Nghiên cứu một số đặc tính hóa sinh của dịch chiết từ cây Giảo cổ lam

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Ư

Ạ

N

--------------

NG

NGHIÊN

NT

NG

T

T

Đ

TN

TT

SINH

G

(Gynostemma Pentaphyllum Thunb) N T T NG N NG N

N

– 2013

ĐẠ N

Ọ

TRƯỜNG ĐẠI HỌ

Ư

Ạ

N

--------------

NG

NG

NT

N N

T

NG

T

T

Đ

TN

N Đ ẠN

TT

G (Gynostemma Pentaphyllum Thunb)

N T T NG N NG N

N

– 2013

ĐẠ

Ọ

N NGƯỜ

Ư NG

THS.

T

N: NG

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CAM K T

Ơ

N

Tôi xin cam đoan rằng đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, có sự hỗ trợ từ Giáo viên hướng dẫn là Ths.

N

H

. Các nội dung nghiên cứu và kết quả

Y

trong đề tài này là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất cứ công trình

TP

tích, nhận xét, đánh giá được chính tác giả nghiên cứu có ghi trong nhật kí thí nghiệm

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

quan tổ chức khác được thể hiện trong phần tài liệu tham khảo.

Nếu phát hiện có bất kỳ sự gian lận nào tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước

TR ẦN

Hội đồng, cũng như kết quả luận văn của mình.

Tác giả

Nguyễ T

N

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

, ng y....tháng....năm 2013

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

sử dụng một số nghiên cứu, nhận xét, đánh giá cũng như số liệu của các tác giả, cơ

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

và bảng theo dõi thí nghiệm hàng ngày trong quá trình thực tập. Ngoài ra, đề tài còn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

nghiên cứu nào trước đây. Những số liệu trong các bảng, biểu phục vụ cho việc phân

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

ại học Sư phạm Hà Nội 2, tôi đã học hỏi

N

Qua thời gian học tập tại Trường

ƠN

Ơ

LỜI C

N

H

được rất nhiều kiến thức ch yên môn và kĩ năng thực hành.

TP

là người đã tận tình chỉ bảo cho tôi những kiến thức

chuyên môn, kỹ năng thực tế, mở mang và nâng cao kiến thức để tôi hoàn thành khoá

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

luận này một cách tốt nhất.

H Ư

Cùng với sự giúp đỡ tận tình của các anh chị m trong nhóm đề tài đã tạo điều

TR ẦN

kiện thuận lợi cho tôi có môi trường học tập và làm việc tốt.

Cuối cùng tôi xin được gửi lời biết ơn chân thành tới gia đình và bạn bè, những

10 00

B

người đã động viên giúp đỡ cho tôi trong quá trình thực hiện đề tài vừa qua.

Trong quá trình học tập và viết khoá luận, do thời gian thực hiện đề tài hạn chế

Ó

A

nên không tránh khỏi những sai sót. Vì vậy, tôi rất mong nhận được sự đóng góp của

, ngày....tháng....năm....

Sinh viên

Nguyễn T

N

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

các thầy cô giáo, bạn bè để giúp tôi hoàn thành tốt khoá luận này.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

biệt là Ths.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâ sắc đến Ban lãnh đạo khoa Sinh - KTNN, đặc

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

ể có được những kiến thức và kết quả như ngày hôm nay, trước tiên tôi xin

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC Đ

....................................................................................................................... 1 NT

. .................................................................... 3

N

T NG Q

Ơ

ƯƠNG

N

H

1.1. Giới thiệ về một số hợp chất tự nhiên ở thực vật ................................................ 3

U

Y

1.1.1. Hợp chất Phenolic ........................................................................................ 3

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

1.1.2.1. Cấu tạo hoá học và phân loại ............................................................... 5

H Ư

1.1.2.2. Hoạt tính sinh học của flavonoid ......................................................... 6

TR ẦN

1.1.3. Tannin .......................................................................................................... 8

B

1.1.3.1. Cấu trúc hóa học và phân loại.............................................................. 8

10 00

1.1.3.2. Tác dụng sinh học ................................................................................ 9

A

1.1.4. Alkaloid ........................................................................................................ 9

-H

Ó

1.1.4.1. Khái niệm và phân loại ........................................................................ 9

-L

Ý

1.1.4.2. Tác dụng sinh học .............................................................................. 10

ÁN

1.1.5. Glycosid trợ tim .......................................................................................... 11

TO

1.1.6. Saponin....................................................................................................... 11

ÀN

1.2. Vài nét chung về cây Giảo cổ lam. ...................................................................... 12

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

1.1.2. Flavonoid thực vật ....................................................................................... 5

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

1.1.1.2. Vai trò của hợp chất phenolic trong thực vật ...................................... 4

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ặc điểm và phân loại ......................................................................... 3

1.1.1.1.

Đ

1.2.1. Thực vật học, phân bố và sinh thái. ........................................................... 12

IỄ N

1.2.2. Thành phần hóa học. .................................................................................. 13

D

1.2.3. Một số tác dụng hóa sinh và công dụng của cây Giảo cổ lam. .................. 14 ƯƠNG 2.1.

Đ

TƯỢNG

ƯƠNG

Á NG

N

. ................... 15

ối tượng ............................................................................................................. 15

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

2.1.1. Mẫu thực vật .............................................................................................. 15 2.1.2. Hóa chất và dụng cụ thí nghiệm. ............................................................... 15

N

2.2. Phương pháp nghiên cứ ..................................................................................... 16

N

H

Ơ

2.2.1. Phương pháp tách chiết mẫu nghiên cứu ................................................... 16

U

Y

2.2.2. Phương pháp khảo sát thành phần hóa học của GCL (Gynostemma

ịnh tính một số nhóm hợp chất tự nhiên ......................................... 17

T

N. ........................................................ 23

3.1. Q y trình tách chiết các phân đoạn từ cây GCL (Gynostemma pentaphyllum

10 00

B

thunb)........................................................................................................................... 23 3.2. Kết q ả định tính một số hợp chất tự nhiên trong phân đoạn. ............................ 24

A

ịnh tính một số hợp chất tự nhiên có trong GCL. ................................... 25

Ó

3.2.1.

-H

3.2.2. Phân tích thành phần các hợp chất tự nhiên trong các phân đoạn dịch chiết từ

ịnh lượng polyphenol tổng số trong các phân đoạn dịch chiết theo

ÁN

3.2.3.

-L

Ý

cây GCL bằng sắc ký lớp mỏng............................................................................. 26

TO

phương pháp Folin - Ciocalteau.. ......................................................................... 28

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TQ

TR ẦN

ƯƠNG

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ciocalteau.........................................................................................................21

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

ịnh lượng pholyphenol tổng số th o phương pháp Folin-

N

2.2.2.3.

Đ ẠO

2.2.2.2. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) ............................................... 20

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

2.2.2.1.

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

pentaphyllum) ....................................................................................................... 17

D

IỄ N

Đ

ÀN

3.2.3.1. Kết quả xây dựng đường chuẩn acid gallic. ...................................... 28 3.2.3.2. Kết quả xác định hàm lượng polyphenol tổng số. ............................. 29

3.3. KẾT QUẢ XÁC ỊNH LIỀU ỘC CẤP ........................................................... 30 ƯƠNG

T

N

N NG

......................................................... 31

4.1. KẾT LUẬN ........................................................................................................... 31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

4.2. KIẾN NGHỊ .......................................................................................................... 31 T

............................................. Error! Bookmark not defined.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

T

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC B NG

Đ

N

Ẽ

NG

Ơ

N

Bảng 3.1. Bảng các phản ứng định tính đặc trưng ....................................................... 19

N

H

Bảng 3.2. Kết q ả định tính các phân đoạn dịch chiết Giảo cổ lam ............................ 25

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Bảng 3.4. ịnh lượng polyph nol tổng số các phân đoạn dịch chiết từ GCL. ............ 29

Hình 1.3.

TR ẦN

Hình 1.2. Flavan (2-phenyl chroman) ............................................................................ 5 tin trái và aponin phải) ........................................................................ 6

10 00

B

Hình 1.4. Cấ tạo Q rc tin trái , H sp ridin giữa , picat chin phải).................... 8 Hình 1. . Procyanidin trái và Q bracho phải) ......................................................... 9

A

orphin

giữa , Nicotin phải) ............................................. 10

Ó

Hình 1.6. Ca in trái ,

-H

Hình 1. . Cấ tạo của taxol ........................................................................................... 11

-L

Ý

Hình 1. . Hình thái của cây Giảo cổ lam ..................................................................... 12

ÁN

Hình 1.9. Q ả xanh và q ả chín của cây GCL ............................................................. 13

TO

Hình 2.1. Thân và lá của cây GCL ............................................................................... 15 ô hình chiết rút các phân đoạn hợp chất tự nhiên từ Giảo cổ lam ............ 23

Hình 3.2. ắc ký đồ các phân đoạn dịch chiết từ giảo cổ lam trong hệ d ng môi Tol n: thylac tat: Ac ton: Acid ocmic = :3:1:1 hiện mà bằng H2SO4 10%).... 27

D

IỄ N

Đ

ÀN

Hình 3.1.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Hình 1.1. Ph nol – thành viên đơn giản nhất của hợp chất Ph nolic ............................ 4

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ẽ

G

N

Đ ẠO

Bảng 3.5. Kết quả thử độc tính cấp th o đường uống...........................................30

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

Bảng 3.3. Kết q ả xây dựng đường ch ẩn acid gallic. ................................................ 28

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC CỤM T : ái tháo đường

N

T

VI T TẮT

: Béo phì

GCL

: Giảo cổ lam

LDL

: Chol st ron xấ

CoA

: Coenzym A

HDL-C

: High densitylipoprotein Cholesterol

HLA

: Kháng ng yên bạch cầ người

TEAF

: Toluen- ethylacetate- acetone- acid formic

LD50

: Medium letalisdosis (liề lượng gây chết trung bình)

POD

: Peroxidase

GOD

: Glucose oxidase

TLC

: Sắc ký lớp mỏng

Rf

: Hệ số lư

ÀN Đ IỄ N

N Y

: (streptozotocin) Sigma

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q TP Đ ẠO N H Ư

TR ẦN

A

Ó -H

Ý

-L ÁN

TO

STZ CHO

D

10 00

B

http://daykemquynhon.ucoz.com

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

H

Ơ

BP

: Cholesterol oxydase

CHE

: Choresterol esterase

AAP

: Amino-Antipirin

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

Đ ẠO

Y

Ơ

: Phân đoạn

CHCl3 : Cloroform

N

P

H

: Ethanol

N

EtOH

U

: Ethyl acetate

.Q

EtOAc

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

: Triglyceride

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

TG

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

M

Đ U

N

 Lý do chọ đề tài.

Ơ

Trong lịch sử Y học từ 1 0 năm trước công ng yên, con người đã biết dùng

N

H

cây cỏ để chữa bệnh như: mướp đắng, sinh địa, hoàng kỳ, huyền sâm, cỏ ngọt, chè

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

việc nghiên cứu khảo sát thành phần hóa học của các loài cây thuốc nhằm đặt cơ sở

bài thuốc cổ truyền ở nước ta, tôi nhận thấy cây Giảo cổ lam (GCL) mọc ở vùng núi

H Ư

TR ẦN

cao phía bắc (Lào Cai, Cao Bằng, Hà Giang, Hòa Bình , được đồng bào sử dụng nhiề trong đời sống hàng ngày làm thực phẩm, trà uống, thuốc chữa bệnh.

10 00

B

ây là một dược liệ đầu vị q ý được ghi trong sách cổ “Nông chính toàn thư hạch chú quyển hạ - năm 1639”. Từ xa xưa được sử dụng cho v a chúa để tăng sức

A

khỏe, kéo dài tuổi thọ và làm đẹp. Giảo cổ lam bắt đầ được nghiên cứu từ năm 19 6

-H

Ó

tại Nhật Bản, việc phát hiện ra cây là do tình cờ khi nghiên cứu một bộ lạc sống trên

Ý

núi cao có tuổi thọ bình quân là 98 tuổi mà ng yên nhân là do người dân nơi đó

-L

thường xuyên uống cây này. Một số nghiên cứu về GCL hiện nay được thực hiện

TO

ÁN

nhiều ở Trung Quốc, Mỹ, ức, Italia như [21]:

IỄ N

Đ

ÀN

- GS.Tan H., Liu Z.L. Liu MJ. Chứng minh GCL có tác dụng kìm hãm sự tích

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

Qua thời gian khảo sát và tham khảo kết hợp với việc nghiên cứu tài liệu về các

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

Đ ẠO

trọng q an tâm đặc biệt.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

khoa học cho việc sử dụng chúng một cách hợp lý, hiệu quả đang là vấn đề được chú

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

xanh, khoai lang,... Hiện nay trên thế giới nói ch ng cũng như ở Việt Nam nói riêng

tụ tiểu cầu, làm tan má đông, chống huyết khối, tăng cường lư thông má lên não.

- Lin, J.M., và cộng sự chứng minh GCL có tác dụng chống viêm gan, chứng cao huyết áp và chống

ng thư. Có tác dụng chống viêm mạnh hơn

Indomethacin.

1

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Wang C. Và cộng sự chứng minh GCL kìm hãm dự phát triển của khối u mạnh.

N

Viện dược liệ Tr ng ương và Viện Karolinski Thụy iển, Hội đái tháo đường

H

Ơ

Thụy iển về cây GCL Việt Nam đã tìm thấy một hoạt chất mới đặt tên là Phanosid.

Y

N

Chất này có tác dụng hạ đường huyết mạnh đồng thời kích thích tụy tăng tiết Insulin

Trên cơ sở tài liệu tham khảo, thông tin thu thập kết quả của những công trình

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

nghiên cứu trên cho thấy những tiềm năng của cây GCL. Do vậy chúng tôi tiến hành

H Ư

đề tài: “Nghiên cứu một số đặc tính hóa sinh của dịch chiết từ cây Giảo cổ lam

TR ẦN

(Gynostemma Pentaphyllum Thunb)”. Với hy vọng cây thuốc cổ truyền này sẽ giúp

 Mục đíc

10 00

ê cứu.

B

y học có một hướng đi mới cho q á trình điều trị bệnh T và chứng BP.

A

Nghiên cứu tách chiết, đặc tính hóa sinh của một số phân đoạn từ cây Giảo cổ

-H

Ó

lam (Gynostemma Pentaphyllum Thunb).

-L

Ý

 Nhi m vụ nghiên cứu. ịnh tính định lượng và tách một số phân đoạn dịch chiết chứa hoạt chất thiên

ÁN

-

Nghiên cứ đặc tính hóa sinh của các phân đoạn dịch chiết từ cây Giảo cổ lam.

D

IỄ N

Đ

ÀN

-

TO

nhiên từ cây Giảo cổ lam (Gynostemma Pentaphyllum Thunb).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

đường thông dụng [21].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

thích tạo ra Insulin mạnh gấp 5 lần hoạt chất Glibenclamide – thuốc chữa bệnh tiểu

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

và làm tăng sự nhạy cảm của tế bào đích với Insulin. Phanosid với liều 500µM kích

2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

ƯƠNG : T NG QUAN TÀI LI U.

N

Q á trình trao đổi chất của sinh vật bao gồm sự tạo thành hợp chất sơ cấp và hợp

H

Ơ

chất thứ cấp. Hợp chất sơ cấp là sản phẩm tạo thành từ q á trình đồng hóa và dị hóa, có

Y

N

vai trò quan trọng đối với cơ thể sống như các acid amin, các acid nucleic, cacbonhydrat,

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Các hợp chất thứ cấp không có chức năng trực tiếp trong các q á trình đồng hóa,

N

G

được dùng làm chất diệt côn trùng, diệt nấm, dược chất. Chúng được phân làm ba nhóm

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

chính ở thực vật: các terpen, các hợp chất phenolic và các hợp chất chứa nitrogen.

TR ẦN

Các nhà y học hiện nay đã và đang tách các hợp chất thứ cấp như: các hợp chất phenolic, flavonoid, alkaloid, tannin, terpen, coumarin ở thực vật... làm các dược liệu

B

điều trị và phòng tránh một số bệnh. Một số bệnh hiểm nghèo như: ng thư, đái tháo

10 00

đường, cao huyết áp, tai biến mạch máu não … cũng được nghiên cứ và điều trị bằng các hợp chất thứ cấp trên [2][10].

-H

Ó

A

1.1. Giới thi u về một số hợp chất tự nhiên ở thực vật 1.1.1. Hợp chất Phenolic

-L

Ý

1.1.1.1. Đặc đ ểm và phân loại

ÁN

Hợp chất phenolic là nhóm các chất khác nhau rất phổ biến trong thực vật. ặc

TO

điểm chung của chúng là trong phân tử có vòng thơm b nz n mang một, hai hay ba

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

chống lại các tác nhân gây bệnh. Trong đó nhiều chất thứ cấp có hoạt tính sinh học mạnh

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

hô hấp, vận chuyển, tăng trưởng và phát triển thực vật, mà chủ yếu là bảo vệ thực vật

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

lipid…

ÀN

nhóm hydroxyl (OH) gắn trực tiếp vào vòng benzen. Dựa vào thành phần và cấu trúc,

D

IỄ N

Đ

người ta chia hợp chất phenolic thành 3 nhóm [13], [15] - Nhóm hợp chất phenol c đơn g ản: trong phân tử chỉ có một vòng benzen và một vài nhóm hydroxyl. Tuỳ thuộc vào số lượng nhóm hydroxyl mà chúng được gọi là các monophenol (phenol), diphenol (pyrocatechin, hydroquinon, ...), triphenol (pyrogalol, oxyhydroquinol, ...).

3

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

U

Y

1.1. Phenol –

G

- Nhóm hợp chất phenol c đa vòng: là nhóm đa dạng nhất trong các hợp chất

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

phenol, có cấu trúc phức tạp do sự liên kết hoặc trùng hợp của các đơn phân. Ngoài

flavonoid, tannin và coumarin.

TR ẦN

gốc phenol còn có các nhóm phụ dị vòng mạch nhánh hoặc đa vòng. Nhóm này có

10 00

B

1.1.1.2. Vai trò của hợp chất phenolic trong thực vật Hợp chất ph nolic được hình thành từ những sản phẩm của q á trình đường

A

phân và con đường p ntos q a acid cynamic hay th o con đường acetate malonate

-H

Ó

qua Acetyl- CoA. Nhóm hợp chất này có một số chức năng trong đời sống thực vật

-L

Ý

[11].

ÁN

- Các hợp chất phenolic tham gia vào quá trình hô hấp như là một chất vận

ÀN

TO

chuyển hydro.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

nhóm này có acid cynamic, acid cumaric.

ại diện

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

chúng ngoài vòng thơm b nz n C6) chúng còn có dị vòng, mạch nhánh.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

- Nhóm hợp chất phenolic phức tạp: trong thành phần cấu trúc phân tử của

- Các polyphenol có thể hình thành liên kết hydro với các protein và enzyme làm

D

IỄ N

Đ

thay đổi hoạt động của các nzym này tương tự như hiệu ứng điều hòa dị lập thể.

- Tác dụng mạnh lên quá trình sinh trưởng, nó đóng vai trò là chất hoạt hoá IAA- oxydase và tham gia vào quá trình sinh tổng hợp enzyme này. Hợp chất phenol tác dụng như chất điều hoà các chất điều khiển sinh trưởng ở thực vật.

4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Hợp chất phenol có tính chất kháng khuẩn. Chúng có tác dụng rất lớn trong quá trình liền sẹo các vết thương cơ học của thực vật, đẩy quá trình tái sinh, chống

Ơ

N

bức xạ, tác nhân gây đột biến và chất chống oxi hóa [5], [8].

H

1.1.2. Flavonoid thực vật

Y

N

Trong số các polyphenol tự nhiên, flavonoid là nhóm chất quan trọng vì chúng phổ

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

tử cacbon, hai vòng benzene A và B nối với nhau qua dị vòng C, trong đó A kết hợp

8 9

A

1

2

C

10

10 00

6

O

B

7

TR ẦN

với C tạo khung chroman.

3'

B

1' 6'

4' 5'

4

-H

Ó

A

5

3

2'

1.2. Flavan (2-phenyl chroman)

-L

Ý

Tùy theo mức độ oxy hoá của vòng pyran, sự có mặt hay không có mặt của nối

ÁN

đôi giữa C2 và C3 và nhóm cacbonyl ở C4 mà có thể phân biệt flavonoid thành các

TO

nhóm phụ sau: flavon, flavonol, flavanon, chalcon và auron, antoxyanidin,

IỄ N

Đ

ÀN

leucoantoxyanidin, catechin, isoflavonoid, rotenoid, neoflavonoid.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Về cấu tạo hóa học, khung cacbon của flavonoid là C6 - C3 - C6, gồm 15 nguyên

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

1.1.2.1. Cấu tạo hoá học và phân loại

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

[1].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

.Q

U

biến ở hầu hết các loài thực vật và có nhiều hoạt tính sinh - dược học có giá trị [5],

Flavonoid tồn tại ở hai dạng: dạng tự do gọi là aglycon và dạng liên kết với

đường gọi là glycoside. Các glycoside khi bị thuỷ phân bằng acid hoặc enzyme sẽ giải phóng ra đường và aglycon tương ứng. Có 2 dạng glycoside là O-glycoside và Cglycosid . ối với O-glycoside phân tử đường liên kết với flavonoid thông qua nhóm

5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

hydroxyl như r tin; đối với C-glycoside, flavonoid liên kết với đường thông qua nguyên tử cacbon như saponin.

OH

Ơ

N

HO

N

H

OH

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

1.1.2.2. Hoạt tính sinh học của flavonoid

- Tác dụng chống oxy hoá (antioxydant): flavonoid có khả năng kìm hãm các

TR ẦN

quá trình oxy hoá dây chuyền sinh ra bởi gốc tự do hoạt động. Những flavonoid có các nhóm hydroxyl sắp xếp ở vị trí octo dễ dàng bị oxy hoá dưới tác dụng của các

10 00

B

enzyme polyphenoloxydase và peroxydase tạo thành dạng semiquinon hoặc quinon.

A

Polyphenoloxydase Flavonoid (dạng oxi hoá)

-H

Ó

O2 + Flavonoid (dạng khử)

(Semiquinon hoặc Quinon) Peroxydase

TO

ÁN

-L

Ý

(dạng Hydroquinon)

Flavonoid (dạng oxi hoá)

(dạng Hydroquinon)

(Semiquinon hoặc Quinon)

IỄ N

Đ

ÀN

H2O2 + Flavonoid (dạng khử )

+H2O

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

1.3. Rut

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

O

.Q

OH

U

O

Y

Glucose

O - Rhamnose - glucose

- Semiquinon hoặc quinon là những gốc tự do bền vững, chúng có thể nhận

điện tử và hydro từ chất cho khác nhau để trở lại dạng hydroquinon. Các chất này có khả năng phản ứng với các gốc tự do hoạt động sinh ra trong quá trình sinh lý và bệnh lý để tiêu diệt chúng.

6

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Flavonoid có khả năng điều hòa hoạt độ enzyme do khả năng liên kết với nhóm amin trong phân tử prot in, làm thay đổi cấu hình không gian của enzyme do

N

đó tạo hiệu ứng điều hòa dị lập thể.

H

Ơ

- Flavonoid có tính kháng khuẩn, kháng vir s, tăng khả năng đề kháng của cơ

Y

N

thể do kích thích lympho bào, tăng sản xuất interferon, ức chế hiện tượng thoát bọng

G

- Flavonoid có tác dụng chống ng thư do kìm hãm các nzym oxy hoá khử,

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

q á trình đường phân và hô hấp, kìm hãm phân bào, phá vỡ cân bằng trong các quá

TR ẦN

trình trao đổi chất của tế bào ng thư [5].

- Tác dụng giảm béo phì và lipid má

B

Theo kết quả nghiên cứu của các nhà khoa học Nhật cho thấy khi chuột béo phì

10 00

được điều trị bằng dịch chiết giàu flavonoid từ lá Bằng lăng Lagerstroemia specciosa

A

L.) thì có trọng lượng giảm đáng kể (~ 10% ). Thí nghiệm tương tự với flavonoid từ lá

-H

Ó

Kim ngân (Lonicera japonica Th nb. đối với chuột cống trắng uống chol st rol cũng cho thấy có tác dụng làm giảm các chỉ số cholesterol, triglycerid, LDL-c đồng thời

-L

Ý

tăng HDL-c [11]. Naringin (C17H32O4) và hesperidin (C28H34O15) là những flavonoid

ÁN

có hàm lượng cao trên họ cam chanh

tac a

đã được nhiều nhà nghiên cứu chiết

TO

xuất và thử tác dụng trên mô hình chuột béo phì cho kết quả tốt trong việc làm hạ các

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

mạch, giảm sức thấm của mao mạch.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

- Flavonoid có hoạt tính của vitamin PP, làm tăng tính bền và đàn hồi của thành

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

(digramilation).

D

IỄ N

Đ

ÀN

chỉ số lipid máu [7].

7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Tác dụng hạ gl cos h yết OH

OH

OH

H3OC

O

HO

O

O

OH

HO

OH

OH

Ơ

OH

),

), Epicatechin

ỗ trọng (Eucommia

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

là có tác dụng điều hòa glucose huyết như: q rc tin có trong

ulmoides Oliver.), Hesperidin và Naringin có trong các cây thuộc họ Rutaceae, ậu nành (Glycine max L.) [9], Myricetin có trong

TR ẦN

G nist in và Daidz in có trong

B

cây Vông vang (Abelmoschus moschatus) [9].

10 00

1.1.3. Tannin

A

1.1.3.1. Cấu trúc hóa học và phân loại

-H

Ó

Tannin là các hợp chất phenolic có trọng lượng phân tử cao có chứa các nhóm

Ý

hydroxyl và các nhóm chức khác như có khả năng tạo phức với protein và các phân tử

-L

lớn khác trong điều kiện môi trường đặc biệt. Tannin thường là các hợp chất vô định

ÁN

hình, có màu trắng, màu vàng nhạt hoặc gần như không mà , có hoạt tính quang học,

ÀN

TO

vị chát, dễ bị oxy hóa khi đ n nóng hay khi để ngoài ánh sáng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Một số lavonoid được tách chiết từ nguyên liệu thực vật đã được chứng minh

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

1

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

U

Y

OH

HO

OH

H

OH O

O

O O CH3

N

O HO

OH

HO

N

HO

OH

O

Tannin được cấu tạo dựa trên acid gallic và acid tanic. Tannin có 2 nhóm chính:

D

IỄ N

Đ

tannin thuỷ phân và tannin ngưng tụ [5], [12], [1].

- Tannin thuỷ phân: gồm có các tannin mà thành phần chính để tạo polymer thường là ester của acid gallic với gốc đường, các st r không mang đường của acid phenolcacbonic và ester của acid ellagovic với đường.

8

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Tannin ngưng tụ: là các oligomer hay polymer của các đơn vị flavonoid (flavan 3-ol) nối với các dây nối C - C không bị cắt khi thuỷ phân như cat chin,

N

epicatechin hoặc các chất tương tự. Tannin ngưng tụ có thể có từ 2 tới 0 hay hơn các

H

Ơ

đơn vị flavonoid.

U

Y

N

1.1.3.2. Tác dụng sinh học

TP

sinh vật gây bệnh và côn trùng ăn lá [21]. Trong y học, tannin được sử dụng làm

N OH

O

HO

OH OH

-H

Ó

A

OH

TR ẦN

OH OH

OH

H Ư

O

B

HO

10 00

http://daykemquynhon.ucoz.com

OH

-L

1.1.4. Alkaloid

)

Ý

1

TO

ÁN

1.1.4.1. Khái ni m và phân loại

ÀN

Alkaloid là một hợp chất hữ cơ có cấu tạo phức tạp có chứa nitơ, đa số có nhân

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

xoang, điều trị cao huyết áp và đột quỵ.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

thuốc cầm máu, chữa đi ngoài, ngộ độc kim loại nặng, chữa trĩ, viêm miệng, viêm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Tác dụng sinh học của tannin là chất bảo vệ cây trồng trước sự tấn công của vi

Đ

chứa nitơ dị vòng, có đặc tính kiềm (alka - có tính kiềm) do đó, nó là nhóm các hợp nhất một nguyên tử nitơ dưới dạng dị vòng.

D

IỄ N

chất không thuần khiết về mặt hoá học. Alkaloid trong mỗi phân tử của nó đều chứa ít

9

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Hiện nay, người ta đã tìm được khoảng gần 6000 alkaloid. Dựa vào cấu tạo vòng hydrocacbon và vị trí của các nhóm nitơ người ta chia các alkaloid thực vật thành 12

Ơ

N

nhóm.

H

Tính chất quan trọng nhất của các alkaloid là tính kiềm, tính chất này là do mạch

Y

N

cacbon chứa nitơ q yết định. Alkaloid có tính kiềm yếu, chúng kết hợp với kim loại

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

nhau. Về chức năng cũng như vai trò của nó đối với đời sống, q á trình tao đổi chất ở

TR ẦN

cây còn rất nhiều tranh luận. Song có thể nhận thấy Alkaloid được quan tâm với vai trò là một chất có tác dụng dược học và chất độc từ những năm trước công nguyên.

B

Alkaloid được sử dụng nhiều trong công nghiệp dược với đặc tính gây ảo giác

10 00

hay thuốc giảm đa đã được ứng dụng trong y tế như các hợp chất tinh khiết (ví dụ như

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

morphine, atropine, và quinine, cocain...) [23].

1.6.

), Mo

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Một loài thực vật duy nhất có thể chứa hơn 100 alkaloid khác nha và nồng độ khác

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

1.1.4.2. Tác dụng sinh học

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

phản ứng tạo màu với thuốc thử. [5], [12], [1]

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

.Q

U

nặng (Hg, Bi, Pb), Alkaloid phản ứng với một số thuốc thử: Phản ứng tạo kết tủa,

)

Mới đây là sự phát hiện ra taxol, hợp chất có hoạt tính sinh học, có tính chất kìm

hãm đã được áp dụng như một loại thuốc chống ng thư [1].

10

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

TP

1.1.5. Glycosid trợ tim

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

dạng glycosid hoà tan trong các dịch tế bào. Dưới tác dụng của enzym hay acid loãng, các glycosid bị thuỷ phân tạo thành các genin và các ose. Là glycosid nên chúng tan

TR ẦN

nhiề trong nước và cồn loãng, ít tan trong các dung môi không phân cực như t , dầu,

B

benzen...

10 00

Tác dụng của glycosid trợ tim là làm tăng sức co bóp của cơ tim, cả ở người lành lẫn người bệnh; làm tăng trương lực cơ tim: làm ngắn chiều dài của các sợi cơ tim đã bị

Ó

A

căng, giãn do vậy làm tăng trương lực cơ tim, giảm thể tích và kích thước tim; làm chậm

-H

nhịp tim: do vừa có tác dụng trên dây thần kinh phế vị, vừa làm giảm tính tự động của

-L

Ý

nút xoang; làm giảm dẫn truyền trong nhĩ, đặc biệt nút nhĩ thất; làm giảm tính kích thích

ÁN

của cơ tâm nhĩ, nhưng trái lại, làm tăng tính kích thích của cơ tâm thất; gây lợi tiểu nhẹ

TO

do giảm tái hấp thu natri ở ống lượn gần.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

với bệnh tim nhưng với liều cao chúng là các chất gây độc. Trong cây, chúng tồn tại ở

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Glycosid trợ tim là một nhóm glycosid có cấu trúc steroid, có tác dụng đặc hiệ đối

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

1

D

IỄ N

Đ

ÀN

1.1.6. Saponin aponin được dùng để chỉ nhóm glycosid có đặc tính chung là khi hoà tan vào nước

sẽ có tác dụng làm giảm sức căng bề mặt của dung dịch và tạo bọt. Dưới tác dụng của các enzym thực vật, vi khuẩn, hoặc acid loãng, saponin bị thuỷ phân thành genin (gọi là sapogenin) và phần glucid.

11

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Phần glucid gồm các ose phổ biến là D-glucose, D-galactose, L-mannose và Larabinose. Phần sapogenin gồm hai nhóm lớn là saponin triterpen và saponin steroid.

N

Trong đó, saponin st roid phân bố tập trung ở cây một lá mầm còn saponin triterpen

Ơ

phân bố rộng nhưng tập trung chủ yếu ở cây hai lá mầm. Về mặt hoạt tính sinh học,

N

H

saponin cung cấp nhiều loại thuốc quan trọng với một số tác dụng chính như sa : tác

1.2. Vài nét chung về cây Giảo cổ lam

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

1.2.1. Thực vật học, phân bố và sinh thái

H Ư

Giảo cổ lam hay còn gọi là dây lõa hùng, trường sinh thảo,

thất diệp đảm

TR ẦN

hoặc ngũ diệp sâm với danh pháp khoa học là Gynostemma pentaphyllum thuộc họ Bầu bí (Cucurbitaceae)

10 00

B

Nó là một loài cây thảo có thân mảnh, leo nhờ tua cuốn đơn ở nách lá. Cây đực và cây cái riêng biệt. Lá đơn xẻ chân vịt rất sâ trông như lá kép chân vịt. Cụm hoa hình

Ó

A

chùy mang nhiều hoa nhỏ màu trắng, các cánh hoa rời nhau xoè hình sao, bao phấn

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

dính thành đĩa, bầu có 3 vòi nhuỵ.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

cholesterol trong máu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

(có trong cam thảo, viễn chí); giảm đa nhức xương có trong ngư tất, cỏ xước), hạ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

dụng bổ, tăng cường sinh lực (saponin có trong họ nhân sâm); tác dụng long đờm, dịu ho

1.8. H

12

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Quả khô hình cầ , đường kính

– 9 mm, khi chín mà đ n, hạt 2-3, tr o, to 4mm. a

Nam, Nam Tr ng Q ốc, Bắc Triề Tiên, Nhật Bản. Ở Việt Nam đã được trồng ở a

B

Pa và Hòa Bình, Hà Giang, Cao Bằng [20].

10 00

GCL là cây th ốc đã được dùng th o y học cổ tr yền Tr ng Q ốc. Người Tr ng

A

Q ốc từ lâ x m cây này như th ốc trường sinh, bởi lẽ người dân ở tỉnh Quý

-H

Ó

Châu ống trà GCL thường x yên thì sống rất thọ. Cây này còn được gọi là nhân sâm phương Nam hay nhân sâm

lá, mặc dù thực tế loài này không có họ hàng gì với

-L

Ý

nhân sâm đích thực. Cây này cũng được dùng ở Nhật Bản với tên amachaz r , ở Hàn

ÁN

Q ốc với tên gọi d ngk lcha và nhiề nước khác.

TO

Ở Việt Nam, vào năm 1997 giáo sư Phạm Thanh Kỳ

ại học Dược Hà nội đã

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

Cây mọc ở độ cao 200 - 2.000 m, trong các rừng thưa và ẩm, ở các vùng Bắc Việt

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

Hình 1.9. Qu xanh và qu chín c a cây GCL

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

hoa vào tháng - , th q ả tháng 9-10.

D

IỄ N

Đ

ÀN

phát hiện cây thất diệp đảm trên núi Phan Xi Păng và được giáo sư Vũ Văn Ch yên ại học Dược Hà nội xác định đúng là loại Gynostemma pentaphyllum. Ngoài ra,

thất diệp đảm còn được tìm thấy ở một số địa phương th ộc vùng đồi núi phía Bắc.

1.2.2. Thành phần hóa học Thành phần hóa học chính của GCL là flavonoit và saponin. Số sapoin của GCL nhiều gấp 3 - 4 lần so với nhân sâm. Trong đó, một số có cấu trúc hoá học giống 13

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

như cấu trúc có trong nhân sâm (ginsenozit). Ngoài ra GCL còn chứa các vitamin và các chất khoáng như selen, kẽm, sắt, mangan, phốtpho...

( ử rê

ườ )[20]:

Ơ

lâm sà

Y

H Ư



Tác dụng giảm mỡ má : Giảo cổ lam làm hạ mỡ trong má tới 20%, đặc biệt làm giảm LDL Chol st rol xấ



22%.

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

của các bệnh nhân giảm từ 113, 6 x ống còn 9 ,868.

Tác dụng bảo vệ gan: 100 bệnh nhân bị viêm gan B dùng GCL trong hai tháng



10 00

B

đã cải thiện rõ rệt tình trạng bệnh.

Các triệ chứng cơ năng khác:

a đầ , thiế má não, đa tức ngực, choáng

-H

Ó

A

ngất, mệt mỏi đề được cải thiện rất tốt.

Làm hạ mỡ má , nhất là giảm chol st rol toàn phần, ngăn ngừa xơ vữa mạch

ÁN



-L

Ý

Công dụng:

TO

má , chống h yết khối và bình ổn h yết áp, phòng ngừa các biến chứng tim mạch, não.

ÀN Đ IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Tác dụng trên h yết áp: sa hai tháng điề trị bằng GCL, h yết áp tr ng bình

G



MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Quercetin (1,8) và Phylamin (1,7).

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Tác dụng tăng lực: GCL làm tăng lực co cơ tới 11,112kg, cao hơn hẳn

TP



Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

còn 23,12.



D

Tác dụng giảm cân: a hai tháng dùng GCL chỉ số B I giảm từ 2 ,04 x ống

U



N

H

Tác dụ

N

1.2.3. Một số tác dụng hóa sinh và công dụng của cây Giảo cổ lam

Chống lão hoá, giảm căng thẳng mệt mỏi, giúp tăng lực mạnh, tăng khả năng làm việc.



Tăng cường hệ miễn dịch, ngăn ngừa sự hình thành và phát triển của khối .



Giúp dễ ngủ và ngủ sâ giấc, tăng cường má lên não, ngăn ngừa chứng lú lẫn ở người già.



Tăng cường chức năng giải độc của gan.

14

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

ƯƠNG 2: Đ

TƯỢNG

ƯƠNG

Á NG

N

U.

2.1. Đố ượng

Ơ

N

2.1.1. Mẫu thực vật

H

Mẫu cây GCL (Gynostemma pentaphyllum thunb) thuộc họ Bầu bí

U

Y

N

(Cucurbitaceae) được phòng thực vật học của Viện sinh thái Việt Nam giám định.

Hình 2.1. Thân và lá c a cây GCL

2.1.2. Hóa chất và dụng cụ thí nghi m

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

340C sa đó nghiền thành bột mịn (hình 2.1).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

tháng 3 năm 2011 tại huyện Xín Mần- Hà Giang, rửa sạch và tiến hành sấy khô ở

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Mẫu nghiên cứu là cây GCL (Gynostemma pentaphyllum thunb) được thu hái vào

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

ịa điểm thu mẫu: xã Quảng Nguyên, huyện Xín Mần, tỉnh Hà Giang.

 Hóa chất: - STZ (streptozotocin) Sigma, ST. Louse.

15

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Silicagel 60 (0,04- 0,063 mm) Merck.

- Các loại d ng môi hữ

cơ như m thanol, ethanol, n-hexan, chloroform, rck, ...

Ơ

mại q ốc tế có y tín: Prolabo, igma,

N

ethylacetat, toluen, aceton,... là các hóa chất tinh khiết được m a của các hãng thương

N

H

 Dụng cụ:

N

áy li tâm pp ndor , li tâm lạnh.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

-

G

- Máy cô quay chân không RE 400 Yamato, Japan.

- Máy xét nghiệm tự động các chỉ số sinh hóa OLYMPUS AU 640, Nhật. áy đo đường huyết tự động OneTouch Ultra và que thử, Mỹ.

TR ẦN

-

- Micropipet và các dụng cụ đo đếm khác.

10 00

B

- Cân kĩ th ật G 612, ức.

- Máy quang phổ UV - VIS 1000.

A

ột số máy móc cần thiết khác như: volt x, máy ly tâm, máy kh ấy từ, bếp

Ó

-

2.2.1.

p áp

ươ

Ý

ươ

ê cứ

p áp ác c ết mẫu nghiên cứu

-L

2.2.

-H

điện.

ÁN

Từ 3000g Giảo cổ lam (Gynostemma pentaphyllum) sấy khô được ngâm chiết

TO

với ethanol 90% ở nhiệt độ phòng 22oC trong vòng 4 ngày q á trình được lặp lại 3

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

- Bình chiết 30 lít.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

- Phễ chiết, phễ lọc, giấy lọc ….

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q

m rt, ức.

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

- Tủ sấy

Y

- Bộ máy oxhl t chiết mẫ của ức

ÀN

lần). Gộp các dịch chiết lại, lọc qua giấy lọc 3 lần và cất lại d ng môi dưới áp suất

D

IỄ N

Đ

giảm bằng máy cất q ay chân không th được cao tổng số ethanol được hòa tan trong nước nóng và chiết lần lượt với các dung môi n-hexan, chloroform, ethylacetate cất d ng môi dưới áp suất giảm th được các cao phân đoạn dịch chiết tương ứng.

16

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

2.2.2.

ươ

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

p áp k ảo sát thành phần hóa học của GCL (Gynostemma

pentaphyllum)

N

2.2.2.1. Định tính một số nhóm hợp chất tự nhiên

H

Ơ

Cao các phân đoạn được hòa tan trong dung môi thích hợp với từng loại phản

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

 Đ nh tính flavonoid

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

dung dịch mẫu vào 2 ống nghiệm: một ống đối chứng, ống kia thêm vài mảnh Mg và

TR ẦN

hiện màu hồng, đỏ hay da cam.

H Ư

đ n trên nồi cách thủy trong vài phút. Phản ứng dương tính khi trong ống nghiệm xuất

- Phản ứng diazo hóa: Cho dung dịch mẫu vào 2 ống nghiệm: Một ống đối

10 00

B

chứng, ống kia nhỏ thêm vài giọt thuốc thử diazo. Phản ứng cho kết quả dương tính

A

khi trong ống nghiệm xuất hiện màu da cam.

Ó

- Phản ứng với acid sunfuric: Cho dung dịch mẫu vào 2 ống nghiệm: Một ống

-H

đối chứng, ống kia thêm vài giọt acid s n ric đặc. Phản ứng cho mà vàng đậm cho

-L

Ý

thấy sự có mặt của lavon và lavonol, mà đỏ hay nâu cho thấy sự có mặt của

ÁN

chalcon và auron.

TO

- Phản ứng định tính catechin: Nhỏ một giọt dung dịch mẫu lên giấy lọc, nhỏ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- Phản ứng Shinoda: Cho thêm vài giọt acid chlohidric vào dung dịch mẫu. Cho

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Mẫu thử được pha trong ethanol với một lượng thích hợp.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

N

ứng định tính [1].

ÀN

tiếp lên một giọt dung dịch vanilin trong HCl đặc. Kết quả cho mà đỏ son là phản

 Đ nh tính tannin

D

IỄ N

Đ

ứng dương tính.

Mẫu thử cũng được pha như trên và làm các phản ứng:

17

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

- Phản ứng với vanilin: Chia dung dịch mẫu vào 2 ống nghiệm: Một ống đối chứng, ống kia thêm vài giọt thuốc thử vanilin/H2SO4. Phản ứng dương tính khi th

N

được mà đỏ đậm.

H

Ơ

- Phản ứng với gelatin/NaCl: Cho vài giọt thuốc thử vào dung dịch mẫu, phản

U

Y

N

ứng dương tính khi trong d ng dịch xuất hiện vẩn đục.

H Ư

dung dịch mẫu vào 2 ống nghiệm: Một ống đối chứng, ống kia thêm vài giọt NaOH

TR ẦN

10%. Phản ứng dương tính khi x ất hiện màu vàng, vàng cam.

- Phản ứng với FeCl3: Nhỏ dung dịch FeCl3 trong HCl 0,5N vào ống nghiệm

10 00

B

đựng mẫu thử được pha loãng bằng ethanol 96%. Phản ứng có kết quả dương tính khi

-H

Ó

 Đ nh tính glycoside

A

dung dịch có màu lục, tía, lam, xanh đ n hay đen.

-L

Ý

Phản ứng Keller-Killian:

ÁN

- Thuốc thử Keller-Killian:

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Dung dịch A: Thêm 0,5 ml dung dịch FeCl3 5% vào 50 ml acid acetic 10%.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

- Phản ứng với dung dịch kiềm: Dung dịch mẫu thử được pha như trên. Chia

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

 Đ nh tính các polyphenol khác

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

dịch mẫu, phản ứng dương tính khi x ất hiện kết tủa.

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

- Phản ứng với acetate chì: Cho vài giọt dung dịch acetate chì 10% vào dung

Dung dịch B: Thêm 0,5 ml dung dịch FeCl3 % vào 0 ml acid s n ric đặc.

- Cho cặn dịch chiết vào ống nghiệm. Thêm 1ml dung dịch A lắc cho tan hết,

nghiêng ống nghiệm từ từ cho dung dịch B vào. Phản ứng dương tính khi x ất hiện vòng nâ đỏ giữa 2 lớp chất lỏng.

18

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

 Đ nh tính alkaloid Mẫu thử được pha trong dung dịch acid acetic 2% với một lượng thích hợp để

Ơ

N

làm các phản ứng.

N

H

- Phản ứng với thuốc thử Dragendroff (hỗn hợp Bi(NO3)3) và KI trong dung

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

0,1N pH=1 . a đó cho vào mỗi ống 5ml dịch chiết mẫu thử, lắc mạnh hai ống. Nếu

H Ư

thấy có nhiều bọt và bền vững ở môi trường kiềm (ống 1) thì cho thấy sự có mặt của

TR ẦN

saponin steroid, môi trường acid (ống 2) là saponin tritecpen.

đ

í

10 00

Bảng 3.1. Bảng các phản ứ

B

Các nhóm phản ứng được trình bày tóm tắt trong bảng 3.1

-H

Ó

A

Nhóm hợp Thuốc Phản ứng chất thử

Mg/HCl

TO

ÁN

-L

Ý

Shinoda

D

IỄ N

Đ

ÀN

Flavonoid

Diazo hoá Diazo Dung dịch NaOH kiềm 10% Acid sulfuric

H2SO4 10%

Vanilin/HCl Tannin

Vanilin/H2SO4

đặc rư Dấu hi u nhận biết à đỏ, hồng, da cam xuất hiện chứng tỏ sự có mặt của flavon, flavonol và các dẫn xuất hydro của chúng.

Phản ứng cho mà da cam là dương tính.

Phản ứng có kết quả dương tính khi x ất hiện màu vàng cam.

Phản ứng cho mầ vàng đậm cho thấy sự có mặt của favon và flavonol, mầ đỏ hay nâu cho thấy sự có mặt của chalcon và auron. à đỏ son xuất hiện chứng tỏ sự có mặt của catechin.

Phản ứng dương tính nếu xuất hiện màu đỏ đậm.

19

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2 ống: Ống 1 cho 5ml dung dịch NaOH 0,5N (pH=13), ống 2 cho 5ml dung dịch HCl

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

- Phản ứng tạo bọt: Mẫu thử đã pha như ở trên. Chia dung dịch nhận được vào

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U TP

.Q

 Đ nh tính saponin

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Y

dịch acid acetic): Alkaloid phản ứng cho mà vàng da cam đến đỏ.

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

H

N

Y

A

Ó

Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC)

-H

2.2.2.2.

Sắc ký lớp mỏng (TLC - thin lay r chromatography là kĩ th ật sắc ký khá nhanh

-L

Ý

gọn và tiện lợi. Nó giúp nhận biết các nhóm chất có trong mẫu nghiên cứ . Phương pháp

ÁN

sắc ký lớp mỏng, thành phần trong hỗn hợp được xác định nhờ so sách hệ số lư của hỗn

ÀN

TO

hợp (Rf) và hệ số lư của một số chất đã biết [1].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

N

FeCl3/HCl

TR ẦN

Dung dịch kiềm

10 00

Polyphenol khác

Keller-Killian

B

http://daykemquynhon.ucoz.com

Glycoside

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Phản ứng dương tính nếu có kết tủa màu da cam.

Phản ứng dương tính nếu xuất hiện vòng đỏ nâu ở bề mặt phân cách giữa hai lớp chất lỏng.

Phản ứng dương tính nếu xuất hiện màu vàng.

Phản ứng dương tính nếu xuất hiện màu lục, xanh, đ n.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Phản ứng dương tính nếu có kết tủa màu trắng hoặc vàng nhạt.

G

Dragendorf

đỏ

.Q

Vans Mayer

có mà

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Alkaloid

Phản ứng dương tính nế thẫm.

Đ ẠO

Hỗn hợp KI + I2 /HCl Hỗn hợp HgCl2+ KI

Bouchard at

Ơ

N

Dung dịch 5% Phản ứng dương tính nếu xuất hiện kết Gelatin/1% NaCl tủa.

Phản ứng dương tính nếu kết tủa xuất Acetate chì 10% hiện.

Nguyên tắc: Kĩ th ật này dựa vào mức độ tương tác của các chất khác nhau

D

IỄ N

Đ

với pha tĩnh bản mỏng và pha động (hệ dung môi chạy sắc ký . Pha tĩnh có thể là silicagel, bột Al2O3 hoặc polyamid .... Pha động là một hỗn hợp từ hai dung môi trở lên với các độ phân cực khác nhau tuỳ thuộc vào mẫu phân tích. ươ

p áp Các mẫ

đã pha trong d ng môi thích hợp được tiến hành

chạy sắc ký trên bản mỏng tráng sẵn DC-Alufolien 60 F254 (Merck 1,05715) kích 20

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

thước phù hợp trên các hệ d ng môi khác nha để lựa chọn ra hệ dung môi phù hợp nhất. Một số hệ d ng môi được sử dụng:

Ơ

N

- Hệ d ng môi được sử dụng: TEAF: 5:3:1:1 (Toluen- ethylacetate- acetone- acid

H

formic).

Y

N

- Toluen: ethylacetate: Acid formic = 5:4:1.

theo công thức: Rf = a/b. Trong đó a là khoảng di chuyển của chất

H Ư

 Nguyên tắc: Dựa trên phản ứng của các hợp chất polyphenol (trong mẫu) với thuốc

TR ẦN

thử Folin-Ciocalteau cho sản phẩm màu xanh lam. So màu trên máy quang phổ UV ác bước tiế

à

ưs

10 00



B

VIS 1000 ở bước sóng λ = 6 nm, dùng chất chuẩn là acid gallic [1].

A

Chuẩn bị mẫu định lượng và hóa chất

-H

Ó

Dung dịch acid gallic: 0,5 g acid gallic + 10 ml C2H5OH + 90 ml H2O bảo quản

-L

Ý

lạnh. Như vậy dịch chuẩn gốc acid gallic có nồng độ 5mg/ml.

ÁN

Dung dịch Na2CO3: 200g Na2CO3 + 800 ml H2O đ n sôi. Thêm một vài tinh

TO

thể Na2CO3, sau 24 giờ đ m lọc và dẫn nước cất tới 1000 ml.

ÀN

Dung dịch mẫu cần định lượng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Định lượng pholyphenol tổng số theo phương pháp Folin- Ciocalteau

N

http://daykemquynhon.ucoz.com

2.2.2.3.

G

nghiên cứu, b là khoảng di chuyển của dung môi.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

f)

TP

hệ số lư

Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Hiện màu bằng dung dịch H2SO4 10% được phun đều trên bản mỏng. Xác định

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

- tylax tat: acid ocmic: Nước = 8:1:1.

D

IỄ N

Đ

Tiến hành xây dựng đường chuẩn acid gallic Chuẩn bị ống định lượng theo số lượng dung dịch gốc như sa : 0, 1, 2, 3,

và

10 ml sa đó dẫn nước cất tới 100 ml ta th được các nồng độ 0, 50, 100, 150, 250 và 500 mg/l acid gallic.

21

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Cho vào mỗi cuvert 20µl mẫu thử (dung dịch gallic chuẩn ở các nồng độ hoặc dịch chiết các phân đoạn) + 1,58ml H2O + 100 µl thuốc thử Folin- Ciocalteau sau 30

N

giây đến 8 phút cho thêm 300µl Na2CO3. ể hỗn hợp dung dịch phản ứng trong 2 giờ

Ơ

ở 20oC rồi xác định ở bước sóng 765nm. Tiến hành định lượng acid gallic để dựng

N Y

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

chất tự nhiên từ các phân đoạn dịch chiết th được.

ịnh tính một số nhóm hợp

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

lượng tương tự như đã làm với mẫu chuẩn acid gallic.

.Q

U

lượng phenolic của mẫu nghiên cứu bằng cách lấy 20µl 0,02ml để định

TP

 Đ

H

đường chuẩn.

22

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

ƯƠNG 3: K T QU VÀ TH O LU N. 3.1. Quy trình tách chiế các p â đoạn từ cây GCL (Gynostemma pentaphyllum

N

thunb)

Ơ

ể tìm hiểu thành phần hóa học của GCL, chúng tôi tiến hành chiết như đã mô tả

N

H

ở phần phương pháp th được cao ethanol. Phân bố đề cao thanol trong nước cất,

Chiết ethanol 3 lần

(40 g) khố lượng cao ethanol

ước,n –hexan

38 63

10 00

B

Loại dung môi

Bổ s

TR ẦN

H Ư

Để lại 20% là

tổng số

G N

http://daykemquynhon.ucoz.com

200 g Cao ethanol tổng số

Đ

-H

Ó

A

n -hexan Đ c loroform

ÁN

-L

Ý

08

Đ

Bổ sung chloroform

Loại dung môi Phần còn lại (bã)

Bổ sung ethylacetate

Loại dung môi

ethylacetate 64.8

Đ

ước

Hình 3.1. Mô hình chiế rú các p â đoạn hợp chất tự nhiên từ Giảo cổ lam

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

66

Phần còn lại (bã)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

3000g Giảo cổ lam

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

chloroform và ethylacetat. Kết quả được trình bày trên sơ đồ 3.1 và bảng 3.1.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

sa đó chiết phân lớp lần lượt với các d ng môi có độ phân cực tăng dần: n- hexan,

23

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Với quy trình chiết rút như trên, chúng tôi th được hiệu suất chiết rút các phân

Ơ H

Y

đối (g)

160

30

18,75

Cao n – hexan

38,63

2,23

Cao chloroform

10,08

0,32

Cao ethylacetate

26,6

0,9

Cao P nước

64,8

H Ư

7,1

2,96 3,37 10,96

A

10 00

B

* % Tính theo nguyên liệu khô ban đầu

-H

Ó

Hiệu suất chiết rút cao nhất là ở phân đoạn cao ethanol (18,75%) so với khối

Ý

lượng nguyên liệ khô ban đầu là 40g, tiếp đến là cao phân đoạn nước (10,96 %), cao

-L

phân đoạn n-h xan

,

% , cao phân đoạn ethylacetate là (3,37%), và thấp nhất cao

ÁN

phân đoạn chloroform (2,96%). Kết quả này cho thấy trong GCL có chứa một lượng

ÀN

TO

lớn các hợp chất tự nhiên.

Đ IỄ N

ê

ro

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

5,77

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Cao ethanol

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

(% nguyên li u khô)*

.Q

tuy

3.2. Kết quả đ nh tính một số hợp chất tự

D

N

Hi u suất chiết rút

Đ ẠO

đầu (g)

Khối khô

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

â đoạn

n từ Gi o c lam

G

Mẫu ban

ú

N

B ng 3.1. Hiệu su t chiế

N

đoạn hợp chất tự nhiên từ 3000 gam bột mịn GCL như bảng 3.1.

p â đoạn

Nhằm góp phần đánh giá thành phần các hợp chất tự nhiên cơ bản có trong cao

các phân đoạn từ dịch chiết GCL, chúng tôi tiến hành các phản ứng định tính, định lượng và sắc ký lớp mỏng.

24

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.1. Đ nh tính một số hợp chất tự nhiên có trong GCL Sử dụng các thuốc thử đặc trưng cho từng nhóm hợp chất tự nhiên, chúng tôi

Ơ

các p â đoạn d ch chiết Giảo cổ lam

H

Diazo

+

+

-

++

-

H2SO4 đặc

++

++

H Ư

-

++

+

Vanilin/HCl đ

+

+

+

-

-

Vanilin

++

++

++

++

+++

Gelatin/NaCl

++

+

+

++

+

Acetat chì

+

+

+

++

++

++

+

+

+

-

FeCl3 5%

++

++

+

++

+

Keller-killian

+++

++

+

++

++

Saponin

Tạo bọt

+++

+++

+++

+++

++

Mayer

+

-

-

+

-

Dragendroff

++

+

+

++

+

Bouchardat

+

-

-

+

-

-L

ÀN

ÁN

Glycoside

Alkaloid

N TR ẦN

10 00

A

-H

NaOH 10%

Ý

Polyphenol khác

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

+

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

.Q

TP ++

G

+++

B

ước

Ó

EtOAc

đ

+++

Tannin

Đ

Cao

+++

Catechin

IỄ N

Cao Cao Cao ethanol n-hexan CHCl 3

Shinoda Flavonoid

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

Thuốc thử

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Nhóm chất

Y

Mẫu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

í

N

Bảng 3.2. Kết quả đ

N

th được kết quả trình bày trong bảng 3.2.

Ghi chú: (+): Các mức phản ứng dương tính, (-): Phản ứng âm tính; Mức đ phản ứng được thể hiện bằng số dấu c ng 25

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả định tính cho thấy rằng, thành phần các hợp chất trong Giảo cổ lam khá phong phú, có đầy đủ các nhóm hợp chất tự nhiên phổ biến như lavonoid,

N

Saponin, Tannin, Glycosid . Trong đó:

H

Ơ

Ở phân đoạn cao Ethanol, n-Hecxan, thylac tat , phân đoạn nước hầu hết

Y

N

các phản ứng với các nhóm chất đề là dương tính. Trong khi đó, ở phân đoạn cao

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

alkaloid và tannin (Vanilin).

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ở phân đoạn cao chloroform có chứa tương đối đầy các chất trừ các chất với

TR ẦN

phản ứng Diazo, H2SO4, Mayer, Bouchardat. Trong đó các chất thấy với hàm lượng nhiều là flavonoid, polyphenol, saponin; các chất còn lại có nhưng với hàm lượng ít.

10 00

B

Ở phân đoạn cao ethylacetate thấy có hầu hết các chất với hàm lượng cao trừ Catechin không có.

Ó

A

Ở phân đoạn nước chứa nhiều tannin (Vanilin), Glycoside, saponin; không

-H

thấy xuất hiện catechin Diazo, Vanilin/HCl đ , NaOH 10%, Mayer, Bouchardat.

-L

Ý

Từ bảng 3.2 ta thấy ở phân đoạn cao cồn tổng số, phân đoạn cao etylacetate và

ÁN

cao nước chứa rất nhiều saponin và flavonoid và mức phản ứng mạnh và rất mạnh,

TO

chứng tỏ là hợp chất có hoạt tính sinh học cao, có khả năng chống oxy hóa, kháng

ÀN

khuẩn, chống viêm, chống sự tăng sinh tế bào không kiểm soát. Kết quả định tính này

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

các chất còn lại đều có mặt với lượng tương đối trừ Bouchardat, Mayer không có mặt.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Ở phân đoạn cao n-Hexan thấy có mặt nhiều Flavonoid, Saponin, Glycoside,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

cồn tổng số hầ như có chứa các nhóm chất Saponin, flavonoid, catechin, glycoside,

D

IỄ N

Đ

giúp chúng tôi có những định hướng để tiếp tục nghiên cứu ở mức độ cao hơn.

3.2.2. Phân tích thành phần các hợp chất tự

ê

ro

các p â đoạn d ch chiết

từ cây GCL bằng sắc ký lớp mỏng Chúng tôi đã tiến hành chạy sắc ký bản mỏng tráng sẵn silicagel Merck Alufolien 60 F254 với nhiều hệ d ng môi khác nha . Q a thăm dò cho thấy hệ dung môi TEAF 26

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

(5:3:1:1) (Toluen-Ethylacetate-Acetone-acid Formic). Dùng chất hiện màu là H2SO4 10%, sấy khô trên bếp điện từ đến khi hiện màu là cho kết quả rõ nét nhất và được

N

chúng tôi lựa chọn. Kết quả sắc ký đồ hình 3.2 cho thấy bản sắc ký xuất hiện nhiề băng

N

H

Ơ

vạch có màu sắc khác nhau.

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

1. Cao phân đoạn cồn tổng số

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

4. Cao phân đoạn ethylacetate

2

3

4

5

B

1

TR ẦN

. Cao phân đoạn nước

10 00

Hình 3.2. Sắc ký đ các p â đoạn d ch chiết từ giảo cổ lam trong h dung môi

A

Toluen: Ethylacetat: Aceton: Acid focmic = 5:3:1:1 (hi n màu bằng H2SO4 10%).

-H

Ó

Qua quan sát trên sắc ký đồ, chúng tôi nhận thấy các phân đoạn dịch chiết từ cây

Ý

GCL đều có nhiều vạch băng với nhiều màu sắc khác nhau. Màu sắc các băng vạch gồm

-L

các màu chủ yế như: mà vàng lavonoid , mà tím t cp n , mà xanh diệp lục).

ÁN

Chứng tỏ trong các phân đoạn dịch chiết từ cây GCL chứa nhiều polyphenol phong phú.

TO

Cao phân đoạn cao cồn tổng số và cao ethylacetate là nhiề băng vạch nhất (8

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

3. Cao phân đoạn chloroform

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

2. Cao phân đoạn n-hexan

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

Chú thích

ÀN

và 9 băng điều này cho thấy ở hai phân đoạn này chứa nhiều flavonoid. Tiếp đến là và 6 băng , phân đoạn CHCl3 ít

nhất chỉ thấy sự xuất hiện của 4 băng.

D

IỄ N

Đ

phân đoạn cao nước, n-Hexan chứa ít băng hơn

27

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

iều này là hoàn toàn phù hợp với kết quả định tính ở trên và là cơ sở cho chúng tôi quyết định chọn các phân đoạn ethanol, n-hexan, chloroform, ethylacetate,

N

cao phân đoạn nước vào mô hình chuột thí nghiệm trong những nghiên cứu tiếp sau.

H

Ơ

3.2.3. Định lượng polyphenol tổng số t ong các phân đoạn dịch chiết theo phương

Y

N

pháp Folin - Ciocalteau

0

TR ẦN

1

OD (765nm) 0.009

50

0.062

3

100 150

0.168

250

0.265

500

0.519

10 00

0.119

Ó

A

4 5

B

2

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

6

OD( 765nm) 0.6 y = 0.001x + 0.0128 R² = 0.9997 0.519

0.5

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

acid gallic (mg/l)

N

TT

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

G

Bảng 3.3. Kết quả xây dựng đường chuẩn acid gallic

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

3.2.3.1. Kết quả xây dựng đường chuẩn acid gallic

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

đoạn dịch chiết bằng phương pháp Folin - Ciocalteau.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

.Q

U

Chúng tôi tiến hành xác định hàm lượng polyphenol tổng số trong các phân

0.4

0.3 0.265 0.2 0.168 0.119

0.1

0.062 0.009

0

0

100

200

300

400

500

600

Acid gallic (mg/l)

Hình 3.3. Đ th đường chuẩn acid gallic 28

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.3.2. Kết quả xác định hàm lượng polyphenol tổng số

OD765nm

Tỷ lệ (%)

(mg/l)

polyphenol

N

Nồng độ polyphenol

4.962

Cao n-hexan

0.274

175.9

Cao EtOAc

0.597

132.1

Cao CHCl3

0.291

61.3

0.613

Cao nước

0.122

102.5

1.025

N

H Ư TR ẦN

B

http://daykemquynhon.ucoz.com

10 00

Bảng định lượng 4.4 cho thấy rằng, cho thấy hàm lượng polyphenol của cao cồn là

A

nhiều nhất, với hàm lượng chiếm khoảng (4.962%). Tiếp th o là phân đoạn cao n-hexan

-H

Ó

(1.759%) và cao EtOAc với hàm lượng tương đương 1.321% , thấp hơn một chút là cao

Ý

phân đoạn nước (1.025%) và cuối cùng là cao phân đoạn chloroform thấp nhất (0.613%).

-L

Kết quả đó chỉ ra rằng, thành phần hóa học trong cây GCL có chứa nhiều hợp iều này phù hợp với

TO

ÁN

chất có khả năng tan tốt trong cao thanol và cao thylac tat .

tính chất vật lý và sự phân cực của phân tử polyphenol, chúng tan tốt trong dung môi

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

1.321

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

1.759

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

496.2

TP

U

0.512

.Q

Cao EtOH

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Y

Mẫu

n dịch chiết từ GCL

Ơ

ư ng polyphenol t ng số

H

Đị

N

B ng 3

ÀN

phân cực và ít tan trong dung môi không phân cực. Với hoạt tính sinh học cao của

D

IỄ N

Đ

phân tử polyphenol chính vì vậy chúng tôi quyết định chọn các phân đoạn ethanol, ethylacetate, n-hexan, chloro orm, cao phân đoạn nước vào mô hình điều trị cho chuột gây béo phì và tiể đường type 2 ở chuột nhắt trắng.

29

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

TQ

3.3.

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

XÁ Đ N

Ề Đ

Ấ

Xác định LD50 của dịch chiết tổng số từ giảo cổ lam trên chuột nhắt trắng bằng con và được cho uống theo liề tăng dần

Ơ

nghiệm, được phân lô ngẫu nhiên, mỗi lô

N

đường uống th o phương pháp của Lorke. Chuột cho nhịn đói trước 16 giờ thí

N

H

đến 8g/kg thể trọng. Theo dõi biểu hiện và số chuột chết trong 72 giờ để đánh giá mức

10

8000mg/kg

10

TP

0%

0

0%

0

0%

10 00

B

Sau 72 giờ theo dõi với các liều 6500, 7000, 7500 mg/kg thể trọng thấy không có con chuột nào chết. ến liều cao nhất 8000mg/kg thể trọng cũng không có con nào

A

chết, vì vậy chưa tính được LD50, nghĩa là có thể kết luận các phân đoạn dịch chiết từ

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

giảo cổ lam hoàn toàn không độc dù ở liều rất cao th o đường uống.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

7500mg/kg

0

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10

0%

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

7000mg/kg

0

G

10

% chuột chết

N

6500mg/kg

Số chuột chết

Đ ẠO

Tổng số chuột

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Liều uống mg/kg

eo đường uống

H Ư

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Bảng 3.5. Kết quả thử độc tính cấp

.Q

U

Y

độ độc của dịch chiết từ GCL.

30

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

ƯƠNG 4 T

4.1.

T

N

N NG

N

H

N

hết các nhóm chất tự nhiên như lavonoid, saponin, glycosid , tannin, alkanoid.

Ơ

N

- Thành phần các hợp chất thiên nhiên trong Giảo cổ lam khá phong phú, chứa hầu

G

đường huyết.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

- Tiếp tục đi sâ tìm hiể cơ chế giảm trọng lượng, giảm lipid máu, hạ glucose

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

huyết hay tăng d ng nạp glucose huyết với thời gian điều trị lâ hơn.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

dịch chiết từ cây GCL có tác dụng trong điều trị béo phì, rối loạn trao đổi lipit và hạ

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

- Tiếp tục đi sâu tìm hiểu thành phần, cấu trúc hóa học của các chất trong phân đoạn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

N NG

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

4. .

U

Y

- Giảo cổ lam hoàn toàn không độc dù ở liều rất cao th o đường uống.

31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

T

T

 Tiếng Vi t

N

[1]. Borel J. P., Maquart X., Gillery P. H., Exposito M., (2006), Hóa sinh cho thầy

H

Ơ

thuốc lâm sàng - Cơ chế phân tử và hóa học về căn nguyên của bệnh (Biên dịch Lê inh, Phan Thị Phi Phi, Hoàng Văn ơn, Lương

N

ức Trình, Vũ Triệu An, Trịnh Văn

G

Thời đại.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

[4]. Nguyễn ức Hoan 2002 , “ ột số hiểu biết về bệnh béo phì và điều trị béo phì,

TR ẦN

Công trình nghiên cứu Y học Quân sự”, Học viện quân y.

[5]. Nguyễn H y Cường, 2010 , “Bệnh đá tháo đường - những quan đ ểm hiện đạ ”, Nxb Y học, Hà Nội.

10 00

B

[6]. Nguyễn Thị Hà (2000), “Chuyển hóa lipid- óa s nh”, Nxb Y học, Hà Nội.

Nguyễn Văn Th

2004 , “Bài giảng dược liệu tập 1”, Nxb Y học, Hà Nội.

[8].

Nguyễn Xuân Thắng 2006 , “Hóa sinh học” Dùng trong đào tạo dược sĩ đại

Ó

A

[7].

Ý

Phùng Thanh Hương 2009 , “Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết và ảnh

-L

[9].

-H

học, Nxb Y học, Hà Nội.

ÁN

hưởng lên chuyển hóa glucose của dịch chiết lá bằng lăng nước (Lagerstroemia

TO

spec osa L.)”, Luận án tiến sĩ dược học, Hà Nội.

ÀN

[10]. Tạ Văn Bình 2006 , Bệnh đá tháo đường - tăng glucose máu, Nxb Y học, Hà

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ỗ Tất Lợi (2009), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Nxb

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

[3].

Đ ẠO

(Gynostemma pentaphyllum Thunb)”, Luận án Hóa học.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

inh, 2010 , “ Khảo sát thành phần hóa học cây giảo cổ lam

.Q

ào Thị Ngọc

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

[2].

Y

Tấn Thành, ặng Vũ Viêm , Nxb Y học, Hà Nội.

Nội.

D

IỄ N

Đ

[11]. Thái Hồng Q ang 19 9 , “Góp phần nghiên cứu m t số biến chứng mạn tính trong

bệnh đá tháo đường”, Tóm tắt luận án PTS khoa học Y dược, Học viện Quân Y

[12]. Trần ức Thọ (2002), “Bệnh đá tháo đường”, Bài giảng bệnh học nội khoa, 1, Nxb Y học, Hà Nội.

32

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

 Tiếng Anh [13]. Barton D.P., Roger I.D., William E.C. (2001), “D sorders of l p ds

Ơ

N

metabol sm”, Endocrinology & metabolism, 23,pp. 993-1075.

N

th l L. B. Nov lli, 200 , “N-

Y

Cristiano achado Galhardi, F rnanda ani and

H

[14]. Gisele A. Souza, Geovana X. Ebaid, Fabio R. F. Seiva, Katiucha H. R. Rocha,

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Obes ty and Related Effects”, Hindawi Publishing Corporation, Brazil.

N

G

Acetylcysteine an Allium Plant Compound Improves High-Sucrose Diet-Induced . 200 . “The mechanism of alloxan-and streptozotocin- induced

TR ẦN

[16]. L nz n,

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

Obes ty and Related Effects”, Hindawi Publishing Corporation, Brazil. d abetes”. Diabetologia 51: 216-226.

B

[17]. Meyers P. A., Bebder D. A. (2003), “Tan c ac d st mulates glucose transport

10 00

and inhibit adipocyte differention n 3T3 L1 cell”, Journal of Nutrition, 135, pp. 165171.

Ó

A

[18]. Ono Y., Hattori E., Fukaya Y, Imai S. (2006) “Ant -obesity effect of Nelumbo

-H

nucifera leaves extract n m ce and rats”, Journal of Ethnopharmacology, 206 (2), pp.

-L

Ý

238 – 244.

ÁN

[19]. Pushparaj P. N., Tan B. K. H., Tan H. C. (2001), “The mechan sm of

TO

hypoglycemic of the semi-purified fractions of Averrhoa bilimbi in streptozotocin-

ÀN

diabetic rats”, Life Sciences, 70, pp. 535-547.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

th l L. B. Nov lli, 200 , “N-

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Cristiano achado Galhardi, F rnanda ani and

Đ ẠO

[15]. Gisele A. Souza, Geovana X. Ebaid, Fabio R. F. Seiva, Katiucha H. R. Rocha,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

Acetylcysteine an Allium Plant Compound Improves High-Sucrose Diet-Induced

D

IỄ N

Đ

 Tài li u từ Webside:

[20]. http://nguyentampharma.com.vn/cay-thuoc-nam/giao-co-lam/.

[21]. http://sinhhocqbu.net/tap-chi-sinh-hoc/…

[22]. http://vi.wikipedia.org/wiki/Gi%E1%BA%A3o_c%E1%BB%95_lam

33

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial