TÌM HIỂU VỀ NGỘ ĐỘC RƯỢU & BÁO CÁO THỰC HÀNH THÍ NGHIỆM VI SINH THỰC PHẨM

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

Đề tài:

TR ẦN

Nhóm 09

Ó

A

10 00

B

Sinh viên thực hiện: Lê Thị Thuận (2006150160) Đặng Thị Phương (200615015)

-H

Nguyễn Thị Kiến Trúc (2006150099)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

Trần Thị Hồng Kim (2006150194)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

BÁO CÁO TIỂU LUẬN VỆ SINH AN TOÀN THỰC PHẨM

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

KHOA CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM

TP.HỒ CHÍ MINH, NĂM 2017 MỤC LỤC

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

MỞ ĐẦU ................................................................................................................... 1 Chương 1: Thực trạng đáng lo ngại về ngộ độc rượu ........................................... 2 1.1.Tìm hiểu chung: ................................................................................................ 2

H

Ơ

1.3. Thực trạng đáng báo động về số người ngộ độc rượu: .................................... 5

N

1.2.Mức độ tiêu thụ rượu ở nước ta: ....................................................................... 3

N

Chương 2: Nguyên nhân và tác hại của ngộ độc rượu: ........................................ 5

TP

2.2.1.Rượu là chất gây nghiện: ............................................................................ 6

Đ ẠO

2.2.2.Rượu có nhiều nguy cơ gây ung thư:.......................................................... 7 2.2.3.Rượu gây khuyết tật cho thai nhi: ............................................................... 7

N

G

Chương 3: Biện pháp và cách xử lí ......................................................................... 7

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.1.Cách nhận biết rượu pha cồn: ........................................................................... 7

TR ẦN

3.2.Cách phòng tránh ngộ độc rượu: ....................................................................... 8 3.3.Cách xử lí khi bị ngộ độc: ................................................................................. 9 Chương 4: Kết luận ................................................................................................ 11

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TÀI LIỆU THAM KHẢO: .................................................................................... 12

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

2.2.Tác hại của ngộ độc rượu: ................................................................................. 6

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

2.1.Nguyên nhân gây ra ngộ độc rượu: ................................................................... 5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

Rượu là một phương tiện để người ta có thể giao lưu với nhau, có thể xích lại gần nhau hơn. Xét về khía cạnh tâm lý, rượu là chất giúp người ta cân bằng các loại cảm xúc như cô đơn, đau buồn, vui sướng… Nhưng ít người trong số chúng ta biết được cái thứ “thuốc tiên hạnh phúc” này có những ảnh hưởng đến tinh thần và thể xác của bạn như thế nào. Rượu là các loại thức uống có chứa cồn được chế biến dưới nhiều dạng khác nhau: Bia, nước giải khát có gas, rượu đế, rượu nếp than, rượu thuốc trong và ngoài nước….. Về mặt khoa học rượu là một dung dịch gồm nước và cồn (trong đó cồn chiếm từ 1% đến 50% tính theo thể tích) ngoài ra các thành phần chính trên rượu còn chứa một lượng nhỏ các chất riêng biệt của mỗi nhà sản xuất nhằm tạo nên mỗi loại rượu một màu sắc, một hương vị đặc thù. Việc lạm dụng kéo dài bia rượu có thể gây ra những tổn hại lâu dài đến sức khỏe của bạn. Những tác động này rất khó hồi phục và cũng rất nguy hiểm cho sức khỏe con người.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Rượu là một loại đồ uống khá phổ biến, hầu như nó không thể thiếu trong các bữa tiệc từ liên hoan, sinh nhật, cưới hỏi, hay có những chuyện vui, buồn.... Rượu là một trong nhiều chất độc hại mà con người tự nguyện tiêu thụ. Bất chấp các cảnh báo của giới y học lẫn ngoài y học, sản lượng rượu bia vẫn đang liên tục gia tăng. Rượu lại rất phổ thông, được quảng cáo hợp pháp, được bán rộng rãi và được nhiều người uống. Hiện nay các đối tượng tiêu thụ rượu ngày càng có độ tuổi hơn. Viện Chiến Lược & Chính Sách.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

U

Y

N

H

Ơ

MỞ ĐẦU Trong những vấn đề xã hội đang được rất nhiều người quan tâm hiện nay chính là tình hình về ngộ độc rượu. Trên các phương tiện thông tin đại chúng, chúng ta thấy xuất hiện ngày càng nhiều những tin tức hình ảnh về việc ngộ độc rượu ở nước ta hiện nay gây ra nhiều hậu quả không tốt đến sức khoẻ của mỗi người. Vậy diễn biến của tình trạng trên đang ra sao, tôi không dám khẳng định trong bài viết này đã thực sự có cái nhìn tổng quan nhưng hi vọng nó sẽ cung cấp cho bạn đọc những nhìn nhận về tình trạng ngộ độc rượu đang hằng ngày hằng giờ tồn tại xung quanh cuộc sống chúng ta.

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

1 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 1: Thực trạng đáng lo ngại về ngộ độc rượu

H

Ơ

1.1.Tìm hiểu chung: - Ethanol là thành phần của các thức uống có cồn, là dung môi của các dược phẩm,

N

Những nghiên cứu mới nhất cho thấy, Việt Nam đang là nước sử dụng rượu bia ở mức cao báo động khi đứng thứ 2 trong khu vực, đứng thứ 10 Châu Á và thứ 29 trên thế giới.

N

là chất pha loãng trong nhiều sản phẩm gia đình như nước súc miệng, nước hoa, và

Đ ẠO

- Methanol còn gọi là alcol methylic, carbinol hay đơn giản hơn là rượu gỗ. Đó là chất lỏng không màu, dễ bốc cháy, mùi vị giống rượu ethanol, có các lý tính

G

như ethanol... Methanol được dùng trong công nghiệp thí dụ như pha chế các loại

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

sơn đánh bóng đồ gỗ, chất lau kính xe, chế mực in cho máy photocopy... Và để methanol nên còn gọi là cồn xanh

TR ẦN

tránh nhầm lẫn với các loại dùng để uống, người ta cho chất màu xanh vào

- Hiện nay chưa có thống kê nào cho biết chính xác trên thế giới có bao nhiêu loại

10 00

B

rượu. Tuy vậy tất cả những thức uống này có chung một đặc điểm là chứa chất cồn ethylic.

Ó

A

 Bia là nước giải khát có nồng độ cồn thấp (2.5% - 8%). Do bia không thông

Ý

khỏe.

-H

qua chưng cất nên có nhiều vitamin và nếu uống vừa phải thì có lợi cho sức

-L

 Rượu vang là rượu lên men không chưng cất từ nước ép trái nho hoặc nước

TO

ÁN

chiết xuất lấy ra từ cách ngâm đường một số hoa quả khác. Nồng độ cồn trong rượu vang thay đổi từ 8% đến 13% tùy loại rượu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

chứa methanol sẽ dẫn đến ngộ độc và thậm chí là tử vong.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

những chất chiết xuất. Việc sử dụng quá nhiều và không đúng cách các sản phẩm có

D

IỄ N

Đ

ÀN

 Rượu mạnh là rượu chưng cất thường có nồng độ cồn trên 20%. Các loại rượu trắng, rượu đế, rượu nếp, rượu gạo là cách gọi của loại rượu sản xuất từ nguyên liệu chính chứa tinh bột như gạo, nếp, bắp... qua công đoạn lên men và chưng cất theo cách thủ công. Việt Nam có các làng nghề sản xuất rượu đế nổi tiếng và các loại rượu này có độ cồn từ 30% - 40%. Các loại rượu mạnh nhập khẩu như Whisky, Jonny Walker, Brandy, Martin, Gin... có nồng độ cồn từ 40% - 60% -Những loại rượu có hàm lượng cồn cao: 2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

 Rượu chế ra từ cồn công nghiệp: dùng cồn công nghiệp pha với nước lã tạo ra rượu trắng sau đó thêm nước cốt rượu gạo, rượu nếp... tùy theo yêu cầu hoặc pha với nước cốt thảo mộc cho ra rượu thuốc, ngâm đủ thứ loại cho ra pín.

H

Ơ

 Dùng nguyên liệu có lẫn bã (gỗ): nếu tận dung bã mía vụn hoặc mật mía

N

rượu khế, rượu nhàu, rượu rắn, rượu trứng kiến, rượu ngọc dương, rượu ngầu

N

cặn khi trong quá trình lên men và chưng cất, bã sẽ phân hủy cho ra hàm

Đ ẠO

thực phẩm hay cồn được dung hòa với nước để có rượu. Một lượng lớn rượu bán trên thị trường chế theo cách này. Tuy nhiên để tăng lợi nhuận,

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

những nhà làm rượu theo kiểu này thường mua cồn có chất lượng kém hơn,

H Ư

có giá thấp hơn. Loại cồn có chất lượng kém này vốn có hàm lượng

TR ẦN

methanol aldehyt, aceton cao vượt tiêu chuẩn.

 Do không loại bỏ phần rượu chứa methanol lúc đầu: khi chưng cất rượu trắng có 3 phần rượu thu được. Phần rượu đầu ngoài ethanol ra, còn

10 00

B

có các tạp chất độc hại là methanol, acetaldehyde, các acid và ester có độ sôi thấp. Phần rượu giữa, phần nhiều là cồn ethanol dùng uống. Phần rượu

A

cuối, có chất độc furfurol, các cồn khác độc hơn ethanol và ester, chúng

-H

Ó

có độ sôi cao và rất độc cho cơ thể.  Do “sáng kiến” nâng cấp rượu: nếu rượu đủ tiêu chuẩn thường phải đạt 45

-L

Ý

độ. Những người chế rượu thường chỉ nấu rượu nồng độ khoảng 20 -30 độ;

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

sau đó tiến hành pha thêm cồn để biến rượu dở thành rượu “xịn”.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

 Chế từ loại cồn ethylic kém chất lượng: thông thường vẫn có thể dùng cồn

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

niên 80 với những rượu chưng cất từ khoai mì trộn với mạt cưa.

U

Y

lượng methanol trong rượu sẽ rất cao. Đã từng xảy ra ngộ độc rượu vào thập

1.2.Mức độ tiêu thụ rượu ở nước ta:

3 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Mỗi năm Việt Nam chi khoảng 3 tỉ USD cho việc sử dụng rượu bia, là nước sử dụng nhiều nhất ở Đông Nam Á. Một con số thật kinh khủng.

- Việt Nam có hơn 400 nhà máy bia, trung bình mỗi người tiêu thụ khoảng 32 lít bia, là nước bán bia rẻ nhất thế giới.Theo thống kê Việt Nam còn là nước sử dụng

N Y

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

chóng điều này tỉ lệ thuận với số người bị ung thư ở nước ta. Tổng số lượng bia

H Ư

dược nhập khẩu năm 2010 là 3,3 triệu lít và tăng lên 4,1 triệu lít vào năm 2012. Nhà quốc gia tiêu thụ bia nhiều nhất.

TR ẦN

máy sản xuất bia nhiều, lượng tiêu thụ lớn vì thế mà Việt Nam đã đứng trong tốp 25

10 00

B

- Mỗi năm Việt Nam còn tiêu thụ khoảng 200 triệu lít rượu không chính thống do người dân tự nấu. Trung bình, một người nam giới trưởng thành uống khoảng 27,4

A

lít cồn nguyên chất. Nước ta là một trong số những quốc gia đứng hàng đầu thế giới

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

về tỷ lệ này.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

-Khối lượng bia rượu được tiêu thụ không hề giảm đi mà tăng lên một cách nhanh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q TP Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

1,29 tỷ lít (2003)

4,5 tỷ lít (2015)

3 tỷ lít (2013)

2,8 tỷ lít (2012)

H

Ơ

N

rượu bia tăng nhanh trong vòng vài năm qua:

4 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

1.3. Thực trạng đáng báo động về số người ngộ độc rượu: - Theo thống kê của Bộ Y tế, từ ra Tết Nguyên đán đến nay, cả nước đã xảy ra hàng chục vụ ngộ độc rượu, với số nạn nhân lên đến hàng trăm người. Cụ thể như:

 Ngộ độc rượu ở Lai Châu, khiến hơn 80 người nhập viện, trong đó 9 người

Ơ

N

bị chết.

N

H

 Ngộ độc rượu ở Hà Giang, khiến 86 người nhập viện.

Y

 Riêng ở Hà Nội, trước và sau Tết, đã có gần 20 người ngộ độc rượu phải vào

Đ ẠO

phải nhập viện do ngộ độc rượu, trong đó có 3 người bị hôn mê sâu, phải thở máy và lọc máu, tình trạng hết sức nguy kịch.

G

- Điều đáng lưu ý, đa số các trường hợp ngộ độc này đều có liên quan đến uống

N H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

rượu chứa methanol.

TR ẦN

Chương 2: Nguyên nhân và tác hại của ngộ độc rượu: 2.1.Nguyên nhân gây ra ngộ độc rượu:

Nguyên nhân của ngộ độc rượu là do lạm dụng rượu, uống rượu vượt quá mức

10 00

B

chấp nhận của cơ thể, do sử dụng rượu không đảm bảo an toàn thực phẩm như: uống phải rượu pha cồn công nghiệp methanol hoặc ethylene glycol; do uống rượu

A

ngâm với thảo mộc (như lá, rễ, hạt cây) hoặc ngâm với động vật (như mật, phủ

-H

Ó

tạng…)

- vì trong rượu tồn tại nhiều chất gây nguy hiểm cho người sử dụng:

-L

Ý

 Isopropyl, Được tìm thấy trong rượu xát, sữa và một số sản phẩm tẩy rửa.

ÁN

 Methanol, một thành phần phổ biến trong các chất chống đông, sơn và dung

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

môi.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

tử vong. ngày 9/3/2017, có 7 sinh viên gồm 5 nam, hai nữ, tại Cầu Giấy, đã

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

U

Trung tâm chống độc của Bệnh viện Bạch Mai cấp cứu, trong đó 5 người đã

 Ethanol, tìm thấy trong đồ uống có cồn, nước súc miệng và một số thuốc.

5 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Cồn methanol rất độc vì nó được phân hủy trong cơ thể (ở gan) do enzyme alcohol dehydrogenase để cho ra formaldehyde (H 2CO). Chất này lại được oxit hóa cho ra formic acid (CH 2O2). Formic acid gây tăng độ acid (acidosis) trong máu, dẫn đến - Bản chất ethanol không có độc tính cao, trong quá trình chuyển hóa, ethanol sinh

H

Ơ

ra acetaldehyde, có tác động ức chế hệ thần kinh.

N

suy hô hấp và ngưng thở.

N

BS Nguyễn Trung Nguyên: Nguyên nhân là do hiện nay, người Việt Nam uống

N

G

Đ ẠO

hơn, nhiều hơn ngày xưa...

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

-H

Ó

Một bệnh nhân ngộ độc rượu nặng đang điều trị tại Bệnh viện Bạch Mai. 2.2.Tác hại của ngộ độc rượu:

-L

Ý

2.2.1.Rượu là chất gây nghiện:

ÁN

- Nếu sử dụng rượu thường xuyên và trong thời gian dài nó làm cho chúng ta bị

TO

nghiện và khó mà bỏ được.Nghiện rượu lâu dài làm hủy hoại cơ thể, ảnh hưởng đến

Đ

ÀN

gia đình và xã hội.

IỄ N D

TP

uống rượu, bia. Những năm gần đây kinh tế phát triển, đối tượng uống rượu nhiều

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

lên và tình trạng uống bia cũng rất nhiều; khắp nơi, chỗ nào cũng thấy tụ tập để

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

quá nhiều rượu, uống ở mức kinh khủng! Lượng rượu tiêu thụ hàng năm đang tăng

 Đối với đất nước: Một quốc gia mà chỉ tồn tại những con người suốt ngày say xỉn, sức khỏe kém chắc chắn quốc gia đó sẽ chẳng thể nào phát triển được, không có sức khỏe không có tinh thần làm sao có thể làm việc được. Đất nước đó cũng mãi tụt lùi không ngóc lên được.  Đối với cá nhân :

6 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

+ Tim là cơ quan dễ bị tác động bởi rượu nên người uống rượu dễ bị bệnh cao huyết áp, xơ mỡ động mạch, cơn đau thắt ngực, nhồi máu cơ tim, đột quỵ. hấp thu chất đạm, chất đường, chất béo, vitamin B9, B12. Bia rượu có thể

H

Ơ

làm tăng khả năng dị ứng với thức ăn và giảm khả năng đề kháng, gây viêm

N

+ Rượu bia tác động lên các vi khuẩn đường ruột, làm giảm sút khả năng

Y

N

loét dạ dày, viêm tụy mạn tính.

giảm tình dục.

G

2.2.2.Rượu có nhiều nguy cơ gây ung thư:

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

- Theo American Cancer Society người uống trên 45 ml rượu mỗi ngày thì có nguy cơ bị ung thư miệng, cuống họng. Riêng đối với phụ nữ thì tăng nguy cơ ung thư

TR ẦN

vú.

- Rượu làm xơ cứng gan, dẫn đến ung thư gan. Tùy theo thời gian và mức độ nghiện

B

rượu của mỗi người mà dẫn đến tình trạng tổn thương gan khác nhau. Giai đoạn

10 00

sớm gan có thể bị thoái hóa mỡ. Giai đoạn này người bệnh chưa có biểu hiện lâm sàng và thường chỉ chẩn đoán qua hình ảnh siêu âm . Nặng hơn, rượu có thể gây

Ó

A

viêm gan biểu hiện bằng chứng chán ăn, mệt mỏi, thỉnh thoảng đau tức vùng hạ

-H

sườn và vàng da. Lâu ngày gan có thể trở nên chai cứng, chức năng gan suy giảm

-L

Ý

nặng nề: lách to, mắt vàng, bụng chướng, chân phù, men gan tăng... sau cùng là hôn

ÁN

mê và tử vong.

TO

2.2.3.Rượu gây khuyết tật cho thai nhi: - Khi mang thai dù uống rượu ít cũng không tốt, còn nếu uống nhiều và kéo dài, liên

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

+Phụ nữ uống nhiều rượu sẽ dẫn đến tình trạng kinh nguyệt không đều, suy

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

+ Nam giới uống nhiều rượu sẽ gây suy giảm khả năng tình dục, giảm chất lượng và số lượng của tinh trùng.

D

IỄ N

Đ

ÀN

tục thì sẽ rút ngắn thai kỳ, đứa trẻ đầu nhỏ, mặt dị dạng, tim hư, trí tuệ đần độn...

Chương 3: Biện pháp và cách xử lí 3.1.Cách nhận biết rượu pha cồn: ✓ Cảm quan bên ngoài Chai rượu phải có đầy đủ nhãn mác, thông tin như tên sản phẩm, tên địa chỉ của nhà sản xuất, tên địa chỉ của nhà nhập khẩu... Ngoài ra có thể ngửi nếu mùi cồn thơm, cay nồng là tốt.

7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

✓ Quan sát bọt rươu.

Lật ngược chai rượu, nếu là rượu xịn, bọt khí sẽ rất mịn và đều , di chuyển chậm tỏa ra các hướng rồi mới nổi dần lên. Nếu là rượu giả bọt khí sẽ to, nổi lên theo chiều thẳng đứng với tốc độ nhanh hơn.

Ơ

H

Đổ rượu ra lòng bàn tay, xát 2 tay vào nhau để nhận ra rượu pha cồn công nghiệp.

N

✓ Dùng tay kiểm tra

N

Trước khi uống rượu, đổ một chút rượu ra lòng bàn tay, xát 2 tay vào nhau một lúc

Đây là cách rất dễ áp dụng và có độ chính xác cao. Cho chai rượu vào ngăn đá trong

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

1 ngày, nếu là rượu hảo hạng sẽ không bao giờ đông, còn nếu là rượu sản xuất bằng

H Ư

men vi sinh chai rượu sẽ đông 1 nửa, nếu chai rượu đông cứng 100% thì đó là rượu

TR ẦN

được làm bằng cồn. ✓ Thử trực tiếp

B

Đây là cách bạn không nên sử dụng, tuy nhiên sẽ là 1 kinh nghiệm để lần sau tránh

10 00

không quay lại những nhà hàng hay quán ăn mà bạn uống rượu ở đó nữa.

Nếu uống rượu gạo xịn thì sẽ cảm giác rất êm, không bị sốc, say từ từ và khi tỉnh

Ó

A

dậy không bị đau đầu hay háo nước.

-L

Ý

-H

3.2.Cách phòng tránh ngộ độc rượu: - Không uống quá nhiều rượu (<30 ml/người/ngày nồng độ từ 30 độ trở lên/ngày).

ÁN

- Không uống cồn công nghiệp và rượu có hàm lượng Methanol 0,05% vì gây mù

TO

mắt và tử vong cao.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

✓ Cho rượu vào ngăn đá tủ lạnh

.Q

ra tay sẽ lâu hết mùi rượu hơn và tay sẽ có cảm giác hơi dính.

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

không còn mùi. Nếu là rượu gạo nấu thật, khi vừa mở nắp chai sẽ có mùi thơm, đổ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

cho nóng lên. Nếu là rượu pha cồn công nghiệp thì sẽ bốc hơi nhanh, một lúc sau sẽ

D

IỄ N

Đ

ÀN

- Không uống rượu chung với thuốc men, nhất là paracetamol - Không uống rượu khi: + Không biết đó là rượu gì. + Rượu không rõ nguồn gốc. + Khi đang đói, mệt hoặc căng thẳng. + Rượu không có giấy chứng nhận lưu hành của cơ quan chức năng có thẩm quyền.

8

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Không uống rượu pha chế, rượu ngâm với lá, rễ cây độc, phủ tạng động vật không rõ ràng độc tính, mật cá, hay những rượu ngâm theo kinh nghiệm cá nhân.

G

tiến hành các bước sơ cấp cứu tại chỗ cho nạn nhân để tránh những hậu quả đáng

N H Ư

•

Kê gối cho nạn nhân nằm, đầu và vai cao hơn.

•

Nếu nạn nhân bất tỉnh kèm theo hiện tượng ứ đọng đờm rãi, thở khò khè cần

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

tiếc xảy ra.

B

cho nằm nghiêng một bên và tìm cách gây nôn, xát mạnh hai bên má.

Nếu thời tiết lạnh cần ủ ấm cho bệnh nhân.

•

Không để bệnh nhân ngủ li bì suốt ngày hoặc đêm. Cách vài giờ phải đánh

A

10 00

•

-H

Ó

thức bệnh nhân dậy. Cho ăn cháo loãng để tránh hạ đường huyết nếu bệnh

Ý

nhân tỉnh và có thể ăn uống.

Nếu lay gọi người bệnh không tỉnh, ứ đọng đờm rãi nhiều, thở sâu, thở

-L

•

ÀN

TO

ÁN

nhanh thậm chí co giật... hoặc có tỉnh dậy nhưng đau đầu, chóng mặt, sợ ánh giữ bệnh nhân ở tư thế cao đầu, nằm nghiêng an toàn và nhanh chóng gọi xe

Đ

cấp cứu chuyển bệnh nhân tới các cơ sở y tế hoặc bệnh viện.

•

Không cho nạn nhân uống thuốc giải độc rượu, các loại thuốc chống nôn, thuốc giảm đau, hạ sốt... Nên uống nhiều nước để không bị mất nước khi nôn

D

IỄ N

sáng, vã mồ hôi, chân tay lạnh, da xanh tái, mờ hoặc mất hẳn thị lực... cần

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

- Khi thấy có người uống rượu có biểu hiện ngộ độc rượu, chúng ta nhanh chóng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

3.3.Cách xử lí khi bị ngộ độc:

liên tục. Uống nước ấm tốt hơn là nước lạnh.

•

Nước chè xanh đậm giúp khử độc cồn cấp tính, hoặc uống sữa nóng, nước gừng tươi (thái lát đun sôi kỹ) để máu lưu thông, hóa giải nhanh chất cồn.

9

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

G

nước để uống. Hoặc 1 nắm đậu xanh giã nát, ít trà mạn và 1 chén nước, đun

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

lên để uống. Nếu bị say kèm đau đầu, hãy giã rau cần tươi hoặc lá dong rồi

TR ẦN

vắt lấy nước cốt để uống sẽ rất hiệu quả.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

• Người ngộ độc rượu không tắm ngay vì dễ bị hạ đường huyết, giảm thân nhiệt có thể gây đột quỵ, trụy tim mạch. Nên ăn nhiều rau xanh, hoa quả, đậu nành để cung cấp vitamin và chất chống ôxy hóa, hạn chế tác hại của cồn trong rượu tới hoạt động của gan.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

• Có thể dùng 3 lát gừng tươi giã nát, trộn với một ít giấm và đường, ép lấy

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

• Các loại nước mía, nước chanh, cam vắt, nước cà chua, nước ép bưởi, sinh tố chuối, nước các loại đậu ninh nhừ… uống nhiều lần sẽ giải được ngộ độc rượu dạng nhẹ.

10 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 4: Kết luận - Muốn tình trạng ngộ độc rượu được hạn chế thì mỗi người trong chúng ta hãy tự ý thức hơn nữa, hãy biết trân trọng và bảo vệ sức khỏe của mình. Không chỉ bảo vệ được sức khỏe của mình khi hạn chế sử dụng rượu bia lại mà nó còn góp phần làm

Ơ

N

giảm các tệ nạn xã hội để đất nước ngày càng văn minh, phát triển hơn.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

- Chúng ta cần sớm ban hành Luật phòng chống tác hại rượu bia, trong đó tập trung vào kiểm soát quảng cáo rượu, bia, đặc biệt trong bối cảnh mạng xã hội phát triển và chưa được kiểm soát hiệu quả. Mặt khác, quy định về điểm bán, giờ bán, quản lý rượu tự nấu/rượu thủ công, kiểm soát sử dụng rượu bia ở trẻ em, phòng chống uống rượu bia khi lái xe…

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Vì vậy, để bảo đảm sức khỏe cho bản thân, tốt nhất mọi người nên hạn chế uống rượu, nếu có uống rượu thì nên chọn loại rượu có thương hiệu uy tín, bảo đảm an toàn thực phẩm và chỉ uống ít. Tuyệt đối không uống hoặc pha chế rượu từ cồn công nghiệp, vì có thể gây mù mắt hoặc tử vong. Không uống rượu nồng độ từ 30 độ trở lên vượt quá 30ml/người/ngày. Không uống rượu ngâm với lá, rễ cây, phủ tạng động vật không rõ độc tính, hoặc rượu ngâm theo kinh nghiệm cá nhân. Không uống rượu khi không biết rượu đó là rượu gì, rượu không rõ nguồn gốc xuất xứ. Đặc biệt, không được uống rượu khi đang đói, mệt nhọc hoặc đang uống thuốc điều trị bệnh. Nếu có dấu hiệu bất thường sau khi uống rượu, cần đến ngay các cơ sở y tế gần nhất để được khám, theo dõi và điều trị kịp thời.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

N

H

- Bên cạnh đó thì các cơ quan chức năng, các bộ, ngành cần có những biện pháp kịp thời để ngăn chặn, thường xuyên giám sát , kiểm tra. Đưa ra những biện pháp xử lí nghiêm hơn nữa đối với những trường hợp vi phạm.

11 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

TÀI LIỆU THAM KHẢO: [1] http://tailieu.vn/doc/ngo-doc-ruou-622243.html [2] https://vi.wikipedia.org/wiki [3] http://vnexpress.net/ngo-doc-ruou/tag-61232-1.html

H

Ơ

N

[4] Báo lao động ngày 26/9/2016

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

[5]Báo tuổi trẻ ngày 28/02/2017

12 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP. HCM

Ơ

N

KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC VÀ THỰC PHẨM

TR ẦN

H Ư

THÍ NGHIỆM VI SINH THỰC PHẨM

GVHD: Ts. Trịnh Khánh Sơn

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

NHÓM 1 SVTH:

MSSV

Trần Thị Như Hảo

16116126

Hà Thị Trinh

16116187

Trương Thị Thu

16116176

Trần Thị Sao Mai

16116148

Nguyễn Thị Yến

16116200

Hoàng Ngọc Thương

16116179

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

BÁO CÁO THỰC HÀNH

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H



D

IỄ N

Đ

Lớp thứ 3,5,7 – tiết 15

Tp. Hồ Chí Minh, tháng 7 năm 2018

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC Bài 1: TIÊU BẢN GIỌT TREO VÀ TIÊU BẢN GIỌT ÉP.................................................. 4 BÀI 3: NHUỘM GRAM .......................................................................................................... 9

H

Ơ

Bài 4: NHUỘM BÀO TỬ ....................................................................................................... 13

N

Bài 2: TẠO VẾT BÔI VÀ NHUỘM ĐƠN ............................................................................. 7

N

Bài 5: KĨ THUẬT PHÒNG ẨM (QUAN SÁT NẤM SỢI) ................................................. 16

Đ ẠO

TP

Bài 8: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MEN, NẤM MỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC................................................................................................................ 27

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Bài 9: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHI BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC................................................................................................................ 31

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Bài 7: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN .............................. 23

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

Bài 6: KỸ THUẬT CẤY RIA ................................................................................................ 19

1

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

Hình 1. 1: Tiêu bản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 .............................. 4 Hình 1. 2: Vi khuẩn hình que trong nước dưa cải muối chua nhuộm bằng crystal violet được quan sát ở độ phóng đại ×1000.................................................................................................. 7 Hình 1. 3: Cấu trúc thành tế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ......... 10 Hình 1. 4: Kết quả nhuộm bào tử ............................................................................................. 13 Hình 1. 5: Nấm sợi.................................................................................................................... 16 Hình 1. 6: Hệ sợi của nấm ........................................................................................................ 17 Hình 1. 7: Kết quả sau khi cấy men bánh mỳ ( bên trái), Yakult (bên phải) lên môi trường. .. 19 Hình 1. 8: Thạch đứng sau khi nuôi cấy bằng mẫu Yakult. ..................................................... 19 Hình 1. 9 a-b: Thạch đứng sau khi nuôi cấy bằng nấm men ................................................... 20 Hình 1. 10: Thạch nghiêng sau khi nuôi cấy bằng nấm men .................................................. 21 Hình 1. 11: Ống nghiệm dương tính ......................................................................................... 23 Hình 1. 12: So sánh ống nghiệm dương tính và ống nghiệm không dương tính. ..................... 24 Hình 1. 13: Ống nghiệm dương tính. ........................................................................................ 25 Hình 1. 14: Khuẩn lạc mọc trên đĩa thạch với độ pha loãng mẫu 10 − 2 ............................... 27 Hình 1. 15: Khuẩn lạc mọc trên đĩa thạch có độ pha loãng mẫu lần lượt là 10 − 3,10 − 4 .. 28

N

DANH MỤC HÌNH

2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

Bảng 1. 1: Kết quả so sánh vi khuẩn lactic nhuộm Gram và nhuộm đơn bằng crystal violet và safranin O ................................................................................................................................... 9 Bảng 1. 2: Tỉ lệ các thành phần có trong cấu trúc của thành tế bào vi khuẩn Gram dương và Gram âm (Nguyễn Lân Dũng và cộng sự, 2003) ...................................................................... 11 Bảng 1. 3:Số ống dương tính .................................................................................................... 23 Bảng 1. 4: Số ống dương tính ở các nồng độ ........................................................................... 24 Bảng 1. 5: Số ống dương tính ở các nồng độ ........................................................................... 24 Bảng 1. 6: Số khuẩn lạc đếm được ở các độ pha loãng ........................................................... 28 Bảng 1. 7: Bảng kết quả ........................................................................................................... 31

N

DANH MỤC BẢNG BIỂU

3

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 1: TIÊU BẢN GIỌT TREO VÀ TIÊU BẢN GIỌT ÉP 1. Mục đích Quan sát được hình dạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống trong

Ơ

Quan sát khả năng di động của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân biệt được

N

môi trường lỏng.

N

H

chuyển động tự thân và chuyển động Brown.

chua bằng việc sử dụng kính hiển vi quang học nền sáng. Trong đó, có nhiều nhất là những vi

Đ ẠO

khuẩn hình que có độ dài ngắn khác nhau, trong suốt (độ tương phản với nền sáng thấp). Các

G

vi khuẩn này đứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi.

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

sự chuyển động của các phân tử nước kéo theo.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Các vi khuẩn này không di động, có sự dịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu do

ÁN

Hình 1. 1: Tiêu bản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000

TO

Kết quả quan sát sự chuyển động của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua:

3. Nhận xét và giải thích

D

IỄ N

Đ

ÀN

https://drive.google.com/open?id=1D0fQmMN8boiHn3Pm0sQXDpDiRPFKOenP

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Kết quả làm tiêu bản thu được hình ảnh của hệ vi sinh vật trong nước dưa cải muối

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

U

Y

2. Kết quả thí nghiệm

Muối dưa là một hình thức lên men quen thuộc nhờ hoạt động của vi khuẩn lactic acid (*). Vi khuẩn lactic và vi khuẩn gây thối ban đầu có thể cùng phát triển, sau một thời gian lượng acid lactic được tích lũy làm ức chế sự phát triển của nhóm vi khuẩn gây thối (Nguyễn Lân Dũng, 2003). Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của môi trường có lợi cho sự phát triển của vi khuẩn lactic acid.

4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

(*) Các vi khuẩn lactic acid được xếp chung vào họ Lactobacteriaece. Các vi khuẩn lactic không đồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn các vi khuẩn hình cầu), Gram dương, không tạo thành bào tử và hầu hết không di động.

Ơ

lactic acid. Các vi khuẩn này có chuyển động Brown, hầu như không di động. Các vi khuẩn

N

Vì thế, hình ảnh thu được trên tiêu bản giọt treo và tiêu bản giọt ép là của vi khuẩn

H

này chỉ dịch chuyển hỗn loạn gần vị trí ban đầu là do sự chuyển động của các phân tử nước

U

Y

N

kéo theo.

G

4. Bàn luận

N

Tiêu bản giọt treo và tiêu bản giọt ép cho ta thấy dễ dàng cách di chuyển của vi sinh

H Ư

vật sống trong môi trường chất lỏng. Đây là phương pháp đơn giản và tiện lợi nhất để tìm

TR ẦN

hiểu về hình dạng và sự chuyển động của vi sinh vật. Tuy nhiên, do kích thước vi khuẩn quá bé và hầu như trong suốt nên để thu được hình thái chính xác của vi khuẩn ta cần có các

B

phương pháp khác.

10 00

Để phân biệt chuyển động Brown và chuyển động tự thân của vi sinh vật trong tiêu

A

bản giọt treo và tiêu bản giọt ép, ta cần quan sát xác định:

-H

Ó

− Quãng đường vi khuẩn di chuyển trong một khoảng thời gian.

Ý

− Hướng di chuyển của vi khuẩn so với hướng dịch chuyển của các phân tử chất lỏng.

-L

Có thể so sánh chuyển động Brown của vi khuẩn lactic trong nước dưa cải muối chua

ÁN

với chuyển động tự thân của vi khuẩn trong nước thịt thối được quan sát bằng tiêu bản giọt

IỄ N

Đ

ÀN

TO

treo để phân biệt sự khác nhau giữa hai loại di chuyển của vi sinh vật.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

thực nhất.

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

TP

trường lỏng nên ta có thể thu được hình dạng và sự di động của vi sinh vật một cách chân

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Tiêu bản giọt treo và tiêu bản giọt ép cho phép quan sát vi sinh vật sống trong môi

Chuyển động của vi khuẩn có trong nước thịt thối:

https://drive.google.com/open?id=1qnRsGtzmw1rrTF2Fa0mxVscsfwxysg4a Khi vi sinh vật quan sát được có di chuyển tự thân, cần có các phương pháp khác để xác định cơ chế di chuyển của vi khuẩn. Những vi khuẩn di chuyển thật sự có thể di chuyển nhờ tiên mao (flagellar motion), di chuyển theo kiểu xoắn ốc (corkscrew-type motion) hoặc uốn khúc (bending-type

motion)

hoặc

trượt

nhẹ

nhàng

(gliding

motion).

Ngoài ra, trong mẫu tiêu bản còn có những vật chất có hình dạng và cách di chuyển khác với

5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

vi khuẩn lactic. Tuy nhiên những vật chất này không phải đối tượng quan sát và không đủ cơ sở để đưa ra những kết luận về chúng. Để thực hiện tiêu bản gọt treo ta cần lưu ý một số điều sau:

H

Ơ

− Tiêu bản giọt treo quan sát được sự chuyển động của vi sinh vật dễ dàng hơn và

N

− Đặt vị trí quan sát tại phía rìa giọt nước vì vi khuẩn tập trung nhiều ở khu vực này.

N

quan sát được các tế bào vi khuẩn có kích thước lớn.

Đ ẠO

Trong khi đó, tiêu bản giọt ép có một số ưu điểm và hạn chế như: − Dụng cụ dễ kiếm, thao tác đơn giản, chuẩn bị mẫu nhanh.

G

− Quan sát được hệ vi sinh vật có trong mẫu tự nhiên.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

− Tiêu bản dễ bị khô do chịu ảnh hưởng của nhiệt độ và đèn chiếu sáng nên không

TR ẦN

giữ được lâu.

Đồng thời, khi sử dụng kính hiển vi quang học nền sáng cho tiêu bản giọt treo và tiêu bản giọt ép, cần điều chỉnh nguồn sáng ở cường độ yếu để những vi sinh vật trong suốt có sự

10 00

B

tương phản với nền sáng để dễ quan sát.

5. Tài liệu tham khảo

-H

Hồ Chí Minh.

Ó

A

Lê Văn Việt Mẫn (2006). Thí nghiệm Vi sinh vật Thực phẩm, NXB. ĐH Quốc gia TP

ÁN

Giáo dục.

-L

Ý

Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2003). Vi sinh vật học. NXB

TO

Webleyd, D. M. (1953). A Simple Method for Producing Microcultures in Hanging

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

vi sinh vật được lâu hơn.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

− Nhờ có một lớp gờ Vaseline giữ ẩm, tiêu bản giọt treo có thể quan sát và giữ mẫu

ÀN

Drops with special reference to Organisms Utilizing Oils.Macaulay Institute for Soil

Anthony W. Thomas (2011). Making a wet mount microscope slide. Microbehunter Microscopy Magazine, 1: 5-6.

D

IỄ N

Đ

Research, Craigiebuckler, Aberdeen 66-71

6

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 2: TẠO VẾT BÔI VÀ NHUỘM ĐƠN 1. Mục đích Tạo vết bôi giúp cố định vi sinh vật lên phiến kính, vi khuẩn bắt màu thuốc nhuộm tốt

Ơ

Nhuộm vi sinh vật bằng phẩm nhuộm có thể xác định được chính xác hình thái, sự sắp

N

hơn để dễ dàng quan sát hình thái và đặc điểm cấu trúc của vi sinh vật.

N

H

xếp, kích thước của vi khuẩn không màu, cũng như xác định được đặc điểm cấu tạo của tế bào

N

G

vi khuẩn lactic acid.

H Ư TR ẦN B 10 00 -H

Ó

A

Hình 1. 2: Vi khuẩn hình que trong nước dưa cải muối chua nhuộm bằng crystal violet được quan sát ở độ phóng đại ×1000

Ý

Tạo vết bôi và nhuộm đơn trên nước dưa cải muối chua cho thấy hình ảnh của các vi

-L

khuẩn hình que có độ dài ngắn khác nhau, bắt màu tím đen của thuốc nhuộm crystal violet.

ÁN

Các vi khuẩn đứng riêng lẻ (A) hoặc xếp thành chuỗi (B), ngoài ra còn có trong hình

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ảnh trường hợp vi khuẩn xếp thành một cụm các tế bào hình que song song.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn được tiến hành trên nước dưa cải muối chua chứa

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

2. Kết quả thí nghiệm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

vi khuẩn dựa trên những thuốc nhuộm chuyên biệt.

3. Nhận xét và giải thích Mẫu nước dưa cải muối chua chứa nhiều vi khuẩn lactic acid. Những vi khuẩn này có

hình que, đứng riêng lẻ hoặc tạo thành chuỗi. Căn cứ vào hình dạng, những vi khuẩn quan sát được được gọi là bacillus (số nhiều là bacilli), khi chúng đứng thành một chuỗi được gọi là streptobacilli.

Trường hợp quan sát được vi khuẩn xếp thành cụm các tế bào hình que song song do các vi khuẩn bước vào quá trình nhân đôi và phân chia. Khi đó, kích thước của vi khuẩn sẽ

7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

nhỏ hơn vi khuẩn trong giai đoạn sinh trưởng nên hình ảnh thu được các vi khuẩn hình que có kích thước khác nhau.

Trong quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn, vết bôi dày sẽ làm vi khuẩn xếp chồng lên

N

nhau dẫn đến khó quan sát chính xác hình dạng, kích thước và cách sắp xếp của vi khuẩn.

H

Ơ

4. Bàn luận

N

Các thành phần trên tế bào vi sinh vật rất nhạy cảm với thuốc nhuộm. Phẩm nhuộm

Đ ẠO

tốt.

Những lỗi thường gặp trong quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn:

N

G

− Tạo vết bôi dày, lượng mẫu vi sinh vật nhiều sẽ làm vi sinh vật xếp chồng lên nhau

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

− Thời gian nhuộm quá ngắn hoặc qúa dài đối với từng loại thuốc nhuộm

TR ẦN

− Lượng thuốc nhuộm dư không được rửa trôi toàn bộ. − Hơ quá nóng làm phá vỡ cấu trúc tế bào vi khuẩn

B

5. Tài liệu tham khảo

10 00

Lê Văn Việt Mẫn (2006). Thí nghiệm Vi sinh vật Thực phẩm, NXB. ĐH Quốc gia TP

A

Hồ Chí Minh

-H

Sociaty of Chemistry.

Ó

M.R.Adams and M.O.Moss.(2000). Food Microbiology. Second Edition. The Royal

ÁN

Giáo dục.

-L

Ý

Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty.(2003), Vi sinh vật học, NXB

TO

TS Trịnh Khánh Sơn (2018). Các kĩ thuật cơ bản trong thực nghiệm vi sinh vật học.

D

IỄ N

Đ

ÀN

NXB Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

thành phần của tế bào để tạo thành muối có khả năng bắt màu và giữ màu phẩm nhuộm rất

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

được sử dụng để nhuộm vi khuẩn có những ion tự do có khả năng kết hợp kết hợp với các

Michael J. Leboffe and Burton E. Pierce. 2010. Microbiology Laboratory Theory &

Application.Third Edition. Morton Publishing Company Churchman, J.W. (1912). The selective bactericidal action of gentian violet, Journal of Experimental Medicine, 16 (2): 221–247, plates 21–31

8

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

BÀI 3: NHUỘM GRAM 1. Mục đích Phân biệt các loài vi khuẩn thành hai nhóm Gram dương và Gram âm. Từ đó phân biệt sự

N

khác nhau về thành phần hóa sinh trên thành tế bào.

H N

Kết quả

Y TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

(thuốc nhuộm thứ nhất): vi

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

khuẩn có màu tím đen

TR ẦN

Safranin O (nhuộm đơn) (thuốc nhuộm thứ hai) vi

-H

Ó

A

10 00

B

khuẩn có màu hồng

-L

Ý

Crystal violet + safranin O (nhuộm Gram): vi khuẩn

ÁN

giữ được màu tím đen (B)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

và màu hồng (A)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

Crystal violet ( nhuộm đơn)

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Thuốc nhuộm

Ơ

2. Kết quả thí nghiệm

Bảng 1. 1: Kết quả so sánh vi khuẩn lactic nhuộm Gram và nhuộm đơn bằng crystal violet và safranin O Trong quy trình nhuộm Gram, crystal violet đóng vai trò là thuốc nhuộm thứ nhất, Safranin O đóng vai trò là thuốc nhuộm thứ hai.

9

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Mẫu vi sinh vật là nước dưa cải muối chua chứa chủ yếu là vi khuẩn lactic acid. Kết quả sau khi nhuộm Gram cho thấy vi khuẩn lactic có khả năng bắt màu và giữ màu cả hai loại thuốc nhuộm trên cùng một tiêu bản.

Ơ

Vi khuẩn lactic acid là những vi khuẩn Gram dương. Tuy nhiên, kết quả thí nghiệm thu

N

3. Nhận xét

N

H

được cho thấy vừa có vi khuẩn Gram dương và Gram âm trong mẫu vi khuẩn lactic. Những vi

TP

Do cấu tạo của thành tế bào vi khuẩn Gram âm và Gram dương khác nhau nên có khả

Đ ẠO

năng bắt màu và giữ màu phẩm nhuộm khác nhau. Thành tế bào vi khuẩn Gram dương có lớp Peptidoglycan dày (chiếm 50% khối lượng khô) được gắn chặt với nhau và có nhiều acid

N

G

teichoic. Peptidoglycan là một loại polyme xốp, không tan, khá cứng và bền vững, bao quanh

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

tế bào như một mạng lưới. Thành phần của Peptidoglycan gồm N-acetylglucosamine (NAG), N-acetylmuramic acid (NAM) và tetrapeptide gồm cả loại D và L acid amine. Tetrapeptide

TR ẦN

trên các chuỗi peptidoglycan sẽ liên kết với nhau tạo cấu trúc chắc chắn. Trong khi đó, vi khuẩn Gram âm có cấu trúc thành tế bào khá phức tạp: trong cùng là một lớp peptidoglycan

B

mỏng, một không gian chu chất và lớp màng ngoài có chứa phospholipid và

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

lipopolysaccharides dễ bị hòa tan trong chất tẩy màu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

dung dịch Safranin O.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

khuẩn Gram dương bắt màu tím đen của Crystal violet, vi khuẩn Gram âm bắt màu hồng của

Hình 1. 3: Cấu trúc thành tế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải)

10

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 1. 2: Tỉ lệ các thành phần có trong cấu trúc của thành tế bào vi khuẩn Gram dương và Gram âm (Nguyễn Lân Dũng và cộng sự, 2003) Tỉ lệ % đối với khối lượng khô của thành tế bào vi khuẩn Gram âm

Peptidoglycan

30-95

5-20

Acid teichoic

Cao

0

Lipoit

Hầu như không có

20

Không có hoặc ít

cao

Ơ H N Y

Đ ẠO

Trong quá trình nhuộm Gram, cả vi khuẩn Gram âm và Gram dương đều có khả năng bắt màu thuốc nhuộm thứ nhất crystal violet. Dung dịch chất cẩn màu iodine có khả năng tạo

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

phức không tan crystal violet- iodine. Khi bị rửa bằng cồn, thành tế bào vi khuẩn Gram dương

H Ư

bị hydrate hóa làm giảm khoảng cách của các phân tử trong màng. Đồng thời lớp

TR ẦN

peptidoglycan dày và nhiều tầng xếp chồng giúp các phức crystal violet – iodine không bị rửa trôi và giữ được màu thuốc nhuộm ban đầu. Trong khi đó, các vi khuẩn Gram âm không có khả năng giữ lại phức này do lớp lipid ngoài thành tế bào dễ bị hòa tan trong chất tẩy, làm trôi

10 00

B

thuốc tẩy thứ nhất. Lớp peptidoglycan mỏng lúc này bị lộ ra ngoài nhưng không có khả giữ được phức crystal violet – iodine. Lúc này, thuốc nhuộm bổ sung (Safranin O) được sử dụng

A

để nhuộm màu vi khuẩn Gram âm.

-H

Ó

Trên các tế bào vi khuẩn Gram dương “già”, thành tế bào vi khuẩn bị thoái hóa và khả năng vận chuyển các ion dương của acid teichoic kém nên phẩm nhuộm thứ nhất có khả năng

-L

Ý

bị rửa trôi cùng với thuốc tẩy và bắt màu phẩm nhuộm thứ hai. Vì vậy, khi quan sát mẫu

ÁN

nhuộm Gram vi khuẩn lactic trong nước dưa cải chua, ngoài những vi khuẩn nhuộm màu tím

TO

đen còn có một số vi khuẩn có màu tím.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Protein

N

Gram dương

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Thành phần

ÀN

Ngoài ra, do thời gian khử màu bằng chất tẩy màu quá lâu hoặc trong quá trình tạo vết bôi

D

IỄ N

Đ

làm biến dạng thành tế bào vi khuẩn nên vi khuẩn Gram dương còn có thể xuất hiện dưới dạng Gram âm.

4. Bàn luận Trong kĩ thuật nhuộm Gram, các tế bào vi khuẩn Gram dương có thể xuất hiện dưới dạng Gram âm, nhưng các tế bào Gram âm thì không bao giờ xuất hiện dưới dạng Gram dương.

11

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Khi quan sát tiêu bản nhuộm Gram, ngoài phân biệt thành phần hóa sinh và cấu tạo của thành tế bào còn có thể xác định được hình dạng, kích thước và sự sắp xếp cảu các tế bào vi khuẩn. Đây là công cụ hữu dụng nhất và được sử dụng thường xuyên trong thí nghiệm vi sinh.

N

Thành tế bào vi khuẩn có chức năng chủ yếu:

H

Ơ

− Duy trì ngoại hình của tế bào.

N

− Hỗ trợ sự chuyển động của tiên mao.

TP

− Cần thiết cho quá trình phân cắt của tế bào, cản trở sự xâm nhập của các chất độc

Đ ẠO

hại vào tế bào.

− Liên quan đến khả năng sinh độc tố và gây hại của tế bào vi khuẩn.

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Vì thế, việc xác định vi khuẩn thuộc Gram dương hoặc Gram âm cho thấy cái nhìn tổng

H Ư

quát về cấu trúc, hình thái, một số đặc điểm và khả năng gây bệnh của vi khuẩn.

TR ẦN

Trong kĩ thuật nhuộm Gram, cần lưu ý một số điểm sau:

− Sử dụng hai loại thuốc nhuộm khác màu, thông thường là crystal violet và một loại

10 00

B

phẩm nhuộm khác dễ phân biệt với màu tím đen.

− Luôn sử dụng giống vi khuẩn “trẻ” được nuôi cấy trong vòng 24 giờ để cho kết quả

A

tốt nhất,

Ó

− Lưu ý thời gian nhuộm màu và thời gian tẩy màu, loại thuốc tẩy sử dụng,

-H

− Tạo vết bôi vi khuẩn đúng cách.

-L

Ý

5. Tài liệu tham khảo

ÁN

Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2003). Vi sinh vật học. NXB

ÀN

TO

Giáo dục. 27-30.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

thấu,…).

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

− Giúp tế bào thích nghi với các điều kiện môi trường ( nhiệt độ, áp suất thẩm

TS Trịnh Khánh Sơn (2018). Các kĩ thuật cơ bản trong thực nghiệm vi sinh vật học.

D

IỄ N

Đ

NXB Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh Lê Văn Việt Mẫn. 2006. Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm. Nhà xuất bản ĐH Quốc gia TP.HCM. M.R.Adams and M.O.Moss.2000. Food Microbiology. Second Edition. The Royal Sociaty of Chemistry.

12

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 4: NHUỘM BÀO TỬ 1. Mục đích Nhuộm bào tử nhằm giúp chúng ta quan sát được hình dạng và vị trí của bào tử trong

N

tế bào sinh dưỡng.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN B 10 00 A Ó -H Ý -L ÁN TO

Hình 1. 4: Kết quả nhuộm bào tử

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Bào tử nằm ở tâm tế bào sinh dưỡng

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

2. Kết quả thí nghiệm

Sau khi nhuộm với malachite green thì các thành phần khác của tế bào vi khuẩn sẽ bị

tẩy màu và sẽ được nhuộm bổ sung với chất nhuộm bổ sung safranin, còn nội bào tử dưới tác nhân nhiệt sẽ được nhuộm và có màu xanh.

D

IỄ N

Đ

ÀN

3. Nhận xét

Kết thúc quá trình nhuộm, ta thấy được hình ảnh của bào tử có màu xanh nằm ở bên trong, còn tế bào sinh dưỡng ở ngoài có màu hồng.

13

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Về hình thái của nội bào tử quan sát dưới kính hiển vi: bào tử nằm ở tâm của tế bào thuộc kiểu vi khuẩn Bacillus. Đây là kiểu vi khuẩn gram dương, hình que.

4. Bàn luận

Ơ

thường không làm cho bào tử bắt màu. Bào tử có đặc điểm là khó bắt màu hơn tế bào dinh

N

Do tính không thẩm thấu của áo bào tử nên với những phương pháp nhuộm thông

N

H

dưỡng, xong khi bắt màu rồi thì lại rất khó bị tẩy màu, trong khi đó tế bào dinh dưỡng bị tẩy

TP

nhân nhiệt độ cao hay kết hợp acid với nhiệt. Việc hoạt hóa sẽ kích thích bào tử nảy mầm và

Đ ẠO

khi bào tử ở trạng thái nảy mầm thì thuốc nhuộm sẽ dễ dàng xâm nhập vào bên trong lõi dẫn

G

đến bào tử bắt màu.

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Điều này được giải thích bằng cơ chế: khi hoạt hóa bằng nhiệt thì nhiệt độ sẽ làm cho

H Ư

protein của áo bào tử bị biến tính dẫn đến cấu trúc áo trở nên xốp hơn, tính thấm tăng và đồng

TR ẦN

thời cũng xúc tiến hoạt động thủy phân của enzyme protease tại đây. Kết quả là lượng protein giảm, cấu trúc áo trở nên lỏng lẻo tạo điều kiện cho nước và thuốc nhuộm thấm vào vỏ bào tử, làm cho vỏ bào tử trương phồng. Sự trương phồng sẽ làm cho lớp peptidoglycan bị vỡ cấu

10 00

B

trúc tạo điều kiện cho nước và thuốc nhuộm thấm vào trong lõi làm cho bào tử có màu xanh.

A

Những lưu ý có khả năng ảnh hưởng đến quá trình nhuộm :

-H

Ó

− Vết bôi vừa phải, không quá dày nếu không thì các lớp vi khuẩn sẽ chồng lên nhau khó nhuộm và gây khó quan sát.

-L

Ý

− Mẫu giấy đặt trên hình chữ nhật có kính thước vừa, phù hợp với phiến kính chữ

ÁN

nhật, vì nếu to quá sẽ làm thuốc nhuộm chảy xuống phía dưới.

TO

− Mẫu giấy trên phiến kính hình chữ nhật phải luôn luôn phải được làm ẩm bởi

malachite green. Vì nếu khô giấy sẽ bị dính chặt vào vết bôi và chúng ta không thể rửa trôi

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Chính vì vậy, để bào tử có thể bắt màu thuốc nhuộm, ta cần hoạt hóa nó bằng tác

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

màu nhanh chóng.

D

IỄ N

Đ

ÀN

với nước.

Trong quá trình cố định vi sinh vật, nếu hơ nóng quá có thể gây vỡ thành tế bào gây

khó quan sát được bào tử.

5. Tài liệu tham khảo Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2003). Vi sinh vật học. NXB Giáo dục. 27-30.

14

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

TS Trịnh Khánh Sơn (2018). Các kĩ thuật cơ bản trong thực nghiệm vi sinh vật học.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

NXB Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.

15

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 5: KĨ THUẬT PHÒNG ẨM (QUAN SÁT NẤM SỢI) 1. Mục đích Nhờ vào kĩ thuật phòng ẩm mà ta có thể quan sát được hình dạng, cấu tạo cũng như giống loài

N

của loại nấm sợi mà ta cấy vào môi trường.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TO

D

IỄ N

Đ

ÀN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Hình 1. 5: Nấm sợi

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

2. Kết quả thí nghiệm

16

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

b) Vách ngăn của sợi nấm

B

Hình 1. 6: Hệ sợi của nấm

10 00

3. Nhận xét

Ó

-H

nấm có mang bào tử.

A

Nấm sinh trưởng và phát triển với thân trong suốt, thân không phân nhánh và đầu sợi

Hệ sợi (khuẩn ty) của nấm mọc trong suốt với nhiều nhánh. Đặc biệt, trên mỗi sợi đều

-L

Ý

có những vách ngăn rõ rệt.

ÁN

Qua những hình ảnh quan sát được dưới kính hiển vi thì ta thấy nó có hình dạng và

TO

đặc điểm giống sợi nấm Aspergillus thuộc lớp nấm bất toàn Deuteromycetes. Giống nấm này

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

a) Hệ sợi

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

D

IỄ N

Đ

ÀN

phần lớn không có hình thức sinh sản hữu tính mà là kiểu sinh sản vô tính.

4. Bàn luận Môi trường sử dụng trong bài này còn được bổ sung thêm chloramphenicol có tác dụng kìm hãm sự phát triển của các loại vi khuẩn, giúp cho tế bào nấm sợi có đủ sinh dưỡng để sinh trưởng và quan sát dễ dàng hơn.

17

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Những lưu ý trong bài quan sát nấm sợi: − Quá trình thực hiện kĩ thuật phòng ẩm (cấy nấm) luôn thực hiện trong điều kiện vô trùng nếu không thì sẽ bị tạp nhiễm, tế bào nấm sinh trưởng không như ý muốn. − Lượng sinh khối ta cấy vào môi trường không quá nhiều nếu không sẽ mọc chồng

Ơ

N

chất gây khó khăn trong việc quan sát.

N

H

5. Tài liệu tham khảo

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Minh.Thí nghiệm vi sinh học thực phẩm.53-55.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

Lê Văn Việt Mẫn, Lại Mai Hương (2010). Nhà xuất bản đại học Quốc gia Tp Hồ Chí

18

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 6: KỸ THUẬT CẤY RIA 1. Mục đích Cấy ria là kỹ thuật dùng để phân lập vi sinh vật từ quần thể ban đầu sau đó nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng thích hợp để tạo ra các khuẩn lạc giống thuần khiết.

Khuẩn lạc của men bánh mì phát triển rất nhanh ( sau 24 giờ ).

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

Khuẩn lạc của Yakult phát triển rất chậm ( sau hơn 48 giờ ).

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10 00

B

Hình 1. 7: Kết quả sau khi cấy men bánh mỳ ( bên trái), Yakult (bên phải) lên môi trường.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

2. Kết quả thí nghiệm

Hình 1. 8: Thạch đứng sau khi nuôi cấy bằng mẫu Yakult.

19

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN

Hình 4a Hình 1. 9 a-b: Thạch đứng sau khi nuôi cấy bằng nấm men

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú Hình 4b

G

N

H Ư

Đ ẠO

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

TP

Y

U

.Q

N

Ơ

H

N

Bọt khí

Thạch đứng tách ra làm 2 phần

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

20

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

A

3. Nhận xét

-H

Ó

Mật độ khuẩn lạc ở hai mẫu có độ khác nhau rõ rệt và thời gian phát triển cũng chênh

-L

cách thưa thớt.

Ý

lệch tương đối đáng kể, khuẩn lạc ở men bánh mì dày đặc trong khi ở Yakult mọc lên một

ÁN

Khuẩn lạc ở mẫu men bánh mì được phân lập gần như ở những đường cấy cuối cùng, bên cạnh đó khuẩn lạc của Yakult được phân lập ngay ở những đường cấy đầu tiên.

Đ

ÀN

TO

4. Bàn luận

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Nhận thấy: xuất hiện bọt khí trong quá trình nuôi cấy.

IỄ N D

10 00

B

Hình 1. 10: Thạch nghiêng sau khi nuôi cấy bằng nấm men

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

Trong kĩ thuật cấy ria mật độ vi sinh vật giảm dần để hình thành các khuẩn lạc riêng

rẽ do: số lượng khuẩn lạc được lấy với một số lượng lớn trên đầu que cấy vòng sau đó được ria trên bề mặt môi trường thạch, chúng sẽ bám dính lên môi trường và giảm dần theo các đường cấy. Tại một số vị trí trên đường cấy các tế bào riêng lẻ sẽ rời khỏi đường cấy và phát triển thành các khuẩn lạc riêng rẽ do vậy không phải mỗi khuẩn lạc hình thành trên đĩa thạch sau quá trình cấy ria đều được hình thành từ một tế bào ban đầu.

Môi trường được sử dụng để đổ đĩa là M1 (môi trường giá đậu đường) được bổ sung các chất dinh dưỡng thích hợp giúp các khuẩn lạc phát triển bên cạnh đó còn được chứa một

21

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

lượng Agar là một loại polysaccharide được tách từ một loại rong biển. Đây là một loại phức hợp polysaccharide mà thành phần chính là agarose và agaropectin nó rất khó để vi sinh vật có thể tiêu thụ và tạo điều kiện cho khuẩn lạc có thể bám dính. (Hoàng Kim Anh.2006) Ở kỹ thuật cấy thạch đứng, trong quá trình phát triển của vi sinh vật có sinh ra bọt khí,

N

nếu vi sinh vật phát triển quá mạnh và bọt khí quá nhiều nhưng không thể nổi lên bề mặt có

H

Ơ

thể xảy ra hiện tượng nứt thạch agar ở giữa và miếng thạch bị khí sinh ra đẩy đi lên.

N

Sự khác nhau giữa kỹ thuật thạch đứng và thạch nghiêng: trong kỹ thuật thạch nghiêng

U

Y

vi khuẩn phát triển ngay trên bề mặt của môi trường (trong điều kiện hiếu khí) vì vậy chúng

Đ ẠO

axit amin tự do. Sự phân giải các acid amin trong pepton sẽ tạo ra NH3 làm bề mặt có môi trường kiềm. Ngược lại trong kỹ thuật thạch đứng vi khuẩn phát triển trong điều kiện yếm khí

G

do vậy Glucose sẽ lên men tạo ra các sản phẩm acid hữu cơ làm PH của môi trường giảm

N H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

xuống (Linde. 1999) Các yếu tố và một số lưu ý trong kĩ thuật cấy ria: để tách thành các tế bào riêng rẽ.

TR ẦN

− Số lượng mẫu lấy vào ở đầu que cấy vừa phải, không quá nhiều vì như thế sẽ khó

10 00

môi trường dẫn tới hư mẫu.

B

− Cần bảo quản (bọc kín) một cách cẩn thận để tránh sự phát triển của nấm mốc lên − Kỹ thuật cấy không đạt có thể dẫn đến các đường cấy bị đè lên nhau, lượng mẫu

Ó

A

quá dày trên môi trường thạch.

-H

5. Tài liệu tham khảo

Ý

Hoàng Kim Anh.2006.Hidrocacbon.In hóa học thực phẩm.Nhà xuất bản khoa học và

-L

kỹ thuật. 224-226

ÁN

J.j.M.Ter Linder, H. Liang, R.W. Davis, H.Y.Steensma, J.P.Van Dijken, J.T

TO

Pronk.1999. Genome-Wide Transcriptional Analysis of Aerobic and Anaerobic Chemostat TS Trịnh Khánh Sơn (2018). Các kĩ thuật cơ bản trong thực nghiệm vi sinh vật học.

NXB Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Cultures of Saccharomyces cerevisiae. Journal of bacteriology. 7409-713.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

hóa Pepton để tiếp tục sinh năng lượng. Pepton có 3 thành phần chính: các peptide, protein,

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

phân giải Glucose thành CO2 và nước sinh năng lượng, sau khi hết Glucose chúng tiếp tục dị

22

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 7: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN 1. Mục đích Đánh giá số lượng vi sinh vật theo số lượng vi sinh vật có xác suất hiện diện lớn nhất trên một đơn vị thể tích mẫu.

N

Định lượng dựa trên kết quả định tính của một loạt các ống nghiệm được lặp lại ở một

Ơ

số độ pha loãng khác nhau .

N

H

2. Kết quả thí nghiệm

Y

a. Sau khi cho mẫu vào môi trường LSB.

3

1

0

U 0

N B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

Sinh bọt khí

0

D

IỄ N

Đ

ÀN

Hình 1. 11: Ống nghiệm dương tính

10-6

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

3

10-5

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

10-4

.Q

10-3

TP

10-2

Đ ẠO

10-1

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Bảng 1. 3:Số ống dương tính

23

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

Từ kết quả thí nghiệm được lựa chọn tiến hành tra bảng MPN ta thu được kết quả như

B

sau:

10-3

10-4

3

Tra bảng MPN

MPN/ml

43

43×102

Ó

A

10-2

-H

10 00

Bảng 1. 4: Số ống dương tính ở các nồng độ

0

-L

Ý

1

ÁN

b. Sau khi cho mẫu vào môi trường BGBL

Nồng độ

10-1

10-2

10-3

Số ống dương tính

2

3

0

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Bảng 1. 5: Số ống dương tính ở các nồng độ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Hình 1. 12: So sánh ống nghiệm dương tính và ống nghiệm không dương tính.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

Ống nghiệm đổi màu

24

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

http://daykemquynhon.ucoz.com

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

Đ ẠO

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

TP

Bọt khí

Y

U

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Hình 1. 13: Ống nghiệm dương tính.

25

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

3. Nhận xét Dựa vào kết quả thu được cho thấy mật độ Coliforms trong mẫu là tương đối ít.

4. Bàn luận Coliform có khả năng lên men lactose (là chất có trong LSB) sinh ra hơi và acid. Khi

N

acid được tạo thành độ pH của môi trương bị giảm xuống do vậy mẫu ống nghiệm có hiện

H

Ơ

tượng đổi màu như trên.

N

Cần phải sử dụng ống Durham để nhận biết bọt khí sinh ra (bọt sẽ đi vào ống

U

Y

Durham), mắt thường có thể quan sát một cách rõ ràng.

Đ ẠO

đổi màu trong môi trường được chọn. Phương pháp này cho phép định lượng được mật độ vi khuẩn thấp trong thể tích mẫu lớn

G

Sau khi thu được các ống nghiệm dương tính ở môi trường LSB cần sử dụng các môi

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

trường EC hay BGBL (trong bài này dùng BGBL) để khẳng định chính xác sự có mặt của Coliforms vì vi sinh vật này có biểu hiện dương tính ở cả 2 loại môi trường. Bên cạnh đó

TR ẦN

chuyển đổi môi trường cũng để cung cấp thêm lượng chất dinh dưỡng cho vi sinh vật.

Một số ứng dụng: xác định độ nhiễm khuẩn của các mẫu nước sinh hoạt, nước thải

B

công nghiệp...

10 00

Các yếu tố ảnh hưởng đến độ chính xác của thí nghiệm: − Pha mẫu bằng Pipette nên nồng độ đạt được có thể không chuẩn xác do kỹ thuật

Ó

A

của người làm.

-H

− Thời gian giữ ống trong bể nước ấm kéo dài có thể khiến mẫu bị nhiễm khuẩn từ

Ý

môi trường ảnh hưởng đến kết quả cuối cùng.

-L

− Người quan sát có thể mắc sai lầm trong sự nhận định ống dương tính.

ÁN

5. Tài liệu tham khảo

TO

Trinh Khanh Son. 2018. Các kỹ thuật cơ bản trong thực nghiệm vi sinh vật học. Nhà

D

IỄ N

Đ

ÀN

xuất bản Đại Học Quốc Gia TP.HCM. 103-105.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

pha mẫu. Phương pháp MPN chỉ sử dụng để nhận diện 1 số sinh vật có khả năng sinh khí và

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Độ chính xác của trị số MPN phụ thuộc vào số lượng ống nghiệm lặp lại trong mỗi độ

26

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

BĂ i 8: Ä?áť&#x160;NH LƯᝢNG Táť&#x201D;NG Sáť? NẤM MEN, NẤM Máť?C Báş°NG PHĆŻĆ NG PHĂ P Ä?áşžM KHUẨN Láş C 1. M᝼c Ä&#x2018;Ă­ch

nĆ°áť&#x203A;c Ä&#x2018;ưᝣc pha loĂŁng lẼy tᝍ táťą nhiĂŞn vĂ tĂ­nh toĂĄn táť&#x2022;ng lưᝣng nẼm men nẼm máť&#x2018;c cĂł trong 1g

H

Ć

Ä&#x2018;Ẽt mẍu, tᝍ Ä&#x2018;Ăł ᝊng d᝼ng trong tháťąc táşż vĂ o Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng táť&#x2022;ng sáť&#x2018; nẼm men, nẼm máť&#x2018;c cĂł trong

N

ThĂ­ nghiáť&#x2021;m nĂ y dĂšng Ä&#x2018;áť&#x192; Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng táť&#x2022;ng sáť&#x2018; nẼm men, nẼm máť&#x2018;c cĂł trong 1ml mẍu

Y

N

mẍu tháťąc phẊm Ä&#x2018;ưᝣc mang Ä&#x2018;i phân tĂ­ch.

Ä? áş O

viáť n Ä&#x2018;áť u máť?c riĂŞng láşť váť&#x203A;i Ä&#x2018;áť&#x2122; phân tĂĄn khĂ´ng Ä&#x2018;áť u vĂ váť&#x203A;i sáť&#x2018; lưᝣng khĂ´ng nhiáť u, sáť&#x2018; lưᝣng giảm nhiáť u váť&#x203A;i nhᝯng Ä&#x2018;ÄŠa thấch cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng cĂ ng cao. Sáť&#x2018; lưᝣng khuẊn lấc náşąm trong khoảng

KhuẊn lấc

HĂŹnh 1. 14: KhuẊn lấc máť?c trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa thấch váť&#x203A;i Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng mẍu đ?&#x;?đ?&#x;&#x17D;â&#x2C6;&#x2019;đ?&#x;?

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

-L

Ă?

-H

Ă&#x201C;

A

10 00

B

TR ẌN

H ĆŻ

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

25-250 CFU cháť&#x2030; xảy ra trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa thấch cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng mẍu 10â&#x2C6;&#x2019;2.

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

TP

Theo káşżt quả thu Ä&#x2018;ưᝣc trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa thấch xuẼt hiáť&#x2021;n cĂĄc khuẊn lấc cĂł hĂŹnh dấng tròn, láť&#x201C;i

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

.Q

U

2. Káşżt quả thĂ­ nghiáť&#x2021;m

27

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Ä?ÄŠa 2

Ä?ÄŠa 3

109

80

78

10-3

1

0

1

10-4

1

1

0

10-5

0

0

0

TO

Ă N

Ă?

10-2

-H

Ä?ÄŠa 1

-L

Ä?áť&#x2122; pha loĂŁng

Ă&#x201C;

A

Bảng 1. 6: Sáť&#x2018; khuẊn lấc Ä&#x2018;áşżm Ä&#x2018;ưᝣc áť&#x; cĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng

Tính kết quả:

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

-

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

HĂŹnh 1. 15: KhuẊn lấc máť?c trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa thấch cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng mẍu lần lưᝣt lĂ đ?&#x;?đ?&#x;&#x17D;â&#x2C6;&#x2019;đ?&#x;&#x2018; , đ?&#x;?đ?&#x;&#x17D;â&#x2C6;&#x2019;đ?&#x;&#x2019;

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

10 00

B

TR ẌN

H ĆŻ

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Ä? áş O

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

.Q

U

Y

N

H

Ć

N

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

Theo káşżt qᝧa quan sĂĄt Ä&#x2018;ưᝣc cháť&#x2030; cĂł 3 Ä&#x2018;ÄŠa petri váť&#x203A;i Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng 10â&#x2C6;&#x2019;2 cĂł sáť&#x2018; khuẊn lấc trĂŞn máť&#x2014;i Ä&#x2018;ÄŠa náşąm trong khoảng 25-250 CFU nĂŞn táť&#x2022;ng sáť&#x2018; khuẊn lấc trong 1ml huyáť n phĂš Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh theo cĂ´ng thᝊc: đ?&#x2018; =

â&#x2C6;&#x2018;đ??ś 3Ă&#x2014;đ?&#x2018;&#x2018;

Trong Ä&#x2018;Ăł: N lĂ sáť&#x2018; khuẊn lấc trĂŞn 1ml mẍu

28

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

â&#x2C6;&#x2018; đ??ś lĂ táť&#x2022;ng sáť&#x2018; khuẊn lấc trĂŞn tẼt cả cĂĄc Ä&#x2018;ÄŠa Ä&#x2018;áşżm Ä&#x2018;ưᝣc: 109, 80, 78 3 lĂ sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa cᝧa Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng Ä&#x2018;ầu tiĂŞn (10â&#x2C6;&#x2019;2) d lĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng cᝧa cĂĄc Ä&#x2018;ÄŠa Ä&#x2018;ầu tiĂŞn: 10â&#x2C6;&#x2019;2

H

Ć

N

Váş­y káşżt quả Ä&#x2018;áşżm khuẊn lấc ta tĂ­nh Ä&#x2018;ưᝣc:

Y

N

N=8.9Ă&#x2014; 103 CFU/ml

Ä? áş O

Khi quan sĂĄt Ä&#x2018;ÄŠa thấch ta thẼy cĂĄc khuẊn lấc máť?c riĂŞng láşť vĂŹ cĂĄc khuẊn Ä&#x2018;ưᝣc nuĂ´i cẼy báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť&#x2022; Ä&#x2018;ÄŠa (Ä&#x2018;ưᝣc lắc Ä&#x2018;áť u váť&#x203A;i mĂ´i trĆ°áť?ng trĆ°áť&#x203A;c khi ᝧ-giĂşp phân tĂĄn cĂĄc táşż bĂ o

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

ra khắp mĂ´i trĆ°áť?ng cả bĂŞn trong thấch váť&#x203A;i Ä&#x2018;iáť u kiáť&#x2021;n vi hiáşżu khĂ­ hoạc káťľ khĂ­). Tháť?i gian ᝧ

H ĆŻ

ngắn nĂŞn cháť&#x2030; máť&#x203A;i quan sĂĄt thẼy cĂĄc táşż bĂ o phĂĄt triáť&#x192;n lĂşc ban Ä&#x2018;ầu cᝧa cĂĄc loấi nẼm

TR ẌN

CĂĄc táşż bĂ o khuẊn lấc cháť&#x2030; xuẼt hiáť&#x2021;n trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa thấch váť&#x203A;i sáť&#x2018; lưᝣng Ă­t vĂŹ nẼm men vĂ nẼm máť&#x2018;c lĂ vi sinh váş­t hiáşżu khĂ­, cháť&#x2030; máť&#x2122;t sáť&#x2018; Ă­t cĂł tháť&#x192; sinh trĆ°áť&#x;ng trong Ä&#x2018;iáť u kiáť&#x2021;n vi hiáşżu khĂ­ vĂ khi

B

lắc Ä&#x2018;ÄŠa thấch khĂ´ng Ä&#x2018;áť u dẍn Ä&#x2018;áşżn sáťą phân tĂĄn khĂ´ng Ä&#x2018;áť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť u.

10 00

NgoĂ i ra cĂł tháť&#x192; do mẍu chᝊa Ă­t vi sinh váş­t hoạc khi pha loĂŁng mẍu khĂ´ng lắc Ä&#x2018;áť u dẍn

Ă&#x201C;

-H

4. BĂ n luáş­n

A

Ä&#x2018;áşżn máş­t Ä&#x2018;áť&#x2122; khuẊn lấc cháť&#x2030; xuẼt hiáť&#x2021;n nhiáť u áť&#x; Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng Ä&#x2018;ầu tiĂŞn còn tᝍ 10â&#x2C6;&#x2019;3 tráť&#x; Ä&#x2018;i thĂŹ rẼt Ă­t

Ă?

ĆŻu Ä&#x2018;iáť&#x192;m cᝧa phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng nẼm thĂ´ng qua viáť&#x2021;c cẼy trĂŞn mĂ´i trĆ°áť?ng thấch

-L

lĂ Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng Ä&#x2018;ưᝣc nhᝯng táşż bĂ o sáť&#x2018;ng trong mẍu khảo sĂĄt ban Ä&#x2018;ầu, tuy nhiĂŞn cần cĂł tháť?i gian

Ă N

nuĂ´i cẼy Ä&#x2018;ᝧ lâu thĂŹ káşżt quả Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng máť&#x203A;i Ä&#x2018;ưᝣc tháť&#x192; hiáť&#x2021;n rĂľ rĂ ng.

TO

MĂ´i trĆ°áť?ng sáť­ d᝼ng Ä&#x2018;áť&#x192; nuĂ´i cẼy nẼm lĂ mĂ´i trĆ°áť?ng M1 (giĂĄ Ä&#x2018;áş­u Ä&#x2018;Ć°áť?ng): Agar,

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

TP

3. Nháş­n xĂŠt

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

U

â&#x2020;&#x2019; Táť&#x2022;ng lưᝣng khuẊn lấc cĂł trong 10ml mẍu chᝊa 1g Ä&#x2018;Ẽt ban Ä&#x2018;ầu lĂ 8.9 Ă&#x2014; 104 CFU.

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

Glucose, Pepton vĂ báť&#x2022; sung thĂŞm Cloramphenicol (khĂĄng sinh) vĂ o Ä&#x2018;áť&#x192; ᝊc cháşż hoạc tiĂŞu diáť&#x2021;t máť&#x2122;t sáť&#x2018; loấi vi sinh váş­t khĂĄc.

Káťš thuáş­t nĂ y sáş˝ cho káşżt quả kĂŠm táť&#x2018;i Ć°u hĆĄn káťš thuáş­t trải Ä&#x2018;ÄŠa vĂŹ hấn cháşż sáťą tiáşżp xĂşc tráťąc tiáşżp váť&#x203A;i oxy cᝧa cĂĄc táşż bĂ o nuĂ´i cẼy CĂĄc yĂŞu cầu vĂ lĆ°u Ă˝ Ä&#x2018;áť&#x2018;i váť&#x203A;i káťš thuáş­t Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť&#x2022; Ä&#x2018;ÄŠa:

29

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

− Khi pha loãng mẫu cần lắc ống nghiệm chứa các mẫu đã pha loãng bằng máy lắc rồi tiếp tục thực hiện các độ pha loãng tiếp theo. − Khi đổ đĩa vào chung với môi trường thực hiện thao tác xoay tròn đĩa petri đã đậy nắp 3-5 vòng ngược chiều nhau và cần lưu ý không để môi trường chứa huyền phù dính lên

N

thành hay nắp đĩa.

H

Ơ

− Thao tác phải nhanh tránh để môi trường bị đông lại khi chưa đổ đĩa.

N

− Giữ nắp đĩa petri không để tiếp xúc trực tiếp với mặt bàn, lật ngược nắp đĩa petri

TP

5. Tài liệu tham khảo

Đ ẠO

Lê Văn Việt Mẫn. 2010. Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm, NXB ĐHQG Thành

G

phố Hồ Chí Minh. 28-33.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Horizontal methods the enumeration of yeasts and moulds. 2012. Syrian National

TR ẦN

Standard Development Draft. Part 1.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TCVN về vi sinh vật trong thực phẩm.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

loang làm ảnh hưởng đến kết quả khi đếm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

xuống khi thạch khô và mang đi ủ tránh nhiễm các loại vi khuẩn khác và vi sinh vật mọc

30

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bài 9: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHI BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC 1. Mục đích

chứa oxy. Vi khuẩn hiếu khí xuất hiện nhiều trong thực phẩm gây ra hư hỏng và ngộ độc thực

H

Ơ

phẩm vậy nên việc định lượng sự có mặt của khuẩn hiếu khí trong thực phẩm là rất cần thiết.

N

Vi khuẩn hiếu khí là nhóm vi khuẩn có thể tồn tại và phát triển trong môi trường có

N

Định lượng vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm có thể được thực hiện bằng phương pháp nuôi

Đ ẠO

sinh vật, nguy cơ hư hỏng, thời hạn bảo quản sản phẩm, mức độ vệ sinh trong quá trình chế biến, bảo quản sản phẩm.

G N

a. Kết quả đếm khuẩn lạc trên đĩa petri

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

2. Kết quả thí nghiệm

Độ pha

Đĩa 1

Đĩa 2

43

44

Đĩa 3

28

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10−1

10 00

B

loãng

TR ẦN

Bảng 1. 7: Bảng kết quả

9

13

13

D

IỄ N

Đ

ÀN

10−2

Hình đĩa petri

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Chỉ tiêu tổng số vi sinh vật hiếu khí được dùng để đánh giá chất lượng của mẫu về vi

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

U

Y

cấy trải trên bề mặt thạch (trải đĩa).

31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

Iáť&#x201E; N

D

Ă&#x20AC;N

Ä?

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

Ă&#x201C;

-H B TR ẌN G

N

H ĆŻ

Ä? áş O

10â&#x2C6;&#x2019;4

10â&#x2C6;&#x2019;5 0

10 00

Y

U

.Q

N

Ć

H

N

4

4 4

3

đ?&#x2018; =

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş 3

TP

4

2 Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ă?

-L

10â&#x2C6;&#x2019;3

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

Ă N

TO

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2

b. TĂ­nh táť&#x2022;ng sáť&#x2018; khuẊn lấc

â&#x2C6;&#x2018;đ??ś [(1 Ă&#x2014; đ?&#x2018;&#x203A;1 ) + (0.1 Ă&#x2014; đ?&#x2018;&#x203A;2 )] Ă&#x2014; đ?&#x2018;&#x2018;

32

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Trong Ä&#x2018;Ăł: N: sáť&#x2018; tĂŞ bĂ o cĂł trong 1ml mẍu â&#x2C6;&#x2018; đ??ś:Táť&#x2022;ng sáť&#x2018; khuẊn lấc Ä&#x2018;áşżm Ä&#x2018;ưᝣc trong cĂĄc Ä&#x2018;ÄŠa (25-250 CFU)

H

Ć

N

đ?&#x2018;&#x203A;1 : sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa áť&#x; Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng Ä&#x2018;ầu tiĂŞn (cĂł káşżt quả chẼp nháş­n)

Y

N

đ?&#x2018;&#x203A;2: Sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa áť&#x; Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng káşż ( cĂł káşżt quả chẼp nhân)

43+44+28 3Ă&#x2014;10â&#x2C6;&#x2019;1

=

115 0.3

= 383 (CPU/ml)

G

đ?&#x2018; =

H ĆŻ

N

3. Nháş­n xĂŠt

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ä? áş O

phĂš:

- Máş­t Ä&#x2018;áť&#x2122; khuẊn lấc trĂŞn Ä&#x2018;ÄŠa Ă­t (<100) vĂŹ lưᝣng mẍu lẼy ra sau pha loĂŁng cháť&#x2030; 0.1ml

TR ẌN

- CĂĄc khuẊn lấc náşąm riĂŞng láşť cĂł tháť&#x192; quan sĂĄt Ä&#x2018;ưᝣc.

- KhĂ´ng báť&#x2039; lan.

B

- TrĂŞn báť mạt thấch khĂ´ng cĂł nĆ°áť&#x203A;c Ä&#x2018;áť?ng.

10 00

- Sáť&#x2018; lưᝣng khuẊn lấc vi sinh váş­t giảm dần khi tÄ&#x192;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng.

A

4. BĂ n luáş­n

-H

Ă&#x201C;

PhĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áşżm khuẊn lấc báşąng trải Ä&#x2018;ÄŠa cĂł Ć°u Ä&#x2018;iáť&#x192;m lĂ tấo Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;áť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť u cao, dáť&#x2026; tháťąc

Ă?

hiáť&#x2021;n hĆĄn phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť&#x2022; Ä&#x2018;ÄŠa.

-L

MĂ´i trĆ°áť?ng dĂšng nuĂ´i cẼy vi sinh váş­t trong thĂ­ nghiáť&#x2021;m nĂ y lĂ mĂ´i trĆ°áť?ng M1, sau khi

Ă N

Ä&#x2018;ưᝣc hẼp tiáť&#x2021;t trĂšng Ä&#x2018;ưᝣc lĂ m nguáť&#x2122;i Ä&#x2018;áşżn khoảng 500C sau Ä&#x2018;Ăł Ä&#x2018;áť&#x2022; vĂ o Ä&#x2018;ÄŠa petri Ä&#x2018;ĂŁ tiáť&#x2021;t trĂšng.

TO

Hiáť&#x2021;n nay viáť&#x2021;c Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng vi khuẊn hiáşżu khĂ­ Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng báť&#x2018;n phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áşżm

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

TP

Váť&#x203A;i káşżt quả khuẊn lấc Ä&#x2018;áşżm Ä&#x2018;ưᝣc nhĆ° trĂŞn ta tĂ­nh Ä&#x2018;ưᝣc táť&#x2022;ng sáť&#x2018; khuẊn lấc trong 0.1ml huyáť n

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

.Q

U

d: Ä&#x2018;áť&#x2122; pha loĂŁng cᝧa cĂĄc Ä&#x2018;ÄŠa Ä&#x2018;ầu tiĂŞn

Ă&#x20AC;N

táşż bĂ o khả thi thay tháşż Redigel, Petrifilm, Spiral Plate System, vĂ Isogrid cho thẼy tĂ­nh hiáť&#x2021;u

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

quả cᝧa cĂĄc phĆ°ĆĄng phĂĄp nĂ y trong viáť&#x2021;c cung cẼp sáť&#x2018; lưᝣng táşż bĂ o khả thi so váť&#x203A;i phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áşżm Ä&#x2018;ÄŠa Aerobic (APC) Ä&#x2018;ưᝣc sáť­ d᝼ng ráť&#x2122;ng rĂŁi.

CĂĄc yĂŞu cầu khi tháťąc hiáť&#x2021;n thĂ­ nghiáť&#x2021;m: â&#x2C6;&#x2019; Khi tiáşżn hĂ nh pha loĂŁg mẍu phải hĂşt Ä&#x2018;Ăşng tháť&#x192; tĂ­ch yĂŞu cầu vĂ tháťąc hiáť&#x2021;n pha loĂŁng theo Ä&#x2018;Ăşng nguyĂŞn tắc. â&#x2C6;&#x2019; CĂĄc Ä&#x2018;ÄŠa petri phải dưᝣc láş­t Ăşp khi ᝧ Ä&#x2018;áť&#x192; trĂĄnh khuẊn lấc máť?c loang.

33

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon https://daykemquynhonofficial.wordpress.com

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

− Không được mở nắp đĩa petri khi đếm khuẩn lạc. − Que trãi thủy tinh phải luôn đặt trong cồn và đốt trên ngọn lửa đèn cồn trước khi trải.

Ơ

Lê Văn Việt Mẫn. 2012. Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm. NXB ĐHQG Thành

N

5. Tài liệu tham khảo

N

H

phần Hồ Chí Minh. 28-33.

U

Y

Vicki S. Chain and Daniel Y.C. Fung. 1991.Comparison of Redigel, Petrifilm, Spiral

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Bacteria in Selected Foods.Vol. 54, No. 3, pp 208-211.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Plate System, Isogrid, and Aerobic Plate Count for Determining the Numbers of Aerobic

34

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial