majonosid-R2 đạt yêu cầu số lượng

N

.Q

Đã xây dựng thiết lập quy trình điều chế ổn định, kinh tế, có tính lặp lại cao cho 10

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

chất chuẩn [10].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

-

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

TCCS và đang tiến tới đăng kí chất chuẩn quốc gia.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đã thẩm định 10 chất chuẩn này theo đầy đủ các tiêu chí của chất chuẩn gốc theo

U Y

-

H

và chất lượng dự án đã đặt ra.

42

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT

1.1. Kết luận

N

Bài tổng quan trên đây đã đưa ra cho chúng ta những hiểu biết cơ bản nhất về

N

H

Ơ

thiết lập chất chuẩn gốc như:

.Q

G N

cả hai phương pháp trực tiếp và gián tiếp.

Đ

3. Hệ thống được các kỹ thuật xác định độ tinh khiết của một chất chuẩn gốc theo

H Ư

Chất chuẩn có vai trò quan trọng trong kiểm tra chất lượng ngành Dược. Công

TR ẦN

tác thiết lập chất chuẩn gốc là rất cần thiết khi nghiên cứu phát triển thuốc mới (đặc biệt là trong xu hướng nghiên cứu phát triển thuốc mới nguồn gốc Dược liệu như hiện nay),

B

trong trường hợp không có chất chuẩn gốc hoặc không tìm được chất chuẩn để nối.

10 00

Nhìn chung, công tác thiết lập chất chuẩn gốc ở nước ta còn khá hạn chế, vì vậy việc thiết lập chất chuẩn gốc sẽ giúp chúng ta giảm được sự phụ thuộc vào các nguồn

-L

Í-

H

Ó

A

chuẩn gốc từ nước ngoài cũng như giảm được giá thành của chất chuẩn gốc.

ÁN

1.2. Đề xuất

TO

Khóa luận này đã cho chúng ta một cái nhìn tổng quát về thiết lập chất chuẩn gốc.

ÀN

Việc thiết lập chất chuẩn gốc còn mới và đang bắt đầu được quan tâm ở nước ta trong

Đ

nghiên cứu và phát triển thuốc mới. Hiện nay, còn rất ít nghiên cứu về việc thiết lập chất

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

chuẩn gốc;

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

2. Hệ thống hóa được các kỹ thuật xây dựng được bộ dữ liệu để nhận dạng chất

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

quy trình thiết lập chất chuẩn gốc;

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

1. Hệ thống được các khái niệm cơ bản nhất về chất chuẩn gốc và các bước trong

D

IỄ N

chuẩn gốc. Bên cạnh những kết quả thu được, để hoàn thiện cũng như nâng cao tính ứng dụng thực tế, tôi xin đưa ra một số đề xuất để tiếp tục phát triển công tác thiết lập chất chuẩn gốc nói chung và ứng dụng chúng trong ngành Dược nói riêng như sau: 

Tăng cường học hỏi, nghiên cứu và thực nghiệm trong công tác thiết lập chất chuẩn gốc tại Việt Nam, bên cạnh đó hợp tác quốc tế với các trung tâm thiết 43

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

lập chất chuẩn gốc của quốc tế, Mỹ, Châu Âu,… để nâng cao trình độ trong công tác thiết lập chất chuẩn gốc; 

Phối hợp với các đơn vị nghiên cứu phát triển thuốc mới, Viện kiểm nghiệm thiết lập chất chuẩn gốc tại Việt Nam theo đúng hướng dẫn chung của WHO;

Ơ

Đặc biệt quan tâm đến một hướng đi rất đáng chú ý và tiềm năng ở nước ta đó

H https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

là thiết lập chất chuẩn gốc có nguồn gốc từ Dược liệu.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN



N

thuốc Trung Ương và Viện kiểm nghiệm thuốc TP.HCM để đẩy mạnh việc

44

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 1.

Bộ Khoa học và Công nghệ (2010), Nghiên cứu chiết tách, tinh chế một số hợp

chất tự nhiên đặc trưng từ dược liệu để làm chất chuẩn phục vụ kiểm nghiệm dược liệu,

N

mã đề tài: KC.10.16/06.10.

H

Ơ

Bộ môn hóa phân tích và độc chất (2004), Kiểm nghiệm thuốc, Trường đại học

U Y

TP

Hội đồng Dược điển Việt Nam (2017), Dược điển Việt Nam V, Bộ Y tế.

6.

Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở các phương pháp phổ ứng dụng trong hóa

H Ư

N

G

Đ

5.

học, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, tr.14-62,72-141,185-358,426-536.

Nguyễn Hữu Lạc Thủy, Võ Ngọc Trái, et al. (2014), "Phân lập và thiết lập chất

TR ẦN

7.

đối chiếu Isoquercitrin", Nghiên cứu y học, 18(2), tr.2-7.

PGS.TS. Trịnh Thị Thủy (2012), Ứng dụng các phương pháp phổ trong phân

B

8.

10 00

tích cấu trúc các hợp chất- Chương trình phát triển nguồn nhân lực y tế, Trường Đại

A

học Dược Hà Nội, Hà Nội, tr.1-25.

Trung tâm Thông tin Khoa học & Công nghệ TP.HCM (2013), "Phân tích xu

Ó

9.

Í-

H

hướng nghiên cứu điều chế và thiết lập chất chuẩn để phục vụ công tác nghiên cứu và

Trung tâm Thông tin Khoa học và công nghệ TP.HCM, GS.TS. Nguyễn Minh

ÁN

10.

-L

kiểm nghiệm trên cơ sở số liệu sáng chế quốc tế".

TO

Đức (2013), Điều chế và thiết lập chất chuẩn từ thiên nhiên để phục vụ công tác nghiên

ÀN

cứu, kiểm nghiệm và tiêu chuẩn hóa Dược liệu, Đông dược, Sở khoa học và công nghệ

Đ

TP HCM,Trung tâm Thông tin Khoa học và Công nghệ, TP HCM, tr.4-43.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

hóa học cây thuốc, Nhà xuất bản y học, TP HCM, tr.75-196.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

GS. Nguyễn Văn Đàn, DS. Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu

4.

ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Hà Nội, Hà Nội, tr.43-69, 84-90, 98-106,107-121,123-213,215-235.

.Q

Bộ môn hóa phân tích và độc chất (2012), Hóa phân tích II, Trường đại học Dược

3.

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Dược Hà Nội, tr.72-79.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

2.

D

IỄ N

Tiếng Anh 11.

Altria K.D. (1996), "Determination of drug-related impurities by capillary

electrophoresis", Journal of Chromatography A, 735(1-2), pp.43-56.

12.

BIPM, IEC, et al. (2012), JCGM 200:2012 International vocabulary of

metrology – Basic and general concepts and associated terms (VIM) pp.50.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

13.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Blessy M, Ruchi D. Patel, et al. (2014), "Development of forced degradation and

stability indicating studies of drugs-A review", Journal of Pharmaceutical Analysis, 4(3), pp.159-165.

British Pharmacopoeia Commission (2014), The British pharmacopoeia

Ơ

Brown M. E. (1979), "Determination of purity by differential scanning

H

15.

N

Stationery Office Books (TSO).

U Y

.Q

Bruni G., Berbenni V., et al. (2011), "Determination of the nateglinide

G

degradation studies of drugs", International Journal of Advances in Pharmaceutics,

Christian Zeine, LGC Standards GmbH (2013), Primary/secondary standards in

TR ẦN

pharmaceutical QC, LGC standards, pp.1-40.

19.

H Ư

18.

N

2(3), pp.1-5.

Chung Chow Chan, Herman Lam, et al. (2004), Analytical Method Validation

B

and Instrument Performance Verification- Chapter 3: Method Validation for HPLC

Committee on Asean reference substance (2005), Guidelines for the

A

20.

10 00

Analysis of Related Substances in Pharmaceutical Drug Products, pp.27-48.

Ó

establishment, handling, storage and use of Asean reference substances, Thailand, pp.2-

Í-

David C.Browne (2009), "Reference Standard Material Qualification",

-L

21.

H

12.

David Kealey, P J Haines (2002), Instant Notes in Analytical Chemistry, pp.270-

TO

22.

ÁN

Pharmaceutical Technology,, 33(4), pp.1-6.

ÀN

282, 302-304.

EDQM

Council

of

Europe

(2018),

from

Đ

23.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Charde M.S., Kumar Jitendra, et al. (2013), "Review: Development of forced

Đ

17.

ẠO

54(5), pp.1196-1199.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

polymorphic purity through DSC", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

16.

N

calorimetry (DSC)", Journal of Chemical Education 56(5), pp.310-313.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

14.

D

IỄ N

https://www.edqm.eu/en/news/reference-standards.

24.

European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM)

(2015), Annual Report, Council of Europe EDQM, pp.1-44.

25.

European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM)

(2016), Annual Report, Council of Europe EDQM, pp.1-43.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

26.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM)

(2017), European Pharmacopoeia 9th Edition.

27.

European Federation of National Associations of Measurement Testing and

Analytical Laboratories (2014), Guide to NMR Method Development and Validation-

Ơ

European Medicines Agency (2016), ICH guideline Q3C (R6) on impurities:

H TP

Haifeng Wang, Jia Li, et al. (2009), "Purity determination of 8-hydroxyquioline

Đ

aluminum by differential scanning calorimetry", Synthetic Metals, 159(1-2), pp.162-

N

Harry G. Brittain (2009), Polymorphism in Pharmaceutical Solids, Drugs and the

H Ư

31.

G

165.

pharmaceutical sciences, pp.318-480.

Harry G. Brittain, Susan J. Bogdanowich, et al. (1991), "Physical

TR ẦN

32.

Characterization of Pharmaceutical Solids", Pharmaceutical Research, 8(8), pp.963-

Hui Gong, Ting Huang, et al. (2012), "Purity determination and uncertainty

10 00

33.

B

973.

ICH (2000), Q6A Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for

Ó

34.

A

evaluation of folic acid by mass balance method", Talanta, 101, pp.96-103.

ICH (2015), Q3D Elemental Impurities-Guidance for Industry, pp.5-13.

36.

ICH (2016), Impurities: Guideline for Residual Solvents Q3C(R6), pp.1-34.

37.

-L

35.

ÁN

Í-

H

New Drug Substances and New Drug Products: Chemical Substances, pp.1-31.

TO

ICH (2016), Q7 Good Manufacturing Practice Guidance for Active

ÀN

Pharmaceutical Ingredients FDA, pp.1-52.

ICH Expert Working Group (2006), Impurities in new drug products Q3B(R2),

Đ

38.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

30.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

.Q

Frank Malz (2003), Quantitative NMR-Spektroskopie als Referenzverfahren in

der analytischen Chemie, Dissertation, pp.5-115.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

29.

N

guideline for residual solvents, pp.7-17.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

28.

N

Part I: Identification and Quantification, pp.1-18.

D

IỄ N

pp.6.

39.

ICH guideline (2006), impurities in new drug substances Q3A(R2), pp.1-11.

40.

International Laboratory Accreditation Cooperation (ILAC) G9 (2005),

Guidelines for the selection and use of reference materials, pp.4-15.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

41.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

International Laboratory Accreditation Cooperation (ILAC) G12 (2000),

Guidelines for the requirements for the competence of reference materials producers, pp.6-7.

International Organization for Standardization 13528 (2005), Statistical methods

Ơ

International Organization for Standardization (2015), ISO Guide 30:2015

H

43.

N

for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons.

U Y

.Q

International Organization for Standardization (2017), ISO Guide 35: Reference

46.

John G.Dorsey, William T.Cooper, et al. (1998), "Liquid Chromatography:

Đ

N

Jouyban1 Abolghasem, Kenndler Ernst (2008), "Impurity analysis of

H Ư

47.

G

Theory and Methodology", Analytical chemistry, pp.591-644.

pharmaceuticals using capillary electromigration methods", electrophoresis, 29(17),

48.

TR ẦN

pp.3531-3551.

Kang Ma, Haifeng Wang, et al. (2009), "Purity determination and uncertainty

B

evaluation of theophylline by mass balance method, high performance liquid

10 00

chromatography and differential scanning calorimetry", Analytica Chimica Acta,

Kestens V., Zeleny R., et al. (2011), "Differential scanning calorimetry method

Ó

49.

A

650(2), pp.227-233.

Í-

H

for purity determination: A case study on polycyclic aromatic hydrocarbons and

Kishore Kumar Hotha, Satti Phani Kumar Reddy, et al. (2013), "Forced

ÁN

50.

-L

chloramphenicol", Thermochimica Acta, 524, pp.1-6.

TO

degradation studies: practical approach-overview of regulatory guidance and literature

ÀN

for the drug products and drug substances", International research journal of pharmacy,

Đ

4(5), pp.78-84.

D

IỄ N

51.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ISO/REMCO (2005), Committee on reference materials, pp.10.

ẠO

45.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

materials -Guidance for characterization and assessment of homogeneity and stability.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

44.

N

Reference materials - Selected terms and definitions.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

42.

LGC Standards (2014), Pharmaceutical impurities and primary reference

standards 2014, pp.1/10-10/10.

52.

Li Y.M., Schepdael A. Van, et al. (1998), "Development and validation of

amoxicillin determination by micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of Chromatography A, 812(1-2), pp.227-236.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

53.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Lommen A., Schilt R., et al. (2002), "Application of 1D 1H NMR for fast non-

targeted screening and compositional analysis of steroid cocktails and veterinary drug formulations administered to livestock", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 28, pp.87-96.

N

Lurie Ira S., Anex Deon S., et al. (2001), "Profiling of impurities in heroin by

Ơ

54.

H

capillary electrochromatography and laser-induced fluorescence detection", Journal of

H Ư

57.

N

204.

Marta Zalewska, Karol Wilk, et al. (2013), "Capillary electrophoresis application

TR ẦN

in the analysis of the anti-cancer drugs impurities", Polish Pharmaceutical Society, pp.171-180.

Mathkar S., Kumar S., et al. (2009), "The use of differential scanning calorimetry

B

58.

10 00

for the purity verification of pharmaceutical reference standards", Journal of

May W., Parris R., et al. (2000), Definitions of Terms and Modes Used at NIST

Ó

59.

A

Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 49, pp.627-631.

Í-

H

for Value-Assignment of Reference Materials for Chemical Measurements, National

Ningbo Gong, Baoxi Zhang, et al. (2014), "Development of a new certified

ÁN

60.

-L

Institute of Standards and Technology (NIST), pp.1-12.

TO

reference material of diosgenin using mass balance approach and Coulometric titration

ÀN

method", Steroids, 92, pp.25-31.

Đ

61.

D

IỄ N

62.

Organization World Health (2012), 2.3 Sulfated ASH.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

by advanced hyphenated technique - HPLC/ICP-MS: A review", Talanta, 161, pp.177-

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Marcinkowska M, Barałkiewicz D (2016), "Multielemental speciation analysis

Đ

56.

ẠO

review", Analytica Chimica Acta, 973, pp.1-24.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

.Q

Man He, Lijin Huang, et al. (2017), "Advanced functional materials in solid

phase extraction for ICP-MS determination of trace elements and their species - A

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

55.

N

Chromatography A, 924(1-2), pp.421-427.

Paul Gabbott, Perkin Elmer, et al. (2014), "Practical Purity Determination by

DSC", Thermal Analysis, pp.1-5.

63.

Raquel Nogueira, Bruno C.Garrido, et al. (2013), "Development of a new sodium

diclofenac certified reference material using the mass balance approach and 1H qNMR to determine the certified property value", European Journal of Pharmaceutical Sciences, 48(3), pp.502-513.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

64.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Roger L. Blaine, Ph.D.John E. Rose (2004), "Validation of Thermogravimetric

Analysis Performance Using Mass Loss Reference Materials", TA Instruments, pp.1-9.

65.

Sandor Gorog (2000), Identification and Determination of Impurities in Drugs,

Elsevier, pp.9-728.

N

Satinder Ahuja, Karen Mills Alsante (2004), Handbook of Isolation and

Ơ

66.

H

Characterization of Impurities in Pharmaceuticals, Separation Science and Technology,

Drug

Authority

TP

Đ

Society of Japanese Pharmacopoeia (2011), Japanese Pharmacopoiea 16th

G

69.

H Ư

70.

N

Edition.

Stephen R Byrn , Ralph R Pfeiffer, et al. (1999), Solid-State Chemistry of Drugs-

71.

TR ẦN

Chapter 8: Infrared Spectroscopy of Solids, Chapter 8, West Lafayette, pp.111-117.

Stephen R Byrn , Ralph R Pfeiffer, et al. (1999), Solid-state chemistry of drugs -

Suryakanta Swain, Prafulla Kumar Sahu, et al. (2014), "An Overview of

10 00

72.

B

Chapter 4: Microscopy, West Lafayette, pp.69-78.

A

Pharmaceutical Impurities and Degradation Products", Pharmaceutical Regulatory

H

The Korean Food and Drug Administration (KFDA) (2012), Korean

Í-

73.

Ó

Affairs, 4(1), pp.1.

The United States Pharmacopeial Convention (2018), "Reference Standards",

ÁN

74.

-L

Pharmacopoiea X, pp.1607-1610,1619-1620,1653,1685,1688,1698,1706.

TO

from http://www.usp.org/reference-standards/reference-standards-catalog.

Tina Zöllner, Michael Schwarz (2013), "Herbal Reference Standards:

ÀN

75.

Đ

applications, definitions and regulatory requirements", pp.1-18.

D

IỄ N

76.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Pharmaceuticals and Organics by DSC", Thermal Analysis, pp.1-4.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Sichina W.J., Manager National Marketing (2000), "Purity Measurements of

ẠO

68.

(2010),

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

&

U Y

Food

.Q

Saudi

Policy Guidance for Pharmaceutical Reference Standard, pp.6-8.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

67.

N

pp.1-25,27-37,75-88,89-117,119-143,249-299,301-339.

Torgny Rundlöf, Ian McEwena, et al. (2014), "Use and qualification of primary

and secondary standards employed in quantitative

1

H NMR spectroscopy of

pharmaceuticals", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 93, pp.111-117.

77.

Torsten Schoenberger (2012), "Determination of standard sample purity using

the high-precision 1H-NMR process", Anal Bional Chem, 403, pp.247-254.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

78.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

U.S Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration,

et al. (2017), Annex 1(R1) Residue on Ignition/Sulphated Ash. 79.

U.S. Pharmacopeial Convention (2013), USP Reference Standards, pp.1-32.

80.

United States Pharmacopeial Convention Inc (2017), USP 40-NF 35 The United

Ơ

USP Council of Experts, USP Reference Standards Committee, et al. (2012),

H

81.

N

States Pharmacopoeia and National Formulary 2017, Deutscher Apotheker Verlag.

Practical

High-Performance

ẠO

Chromatography, pp.4-319.

WHO (2007), "General guidelines for the establishment, maintenance and

Đ

83.

Liquid

G

distribution of chemical reference substances", WHO technical report series, annex

H Ư

84.

N

3(943), pp.61-82.

WHO (2014), WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical

TR ẦN

Preparations-Forty eighth report, pp.21-25.

WHO (2017), The International Pharmacopoeia, Seventh Edition.

86.

WHO, V. Hjortsberg (2005), WHO Collaborating Center for Chemical

B

85.

Yiu-chung Yip, Siu-kay Wong, et al. (2011), "Assessment of the chemical and

A

87.

10 00

Reference Substances-Report on the work in 2005 pp.1-96.

H

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

30(4), pp.628-640.

Ó

enantiomeric purity of organic reference materials", Trends in Analytical Chemistry,

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

(2004),

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

R.Meyer

.Q

Veronika

TP

82.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Medicines and Foods", Pharmaceutical Research, 29(4), pp.922-931.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

"Primary and Secondary Reference Materials for Procedures to Test the Quality of

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

PHỤ LỤC

N

Phụ lục 1: Ví dụ về ứng dụng của CE trong phân tích tạp chất liên quan của Amoxicillin.

U Y

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

bằng khối lượng và DSC.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Phụ lục 5: Xác định độ tinh khiết của chất chuẩn gốc Theophylin bằng phương pháp cân

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Phụ lục 4: Ví dụ về thiết lập 6 chất chuẩn gốc.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Phụ lục 3: Thiết lập chất chuẩn gốc Glibenclamid.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

Phụ lục 2: Thiết lập chất chuẩn Indinavir theo hướng dẫn của WHO.

PL-1

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phụ lục 1: Ví dụ về ứng dụng của CE trong phân tích tạp chất liên quan của Amoxicillin Ví dụ về Phương pháp MEKC đã được phát triển và phê chuẩn cho phân tích amoxicillin và các tạp chất tiềm ẩn. Điều kiện: Hệ đệm chảy, natri dihydrogenphosphat

N

70mM, SDS 125mM và acetonitrin 5%, điều chỉnh pH đến 6.0, chiều dài của mao quản

H

Ơ

silic nóng chảy không tráng 44cm (chiều dài hiệu dụng 36cm) × 50 µm I.D, điện áp 15

U Y

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Hình 3.1 Hình ảnh phân tích MEKC của một mẫu muối natri amoxicillin [52].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q Thời gian di chuyển (phút)

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

Sự hấp thụ UV (0.1

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

toàn tách khỏi các tạp chất tiềm ẩn của nó (Hình 3.1)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

kV, nhiệt độ 25℃, bước sóng phát hiện 230 nm. Phương pháp cho phép amoxicillin hoàn

PL-2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ph᝼ l᝼c 2: Thiáşżt láş­p chẼt chuẊn Indinavir theo hĆ°áť&#x203A;ng dẍn cᝧa WHO (2005) [86]

NguyĂŞn liáť&#x2021;u: Khoảng 200 g mẍu (lĂ´ cᝧa nhĂ sản xuẼt sáť&#x2018; L-000735524-002L039) Ä&#x2018;ĂŁ Ä&#x2018;ưᝣc nháş­n tấi trung tâm WHO vĂ o thĂĄng 05/2005. NguyĂŞn liáť&#x2021;u Ä&#x2018;ưᝣc bảo quản trong

Ć

N

bao bĂŹ kĂ­n áť&#x; + 5â&#x201E;&#x192;, trĂĄnh ĂĄnh sĂĄng.

Bẹng chᝊng vᝠcẼu trúc hóa h�c:

bromid Ä&#x2018;ưᝣc ghi lấi trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa kali bromid

TO

Ă N

HĂŹnh 4.1 Pháť&#x2022; IR cᝧa 1,5 mg Indinavir sáť&#x2018; kiáť&#x192;m soĂĄt 105231 trong 300 mg kali

Ă&#x20AC;N Ä?

Iáť&#x201E; N

Pháť&#x2022; UV: Máť&#x2122;t pháť&#x2022; UV trong Methanol Ä&#x2018;ưᝣc ghi lấi trĂŞn mĂĄy quang pháť&#x2022; Varian Cary 5. Quang pháť&#x2022; thu Ä&#x2018;ưᝣc nhĆ° hĂŹnh 4.2.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-L

Ă?-

H

Ă&#x201C;

A

10 00

B

TR ẌN

H ĆŻ

N

G

Ä?

áş O

W105231).

â&#x20AC;˘

D

Pháť&#x2022; háť&#x201C;ng ngoấi: Máť&#x2122;t pháť&#x2022; háť&#x201C;ng ngoấi Ä&#x2018;ưᝣc Ä&#x2018;Ć°a ra trong hĂŹnh 4.1 dĆ°áť&#x203A;i Ä&#x2018;ây (sáť&#x2018; Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

â&#x20AC;˘

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

-

U Y

MĂ´ tả: Báť&#x2122;t mĂ u trắng.

.Q

-

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

H

Dᝯ liáť&#x2021;u phân tĂ­ch:

Máť&#x2122;t cáťąc Ä&#x2018;ấi hẼp thu UV Ä&#x2018;ưᝣc quan sĂĄt áť&#x; khoảng 260 nm; đ??´1% 1đ?&#x2018;?đ?&#x2018;&#x161; = 60 áť&#x; bĆ°áť&#x203A;c sĂłng 260 nm (n = 6, RSD = 0,7%); CĂĄc tĂ­nh toĂĄn Ä&#x2018;ưᝣc tháťąc hiáť&#x2021;n tham chiáşżu váť&#x203A;i chẼt khĂ´.

PL-3

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phân tích nhiệt trọng lượng: Khi hợp chất được làm nóng đến nhiệt độ 105℃, quan sát thấy mất 2,9% (kl/kl) (n = 6, RSD = 4,1%).

Nước: 2,9% (n = 3) được xác định bằng chuẩn độ Karl Fischer.

•

Dung môi tồn dư: Tổng hàm lượng < 0,1%. Không phát hiện thấy đỉnh nào.

10 00

B

•

Ó

trong Ph.Eur 5.0.

A

Phép thử bao gồm dung môi tồn dư nhóm 1, nhóm 2, nhóm 3 theo phương pháp

Í-

H

Hệ thống A: Các dung dịch đối chiếu tương ứng với các nồng độ sau của dung

-L

môi tồn dư trong mẫu: Benzen (2 ppm), Carbontetrachlorid (4 ppm), 1,2-

ÁN

Dichloroethan (5 ppm), 1,1-Dichloroethen (8 ppm), 1,1,1-Trichloroethan (10

TO

ppm), Acetonitril (410 ppm), Chlorobenzen (360 ppm), Cyclohexan (3880 ppm),

D

IỄ N

Đ

ÀN

1,2-Dichloroethen (1870 ppm), Methylen chlorid (600 ppm), 1,4-Dioxan (380 ppm), Methanol (3000 ppm), Methylcyclohexan (1180 ppm),

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

•

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Phân tích

TR ẦN

-

H Ư

N

Hình 4.2 Phổ UV của Indinavir số kiểm soát 105231, 101 µg/ml trong methanol

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Tetrahydrofuran (720 ppm), Toluen (890 ppm) và Xylen (2170 ppm).

Hàm lượng dung môi tồn dư được kiểm tra bằng sắc ký khí với các điều kiện sau: -

Thiết bị: GC Hewlett Packard -

Chương trình nhiệt độ: 40°C trong 20

6890;

phút, 10°C/phút và giữ 240°C trong 20 phút; PL-4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn -

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Cột: DB-624 (30 m x 0.32

-

Tiêm mẫu: Đầu tiêm HP 7694;

-

Tách: 1:2;

-

Nhiệt độ lò HS: 105℃;

-

Detector: FID;

-

Thăng bằng vial: lắc chậm 60 phút;

-

Nhiệt độ đầu dò: 250℃;

-

Thể tích vòng lặp: pha khí 1,0 ml.

H

Ơ

Nhiệt độ phun: 140℃;

Đ

ẠO

Dung môi rửa giải: Dicloromethan: methanol: dung dịch amoni 25% (83: 15: 2)

G

Mẫu: 450 µg indinavir hòa tan trong metanol.

H Ư

N

Hình ảnh: Quét ở 254 nm bằng máy quét CAMAG TLC 3

TR ẦN

Rf (indinavir) = 0,6

Giới hạn định lượng khoảng 1 µg (0,2%), khi quét ở bước sóng 254 nm.

B

HPLC:

10 00

•

Độ tinh khiết theo chuẩn hóa diện tích: 99,8% (n = 6, RSD = 0.04% đối với pic

A

chính, RSD=25.8% được tính trên mức tạp chất). 14 tạp chất trên giới hạn định

H

Ó

lượng được phát hiện. Sắc ký đồ thể hiện trong hình 4.3.

-L

Í-

Các điều kiện:

Dung môi rứa giải: A: Acetonitril: đệm phosphat pH 7.5: nước (30: 5: 65);

-

B: Acetonitril: đệm phosphat pH 7,5: nước (70: 5: 25)

-

1,8 g dinatri hydrogen phosphat, dihydrat, hòa tan trong khoảng 50 ml nước. pH được điều chỉnh đến 7,5 với 1 M acid photphoric. Dung dịch được pha loãng thành 100,0 ml bằng nước và lọc.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

Bản mỏng: Silica gel 60 F-254 TLC (Merck);

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N U Y

Sắc ký lớp mỏng:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

-

Độ tinh khiết: •

http://daykemquynhon.ucoz.com

Khí mang: Heli (2.2 ml/phút);

.Q

-

-

N

mm, phim 1.8 µm);

PL-5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Thành phần dung

%A

%B

Thời gian

Đẳng dòng

93 → 20

7 →80

5 – 25

Tuyến tính

20

80

25 – 30

Đẳng dòng

20 →93

80 →7

30 – 35

Tuyến tính

93

7

35 – 45

Tái cân bằng

Ơ

0–5

H

7

Cột: Cột BDS Hypersil C18, 250 x 4.6 mm, 5µm;

-

Nhiệt độ cột: 40℃;

-

Detectỏ, bước sóng: Máy quang phổ, 220 nm;

-

Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút;

-

Nhiệt độ phun: 8℃;

-

Chuẩn bị mẫu: Indinavir được hòa tan trong pha động A và B (50:50) đến nồng

-

Đ G N

H Ư

10 00

B

độ 2,0 mg/ml. 20 ml (tương ứng 40 µg).

Tính ổn định của dung dịch mẫu: Mẫu được ổn định trong bóng tối ở 8℃ trong ít

A

nhất 4 giờ;

Giới hạn phát hiện: 0,5 ng (0,001%) ở 220 nm;

-

Giới hạn định lượng: 2 ng (0,005%) ở 220 nm.

-

Detector mảng diod: Phổ của hầu hết các đỉnh tạp chất cũng như đỉnh chính tương

-L

Í-

H

Ó

-

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

tự với cực đại UV ở khoảng 260 nm và dưới 220 nm.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Thời gian thu dữ liệu: 30 phút;

ẠO

-

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

U Y

N

93

N

(phút)

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

môi rửa giải

Loại

PL-6

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

-

Nhận dạng phổ IR: Phù hợp;

-

Định lượng HPLC: 100,2%;

-

Tổng tạp (HPLC): 0,0%;

-

Nước (Karl Fischer): 2,9%;

-

Tạp chất (TLC): Điểm duy nhất;

-

Độ tinh khiết được gán giá trị 97,1% (nguyên trạng);

-

Tính ổn định: Không có nghiên cứu về độ ổn định đặc biệt nào được thực hiện.

10 00

A

Ó

H

Í-

-L

ÁN

TO

Thường xuyên kiểm tra lại ICRS này khi bảo quản ở trạng thái khô.

ÀN

Kết luận: Indinavir, số kiểm soát 105231 có thể được coi thích hợp như một chất chuẩn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đặc điểm: Bột màu trắng;

B

-

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Dữ liệu do nhà sản xuất cung cấp:

H Ư

N

Hình 4.3 Sắc ký đồ của Indinavir số 105231 được theo dõi ở bước sóng 220 nm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

D

IỄ N

Đ

quốc tế cho mục đích dự định.

PL-7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phụ lục 3: Thiết lập chất chuẩn gốc Glibenclamid [51]

-Số mục lục: GCQUANT0008.00

N

-Số lô: 25894

H

-Số đăng ký: [10238-21-8]

-Sự phân tích nguyên trạng: 99,7%

Đ G N H Ư

i.

Bộ dữ liệu nhận dạng:

TR ẦN

 Phổ 1H-NMR (Điều kiện: 400 MHz, DMSO-d6) và Phổ 13C-NMR (Điều kiện: 100 MHz, DMSO-d6): Các tín hiệu của phổ NMR và biện giải phổ phù hơp với phổ của

B

chất chuẩn đối chiếu Châu Âu Glibenclamid, G0325000, lô 3.0, Id00DQP3.

10 00

 Khối phổ:

Ó

A

Phương pháp: 4,5 kV ESI, nhiệt độ bốc hơi : 200℃, đầu vào trực tiếp.

H

Các tín hiệu của phổ MR và biện giải phổ phù hợp với phổ của chất chuẩn Châu Âu

ÁN

 Phổ IR

-L

Í-

Glibenclamid, G0325000, lô 3.0, Id00DQP3.

TO

Phương pháp: Phổ hồng ngoại biến đổi Fourier phản xạ suy giảm tổng thể (ATR-

D

IỄ N

Đ

ÀN

FTIR).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

-Điểm nóng chảy: 172℃

ẠO

-Phân tử khối: 494,00

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

-Cảm quan: chất rắn màu trắng

C23H28ClN3O5S

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

-Công thức phân tử Glibenclamid: Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

N

bóng tối

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

-Điều kiện bảo quản: 15-25℃, trong

Các tín hiệu của phổ MR và biện giải phổ phù hợp với phổ của chất chuẩn Châu Âu Glibenclamid, G0325000, lô 3.0, Id00DQP3.

 Điểm chảy: Phương pháp: phương pháp mao quản.

Giá trị trung bình (n=3): 172℃.

PL-8

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Độ tinh khiết: Được xác định bằng HPLC.

-

Điều kiện HPLC: Cột (Pro C18 RS, 5 µm, 150 × 4,6 mm)

-

Điều kiện chạy sắc ký: 1,0 ml/phút, 40℃;

•

0 – 30 phút, Nước/Acetonitril: 55/45;

•

30 – 35 phút, Nước/Acetonitril lên 30/70;

•

35 – 40 phút, Nước/Acetonitril: 30/70;

•

40 – 45 phút, Nước/Acetonitril lên 55/45;

•

45 – 60 phút, Nước/Acetonitril 55/45 (v/v);

•

0,1% H3PO4.

-

Detector: DAD, 230nm.

-

Tiêm mẫu: Tự động, 5 µl; 0,19764 mg/ml trong Methanol.

Diện tích

% diện tích

1

2,09

0,51

0,00

2

3,83

23,83

0,13

3

5,66

5,40

0,03

7,66

5,90

0,03

16,34

18008,72

99,80

18044,35

100,00

A Ó Í-L

ÁN

5

H

4

TO

Tổng

Kết quả:

D

IỄ N

Đ

ÀN

-

•

Trung bình: 99,80%;

•

Số kết quả: n = 6;

•

Độ lệch chuẩn: 0,01%.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Thời gian lưu

B

Pic

10 00

TR ẦN

Báo cáo phần trăm diện tích- sắp xếp theo tín hiệu:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

G

Đ

ẠO

TP

.Q

U Y

N

H

Ơ

N

•

H Ư

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

-

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ii.

http://daykemquynhon.ucoz.com

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Mất khối lượng do làm khô:

iii.

-

Điều kiện: 105℃ trong 4 giờ;

-

Không phát hiện thấy một lượng đáng kể hàm lượng chất bay hơi (< 0,05%).

PL-9

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

iv.

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Tro sulfat: Kết quả: dưới giá trị chi tiết thiết lập là < 0,1%.

Phổ cộng hưởng từ hạt nhân định lượng (qNMR): Dung môi DMSO-d6 với acid 3,5-Dinitrobenzoic làm chuẩn nội.

-

Kết quả:

H

Ơ

N

-

Trung bình: 99,67%;

•

Số kết quả: n = 6;

•

Độ không đảm bảo đo: 0,40%.

-

Tro sulfat: không phát hiện;

-

Phân tích:

-

qNMR: 99,67%;

N H Ư TR ẦN

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

Phân tích được đánh giá là 99,7% nguyên trạng, độ không đảm bảo đo là 0,4%.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Mất khối lượng do làm khô: không phát hiện;

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

-

Đ

Độ tinh khiết HPLC: 99,80%;

G

-

ẠO

TP

 Kết quả cối cùng:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

•

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

v.

PL-10

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ph᝼ l᝼c 4: Thiáşżt láş­p 6 chẼt chuẊn gáť&#x2018;c Theo tĂĄc giả S.Mathkar, trong nghiĂŞn cᝊu thiáşżt láş­p chẼt chuẊn trĂŞn 16 chẼt chuẊn (trong Ä&#x2018;Ăł cĂł 6 chẼt chuẊn gáť&#x2018;c):

N

Ä?áť&#x2122; tinh khiáşżt chẼt chuẊn gáť&#x2018;c Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh toĂĄn theo cân báşąng kháť&#x2018;i lưᝣng (mass

H

Ć

balance):

.Q

Ä?

hᝣp) vĂ so sĂĄnh váť&#x203A;i xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt báşąng DSC. Ä?áť&#x2122; chĂŞnh láť&#x2021;ch Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt giᝯa

H ĆŻ

Ä?áť&#x2122; đ??­đ??˘đ??§đ??Ą đ??¤đ??Ąđ??˘áşżđ??­ Ä&#x2018;ĂŁ đ??ąĂĄđ??&#x153; đ??§đ??Ąáş­đ??§

Ă&#x2014; 100

Káşżt quả Ä&#x2018;ưᝣc trĂŹnh bĂ y áť&#x; bảng 4.1.

B

Bảng 4.1 So sĂĄnh káşżt quả Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt thu Ä&#x2018;ưᝣc thĂ´ng qua DSC váť&#x203A;i káşżt quả Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh

10 00

khiáşżt thu Ä&#x2018;ưᝣc thĂ´ng qua sắc kĂ˝ vĂ cĂĄc káťš thuáş­t phân tĂ­ch khĂĄc

A

Loấi chẼt

Ă&#x201C;

Tên hᝣp chẼt

Ă?-

H

chuẊn

ChẼt chuẊn

Dipropionat

gáť&#x2018;c

TO

Ă N

-L

Betamethason

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

Propylparaben

D

|Ä?áť&#x2122; đ??­đ??˘đ??§đ??Ą đ??¤đ??Ąđ??˘áşżđ??­ Ä&#x2018;ĂŁ đ??ąĂĄđ??&#x153; đ??§đ??Ąáş­đ??§ â&#x20AC;&#x201C; Ä?áť&#x2122; đ??­đ??˘đ??§đ??Ą đ??¤đ??Ąđ??˘áşżđ??­ đ??&#x192;đ??&#x2019;đ??&#x201A;|

TR ẌN

Ä?áť&#x2122; chĂŞnh láť&#x2021;ch Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt =

N

G

Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt DSC vĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt Ä&#x2018;ĂŁ xĂĄc nháş­n Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh toĂĄn sáť­ d᝼ng cĂ´ng thᝊc sau:

ChẼt chuẊn gáť&#x2018;c

Ethinyl

ChẼt chuẊn

Estradiol

gáť&#x2018;c

Loratadin

ChẼt chuẊn gáť&#x2018;c

N-Methyl

ChẼt chuẊn

desloratadin

gáť&#x2018;c

Ä?áť&#x2122; tinh khiáşżt Ä&#x2018;ưᝣc chᝊng nháş­n (%)

Ä?áť&#x2122; tinh khiáşżt DSC (%)

Ä?áť&#x2122; cháť&#x2021;nh láť&#x2021;ch Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt (%)

99,2

99,2

0,0

100,0

100,0

0,0

100,0

99,9

0,1

100,0

99,7

0,3

98,0

99,8

1,8

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

áş O

cĂĄc káťš thuáş­t: cắn sau nung, Karl Fischer hoạc mẼt kháť&#x2018;i lưᝣng do lĂ m khĂ´, TGAâ&#x20AC;Ś thĂ­ch

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

XĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp cân báşąng kháť&#x2018;i lưᝣng (trong Ä&#x2018;Ăł sáť­ d᝼ng

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ä&#x2018;áť&#x2122; Ẋm)/100].

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U Y

N

= [Ä?áť&#x2122; tinh khiáşżt theo sắc kĂ˝ Ă&#x2014; (100 â&#x20AC;&#x201C; tấp chẼt vĂ´ cĆĄ â&#x20AC;&#x201C; dung mĂ´i táť&#x201C;n dĆ° hoạc

PL-11

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Tuy nhiên, kết quả DSC chỉ đáng tin cậy đối với các hợp chất có độ tinh khiết cao (≥ 98%), có các điểm nóng chảy rõ ràng và không có các điều kiện ảnh hưởng đến nhiệt độ nóng chảy của chúng. Hơn nữa, phân tích DSC chỉ nên được thực hiện để xác minh độ tinh khiết của các CCĐC có độ tinh khiết đã được xác định bằng các kỹ thuật phân

Ơ

N

tích khác được đề xuất trong Dược điển Châu Âu [26], [58].

N

H

Đối với chất chuẩn có độ tinh khiết lớn hơn hoặc bằng 98%, khác biệt phần trăm

.Q

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

khác [58].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ít hơn 1,0% so với độ tinh khiết thu được thông qua sắc ký và các kỹ thuật phân tích

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Đặc biệt, đối với chất chuẩn gốc có độ tinh khiết cao hơn, độ tinh khiết DSC khác biệt

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

độ tinh khiết giữa độ tinh khiết đã được xác nhận và độ tinh khiết DSC là nhỏ hơn 2,0%.

PL-12

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phụ lục 5: Xác định độ tinh khiết của chất chuẩn gốc Theophylin bằng phương pháp cân bằng khối lượng và DSC Theo tác giả Kang Ma, trong nghiên cứu xác định độ tinh khiết của theophylline

H

Ơ

Độ tinh khiết = (100% - % tạp chất không bay hơi) × (100% - % tạp

N

theo phương pháp cân bằng khối lượng, HPLC và DSC:

.Q

do làm khô; với tạp chất không bay hơi, mỗi loại được xác định và định lượng bằng

G

Đ

phép đo khối phổ và sắc ký. kết quả độ tinh khiết của chất chuẩn đối chiếu theo phương

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

pháp cân bằng khối lượng là 99,82 % và theo DSC là 99,79 % [48].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

độ Karl Fischer, hàm lượng tro được xác định thông qua phương pháp mất khối lượng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

chúng được xác định bằng kỹ thuật TGA, hàm lượng nước được đo lường bằng chuẩn

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Trong đó: các tạp chất dễ bay hơi bao gồm dung môi tồn dư và hàm lượng của

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

chất bay hơi - % nước - % tro) × 100%

PL-13

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial