Sử dụng phổ Raman để phân tích một số thông số của quá trình trộn bột trong bào chế viên nén

B

YT

B

IH

C HÀ N I

YT

IH

C HÀ N I T

Mã sinh viên: 1401135

S

T

S S S

D NG PH THÔNG S

PHÂN TÍCH M T C

N TR N B T

TRONG BÀO CH VIÊN NÉN PARACETAMOL QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHI M VÀ C A M T S TH

D NG PH THÔNG S

RAMAN

PHÂN TÍCH M T

C

N TR N B T

TRONG BÀO CH VIÊN NÉN PARACETAMOL QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHI M VÀ C A M T S TH

CH PH M TRÊN

CH PH M TRÊN NG ng d n:

NG

1. TS. Nguy

c Thi n

c hi n: 1. B môn V t lý ih

2019

c Hà N i

2. Vi n Ki m nghi m Thu c Trung

KHOÁ LU N T T NGHI

HÀ N I

ng

HÀ N I

2019

L IC

M CL C

c h t, tôi xin bày t lòng bi nh

n TS. Nguy

c Thi

TV

c và g i l i c c ti

ng d

1.1. Ph Raman và ng d ng c a nó trong bào ch

y cô trong B môn V t lý - Hóa lý và Vi n Ki m

nghi m Thu

u ki n, cung c p cho tôi các tài li u c n thi t,

các d ng c , thi t b trong quá trình làm th c nghi

ih

c Hà N i

tôi hoàn thành khóa lu n.

su t quá trình h c t p t

c ng d ng c th ph Raman trong phân tích quy trình bào ch c ph m ........................................................................................................................... 3 ng d ng ph Raman trong nghiên c u ti n công th c ............................... 3

u, các th y cô giáo và cán b nhân viên

ng d ng ph

n tr n b t ........................... 5

y b o và trang b cho tôi nh ng

1.1.2.3.

ng d ng ph

nt oh

1.1.2.4.

ng d ng ph

n d p viên ........................... 6

1.1.2.5.

ng d ng ph

n bao viên ........................... 6

1.1.2.6.

ng d ng ph Raman trong ki m soát ch

ng cho s n ph m cu i cùng 7

ng.

n bè, các em c

ng hành cùng tôi trong

ng.

i thân trong

i b t v ph Raman ........................................................................... 2

1.1.2.2.

nh

Cu i cùng, tôi xin dành s bi

c ph m ................................ 2

1.1.2.1.

ki n th c khoa h c n n t ng su t th i gian h Tôi xin c

NG QUAN ...................................................................................... 2

, ch b o t n tình

trong su t quá trình tôi th c hi n khóa lu n này.

Tôi xin c

............................................................................................................ 1

c nh

n b m tôi và t t c nh ng

t ........................ 5

1.2. S d ng ph Raman trong phân tích m t s thông s quan tr ng trong giai n tr n b t kép trong bào ch viên nén paracetamol ............................................. 7 a paracetamol ................................... 7

bên khích l

tôi trong su t th i gian tôi h c t p.

1.2.1.2. V tính ch 1.2.2. V

a paracetamol ........................................................... 8 bi n ....................................................................................... 11

1.2.3. V quá trình tr n b t kép trong bào ch viên nén và m t s ch ph m viên nén trên th ng .................................................................................................... 14 id

Hà N i, ngày 19 tháng 5

hc

c ch c ch t

Sinh viên

. n tr n

b c ch t trong ch ph m viên nén paracetamol trên th

.16

t U ....................... 18

2.1. Nguyên v t li u, thi t b .................................................................................... 18

3.3.1. Xây d ng mô hình h i quy............................................................................. 30

2.1.1. Nguyên li u .................................................................................................... 18

3.3.2. Th

2.1.2. Thi t b ........................................................................................................... 18

3.3.2.1. Tính ch n l c ............................................................................................... 32

2.1.2.1 Thi t b

3.3.2.2. Kho ng tuy n tính ....................................................................................... 32

Raman ................................................................................. 18

2.1.2.2. M t s thi t b chính, d ng c khác ............................................................ 19 2.1.3. Ph n m m ....................................................................................................... 19

nh mô hình ........................................................................................ 32

l pl

.................................................................................. 33

2.1.3.1. Ph n m m The Unscrambler X ................................................................... 19

3.3.3. ng d ng c a mô hình h i quy t i thi u t ng ph n trong p n tr n b t ..................................................................................................................... 34

2.1.3.2. Ph n m m Origin Pro 8 ............................................................................... 20

3.4 Sàng l c nhanh ch ph m................................................................................... 35

2.1.3.3. M t s ph n m m khác ............................................................................... 20

3.5. Bàn lu n............................................................................................................. 35

2.2. N

u .............................................................. 20

2.2.1. N i dung nghiên c

...

.20

u................................................................................ 20 2.2.2.1. Nguyên t c................................................................................................... 20 2.2.2.2. Cách ti

.

Xây d ng các lô b t ................................................................................................. 21 Lô hu n luy n ........................................................................................................ 21 Lô th

nh ......................................................................................................... 21

Lô th .................................................................................................................... 21 Lô PARII ............................................................................................................... 21 lý và nh p d li u vào ph n m m ................................................................ 21 Ghép c p các t p d li u và k t h p v i chi u b

n thích h p ..................... 22 t ngo i ............................................... 22

t qu C NGHI M. K T QU VÀ BÀN LU N ............................... 25 3.1. Phân tích d a paracetamol b n thành ph n chính ......................................................................................................................... 25 n tr n b

n thành ph n chính ................... 27

n tr n b

n h i quy t i thi u t ng ph n .. 30

K T LU N VÀ KI N NGH .................................................................................. 38 1. K T LU N .......................................................................................................... 38 2. KI N NGH ......................................................................................................... 38 TÀI LI U THAM KH O ........................................................................................ 40

DANH M C CÁC KÝ HI U, CÁC CH

VI T T T

DANH M C CÁC B NG

API

Active Pharmaceutical Ingredient

DSC

Differential Scanning Calorimetry

EMA

European Medicines Agency

FT-IR

Fourier Transform Infrared Spectroscopy

B ng 3: Lô th

HPLC

High performance Liquid Chromatography

c

IR

Infrared Spectroscopy

IUPAC

B ng 1: Ph

Liên minh Qu c t v Hóa h c thu n

Chemistry

túy và Hóa h c ng d ng

Liquid Chromatography - Mass Spectroscopy

LoQ

Limit of Quantitation

NIR

Near-Infrared Spectroscopy

PAR

Paracetamol

PARI

Paracetamol form I

PARII

Paracetamol form II

PAT

Process Analytical Technology

PC

Principal Component

PCA

Principal Component Analysis

PCR

Principal Component Regression

PLS/PLSR

Partial Least Squares Regression

UV

Ultra Violet

XRD

X - Ray powder diffraction

sai c a các thành ph n chính PC...............26

B ng 2: So sánh các thành ph n chính PC v giá tr h s

International Union of Pure and Applied

LC-MS

gi

Paracetamol

ia X

nh

cs d

l pl

2............32 chính xác

u là %, tr SD................................34

DANH M C CÁC HÌNH V

TH TV

Hình 1: C u trúc phân t Hình 2: C u trúc PARI nhìn theo tr

...

Hình 3: C u trúc PARII nhìn theo tr

..

Hi n nay, ph

ph bi ...13

Hình 5:

...

Hình 6: Minh h Hình 7 Hình 8

n xây d ng b d li

n th

22

u khóa lu

....24

c gi i thích b

....25

ng nh t trong ngành công nghi

nghiên c u v

19

c

ng các ch t, phân tích quy trình bào ch . Viên nén r t

nh Hình 4: Quy trình x lý

c ng d ng trong nhi u ngành, nhi

hòa tan c l c d p viên phù h

c ph m. Trong bào ch , vi c

c

c ch t là r t quan tr ng b

c ch t, kh

u nén c

u này

ng

c ch t s

rã c a viên nén

n

quá trình tr n b t

r t quan tr ng b i n u th i gian tr n quá lâu hay quá nhanh, t l tr n không phù h

ud

n vi c phân ph i

u

Th c t trên th gi i, ph Raman Hình 9 th th Loading (B) gi a các m u lô PARII so v i các m u trung bình trong lô hu n luy n và lô th 27

n mà hi u qu

c ch t trong kh i b t. c k t h p v i phân tích

n

PLS và phân tích PCA trong vi c phân tích

m t s thông s c a quá trình tr n b t trong bào ch viên nén và c a m t s ch Hình 10 th ph Raman c a PARI, PARII và PC2 (kho ng d ch chuy n 176 cm-1 ÷ 1900 cm.. ..28

ph m viên nén trên th

ng. Tuy nhiên, hi n v

u c th nào

c Hình 11 ( ), 15 (

th Scores c a lô 5,09% (A) và lô 40,06% t i các th ), 20 ( ) (phút tr

...29

d

Raman c m tay trong vi c phân tích. Chính vì nh ng lý do trên,

chúng tôi ch Hình 12: Ph Raman trung bình c a 6 lô trong lô hu n luy n t i t=20 phút tr n v i c sóng kíc ...

31

u nào s

S d ng ph Raman

quá trình tr n b t trong bào ch viên nén paracetamol quy mô phòng thí nghi m và c a m t s ch ph m trên th

Hình 13

th

c gi i thích b

Hình 14 th bi u di ng h mô hình RS/PLS v i thành ph Hình 15 th bi u di n tr RSD c m tr n c a t ng lô hu n luy

..

...

n tuy n tính sau khi hi u chu n c a cs d ..

phân tích m t s thông s c a

1. S d thay

i

ng

c ph Raman k t h p v c ch t paracetamol

ph m viên nén ch

ng tính theo mô hình cho m i th i

2. S d tích

cs

im phân tích s n tr n b t và trong ch

i. c ph Raman k t h p v ng c a th i gian tr

phân c ch t lên giai

o n tr n b t trong quy trình bào ch viên nén ch a paracetamol.

3. S d ng

c ph

nén ch a paracetamol trên th

sàng l c nhanh m t s ch ph m viên ng.

M ts

1: T NG QUAN

mc

Raman là không c n ti p xúc tr c

ti p mà có th qua các b m t nh a, th y tinh và quá trình thi n v

1.1.

1.1

ng [35]. Ngày nay, các công c d a trên ph Raman r c phân tích các m u tr c tuy n t các dây

nét n i b t v ph Raman T

n ra lo i m i b c x th c p c g i là tán x Raman,

r

t s phát tri n liên t c v

thi t b s d ng nguyên lý c a tán x này. V i nh ng ti n b v

nt ,

m vi ng d ng m r ng nhanh chóng c a nó, máy quang ph Raman, kính hi n vi và các công c phân tích liên quan

ng Raman, tán x

chuy n s n xu t ho c bên trong các thùng ch ph m v i nh

n,

i Stokes và tán x

ng b

m t.

i m i s phân tích.

c ng d ng c th ph Raman trong phân tích quy trình bào ch

c ph m

c thúc

ng khác nhau ngoài hi u

n s ch p nh n ph

n lý trong vi

1.1.2 .

c th c hi n cho các s n

c ch t khác nhau [8

Raman b

c phát tri n trong nhi u

th p k [21]. Trong l ch s , s phát tri n c a các công c y b i s phát tri n c a các hi

Phân tích quy trình bào ch Raman có l i ích nhi

c ph m b

i quang ph h ng ngo i (IR). B i vì ph Raman

là m t k thu t tán x , không c

ng d n ánh sáng tham chi u (c n cho ph

h ng ngo i, c n h ng ngo i); D Quang ph

trong nhi

c, bao g

m ut

c ph m, nghiên c u y sinh in vivo, ki m soát quá

hi n vi Raman so v i kính hi n vi h ng ngo

pháp y. Các k thu

c th c hi n ngày càng nhi u

n phát tri n thu c khác nhau, bao g

phân gi

nh tính, nghiên c u và ch

phát tri n thu

n cu i, phân tích quá trình, ki m soát ch

quang ph s c nét gi

ng, ki m

nh nguyên li u thô và phát hi n thu c gi .

không c n l y m u và x lý m

m

r t l n trong vi c phân tích các thông s quan tr ng c a các

ph Raman, t

1.1.2.1.

c ti p c tích h p s n trong các thi t b s n xu t liên t c,

n, luôn khép kín và s

c

Raman. Trong nhi

ng h

n

c cung c p kh

ng

t tr i.

c bi t trong vi c s n xu t liên t

c bi t là s n xu

i Fourier (FT-IR). M t l n quét m

c là ch t tán x Raman y u b

n s n xu t liên t

mô t các m u t

n hình có th thu th p d li u quang ph trong ph m vi 4000 - 40 cm-1.

các

, sàng l c, phân tích sinh h c, phân tích công th c trong

ph

c b ng kính

so v i quang ph h ng ngo i bi

sinh h c phân t

Ph

i quang và cho phép l y

c ch ng minh là m t công c h u ích ng d ng

ng, ch t bán d n, ch t xúc tác, kh o c h c và khoa h c

trình, khoa h

n, thân

c ph m.Vi c s n xu t không b

c phân tích và ki m soát t c th i b ng công c

c s n xu t liên t c tr nên kh thi trong th c t .

ng d ng ph Raman trong nghiên c u ti n công th c Các nghiên c u ti n công th c là m

tri n thu

hi u các tính ch t hóa lý c a thu

h tr phát

tri n công th c cho các nghiên c u ti n lâm sàng và lâm sàng. Ph

c

s d

c th c hi

n thi t y u c a quá trình phát

c nghiên c u này.

Quang ph

c s d ng r i anhydrat

tìm hi u các bi nh hình [22], [16

i pha

ng tinh th [19], [28]. Hi u các bi tr ng thái r n b i c ch t

m và nhi

khá quan tr

i

nghiên c u tính

nh

M t trong nh ng nhi m v quan tr ng trong quá trình xây d ng ti n công th c là hi u s phân h y c a thu c v i s hi n di n c khác nhau. M c dù phân tích s c ký l ng hi kh i ph (LC-MS) là c n thi

c trong

1.1.2.2.

iý

c ch t. Savolainen và c ng s

nh hình b ng cách s d ng các k thu a indomethacin làm nguyên li

nb u ch khác

cs d

mb os

nhi

và/ho

m cao [9]. n tr n b t

u kh i b t là r t c n thi t cho s

ng th p ho c thu c có

các thành ph n xa l ng hay g n k t m nh v i nhau. Trong trong quá trình (in - process) truy n th ng, ph i ch cho máy tr n d ng l i m i thì m um il

c. N u tích h p vào máy tr n công c phân tích

t c th i thì không c n ph i l y m u hay ch cho máy d ng mà kh i b t v n có th c phân tích. Ph Raman có th

ng d ng cho vi c phân tích s

quan sát r ng ph Raman là k thu t nh y nh t trong s các k thu t quang ph

kh i b t (không c n l y m u) th m chí cho các thu

phân bi t c s khác bi t phân t c a các m

( 1%), và k t qu phân tích g

phân h y c a các m

c

chu n b b ng các cách khác nhau [30].

Ph Raman có th h th ng phân ph i thu công th c. Ph h

mô t hi

cs d

c ch t

m c u trúc vi mô c a các

xác

c v i thu c trong nh phân b

ng nh t phân ph

c c a các vi

i h ng ngo i g n (NIR) t l i th

ph có th

ct

1.1.2.3.

c ch t trong viên nén

h

s

có th có nh

a, ph

h t cung c p thông tin h u ích v

trong các công th c phân tán r n và có th k t tinh c

c ch t

cs d

nghiên c

nh hình t các công th c phân tán r

b ng các k thu t khác nhau. Gi i h n phát hi n c k t tinh v t trong phân tán r

k t tinh

t và t o h t khô. T o h t c dính l ng vào kh i b

tb

n b i th i gian tr n

nt oh t

t

ch y c a kh i b t ph c t ng nh t v

c chia làm 2 lo i n thêm m

ng phù

y khô. Ph Raman

c bi t so v i ph NIR cho vi c phân tích quy trình t o c phân tán y u ph

c h p th m nh trong ph

NIR. Trong quy trình s n xu t liên t c, thao tác t o h

ng h c u ch

c hi u cao c a

ng thành ph n trong h .

ng d ng ph Raman trong p

ph m thu c v i c u trúc ngày càng ph c t p và k thu t cao [31]. Scoutaris và c ng

h p Polyvinylpyrrolidon - felodipin [25].

c bi t là v i h

Quá trình t o h t giúp là là t o h t

nghiên c u các h phân ph i thu c trong h n

c ch t th p

ph t ngo i (UV) hay HPLC (c n ph i l y m u) [14]. Ngoài ra, gi i h n phát hi n

[29], [18]. Lo i thông tin này có th c c k h u ích cho vi c phát tri n các s n

d ng kính hi n vi Raman

uc a

d ng

c a k thu

cs d

ng

u thách th c, ví d

u. Các tác gi

c chu n b b ng các

nghiên c u

nh hình t tr ng thái tinh khi

ng d ng ph Raman trong p

(HPLC) và s c ký l ng -

c m t b c tranh hoàn ch nh v s phân

h u ích v s phân h y có th có c

nhau t các d

ng h c k t tinh c a m t s

u ki n

u ki n khác nhau, quang ph Raman có th

các m

c gi i quy t theo th

các phân tán phân t

.

h yc a

Quang ph

t s d ng tr c vít xo n

ki m soát d a trên ph c th c hi n. Fonteyne và c ng s

s d ng ph

phân tích t c th i

iv i

c h t và s chuy n d ch hydrat - anhydrat n

c tính các thông s quan

].

tr ng c a quá trình t o h t [5], [6]. Quá trình t o h

t yêu c

c s y khô,

u này b t l i cho nguyên li u nh y c m nhi t. S y tâng sôi là m giúp gi m thi u s

pháp ph Raman

ng c a nhi t lên nguyên li u b i th

b ng

t

c tích h p vào trong thi t b t

s bi

i pha c

c ch t, ví d

1.1.2.4.

ng d ng ph Raman trong p D

hydrat hóa c a natri risedronat [14].

t o ra hình d ng cho s n ph m,

ng thì ch m

gây v

ki m tra ch

ng.

ng kê c a vi c

m b o ch

c ch

công nghi

c ph

i v i vi

c ch p nh n và ph bi n trong ngành nh tính và s

ng thu

công c r t h

u này làm cho ph Raman tr thành m t

ki m tra hi u su t c a s n ph m cu i cùng và nh ng thay u này cho phép theo dõi s

c ch t n

c các

ng (LoQ) là 0,19%

tia sáng t i) [11]. Ngoài ra, ph Raman còn cho phép d

ng m c a viên

ng ch

c ch t paracetamol [1]. K t qu chúng tôi ng nh m ng d ng cho vi c ki m soát ch t

c ch t trongviên nén trong quá trình s n xu ng d

ki m tra s

viên trong cùng m t lô s n ph m trên th dù các thành ph

y trong quá trình tr n liên t c và d p

viên [26], [4].

ng d ng trong vi c yh ah

n bao viên

c là khác nhau và khác so v ng v i sai s l n nh t so v

t công c có giá tr

thông tin ph

ng th i c ch t gi a các

ng và th

10%). Các mô hình là s k t h p gi

ng d ng ph Raman trong p

ng

c ch t paracetamol trong viên nén chúng tôi t bào ch và trong m t s ch

c

i gi i h n phát

n gi i h

i v i mu i natri wafarin b ng cách s d ng ph Raman truy

Knop và c ng s g

i d ng r n trong

t s nghiên c u v vi c ki m nghi

ph m viên nén trên th

Raman truy n qua. Griffen và c ng s

Quang ph

c coi là m t

ng c a d ng bào ch và s hi n di n c a nhi u

c cho tín hi u Raman y u [33

ng. Th m

c gi i quy t b ng cách s d ng ph

công c

c ph

c ch t cho ph Raman s

c ch t và các d ng

c gây v viên

ng cho s n ph m cu i

quá trình th hòa tan.

hi n c

1.1.2.5.

y thách th c do s

i trong c u trúc tinh th

ng.

mb

ng thành ph

c. H u h

c ki m tra, d

S d ng ph Raman cho vi thù hình c

nhi m v

ng

d ng c a PAT có th thay th các phép th trên b ng cách s d ng công c phân y càng nhi u m

c phát tri n mô hình n i tuy n

ng d ng ph Raman trong ki m soát ch

Ki m soát ch

c l y và th (l c

ng

c bi t c a chi

Châu Âu

cùng

quy mô công nghi p, v i công su t hàng ch c nghìn viên m i gi , n u ki m nghi

ng d n c

c áp d ng [34].

1.1.2.6.

n d p viên

c cu

i v i các yêu c

(EMA)

phân tích

quy mô s n xu

ng chúng (cho cs d

xây d ng

c kh o sát vào kho ng n, PCA, PLS, PCR v i

c c a các viên nén.

theo dõi quá trình bao.

t tài li u v vi c so sánh các công c PAT c ch t. Các tác gi cho r ng quang ph Raman là m t theo dõi quá trình bao c a các d ng bào ch r n,

không phân bi t thi t b bao hay nhân bao [17]. Các tác gi

Paracetamol (PAR), danh pháp IUPAC là N-(4-hydroxyphenyl) acetamid,

8H9NO2

hình 1).

Hình 1: C u trúc phân t PAR.

45°C. Tuy Hình 2: C u trúc PARI nhìn theo tr c c [12].

PAR

aminophenol

].

có

oi là

1.2.1.2.

T h3

nha

12 hình 2).

nhi t (DSC), ph h ng ngo i (FT-IR), ph nhi u x tia X (XRD) (tham kh o Ph l c 1) và ph Raman

tìm s khác bi t v ph gi a 2 d ng.

1.2.2.

V i b d li u l n

ct ob

t ng khâu c a quá trình bào ch

ph Raman trong t

n,

u này t o ra m t thách th c trong vi c x lý

thông tin k t qu

li u d

nh t, ph bi n nh t, và trong nhi y [27 Hình 3: C u trúc PARII nhìn theo tr c a [13].

pháp

PAR

ng h p có th cung c il

ng d li u

ph IR, ph

PCA là m

c a PARII [24]. C th , h PAR trên th

ng v

u v kh ng viên thu c gi

ng các ch

h p c a PARI và PARII. Các s li PARI/PAR

n cung c p m t cái nhìn t ng

quan có th hi

Tác gi P. Di Martino và c ng s

u nén ng viên thu c

mà h s d ng là h n ra r ng v i nh ng viên thu c có t l

c d p th ng tr nên kh thi v i l c nén h p lý. Ngoài ra,

nhóm nghiên c u còn kh o sát v tính

nh và không có s chuy

u, b i vì nó l u và chi u chúng lên m t s

trong d li u g c,

n

86%.

ng nh

n ti m ng nh

c g i là thành

nh trong t ng s thông tin có

u tiên ch a ngu n thông tin l n nh t trong t p d li u, m i

PC ti p theo ch a ít th t

c.

B ng cách v

th

th

u (m i m u là m c ti t l , d

c

c mang theo b i các bi n ban

ph n chính (PC). M i PC gi i thích m

a PARII r t n

i thù hình sang PARI, ngay c

c v thông tin chính có trong m t b

g

nh c a PARII d ng nguyên li u và

trong viên nén. K t qu cho th y sau kho

c t o ra b

n [7].

li 23], [32]).

n

thông tin và d

th Loading), các m i quan h th Score) và bi n quan tr ng có th

n vi c gi i thích các nhóm m u nh

ng ho c khác

bi t.

Chúng t

d

uv

a PAR

t tinh nóng ch y có s d ng c phân bi t v i nhau b

c PAR nhi t [2]. 2 d ng này

m quan các ph phân tích

Phân tích PCA có th Bi m u?

cs d

i v i d li u ph

tr l i các câu h c sóng) mô t s khác bi t gi a các

Nh ng bi

u nh t cho m t s khác bi t quan?

Có 2 thu

Nh ng bi

i v i ma tr n d li u l n c v s

Nó cho phép phát hi n các m u và quan tr

cs d

phát hi n các m u ngo i lai. Cu

PLS, hay còn g i là PLSR, là m t

- có trong d li u.

n c a các k thu t phân tích d li bi t sâu s c v

n thi t cho nhi

mô hình hóa m i quan h gi a t p bi n. Hi u

là m

t h u ích

tích) và t p bi n ph thu d li

c s d ng trong ph n m m The

Unscrambler X, bao g m h i quy thành ph n chính (PCR), h i quy b

i

thi u t ng ph n (PLS), h i quy

phân gi

phân lo i, thông tin m i có th

c chi u lên m t mô hình PCA duy nh t b ng

hi u ho c lên nhi

n (MCR). Trong

ng th i b ng cách s d

ng là hà

n cl

ng là tín hi u phân

ng ch t phân tích) trong cùng t p

mô hình hóa c hai t p bi n X và Y (g i là mô hình h i n tuy

ng th i tìm ra các bi n ti m n (hay còn g i là các nhân

t -

n chính (PC)) hi u ch nh và s

thành ph n này trong t p X mà t

phân tích h

. Trong th c t

n c a mô hình này c s d ng nh t trong các

n.

i ba b thu c tính b sung:

Thu c tính Score Chúng mô t các thu c tính c a các m d ng b th

c am cv

c hi n th

i

c v trên m t PC khác. Tuy nhiên, PC có mô t các quá trình phát tri n th i

gian.

Thu c tính Loading Chúng mô t m i quan h gi a các bi n và có th

cv

m

li u ph ) ho c

bi u

c s d ng trong gi

i d ng

m.

Thu c tính p

c gi i thích

Thu c tính này cho bi t m i PC gi sai. Giá tr này t sai trong d li u.

ng t l ph

at

ng t

c các bi n trong t p Y thông qua

n tuy n tính. Quy trình x c th hi

c g i là mô hình SIMCA.

M i PC c a

i thu t toán

SVD.

ng thông tin h u ích - trái

c v i thông tin nhi u ho c nh ng bi n

pháp phân lo

ng hàng và c t thì nên

ch n thu t toán NIPALS do thu

quan)?

và

c dùng trong ph n m m Unscrambler cho h i quy PLS:

Hình 4: Quy trình x lý trong phân tích PLS.

PLS có th ng Y có th

c th c hi n v i m t ho c nhi u bi

t c th i. P

c s d ng trong mô hình h i quy này. K t qu chính c a mô hình

Raman là m t trong nh ng công c

vi t c a nó.

nh

th h i quy v i các thông s h i quy.

Có 3 thu

id M

c dùng trong ph n m m Unscrambler cho h i quy PLS:

c ch t, s

ng hàng và c t thì nên ch n thu t toán NIPALS do thu t toán này tính toán i thu t toán Kernel.

c ch t

u x b t tia X là chu n vàng trong nghiên c u

i v i ma tr n d li u l n c v s

nhanh

i

i yêu c u ph i chu n b m u và

nh t c th i d

c ch t trong khi bào ch .

Bên c

n th i gian, ch id

1.2.3.

ut nt i

d ng b t. cs

Viên nén là m t trong nh ng d ng bào ch ph bi n nh t trong ngành công nghi

c ph m. D ng bào ch viên nén ph thu c vào cách t o h t và có th t o

h tb

t, xát h t khô và d p th ng. M

ch t

xát h mb os

ng nh t, quy trình và thi t b

bào ch viên nén bao g

tt

b nc a

n.

p viên và có th

c tr n b t kép và t o kh i m v

và s

ng c a các viên nén trong cùng m t lô ch ph

ng s n ph m, c th

vi c phân tích và ki m soát các thao tác này là r t quan tr

trình bào ch

ng

c dùng ngày càng nhi u trong vi c xác

nh d

c ch t và s

i c a chúng khi các m u

(b t, viên nén) hay th m chí

c phân tích s bi n

d ng nguyên li u hay sau m

d bi

a CL

c trong quá

t c n thi t b i y u t này s

d ng r n

ng l ng (s k t tinh quá bão hòa hay d ng ph

nghiên c u s chuy n Raman cho các

t h p ph Raman c a chúng v

phân tích s khác bi t gi a các ph c a các d ng tinh th c a CL th thành ph n chính PC.

c bi t là các thông

m c a kh i m. Bên c c ch t khi

, ph

s chuy n pha). Xuan và c ng s

c dính l ng là r t

ng tr c ti p lên ch

ng

u ph i chu n b m u, t n th i gian và

pha c a ch t CL - 20 trong tr ng thái r n [15]. C th , h

quan tr ng và s

id

G

nc a

c bao màng bao thích h p.

i gian tr

ux

c ch

chi phí cao.

n b nguyên li u, tr n b t kép, nhào

m, xát h t, s y se s a h t và cu

s

phân tích s k t tinh và d ng thù hình c

d

20

ra r t hi u qu ,

nhanh và chính xác, không c n th i gian cho quá trình x lý và chu n b m u, chi phí th bi t v v

c th s khác nh ph

a các d ng tinh th là

p

thông tin v s khác bi t trong c u trúc tinh th gi a các d ng (do ph

hòa tan c a thu c.

c

ng c a các nhóm ch c trong phân t và gi a các phân t ).

Vi c s n xu t thu c d

ct

ng hóa c trong

khâu bào ch và ki m soát ch

ng trong quá trình bào ch

c bi t là khi s n

xu t liên t c b t bu c c n có m t công c

phân tích và ki m soát song song và

c ch t tr n b t

n

n th c ch t

ng ph i

l ch chu

và s

c ch t trong t ng i gi

c ch t các m u

ng trung bình c a các m u v i theo yêu c u. m là không th tr n b t liên t c, t n th i gian và hóa

ch

phân tích m u, t

n xu t.

Lee và c ng s

d ng ph Raman k t h p v i các phân tích quá trình tr n b t [20]. H s d

d n quang

c tích h p vào trong các bu ng tr

khác nhau trong kh i b t r

Raman

phân tích s

u các v trí

ng t i các v trí

t cách t c th i b ng cách phân tích k t qu

ct

n.

m là nhanh, không t n th i gian x m

ng th i quá trình tr n b t không b

ng

n. c ch t trong ch ph m

viên nén paracetamol trên th

ng

Trong th c t

d ng ngày m t nhi u ph Raman

trong vi c phát hi n và sàng l c nhanh các ch ph m trên th ng (m c s d ng cho m vi c s d ng (có th

ng c v m

nh

ng còn h n ch

n c m tay hay

Máy Raman c

m thu n ti n trong

c d ng l ng, r n, viên nén, b

v i t ng lo i), v n chuy n d dàng, g n nh c m tay là gi i h n phát hi

p m c a Raman

c cao b ng v i máy

t

bàn.

Trong thi t b

m tay có tích h p s n thông s t t 85% ho c 90% tr

ch ph m. H s

s

sánh giá tr cs d trên bao nhiêu ph

các v

c hay ph t ngo

m u. T

u hàm

n tr n b t c a bào ch

cho d ng quá trình tr n b t và l y m u b

phân tích s

ng ph c ch t có trong

ng gi a 2 ph (ph chu n và ph th ), so

t im iv

ng trên 2 ph . M t khác thông s này

sàng l c nhanh các ch ph m v m nh).

ng

HQI c a m u so v i ph

U

ch

85 thì k t qu

c ch t paracetamol v i m

t, trong m u lúc này

ng t i thi u nh

nh.

2.1 2.1.1. Nguyên li u c ch t: Paracetamol (s CAS: 103-90-2, công ty Anhui Jinao Chemical, Trung Qu c, tiêu chu n s n xu t). c: avicel PH 102, tinh b t mì, talc, magnesi stearat (Trung Qu c), dung d ch NaOH 10% chu n (Trung Qu c), t tiêu chu t l kh

cc t1l

ih

c Hà N i).

c d ng ho c tinh khi t phân tích ng c

c ch

c

c s d ng trong

quá trình tr n b t.

Hình 5 ng

Paracetamol Avicel PH 102 Tinh b t mì Talc Mg stearat Các viên nén: Saviday

c ch t trong lô (g) 80 g 80 g 12,5 g 1,5 g SaviPharm (s lô 1785382); Decolgen

International Pharma ( s lô 707671); Colocol Panadol

GSK (s lô X0B034); Paracetamol

Túi nh a PE (Trung Qu

2.1.2.2. M t s thi t b chính, d ng c khác C i, chày b ng s

Máy quang ph UV-Vis: máy U-1900 UV/VIS (Hitachi 3J0

United

Saokim Pharma ( s lô 030317), ThePhaCo (s lô 368).

ng m u.

c tích h p s

Cân phân tích (Sartorius

c).

Cân k thu t (Sartorius

c).

Máy vi tính Lenovo (Intel (R), RAM 2.00 GB, 64 bit).

. t 85 v i ph paracetamol USP chu n

ng d ng trong sàng l c nhanh các ch ph m. N u

nh m c, ph u l c, pipet

paster, gi y l c, cuvet th ch anh.

ng máy NANO RAM (hình 5) (model: BWS456;

c sóng kích thích: 785 nm; d ch chuy n Raman: 176 ÷ 1900 cm-1, công su t 350

H s ch ng ph

Nh t B n, model:

c, model: RH digital KT/C safety control).

Các d ng c khác: C c có m

c hi u chu n b ng th chu

viên nén

0003).

Máy gia nhi t có khu y t (IKA -

Raman

Ph R

tr n b t trong vi c bào ch

paracetamol quy mô phòng thí nghi m.

2.1.2. Thi t b 2.1.2.1 Thi t b

.

2.1.3. Ph n m m 2.1.3.1. Ph n m m The Unscrambler X c th c hi n b ng ph n m m The Unscrambler X (phiên b n X10.5). The Unscrambler X là m t ph n m bi

cs d

hi u chu n d li

phân tích d li

n, áp d ng cho d li u quang ph

h ng ngo i g n, ph Raman và phát tri n các mô hình d

s d ng trong

phân tích ph th i gian th c cho nguyên li u. c tích h p trong ph n m phân tích thành ph n chính PCA, các phân tích h

c s d ng là

2.2.2.2. Cách ti n hành Xây d ng các lô b t Lô hu n luy n c ch t PAR (chu n nguyên li

n PCR, PLS, L-PLS,

n Vi t Nam

MLR.

IV, là d ng I (PARI) [6]

2.1.3.2. Ph n m m Origin Pro 8

0,00, 5,09, 10,05, 19,99, 40,06, 49,85, 60,11, 79,88 và 100,00(%), m i lô có

n m m chuyên v thi t k và x lý ph này, chúng tôi s d ng ph n m li

th . Trong nghiên c u

v m t s ph

kh

ng 20g (t s kh i)

th d a trên các s Lô th

2.1.3.3. M t s ph n m m khác

c v i nhau trong t t c các viên là c th c hi n trong c i s và

Raman sau m i kho ng th i gian 5, 10, 15, 20 phút tr n. nh

Lô th

B ph n m m Microsoft Office 2007, Paint.

ng gi

ng v i 9 lô hu n luy n là

i v i m i lô này, quá trình tr n b

kh o sát b

c t ph n m m Unscrambler X.

i9c

nh

c ch t o g m 7 lô v

ng 79,97,

79,83, 79,54, 79,74, 79,45, 79,84 và 79,67(%), m i lô có kh Lô th

2.2.1. N i dung nghiên c u K t h p d li u ph Raman và phân tích PCA, PLS c ch t PAR viên nén

phân tích quá trình

i d ng bào ch viên

nén là: Saviday (10 viên), Decolgen (10 viên), Colocol (8 viên), Panadol (10 viên),

tr

u trong c i s

c ch t chính PAR, m i lo i

ti

c nghi n m n và

nh d ng thù hình c a PAR.

Lô PARII

tr n b t.

S d ng ph Raman và h s ch ng ph ph m viên nén ch

c ch t PAR trên th

ng.

Ch t o các lô b t t nguyên li

li u c a t

u

n, t

t tinh nóng ch y s d ng y paracetamol gi

nhiên v nhi

55°C, ti p theo nâng nhi

cùng h nhi

v nhi

d

nhi

c ghép c p v i nhau và th c

nhi t t

lên 90°C và gi trong 2 phút, cu i

phòng. Paracetamol d

cs

ch t o 3 lô PARII. Ph Raman c

v i các lô hu n luy n (tr lô 0%) và lô th

p cho t ng trong ph n m m The

Unscrambler X trên m t máy vi tính. Các d li u này s

c t o ra b

[2]. C th

2.2.2.1. Nguyên t c

Raman c a các lô v i th i gian,v trí và s l

PARII

sàng l c nhanh ch

u

hi n t ng n i dung nghiên c u.

ng v i 5 lo i ch ph

Paracetamol (10 viên) ch

i.

ck th pv

Các lô th

nghiên c u d ng

n tr n b t và trong ch ph m

K t h p d li u ph

nh p d

ng 10g.

c phân tích PCA cùng nh d

c ch t

PAR. lý và nh p d li u vào ph n m m xây d ng b d li u chúng tôi ti lô hu n luy n (m i th

m 5, 10, 15, 20 phút tr

Raman các lô trong các Raman t i 20 v trí

ng u nhiên khác nhau), lô th

nh (tr

Raman t i 20 v

trí khác nhau), lô th (nghi n m n và tr

i 1 v trí ng u

nhiên) và lô PARII (tr

i1v

nh m c, l

c

c

ng PAR trong các lô theo A(1%, 1 cm). A (1%, 1 cm) có giá

nh và lô th . Sau

c nh p vào các t

h p ph c a dung d ch thu

sóng 257 nm, dùng cuvet dày 1 cm. M u tr ng là dung d ch natri hydroxyd 0,01M.

cs d

tính giá tr trung bình cho t ng lô trong lô hu n luy n, lô th li

nv

tr là 715

c sóng 257 nm

n Vi t Nam IV). Công th

ng trong ph n m m.

n xây d ng b d li

c mô t

. ng % dung d ch th , Ax

x

h p th ph

c c a dung d ch th sau quá trình pha loãng; m là kh

ng b t th cân ban

gam). t qu Hình 6: Minh h

n xây d ng b d li

Ghép c p các t p d li u và k t h p v

u vào.

th pv

c a paracetamol

n tr n b t và trong các c ti

th loading và scores) c

n

n

th c xây d ng trên phân

tích PCA k t h p v i d li u ph Raman c a các lô hu n luy n, lô th và lô

hình 7. K t qu

PARII.

bi n. i chi u b

n Vi t Na

ng PAR trong các m u c a các lô th sánh v i k t qu

S

t ngo i ang ph

nh. K t qu

c khi s d

cs d c này s

ng c a các lô hu n luy n

th

c so

n s d ng phân tích

nh, cân chính xác (m gam) m

ng kho ng 0,15 g PAR

nh m c 200 ml, thêm 50 ml dung d ch natri c, l

qua gi y l c khô, b 20 ml d ch l nh m c 1

cv

n v ch, l

ur il c

79,88,

án ti p qua

c xây d ng trên phân tích PLS k t h p v i d

100,00 (%) (t i th c xây d ng và th

giá tr t

l c chu

60,11,

m 20 phút tr n). C th , mô hình này sau nh (b

ng cho t ng v trí t i t ng th

u. L y chính xác 10 ml dung

nh m c 100 ml, thêm 10 ml natri hydroxyd 0,1 M, thêm

c xây

li u ph Raman c a m t s lô hu n luy n : 0,00, 19,99, 40,06,

u. L y chính xác 10 ml d ch l c cho vào bình n v ch, l

c c ti p

th scores) c

m tr n. Cách th

mô hình h

ng b t vi

n tr n b

d ng trên phân tích PCA k t h p v i d li u ph Raman c a t ng lô hu n luy n t i t ng th

i v i m i lô th

gi

nh

nh

PLS.

d

id

ch ph m viên nén th

n thích h p

Vi c ghép c p các t p d li u r thích h

S

t ngo i UV) s m c a t ng lô hu n luy

i gi a các v trí c a t ng th

c tính toán và so sánh v i nhau.

m tr n c a

Vi c sàng l c nhanh ch ph

s

C

C NGHI M. K T QU VÀ BÀN LU N

HQI là 85. C k t qu c khi s d ng h s ra nh n xét v các gi i h n phát hi n v

c chúng tôi th ng kê l i và rút

3.1. Phân tích d

c ch t.

chính Chúng tôi phân tích d

i k thu t PCA cho b d li u ph

trung bình v i cùng các thông s

t: t p d li u là ph c a 3 lô PARII, ph

trung bình c a các lô hu n luy n sau 20 phút tr n và c a các lô th , s thành ph n chính là 7, s d

c chéo v i thu t toán NIPALS. K t qu

th

th

u di n giá tr % hi u chu n và xác th c

Hình 8

c gi i thích b i các PC. T th c Hình 7

n

u khóa lu n.

c gi i thích b i các PC.

th , chúng ta có th th y giá tr hi u chu n và xác

m i v trí PC là khá g n nhau. Và 2 giá tr này tr

mô hình s d

gi i thích (t c là s d

PC3). C th , % giá tr

Hình 8 PC1 hi u chu n gi chính nó (80,30%). Giá tr

ng nhau khi ng th i PC1, PC2 và

c gi i thích b i

th

c trình bày c th

c gi i thích b i các PC. c 84,43%, khá g n so v i giá tr xác th c c a n 95,25% và 91,57%

ng khi s

d ng c PC1 và PC2 (ký hi u PC-1,2 trong b ng 1) hi u chu n và xác th

gi i

tin c y cao (giá tr xác th c và hi u chu n g

c bi

n c PC1, PC2 và PC3 (PC-

1,2,3)) và ch c

gi

khác bi t c a các m u trong mô hình. Do v

tài này chúng tôi s d ng

phân tích d B ng 1: Ph PC-1

84,43

cs

c ch t.

gi

sai c a các thành ph n chính PC.

PC-1,2

95,25

PC-

PC-

PC-

1,2,3

1,2,3,4

1,2,3,4,5

99,49

99,76

99,92

PC-

PC-

Hình 9

th

th Loading (B) gi a các m u lô PARII so v i các

1,2,3,4,5,6 1,2,3,4,5,6,7 99,96

m u trung bình trong lô hu n luy n và lô th .

T

99,98

th Scores (hình 9A), chúng tôi nh n th

c phân bi t rõ

ràng so v i lô hu n luy n và lô th theo tr 80,30

91,57

99,14

99,47

99,81

99,85

luy

99,87

th Loading (hình 9B) c a PC2 ch

ch t mà ít ch u thi Score, hay còn g là m t bi

th

m (m

m bi u di n cho m t m u),

th Score hai chi u v i hai tr

c bi t h u

ích, vì hai PC này là t ng h p c a nhi u bi n trong d li thành ph n chính

iv

tk c p

th có hai tr c là PC1 và PC2 này, khi 2

i di n cho 2 m u càng g n nhau thì ch ng t các m

ng

c l i. th

h

ng hay khác nhau và s

c

nh ph c a PC2 (c âm và

nh c a ph Raman PARI và PARII (hình 10) [3], và thêm ng n n c a PC2 x p x b ng 0 (ngo i tr kho ng ph cu i t -1

1700 ÷ 1900cm )

c l i, hai lô hu n luy n và th không có s phân bi t theo u này ch ra r

tr th

c ch t trong lô hu n luy n và lô

u là paracetamol d ng I, còn trong lô PARII là

paracetamol d ng II.

th này s bi

ng

c các bi n nào là các bi n quan

i v i m i PC. yd

c vì toàn b

c

3.2 th bi u di n t tr ng c a các bi n (m

c a các bi n) lên các PC. T tr

ng c

chi u có vai trò cung c p thông tin v các m u (m i

chi u là m t PC)

c bi t là so v i lô hu n

Chúng tôi phân tích d

b ng vi c s d

cl pl

thu t phân tích PCA cho t ng b d li u ph trung bình c a các lô hu n luy n (5,09%, 10,05%, 19,99%, 40,06%, 49,85%, 60,11%, 79,88%) sau l

th trên chúng ta có th bi a các bi

u vào

c2m i v i s khác bi t này.

tk

m tr n: 5, 10, 15, 20 phút tr n, v i cùng các thông s thành ph n chính là 7, s d

t

m

:S

c chéo v i thu t toán NIPALS.

y ng v i m i lô hu n luy m tr n, m i th

t các th i

m tr c phân tích, và có t t c 7 lô hu n luy

ng v i t ng th i ng v i 20 c kh o sát.

K t qu c th v th

c gi i thích cho t

c bi u

ph n Ph l c 2).

Hình 11

th Scores c a lô 5,09% (A) và lô 40,06% (B) t i các th

m5

), 15 ( ), 20 ( ) (phút tr n).

C th ,

th Scores (hình 11A -

chi u theo tr c hoành PC1 (tr c gi

c nhi

c 2 nhóm m u v i kho Hình 10:

c s d ng phân tích PCA cho m

ng

u phù h p. Ngoài ra

y, ch c

khác bi t v

u t i các th

giúp chúng ta có th phân bi m tr n

c 2 nhóm m u

cs

n phút 20 v

u này ch ng t uv

cho k t qu

c

nhóm 2) còn nhóm 2 g m 18 m u còn l i.

Theo th i gian tr n các m

a các m u trong cùng 1 mô

th Score (v i 2 tr c là PC1 và PC2) gi a các mô

hình trong cùng 1 lô hu n luy

u so v i các v trí

ch

u (hình 11A -

v i m i mô hình trong 28 mô hình này, chúng ta ch c n s d giá tr

ng th p 5,09%, tá

trên v i nhóm 1 ch g m 2 m u (có th bi u di n cho các v

u tiên gi

sai gi a các m u trong mô hình và giá tr xác th c và hi u chu

gi

c gi

c chi m ph n l n không gian trong kh i b

176 cm-1 ÷ 1900 cm-1).

D li u tính toán cho th y

nh t) thu

i r t xa nhau (chênh l ch l n v hàm

c ch

th ph Raman c a PARI, PARII và PC2 (kho ng d ch chuy n

) ch ra r ng

lô 5,09%. (Tham kh

c ch uv

ng. Lô 10,05%, 19,99%

th Score c a các lô này

ph n Ph

l c 3).

t ng lô hu n luy n.

Không gi m u (hình 11B ch t cùng chi m ph v is

ng m

c 2 nhóm c c 2 nhóm m u trên i gi a 2 nhóm không

xa nhau. Theo th i gian tr n các m u (hình 11B -

n phút th

u này ch ng t

c ch t và tá d

tán vào nhau và các m u tr

uv

c ch

m 5 phút. Lô 49,85%, 60,11% và 79,88% cho k t qu chí, lô 60,11% và 79,88% sau 5 phút tr nhau. (Tham kh

i th i lô 40,06%. Th m

c ch

th Score c a các lô này

u vào

ph n Ph l c 3).

K t qu kh o sát quá trình tr n này s

c ki m tra l i m t l n n a và

i chi u sau khi xây d

ng

m c 3.4.3 c a khóa lu n

này. í

3.3.

Hình 12: Ph Raman trung bình c a 6 lô trong lô hu n luy n t i t=20 phút tr n v i c sóng kích thích 785 nm.

3.3.1. Xây d ng mô hình h i quy Hình 12 cho th y m t s -1

8 cm

(dao

-1

ng

as(N-C-CH3

-1

1612 cm , 1648 cm (dao hi u:

ng

ng n n c a các ph gi m d nc

-C t

tín hi

ng

y);

n d ng).

ng th

n theo ng c

ng n n ph

m u. Tuy nhiên, v

),

-CH)) [2].

y, có s

n

ng b

), 1325 cm-1

ix

as

chi

a PAR trong các lô hu n luy n

ct

ng c trong

c ch t không b

i hay nh

c.

Chúng tôi xây d ng mô hình ph Raman-PLS (RS/PLS) cho b d li u ph trung bình v i cùng các thông s

t:

ph trung bình c a 6 lô hu n luy n sau 20 phút tr hình, bi Y là n

m ph

chéo v i thu t toán NIPALS. K t qu

c ch

xây d ng mô

n d ch chuy n Raman 176 ÷ 1900 cm-1, bi n

c a 6 lô, s thành ph n chính là 4, s d

Hình 13

n PLS, t p hu n luy n là 6

c

th

c gi i thích b i các PC.

K t qu % giá tr RS/PLS

c gi i thích b i các PC trong mô hình

c th hi n trong hình 13. T

và xác th c c

y r ng giá tr hi u chu n

ng v i nhau ch ng t phân tích PLS phù h p cho

vi c phân tích và xây d ng mô hình h i quy cho b d di

u vào, và mô hình

xây d

tuy n tính cao. Tuy nhiên, giá tr

c gi i

thích xác th c gi m d n t PC3.

2

K t qu h s

ng v i

c th hi n

b ng 2.

2

B ng 2: So sánh các thành ph n chính PC v giá tr h s

.

PC1

PC2

PC3

PC4

R2 (hi u chu n)

0,9846

0,9981

0, 9991

0,9994

R2 (xác th c)

0,9693

0,9955

0,9843

0,9536

T b ng 2, chúng tôi th y r ng v i vi c s d ng s thành ph n chính t 2

PC2 tr

hi u chu n l

xác th

i gi m d

gi m d n

% giá tr

s R2

0,995.

n PC4, phù h p v i s

c gi i thích (hình 13). Theo quy t c ng là ch n PC nh nh

ch

s

l n,

Hình 14

u này chúng tôi ch n s d ng s thành ph n chính là 2 (PC1 và PC2)

xây d

3.3.2. Th

ng.

3.3.2.3.

c so sánh v

a PAR

nh d a vào ch

t là RSD-UV và AC-UV c

UV.

Công th

RSD-PLS =

× 100%;

AC-PLS =

× 100%.

AC-UV =

× 100%.

c này.

RSD-UV =

3.3.2.2. Kho ng tuy n tính 2

ng

u cho các

u này cho th y quy trình có tính

phát hi n PAR trên n n h n h

ng.

n PC2.

l pl

v i các ch s này l c) không cho các

n luy n còn l

a lô 100,00% (hình 12

c s d ng P

cs d

l pl

ch n l c cho mô hình. Lô 0,00% (ch g m h n h

ph n chính

n tuy n tính sau khi hi u chu n c a

s RSD-PLS và AC-PLS c a mô hình khi tính toán cho lô th

Ph trung bình c a 6 lô hu n luy

H s

ng h

mô hình RS/PLS v i thành ph n chính

nh mô hình

3.3.2.1. Tính ch n l c

ch n l

th bi u di

× 100%;

d c Slope hi u ch nh c a mô hình v i thành u là 0,9981 (hình 14

-PLS và SD-

c ch p nh n ch t d

l ch chu n các k t qu

c

c ch t d UV; K t qu

c ch t ghi trên nhãn trung bình c a các m u th b ng 3 cho th y RSD-PLS và RSD-UV l

và 2,65%, AC-PLS và AC-UV l n

nh.

t là 0,84% (nh

t là 99,04% (n m trong kho ng 98%-102%)

t qu th

nh c a các lô b ng mô hình PLS và b ng i k t qu ghi

trên nhãn c a m u.

B ng 3: Lô th

nh

cs d

l pl

c

chính xác

u là %, tr SD.

Lô

CC

LC

UVC

1

77,56

79,97

80,70

CAC

2

78,70

79,83

77,00

3

79,57

79,54

80,10

4

79,25

79,74

78,40

5

79,67

79,45

85,50

6

78,20

79,67

80,80

UVAC

7

79,72

79,84

79,40

80,27

78,95

AC-PLS

SD-PLS

RSD-PLS

99,04

0,83

0,84

Hình 15

LAC 79,72

AC-UV

SD-UV

RSD-UV

100,69

2,67

2,65

3.4.

K t qu cho th y, t i th

c tính b

theo mô hình, UVC

c ch t c a lô

t t i m i th

t t c 20 v i

i 40,06% s

, các lô t 40,06% tr y các m

ph m v khía c nh

trên b

th , trong nghiên c u, k t qu

phút tr n) chu

m tr n (5, 10, 15, 20

các lô hu n luy n (tr lô 0% và lô 100%) r i RSD. K t qu

4. K t qu giá tr RSD c tr n c a t ng lô hu n luy

ng c th

c tham kh o

l ch ph n Ph l c

ng tính theo mô hình RS/PLS cho m i th c bi u di

th hình 15.

m

u t

t t c 20 v

c ch t cao trên 10,05% tr raman

c phát hi n thông qua k t qu

3.3.3. ng d ng c a mô hình h i quy t i thi u t ng ph n trong phân tích giai n tr n b t c áp d ng th cho vi c ki m tra l i quy trình tr n b t t i t ng th

lô 10,05% có 18 v

âm tính

c phát hi n thông qua k t qu

lên

UV.

ng t ng v

m 20 phút tr n,

k t qu âm tính, lô 19,99% có 8/20 v

c ch t ghi trên nhãn c a lô, CC là hàm c ch t c a lô d

th bi u di n tr RSD c ng tính theo mô hình cho m i th i m tr n c a t ng lô hu n luy n.

t, còn m t

ng u này cho th y

v i vi c s d ng ph raman v i thông s HQI c th , vi c sàng l c nhanh các ch

HQI là 85

c ch

ng là kh thi, r t nhanh và ti t ki m. C Raman c a các m u trong lô th v i h s u trong lô th

u

c ch t cao trên

10,05%.

3.5. y PAR

và trong

trình bào ch thu c d ng này. S li m.

K t qu kh o sát quá trình tr n b t gi

c ch

c b ng phân

tích PCA cho th y trong kho ng 0 ÷ 20 phút, th i gian tr n t l thu n v i s c ch t và kh i b nh th

ng PAR trên 40% thì d tr ng tr n t

s n xu t hi u qu

ng

u. Vi c xác

t quan tr ng, giúp ti t ki m chi phí,

c ph m.

Mô hình h i quy Raman

ng PAR trong h n h p b t

c xây d ng (R = 0,9981) nh m ph c v cho vi c phân tích s n tr n b t. K t qu th

ng

nh cho th y mô hình i hình 15 cho th y các lô 5,09%,

10,05% và 19,99% cho giá tr RSD r t cao (trên 40%) t i th ch ng t t i th

m này các lô v

c l i ch ng t k t lu

ra

c tr

m tr n 20 phút,

u. Các lô còn l i cho giá tr

u các lô này. K t qu ki m tra l i này phù h p v i m c 3.2 trong khóa lu n.

Bên c

c sàng l c nhanh

c th c hi n, r t có ích cho

vi c sàng l c nhanh (c trong bào ch và ki m nghi m) các ch ph m có c ch t PAR cao trên 10,05% v i k t qu t(

t

ng

i 40,06% v i k t qu

). c các môi hình h

c ch t PAR trong d ng bào ch viên nén c ch t và t l thành ph t

nh

m t nghiên c

cs d

[1].

bào ch

n h p b t PAR trong khóa lu n này. K t qu cho th y các mô hình u cho tính ch n l

l

tuy n tính t t.

ng m t s viên nén PAR trên th d kh

thông tin r ng ph m này

c ch t gi a các m u trong cùng m t lô c a các ch u nhau. Tron

c ch u h u ích trong vi c ki

có m t ch ph m (chính là lô Saviday

s lô 1785382) không có s chênh l ch nhi u gi a các sai s d

Ngoài ra, k t qu d trên nhãn l i cho th y kh

d ng nh ng mô ng.

y, vi c xây

i d ng h n h p b

u c ch t trong quá

.

cho t ng

ng cao gi a các viên trong lô ch ph m này. ng chênh l ch r t ít so v ng d ng mô hình

ng và sàng l c nhanh các ch ph m viên nén ch a PAR.

l p l i cao (RSD-PLS = 0,84%, ACph UV. K t qu giá tr RSD

m t s ch ph m (chính là các lô thu c Decolgen và

c s d ng trong khóa lu n này) là r t l n (1,32 - 10,26%), cung c p

viên, ch ng t s PLS nh m

2

c ch t

cho t ng viên

d

c còn cho th y s chênh l ch v sai s

ng ghi ng

nh

M r ng nghiên c u quy trình ki m soát cho d ng bào ch viên nén

K T LU N VÀ KI N NGH

ih

c ch

M r ng nghiên c u cho các d ng bào ch

1.

Sau khi th c hi

tài này, chúng tô cs

i

b t và trong s n ph 1785382); Decolgen

c k t qu

dung d ch u ng, tiêm, nh m t,

c ch t

i có ch a PAR (Saviday

n tr n

SaviPharm (s lô

United International Pharma ( s lô 707671); Colocol

Saokim Pharma ( s lô 030317), Panadol

GSK (s lô X0B034); Paracetamol

ThePhaCo (s lô 368)). C th , d và trong m t s ch ph m trên th

c ch t PAR trong nguyên li u ng

u là PARI, gi ng v i nguyên li u ban

u.

Phân tích

o n tr n trong vi c bào ch viên nén ch

ch t PAR b

n PCA, PLS. C th ,

c n giúp

chúng tôi nh n ra r ng trong kho ng 0 ÷ 20 phút, th i gian tr n t l thu n v i s c ch t và kh i b

ng PAR trên 40% thì d tr

Sàng l c nhanh các ch ph m trên th

ng

u.

ki m soát ch

ng.

Trong nghiên c u này, chúng tôi có th phát hi n (c trong bào ch và ki m nghi m) các ch ph

ng PAR trên 10,05% hay

d a trên h s HQI là 85

Do s h n ch v

i 40,06% ch c n

Raman c m tay.

u ki

m t th i gian và kinh phí,

nghiên c u này còn m t s h n ch và ch

u trong vi c ng d ng ph

Raman trong vi c phân tích m t s thao tác trong quy trình bào ch viên nén ch a t s ki n ngh

PAR ng d

Raman c m tay

n vào m t s

thao tác khác trong quy trình bào ch viên nén ch a PAR v i quy mô công nghi p trong các nhà máy s n xu t.

ng khác. iên nang, siro,

7.

multivariate methods for quantitative determination with transmission

TÀI LI U THAM KH O

Raman spectroscopy in pharmaceutical formulations

1. T n,

1.

t, N. T. Hi

(2018

ng

ng Paracetamol trong viên nén b ng quang ph Raman v i mô hình phân tích h

p chí D

8.

nhi

Kh o sát

ng c a

p chí Nghiên c

c và Thông tin thu c, s 4+5, tr.

T. Gnutzmann, R. Kahlau, S. Scheifler, F. Friedrichs, E.A. Rossler, K. Rademann, F. Emmerling (2013),

k t tinh lên quá trình hình thành paracetamol d ng II

(Orthorhombic)

S. Garrigues, M. de la Guardia (2013), Non-invasive analysis of solid samples, TrAC , Trends Anal. Chem., 43, pp. 161 173.

9. n,

dynamics of nifedipine , CrystEngComm., 15, pp. 4062 4069.

10.

Mixture of Paracetamol and Ascorbic Acid, Prepared Extempore, at Elevated

nh

Trop J Pharm Res, 14(8), pp. 1315

N. Al-Zoubi, J. E. Koundourellis, and S.

-IR and

1321.

Raman spectroscopic methods for identification and quantitation of

11. Griffen JA, Owen AW, Matousek P (2018), Quantifying low levels (< 0.5%

J. Pharm.

w/w) of warfarin sodium salts in oral solid dose forms using transmission

Biomed. Anal., 29(3), pp. 459 467.

Casian T, Reznek A, Vonica-Gligor AL, Van Renterghem J, De Beer T,

J Pharm Biomed Anal, 155, pp. 276 83.

12. M. Haisa, S. Kashino, R. Kawai, and H. Maeda (1976)

Development, validation and comparison of near infrared and Raman spectroscopic methods for fast characterization of tablets with

Form of p-

Fonteyne M, Vercruysse J, Díaz DC, Gildemyn D, Vervaet C, Remon JP, et

14. Hausman DS, Cambron RT, Sakr A (2005),

al (2012), Prediction of quality attributes of continuously produced granules Eur. J. Pharm. Biopharm., 82(2), pp. 429 36.

Application of Raman

spectroscopy for on-line monitoring of low dose blen

Pharm. Dev. Technol., 18(1), pp. 85 97.

Fonteyne M, Soares S, Vercruysse J, Peeters E, Burggraeve A, Vervaet C, et

p-

Acta Cryst., 70(1), pp. 2510 2512.

al (2013), Real-time assessment of critical quality attributes of a continuous

6.

Acta Cryst., 58(2), pp. 1283 1285.

13. M. Haisa, S. Kashino, and H. Maeda (1974)

Talanta, 167, pp. 333 43.

5.

Crystal growth rates and molecular

24 28.

2. T

4.

J. Chemom., 24, pp.

674 680.

c h c, 58(509), tr. 16

19.

2.

3.

M. Fransson, J. Johansson, A. Sparén, O. Svensson (2010), Comparison of

Int J

Pharm., 298(1), pp. 80 - 90.

15. principal component analysis to quantitatively analyze four crystallographic phases of explosive CL-

RSC Advances., 8, pp. 23348

23352.

16. A. Hédoux, Y. Guinet, M. Descamps (2011), The contribution of Raman

25. R. Palermo, S. Short, C. Anderson, H. Tian, J. Drennen III (2012),

spectroscopy to the analysis of phase transformations in pharmaceutical

Determination of figures of merit for near-infrared, raman and powder Xray diffraction by net analyte signal analysis for a compacted amorphous

compounds , Int. J. Pharm., 417, pp. 17 31.

17. K. Knop, P. Kleinebudde (2013),

pharmaceutical film coating applications , Int. J. Pharm., 457, pp. 527 536.

18. A. Kuriyama, Y. Ozaki (2014),

dispersion with spiked crystallinity , J. Pharm. Innov., 7, pp. 56 68.

PAT-tools for process control in

26. Peeters E, Tavares da Silva AF, Toiviainen M, Van Renterghem J,

Assessment of active pharmaceutical

Vercruysse J, Juuti M, et al (2016), Assessment and prediction of tablet

ingredient particle size in tablets by raman chemical imaging validated using

properties using transmission and backscattering Raman spectroscopy and

polystyrene microsphere size standards , AAPS Pharm. Sci. Tech., 15, pp.

375 387.

Asian J. Pharm. Sci., 11(4), pp. 547 58.

27. J. Rantanen, H. Wikström, F.E. Rhea, L.S. Taylor (2005),

19. K.S. Lee, K.-J. Kim, J. Ulrich (2014), In situ monitoring of cocrystallization of salicylic acid-

understanding of factors contributing to quantification of anhydrate/hydrate

-dipyridyl in solution using Raman spectrosco

powder mixtures , Appl. Spectrosc., 59, pp. 942 95.

Cryst. Growth Des., 14, pp. 2893 2899.

28.

N. Rodriguez-Hornedo, S.J. Nehm, K.F. Seefeldt, Y. Pagan-Torres, C.J.

20. S. H. Lee, J. H. Lee, S. Cho, S. H. Do and Y. A. Woo (

tallization of pharmaceutical molecular

determination of blending process for trimebutine tablets using principle Ar. Pharm. Res., 35(9), pp 1599

1607.

Mol. Pharmaceutics, 3, pp. 362 367.

29. P.Y. Sacré, P. Lebrun, P.-F. Chavez, C.D. Bleye, L. Netchacovitch, E. Rozet, R. Klinkenberg, B. Streel, P. Hubert, E. Ziemons (2014), A new criterion to

21. Y.S. Li, J.S. Church (2014), Raman spectroscopy in the analysis of food and pharmaceutical nanomaterials , J. Food Drug Anal., 22, pp. 29 48.

22. S.Y. Lin, W.-

Improved

-stage microscopy and

assess distributional homogeneity in hyperspectral images of solid pharmaceutical dosage fo

Anal. Chim. Acta, 818, pp. 7 14.

30. M. Savolainen, A. Heinz, C. Strachan, K.C. Gordon, J. Yliruusi, T. Rades, N.

thermal micro-Raman spectroscopy in the study of phase transformation of

Sandler (2007),

metoclopramide HCl monohydr

indomethacin using multivariate visualization , Eur. J. Pharm. Sci, 30, pp.

J. Raman Spectrosc., 43, pp. 1166

1170.

113 123.

23. P. Di Martino, P. Conflant, M. Drache, and J. Huvenne (1997)

31. N. Scoutaris, M.R. Alexander, P.R. Gellert, C.J. Roberts (2011), Inkjet J. Therm.

Anal., 48, pp. 447 458.

24. P. Di Martino, a. M. Guyot-Hermann, P. Conflant, M. Drache, and J. C. Guyot (1996),

Screening for differences in the amorphous state of

printing as a novel medicine formulation technique , J. Control. Release, 156, pp. 179 185.

32. C. Sudha and K. Srinivasan (2013)

new pure paracetamol for direct compression: The Int. J. Pharm., 128(1 2), pp. 1 8.

J. Cryst., 401, pp. 248 251.

33. M. de Veij, P. Vandenabeele, T. De Beer, J.P. Remon, L. Moens (2009), Reference database of Raman spectra of pharmaceutical excipients , J. Raman Spectrosc., 40, pp. 297 307.

34. M. Wirges, A. Funke, P. Serno, K. Knop, P. Kleinebudde (2013), Development and in line validation of a Process Analytical Technology to facilitate the scale up of coating processes , J. Pharm. Biomed. Anal., 78 7, pp. 57 64.

35. X. Zhu, T. Xu, Q. Lin, Y. Duan (2013), Technical development of Raman spectroscopy: from instrumental to advanced combined technologies , Appl.

Spectrosc. Rev., 49, pp. 64 82.

PH L C PH L C 1. Ph nhi u x tia X c a PARI và PARII. PH

L C 2. B ng s li

hu n luy n

l

t các th

c gi i thích b i các PC cho t ng lô m tr n.

PH L C 3. th Scores c a m t s lô hu n luy n t i các th m phút tr n th ), 15 (xanh lam), 20 (xanh l c).

PH L C 4. K t qu ng t ng v t ng th m tr n các lô hu n luy u là %.

PH L C 1 Ph nhi u x tia X c a PARI và PARII.

PH C L C 2 B ng s li l

t các th

c gi i thích b i các PC cho t ng lô hu n luy n m tr n.

2.1 Lô 5,09% PC-1

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

98,77

99,49

99,70

99,84

99,89

99,91

99,92

98,69

99,30

99,51

99,67

99,77

99,78

99,78

10

98,79

99,88

99,93

99,96

99,97

99,97

99,98

98,46

99,79

99,80

99,89

99,90

99,90

99,90

15

99,82

99,90

99,94

99,96

99,97

99,98

99,98

99,80

99,88

99,88

99,91

99,92

99,92

99,93

20

99,83

99,94

99,96

99,97

99,98

99,98

99,98

99,80

99,90

99,91

99,93

99,94

99,94

99,94

5

Hình 1: Ph XRD c a PARI và PARII. 2.2 Lô 10,05% PC-1

5

10

15

20

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

99,77

99,87

99,89

99,92

99,93

99,94

99,95

99,75

99,82

99,83

99,84

99,87

99,87

99,88

99,65

99,86

99,89

99,91

99,92

99,94

99,95

99,63

99,75

99,79

99,80

99,81

99,82

99,82

97,67

99,77

99,87

99,90

99,92

99,94

99,95

97,04

98,96

99,03

99,34

99,38

99,46

99,50

99,43

99,67

99,82

99,86

99,89

99,91

99,93

99,38

99,51

99,72

99,76

99,77

99,78

99,81

2.3 Lô 19,99%

2.6 Lô 60,11% PC-1

5

10

15

20

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

98,70

99,37

99,74

99,81

99,87

99,90

99,91

98,62

99,02

99,61

99,66

99,74

99,74

99,76

99,63

99,75

99,83

99,87

99,90

99,92

99,93

99,60

99,65

99,70

99,72

99,73

99,76

99,77

99,65

99,81

99,87

99,90

99,92

99,94

99,95

99,62

99,72

99,76

99,78

99,83

99,83

99,84

98,59

99,71

99,83

99,87

99,89

99,91

99,93

98,48

99,50

99,62

99,66

99,66

99,70

99,72

2.4 Lô 40,06%

10

15

20

98,83

PC-2 99,81

PC-3 99,92

PC-4 99,94

PC-5 99,95

PC-6

xác t 10

15

20

99,96

PC-7 99,97

98,69

99,76

99,88

99,90

99,91

99,91

99,91

99,67

99,85

99,91

99,94

99,95

99,96

99,97

99,64

99,80

99,87

99,87

99,89

99,90

99,90

97,94

98,93

99,73

99,89

99,94

99,96

99,97

97,82

97,96

99,04

99,29

99,36

99,37

99,40

96,34

98,91

99,60

99,73

99,78

99,82

99,84

83,53

93,09

98,07

98,90

98,96

99,00

99,00

2.5 Lô 49,85% PC-1

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

99,34

99,73

99,85

99,88

99,90

99,92

99,93

99,27

99,63

99,77

99,80

99,80

99,81

99,82

10

99,25

99,76

99,85

99,88

99,90

99,92

99,93

99,18

99,70

99,79

99,81

99,82

99,82

99,82

15

99,45

99,79

99,86

99,89

99,92

99,94

99,95

99,39

99,71

99,78

99,79

99,83

99,85

99,86

20

96,05

99,10

99,47

99,65

99,72

99,79

99,84

95,86

98,62

98,98

99,13

99,15

99,25

99,37

5

5

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

89,99

93,39

95,55

96,50

97,22

97,74

98,18

88,87

90,88

93,69

94,22

94,78

95,04

95,22

96,87

99,70

99,81

99,90

99,92

99,94

99,95

89,51

98,65

98,69

99,53

99,54

99,56

99,56

63,33

80,41

87,05

90,23

91,92

93,35

94,60

57,41

73,87

80,74

83,42

84,14

84,92

86,02

96,03

98,14

98,85

99,17

99,35

99,53

99,64

93,47

96,28

98,01

98,25

98,27

98,75

98,90

PC-1

PC-2

PC-3

PC-4

PC-5

PC-6

PC-7

2.7 Lô 79,88% PC-1

5

PC-1

5

10

15

20

72,03

82,78

90,87

93,62

95,27

96,46

97,24

66,67

71,76

84,75

87,02

88,03

89,31

89,90

93,15

95,46

97,36

98,43

98,83

99,17

99,36

88,24

89,25

91,28

93,73

93,97

94,30

94,71

77,25

88,58

92,86

94,34

95,50

96,56

97,29

73,99

84,12

88,71

89,31

89,59

90,95

91,59

93,66

98,05

98,80

99,09

99,30

99,45

99,54

92,86

97,14

97,99

98,26

98,43

98,56

98,62

PH L C 3 th Scores c a m t s lô hu n luy n t i các th m phút tr n th : 5 ), 15 (xanh lam), 20 (xanh l c).

PH L C 4 K t qu

ng t ng v luy n

t ng th ng và

m tr n u là %.

các lô hu n

4.1. Lô 5,09%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD

5 phút 2,86 4,03 3,94 2,72 0,37 3,09 7,84 28,09 2,68 1,09 1,89 4,28 0,21 -1,51 0,96 -0,49 27,93 1,69 1,31 3,74

10 phút -1,83 25,64 27,69 27,00 26,24 29,47 -3,46 25,94 26,60 28,17 -0,20 28,68 31,40 29,56 14,38 30,22 -0,99 17,81 28,53 29,46

15 phút 1,62 30,37 28,52 27,12 21,37 30,01 1,64 -7,82 25,31 19,23 32,40 -5,83 28,32 28,75 1,96 -0,65 31,14 25,42 2,18 3,79

20 phút 31,11 30,13 29,46 28,28 27,11 26,85 29,94 32,50 30,21 1,04 22,25 -1,03 -1,51 2,95 -20,75 1,42 30,84 32,33 26,08 26,60

4,84

21,02

16,24

19,29

8,18 169,17

12,29 58,47

14,47 89,12

15,81 81,94

5 phút 31,95 3,43 2,39 1,71 3,12

10 phút 4,84 2,94 32,56 4,89 29,47

15 phút 4,72 3,86 33,06 31,59 28,99

20 phút 31,56 31,56 24,65 28,72 32,11

4.2. Lô 10,05%

Hình 2

th Score c a lô 10,05% (A), 19,99% (B), 49,85% (C), 60,11% (D) và

79,88% (E).

1 2 3 4 5

6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD

4,50 6,49 3,78 29,14 32,49 3,66 4,90 31,53 33,08 28,65 31,48 29,11 20,83 27,94 28,97

33,04 15,88 6,19 34,46 6,76 33,04 33,24 33,09 30,41 5,44 3,51 6,38 30,67 28,32 30,86

31,68 31,02 9,98 4,53 -3,26 30,60 4,89 32,03 28,46 4,75 8,85 22,60 29,18 29,00 31,82

2,14 28,96 35,41 6,57 30,37 3,80 32,98 5,28 28,36 25,60 26,84 25,62 28,49 28,70 31,33

17,96

20,30

19,92

24,45

13,42 74,73

13,28 65,44

13,07 65,59

10,62 43,43

5 phút 14,06 6,26 21,25 6,47 36,29 15,90 15,44 12,61 13,52 14,12 11,08 32,82 16,68 20,36 36,20 14,98 16,34

10 phút 10,25 11,57 11,30 13,38 11,30 39,06 12,57 12,88 15,90 14,05 5,22 16,72 12,49 2,34 37,23 8,69 35,66

15 phút 35,36 13,97 36,62 12,88 37,11 35,16 17,68 18,08 12,08 23,15 11,28 37,14 15,13 14,17 11,03 14,74 13,72

20 phút 34,30 31,70 13,49 16,47 14,09 13,98 20,32 38,31 22,02 8,34 14,74 9,22 39,30 15,18 13,24 11,42 13,97

4.3. Lô 19,99%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17

18 19 20 Trung bình SD RSD

36,04 8,20 11,63

11,68 35,91 35,93

17,60 38,02 12,66

31,92 16,97 12,88

18,01

17,71

21,38

19,59

9,70 53,84

11,75 66,34

10,57 49,46

9,83 50,18

5 phút 44,64 40,70 37,95 44,11 28,48 48,41 42,81 44,92 55,25 43,21 35,45 32,80 36,60 45,80 30,67 36,27 23,66 34,89 32,21 40,41

10 phút 43,84 46,45 36,57 36,43 41,12 39,11 38,33 46,53 36,73 34,69 45,45 50,59 36,04 39,48 33,90 45,30 45,81 33,20 34,98 46,07

15 phút 31,12 44,46 45,46 43,25 53,81 30,37 51,37 43,16 51,39 44,99 45,37 41,78 46,62 45,62 31,93 40,93 34,20 40,39 44,91 35,77

20 phút 37,15 37,31 34,06 38,96 41,33 38,71 40,85 35,83 32,80 49,69 43,46 37,78 43,67 36,96 41,97 34,16 47,15 34,87 39,49 39,86

38,96

40,53

42,34

39,30

7,51 19,29

5,26 12,99

6,71 15,84

4,38 11,15

5 phút

10 phút

15 phút

20 phút

54,75 48,20

44,67 48,40

44,67 46,85

28,05 53,27

4.4. Lô 40,06%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD 4.5. Lô 49,85%

1 2

3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD

48,82 43,32 50,82 48,69 42,90 47,86 43,73 50,08 52,15 52,02 51,76 45,23 51,78 55,50 56,42 45,10 55,42 52,76

45,41 43,81 40,78 46,20 55,38 56,55 53,46 50,41 44,58 54,11 50,18 52,86 52,45 52,76 53,27 50,26 57,00 53,19

53,12 56,23 51,46 50,15 49,97 55,14 50,33 37,91 49,02 55,54 42,80 44,29 52,33 49,40 46,22 37,90 52,18 48,33

55,86 52,89 51,97 45,59 47,47 43,18 52,43 47,47 53,18 45,25 46,49 46,42 51,46 50,98 51,12 54,38 54,53 45,84

49,87

50,29

48,69

48,89

4,22 8,46

4,65 9,24

5,22 10,72

6,15 12,58

5 phút

10 phút

15 phút

20 phút

61,63 56,37 54,70 59,64 54,99 60,41 55,85 57,61 56,68 59,67 59,76 55,21 52,86 57,60

59,00 59,05 64,69 55,85 58,82 62,31 58,84 67,42 61,87 63,12 64,24 54,86 60,07 56,45

57,05 59,74 57,63 55,22 57,99 56,31 61,16 59,58 56,77 57,04 55,43 57,06 55,80 57,99

54,80 61,88 56,31 56,60 56,28 56,98 54,62 58,31 59,98 57,88 58,26 56,85 57,07 62,37

4.6. Lô 60,11%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD

61,57 60,94 58,14 50,85 55,76 49,88

-10,53 63,18 57,99 56,93 59,12 62,18

57,18 57,35 59,79 57,43 59,52 58,89

58,41 55,90 57,89 58,83 53,21 57,83

57,01

56,77

57,75

57,51

3,36 5,90

16,17 28,49

1,60 2,76

2,23 3,87

5 phút 84,26 81,91 76,77 82,57 85,80 84,80 83,64 83,64 73,76 76,30 79,89 82,40 83,10 78,50 78,50 82,09 81,39 82,05 81,89 84,58

10 phút 86,15 79,79 82,34 84,51 77,89 80,10 82,95 97,53 85,29 83,13 78,97 77,89 77,05 82,38 80,19 81,05 81,67 81,45 77,71 83,02

15 phút 81,18 80,79 80,51 80,05 79,52 77,27 81,65 81,01 80,68 76,55 83,71 80,43 83,25 83,01 78,29 84,31 78,77 80,72 81,69 81,47

20 phút 87,61 82,68 80,97 81,86 78,02 85,40 80,78 82,08 83,43 83,35 84,65 82,63 80,10 65,81 84,15 85,36 81,62 85,63 94,21 82,83

81,39

82,05

80,74

82,66

3,17 3,89

4,46 5,43

2,02 2,50

5,18 6,26

4.7. Lô 79,88%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Trung bình SD RSD