THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO...

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN --------

TÔN PHÚ TÙNG

THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỌC

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ts. NGUYỄN THỊ THU THỦY

2017

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN --------

TÔN PHÚ TÙNG

THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỌC

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ts. NGUYỄN THỊ THU THỦY

2017

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CẢM ƠN

H

Ơ

Em xin chân thành cảm ơn sự quan tâm và giúp đỡ nhiệt tình của toàn thể

N

Trước hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành và sâu sắc nhất tới Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy, giảng viên đã trực tiếp hướng dẫn, truyền đạt kiến thức và tận tình giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện đề tài.

TP

Trang Hiền Nhân cùng với các Anh Chị kỹ thuật viên tại phòng thí nghiệm –

G

chỉ dạy cho em những kinh nghiệm quý giá nhất để em hoàn thành luận văn của

H Ư

N

mình.

TR ẦN

Em xin cảm ơn thầy Nguyễn Văn Đạt cố vấn lớp hóa học K39 luôn quan tâm theo dõi, chỉ dạy cả về kiến thức chuyên môn lẫn kinh nghiệm xã hội cho chúng em.

B

Em xin cảm ơn quý Thầy, Cô trong hộ đồng chấm khóa luận tốt nghiệp Đại

10 00

học đã dành thời gian quý báu xem xét, góp ý và sửa chữa giúp em hoàn thiện luận văn này một cách tốt nhất.

Ó

A

Sau cùng, em xin vô cùng cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè là chỗ dựa

-H

tinh thần vững chắc, luôn giúp đỡ, quan tâm chia sẻ cùng em trong suốt thời gian

Chân thành cảm ơn!

TÔN PHÚ TÙNG

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

qua để em có thể hoàn thành luận văn cũng như chương trình Đại Học.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Á Châu đã tạo điều kiện toàn diện cả về hóa chất lẫn máy móc, luôn quan tâm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Công ty TNHH Liên Nông Việt Nam (Đức Hòa, Long An) và Công ty Hóa sinh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Em cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến anh Đỗ Điền Trung và chị

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

quý Thầy Cô của bộ môn Hóa học, Khoa Khoa Học Tự Nhiên, người đã trang bị cho em kiến thức, tạo điều kiện thuận lợi trong suốt những năm học tại trường.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Trường Đại Học Cần Thơ

Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam

Khoa Khoa Học Tự Nhiên

Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc ------

------

N

Bộ Môn Hóa Học

H

Ơ

NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Cán bộ hướng dẫn

Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

1. Cán bộ hướng dẫn: Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy 2. Đề tài: “THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS” Lớp: Hóa HọcSinh viên thực hiện: Tôn Phú Tùng MSSV: B1304130 Khóa: 39 3. Nội dung nhận xét: a) Nhận xét về hình thức của LVTN: ................................................................................................................................ ................................................................................................................................ b) Nhận xét về nội dung của LVTN (đề nghị ghi chi tiết và đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực hiện của đề tài: ................................................................................................................................ ................................................................................................................................  Những vấn đề còn hạn chế: ................................................................................................................................ ................................................................................................................................ c) Nhận xét đối với sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dung chính do sinh viên nào chịu trách nhiệm thực hiện nếu có): ................................................................................................................................ ................................................................................................................................ d) Kết luận, đề nghị và điểm: ................................................................................................................................ ................................................................................................................................

Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2017

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Trường Đại Học Cần Thơ Khoa Khoa Học Tự Nhiên

Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc

Bộ Môn Hóa Học

------

------

Ơ

H

1. Cán bộ phản biện:……………………………………………………………..

N

NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN

N

a) Nhận xét về hình thức của LVTN:

TR ẦN

H Ư

................................................................................................................................ ................................................................................................................................ b) Nhận xét về nội dung của LVTN (đề nghị ghi chi tiết và đầy đủ):

B

 Đánh giá nội dung thực hiện của đề tài:

10 00

................................................................................................................................ ……........................................................................................................................

A

 Những vấn đề còn hạn chế:

-H

Ó

................................................................................................................................ ................................................................................................................................

-L

Ý

c) Nhận xét đối với sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dung chính do sinh viên nào chịu trách nhiệm thực hiện nếu có):

TO

ÁN

................................................................................................................................ ................................................................................................................................

................................................................................................................................ ................................................................................................................................

D

IỄ N

Đ

ÀN

d) Kết luận, đề nghị và điểm:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

4. Nội dung nhận xét:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

3. Sinh viên thực hiện: Tôn Phú Tùng MSSV: B1304130 Lớp: Hóa HọcKhóa: 39

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

2. Đề tài: “THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS”.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2017 Cán bộ phản biện

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Ơ

Việc sử dụng các loại thuốc kích thích tăng trưởng nói chung và Gibberellic acid nói riêng trên nông sản ngày càng phổ biến. Thị trường xuất hiện ngày càng nhiều các loại nông dược có chứa Gibberellic acid nhưng chất lượng và hàm lượng chưa thực sự được quan tâm. Do đó, việc xác định hàm lượng của các sản phẩm nông dược này là cần thiết.

N

TÓM TẮT

10 00

B

Ứng dụng quy trình để thực hiện xác định hàm lượng Gibberellic acid có trong 3 mẫu nông dược đang được lưu hành trên thị trường. Trong đó, có 2 mẫu đạt yêu cầu và một mẫu không đạt yêu cầu so với hàm lượng trên nhãn.

-H

Ó

A

Từ quy trình định lượng Gibberellic acid bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò UV-VIS có thể kiến nghị để ứng dụng để thực hiện xác định dư lượng Gibberellic acid có trong nông sản, đảm bảo tính an toàn của nông sản và sức khỏe người tiêu dùng.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

Từ khóa: Gibberellic acid, quy trình định lượng, HPLC/UV-VIS, sắc ký lỏng hiệu năng cao, quang phổ,…

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

H Ư

Kết quả thực hiện thẩm định cho quy trình đảm bảo độ tin cậy cao với tính tuyến trong khoảng 25-200 mg/L. Độ đúng đạt trong khoảng 94-106%. Độ chính xác với RSD < 2%. Giới hạn phát hiện là 0,000355 mg/L, giới hạn định lượng là 0.010764 mg/L.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

G

Đ ẠO

Tuy nhiên, quy trình phân tích này còn nhiều mặt hạn chế và chưa thống nhất về nhiều mặt. Từ thực tế đó, việc thẩm định các tiêu chí như tính tuyến tính, giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng, độ lặp lại, độ đúng làm tăng độ tin cậy và tính thống nhất của quy trình định lượng.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Các phương pháp định lượng Gibberellic acid rất đa dạng; trong đó, phương pháp phân tích bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò UV-VIS là phổ biến nhất.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CAM KẾT Tôi tên Tôn Phú Tùng, tôi xin cam đoan những số liệu sử dụng trong luận văn này hoàn toàn là nghiên cứu của riêng tôi và chưa từng được sử dụng trong

Cán bộ hướng dẫn

Ơ

năm

H

Cần Thơ, ngày tháng

N

bất kỳ báo cáo cùng cấp nào.

Ts. Nguyễn Thị Thu Thủy

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

Tôn Phú Tùng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

Sinh viên ký tên

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC TÓM TẮT .......................................................................................................... vi

Ơ

DANH SÁCH BẢNG ..........................................................................................x

N

LỜI CAM KẾT ................................................................................................ vii

N

H

DANH SÁCH HÌNH ......................................................................................... xi

Y

DANH SÁCH PHỤC LỤC .............................................................................. xii

G

1.2 Mục tiêu đề tài .................................................................................................................. 1

H Ư

N

CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN............................................................................... 3 2.1 Tổng quan về quang phổ ................................................................................................... 3

TR ẦN

2.1.1 Sơ lược về sự ra đời và lịch sử nghiên cứu quang phổ .............................................. 3 2.1.2 Định luật hấp thu ........................................................................................................ 5 2.1.3 Các yếu tố liên quan đến sự hấp thu .......................................................................... 5

10 00

B

2.1.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hấp thu ........................................................................ 7 2.1.5 Cơ sở lý thuyết của một số phương pháp trắc quang ................................................. 8 2.1.6 Cấu tạo máy quang phổ UV-VIS ............................................................................. 10

Ó

A

2.2 Tổng quan về HPLC ....................................................................................................... 12

-H

2.2.1 Nguyên tắc ............................................................................................................... 12

Ý

2.2.2 Các bộ phận cơ bản của máy HPLC ........................................................................ 13

-L

2.2.3 Một số đại lượng đặc trưng cho sắc ký lỏng hiệu năng cao ..................................... 15

ÁN

2.3 Tổng quan về Gibberellic acid ........................................................................................ 19

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

2.3.1 Sơ lược về lịch sử phát hiện Gibberellic acid .......................................................... 19 2.3.2 Cấu tạo, danh pháp, tính chất ................................................................................... 19

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

1.1 Đặt vấn đề ......................................................................................................................... 1

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

CHƯƠNG 1 GIỚI THIỆU ................................................................................ 1

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ......................................................................... xiii

2.3.3 Tính chất sinh lý của Gibberellic acid...................................................................... 20 2.3.4 Độc tính.................................................................................................................... 21 2.3.5 Tổng quan về định lượng Gibberellic acid............................................................... 22

2.4 Tổng quan về thẩm định quy trình định lượng Gibberallic acid bằng HPLC/UV-VIS .. 22 2.4.1 Định nghĩa ................................................................................................................ 22 2.4.2 Mục đích .................................................................................................................. 22 2.4.3 Các chỉ tiêu thẩm định quy trình phân tích .............................................................. 23

CHƯƠNG 3 . PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .......................................... 29

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.5 Thời gian và địa điểm thực hiện ..................................................................................... 29 2.5.1 Thời gian thực hiện .................................................................................................. 29 2.5.2 Địa điểm thực hiện ................................................................................................... 29

Ơ

2.6.1 Hóa chất và dung môi .............................................................................................. 29

N

2.6 Phương tiên thực hiện ..................................................................................................... 29

H

2.6.2 Thiết bị và dụng cụ................................................................................................... 29

N

2.7 Đối tượng nghiên cứu ..................................................................................................... 30

U

Y

2.7.1 Quy trình định lượng GA3 bằng HPLC/UV-VIS ..................................................... 30

TP

2.7.3 Mẫu Gibberrellic acid trên thị trường ...................................................................... 31

2.8.2 Thẩm định quy trình................................................................................................. 32

H Ư

N

G

2.8.3 ứng dụng phương pháp HPLC/UV-VIS để xác định hàm lượng trong các mẫu nông dược thu được ................................................................................................................... 32 2.9 Phương pháp xử lý kết quả ............................................................................................. 33

TR ẦN

CHƯƠNG 4 THỰC HIỆN VÀ KẾT QUẢ .................................................... 34 2.10 Xác định bước sóng hấp thu cực đại của Gibberellic acid ............................................ 34 2.10.1 Cách thực hiện ....................................................................................................... 34

10 00

B

2.10.2 Bước sóng hấp thu cực đại của Gibberellic acid .................................................... 34 2.10.3 Ý nghĩa của bước sóng hấp thu cực đại ................................................................. 34

A

2.11 Thẩm định quy trình định lượng Gibberellic acid bằng HPLC/UV-VIS ...................... 35

Ó

2.11.1 Tính tuyến tính ....................................................................................................... 35

-H

2.11.2 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng............................................................. 36

Ý

2.11.3 Độ đúng.................................................................................................................. 37

-L

2.11.4 Độ lặp lại ................................................................................................................ 38

ÁN

2.12 Định lượng trên mẫu thật .............................................................................................. 41 2.12.2 Phân tích các mẫu trên thị trường .......................................................................... 43

CHƯƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ................................................... 47 2.13 Kết luận ......................................................................................................................... 47 2.14 Kiến nghị....................................................................................................................... 47

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

2.12.1 Phân tích chuẩn Gibberellic acid............................................................................ 41

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2.8.1 Lựa chọn phương pháp ............................................................................................ 32

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

2.8 Phương pháp nghiên cứu ................................................................................................ 32

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

2.7.2 Chất chuẩn đối chiếu ................................................................................................ 31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH SÁCH BẢNG

Ơ

Bảng 2.2 Độ lặp lại tối đa chấp nhận được các nồng độ khác nhau (AOAC) ...24

N

Bảng 2.1 Tổ hợp màu và màu bổ sung .................................................................5

N

H

Bảng 2.3 Độ thu hồi chấp nhận được ở các nồng độ khác nhau ........................25

Y

Bảng 3.1 Hàm lượng đăng ký các mẫu thu gom trên thị trường ........................31

TP

Bảng 4.2 Kết quả hấp thu ABS của GA3 ở bước sóng 206 nm ..........................35

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Bảng 4.4 Hiệu suất thu hồi .................................................................................38

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Bảng 4.3 Kết quả tính LOD và LOQ .................................................................36

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Bảng 4.1 Cách chuẩn bị dung dịch Gibberellic acid ..........................................35

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Thiết bị Spektralapparat thiết kế bởi G. R. Kirchoff và R. W. Bunsen 3

H

Ơ

Hình 2.3 Các hiệu ứng và sự dịch chuyển ...........................................................7

N

Hình 2.2 Các vùng trong bức xạ điện từ ..............................................................4

Y

N

Hình 2.4 Mô tả đường chuẩn của phương pháp đường chuẩn .............................9

TP

G

Hình 2.9 Sơ đồ cấu tạo của máy HPLC .............................................................12

H Ư

N

Hình 2.10 Một số loại cột dùng trong HPLC .....................................................15

TR ẦN

Hình 2.11 Hệ số kéo đuôi và hệ số đối xứng peak trong HPLC ........................18 Hình 2.12 Công thức cấu tạo của Gibberellic acid ............................................19 Hình 2.13 Gibberellic acid dạng tinh thể ...........................................................20

10 00

B

Hình 3.1 Máy sắc ký Shimazu LC-2030 Prominence-i .....................................29 Hình 3.2 Một số sản phẩm nông dược chứa GA3 .............................................32

Ó

A

Hình 4.1 Biểu đồ thể hiện max của Gibberellic acid .........................................34

-H

Hình 4.2 Đường chuẩn của Gibberellic acid tại 206 nm....................................36

-L

Ý

Hình 4.3 Kết quả xác định độ đùng ...................................................................37

ÁN

Hình 4.4 Kết quả kiểm tra độ lặp lại thực hiện bởi người thứ nhất ...................39

TO

Hình 4.5 Kết quả kiểm tra độ lặp lại thực hiện bởi người thứ hai .....................40

D

IỄ N

Đ

ÀN

Hình 4.6 Sơ đồ các bước pha dung dịch chuẩn ..................................................41

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Hình 2.8 Sơ đồ cấu tạo của một máy quang phổ hai chùm tia...........................12

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Hình 2.7 Sơ đồ cấu tạo của một máy quang phổ một chùm tia .........................11

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Hình 2.6 Sơ đồ cấu tạo của một máy UV-VIS ...................................................11

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Hình 2.5 Đồ thị củ phương pháp thêm chuẩn ....................................................10

Hình 4.7 Kết quả phân tích chuẩn Gibberellic acid ...........................................42 Hình 4.8 Sơ đồ các bước pha dung dịch mẫu ....................................................43 Hình 4.9 Kết quả phân tích mẫu Gibber 4T (4%) ..............................................44 Hình 4.10 Kết quả phân tích mẫu Gibber 1T (1%) ............................................45 Hình 4.11 Kết quả phân tích mẫu Gibber 20T (20%) ........................................46

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

Đ ẠO

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

TP

Y

U

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH SÁCH PHỤC LỤC

Bảng PHỤC LỤC A Mức độ sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất .......52

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT High Performance Liquid Chromatography

UV-VIS

Ultralviolet – Visible

H2O

Nước

MeOH

Methanol

LOD

Limit of detection

LOQ

Limit of quantitation

GA3

Gibberellic acid

GC

Gas Chromatography

MS

Mass Spectrometry

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q TP

Đ ẠO

G

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Y

N

H

Ơ

N

HPLC

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Đ ẠO

G

N

H Ư

TR ẦN

B

10 00

A

Ó

-H

Ý

-L

ÁN

TO ÀN Đ

IỄ N D

Trong những năm qua, phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò UV-VIS (HPLC/UV-VIS) của Cục Bảo vệ Thực vật (thuộc Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn) được các nhà sản xuất để kiểm nghiệm hàm lượng Gibberellic acid trong nguồn nguyên liệu đầu vào cũng như hàm lượng của thành phẩm. Phương pháp này cho kết quả khá chính xác vì có độ chọn lọc cao có giới hạn phát hiện thấp. Tuy nhiên, quy trình nói trên sẽ có ý nghĩa hơn nếu được thầm định thường xuyên. Xuất phát từ thực tế đó, đề tài: THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS” được thực hiện với mong muốn thẩm định lại qui trình định lượng Gibberrellic acid có trong một số loại nông sản, bằng phương pháp HPLC với đầu dò UV-Vis góp phần giúp các nhà chuyên môn có nhiều thông tin quý trong quy trình phân tích các chất kích thích sinh trưởng thực vật đang được sử dụng, tìm ra giải pháp góp phần chuẩn hóa chất lượng sản phẩm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Các loại thuốc chứa Gibberellic acid được cấp số đăng ký ngày càng nhiều.

Bên cạnh đó các loại thuốc kém chất lượng, với hàm lượng sai khác so với hàm lượng in trên nhãn và chưa được đăng ký cấp phép vẫn được lưu hành rãi do giá thành thấp và sự hiểu biết còn hạn chế của nông dân về nông dược. Các loại thuốc giả, thuốc kém chất lượng không những gây nên thiệt thòi cho người nông dân mà còn ảnh hưởng gián tiếp đến sức khỏe người tiêu dùng. Vì thế, phương pháp kiểm nghiệm định lượng các loại thuốc bảo vệ thực vật có chứa Gibberellic acid là cần thiết đối với các nhà sản xuất, các nhà nghiên cứu và các cơ quan quản lý chất lượng thuốc.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

1.1 Đặt vấn đề Ngày nay, các loại nông dược có chứa thuốc kích thích sinh trưởng nói chung và Gibberellic acid nói riêng được nhà nông sử dụng rộng rãi để tăng năng suất nông sản. Gibberellic acid có tác dụng kích thích sinh trưởng mạnh ở cây trồng, làm tăng ưu thế chồi, ảnh hưởng đến sự tạo thành hạt, sự nảy mầm của hạt.

Bên cạnh đó, việc sử dụng lâu dài các loại nông sản có chứa dư lượng lớn Gibberellic acid sẽ gây ảnh hưởng tiêu cực đến sức khỏe người tiêu dùng.

N

CHƯƠNG 1 GIỚI THIỆU

1.2 Mục tiêu đề tài Đề tài “Thẩm định quy trình định lượng Gibberellic acid bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò uv-vis” được tiến hành với những mục đích sau: -

Xác định bước sóng hấp thu quang cực đại của Gibberellic acid.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

-

Thẩm định quy trình định lượng Gibberellic acid bằng phương pháp HPLC/UV-VIS theo các tiêu chí khoảng tuyến tính, giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng, độ đúng và độ lặp lại.

Xác định hàm lượng Gibberellic acid có trong một số mẫu nông dược được sử dụng trong giai đoạn hiện nay.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

-

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN

ÁN

TO ÀN Đ

IỄ N D

Năm 1879 Marie Alfred Cornu thấy rằng, những tia có bước sóng ngắn của bức xạ mặt trời trên bề mặt trái đất bị hấp thụ bởi khí quyển. Một năm sau đó, Walther Noel Hartley mô tả rất tỉ mỉ về sự hấp thụ UV của O 3 và nó trở nên rõ ràng hơn khi họ phát hiện ra rằng O3 chứa đầy trong bầu khí quyển.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Đ ẠO

G

N H Ư TR ẦN B 10 00 A Ó -H -L

Ý

Hình 2.1 Thiết bị Spektralapparat thiết kế bởi G. R.Kirchhoff và R. W. Bunsen

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Vào năm 1859 với sự cộng tác của nhiều nhà vật lý nổi tiếng như Gustav R. Kirchhoff, Robert W Bunsen tại Heidelberg. Họ đã sử dụng thiết bị có tên là “Spektralapparat”, họ đã ghi nhận được quá trình phát xạ rất đặc biệt của nhiều nguyên tố khác nhau. Với phương pháp này họ đã tiếp tục khám phá ra hai nguyên tố mới là casium và rubidium. Sự khám phá này là nền tảng cho sự khám phá tiếp theo về sự hấp thu và phát xạ của hấp thu phân tử.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

Cách đây 200 năm, Joseh von Fraunhofer (1787-1826) lần đầu tiên sản xuất loại máy đo quang phổ mà tính năng không có gì sánh kịp lúc bấy giờ. Ông có thể xác định chính xác độ dài bước sóng của nhiều vạch. Tuy nhiên, trong thời gian này ông ấy không hiểu được những cơ sở vật lý về những vấn đề mà ông ấy đã khám phá ra.

N

2.1 Tổng quan về quang phổ 2.1.1 Sơ lược về sự ra đời và lịch sử nghiên cứu quang phổ

2.1.2 Định nghĩa bức xạ điện từ Trong quang phổ học ánh sáng nhìn thấy, tia hồng ngoại, tia tử ngoại, tia Rơnghen, sóng radio… đều được gọi chung một thuật ngữ là bức xạ.

Bức xạ điện từ hay còn gọi là ánh sáng, nó là một trạng thái của năng lượng được truyền trong không gian với vận tốc lớn (c = 2,998.108 ms-1). Bức xạ điện từ được miêu tả như một dạng sóng mà ở đó tính chất của nó phụ thuộc vào bước

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

sóng, tần số, vận tốc và biên độ của nó. Mặt khác, bức xạ điện từ còn được xem như là hạt, do đó có thể coi bức xạ điện từ như chùm năng lượng không khối lượng và được gọi là lượng tử ánh sáng (photon). Theo thuyết lượng tử ánh sáng,

H

Ơ

N

giữa năng lượng ε của photon với bước sóng ánh sáng có mối quan hệ

-L

Vùng tử ngoại chân không (UV xa) λ = 50-200 nm, tuy nhiên ít được sử

ÁN

dụng vì :

TO ÀN Đ

IỄ N D

• Có năng lượng khá lớn, khi va chạm gây vỡ liên kết trong phân tử • Bị hấp thu mạnh bởi hầu hết dung môi và oxy của không khí • Bị hấp thu bởi thạch anh (dùng làm cốc đo) Vùng tử ngoại gần (UV gần): từ λ = 200-375 nm

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ý

Vùng ánh sáng bao gồm tia cực tím và ánh sáng khả kiến được gọi tắt là vùng UV-VIS. Vùng UV-VIS được chia thành 3 vùng nhỏ :

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Đ ẠO

G

N H Ư TR ẦN B 10 00 A -H

Ó

Hình 2.2 Các vùng trong bức xạ điện từ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Bức xạ điện từ bao gồm một dãy các sóng điện từ có bước sóng thay đổi trong khoảng rất rộng từ cỡ mét đến Å hoặc nhỏ hơn nữa. Toàn bộ dãy sóng đó được chia thành nhiều vùng phổ với tên gọi khác nhau. Vùng mà mắt người cảm nhận được có tên là ánh sáng khả kiến hay vùng nhìn thấy bao gồm bức xạ có bước sóng từ 396-760 nm. Vùng ngay trước và sau vùng khả kiến được gọi là vùng tử ngoại và vùng hồng ngoại. Tuy nhiên ranh giới của các vùng quang phổ là không cứng ngắc mà có thể chồng chéo lên nhau.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

Trong đó h là hằng số Planck 6,624.10-34 Js

Vùng khả kiến (Vis): từ λ = 375-800 nm Có thể nói trong công tác kiểm nghiệm nói chung và kiểm nghiệm thuốc nói riêng, phép đo UV-Vis đóng vai trò rất quan trọng trong phân tích định tính, thử tinh khiết và định lượng. Bên cạnh đó, phương pháp UV-Vis còn có thể dùng để xác định hằng số phân ly acid-base Ka, xác định số tiểu phân hấp thu dung

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

dịch (xác định đẳng quang). Phương pháp này phổ biến hằng ngày ở các phòng

H Ư

C: nồng độ dung dịch tính bằng mol/L

N

G

l: chiều dày của lớp dung dịch hấp thụ tính bằng cm

hấp thu quang mol)

TR ẦN

ε: Độ hấp thụ phân tử gam (hay còn gọi là hệ số tắt phân tử gam, hệ số

B

A: Độ hấp thụ quang hay mật độ quang

10 00

Định luật Beer-lambert là cơ sở của các phương pháp phân tích quang phổ.

Hệ số hấp thu quang mol là đại lượng không đổi, đặc trưng cho từng chất.

2.1.4 Các yếu tố liên quan đến sự hấp thu 2.1.4.1 Màu sắc

Màu sắc có tầm quan trong riêng biệt cho một chất. Màu của một chất liên quan với sự hấp thu và sự phản xạ của một chất. Mắt người nhìn thấy được màu bổ trợ cho màu hấp thu.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

Định luật Beer-lambert tuân theo một cách nghiêm ngặt chỉ khi các dạng đơn lẻ gây ra sự hấp thụ quan sát thấy. Tuy nhiên, định luật không tuân theo khi các dạng khác nhau của phân tử đang hấp thụ nằm trong cân bằng, khi chất tan và dung môi tạo thành phức qua một vài loại kết hợp, khi cân bằng nhiệt tồn tại giữa trạng thái electron cơ bản và trạng thái kích thích ở mức thấp, hay khi các hợp chất huỳnh quang và các hợp chất bị biến đổi bởi bức xạ có mặt trong dung dịch.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

I0 và I là cường độ của tia tới và tia truyền qua tương ứng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Trong đó:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

2.1.3 Định luật hấp thu Có hai định luật thực nghiệm được công thức hóa cho cường độ hấp thụ. Định luật Lambert phát biểu rằng phần tia tới bị hấp thụ phụ thuộc vào cường độ của nguồn. Định luật Beer phát biểu rằng sự hấp thụ tỉ lệ với số phân tử hấp thụ.

Từ các định luật này ta có phương trình sau của định luật Beer-Lambert:

N

thí nghiệm.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

λ (nm)

Màu phổ

Màu bổ sung

1

400-430

Tím

Vàng lục

2

430-480

Chàm

Vàng

3

480-490

Chàm lục

Cam

4

490-500

Lục chàm

Đỏ

5

500-560

Lục

Đỏ tía

6

560-580

Vàng lục

7

580-595

Vàng

8

595-650

Cam

9

650-730

Đỏ

Lục vàng

10

730-760

Đỏ tía

Lục

H N Y

B

10 00

Nhóm mang màu là nhóm chưa no, liên kết đồng hóa trị π trong phân tử gây

A

ra sự hấp thu bức xạ trong vùng UV-Vis.

-L

Ý

-H

Ó

Trong một hệ liên hợp, tính bất đối xứng của các liên kết π càng tăng thì các nhóm mang màu càng dễ hấp thu. Rất nhiều phân tử có thể có hai đến nhiều nhóm mang màu.

ÁN

2.1.4.3 Nhóm trợ màu (Auxochrome) Nhóm trợ màu là những nhóm thế no gắn vào nhóm mang màu làm thay đổi

Đ

ÀN

TO

cả bước sóng lẫn cường độ của dải hấp thu cực đại, thường làm chuyển dịch λmax

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

N

Chàm lục

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

Chàm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q TP

Đ ẠO Tím

2.1.4.2 Nhóm mang màu (Chromophore)

IỄ N D

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

Thứ tự

N

Bảng 2.1 Tổ hợp màu phổ và màu bổ sung

về phía dài hơn.

Ví dụ: –OH, -NH2,-Cl,… làm tăng tính hấp thu, làm giảm năng lượng cần

hấp thu.

2.1.4.4 Các hiệu ứng và sự dịch chuyển Sự dịch chuyển sang đỏ (red shift) λmax chuyển bước sóng dài hơn do các nhóm trợ màu, dung môi, ion hóa chất tan.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Sự dịch chuyển sang xanh (blue shift) λmax chuyển về bước sóng ngắn hơn.

Hiệu ứng tăng cường độ (hyperchromic effect): xảy ra khi có sự tăng tính

Ý

-H

Ó

A

Cấu trúc phân tử ảnh hưởng lớn đến khả năng hấp thụ UV-Vis của phân tử.

Các yếu tố này có thể là hiệu ứng cảm ứng I, liên hợp và các hiệu ứng không gian vị trí của các liên kết đôi ảnh hưởng nhiều đến sự hấp thu của phân tử, đặc biệt là các hệ liên hợp có thể làm thay đổi vị trí các cực đại hấp thu.

ÁN

-L

2.1.5.2 Môi trường Độ phân cực của dung môi có thể làm biến đổi môi trường điện tử của nhóm hấp thu mang màu. Một cách tổng quát, độ lớn của sự chuyển dịch có thể liên quan đến độ phân cực của dung môi.

TO ÀN Đ

IỄ N D

a. Dung môi

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

B

2.1.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hấp thu 2.1.5.1 Cấu trúc phân tử

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Hình 2.3 Các hiệu ứng và sự dịch chuyển

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

Hiệu ứng giảm cường độ (hypochromic effect): có sự phân ly phân tử dẫn đến giảm ε thường kèm chuyển dịch xanh.

N

liên hợp π-π trong phân tử dẫn đến tăng ε, thường kèm theo sự chuyển dịch đỏ.

Khi chọn dung môi cho dung dịch đo phổ UV-Vis ngoài việc dựa vào độ tan của chất cần nghiên cứu còn phải tính đến khả năng hấp thụ của chính dung môi này. b. Nồng độ Thường thì nồng độ chỉ ảnh hưởng đến cường độ của dải. Ở nồng độ cao, tương tác phân tử có thể gây nên sự thay đổi về dạng và vị trí của dải hấp thu.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Các thay đổi này làm khác đi tính tuyến tính của độ hấp thu theo nồng độ và dẫn đến kết quả định lượng không chính xác.

H

Ơ

Ảnh hưởng của pH trên phổ hấp thu rất lớn và chủ yếu làm dịch chuyển sự cân bằng giữa 2 dạng khác nhau.

N

c. pH

N

d. Nhiệt độ

Ưu điểm: phương pháp đơn giản, nhanh chóng, không tốn thời gian dựng đường chuẩn.

10 00

B

Nhược điểm: không thể tính chính xác nồng độ chất cần phân tích, cần phải pha dung dịch chuẩn có nồng độ gần với nồng độ chất cần phân tích.

A

2.1.6.2 Phương pháp đường chuẩn

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

Lập các đường chuẩn riêng lẻ đối với từng cấu tử trong hỗn hợp bằng cách đo những thể tích bằng nhau của một loạt dung dịch chất chuẩn có nồng độ khác nhau. Như vậy ta thu được một loạt các độ hấp phụ ứng với từng nồng độ chất chuẩn đã phân tích. Một đường chuẩn được dựng cho mỗi cấu tử với một trục nồng độ và trục kia là độ hấp phụ tương ứng để kiểm tra sự tuyến tính của phương pháp.

Từ các hệ số hấp phụ thu được của các cấu tử cần phân tích và đường chuẩn vừa thiết lập suy ra được nồng độ của chúng.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Đo cấu tử chất cần phân tích y như điều kiện đo mẫu chuẩn.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

H Ư

N

G

So sánh cường độ màu của dung dịch cần xác định với cường độ màu của dung dịch chuẩn đã biết nồng độ, dung dịch chuẩn với dung dịch cần xác định phải được đo trong cùng một điều kiện.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

2.1.6 Cơ sở lý thuyết của một số phương pháp trắc quang 2.1.6.1 Phương pháp so sánh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Nhiệt độ cũng ảnh hưởng đến việc đo quang phổ UV-Vis: sự trương nở đơn giản của dung môi đủ làm thay đổi độ hấp thu biểu kiến và do đó cũng làm ảnh hưởng đến độ đúng của kết quả.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Ó

-H

C0 = Cx

A

10 00

B

Nguyên tắc của phương pháp này là người ta dùng ngay mẫu phân tích làm nền để chuẩn bị một dãy mẫu đầu bằng cách lấy một lượng mẫu phân tích nhất định và thêm vào đó những lượng chất nhất định của hoạt chất cần xác định theo từng bậc (theo cấp số cộng). Ví dụ thêm vào là C1, C2,… như thế chúng ta sẽ được dãy mẫu chuẩn là: C1’= (Cx+C1)

-L

Ý

C2’= (Cx+C2)

ÁN

C3’= (Cx+C3) Trong đó Cx là hàm lượng của hoạt chất cần xác định trong mẫu phân tích.

Tiếp đó cũng chọn các điều kiện thí nghiệm phù hợp và hoạt chất cần phân tích, tiến hành ghi lại diện tích peak theo nồng độ.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

C4’= (Cx+C4)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2.1.6.3 Phương pháp thêm chuẩn

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

Hình 2.4 Mô tả đường chuẩn của phương pháp đường chuẩn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

-H

Ó

A

10 00

Bộ đơn sắc là một cách tử nhỏ, vai trò của nó là phân bố lại chùm ánh sáng thành các bước sóng thành phần của nó. Một hệ thấu kính hội tụ bước sóng đòi hỏi vào cuvet mẫu. Ánh sáng đi qua cuvet mẫu và đi tới detector. Detector ghi nhận cường độ của ánh sáng đã truyền qua I.

Ý

Detector nói chung là một ống nhân quang, mặc dù trong các thiết bị hiện

-L

đại các diot quang cũng được sử dụng.

ÁN

Máy quang phổ tử ngoại và khả kiến UV-Vis gồm những bộ phận chủ yếu

Đ

ÀN

TO

sau:

(1)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

B

TR ẦN

Nguồn sáng thường là đèn deuteri, phát xạ bức xạ điện tử trong vùng UV của phổ. Nguồn thứ 2 là đèn tungsten, được sử dụng cho bước sóng trong vùng khả kiến Vis.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Một máy quang phổ UV-Vis gồm có: nguồn sáng, bộ đơn sắc và detector.

IỄ N D

N

H Ư

2.1.7 Cấu tạo máy quang phổ UV-VIS

G

Hình 2.5 Đồ thị của phương pháp thêm chuẩn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Đèn nguồn (source): gồm đèn tungsten-halogen hay wolframe đo

vùng Vis, đèn Hydrogen hay Deuterium đo vùng UV (2) Bộ tạo ánh sáng đơn sắc bằng lăng kính thạch anh hay bằng cách tử (3) Hộp đựng mẫu (cuvet) bằng thủy tinh thạch anh để đo vùng UV-Vis, thủy tinh thường để đo vùng Vis. (4) Bộ phận tín hiệu (detector) là ống nhân quang điện đo từ 200-680 nm.

Trong trường hợp đo ở vùng có bước sóng lớn hơn 680 nm.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

(5) Bộ khuếch đại tín hiệu

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Loại một chùm tia (single beam): loại này để đo điểm, tức là ta đo độ hấp thu của từng bước sóng một. Muốn thu được toàn bộ phổ tự ta phải xây dựng lấy.

Ý

Hình 2.7 Sơ đồ cấu tạo máy quang phổ một chùm tia

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Loại hai chùm tia (giống nhau về cường độ và λ): thông thường có bộ phận tự ghi kèm và máy tự ghi toàn bộ phổ mà ta cần khảo sát.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Các máy quang phổ UV-Vis được phân loại theo cấu tạo:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

Phân loại :

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Hình 2.6 Sơ đồ cấu tạo của một máy UV-VIS

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

(6) Bộ phận ghi nhận tín hiệu.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

Hỗn hợp chất cần phân tích được hòa tan trong một dung môi thích hợp, tiêm một thể tích chính xác vào bộ phận tiêm mẫu và được mang vào cột bởi một một dung môi (pha động). Sự tách diễn ra trong cột có chứa những hạt xốp có diện tích bề mặt lớn (pha tĩnh). Với việc chọn pha động và pha tĩnh thích hợp, các cấu tử trong mẫu sẽ di chuyển dọc trên cột với những tốc độ khác nhau. Khi những cấu tử lần lượt thoát ra khỏi cột và đi vào detector thích hợp, ở đây tín hiệu được ghi lại, xử lí và cho ra một sắc ký đồ, cho biết sự hiện diện của mỗi cấu tử dưới dạng một peak. Khi đó lượng cấu tử có trong mẫu được tính toán dựa vào chiều cao hoặc diện tích peak của nó.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

2.2 Tổng quan về HPLC 2.2.1 Nguyên tắc

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Hình 2.8 Sơ đồ cấu tạo máy quang phổ hai chùm tia

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Hình 2.9 Sơ đồ cấu tạo máy sắc ký lỏng hiệu năng cao

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.2 Các bộ phận cơ bản của máy HPLC 2.2.2.1 Bình chứa dung môi

Ơ

N

H

Dung môi được bơm vào phải không được chứa bụi bẩn hoặc những vật lạ khác. Cần lọc dung môi qua giấy lọc 0,45 µm trước khi sử dụng.

N

Bình chứa dung môi là bình thủy tinh có nắp được khoan lỗ dẫn ống nhựa để dẫn dung môi từ bình đến bơm.

Ó

A

2.2.2.3 Hệ thống tiêm mẫu

-L

Ý

-H

Phương pháp tiêm mẫu đầu tiên mượn kỹ thuật tiêm mẫu trong GC, trong đó dùng syringe tiêm mẫu qua một đệm cao su tự hàn kín được đặt tại đầu của bộ tiêm mẫu ở đầu cột tách.

Đ

ÀN

TO

ÁN

Phương pháp phổ biến hiện nay là dùng van tiêm mẫu có một vòng mẫu có dung tích khác nhau từ 5-500 µL. Phương pháp này rất dễ sử dụng, dễ tự động hóa và cho độ chính xác rất cao, mặc dù tương đối đắt tiền.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

B

TR ẦN

Chức năng chính của bơm là vận chuyển pha động từ bình chứa dung môi đi qua cột tách với tốc độ xác định. Hệ thống bơm phải giữ cho pha động luôn chảy với một lưu lượng không đổi. Ống dẫn và hệ thống nối phải là loại chịu được áp suất sinh ra do hệ thống bơm. Hệ thống điều khiển bằng bộ xử lí có khả năng cung cấp pha động hoặc hằng định hoặc thay đổi tỷ lệ thành phần theo một chương trình xác định.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H Ư

2.2.2.2 Hệ thống bơm

IỄ N D

N

G

Đ ẠO

Áp suất trong cột tách có thể lớn hơn hai trăm lần áp suất khí quyển. Cột tách có thể chịu đến 200 bar nhưng hầu hết những thí nghiệm trong HPLC chỉ sử dụng áp suất trong cột khoảng 20-100 bar. Áp suất trong cột phụ thuộc vào chiều dài cột, kích thước hạt của pha tĩnh, độ nhớt và tốc độ dòng của pha động.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Cần loại bỏ hoặc đuổi các không khí hòa tan hoặc các bọt không khí trong dung môi vì khí hòa tan có thể làm biến dạng các peak và sinh bọt khí làm nhiễu nền. Loại bỏ bằng cách chạy siêu âm, hoặc sục khí trơ. Áp suất của cột tách

2.2.2.4 Cột sắc ký Các cột sử dụng trong HPLC được làm bằng vật liệu thép không rỉ với mặt trong được làm nhẵn. Kích thước phổ biến của một cột là đường kính bằng 6,35 mm, đường kính trong bằng 4,6 mm và chiều dài lên đến 25 cm. Cột với đường kính trong nhỏ hơn 2 mm thường được coi là vi cột.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

-H

Ó

dung môi và trong mẫu tiêm vào.

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

Cột bảo vệ không làm thay đổi hiệu quả tách của cột, cột bảo vệ được đổ đầy các hạt nhồi tráng film mỏng hoặc có pha liên kết như trong cột phân tích.

Cột bảo vệ có một dung lượng xác định cho chất nhiễm bẩn. Số lần tiêm mẫu, sự suy giảm của hình dáng peak hoặc độ phân giải là dấu hiệu cần phải thay cột bảo vệ.

2.2.2.5 Detector

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

A

vệ những cột đắt tiền khỏi sự xâm nhập của các hạt bẩn nhỏ có thể có trong

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Sau bộ phận tiêm mẫu và trước cột tách cần phải có cột bảo vệ giúp bảo

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q 10 00

 Tiền cột/cột bảo vệ

B

Hình 2.10 Một số loại cột tách dùng trong HPLC

IỄ N D

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

Nhiệt độ cột của pha động và cột phải được giữ ổn định trong suốt thời gian phân tích. Phần lớn quá trình tách được thực hiện ở nhiệt độ phòng, nhưng cột có thể được làm nóng nhằm thu được hiệu quả cao hơn. Tuy nhiên, nhiệt độ cột cũng không được phép vượt quá 60◦C vì khả năng phân hủy của pha tĩnh hoặc sự thay đổi thành phần của pha động có thể xảy ra.

N

Cột được nhồi các hạt có cở đường kính 3, 4, 5, 10 µm. Chất nhồi trong cột thường là silicagen hoặc silicagen có bọc hoặc gắn hóa học một màng mỏng chất hữu cơ. Bên cạnh silicagen người ta còn dùng Al2O3 hạt chất trao đổi ion.

Là bộ phận phát hiện các chất khi chúng ra khỏi cột và cho các tín hiệu ghi trên sắc ký đồ để có thể định tính và định lượng. Tùy theo tính chất của các chất cần phân tích mà sử dụng các detector thích hợp và phải thỏa mãn điều kiện trong một vùng nồng độ nhất định của chất phân tích.

Có nhiều loại detector khác nhau trong đó detector UV-VIS được sử dụng phổ biến nhất. Detector UV-VIS là loại đơn giản chỉ có thể đặt một bước sóng cố định trong suốt quá trình sắc ký. Ngoài ra, có thể detector Diod array có khả năng thay đổi bước sóng theo chương trình đã đặt trong một quá trình sắc ký, có thể quét chồng phổ hoặc lấy phổ 3D để phát hiện định tính.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.3 Máť&#x2122;t sáť&#x2018; Ä&#x2018;ấi lưᝣng Ä&#x2018;ạc trĆ°ng cho sắc kĂ˝ láť?ng hiáť&#x2021;u nÄ&#x192;ng cao 2.2.3.1 Háť&#x2021; sáť&#x2018; phân báť&#x2018;

N

Cân báşąng cᝧa máť&#x2122;t cẼu táť­ X trong háť&#x2021; sắc kĂ˝ cĂł tháť&#x192; Ä&#x2018;ưᝣc mĂ´ tả báşąng phĆ°ĆĄng trĂŹnh nhĆ° sau:

Ć

Xpha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng â&#x2020;&#x201D; Xpha tÄŠnh

TR ẌN

Ta cĂł:

đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026;â&#x20AC;˛ = đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026; â&#x2C6;&#x2019; đ?&#x2018;Ą0

A

10 00

B

t0: tháť?i gian lĆ°u cháşżt( tháť?i gian khĂ´ng lĆ°u giᝯ) lĂ khoảng tháť?i gian Ä&#x2018;áť&#x192; cho chẼt nĂ o Ä&#x2018;Ăł khĂ´ng cĂł ĂĄi láťąc váť&#x203A;i pha tÄŠnh Ä&#x2018;i qua cáť&#x2122;t; Ä&#x2018;Ăł cĹŠng lĂ khoảng tháť?i gian pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng Ä&#x2018;i tᝍ Ä&#x2018;ầu cáť&#x2122;t Ä&#x2018;áşżn cuáť&#x2018;i cáť&#x2122;t. tR: tháť?i gian lĆ°u cᝧa máť&#x2122;t cẼu táť­ tᝍ khi vĂ o cáť&#x2122;t Ä&#x2018;áşżn khi tĂĄch ra kháť?i cáť&#x2122;t. tâ&#x20AC;&#x2122;R tháť?i gian lĆ°u tháş­t cᝧa máť&#x2122;t cẼu táť­.

-H

Ă&#x201C;

2.2.3.3 Tháť&#x192; tĂ­ch lĆ°u trᝯ

-L

Ă?

Trong sắc kĂ˝ láť?ng, thay vĂŹ tháť?i gian lĆ°u, Ä&#x2018;Ă´i khi nguáť?i ta sáť­ d᝼ng khĂĄi niáť&#x2021;m tháť&#x192; tĂ­ch lĆ°u VR.

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

TĆ°ĆĄng táťą ta cĹŠng cĂł cĂĄc khĂĄi niáť&#x2021;m tháť&#x192; tĂ­ch khĂ´ng lĆ°u giᝯ Vo vĂ tháť&#x192; tĂ­ch lĆ°u hiáť&#x2021;u cháť&#x2030;nh Vâ&#x20AC;&#x2122;R Tháť&#x192; tĂ­ch lĆ°u vĂ tháť?i gian lĆ°u quan háť&#x2021; theo háť&#x2021; thᝊc sau:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H ĆŻ

N

2.2.3.2 Tháť?i gian lĆ°u

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

Ä? áş O

Cs: náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; cẼu táť­ trong pha tÄŠnh.

CM: náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; cẼu táť­ trong pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng.

Háť&#x2021; sáť&#x2018; K tĂšy thuáť&#x2122;c vĂ o bản chẼt pha tÄŠnh, pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng vĂ chẼt phân tĂ­ch.

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U .Q

Váť&#x203A;i:

Iáť&#x201E; N D

đ??śđ?&#x2018; đ??śđ?&#x2018;&#x20AC;

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

đ??ž=

Y

N

H

Háşąng sáť&#x2018; cân báşąng K cho cân báşąng nĂ y Ä&#x2018;ưᝣc gáť?i lĂ táť&#x2030; láť&#x2021; phân báť&#x2018; hay háşąng sáť&#x2018; phân báť&#x2018; (partition coefficient) vĂ Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh nhĆ° sau:

đ?&#x2018;&#x2030;đ?&#x2018;&#x2026; = đ??š. đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026; Trong Ä&#x2018;Ăł: F: lĆ°u lưᝣng dòng pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng Ä&#x2018;i qua cáť&#x2122;t tĂ­nh báşąng mL/phĂşt, V tĂ­nh báşąng mL tR: tháť?i gian lĆ°u tĂ­nh báşąng phĂşt.

TĆ°ĆĄng táťą ta cĂł: đ?&#x2018;&#x2030;đ?&#x2018;&#x2026;â&#x20AC;˛ = đ??š. đ?&#x2018;Ą. đ?&#x2018;&#x2030;đ?&#x2018;&#x2026;â&#x20AC;˛

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

đ?&#x2018;&#x2030;0â&#x20AC;˛ = đ??š. đ?&#x2018;Ą. đ?&#x2018;&#x2030;0â&#x20AC;˛

Y

10 00

B

Hiáť&#x2021;u quả tĂĄch cᝧa cáť&#x2122;t hay còn gáť?i lĂ hiáť&#x2021;u nÄ&#x192;ng, sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt N cᝧa cáť&#x2122;t.

-H

Ă&#x201C;

A

Sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt N Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh theo cĂ´ng thᝊc: đ?&#x2018; =

đ??ż đ??ť

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

-L

Ă?

Váť&#x203A;i:

L: chiáť u dĂ i cáť&#x2122;t H: chiáť u cao máť&#x2122;t Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt

H Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh theo phĆ°ĆĄng trĂŹnh VanDeemter: đ??ť =đ??´+

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2.2.3.5 Hiáť&#x2021;u quả tĂĄch cᝧa cáť&#x2122;t

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

k = 5 â&#x20AC;&#x201C; 7 lĂ lĂ˝ tĆ°áť&#x;ng nhẼt.

TR ẌN

H ĆŻ

N

G

k lĂ tᝡ láť&#x2021; tháť?i gian mẍu náşąm trong pha tÄŠnh so váť&#x203A;i tháť?i gian náşąm trong pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng. Hay nĂłi cĂĄch khĂĄc k lả tᝡ láť&#x2021; giᝯa sáť&#x2018; mol chẼt tan trong pha tÄŠnh váť&#x203A;i sáť&#x2018; mol chẼt tan trong pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng. Háť&#x2021; sáť&#x2018; dung lưᝣng k cĂ ng láť&#x203A;n thĂŹ tháť?i gian phân tĂ­ch cĂ ng lâu.

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q TP Ä? áş O

đ?&#x2018;&#x2030;đ?&#x2018;&#x2026;â&#x20AC;˛ đ?&#x2018;&#x2030;đ?&#x2018;&#x2026; â&#x2C6;&#x2019; đ?&#x2018;&#x2030;0 đ?&#x2018;&#x2DC;= = đ?&#x2018;&#x2030;0 đ?&#x2018;&#x2030;0

Iáť&#x201E; N D

U

đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026;â&#x20AC;˛ đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026; â&#x2C6;&#x2019; đ?&#x2018;Ą0 đ?&#x2018;&#x2DC;= = đ?&#x2018;Ą0 đ?&#x2018;Ą0

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

H

Ć

2.2.3.4 Háť&#x2021; sáť&#x2018; dung lưᝣng Còn Ä&#x2018;ưᝣc gáť?i lĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; lĆ°u giᝯ Ä&#x2018;ưᝣc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh nghÄŠa lĂ tᝡ sáť&#x2018; giᝯa tháť?i gian lĆ°u hiáť&#x2021;u cháť&#x2030;nh vĂ tháť?i gian khĂ´ng lĆ°u giᝯ tháť&#x192; hiáť&#x2021;n khả nÄ&#x192;ng lĆ°u giᝯ cᝧa cáť&#x2122;t Ä&#x2018;áť&#x2018;i váť&#x203A;i cẼu táť­ vĂ Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh theo cĂ´ng thᝊc sau:

N

ĆŻu Ä&#x2018;iáť&#x192;m cᝧa viáť&#x2021;c sáť­ d᝼ng tháť&#x192; tĂ­ch lĆ°u lĂ Ä&#x2018;ấi lưᝣng nĂ y khĂ´ng ph᝼ thuáť&#x2122;c vĂ o lĆ°u lưᝣng dòng pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng vĂ Vo chĂ­nh lĂ tháť&#x192; tĂ­ch ráť&#x2014;ng cᝧa cáť&#x2122;t.

đ??ľ + đ??ś. đ?&#x2018;˘Ě&#x2026; đ?&#x2018;˘Ě&#x2026;

Trong Ä&#x2018;Ăł: A: sáť&#x2018; hấng biáť&#x192;u tháť&#x2039;s sáťą chảy ráť&#x2018;i cᝧa dòng dung mĂ´i pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng B: biáť&#x192;u tháť&#x2039; sáťą khuáşżch tĂĄn dáť?c theo cáť&#x2122;t C: tráť&#x; láťąc chuyáť&#x192;n kháť&#x2018;i trong cáť&#x2122;t ĹŤ: táť&#x2018;c Ä&#x2018;áť&#x2122; dĂ i cᝧa pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng (cm/phĂşt)

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Váť&#x203A;i táť&#x2018;c Ä&#x2018;áť&#x2122; dòng gần váť&#x203A;i táť&#x2018;c Ä&#x2018;áť&#x2122; táť&#x2018;i Ć°u (nghiĂŞn cᝊu káťš váť&#x203A;i tᝍng chẼt trĂŞn cáť&#x2122;t Ä&#x2018;ạc trĆ°ng) thĂŹ: đ??ť = 2,8. đ?&#x2018;&#x2018;đ?&#x2018;?

Ć N

Y

đ?&#x2018;&#x2DC;2â&#x20AC;˛ đ?&#x2018;&#x2DC;1â&#x20AC;˛

B

đ?&#x203A;ź=

10 00

Trong Ä&#x2018;Ăł:

kâ&#x20AC;&#x2122;1 lĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; dung lưᝣng cᝧa peak Ä&#x2018;ᝊng (ra) trĆ°áť&#x203A;c

Ă&#x201C;

A

kâ&#x20AC;&#x2122;2 lĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; dung lưᝣng cᝧa peak Ä&#x2018;ᝊng sau.

-L

Ă?

-H

2.2.3.7 Ä?áť&#x2122; phân giải Ä?ây lĂ Ä&#x2018;ấi lưᝣng biáť&#x192;u tháť&#x2039; rĂľ cả 3 khả nÄ&#x192;ng cᝧa cáť&#x2122;t sắc kĂ˝: sáťą giải hẼp, sáťą cháť?n láť?c, vĂ hiáť&#x2021;u quả tĂĄch. Ä?áť&#x2122; phân giải Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng cĂ´ng thᝊc:

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

đ?&#x2018;&#x2026; =2Ă&#x2014;

(đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026;2 â&#x2C6;&#x2019; đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x2026;1 ) đ?&#x2018;&#x160;2 + đ?&#x2018;&#x160;1

Trong Ä&#x2018;Ăł:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẌN

LĂ Ä&#x2018;ấi lưᝣng Ä&#x2018;ạc trĆ°ng cho khả nÄ&#x192;ng tĂĄch hai chẼt cᝧa cáť&#x2122;t.

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H ĆŻ

2.2.3.6 Ä?áť&#x2122; cháť?n láť?c

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U

.Q TP

N

G

Ä? áş O

KĂ­ch thĆ°áť&#x203A;c hất hẼp ph᝼ (dp): sáť&#x2018; hất cĂ ng nháť?, sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt cĂ ng láť&#x203A;n. Ä?áť&#x2122; nháť&#x203A;t cᝧa pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng cĂ ng láť&#x203A;n, N cĂ ng nháť?.

Nhiáť&#x2021;t Ä&#x2018;áť&#x2122; cĂ ng cao, N cĂ ng láť&#x203A;n.

Táť&#x2018;c Ä&#x2018;áť&#x2122; pha Ä&#x2018;áť&#x2122;ng cĂ ng cao, N cĂ ng nháť?. Tuy nhiĂŞn, váť&#x203A;i hất nháť&#x201C;i cĂł kĂ­ch thĆ°áť&#x203A;c nháť? hĆĄn 2 Âľm sáş˝ khĂ´ng Ä&#x2018;ĂĄng káť&#x192; vĂ quĂĄ trĂŹnh tĂĄch Ä&#x2018;ưᝣc Ä&#x2018;Ẋy nhanh.

Iáť&#x201E; N D

N cĂ ng láť&#x203A;n, khả nÄ&#x192;ng tĂĄch cĂ ng cao, cĂĄc peak sắc kĂ˝ cĂ ng háşšp vĂ nháť?n.

N cĂ ng nháť?, khả nÄ&#x192;ng tĂĄch cĂ ng kĂŠm, cĂĄc peak tĂš vĂ ráť&#x2122;ng.

CĂĄc yáşżu táť&#x2018; ảnh hĆ°áť&#x;ng Ä&#x2018;áşżn sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt:

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

H

Ă? nghÄŠa cᝧa sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt N: -

N

Tuy nhiĂŞn, tháťąc táşż khĂ´ng phải chẼt nĂ o cĹŠng Ä&#x2018;ưᝣc nghiĂŞn cᝊu káťš váť táť&#x2018;c Ä&#x2018;áť&#x2122; dòng táť&#x2018;i Ć°u nĂŞn thĆ°áť?ng tĂ­nh sáť&#x2018; Ä&#x2018;ÄŠa lĂ˝ thuyáşżt theo sắc kĂ˝ Ä&#x2018;áť&#x201C;.

tR1 vĂ tR2: lần lưᝣt lĂ tháť?i gian lĆ°u cᝧa peak ra trĆ°áť&#x203A;c vĂ tháť?i gian lĆ°u cᝧa peak ra sau.

W2 vĂ W1: lần lưᝣt lĂ chiáť u ráť&#x2122;ng Ä&#x2018;o Ä&#x2018;ưᝣc áť&#x; váť&#x2039; trĂ­ ½ chiáť u cao cᝧa peak ra trĆ°áť&#x203A;c vĂ peak ra sau.

Hay: 1 đ?&#x2018;&#x2DC;â&#x20AC;˛ (đ?&#x203A;ź â&#x2C6;&#x2019; 1) đ?&#x2018;&#x2026;= Ă&#x2014; Ă&#x2014; Ă&#x2014; â&#x2C6;&#x161;đ?&#x2018; â&#x20AC;˛ 4 1+đ?&#x2018;&#x2DC; đ?&#x203A;ź

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.3.8 Háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng (Asymmetry factor) vĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; kĂŠo Ä&#x2018;uĂ´i (Tailing Factor)

đ?&#x2018;&#x17D;+đ?&#x2018;?

2đ?&#x2018;&#x17D;

-H

Ă&#x201C;

a: ½ chiáť u ráť&#x2122;ng phĂ­a trĆ°áť&#x203A;c peak áť&#x; váť&#x2039; trĂ­ 5% chiáť u cao peak

Ă?

b: ½ chiáť u ráť&#x2122;ng phĂ­a sau peak áť&#x; váť&#x2039; trĂ­ 5% chiáť u cao peak.

đ??´đ?&#x2018; =

đ?&#x2018;? đ?&#x2018;&#x17D;

Trong Ä&#x2018;Ăł: a: ½ chiáť u ráť&#x2122;ng phĂ­a trĆ°áť&#x203A;c peak áť&#x; váť&#x2039; trĂ­ 10% chiáť u cao peak b: ½ chiáť u ráť&#x2122;ng phĂ­a sau peak áť&#x; váť&#x2039; trĂ­ 10% chiáť u cao peak.

Háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng Ä&#x2018;ưᝣc chẼp nháş­n khi náşąm trong khoảng 0,9-1,2

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

-L

Háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng Ä&#x2018;ưᝣc sáť­ d᝼ng ráť&#x2122;ng rĂŁi trong nhiáť u ngĂ nh khĂĄc nhau, Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng cĂ´ng thᝊc:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

đ?&#x2018;&#x2021;đ?&#x2018;&#x201C; =

A

Trong Ä&#x2018;Ăł:

10 00

B

Háť&#x2021; sáť&#x2018; kĂŠo Ä&#x2018;uĂ´i thĆ°áť?ng dĂšng trong phân tĂ­ch dưᝣc phẊm, Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng cĂ´ng thᝊc:

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẌN

HĂŹnh 2.11 Háť&#x2021; sáť&#x2018; kĂŠo Ä&#x2018;uĂ´i vĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng peak trong HPLC

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q H ĆŻ

N

G

Ä? áş O

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ć

N

Háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng vĂ háť&#x2021; sáť&#x2018; kĂŠo Ä&#x2018;uĂ´i lĂ cĂĄc Ä&#x2018;ấi lưᝣng Ä&#x2018;ạc trĆ°ng Ä&#x2018;áť&#x192; xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh sáťą kĂŠo Ä&#x2018;uĂ´i cᝧa peak phân tĂ­ch.

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Ơ

Gibberellin là nhóm phytohormone thứ hai được phát hiện sau auxin. Từ những nghiên cứu bệnh lý “bệnh lúa von” do loài nấm ký sinh ở cây lúa Gibberella fujikuroi (nấm Fusarium miniliforme ở giai doạn dinh dưỡng) gây nên.

Năm 1926, nhà nghiên cứu bệnh lý thực vật Eiichi Kurosawa (Nhật Bản) đã thành công trong thí nghiệm gây “bệnh von” nhân tạo cho lúa và ngô..

N

2.3 Tổng quan về Gibberellic acid 2.3.1 Sơ lược về lịch sử phát hiện Gibberellic acid

TR ẦN

Người ta đã tìm ra được nhiều nguồn gibberellin ở nhiều nguồn khác nhau như ở các loại nấm, thực vật bậc thấp và thực vật bậc cao.

10 00

B

2.3.2 Cấu tạo, danh pháp, tính chất 2.3.2.1 Cấu tạo

A Ó

OH

CO HO

H

Ý

-H

H

COOH

-L ÁN TO ÀN Đ

IỄ N D

O

Hình 2.12 Công thức cấu tạo của Gibberellic acid

Công thức phân tử của Gibberellic acid: C19H22O6

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

N

G

Năm 1956, một nhóm nhà khoa học người Mỹ đã tách được gibbereliin từ các thực vật bậc cao và xác định được rằng đây là phytohormone tồn tại trong nhiều bộ phận của cây. Hiện nay, người ta đã phát hiện ra trên 50 loại gibberellin và ký hiệu A1, A2, A3,… . Trong đó, gibberellin A3 (hay còn gọi là Gibberellic acid) có tác dụng sinh lý mạnh nhất.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Năm 1955, hai nhóm nghiên cứu của Anh và Mỹ đã phát hiện ra Gibberellic acid ở cây lúa bị bệnh lúa von và xác định được công thức hóa học của nó.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Teijiro Yabuta (1888-1977) vào năm 1938 đã tách thành công hai chất dưới dạng tinh thể từ nấm lúa von gọi là gibberellin A và gibberellin B nhưng chưa xác định được bản chất hóa học của chúng.

Khối lượng phân tử: 346,38 g/mol 2.3.2.2 Danh pháp

Tên theo IUPAC: (3S,3aS,4S,4aS,7S,9aR,12S)-7,12-dihydroxy-3-methyl6-methyllene-2-oxoperhydro-4a,7-methano-9b,3-propeno[1,2-b]furan-4carboxylic acid Tên gọi khác: Gibbrel, GA3, A3,…

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.3.2.3 Tính chất vật lý Tinh thể màu trắng, không mùi, ổn định ở điều kiện thường.

Nóng chảy ở 233-235 oC

Ó

A

10 00

B

Gibberellic acid kiểm soát hướng đặt các vi sợi cellulose lúc mới vừa được tổng hợp trong vách tế bào, hướng đặt này lại do hướng đặt của các vi ống ở ngoại vi tế bào quyết định. Gibberellic acid cảm ứng sự đặt các vi ống theo hướng ngang ở nhiều kiểu tế bào (kể cả tế bào mà Gibberellic acid không kích thích sự kéo dài), tuy nhiên sự phối hợp hoạt động giữa và auxin trong sự đặt các vi ống chưa được biết

-L

Ý

-H

Gibberellic acid hạ thấp nồng độ Ca2+ trong vách, giúp kéo dãn vách (do Ca2+ cản trở sự kéo dãn vách tế bào thực vật). Trong hoạt động này, vách tế bào không bị acid hóa.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

Gibberellic acid cản trở hoạt động của các peroxidaz vách tế bào, do đó làm chậm sự hóa cứng của vách.

2.3.3.2 Sự kéo dài của thân

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

2.3.3 Tính chất sinh lý của Gibberellic acid 2.3.3.1 Sự kéo dài tế bào

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H Ư

N

Hình 2.13 Gibberellic acid dạng tinh thể

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

Độ tan trong nước ở 20oC: 5 g/l

Hiệu quả sinh lý rõ rệt nhất của Gibberellic acid là kích thích mạnh mẽ sự sinh trưởng kéo dài của thân và vươn dài của lóng. Hiệu quả này có được là do Gibberellic acid kích thích mạnh mẽ lên pha giãn của tế bào theo chiều dọc. Vì vậy, khi được xử lý bằng Gibberellic acid, cây sẽ tăng trưởng nhanh sinh khối, làm cho cây tăng chiều cao mạnh (đậu xanh, đậu tương thành dây leo, cây đai cao gấp 2-3 lần). Gibberellic acid còn góp phần thúc đẩy phân chia tế bào.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.3.3.3 Sự kéo dài lóng và tăng trưởng lá

N

H

Ơ

Xử lý Gibberellic acid liều cao (hay phối hợp với Cytokinin) kích thích mạnh sự tăng trưởng lá.

N

Kích thích sự kéo dài lóng, vừa do sự kéo dài, vừa do sự phân chia tế bào thân, là đặc tính nổi bật của gibberellin nói chung và Gibberellic acid nói riêng.

Gibberellic acid kích thích kích thích phân chia tế bào nhu mô vỏ và biểu bì.

Y

2.3.3.4 Sự này mầm, nảy chồi

10 00

Gibberellic acid ảnh hưởng đến sự phân hóa giới tính của hoa, ức chế hoa cái và kích thích sự phát triển của hoa đực.

-H

Ó

A

Gibberellic acid có tác dụng tăng kích thước quả và tạo quả không hạt, cho hiệu quả rõ rệt khi kết hợp với auxin.

Ý

2.3.4 Độc tính

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Gibberellic acid là chất ổn định, dễ bắt cháy và không tương thích với acid khác cũng như các chất oxy hóa mạnh. Nó có thể tác động như một chất kích thích dị ứng mắt (R36). Liều gây tử vong đối với 50% mẫu chuột cống thử nghiệm bằng đường miệng (LD50) là 6300 mg/kg.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

B

Trong nhiều trường hợp, Gibberellic acid kích thích ra hoa rõ rệt.

Gibberellic acid giúp kéo dài nhanh chóng các cụm hoa, kích thích ra hoa cây dài ngày trong điều kiện ngắn ngày

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

2.3.3.5 Sự ra hoa, quả

IỄ N D

H Ư

N

G

Trên cơ sở đó, nếu xử lý Gibberellic acid ngoại sinh thì có thể phá bỏ trạng thái ngủ của hạt, củ, căn hành kể cả trong trạng thái ngủ sâu.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Gibberellic acid kích thích sự này mẩm, nảy chồi của các mầm ngủ, của hạt và củ. Hàm lượng Gibberellic acid thường tăng lên lúc chồi cây, củ, căn hành hết thời kỳ nghỉ, lúc hạt nảy mầm. trong trường hợp này, Gibberellic acid kích thích sản sinh các enzyme thủy phân như amilase, protase, photpstase,... xúc tiến quá trình phân hủy các polimer thành các monomer khác, tạo điều kiện về nguyên liệu và năng lượng cho quá trình nảy mầm.

Ngoài ra, nghiên cứu “The Toxicity and Teratogenicity of gibberellic acid (GA3) base on the frog embryo teratogenesis assay-Xenopus (FETAX)” của đại học Cukurova (Adana, Thổ Nhĩ kỳ) chỉ ra rằng, nồng độ Gibberellic acid tăng cao gây nên đột biến gen của phôi thai ếch, đồng thời gây ra hiện tượng vô sinh ở thế hệ sau. Kết luận chỉ ra rằng, tuy chưa có trường hợp ghi nhận hiện tượng phôi thai đột biến ở người do sự tăng Gibberellic acid gây ra nhưng cần cẩn trọng trong việc sử dụng Gibberellic acid cũng như thời gian cách ly và nồng độ cho phép trên nông sản.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Ơ

Hiện nay, một số nông sản (dưa hấu, ổi, chanh, mít,…) được xử lý bằng Gibberellic acid với nồng độ cao nhằm ức chế thụ phấn; từ đó gây ra hiện tượng “quả không hạt”. Mặt dù các loại quả không hạt rất được ưa chuộng nhưng bên cạnh đó, dư lượng Gibberellic acid còn tồn đọng trên quả ít nhiều gây ra ảnh hưởng đến sức khỏe con người, đặc biệt là sức khỏe sinh sản. Gibberellic ở nồng độ cao có thể ức chế các loại hooc-môn tăng trưởng và sinh sản ở người.

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

-L

Ý

-H

Ó

Thẩm định qui trình phân tích là một quá trình tiến hành thiết lập bằng thực nghiệm các thông số đặc trưng của phương pháp để chứng minh rằng phương pháp đáp ứng yêu cầu phân tích dự kiến.

ÁN

2.4.2 Mục đích

Đ

ÀN

TO

Thẩm định phương pháp phân tích là một công việc bắt buộc, có tính chất định kỳ nhằm đảm bảo phương pháp phân tích phù hợp và kết quả phân tích đạt độ tin cậy trong suốt quá trình phân tích.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

A

10 00

2.4 Tổng quan về thẩm định quy trình định lượng Gibberallic acid bằng HPLC/UV-VIS 2.4.1 Định nghĩa

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

B

TR ẦN

Ngoài ra, Gibberellic acid còn có thể được phân tích bằng các phương pháp khác nhau như HPLC với đầu dò MS/MS, HPLC với đầu dò DAD, phương pháp điện thế (Voltammetry).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H Ư

N

G

Đ ẠO

Sử dụng phương pháp HPLC có cột tách LiChrospher RP 18 (250 x 4,6 mm i.d, 5 µm) hoặc tương đương với pha động là Methanol : H2O : Phosphoric acid (35 : 64,9 : 0,1) nối với đầu dò UV-VIS có thể tách và định lượng được Gibberellic acid trong khoảng tuyến tính 25-200 mg/L. Đây là phương pháp được sử dụng rộng rãi nhất do tính chính xác cao, thời gian thực hiên nhanh chóng, giá thành hợp lý (dung môi pha động và đầu dò tương đối rẻ hơn các loại khác.

IỄ N D

.Q

2.3.5 Tổng quan về định lượng Gibberellic acid

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Bộ Nông nghiệp Hoa Kỳ nghiêm cấm phun Gibberellic acid quá ngưỡng liều là 5 mg/m2 đối với đa số các loại nông sản, rau quả. Bên cạnh đó, Bộ Nông nghiệp Hoa kỳ cũng quy định thời gian cách ly tối thiểu là 5 ngày và mức dư lượng cho phép (MRL – Maximum Residuce Level) là 0,001 ppm.

Các yêu cầu cần thực hiện trong thẩm định như: tính đặc hiệu (specificity), độ đúng (accuracy), độ chính xác (precision), giới hạn phát hiện (limit of detection, LOD), giới hạn định lượng (limit of quantitation, LOQ), tính tuyến tính (linearity), miền giá trị (range)…

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Ć

TĂ­nh Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u hay còn gáť?i lĂ tĂ­nh cháť?n láť?c (selectivity) cᝧa máť&#x2122;t qui trĂŹnh phân tĂ­ch lĂ khả nÄ&#x192;ng cᝧa qui trĂŹnh cho phĂŠp xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh chĂ­nh xĂĄc vĂ Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u cĂĄc chẼt cần phân tĂ­ch mĂ khĂ´ng báť&#x2039; ảnh hĆ°áť&#x;ng báť&#x;i sáťą cĂł mạt cᝧa cĂĄc chẼt khĂĄc cĂł trong mẍu tháť­.

N

2.4.3 CĂĄc cháť&#x2030; tiĂŞu thẊm Ä&#x2018;áť&#x2039;nh quy trĂŹnh phân tĂ­ch 2.4.3.1 TĂ­nh Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u (Specificity)

Y

TĂšy Ä&#x2018;áť&#x2018;i tưᝣng trong qui trĂŹnh phân tĂ­ch mĂ tháťąc hiáť&#x2021;n tháť­ nghiáť&#x2021;m. Náşżu máť&#x2122;t

Váť&#x203A;i tháť­ tinh khiáşżt: Ä&#x2018;ảm bảo ráşąng xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;Ăşng vĂ chĂ­nh xĂĄc hĂ m

G

lưᝣng cᝧa cåc tấp chẼt có trong mẍu th᝭ như cåc chẼt liên quan, cåc kim loấi

H ĆŻ

N

nạng, cĂĄc chẼt phân hᝧy,â&#x20AC;Ś

Trong tháť­ Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng, tĂ­nh Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u Ä&#x2018;ưᝣc biáť&#x192;u tháť&#x2039; báşąng Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂŞnh láť&#x2021;ch hay

TR ẌN

hiáť&#x2021;u giᝯa cĂĄc káşżt quả thu Ä&#x2018;ưᝣc tᝍ máť&#x2122;t mẍu giả Ä&#x2018;áť&#x2039;nh váť&#x203A;i cĂĄc káşżt quả thu Ä&#x2018;ưᝣc tᝍ mẍu tháť­. TĂ­nh Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u cĹŠng lĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; nhiáť&#x2026;u cᝧa phĆ°ĆĄng phĂĄp. Ä?áť&#x2122; nhiáť&#x2026;u cĂ ng thẼp,

B

Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u cĂ ng cao.

-

10 00

CĂĄc cĂĄch xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u:

ChuẊn báť&#x2039; mẍu: trong khi xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh theo phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť xuẼt váť&#x203A;i mẍu tháť­,

Ă&#x201C;

A

ta tiáşżn hĂ nh chuẊn báť&#x2039; máť&#x2122;t mẍu giả Ä&#x2018;áť&#x2039;nh, mẍu nĂ y bao gáť&#x201C;m cĂĄc thĂ nh phần giáť&#x2018;ng

trắng.

XĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh hiáť&#x2021;u hay Ä&#x2018;áť&#x2122; sai láť&#x2021;ch cᝧa cĂĄc káşżt quả thu Ä&#x2018;ưᝣc.

Ă N

-

Ă?

XĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh cĂĄc mẍu trĂŞn phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť xuẼt. Káşżt quả thu Ä&#x2018;ưᝣc so váť&#x203A;i mẍu

-L

-

-H

háť&#x2021;t nhĆ° mẍu Ä&#x2018;em tháť­ nhĆ°ng khĂ´ng chᝊa hoất chẼt cần tháť­.

TO

TĂ­nh hiáť&#x2021;u Ä&#x2018;ạc hiáť&#x2021;u cᝧa phĆ°ĆĄng phĂĄp cháť&#x2030; Ä&#x2018;ất khi Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂŞnh láť&#x2021;ch khĂ´ng quĂĄ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Váť&#x203A;i tháť­ Ä&#x2018;áť&#x2039;nh tĂ­nh: Ä&#x2018;ảm bảo ráşąng xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;Ăşng chẼt cần tháť­

Ä? áş O

-

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q TP

khĂĄc nhau Ä&#x2018;áť&#x192; chᝊng minh.

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

phĆ°ĆĄng phĂĄp khĂ´ng tháť&#x192; phân biáť&#x2021;t rĂľ thĂŹ cần phải pháť&#x2018;i hᝣp nhiáť u phĆ°ĆĄng phĂĄp

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

1%

đ??ť% = 100% â&#x2C6;&#x2019;

Ä?đ??ż đ?&#x2018;&#x201D;đ?&#x2018;&#x2013;ả Ä&#x2018;áť&#x2039;đ?&#x2018;&#x203A;â&#x201E;&#x17D;â&#x2C6;&#x2019;Ä?đ??ż đ?&#x2018;&#x161;ẍđ?&#x2018;˘ đ?&#x2018;Ąđ?&#x2018;&#x;ắđ?&#x2018;&#x203A;đ?&#x2018;&#x201D; Ä?đ??ż đ?&#x2018;&#x201D;đ?&#x2018;&#x2013;ả Ä&#x2018;áť&#x2039;đ?&#x2018;&#x203A;â&#x201E;&#x17D;

. 100%

2.4.3.2 Ä?áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc Ä?áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc lĂ mᝊc Ä&#x2018;áť&#x2122; sĂĄt gần (closeness) giᝯa cĂĄc káşżt quả tháť­ riĂŞng ráş˝ xi váť&#x203A;i giĂĄ tráť&#x2039; trung bĂŹnh đ?&#x2018;&#x2039;Ě&#x2026; thu Ä&#x2018;ưᝣc khi ĂĄp d᝼ng phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť xuẼt cho cĂšng máť&#x2122;t mẍu tháť­ Ä&#x2018;áť&#x201C;ng nhẼt trong cĂšng Ä&#x2018;iáť u kiáť&#x2021;n xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh.

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Ä?áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc báť&#x2039; ảnh hĆ°áť&#x;ng báť&#x;i sai sáť&#x2018; ngẍu nhiĂŞn (random errors).

TR ẌN

đ?&#x2018;ĽĚ&#x2026;: GiĂĄ tráť&#x2039; trung bĂŹnh cᝧa cĂĄc lần tháť­ nghiáť&#x2021;m

Ă&#x201C;

A

10 00

B

TiĂŞu chuẊn chẼp nháş­n cho Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc ph᝼ thuáť&#x2122;c rẼt nhiáť u vĂ o loấi phân tĂ­ch. Ä?áť&#x2018;i váť&#x203A;i phân tĂ­ch thĆ°áť?ng quy cĂĄc thuáť&#x2018;c tân dưᝣc, RSD cĂł tháť&#x192; Ä&#x2018;ất dáť&#x2026; dĂ ng trĂŞn dĆ°áť&#x203A;i 2%. Ä?áť&#x2018;i váť&#x203A;i cĂĄc mẍu sinh háť?c Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc khoảng 15% áť&#x; giáť&#x203A;i hấn náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng vĂ 10% áť&#x; náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; cao hĆĄn. Theo AOAC ᝊng váť&#x203A;i máť&#x2014;i náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chẼt phân tĂ­ch khĂĄc nhau thĂŹ phĆ°ĆĄng phĂĄp sáş˝ cĂł giĂĄ tráť&#x2039; RSD khĂĄc nhau. Náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chẼt cĂ ng thẼp thĂŹ káşżt quả cĂ ng dao Ä&#x2018;áť&#x2122;ng nhiáť u nghÄŠa lĂ RSD cĂ ng láť&#x203A;n.

-H

Bảng 2.2 Ä?áť&#x2122; lạp lấi táť&#x2018;i Ä&#x2018;a chẼp nháş­n Ä&#x2018;ưᝣc áť&#x; cĂĄc náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; khĂĄc nhau (theo AOAC) HĂ m lưᝣng %

-L

Ă N

1 2

Ă?

STT

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

3

4 5 6 7 8 9 10

Tᝡ láť&#x2021; chẼt

Ä?ĆĄn váť&#x2039;

RSD (%)

100 10

1 10-1

100% 10%

1,3 1,8

1

10-2

1%

2,7

0,1% 100 ppm 10 ppm 1 ppm 100 ppb 10 ppb 1 ppb

3,7 5,3 7,3 11 15 21 30

0,1 0,01 0,001 0,0001 0,00001 0,000001 0,0000001

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

xi: GiĂĄ tráť&#x2039; tĂ­nh Ä&#x2018;ưᝣc cᝧa lần tháť­ nghiáť&#x2021;m thᝊ â&#x20AC;&#x153;iâ&#x20AC;?

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H ĆŻ

N

n: Sáť&#x2018; lần lĂ m thĂ­ nghiáť&#x2021;m

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q G

Trong Ä&#x2018;Ăł:

Iáť&#x201E; N D

Ä? áş O

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ć

CĂĄch lĂ m: Tiáşżn hĂ nh thĂ­ nghiáť&#x2021;m lạp lấi 10 lần (Ă­t nhẼt 6 lần) trĂŞn cĂšng máť&#x2122;t mẍu. Mẍu phân tĂ­ch cĂł tháť&#x192; lĂ mẍu chuẊn, hoạc mẍu trắng cĂł thĂŞm chuẊn, táť&#x2018;t nhẼt lĂ lĂ m trĂŞn mẍu tháť­ hay mẍu tháť­ thĂŞm chuẊn. TĂ­nh Ä&#x2018;áť&#x2122; láť&#x2021;ch chuẊn SD vĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; láť&#x2021;ch chuẊn tĆ°ĆĄng Ä&#x2018;áť&#x2018;i theo cĂ´ng thᝊc sau:

N

Ä?ấi lưᝣng Ä&#x2018;ạc trĆ°ng cho Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc lĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; láť&#x2021;ch chuẊn tĆ°ĆĄng Ä&#x2018;áť&#x2018;i (RSD% = Relative Standard Deviation %)

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.4.3.3 Ä?áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng

N

Ä?áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng cᝧa máť&#x2122;t qui trĂŹnh phân tĂ­ch lĂ mᝊc Ä&#x2018;áť&#x2122; sĂĄt gần (closeness) cĂĄc giĂĄ tráť&#x2039; tĂŹm thẼy váť&#x203A;i giĂĄ tráť&#x2039; tháťąc khi ĂĄp d᝼ng qui trĂŹnh Ä&#x2018;áť xuẼt trĂŞn cĂšng máť&#x2122;t mẍu tháť­ Ä&#x2018;ĂŁ Ä&#x2018;ưᝣc lĂ m Ä&#x2018;áť&#x201C;ng nhẼt trong cĂšng Ä&#x2018;iáť u kiáť&#x2021;n xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh.

H

Ć

Ä?áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng báť&#x2039; ảnh hĆ°áť&#x;ng báť&#x;i sai sáť&#x2018; háť&#x2021; tháť&#x2018;ng (systematic errors)

N

Ä?ấi lưᝣng Ä&#x2018;ạc trĆ°ng cho Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng

N

G

> Tᝡ láť&#x2021; ph᝼c háť&#x201C;i (lĂ sai sáť&#x2018; tĆ°ĆĄng Ä&#x2018;áť&#x2018;i cᝧa phĂŠp Ä&#x2018;o) Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng cĂ´ng thᝊc sau:

H ĆŻ

Táťś Láť&#x2020; PHᝤC Háť&#x2019;I = ĹŤ . 100%

TR ẌN

PhĆ°ĆĄng phĂĄp tiáşżn hĂ nh thẊm Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng

10 00

B

XĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh hĂ m lưᝣng cᝧa chẼt cần tháť­ trong mẍu Ä&#x2018;em tháť­ báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp dáťą kiáşżn.

Cho vĂ o mẍu tháť­ máť&#x2122;t lưᝣng chẼt cᝧa chẼt cần tháť­ cĂł hĂ m lưᝣng báşąng 90%, 100% vĂ 110% hĂ m lưᝣng lĂ˝ thuyáşżt hay hĂ m lưᝣng ghi trĂŞn nhĂŁn, ráť&#x201C;i tiáşżn hĂ nh xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh báşąng phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť xuẼt.

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

-L

Ă?

-H

Ă&#x201C;

A

TĂšy tᝍng náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; khĂĄc nhau mĂ phĆ°ĆĄng phĂĄp yĂŞu cầu cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; thu háť&#x201C;i khĂĄc nhau. Trong trĆ°áť?ng hᝣp phân tĂ­ch cĂĄc chẼt hĂ m lưᝣng váşżt cĂł tháť&#x192; tham khảo tiĂŞu chuẊn cᝧa háť&#x2122;i Ä&#x2018;áť&#x201C;ng Châu Ă&#x201A;u.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ä? áş O

BIAS: |đ?&#x2018;Ľđ?&#x2018;&#x2018;| = |đ?&#x2018;ĽĚ&#x2026; â&#x2C6;&#x2019; đ?&#x153;&#x2021;|

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

HĂ m lưᝣng xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;ưᝣc lĂ : đ?&#x2018;ĽĚ&#x2026;

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

U TP

.Q

Hà m lưᝣng cᝧa chẼt chuẊn cho và o là : ¾

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

Y

>BIAS: hiáť&#x2021;u giᝯa hĂ m lưᝣng tháťąc thĂŞm vĂ o mẍu Âľ vĂ hĂ m lưᝣng tĂŹm lấi Ä&#x2018;ưᝣc.

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 2.3 Độ thu hồi chấp nhận được ở các nồng độ khác nhau

100%

98-102

2

10

10-1

10%

98-102

3

1

10-2

1%

97-103

4

0,1

10-3

0,1%

5

0,01

10-4

100 ppm

6

0,001

10-5

10 ppm

80-110

7

0,0001

10-6

1 ppm

80-110

8

0,00001

10-7

9

0,000001

10-8

10

0,0000001

Y

10 ppb

60-115

1 ppb

40-120

A

10 00

B

Tại Việt Nam, mức sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất đối với thuốc bảo vệ thực vật dạng viên nén hoặc dạng bột hòa tan trong nước được thể hiện trong bảng Mức độ sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất trong phần mục lục.

-H

Ó

2.4.3.4 Tính tuyến tính

TO

ÁN

-L

Ý

Tính tuyến tính của qui trình phân tích là khả năng luận ra các kết quả của phương pháp dựa vào đường biểu diễn sự tương quan tỷ lệ giữa đại lượng đo được y và nồng độ x. Cả hai trường hợp đều yêu cầu giữa đại lượng đo được và nồng độ phải có sự phụ thuộc tuyến tính.

Tính chất tuyến tính được biểu thị bằng hệ số tương quan (coefficient of

D

IỄ N

Đ

ÀN

correlation: R2). Nếu là sự phụ thuộc tuyến tính, ta có khoảng khảo sát đường

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

80-110

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

95-107

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

.Q TP

95-105

Đ ẠO

G

N H Ư

100 ppb

10-9

Ơ

1

N

100

N

Độ thu hồi (%)

1

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Đơn vị

H

Hàm lượng % Tỷ lệ chất

STT

biểu diễn là đoạn thẳng tuân theo phương trình sau: y = ax+b Hệ số tương quan R; intercept (b); slope (a).

Nếu R = 1: có tương quan tuyến tính rõ rệt R > 0: có tương quan đồng biến R < 0: có tương quan nghịch biến R < 0,5: không có tương quan tuyến tính

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

R > 0,5: cĂł ph᝼ thuáť&#x2122;c tuyáşżn tĂ­nh R = 0: hoĂ n toĂ n khĂ´ng cĂł tĆ°ĆĄng quan

-H

Ă&#x201C;

A

Miáť n giĂĄ tráť&#x2039; thĆ°áť?ng Ä&#x2018;ưᝣc biáť&#x192;u tháť&#x2039; báşąng khoảng náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; mĂ áť&#x; khoảng náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; nĂ y vẍn còn sáťą ph᝼ thuáť&#x2122;c tuyáşżn tĂ­nh giᝯa giĂĄ tráť&#x2039; Ä&#x2018;o Ä&#x2018;ưᝣc vĂ náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122;.

-L

Ă?

2.4.3.6 Giáť&#x203A;i hấn phĂĄt hiáť&#x2021;n (LOQ, Limit Of Detection) Giáť&#x203A;i hấn phĂĄt hiáť&#x2021;n cᝧa máť&#x2122;t quy trĂŹnh phân tĂ­ch lĂ lưᝣng thẼp nhẼt cᝧa chẼt

Ă N

cần tháť­ trong mẍu còn cĂł tháť&#x192; phĂĄt hiáť&#x2021;n Ä&#x2018;ưᝣc nhĆ°ng khĂ´ng nhẼt thiáşżt phải xĂĄc CĂĄch xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh giáť&#x203A;i hấn phĂĄt hiáť&#x2021;n: dáťąa vĂ o phĆ°ĆĄng trĂŹnh háť&#x201C;i quy tuyáşżn tĂ­nh cᝧa mẍu tháť­ vĂ cĂĄc thĂ´ng sáť&#x2018; tháť&#x2018;ng kĂŞ.

Giáť&#x203A;i hấn phĂĄt hiáť&#x2021;n (LOD) Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh dáťąa trĂŞn cĂ´ng thᝊc:

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ä&#x2018;áť&#x2039;nh chĂ­nh xĂĄc hĂ m lưᝣng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

B

Miáť n giĂĄ tráť&#x2039; cᝧa máť&#x2122;t qui trĂŹnh phân tĂ­ch lĂ khoảng giᝯa náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; cao vĂ náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; thẼp nhẼt cᝧa chẼt cần phân tĂ­ch cĂł trong mẍu tháť­, váť&#x203A;i bẼt káťł náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; nĂ o trong khoảng nĂ y Ä&#x2018;áť u Ä&#x2018;ĂĄp ᝊng váť Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc lẍn Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng vĂ tĂ­nh chẼt tuyáşżn tĂ­nh cᝧa phĆ°ĆĄng phĂĄp.

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

2.4.3.5 Miáť n giĂĄ tráť&#x2039;

TR ẌN

H ĆŻ

N

G

TĂ­n hiáť&#x2021;u cĂĄc lần Ä&#x2018;o cᝧa máť&#x2014;i náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; phải cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; lạp lấi Ä&#x2018;ất yĂŞu cầu: khi thẊm Ä&#x2018;áť&#x2039;nh phĆ°ĆĄng phĂĄp, máť&#x2014;i náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; cần Ä&#x2018;ưᝣc Ä&#x2018;o vĂ i lần (ba lần) Ä&#x2018;áť&#x192; kiáť&#x192;m tra Ä&#x2018;áť&#x2122; lạp cᝧa cĂĄc náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chuẊn.

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q

Ä? áş O

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ć

Nhᝯng lĆ°u Ă˝ khi xây dáťąng Ä&#x2018;Ć°áť?ng chuẊn: cần Ä&#x2018;ảm bảo náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chuẊn chĂ­nh xĂĄc. Ä?Ć°áť?ng chuẊn lĂ yáşżu táť&#x2018; sáť&#x2018;ng còn, quyáşżt Ä&#x2018;áť&#x2039;nh sáťą Ä&#x2018;Ăşng Ä&#x2018;ắn cᝧa káşżt quả phân tĂ­ch, do Ä&#x2018;Ăł náşżu trong quĂĄ trĂŹnh xây dáťąng Ä&#x2018;Ć°áť?ng chuẊn mắc nhᝯng sai sáť&#x2018; láť&#x203A;n sáş˝ dẍn Ä&#x2018;áşżn sáťą mẼt chĂ­nh xĂĄc cᝧa káşżt quả. Ä?iáť u Ä&#x2018;ầu tiĂŞn Ä&#x2018;áť&#x192; kiáť&#x192;m soĂĄt Ä&#x2018;ưᝣc sáťą chĂ­nh xĂĄc cᝧa cĂĄc náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chuẊn khi xây dáťąng Ä&#x2018;Ć°áť?ng chuẊn lĂ cần Ä&#x2018;ảm bảo Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc cᝧa chẼt chuẊn váť hĂ m lưᝣng, Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt. Theo yĂŞu cầu cᝧa ISO 17025, cĂĄc chẼt chuẊn khi sáť­ d᝼ng cần cĂł chᝊng nháş­n cᝧa nhĂ sản xuẼt vĂ vẍn còn hấn sáť­ d᝼ng. Trong máť&#x2122;t sáť&#x2018; trĆ°áť?ng hᝣp, cĂł tháť&#x192; báť&#x2018; trĂ­ cĂĄc thĂ­ nghiáť&#x2021;m Ä&#x2018;áť&#x192; Ä&#x2018;ĂĄnh giĂĄ chẼt lưᝣng cᝧa cĂĄc chuẊn trĆ°áť&#x203A;c khi Ä&#x2018;Ć°a vĂ o sáť­ d᝼ng.

N

ThĆ°áť?ng chẼp nháş­n sáťą tuyáşżn tĂ­nh khi 0,995 â&#x2030;¤ R2 â&#x2030;¤1

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

đ??żđ?&#x2018;&#x201A;đ??ˇ = 3,3.

Ä?áť&#x2122; đ?&#x2018;&#x2122;áť&#x2021;đ?&#x2018;?â&#x201E;&#x17D; đ?&#x2018;?â&#x201E;&#x17D;đ?&#x2018;˘áşŠđ?&#x2018;&#x203A; Ä?áť&#x2122; đ?&#x2018;&#x2018;áť&#x2018;đ?&#x2018;?

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

H ĆŻ TR ẌN B 10 00 A Ă&#x201C; -H Ă?

-L Ă N TO

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Ä?áť&#x2122; đ?&#x2018;&#x2122;áť&#x2021;đ?&#x2018;?â&#x201E;&#x17D; đ?&#x2018;?â&#x201E;&#x17D;đ?&#x2018;˘áşŠđ?&#x2018;&#x203A; Ä?áť&#x2122; đ?&#x2018;&#x2018;áť&#x2018;đ?&#x2018;?

N

đ??żđ?&#x2018;&#x201A;đ?&#x2018;&#x201E; = 10.

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Ä? áş O

Giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng (LOQ) Ä&#x2018;ưᝣc xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh dáťąa trĂŞn cĂ´ng thᝊc:

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q

CĂĄch xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng: giáť&#x203A;i hấn phĂĄt hiáť&#x2021;n xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh dáťąa vĂ o phĆ°ĆĄng trĂŹnh háť&#x201C;i quy tuyáşżn tĂ­nh cᝧa mẍu tháť­ vĂ cĂĄc thĂ´ng sáť&#x2018; tháť&#x2018;ng kĂŞ.

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ć

Giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng cᝧa máť&#x2122;t qui trĂŹnh phân tĂ­ch lĂ lưᝣng thẼp nhẼt cᝧa chẼt cần tháť­ cĂł trong mẍu tháť­ còn cĂł tháť&#x192; xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh Ä&#x2018;ưᝣc váť&#x203A;i Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;Ăşng vĂ Ä&#x2018;áť&#x2122; chĂ­nh xĂĄc thĂ­ch hᝣp. Giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng lĂ máť&#x2122;t thĂ´ng sáť&#x2018; cᝧa phĆ°ĆĄng phĂĄp Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng Ä&#x2018;áť&#x2018;i váť&#x203A;i lưᝣng thẼp nhẼt cᝧa chẼt tháť­ trong khung mẍu vĂ Ä&#x2018;ưᝣc sáť­ d᝼ng Ä&#x2018;ạc biáť&#x2021;t trong viáť&#x2021;c xĂĄc Ä&#x2018;áť&#x2039;nh cĂĄc tấp chẼt vĂ cĂĄc sản phẊm phân hᝧy. Giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng cĂł tháť&#x192; Ä&#x2018;ưᝣc biáť&#x192;u diáť&#x2026;n báşąng sáťą cho phĂŠp cĂł mạt cᝧa chẼt cần tháť­ trong mẍu Ä&#x2018;em tháť­ vĂ náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; phần trÄ&#x192;m, phần ngĂ n, phần triáť&#x2021;u,â&#x20AC;Ś

N

2.4.3.7 Giáť&#x203A;i hấn Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng (LOQ, Limit Of Quantitation)

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian và địa điểm thực hiện 3.1.1 Thời gian thực hiện

Ơ

N

Đề tài được thực hiện từ ngày 25/12/2016 đến ngày 8/3/2017

Y https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

3.2.2 Thiết bị và dụng cụ Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao Shimazu LC-2030 Prominence-i với detector tử ngoại (UV) Cột sắc ký Ecosil C18 (250  4,6 mm, 5 µm) Máy quang phổ UV-VIS Shimazu UV 1800, cuvet thạch anh 1 cm Máy lắc siêu âm Màng lọc 0,45 µm Bình định mức 20 mL Micropipet Cân phân tích với độ chính xác 0,00001 g Xilanh bơm mẫu có gắn đầu lọc 0,45 µm Máy tính kết nối với hệ thống HPLC/UV-VIS có cài đặt sẵn phần mềm Postrun Analysis và Microsoft Excel Máy tính kết nối với máy quang phổ UV-VIS có cài đặt sẵn phần mềm đọc dữ liệu quang phổ và Microsoft Excel.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

.Q TP Đ ẠO G

H Ư

N

3.2 Phương tiện thực hiện 3.2.1 Hóa chất và dung môi Nước cất Methanol Phosphoric acid Chuất chuẩn GA3 (C% = 91,10%)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Địa điểm: Công ty TNHH Liên Nông Việt Nam Địa chỉ: Lô E2, đường số 5, Đức Lập Hạ, Đức Hòa, Long An

N

H

3.1.2 Địa điểm thực hiện

Hình 3.1 Máy sắc ký Shimazu LC-2030 Prominence-i

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

3.3 Đối tượng nghiên cứu 3.3.1 Quy trình định lượng GA3 bằng HPLC/UV-VIS Quy trình nghiên cứu là quy trình của Cục Bảo vệ Thực vật trực thuộc Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn, được các phòng thí nghiệm sử dụng phổ biến trong các phòng thí nghiệm.

N

H

Ơ

Quy trình định lượng chi tiết:

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Ý

Methanol : Nước : Acid Phosphoric 35

Tốc độ dòng :

1 mL/phút

Bước sóng :

206 nm

Lượng mẫu bơm vào :

20 µL

Nhiệt độ cột :

400C

ÁN TO ÀN Đ

IỄ N D

Pha động :

-L

X

-H

3.3.1.4 Thông số máy

: 64,5 :

0,1

(theo thể tích)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ó

A

10 00

B

3.3.1.3 Chuẩn bị mẫu Cân lượng mẫu thu mua từ ở thị trường có chứa 0,020 g hoạt chất Gibberellic acid (ghi trên nhãn) vào bình định mức 20 mL. Hòa tan và định mực đến vạch bằng dung dịch pha động (dung dịch B). Lấy chính xác 2 mL dung dịch B cho vào bình 20 mL và định mức đến vạch bằng dung dịch pha động. Lọc qua màng lọc 0,45 µm và đuổi khí trước khi bơm vào máy.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

N

G

3.3.1.2 Chuẩn bị dung dịch chuẩn Cân khoảng 0,020 g chất chuẩn Gibberellic acid chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 20 mL. Hòa tan và định mực đến vạch bằng dung dịch pha động (dung dịch A). Lấy chính xác 2 mL dung dịch A cho vào bình 20 mL và định mức đến vạch bằng dung dịch pha động. Đuổi khí trước khi bơm vào máy.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

3.3.1.1 Nguyên tắc Hàm lượng hoạt chất Gibberellic acid được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng cao áp, detector tử ngoại (UV), cột pha đảo. Kết quả được tính toán dựa trên sự so sánh tỷ số giữa số đo diện tích hoặc chiều cao của peak mẫu thử và peak mẫu chuẩn.

3.3.1.5 Tiến phân tích trên máy Bơm dung dịch mẫu chuẩn vào máy HPLC/UV-VIS. Kết quả chỉ có thể chấp nhận khi hệ số đối xứng peak nằm trong khoảng 0,9-1,2 và giữa hai lần đo liên tiếp cho chiều cao peak và diện tích peak không lệch nhau quá 1% hoặc độ lệch chuẩn tương đối (%RSD) của hai đại lượng trên giữa các lần đo (ít nhất 3

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

lần Ä&#x2018;o) dĆ°áť&#x203A;i 20% . Lần lưᝣt bĆĄm cĂĄc mẍu tháť­ vĂ o mĂĄy (sáť&#x2018; Ä&#x2018;o cĂĄc chiáť u cao peak vĂ diáť&#x2021;n tĂ­ch peak giᝯa cĂĄc lần Ä&#x2018;o khĂ´ng láť&#x2021;ch quĂĄ 1%).

Ć

HĂ m lưᝣng hoất chẼt Gibberellic acid (X) trong mẍu Ä&#x2018;ưᝣc tĂ­nh báşąng % (w/w) theo cĂ´ng thᝊc :

Y

N

H

đ?&#x2018;¤ đ?&#x2018;&#x2020;đ?&#x2018;&#x161; Ă&#x2014; đ?&#x2018;&#x161;đ?&#x2018;? Ă&#x2014;đ?&#x2018;&#x192; đ?&#x2018;&#x2039;% ( ) = đ?&#x2018;¤ đ?&#x2018;&#x2020;đ?&#x2018;? Ă&#x2014; đ?&#x2018;&#x161;đ?&#x2018;&#x161;

mm : Kháť&#x2018;i lưᝣng mẍu tháť­ (g)

G

mc : Kháť&#x2018;i lưᝣng mẍu chuẊn (g)

H ĆŻ

N

P : Ä?áť&#x2122; tinh khiáşżt cᝧa chẼt chuẊn.

TR ẌN

Mᝊc Ä&#x2018;áť&#x2122; sai láť&#x2021;ch cho phĂŠp Ä&#x2018;ưᝣc quy Ä&#x2018;áť&#x2039;nh trong bảng mᝊc Ä&#x2018;áť&#x2122; cho phĂŠp cᝧa hĂ m lưᝣng hoất chẼt (Bảng ph᝼c l᝼c A.) CĂĄc sáť&#x2018; liáť&#x2021;u Ä&#x2018;ưᝣc xáť­ lĂ˝ dáťąa trĂŞn phần máť m Postrun Analysis kèm theo phần máť m Ä&#x2018;áť?c dᝯ liáť&#x2021;u háť&#x2021; tháť&#x2018;ng HPLC trĂŞn mĂĄy tĂ­nh.

A

10 00

B

3.3.2 ChẼt chuẊn Ä&#x2018;áť&#x2018;i chiáşżu TĂŞn chẼt chuẊn : Gibberellic acid (GA3), Ä&#x2018;áť&#x2122; tinh khiáşżt : 91,10% cᝧa hĂŁng Sigma-Aldrich

-H

Ă&#x201C;

3.3.3 Mẍu Gibberrellic acid trĂŞn tháť&#x2039; trĆ°áť?ng

-L

Ă?

Ba mẍu nĂ´ng dưᝣc Ä&#x2018;ưᝣc thu mua tᝍ cĂĄc cáť­a hĂ ng kinh doanh thuáť&#x2018;c bảo váť&#x2021; tháťąc váş­t trĂŞn Ä&#x2018;áť&#x2039;a bĂ n táť&#x2030;nh An Giang, Long An vĂ huyáť&#x2021;n Cᝧ Chi (Tp.HCM). Ä?áť&#x2039;a Ä&#x2018;iáť&#x192;m thu gom

1

Gibber 4T

4

0916431

An Giang

2

Gibber 1T

1

GA23185

Long An

3

Gibber 20T

20

070716G

Cᝧ Chi

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

Bảng 3.2 HĂ m lưᝣng Ä&#x2018;Ä&#x192;ng kĂ˝ cĂĄc mẍu thu gom trĂŞn tháť&#x2039; trĆ°áť?ng HĂ m lưᝣng GA3 Ä&#x2018;Ä&#x192;ng STT TĂŞn mẍu Sáť&#x2018; lĂ´ kĂ˝ trĂŞn nhĂŁn (%)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ä? áş O

Sc : Sáť&#x2018; Ä&#x2018;o trung bĂŹnh diáť&#x2021;n tĂ­ch peak mẍu chuẊn

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

Sm : Sáť&#x2018; Ä&#x2018;o trung bĂŹnh diáť&#x2021;n tĂ­ch peak mẍu tháť­

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q

U

Trong Ä&#x2018;Ăł :

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

3.3.1.6 Tính toån kết quả

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

10 00

B

Khi định lượng bằng phương pháp HPLC/MS-MS mất nhiều thời gian và thiết bị máy móc phải tinh vi, hiện đại. Các phương pháp như quang phổ, nhị biến đòi hỏi một lượng mẫu lớn, độ chính xác chưa thực sự cao, sai số lớn trong việc thao tác cũng như tính toán.

Ý

-H

Ó

A

Phương pháp HPLC được sử dụng rộng rãi trong việc xác định hàm lượng các loại thuốc bảo vệ thực vật nói chung và Gibberellic acid nói riêng do tính chính xác cao và thời gian thực hiện nhanh chóng. Bên cạnh đó, loại đầu dò UVVIS có giá thành rẻ, sai số nhỏ và tốc độ nhanh chóng nên được sử dụng rộng rãi.

-L

3.4.2 Thẩm định quy trình Xác định bước sóng mà tại đó dung dịch chứa Gibberellic acid hấp thu quang phổ tối đa.

Xác định khoảng tuyến tính.

Xác định LOD. Xác định LOQ. Độ đúng, hiệu suất thu hồi. Độ lặp lại Ứng dụng phương pháp HPLC/UV-VIS để xác định hàm lượng trong các mẫu nông dược thu được.

Đ

ÀN

TO

ÁN

-

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

H Ư

N

Với mỗi loại nông dược, việc sử dụng đúng liều lượng là cần thiết nên công tác kiểm nghiệm định lượng hàm lượng là thật sự quan trọng. Công tác kiểm nghiệm cần được thực hiện tối ưu, với độ chính xác cao trong khoảng thời gian nhanh nhất.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

3.4 Phương pháp nghiên cứu 3.4.1 Lựa chọn phương pháp

IỄ N D

Đ ẠO

Hình 3.1 Một số sản phẩm nông dược có chứa Gibberllic acid

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

3.4.3 Phương pháp xử lý kết quả

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

Sử dụng các phầm mềm Ecxel và phần mềm Postrun Analysis để tính toán kết quả về tính tuyến tính, độ đúng, độ lặp lại và hàm lượng các mẫu trên thị trường.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 4 THỰC HIỆN VÀ KẾT QUẢ

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Sau khi quét bước sóng mà tại đó Gibberellic acid hấp thu quang cực đại, thu được biểu đồ :

-L

Ý

Hình 4.1 Biểu đồ thể hiện max của Gibberellic acid

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

Từ biểu đồ cho thấy, tại bước sóng 206 nm, Gibberrellic acid hấp thu quang cực đại.

4.1.3 Ý nghĩa của bước sóng hấp thu cực đại

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

4.1.2 Bước sóng hấp thu cực đại của Gibberellic acid

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Tiến hành quét bước sóng bằng máy đo quang phổ với mẫu trắng là dung dịch pha động.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

Cân 0,010 g chất chuẩn vào bình định mức 20 mL. Hòa tan bằng 15 mL dung dịch pha động (MeOH:H2O:H3PO4 = 35 :64,9 :0,1; theo thể tích).

Lắc siêu âm trong 20 phút. Lắc siêu âm và làm nguội dung dịch. Bổ sung thêm dung dịch pha động cho đến vạch, thu được dung dịch X. Hút chính xác 1 mL dung dịch X cho vào bình định mức 20 mL và định mức đến vạch bằng dung dịch pha động.

N

4.1 Xác định bước sóng hấp thu cực đại của Gibberellic acid 4.1.1 Cách thực hiện

Bước sóng hấp thu cực đại (max) cho biết tại đó dung dịch chứa chất phân tích hấp thu quang cực đại.

Thông số max cũng chính là thông số cần cài đặt cho đầu dò UV-VIS trong hệ thống HPLC/UV-VIS để đảm bảo tính thống nhất và độ chính xác của cả quy trình.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Ơ

Chuẩn bị dung môi : dung môi pha động (MeOH:H2O:H3PO4 = 35 :64,9 :0,1; theo thể tích)

N

4.2 Thẩm định quy trình định lượng Gibberellic acid bằng HPLC/UV-VIS 4.2.1 Tính tuyến tính

N

H

Chuẩn bị mẫu chuẩn :

0,5

1

Thể tích định mức (mL)

20

2

3

4

20

20

20

H Ư

200

B

20

150

10 00

Thực hiện đo độ hấp thu quang học của các dung dịch ở bước sóng 206 nm.

Kết quả thu được thể hiện ở Bảng 4.2 và Hình 4.2

Nồng độ (mg/l)

Độ hấp thụ A

25

2.94729

50

2.98156

100

3.05124

150

3.12994

200

3.19578

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

Bảng 4.2 Kết quả độ hấp thu ABS của Gibberillic acid ở bước sóng 206 nm

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Thể tích chuẩn 1000mg/L(mL)

100

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

50

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

25

N

Nồng độ (mg/L)

TR ẦN

G

Bảng 4.1 Cách chuẩn bị dung dịch Gibberellic acid

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Pha dung dịch gốc 1000 mg/L: Cân chính xác lượng chất chuẩn chứa 20 mg Gibberellic acid, cho vào bình định mức 20 mL, thêm khoảng 15 mL dung dịch pha động. Lắc đều, siêu âm trong 20 phút, bổ sung thêm dung dịch pha động đến vạch, lắc đều.

Từ dung dịch chuẩn Gibberellic acid chuẩn 1000 mg/L ta pha các dung dịch với nồng độ tương ứng 25, 50, 100, 150, 200 mg/L.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Tuyến tính GA3 3.25000

Ơ

N

y = 0.0014x + 2.9105 R² = 0.9993

3.20000

N

H

3.15000

Y

3.10000

0

50

100

150

200

250

TR ẦN

H Ư

N

G

Hình 4.2 Đường chuẩn của Gibberellic acid tại bước sóng 206 nm Đường chuẩn cho thấy có sự tuyến tính của Gibberellic acid trong khoảng nồng độ từ 25-200 mg/L, phương trình hồi quy y=0,0014x + 2,9105 với hệ số hồi quy tuyến tính R2=0,9993 thể hiện trong hình.

4.2.2 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng

10 00

B

Giới hạn phát hiện (LOD):

-H

Ó

A

Giới hạn định lượng (LOQ):

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

Từ đó ta có bảng Bảng 4.3 Kết quả tính LOD và LOQ Giá trị Gibberellic acid S (độ dốc) SD LOD (mg/L) LOQ (mg/L)

2,9105 0,003133 0,000355 0,010764

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2.90000

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

2.95000

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U TP

3.00000

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.05000

Như vậy, đối với Gibberellic acid, giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng lần lượt là 0,000355 mg/L và 0,010764 mg/L. Qua đó có thể thấy rằng Gibberrellic acid có thể phân tích được kể cả các mẫu có nồng độ thấp.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

4.2.3 Độ đúng Nguyên tắc: sử dụng phương pháp thêm chuẩn, thêm một lượng mẫu đối chứng có nồng độ biết trước vào mẫu thử ta được:

Ơ

Y

N

H

Pha dung dịch chuẩn: Cân chính xác lượng chất chuẩn chứa 0,020 g Gibberellic acid. Hòa tan bằng dung dịch pha động, lắc siêu âm, định mức đến 20 mL.

N

C(mg/L) = Cđối chứng (mg/L) + Cmẫu thử (mg/L)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Thực hiện quá trình 6 lần và ghi nhận được kết quả trong bảng và hình

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Hút 0,5 mL dung dịch chuẩn và 0,5 mL dung dịch mẫu cho vào cùng một vio 1 mL. Bơm vào máy HPLC và tiến hành đo.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Pha dung dịch mẫu: Cân chính xác lượng mẫu có chứa 0,020 g Gibberellic acid. Hòa tan bằng dung dịch pha động, lắc siêu âm, định mức đến 20 mL.

Hình 4.3 Kết quả xác định độ đúng

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 4.4 Hiáť&#x2021;u suẼt thu háť&#x201C;i

N

Ć

H

N

Y

.Q TP

H ĆŻ

N

CSpike: náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chuẊn ban Ä&#x2018;ầu (mg/L) CObs: náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;o Ä&#x2018;ưᝣc (mg/L)

TR ẌN

Cm = Náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; mẍu * VhĂşt mẍu

B

CSpike = Náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; chuẊn * VhĂşt chuẊn

10 00

đ??ťđ?&#x2018;&#x2013;áť&#x2021;đ?&#x2018;˘ đ?&#x2018; đ?&#x2018;˘áşĽđ?&#x2018;Ą (%) =

đ??śđ?&#x2018;&#x201A;đ?&#x2018;?đ?&#x2018; â&#x2C6;&#x2019; đ??śđ?&#x2018;&#x161; đ??śđ?&#x2018;&#x2020;đ?&#x2018;?đ?&#x2018;&#x2013;đ?&#x2018;&#x2DC;đ?&#x2018;&#x2019;

-H

Ă&#x201C;

A

Qua káşżt quả thẼy Ä&#x2018;ưᝣc phĆ°ĆĄng phĂĄp cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; ph᝼c háť&#x201C;i cao Ä&#x2018;ĂĄp ᝊng yĂŞu cầu trong khoảng 94-106%.

4.2.4 Ä?áť&#x2122; lạp lấi

Ă N

-L

Ă?

Quy trĂŹnh Ä&#x2018;áť&#x2039;nh lưᝣng Gibberrellic acid cᝧa C᝼c bảo váť&#x2021; tháťąc váş­t Ä&#x2018;ưᝣc tháťąc hiáť&#x2021;n báť&#x;i hai lần Ä&#x2018;o khĂĄc nhau, máť&#x2014;i lần tháťąc hiáť&#x2021;n lần lưᝣt mẍu Ä&#x2018;áť&#x2018;i chᝊng vĂ mẍu chuẊn. Máť&#x2014;i mẍu tháťąc hiáť&#x2021;n lạp lấi 6 lần.

Khi Ä&#x2018;Ăł, phĆ°ĆĄng phĂĄp cĂł Ä&#x2018;áť&#x2122; lạp lấi cao.

D

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Káşżt quả Ä&#x2018;ưᝣc chẼp nháş­n khi %RSD káşżt quả 6 lần Ä&#x2018;o áť&#x; máť&#x2014;i lưᝣng cân khĂ´ng vưᝣt quĂĄ 2%.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Cm: náť&#x201C;ng Ä&#x2018;áť&#x2122; mẍu ban Ä&#x2018;ầu (mg/L)

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

VhĂşt mẍu: tháť&#x192; tĂ­ch hĂşt ra tᝍ mẍu (mL)

Ä? áş O

VhĂşt chuẊn: tháť&#x192; tĂ­ch Ä&#x2018;ưᝣc hĂşt ra tᝍ chuẊn (mL)

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

19.2 20.9 20.6 21.3 20.4 18.8

Trong Ä&#x2018;Ăł:

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

1 2 3 4 5 6

Náť&#x201C;ng Náť&#x201C;ng Cân VhĂşt VhĂşt Hiáť&#x2021;u Ä&#x2018;áť&#x2122; Ä&#x2018;áť&#x2122; Cm CSpike CObs chuẊn mẍu chuẊn suẼt mẍu chuẊn (mg/L) (mg/L) (mg/L) (mg) (mL) (mL) (%) (mg/L) (mg/L) 960 20 1000 0.5 0.5 480.00 500.00 971.131 94.23 1045 985 0.5 0.5 522.50 492.50 976.408 98.26 19.7 1030 955 0.5 0.5 515.00 477.50 970.152 103.17 19.1 1065 1005 0.5 0.5 532.50 502.50 975.794 94.19 20.1 1020 955 0.5 0.5 510.00 477.50 970.107 103.16 19.1 940 990 0.5 0.5 470.00 495.00 972.997 96.57 19.8

U

Cân STT mẍu (mg)

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Hình 4.4 Kết quả kiểm tra độ lặp lại thực hiện lần đo thứ nhất Kết quả phân tích cho thấy ở lần đo thứ nhất, nồng độ mẫu chuẩn qua các lần thực hiện có độ lệch chuẩn tương đối (%RSD) không vượt quá 2%.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Hình 4.5 Kết quả kiểm tra độ lặp lại thực hiện lần đo thứ hai Kết quả phân tích cho thấy ở lần thực hiện thứ hai, nồng độ mẫu chuẩn qua các lần thực hiện có độ lệch chuẩn tương đối (%RSD) không vượt quá 2%.

Như vậy, phương pháp cho độ lặp lại cao với độ lệch chuẩn tương đối thấp, không vượt quá 2%.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Y

N

H

Ơ

Cân khoảng 0,020 g chất chuẩn Gibberellic acid chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 20 mL. Hòa tan và định mực đến vạch bằng dung dịch pha động (dung dịch A). Lấy chính xác 2 mL dung dịch A cho vào bình 20 mL và định mức đến vạch bằng dung dịch pha động. Đuổi khí trước khi bơm vào máy.

N

4.3 Định lượng trên mẫu thật 4.3.1 Phân tích chuẩn Gibberellic acid 4.3.1.1 Chuẩn bị mẫu chuẩn

H Ư

N

G

Định mức đến 20 mL bằng dd pha động 20 mL dung dịch gốc Hút 2 mL

TR ẦN

Định mức đến 20 mL bằng dd pha động

B

Dung dịch chuẩn

10 00

Hình 4.6 Sơ đồ các bước pha dung dịch chuẩn Dung dịch chuẩn được bơm vào máy HPLC

Ó

A

Thông số máy :

-L

Ý

-H

Pha động :

35

: 64,5

1 mL/phút

Bước sóng :

206 nm

Lượng mẫu bơm vào :

20 µL

Nhiệt độ cột :

40OC

:

0,1

(theo thể tích)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

Tốc độ dòng :

Methanol : Nước : Acid Phosphoric

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Lắc siêu âm 20 phút

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

15 mL dung dịch

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q

TP

Thêm 15 mL dd pha động

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Cân 0,020 chất chuẩn

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DấyKèmQuyNhƥn

Kết quả phân tích chẼt chuẊn

D

HÏnh 4.7 Kết quả phân tích chuẊn GA3 bẹng HPLC/UV-VIS

Kết quả cho thẼy:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Máť&#x152;I YĂ&#x160;U CẌU GᝏI Váť&#x20AC; Háť&#x2DC;P MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Dáş Y KĂ&#x2C6;M QUY NHĆ N OFFICIAL ST&GT : Ä?/C 1000B TRẌN HĆŻNG Ä?áş O TP.QUY NHĆ N

.Q

Iáť&#x201E; N

Ä?

Ă&#x20AC;N

TO

Ă N

-L

Ă?

-H

Ă&#x201C;

A

10 00

B

TR ẌN

H ĆŻ

N

G

Ä? áş O

TP

NĆĄi báť&#x201C;i dưᝥng kiáşżn thᝊc ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła cho háť?c sinh cẼp 2+3 / Diáť&#x2026;n Ä?Ă n ToĂĄn - LĂ˝ - HĂła Quy NhĆĄn 1000B Trần HĆ°ng Ä?ấo Tp.Quy NhĆĄn Táť&#x2030;nh BĂŹnh Ä?áť&#x2039;nh

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ć

N

4.3.1.2

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

GA3 cĂł tháť?i gian lĆ°u trung bĂŹnh lĂ 10,943 phĂşt.

Háť&#x2021; sáť&#x2018; Ä&#x2018;áť&#x2018;i xᝊng peak trung bĂŹnh lĂ 1,006 (Ä&#x2018;ĂĄp ᝊng trong khoảng 0,9-1,2).

CĂĄc thĂ´ng sáť&#x2018; chiáť u cao peak vĂ diáť&#x2021;n tĂ­ch peak giᝯa 2 lần Ä&#x2018;o khĂ´ng láť&#x2021;ch quĂĄ 1% : â&#x2C6;&#x2020;đ??ť.đ?&#x2018;?đ?&#x2018;&#x2019;đ?&#x2018;&#x17D;đ?&#x2018;&#x2DC; = â&#x2C6;&#x2020;đ?&#x2018;&#x2020;.đ?&#x2018;?đ?&#x2018;&#x2019;đ?&#x2018;&#x17D;đ?&#x2018;&#x2DC; =

|35098 â&#x2C6;&#x2019; 34934| Ă&#x2014; 100 = 0,469% < 1% 34934

|658174 â&#x2C6;&#x2019; 657150| Ă&#x2014; 100 = 0,156% < 1% 657150

Ä?Ăłng gĂłp PDF báť&#x;i GV. Nguyáť&#x2026;n Thanh TĂş

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Ơ

4.3.2 Phân tích các mẫu trên thị trường 4.3.2.1 Chuẩn bị mẫu Cân lượng mẫu thử có chứa 0,020 g hoạt chất Gibberellic acid chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 20 mL. Hòa tan và định mực đến vạch bằng dung dịch pha động (dung dịch B). Lấy chính xác 2 mL dung dịch B cho vào bình 20 mL và định mức đến vạch bằng dung dịch pha động. Lọc qua màng lọc 0,45 µm và đuổi khí trước khi bơm vào máy.

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

H Ư

Định mức đến 20 mL bằng dd pha

TR ẦN

động

20 mL dung dịch gốc

10 00

B

Lắc siêu âm 20 phút Định mức đến 20 mL bằng dd pha động

Dung dịch mẫu

A

Hình 4.8 Sơ đồ các bước pha dung dịch mẫu

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

Dung dịch mẫu được bơm vào máy HPLC với điều kiện và thông số máy hoàn toàn tương tự điều kiện và thông số máy phân tích mẫu chuẩn.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

Lắc siêu âm 20 phút

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

15 mL dung dịch

Đ ẠO

Thêm 15 mL dd pha động

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

Cân lượng mẫu chứa 0,020 g Gibberellic acid

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

Nghiền mẫu

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

Hình 4.9 Kết quả phân tích mẫu Gibber 4T (4%)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

4.3.2.2 Kết quả phân tích mẫu Gibber 4T

Kết quả cho thấy:

Mẫu có peak tại thời gian lưu 10,937 phút.

Hệ số đối xứng peak đạt 1,009 (đáp ứng trong khoảng 0,9-1,2).

Chiều cao peak và diện tích peak đều có %RSD nhỏ hơn 20%.

Kết quả tính toán được mẫu có hàm lượng 3,980% (%RSD=1,162<2%) sai lệch 0,5% so với hàm lượng đăng ký trên nhãn, mẫu đạt chuẩn. ∆=

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

|4 − 3,980| × 100 = 0,5% < 10% 4

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

D

Hình 4.10 Kết quả định lượng mẫu Gibber 1T (1%)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

4.3.2.3 Kết quả phân tích mẫu Gibber 1T

Kết quả cho thấy :

Mẫu có peak tại thời gian lưu 10,927 phút.

Hệ số đối xứng peak đạt 1,051 (đáp ứng trong khoảng 0,9-1,2).

Chiều cao peak và diện tích peak đều có %RSD nhỏ hơn 20%.

Kết quả tính toán được mẫu có hàm lượng 0,924% (%RSD=1,312<2%), sai lệch 7,6% so với hàm lượng đăng ký trên nhãn, mẫu đạt chuẩn. ∆=

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

|1 − 0,924| × 100 = 7,6% < 15% 1

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q Đ

ÀN

Kết quả cho thấy :

IỄ N D

Hình 4.11 Kết quả định lượng mẫu Gibber 20T (20%)

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

N

4.3.2.4 Kết quả phân tích mẫu Gibber 20T

Mẫu có peak tại thời gian lưu 10,516 phút.

Hệ số đối xứng peak đạt 1,024 (đáp ứng trong khoảng 0,9-1,2).

Chiều cao peak và diện tích peak đều có %RSD nhỏ hơn 20%.

Kết quả tính toán được mẫu có hàm lượng 18,478% (%RSD=1,312<2%), sai lệch 7,6% so với hàm lượng đăng ký trên nhãn, không đạt mức độ sai lệch cho phép. |20 − 18,478| ∆= × 100 = 7,6% > 6% 20

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

CHƯƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

Ơ

Đề tài “THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG GIBBERELLIC ACID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS” đạt được kết quả sau đây như sau :

N

5.1 Kết luận

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

Ứng dụng quy trình phân tích hàm lượng Gibberellic acid bằng phương pháp HPLC/UV-VIS để thực hiện định lượng Gibberellic acid tại các cơ sở kiểm nghiệm có trang bị máy HPLC/UV-VIS. Tiếp tục nghiên cứu để thẩm định các quy trình phân tích các hợp chất tương tự như GA7, GA9,… bằng phương pháp HPLC/UV-VIS. Nghiên cứu quy trình ở mức độ cao hơn, ứng dụng trong phân tích dư lượng Gibberellic acid trong nông sản.

Tiếp tục nghiên cứu quy trình định lượng Gibberellic acid trong các sản phẩm nông dược đa thành phần.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

-H

Trên cơ sở kết quả đạt được, chúng tôi kiến nghị một số vấn đề sau:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Ó

A

5.2 Kiến nghị

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Tối ưu hóa được quy trình phân tích hàm lượng Gibberellic acid bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò UV-VIS cho độ đúng với hiệu suất thu hồi trong khoảng 94% - 106% và độ lặp lại cao (%RSD giữa các lần đo dưới 2%), giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng lần lượt là 0,000355 mg/L và 0,010764 mg/L, đáp ứng các yêu cầu của quy trình phân tích. Từ đó, quy trình có thể được áp dụng rộng rãi để xác định hàm lượng Gibberellic acid của các sản phẩm nông dược trên thị trường cũng như các sản phẩm mới trong phòng thí nghiệm.

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao có kỹ thuật đơn giản, thời gian phân tích nhanh chóng, dung mỗi và hóa chất đơn giản. Đầu dò UV-VIS cho kết quả định lượng nhanh chóng, chính xác với sai số nhỏ, đáp ứng hầu hết các nhu cầu phân tích định lượng hiện đại. Áp dụng phương pháp đã thẩm định để kiểm tra hàm lượng thật được ghi trên nhãn của các sản phẩm có chứa Gibberellic acid trên thị trường. Kết quả cho thấy : tuy có nhiều loại sản phẩm nhưng chất lượng không ổn định, có sự sai khác giữa hàm lượng thực tế và hàm lượng đăng ký trên nhãn. Kết quả phân tích cho thấy trong 03 mẫu thu thập được có 01 mẫu không đạt yêu cầu hàm lượng đăng ký trên nhãn.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Ơ

[1] Brian, P.W., Elson, G.W., Hemming, H.G., and Radley, M. : The plantgrowth-promoting properties of Gibberellic acid, a method product of the fungus Gibberlla fujikurio, J. Sci. Food Agric., 1954, pp 602-612.

[2] Chen, S. S. C. and Park, W. : Earley actions of Gibberellic acidon the embryo and on the endosperm of Avena fatua seed, Plant Physiol, 1973, pp 174-189.

[3] Murakami, Y. : Bioassay of gibberellins using rice endosperm and some problems of its application, Bot. Mag. Tokyo, 1956, pp 315-327.

[4] Ogawa, Y. : Studies on the conditions for Gibberllic acid assay using rice seedling, Plant and Cell Physiol, 1963, pp 227-237.

[5] Jones, R. L. and Varner, J. E. : The bioassay of gibberellins, Planta (Berl .), 1967, pp 155-161.

[6] Phinney, B. O. : Growth response of single gene dwarf mutants in maize to Gibberellic acid, Proc. Nat., Acad., Sci., 1956, pp 185-189.

[7] High Performance Liquid Chromatographic Determination of the Ternary Mixture of Caffeine, Dipyrone and Drotaverine Hydrochloride in Tablets Dosage FormTarek S. Belal1Department of Pharmaceutical Analytical Chemistry, Faculty of Pharmacy, University of Alexandria, Elmessalah 21521, Alexandria, Egypt. Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol. 3 (06), pp. 033-039, June, 2014ISSN 22313354.

[8] Japanese Pharmacopoepia 12th Edition, General Test Methods of Liquid Chromatography.

[9] USP (United State Pharmacopoepia XXIII-5, Chorotography.

[10] LCtalk Vol.34, TEC Calculation of number of Theoretical Plantes.

[11] Nguyễn Đình thành : Cơ sở các phương pháp phổ ứng dụng trong hóa học; Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, 2011.

[12] Nguyễn Thị Diệp Chi : Bài giảng các phương pháp phân tích hiện đại.

Khoa Khoa học Tự nhiên. Trường Đại học Cần Thơ, 2008.

[13] Kelly Alessandra Sakiara: Spectrophotometric determination of dipyrone in pharmaceutical preparations by using chromotropic acid, 1999.

[14] Trần Cao Sơn và cộng sự : Thẩm định phương pháp trong phân tích Hóa học và vi sinh vật, Nhà Xuất bản Khoa học và kỹ thuật Hà Nội, 2009.

N

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

PHỤC LỤC A. BẢNG MỨC ĐỘ SAI LỆCH Bảng PHỤC LỤC A Mức độ sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất Hàm lượng hoạt chất đăng ký Mức sai lệch cho phép

Từ 25 trở xuống

±15% hàm lượng đăng ký

Từ trên 2,5 đến 10

Từ trên 25 đến 100

±10% hàm lượng đăng ký

Từ trên 10 đến 25

Từ trên 100 đến 250

±6% hàm lượng đăng ký

Từ trên 25 đến 50

Từ trên 250 đến 500

±5% hàm lượng đăng ký

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

±25 g/kg

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

Từ trên 500 trở lên

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

± 2,5% hàm lượng đăng ký

G

Từ trên 50 trở lên

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U

Y

N

H

Từ 2,5 trở xuống

N

g/kg

Ơ

%

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial