Nghiên cứu chiết xuất, phân lập và đánh giá tác dụng chống oxy hóa in vitro của isoflavonoid...

NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA IN VITRO CỦA ISOFLAVONOID TỪ HẠT ĐẬU TƯƠNG (Glycine max L.)

LUẬN VĂN THẠC SỸ DƯỢC HỌC

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC

Ơ

N

Trang phụ bìa

U Y

Chương 1: TỔNG QUAN

B

1.1 Tổng quan về isoflavonoid

TR ẦN

ĐẶT VẤN ĐỀ

2 2

1.1.2 Tác dụng sinh học của isoflavonoid

8

A

10 00

2

H

Ó

11

-L

Í-

1.2.1 Đặc điểm thực vật, sự phân bố

ÁN

1.2.2 Thành phần hóa học của Glycine max L.

11 12

1.2.3 Tác dụng sinh học của isoflavonoid trong hạt đậu tương.

14

Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

19

2.1 Vật liệu nghiên cứu

19

TO ÀN

1

1.1.1 Cấu tạo hóa học của isoflavonoid

1.2 Tổng quan về cây đậu tương

Đ

Trang

2.1.1. Nguyên liệu nghiên cứu

19

2.1.2. Thuốc thử, dung môi, hóa chất

20

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

N

G

Đ

Danh mục các hình

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP ẠO

Danh mục các bảng

IỄ N D

.Q

Danh mục các chữ viết tắt

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mục lục

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Lời cảm ơn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.1.3. Dụng cụ

20

2.2 Phương pháp nghiên cứu

H Ư

3.1.1 Định tính Saponin

TR ẦN

3.1.2 Định tính Flavonoid

10 00

3.1.4 Định tính sterol

B

3.1.3 Định tính tanin

28 28 30 30

3.1.6 Định tính polysaccharid

31

Ó

A

31

3.1.8 Định tính acid amin

32

3.1.9 Định tính chất béo

32

3.1.10 Định tính acid vô cơ

32

ÁN

-L

Í-

H

31

TO ÀN

28

3.1.5 Định tính caroten

3.1.7 Định tính đường khử

Đ

28

3.2 Chiết xuất isoflavonoid

34

3.2.1 Chiết xuất isoflavonoid bằng phương pháp hồi lưu

34

3.2.2 Chiết xuất isoflavonoid bằng phương pháp ngấm kiệt

36

3.2.3 Quy trình loại chất béo, acid amin và đường

39

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

3.1 Định tính các nhóm chất hữu cơ chính trong hạt đậu tương

25

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ

Chương 3: THỰC NGHIỆM - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

24 MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP ẠO

2.2.4. Xác định hoạt độ chống oxy hóa trên in vitro

IỄ N D

.Q

2.2.3. Phân lập và nhận dạng isoflavonoid Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Ơ

N 22

U Y

2.2.2 Chiết xuất

http://daykemquynhon.ucoz.com

21

H

2.2.1. Định tính các nhóm chất hữu cơ chính trong hạt đậu tương

N

21

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.3 Xây dựng quy trình chiết xuất isoflavonoid và làm giàu isoflavonoid từ hạt đậu tương 3.4 Phân lập và nhận dạng isflavonoid

N

H

44

46

51

H Ư

N

G

Đ

3.5 Hoạt tính chống oxi hóa in vitro của dịch chiết hạt đậu tương theo phương pháp DMA

TR ẦN

53 53

3.7.2 Về chiết xuất isoflavonoid toàn phần

53

B

3.7.1 Về định tính các thành phần chính trong hạt đậu tương

55

3.7.4 Về hoạt tính chống oxy hóa in vitro

56

A

10 00

3.7.3 Về phân lập và nhận dạng isoflavonoid

H

Ó

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

-L

Í-

Tài liệu tham khảo

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

PHỤ LỤC

57

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

3.4.3. Nhận dạng các isoflavonoid

45 MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.4.2. Phân lập isoflavonoid

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

44

U Y

3.4.1. Định tính isoflavonoid bằng sắc ký lớp mỏng

3.6 Bàn luận

N

42

Ơ

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Tử ngoại

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Acid ribonucleic

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

B

Phổ khối lượng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

H Ư

Cholesterol tỉ trọng thấp

A

10 00

Ơ

Cholesterol tỉ trọng cao

Ó H Í-

-L

H N

ẠO

TP

.Q

U Y

Acid deoxyribonucleic Thụ thể estrogen

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

TT UV

TR ẦN

MDA MeOH MS NXB PĐ POL RNA SKLM TGFβ

Tiếng Việt

G

HTCO LDL-Cholesterol

Viết đầy đủ Dược điển Việt Nam Desoxyribonucleic acid Estrogen Receptor Ethyl Acetate Ethanol Hoạt độ chống oxy hóa High Density Lipoprotein Cholesterol Hoạt tính chống oxy hóa Low Density Lipoprotein Cholesterol Malonyldialdehyd Methanol Mass Spectrometry Nhà xuất bản Phân đoạn Peroxy hóa Lipid Ribonucleic acid Sắc ký lớp mỏng Transforming Growth Factor beta Thuốc thử Ultra Violet

Đ

Chữ viết tắt DĐVN DNA ER EtOAc EtOH Hđ HDL-Cholesterol

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

N

H

Trang

Các phân nhóm isoflavonoid

1.2

Hàm lượng các Isoflavonoid trong một số cây họ Đậu và thực phẩm làm từ Đậu tương

14

3.1

Kết quả định tính sơ bộ các nhóm chất trong hạt đậu tương

33

3.2

Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết hồi lưu bằng 3 dung môi MeOH, EtOH 90% và EtOAc

ÁN

40

Đ

ÀN

TO

3.7

Kết quả định tính 4 nhóm chất chính của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90% từ hạt đậu tương sau khi đã loại chất béo, acid amin và đường

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ó H

38

Í-

Hàm lượng cắn của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90% sau khi loại chất béo, acid amin và đường

-L

3.6

37

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10 00

Kết quả định tính 4 nhóm chất chính của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90% từ hạt đậu tương

36

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết bằng phương pháp ngấm kiệt với dung môi EtOH

A

3.5

35

H Ư

TR ẦN

Kết quả định tính isoflavonoid, chất béo, acid amin và đường của 3 dịch chiết EtOH 90%, MeOH và EtOAc từ hạt đậu tương

B

3.4

4

Đ

ẠO

TP

.Q

U Y

1.1

3.3

IỄ N D

NỘI DUNG

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

BẢNG

Ơ

N

DANH MỤC CÁC BẢNG

41 3.8

Giá trị Rf của các vết trên sắc ký đồ dịch chiết isoflavonoid

3.9

Kết quả hoạt độ chống oxy hóa của 4 dịch chiết EtOH 40%, EtOH 70%, EtOH 70% đã làm giàu isoflavonoid và EtOH 90%

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

44

52

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC HÌNH

1.2

Các dạng cấu trúc vòng C của flavonoid

1.3

Cấu trúc 2-phenyl chroman và 3-phenyl chroman

1.4

Cấu trúc hóa học của các isoflavonoid trong hạt đậu tương

1.5

Cấu trúc hóa học của Oestradiol, diethylstilbenstrol và 2 hormone thực vật genistein và daidzein

TR ẦN

23

10 00

Í-

H

Ó

A

Sơ đồ quy trình chiết xuất và làm giàu isoflavonoid từ hạt đậu tương

24

43 44

Phổ khối chất ĐT1

47

3.4

Công thức cấu tạo của Daidzein

47

3.5

Phổ khối chất ĐT2

48

3.6

Công thức cấu tạo của Glycitein

48

3.7

Phổ khối chất ĐT3

49

3.8

Công thức cấu tạo của Genistein

49

ÁN

-L

Sắc ký đồ dịch chiết EtOH70% đã loại tạp (UV 254 nm)

TO ÀN

19

B

Sơ đồ chiết xuất Isoflavonoid từ hạt Đậu tương bằng phương pháp ngấm kiệt

16

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Sơ đồ chiết xuất Isoflavonoid từ hạt Đậu tương bằng phương pháp chiết hồi lưu

3.3

Đ

13

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

2.2

3.2

3 MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G N

Quả đậu tương và hạt đậu tương nghiên cứu

H Ư

2.1

3.1

2

ẠO

TP

.Q

U Y

N

H

2

Ơ

Khung cấu trúc flavonoid

N

Trang

1.1

2.3

IỄ N D

NỘI DUNG

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

HÌNH

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

3.10 Công thức cấu tạo của Daidzin (Daidzein glucosid) 51

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

N

Ơ

H

N

50

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

U Y

.Q

Phổ khối Daidzin

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

3.9

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

H

Nam. Hạt đậu tương được sử dụng để chế biến thành nhiều loại thức ăn khác

Ơ

Đậu tương là cây trồng khá phổ biến trên thế giới, trong đó có Việt

N

ĐẶT VẤN ĐỀ

.Q

Đ

tương còn có chứa một số isoflavonoid là genistein, daidzein, glycitein và các

N

G

dạng glycosid của chúng có nhiều tác dụng tốt đối với sức khỏe.

H Ư

Các isoflavonoid trong hạt đậu tương là những chất có tác dụng chống

TR ẦN

oxy hóa mạnh. Bên cạnh đó chúng còn được xếp vào nhóm các phytoestrogen – nhóm chất lấy từ thực vật có tác dụng tương tự như hormone sinh dục 17β estradiol. Sự kết hợp 2 tính chất này của các isoflavonoid trong hạt đậu tương

10 00

B

giúp cho chúng có được tác dụng tốt trong phòng ngừa một số bệnh như ung thư vú, ung thư buồng trứng, ung thư ruột kết..; các bệnh về tim mạch như

Ó

A

tăng lipid máu, vữa xơ động mạch; ngăn ngừa loãng xương… Các

H

isoflavonoid này còn có tác dụng tốt giúp cải thiện một số hội chứng ở phụ nữ

-L

Í-

tiền mãn kinh như cơn bốc hỏa, chứng hay quên, mất tập trung…

ÁN

Lượng isoflavonoid có trong thực phẩm sử dụng hàng ngày thường là

TO

rất thấp. Để phát huy được những tác dụng quý báu trên, isoflavonoid cần

D

IỄ N

Đ

ÀN

được bổ sung dưới dạng thuốc hay thực phẩm chức năng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

rất nhiều loại acid amin trong đó có 8 acid amin cần thiết thì trong hạt đậu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

trong đó có Việt Nam. Ngoài giá trị dinh dưỡng cao do trong thành phần có

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

là những loại thức ăn được sử dụng thường xuyên của một số nước châu Á,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

nhau như đậu phụ, bột đậu nành, sữa đậu nành, tào phớ, dầu đậu nành…Đây

Vì lí do trên, chúng tôi đề xuất nghiên cứu “Nghiên cứu chiết xuất, phân lập và đánh giá tác dụng chống oxy hóa in vitro của isoflavonoid từ hạt Đậu tương (Glycine max L.)” với 2 mục tiêu nghiên cứu như sau:

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

N

Ơ

H

N

2- Đánh giá tác dụng chống oxy hóa của isoflavonoid in vitro.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1- Nghiên cứu chiết xuất, phân lập và nhận dạng các isoflavonoid từ hạt đậu tương.

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 1

Đ

cấu trúc hóa học thì flavonoid có cấu trúc theo kiểu C6-C3-C6 tức là khung

H Ư

N

G

cơ bản gồm 2 vòng benzen nối với nhau qua một mạch 3 carbon [1].

B

TR ẦN

A

10 00

B

Hình 1.1: Khung cấu trúc flavonoid

Trong đa số các trường hợp thì mạch carbon đóng vòng với vòng A và

H

Ó

A

tạo nên dị vòng có dị tố oxy C. Dị vòng C có thể là: O

O

O

O

γ- pyron

dihydro γ- pyron

O

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

O

Dihydropyran

Pyrilium

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Flavonoid là một nhóm hợp chất lớn thường gặp trong thực vật. Xét về

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

1.1.1 Cấu tạo hóa học của Isoflavonoid

IỄ N D

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1.1 Tổng quan về isoflavonoid

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

Ơ

N

TỔNG QUAN

Hình 1.2: Các dạng cấu trúc vòng C của flavonoid Sự phân loại flavonoid dựa vào vị trí của các gốc aryl (vòng B) và các mức độ oxy hóa của mạch 3 carbon. Người ta chia ra: euflavonoid là các flavonoid có gốc aryl ở vị trí C-2, isoflavonoid có gốc aryl ở vị trí C-3,

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

neoflavonoid có gốc aryl ở vị trí C-4. Người ta còn phân biệt biflavonoid là

N

những flavonoid dimer, triflavonoid cấu tạo bởi 3 monomer flavonoid,

H

Ơ

flavolignan là những flavonoid mà phân tử có một phần cấu trúc lignan.

H Ư

N

G

o

TR ẦN

o

3-Phenyl chroman

10 00

B

2-Phenyl chroman

o

Hình 1.3: Cấu trúc 2-phenyl chroman và 3-phenyl chroman

Ó

A

Isoflavonoid là một phân nhóm đặc biệt và khá lớn của flavonoid,

Í-

H

nhóm chất này có khung cấu trúc là 3-phenylchroman được sinh tổng hợp từ

-L

dẫn chất 2-phenylchroman bằng phản ứng dịch chuyển 1,2-aryl. Sự phân bố

ÁN

isoflavonoid trong hệ thực vật bậc cao là hạn chế nhưng sự đa dạng về cấu

TO

trúc của isoflavonoid lại rất lớn. Sự đa dạng này không chỉ liên quan đến

D

IỄ N

Đ

ÀN

khung cấu trúc 3-phenylchroman mà còn liên quan đến mức độ oxy hóa của khung cấu trúc này cũng như sự có mặt của dị vòng. Phân loại nhóm

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

o

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

ẠO

khung cơ bản của isoflavonoid là 3-phenylchroman [1], [16]

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

khung cơ bản: flavonoid có cấu trúc khung là 2-phenylchroman, trong khi đó

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Sự khác nhau giữa isoflavonoid và các flavonoid khác chính là bộ

isoflavonoid cũng dựa trên hai tiêu chuẩn trên để phân loại. Isoflavonoid được chia làm các nhóm nhỏ theo mức độ oxy hóa của dị vòng C, tạo thành các nhóm isoflavone, isoflavanone, rotenoid, pterocarpan, isoflavan, isoflavanon,

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3-arylcoumarin, coumestan ...[23]. Bảng 1.1 trình bày tóm tắt các phân nhóm

Ơ

N

của isoflavonoid [1], [23].

Đ

hiện 364 aglycon, trong vòng 10 năm qua đã

G

1

H Ư

N

có 130 cấu trúc mới được phát hiện.

ISOFLAVANON

TR ẦN

O

Isoflavanon được xem là phân nhóm hiếm

B

hơn so với isoflavon. Isoflavanon được sinh

10 00

O

tổng hợp từ isoflavon và pterocarpan.

2

Í-

H

Ó

O

A

Thường gặp ở họ Đậu.

ÁN

-L

ROTENOID O

chứa oxy. Rotenoid được sinh tổng hợp từ 2O

methoxyisoflavon.

ÀN

TO

3

Rotenoid là 1 isoflavonoid có thêm 1 dị vòng

Pterocarpan là nhóm chất lớn thứ 2 sau 4

PTEROCARPAN

D

IỄ N

Đ

O

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

isoflavonoid tự nhiên. Cho đến nay đã phát O

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Isoflavon là phân nhóm lớn nhất của nhóm

ISOFLAVON

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N .Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Một số đặc điểm

trúc hóa học

U Y

Phân nhóm - Cấu

STT

H

Bảng 1.1: Các phân nhóm isoflavonoid

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Isoflavon. Pterocarpan có 4 vòng, có nhân cơ bản của isoflavonoid và có liên kết ether giữa

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

O

O

Carbon số 4 và 2’. Được chia làm 3 nhóm

N

nhỏ: pterocarpan, hydroxypterocarpan và

U Y

Rất nhiều isoflavan đóng vai trò như các chất bảo vệ thực vật như phytoalexin trong các cây họ Đậu (ví dụ như Millettia dielsiana,

ẠO

5

N

G

Đ

Phaseolus coccineus).

isoflav-3-en khi có phản ứng loại nước và

TR ẦN

ISOFLAVANOL

H Ư

Phân nhóm isoflavanol là tiền chất của cũng là tiền chất của pterocarpan khi đóng

O

vòng với sự tham gia của nhóm OH ở vị trí

B

6

loài như G. glabla, G. inflata

Í-

H

Ó

A

OH

10 00

số 4. Isoflavanol được tìm thấy ở một vài

ÁN

-L

ISOFLAV-3-EN O

glabla hay G. inflata.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

7

Được tìm thấy ở các loài Glycyrrhiza như G.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

O

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

ISOFLAVAN

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

pterocarpen.

O

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

O

isoflavonoid . Đến năm 1985 mới chỉ phát hiện được 6 chất. Đến nay có thêm 3 chất

Ơ

O

3- arylcoumarin là một nhóm nhỏ của

N

3-ARYLCOUMARIN

H

8

U Y

O

nguồn chính chứa coumestan. Ngoài ra

H Ư

9

coumestan còn có ở nhiều loài quen thuộc

TR ẦN

như

O

Glycine

max,

Phaseolus

lunatus,

Pueraria lobata, Wedelia calendulacea,

10 00

B

Eclipta alba.

Coumaronchromon là một phân nhóm tự

MON

nhiên rất nhỏ trong nhóm isoflavonoid. Ban

Ó

A

COUMARONCHRO

đầu chỉ có một chất duy nhất được phân lập

H O

O

là listein được phân lập từ loài Piscidia erythrina. Cho đến nay số chất trong phân

O

nhóm này đã tăng lên 13 chất.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

10

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

loài thuộc chi Glycyrrhiza được xem như là

N

O

pterocarpan đã được oxi hóa hoàn toàn. Các

G

COUMESTAN

ẠO

Coumestan được xem như là dẫn chất của

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

Glycyrrhiza.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

được tìm thấy từ rễ các loài thuộc chi

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

mới được phát hiện. Tất cả các chất này đều

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Cho đến nay phân nhóm mới chỉ

COUMARONCHROMEN

được phân lập từ hạt của loài

Ơ

O

phân

lập

từ

một

vài

loài

(O )

N

Pterocarpus spp.

TR ẦN

H Ư

12

10 00

B

O

A

Các chất trong nhóm này chủ yếu

H

Ó

được

Í-L ÁN TO

từ

các

loài

O

odorifera.

D

IỄ N

Đ

ÀN

lập

Glycyrrhiza uralensis, Dalbergia

2-ARYLBENZOFURAN

13

phân

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

methyl ether và cadinyl ether được

G

α-METHYLDEOXYBENZOIN

một vài

ẠO

Angolenin cùng với

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

Pachyrhizus erosus.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

11

H

O

N

có một chất là pachyrrhisomen,

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Nhóm chất này ban đầu chỉ có 4

H

Ơ

nhóm chất này đã tăng lên đáng kể,

N

chất được phân lập. Đến nay,

còn có isoflavonoid-isoflavonoid,

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

TR ẦN

1.1.2.1 Tác dụng chống oxy hóa

Các gốc tự do là những tiểu phân hóa học (nguyên tử, mảnh phân tử

10 00

B

hay ion) có electron hóa trị chưa được ghép đôi ở ocbital hóa trị.

Trong cơ thể, các gốc tự do là những sản phẩm nội sinh sinh ra do các

Ó

A

phản ứng oxy hóa của quá trình hô hấp tế bào. Ngoài ra thì các gốc tự do cũng

Í-

H

có thể được tạo nên do tác động của các yếu tố từ bên ngoài cơ thể như tia

-L

phóng xạ, tia cực tím, ô nhiễm môi trường, thuốc, thức ăn, khói thuốc…

ÁN

Trong cơ thể có một hệ thống các enzyme chống oxy hóa nội sinh như glutathione peroxidase, superoxide dimutase, catalase...có tác dụng ngăn chặn

D

IỄ N

Đ

ÀN

sự hình thành và loại bỏ các gốc tự do khi chúng được sinh ra. Bên cạnh đó

thì trong các nguồn thức ăn cũng như thuốc đưa vào cũng có những chất

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

1.1.2 Tác dụng sinh học của isoflavonoid

N

G

Đ

ẠO

qua dây nối ether.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

phenylpropanoid liên kết với nhau

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

isoflavonoid-stilben, isoflavonoid-

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

không chỉ có isoflavan dimer mà

ISOFLAVONOID OLIGOMER

U Y

14

chống oxy hóa như vitamin E, β-caroten, flavonoid… cũng có tác dụng chống lại sự hình thành của các gốc tự do... Khi có sự mất cân bằng giữa quá trình sinh ra gốc tự do và quá trình loại bỏ gốc tự do thì các gốc tự do sinh ra sẽ gây tác hại đối với cơ thể. Các gốc tự do phản ứng và làm biến đổi cấu trúc và

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

chức năng của một số thành phần của tế bào, chẳng hạn như lipid ở màng tế

Ơ

H

như ung thư, tim mạch, quá trình lão hóa, các bệnh về khớp, rối loạn thần

N

bào, lipoprotein, RNA, DNA, và là nguyên nhân tạo nên nhiều bệnh mãn tính

.Q

Đ

trao đổi H/electron với các gốc tự do nhờ các nhóm OH phenol trong phân tử

G

và thúc đẩy hoạt động của các enzyme chống oxy hóa nội sinh như

H Ư

N

glutathione peroxidase, superoxide dimutase, catalase.... Ngoài ra thì có một số tài liệu còn đề cập đến khả năng chống oxy hóa của các isoflavone bằng

TR ẦN

cách tạo chelat với đồng và sắt, là những chất tham gia làm thúc đẩy phản ứng

B

oxy hóa tạo ra các gốc tự do trong cơ thể [28].

10 00

1.1.2.2 Tác dụng trên hệ thống tim mạch

A

Các isoflavonoid ngăn cản quá trình oxy hóa LDL-Cholesterol, làm

H

Ó

giảm Cholesterol toàn phần trong đó làm giảm LDL-Cholesterol và làm tăng

Í-

HDL-Cholesterol do vậy làm giảm nguy cơ xơ cứng động mạch. Isoflavonoid

-L

như puerarin, daidzein lại có tác dụng hạ huyết áp, chống loạn nhịp tim. Trên

ÁN

tuần hoàn não, chúng làm giảm trợ lực mạch máu vỏ não, tăng lưu lượng máu

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

qua não [7], [16], [24], [28], [32].

1.1.2.3 Chống ung thư

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

H/electron. Các isoflavonoid tác dụng chống oxy hóa theo hai cách: phản ứng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

hydroxyl phenol ở vòng B và vòng A, các nhóm này có khả năng nhường

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Tác dụng chống oxy hóa của các isoflavonoid chủ yếu là các nhóm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

kinh…[28], [32].

Một số isoflavonoid (genistein) có khả năng ức chế sự phát triển của một số dòng tế bào gây ung thư như dòng tế bào DU145 (gây ung thư tuyến tiền liệt), MCF-7 (gây ung thư vú), HL-60 (ung thư tủy sống), MOLT-4 (ung thư tế bào lympho). Có rất nhiều giả thuyết giải thích khả năng chống ung thư

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

của các isoflavonoid. Giả thuyết được nói đến nhiều nhất chính là khả năng

H

Ơ

Các gốc tự do tác động tới các DNA gây ra đột biến các DNA. Sự tích tụ các

N

chống oxy hóa, ngăn chặn sự hình thành các gốc tự do của các isoflavonoid.

.Q

dụng trực tiếp hay gián tiếp qua thúc đẩy hoạt động của các enzyme chống

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Ngoài ra còn có các giả thuyết khác giải thích khả năng chống ung thư

H Ư

N

của các isoflavonoid như ức chế sự hình thành mạch, ức chế tyrosine kinase, hay hoạt tính kháng oestrogen (oestrogen kích thích sự phát triển của một số oestrogen nên cạnh tranh tác dụng với oestrogen, hạn chế sự phát triển của tế

10 00

B

bào ung thư).

A

1.1.2.4 Hoạt tính Estrogen

H

Ó

Một số isoflavonoid, được gọi là các phytoestrogen, có tác dụng giống

Í-

như oestrogen, một hormone sinh dục nữ. Phytoestrogen là những hợp chất tự

-L

nhiên có nguồn gốc từ thực vật, có khả năng gây ra tác dụng oestrogen hoặc

ÁN

đối kháng tác dụng oestrogen. Các nhóm hợp chất thiên nhiên có tính chất

TO

phytoestrogen gồm isoflavonoid, stilben, lignan và coumestan.

Đ IỄ N D

TR ẦN

dòng tế bào ung thư, do một số isoflavonoid có khả năng gắn với thụ thể

Vào những năm 1940, lần đầu tiên người ta phát hiện ra rằng một vài

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ẠO

có khả năng ngăn ngừa ung thư [16], [22], [24], [28], [29], [32].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

oxy hóa nội sinh ngăn chặn sự hình thành và tác động của các gốc tự do nên

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

gốc tự do mang nhiều đặc trưng của chất gây ung thư. Các isoflavonoid có tác

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

DNA bị đột biến dẫn đến sự phát triển bất thường của tế bào. Như vậy, các

hợp chất có nguồn gốc từ thực vật có thể gây ra tác dụng tương tự hoạt tính oestrogen. Những con cừu gặm cỏ trên cánh đồng mọc nhiều cây cỏ ba lá đỏ (Trifolium uniflorum) gặp nhiều các vấn đề về sinh sản. Những con non thì có nhiều dấu hiệu phát dục sớm, những con cừu cái không thể mang thai hoặc

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

những con đang mang thai lại thường bị sảy thai. Về sau người ta tìm ra

H

Ơ

trên những cánh đồng cỏ này chứa một hàm lượng lớn các isoflavonoid là

N

nguyên nhân là do cây cỏ ba lá (Trifolium uniflorum) mọc với số lượng lớn

U Y .Q

Đ

pháp điều trị thay thế hormone cho phụ nữ tuổi tiền mãn kinh không an toàn

G

và hiệu quả như mong muốn. Sự phổ biến của các hormone thực vật trong chế

H Ư

N

độ ăn uống và tác dụng sinh học của chúng đang rất được các nhà khoa học

TR ẦN

quan tâm [30].

Nghiên cứu dịch tễ một số bệnh ung thư phụ thuộc oestrogen như ung

B

thư vú, ung thư tử cung, cho thấy lượng phytoestrogen trong khẩu phần ăn

10 00

của người châu Á cao hơn trong khẩu phần ăn của người châu Âu và Mỹ cùng với tỷ lệ mắc bệnh thấp hơn người châu Âu và Mỹ. Nhóm người châu Á di cư

H Í-

[30], [32].

Ó

A

sang Mỹ có tỷ lệ bệnh cao hơn nhóm người sống tại chính nước họ [24], [28],

-L

Theo nhiều kết quả nghiên cứu, một số isoflavonoid có cấu trúc hóa

ÁN

học tương tự như các oestrogen nội sinh và gây ra tác dụng đối kháng hay chủ

TO

vận với oestrogen. Tác dụng đối kháng hay chủ vận này phụ thuộc vào nồng

thì genistein là chất có hoạt tính oestrogen mạnh nhất [16],[19],[28],[32].

D

IỄ N

Đ

ÀN

độ của chúng hoặc các mô đích mà chúng tác dụng. Trong các isoflavonoid

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

các hormone thực vật đã tăng lên nhanh chóng khi các nhà khoa học thấy liệu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Trong những năm gần đây mối quan tâm của các nhà khoa học đối với

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

được phát hiện [29].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

formononetin và biochanin A. Đây cũng là những phytoestrogen đầu tiên

Có nhiều nghiên cứu đã chứng minh việc sử dụng các phytoestrogen, trong đó có các isoflavonoid với liều cao có tác dụng cải thiện rõ rệt các triệu

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

chứng do thiếu hụt oestrogen ở các phụ nữ mãn kinh mà không gây ra các tác

Ơ

N

dụng phụ nghiêm trọng như liệu pháp thay thế hormone.

U Y

Các isoflavonoid có tác dụng chống viêm giống như nhóm flavanon, 4-

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Merr. Thuộc chi Glycine Willd., họ đậu Fabaceae (Papilionaceae), bộ Đậu

B

(Fabales), phân lớp Hoa Hồng (Rosidae), lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida),

10 00

ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) [10],[30].

A

Đậu tương là cây thảo đứng, sống hàng năm, cao từ 40 – 80cm. Thân

H

Ó

cành mảnh, có lông màu trắng. Lá kép mọc so le, gồm 3 lá chét hình bầu dục

Í-

hoặc trái xoan, gốc tròn, đầu nhọn, dài từ 3 – 12cm, rộng 2 – 8cm, lá chét bên

-L

lệch. Hoa dầy, trắng hay tím, xếp thành chùm ở gốc. Quả đậu, có lông mềm

ÁN

màu vàng, mọc thõng xuống, dài 3 – 4cm, hơi thắt lại ở giữa các hạt. Hạt 2, 3,

TO

5 thận dài, màu trắng vàng. Việt Nam phân biệt rõ ràng đậu nành hay đậu

Đ

tương (hạt màu vàng nhạt) với hạt đậu đen, đậu đỏ… nhưng trong các tài liệu

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

Theo hệ thống phân loại mới của Takhtajan thì loài Glycine max (L.)

IỄ N D

H Ư

1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố

N

G

Đ

1.2. Tổng quan về cây đậu tương Glycine max (L.) Merr.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

nghiệm trên mô hình ức chế sinh tổng hợp prostagladin [17].

TP

4-arylcoumarin, 4-arylchroman. Tác dụng này được chứng minh bằng thực

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

arylcoumarin, dihydroflavonon, anthocyanin, flavan-3-ol, chalcon, biflavon,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

1.1.2.5 Các tác dụng khác

nước ngoài với tên khoa học Glycine soja hay Glycine max hay Soja hispida người ta dùng chỉ nhiều loại đậu với màu vàng nhạt, màu nâu, màu đen [6], [13].

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Từ lâu, Đậu tương đã được sử dụng làm thực phẩm, nhất là ở các nước

Ơ

H

lan ra các nước Việt Nam, Malaysia, Nhật Bản, Triều Tiên... Ở châu Âu mới

N

châu Á. Người ta cho rằng Đậu tương có nguồn gốc từ Trung Quốc rồi sau đó

.Q

những nước châu Mỹ. Những nước thuộc miền trung và đồng bằng sông

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

H Ư

6% và một số chất khác không có Nitơ [8].

N

G

Toàn cây chứa nước 12%, glucid 16%, Protein 14-15%, muối khoáng

TR ẦN

Hạt Đậu tương (100g hạt) chứa [6], [8]: Nước: 8g

-

Chất vô cơ: 4-5g bao gồm K (2 g); Na (0,38 g); Ca (0,23 g); P (0,65 g);

10 00

B

-

A

Mg (0,24 g) và S (0,46 g).

Glucid: 15-25g

-

Chất béo: 15-20g

-

Các acid amin: 35-40g bao gồm: Glycin (0,97 g); Valin (0,63 g); Leucin

ÁN

-L

Í-

H

Ó

-

(8,45 g); Isoleucin (1,7g), Prolin (3,78 g); Threonin (1,6 g); Phenylalanin

D

IỄ N

Đ

ÀN

(3,86 g); acid aspartic (3,89 g); acid glutamic (19,46 g); Tyrosin (1,86 g);

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

1.2.2 Thành phần hóa học của Glycine max (L.) Merr.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

Missisipi đã trở thành những nước sản xuất Đậu tương với sản lượng lớn [13].

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

Liên Xô cũ nhưng ngược lại việc trồng Đậu tương phát triển nhanh chóng ở

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

biết đến Đậu tương vào đầu thế kỷ 18 và việc trồng trọt bắt đầu thực hiện ở

Arginin (7,8 g); Histidin (1,39 g); Lysin (2,96 g); Tryptophan (1,25 g); Serin (1,8 g); Alanin (1,7 g); Cystin (1,18 g) và Methionin (0,68 g).

-

Ngoài ra, còn một số các chất khác như: - Dẫn chất isoflavonoid: genistein, daidzein và glycitein.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Sắc tố anthoxyan trong các loại đậu tím, đen.

N

- Vitamin: tan trong nước (B1, B2, PP), tan trong dầu (A, D, E, K, I).

H

Ơ

- Các enzym: Amylase, Lipaseidin, Protease, Urease...

TR ẦN

OR4

R3

R4

H

H

H

Genistin

OH

H

Glu

H

Daidzein

H

H

H

H

H

H

Glu

H

Glycitein

H

OCH3

H

H

H

OCH3

Glu

H

Í-

-L

Daidzin

H

Ó

B

OH

A

Genistein

10 00

R2

ÁN

R1

O

H Ư

R1

N

R2

Hình 1.4: Cấu trúc hóa học của các isoflavonoid trong hạt đậu tương

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Glycitin

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

G

Đ

O

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

R3O

ẠO

isoflavonoid đã được tìm thấy trong hạt Đậu tương [21].

.Q

tương chỉ chứa rất ít các chất này. Hình 1.4 trình bày cấu trúc hóa học của các

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

cây họ Đậu. Các loại đậu khác cũng như các chế phẩm có nguồn gốc từ Đậu

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Đậu tương và Sắn dây có hàm lượng isoflavonoid cao nhất trong các

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ngoài những chất chủ yếu trên, các isoflavonoid trong đậu tương còn

N

tồn tại dưới dạng 6-O-acetyl và 6-O-malonyl glycosid. Ngoài ra, còn có dạng

H

Ơ

succinyl glycosid của daidzein, genistein và glycitein.

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Hạt đậu tương Tào phớ

1,1 - 9,8

1,3 - 21

1,1 - 150

0,5 - 91

1,7 - 221

5,0 - 42,1

0,6 - 25,6

3,6 - 67,5

0,007 - 0,5

0,008 - 0,04

0,015 - 0,5

0,07 - 0,2

0,01 - 0,2

1,1 - 3,6

A

Ó H

ÁN

Đậu xanh

2,6 - 31

Í-

-L

Đậu đỏ

(mg/100g)

TO

1.2.3. Tác dụng sinh học của isoflavonoid trong hạt đậu tương

Đ

1.2.3.1 Tác dụng chống oxy hóa (antioxidant)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

H Ư 1,1 - 11,3

TR ẦN

Sữa đậu

toàn phần

0,8 - 9,7

B

1,6 - 15

10 00

Đậu cho trẻ em

Isoflavonoid

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

Genistein (mg/100g) Daidzein (mg/100g)

Thức ăn

IỄ N D

G

Đ

thực phẩm làm từ Đậu tương

TP

Bảng 1.2: Hàm lượng các isoflavonoid trong một số cây họ Đậu và

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Đậu tương được trình bày ở bảng 1.2 [29].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Hàm lượng isoflavonoid trong một số cây họ Đậu và thực phẩm làm từ

Các isoflavonoid trong hạt đậu tương có tính oxy hóa mạnh, trong đó mạnh nhất là genistein và cũng là chất được quan tâm và nghiên cứu nhiều nhất. Hoạt tính chống oxy hóa của các isoflavonoid trong đậu tương là do các nhóm OH phenol của vòng A và B có khả năng nhường H/electron cho các

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

gốc tự do. Khả năng dập tắt các gốc tự do được thể hiện qua nghiên cứu khả

N

năng dập tắt chuỗi phản ứng tạo gốc tự do trên chuột khi chiếu tia cực tím B

H

Ơ

trên thực nghiệm [28], [32].

Đ

nghiên cứu so sánh với α-tocopherol. Kết quả cho thấy isoflavonoid có tác

N

G

dụng mạnh hơn α-tocopherol từ 80 – 100 lần [6]. Ngoài tác dụng dập tắt các

H Ư

gốc tự do, Các isoflavonoid trong đậu tương còn có khả năng thúc đẩy hoạt

TR ẦN

động của các enzyme chống oxy hóa nội sinh như glutathione peroxidase, superoxide dismutase và glutathione reductase ... [17],[24],[28],[32].

B

Do có tác dụng chống oxy hóa mạnh nên các isoflavonoid đậu tương

10 00

còn có tác dụng bảo vệ tế bào thần kinh (các tế bào thần kinh bị tổn thương và

A

chết do bị các tác nhân oxy hóa tấn công), do đó các isoflavone còn rất có lợi

H

Ó

cho những người bị các bệnh tổn thương tế bào thần kinh như bệnh

-L

Í-

Parkinson, Alzheimer [28].

ÁN

1.2.3.2 Tác dụng kiểu Estrogen

TO

Các isoflavonoid có trong hạt đậu tương đều được xếp vào nhóm các

D

IỄ N

Đ

ÀN

chất phytoestrogen. Các nhà khoa học đã so sánh về mặt cấu trúc của 17βestradiol, diethylstilbenstrol với genistein và daidzein thấy có sự tương đồng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Tác dụng chống oxy hóa của isoflavonoid chiết xuất từ đậu tương được

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

dịch chiết đậu tương có tác dụng giảm sự peroxy hóa lipid [6].

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

cống trắng và dùng adriamycin là chất sinh ra các gốc tự do, kết quả cho thấy

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Sự peroxy hóa lipid được tiến hành trên microsom tim và gan của chuột

về mặt cấu trúc. Điều này có thể giải thích một phần tại sao genistein có thể gắn vào các thụ thể oestrogen. Hình 1.5 trình bày sự tương đồng về cấu trúc hóa học của hormon oestradiol và các dẫn chất stilben, isoflavonoid như diethylstilbenstrol, genistein và daidzein.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Người ta đã biết đến hai loại receptor của oestrogen là ERα và ERβ.

Ơ

H

của chúng thay đổi theo từng loại mô và hiệu lực tác dụng của chúng cũng

N

Mặc dù cả hai loại receptor này có mặt trong cùng một tế bào nhưng nồng độ

.Q

năng gắn kết của genistein với ERβ mạnh hơn 20 lần so với ERα. Genistein

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

N

G

OH

TR ẦN

H Ư

OH

HO

OH

O

Genistein

10 00

17β-oestradiol

B

HO

O

OH

OH

-L

ÁN

HO

Í-

H

Ó

A

O

O

Daidzein

TO

Diethylstilbenstrol

HO

Đ

Hình 1.5: Cấu trúc hóa học của oestradiol, diethylstilbenstrol và 2 hormone thực vật genistein và daidzein

D

IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ẠO

tiền liệt, màng trong tử cung, mạch máu và các mô xương [22],[29],[32].

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

gây ra đáp ứng tương tự như oestradiol tại các tế bào vú, buồng trứng, tuyến

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

hoạt tính của oestradiol, và khi gắn với ERβ thì giá trị này tăng lên là 1/3. Khả

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

khác nhau. Khi liên kết với ERα genistein có hoạt tính oestrogen bằng 1/1000

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Nghiên cứu trên những phụ nữ mãn kinh khi dùng các isoflavonoid

N

trong đậu tương thì thấy sau một thời gian, số lượng các globulin gắn

H

Ơ

hormone sinh dục trong máu tăng lên.

.Q

Đ

vận này phụ thuộc vào nồng độ của chúng hoặc các mô đích mà chúng tác

H Ư

N

mạnh nhất [11], [19].

TR ẦN

Những phụ nữ tiền mãn kinh và mãn kinh có sự thiếu hụt hormone oestrogen nên thường gây ra một số hội chứng như rối loạn vận mạch tạo ra

B

các cơn bốc hỏa, một số bệnh về tim mạch, loãng xương… Để khắc phục các

10 00

hội chứng này, từ lâu người ta đã sử dụng liệu pháp thay thế hormone oestrogen. Liệu pháp này đã khắc phục được các hội chứng trên nhưng do

Ó

A

giới hạn điều trị hẹp nên dễ xảy ra khả năng quá liều, đồng thời phải sử dụng

H

trong thời gian dài nên dễ gặp một số tác dụng phụ nghiêm trọng như ung thư

-L

Í-

vú, ung thư nội mạc tử cung, ung thư buồng trứng… Do vậy, trong những

ÁN

năm gần đây, các nhà khoa học đang có sự quan tâm lớn tới việc sử dụng liệu

Đ

ÀN

TO

pháp điều trị thay thế hormone bằng các phytoestrogen an toàn hơn.

IỄ N D

G

dụng. Trong các isoflavonoid thì genistein là chất có hoạt tính oestrogen

Trong liệu pháp điều trị thay thế hormone cho phụ nữ tuổi tiền mãn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

tác dụng đối kháng hay chủ vận với oestrogen. Tác dụng đối kháng hay chủ

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

coumestrol có cấu trúc hóa học tương tự như các oestrogen nội sinh và gây ra

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

genistein, daidzein và các chất chuyển hóa của chúng như coumestran,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Theo nhiều kết quả nghiên cứu, các isoflavonoid trong đậu tương như

kinh, việc sử dụng các isoflavonoid đem lại những lợi ích rõ rệt. Chúng ức chế quá trình xốp xương, giảm tỷ lệ hay gặp các cơn bốc hỏa, mất ngủ, hay cáu giận, hay quên và khó tập trung. Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng những người có chế độ ăn chứa genistein và các phytoestrogen với nồng độ cao (100mg/ngày) sau thời gian nghiên cứu khoảng 10 tuần đã có những cải thiện

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

đáng kể về trí nhớ, khả năng nhận thức và khả năng phản xạ. Đối với những

Ơ

U Y

1.2.3.3 Tác dụng trên hệ thống tim mạch

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

giảm LDL-Cholesterol và làm tăng HDL-Cholesterol do vậy làm giảm nguy

N

G

cơ xơ cứng động mạch. Genistein còn có khả năng ngăn chặn sự hình thành

H Ư

các cơn đau tim và đột quỵ khi hoạt động như một tác nhân chống lại việc

TR ẦN

hình thành các cục máu đông. Daidzein lại có tác dụng hạ huyết áp, chống loạn nhịp tim. Trên tuần hoàn não, có tác dụng làm giảm trợ lực mạch máu vỏ

10 00

B

não, tăng lưu lượng máu qua não [16], [19], [28], [32].

Ó

A

1.2.3.4 Tác dụng chống ung thư

Í-

H

Isoflavonoid từ đậu tương có tác dụng hạn chế sự phát triển của nhiều

-L

loại ung thư phụ thuộc hormone và không phụ thuộc hormone in vitro như tế

ÁN

bào ung thư vú, tiền liệt tuyến, trực tràng và ruột kết. Tác dụng này được giải thích là do sự điều chỉnh tác dụng oestrogen, hạn chế hoạt động của tyrosine

D

IỄ N

Đ

ÀN

kinase, DNA topoisomerase, hạn chế tổng hợp và giải phóng của TGFβ

(Transforming Growth Factor beta), làm giảm sự biệt hóa và chu trình tế bào

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

trình oxy hóa LDL-Cholesterol, làm giảm Cholesterol toàn phần trong đó làm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

mạnh. Nó loại bỏ các gốc tự do và giảm sự peroxyd hóa lipid. Ngăn cản quá

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

Các isoflavonoid trong hạt đậu tương có khả năng chống oxy hóa

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

thì không thấy những cải thiện này hoặc những cải thiện không thực sự rõ rệt [29].

N

người mà chế độ ăn không có hoặc có chứa phytoestrogen với nồng độ thấp

thông qua việc thay đổi sao chép gen.

Oestrogen đóng vai trò là hormone đa chức năng trong cơ thể, trong đó có chức năng kích thích sự phân bào của các tế bào trong hệ cơ quan sinh sản, xương, tim, não… Các tế bào ung thư phụ thuộc hormone oestrogen khi có sự

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

kích thích của oestrogen thì sẽ phát triển rất nhanh. Các isoflavonoid trong hạt

Ơ

H

chỉ gây tác dụng oestrogen yếu và hạn chế sự gắn của oestrogen vào thụ thể

N

đậu tương có tác dụng oestrogen yếu nên khi gắn vào các thụ thể oestrogen thì

U Y .Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

cung…với hóa trị liệu [21], [25], [31].

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

cảm của một số loại tế bào ung thư như tế bào ung thư vú, ung thư tử

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ngoài ra, một số nghiên cứu chỉ ra rằng genistein làm tăng độ nhạy

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

bào ung thư [16],[17],[24],[28],[29],[32].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

nên gây ra tác dụng đối kháng oestrogen, làm hạn chế sự phát triển của các tế

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 2

Đ

- Hạt Đậu tương thu hái tại huyện Phú Xuyên – Hà Nội.

H Ư

N

G

- Lựa chọn nguyên liệu:

+ Hạt có thể chất cứng, hình cầu hoặc hình xoan tròn, kích thước 2 – 5

TR ẦN

mm, có màu vàng nhạt hoặc hơi xanh. Hạt có rốn màu trắng nổi rõ.

10 00

- Xử lý nguyên liệu:

B

+ Chọn những hạt đậu tương tốt, màu vàng nhạt, không mốc mọt.

Ó

H

đạt tiêu chuẩn.

A

+ Loại bỏ tạp cơ học: vỏ quả, mảnh lá, các hạt bị sâu, mọt, lép không

-L

Í-

+ Hạt được sấy khô (nhiệt độ < 60oC), xay vỡ, cho vào túi PE đóng kín,

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

để nơi khô ráo làm thực nghiệm.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

2.1.1. Nguyên liệu nghiên cứu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

2.1. Vật liệu nghiên cứu

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

Ơ

N

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ó

A

thường:

H

- Methanol: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông - Trung Quốc.

-L

Í-

- Chloroform: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông - Trung Quốc.

ÁN

- Dicloromethan: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông - Trung Quốc.

- Ethanol 96%: công ty Hóa chất Đức Giang - Việt Nam.

Đ

ÀN

TO

- n -Hexan: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông - Trung Quốc.

- Ethyl acetat: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông - Trung Quốc.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Hóa chất sử dụng trong thực nghiệm là các hóa chất thí nghiệm thông

IỄ N D

10 00

B

2.1.2. Thuốc thử, dung môi, hóa chất

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

H Ư

N

G

Hình 2.1: Quả đậu tương và hạt đậu tương nghiên cứu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

- Natri Hydroxyd, Amoni Hydroxyd: xí nghiệp Hóa dược Quảng Đông Trung Quốc.

- Silicagel sắc ký cột (Silicagel, Merck, d = 60-200 µm).

- Bản sắc ký lớp mỏng tráng sẵn (Silicagel GF254 – Merck).

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

H

Dược Hà Nội, Trung tâm nghiên cứu ứng dụng sinh y dược học - Học viện

H Ư

- Cân phân tích Presica XB-220 (d = 0,1 mg), Đức

TR ẦN

- Máy xác định độ ẩm tự động Precisa PH60, Đức - Đèn tử ngoại bước sóng 254 và 365 nm

B

- Máy ảnh Sony cybershoot DSC-W310

10 00

2.2. Phương pháp nghiên cứu

Ó

A

2.2.1. Định tính các nhóm chất hữu cơ chính trong hạt đậu tương

H

Trong hạt đậu tương có nhiều thành phần khác nhau, do vậy chúng tôi

-L

Í-

tiến hành định tính một số nhóm chất chính bằng phản ứng hóa học [1], [2], [3].

Đ

ÀN

TO

ÁN

2.2.1.1 Định tính Saponin - Quan sát hiện tượng tạo bọt.

- Phản ứng với H2SO4 đặc.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

- Bình gạn thủy tinh 250 ml - 500 ml - 1 lít,

G

Đ

- Tủ sấy Memmert (Đức).

ẠO

- Máy cất quay BUCHI waterbath B480 (Đức).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

- Cột sắc ký thủy tinh các loại,

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

- Bình thủy tinh có nắp đậy,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Quân y gồm có:

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

Các dụng cụ thí nghiệm được sử dụng ở bộ môn Dược liệu - Đại học

N

2.1.3. Dụng cụ

2.2.1.2 Định tính Flavonoid - Phản ứng Cyanidin.

- Phản ứng với NaOH 10%.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Phản ứng với hơi NH3.

H

Ơ

N

- Phản ứng với FeCl3 5%.

Đ

ẠO

- Phản ứng với gelatin 1%.

N

G

2.2.1.4 Định tính Sterol

TR ẦN

2.1.1.5 Định tính caroten

H Ư

- Phản ứng Libermann

10 00

B

- Phản ứng với H2SO4 đặc

2.2.1.6 Định tính polysaccharid

Ó

A

- Phản ứng với thuốc thử Lugol

Í-

H

2.2.1.7 Định tính đường khử

ÁN

-L

- Phản ứng Fehling.

- Phản ứng với thuốc thử Ninhydrin.

2.2.1.9 Định tính chất béo - Tạo vết trong mờ trên giấy lọc

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

2.2.1.8 Định tính acid amin

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

- Phản ứng với chì acetat 10%.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

- Phản ứng với FeCl3 5%.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

2.2.1.3 Định tính tanin

2.2.1.10 Định tính acid vô cơ

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Phản ứng với Na2CO3.

Ơ

N

2.2.1.11 Định tính bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

amoniac, phun thuốc thử hiện màu như vanilin1% /H2SO4… và quan sát dưới

H Ư

N

G

ánh sáng thường và ánh sáng tử ngoại như trên [11], [25].

2.2.2 Chiết xuất

TR ẦN

Chúng tôi tiến hành khảo sát chiết xuất với các dung môi có độ phân cực khác nhau là methanol, ethanol 90% và ethyl acetat bằng phương pháp

A

2.2.2.1 Chiết hồi lưu

10 00

B

chiết hồi lưu và chiết ngấm kiệt.

H

Ó

Tiến hành chiết hồi lưu song song với 3 dung môi là MeOH, EtOH

Í-

90% và EtOAc với cùng lượng dung môi, cùng khối lượng dược liệu, cùng

-L

thời gian và quy trình chiết xuất. Sơ đồ quy trình chiết hồi lưu được trình bày

TO

ÁN

ở hình 2.2.

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

ở bước sóng λ = 254 và 365 nm. Dùng thuốc thử hiện màu như hơ hơi

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Sắc ký đồ được quan sát dưới ánh sáng thường, ánh sáng tử ngoại (UV)

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Thử khai triển với 3 hệ dung môi khác nhau.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

Dùng bản mỏng tráng sẵn silicagel GF254 (Merck).

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

U Y .Q Cắn

Í-

H

Ó

A

10 00

B

Cất thu hồi DM

phương pháp chiết hồi lưu

Dịch chiết thu được đem cất thu hồi dung môi bằng máy cất quay chân

không ở nhiệt độ dưới 60oC. Phần cắn được làm khô trong bình hút ẩm.

Lượng cắn chiết xuất được tính bằng phương pháp cân, theo công thức dưới đây.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Hình 2.2 Sơ đồ chiết xuất isoflavonoid từ hạt Đậu tương bằng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Dịch chiết

TR ẦN

Bã dược liệu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

H Ư

N

G

Đ

Dung môi

TP

Chiết hồi lưu 3h

ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Bột đậu tương

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả tính theo công thức sau:

H

Ơ

N

m × 100% a × (100 − h)

U Y ẠO

- m là khối lượng cắn khô thu được (g).

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

- h là hàm ẩm dược liệu (%).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- a là khối lượng dược liệu ban đầu (g).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

.Q

- X là tỉ lệ % khối lượng cắn (%).

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Trong đó:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

%X =

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.2.2 Chiết ngấm kiệt

Ơ

H

pháp ngấm kiệt với dung môi ethanol. Sơ đồ quy trình chiết xuất được trình

N

Chúng tôi khảo sát chiết isoflavonoid từ hạt đậu tương bằng phương

Dịch chiết

10 00

B

Bã dược liệu

TR ẦN

H Ư

N

24h x 3 lần

Í-

H

Ó

A

Cất thu hồi DM

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Cắn

Hình 2.3: Sơ đồ chiết xuất isoflavonoid từ hạt Đậu tương bằng phương pháp ngấm kiệt

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Dung môi

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ

Ngấm kiệt ,to = 25oC

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

Bột đậu tương

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

bày ở hình 2.3.

Cách tiến hành: cân chính xác một lượng bột đậu tương, làm ẩm bằng ethanol, để yên 30 phút. Cho bột đậu tương đã làm ẩm vào bình chiết, thêm dung môi. Rút dịch chiết sau 24h, tiến hành chiết 3 lần. Gộp dịch chiết cất thu

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

hồi dung môi. Cắn được làm khô trong bình hút ẩm. Lượng cắn thu được tính

Ơ

N

theo công thức như phần chiết xuất bằng phương pháp chiết hồi lưu.

U Y

Chúng tôi tiến hành phân lập isoflavonoid bằng cách kết hợp các

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

Trong đó, sắc ký lớp mỏng và sắc ký lớp mỏng chế hóa có pha tĩnh là các chất

N

G

hấp phụ được trải thành lớp mỏng trên các phiến kính hoặc kim loại, còn sắc

TR ẦN

Phương pháp sắc ký cột

H Ư

ký cột thì pha tĩnh là các hạt hấp phụ được nhồi vào trong cột sắc ký.

B

+ Sử dụng pha tĩnh là Silicagel 60 Merck.

10 00

+ Để lựa chọn hệ dung môi rửa giải hợp lý, chúng tôi lựa chọn dung môi

H

Ó

sắc ký lớp mỏng.

A

tách qua quá trình tiến hành định tính dịch chiết isoflavonoid toàn phần bằng

Í-

Trong quá trình chạy sắc ký cột, các phân đoạn tách ra được tiến hành

-L

thử độ tinh khiết bằng sắc ký lớp mỏng với các dung môi có độ phân cực khác

TO

ÁN

nhau [4].

Sắc ký lớp mỏng chế hóa

Đ

Đối với các phân đoạn chưa tinh khiết, dịch chiết thu được sau khi chạy sắc ký cột đem cô lấy cắn và tiến hành chạy sắc ký chế hóa để phân lập các isoflavonoid tinh khiết.

D

IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

tĩnh) đã đặt hỗn hợp các chất cần tách khi cho pha lỏng (pha động ) chạy qua.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

của các phương pháp này là dựa trên sự phân bố khác nhau trên pha rắn (pha

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

phương pháp sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng, sắc ký chế hóa. Nguyên tắc chung

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

2.2.3. Phân lập và nhận dạng isoflavonoid

Nhận dạng isoflavonoid

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Các isoflavonoid phân lập được đem nhận dạng dựa trên tính chất lý

Ơ

N

hóa, phân tích phổ khối [5].

.Q

ra MDA (Malonyl dialdehyd). MDA phản ứng với acid thiobarbituric tạo ra

G

Đ

hợp chất màu hồng. Đo cường độ màu biết lượng MDA nhiều hay ít, mẫu thử

TR ẦN

có chất chống oxi hóa.

Hoạt độ chống oxy hóa biểu diễn bằng giá trị phần trăm (%) MDA bị

10 00

- Cách tiến hành

B

ức chế ở mẫu thử so với mẫu đối chứng.

Ó

A

Trong những lọ màu nâu nút kín, cùng loại cho hỗn hợp phản ứng gồm:

Í-

H

- 2 ml Tween 80 1%

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

- 0,2 ml dung dịch FeSO4 10-3M

IỄ N D

H Ư

N

có chất chống oxy hóa thì lượng MDA thấp hơn so với mẫu đối chứng không

- 0,2 ml dung dịch acid ascorbic 10-2M - 0,6 ml dịch chiết isoflavonoid (mẫu đối chứng thay bằng 0,6 ml

nước cất).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

(Tween 80) ở một nhiệt độ nhất định. Sau một khoảng thời gian, phản ứng tạo

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

- Nguyên tắc của phương pháp: tiến hành peroxy hóa acid béo chưa no

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

- Xác định hoạt độ chống oxy hóa theo phương pháp định lượng MDA [15].

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

2.2.4. Xác định hoạt độ chống oxy hóa trên in vitro

Đậy nút kín, lắc kỹ, ủ nhiệt độ 40oC trong 48 giờ. Lấy 2 ml hỗn hợp sau khi ủ, thêm vào đó 1 ml dung dịch acid tricloracetic 30%. Để yên 1 giờ. Ly tâm 5 phút với tốc độ 4200 vòng/phút. Lấy 2 ml dịch trong sau ly tâm, thêm 2 ml dung dịch acid thiobarbituric 0,25%. Đun cách thủy 100oC trong 15 phút,

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

để nguội đến nhiệt độ phòng. Đo màu của phức tạo thành ở bước sóng λ =

H

Nếu trong mẫu thử có chất chống oxi hóa thì lượng MDA tạo thành

Ơ

N

532 nm. Tính lượng MDA với hệ số tắt mol ε = 1,56.105M-1cm-1.

.Q

Đ

(HTCO) của thuốc thử.

H Ư

Hđ % = (Dc – Dt)/Dc x 100

N

G

- Công thức tính hoạt độ chống oxi hóa (Hđ %)

TR ẦN

Dc: Mật độ đo quang của mẫu chứng

10 00

- Giá trị thực (µ):

B

Dt: Mật độ đo quang của mẫu thử

s n

Í-

H

Ó

A

µ = x ± tα

ÁN

-L

µ: là giá trị thực

với α = 0,95 tα là giá trị phụ thuộc vào số bậc tự do k = n – 1 và phụ thuộc vào độ kỳ vọng α

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

x : giá trị trung bình

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

peroxy hóa lipid (POL) của chất thử và gọi là hoạt tính chống oxy hóa

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

mẫu thử giảm so với mẫu đối chứng sẽ biểu hiện khả năng ức chế quá trình

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

chứng. Cường độ màu sẽ tỷ lệ thuận với nồng độ MDA. Lượng MDA trong

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

phải ít hơn mẫu đối chứng, tức mật độ quang mẫu thử phải thấp hơn mẫu

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

N

Ơ

H

N

N: số lần lặp lại thí nghiệm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Độ lệch chuẩn (S2) [9], [12]

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 3

H Ư

N

90%, đun cách thủy 15 phút, lọc dịch chiết bằng giấy lọc. Dùng dịch chiết này

Tiến hành:

10 00

B

● Quan sát hiện tượng tạo bọt

TR ẦN

để làm phản ứng.

Lấy 5ml nước cất cho vào ống nghiệm, thêm vào vài giọt dịch chiết

Ó

A

trên, lắc mạnh trong 1 phút.

Í-

H

Kết quả: cột bọt tan sau 5 phút.

-L

Kết luận: âm tính

Đ

ÀN

TO

ÁN

● Phản ứng với H2SO4 đặc Lấy 5ml dịch chiết cồn ở trên cho vào ống nghiệm, cô cách thủy đến

khô thu được cắn. Nhỏ vào cắn này vài giọt H2SO4 đặc.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Lấy 5g bột dược liệu, cho vào bình nón 50 ml thêm vào 30 ml EtOH

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ

Chiết xuất:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

ẠO

3.1.1 Định tính Saponin

IỄ N D

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.1. Định tính các nhóm chất hữu cơ chính trong hạt đậu tương

U Y

N

H

Ơ

N

THỰC NGHIỆM - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

Kết quả: không chuyển màu.

Kết luận: phản ứng âm tính.

3.1.2 Định tính Flavonoid

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chiết xuất:

Cho vào ống nghiệm nhỏ 1ml dịch chiết, thêm vài giọt dung dịch

H

Ó

A

NaOH 10%.

-L

Í-

Kết quả: dịch cho màu vàng đậm lên.

ÁN

Kết luận: phản ứng dương tính

IỄ N

Đ

ÀN

TO

+ Phản ứng với hơi NH4OH Lấy một tờ giấy lọc, khoanh tròn 2 vị trí để nhỏ dịch chiết. Nhỏ dịch

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

B

10 00

+ Phản ứng với NaOH 10%

TR ẦN

Kết luận: phản ứng âm tính. ● Phản ứng với kiềm

N

H Ư

Kết quả: dịch không thấy chuyển màu.

G

kim loại. Nhỏ vào từng giọt HCl đậm đặc (3-5 giọt).

ẠO

Lấy vào ống nghiệm nhỏ 1ml dịch chiết. Thêm vào một ít bột magnesi

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

● Phản ứng Cyanidin

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

.Q

Tiến hành:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

dụng để tiến hành các phản ứng định tính.

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

H

đun sôi cách thủy trong 5 phút, lọc dịch chiết qua giấy lọc. Dịch thu được sử

N

Lấy 5g bột đậu tương cho vào bình nón 50 ml, thêm 20 ml EtOH 90%,

chiết vào khoảng đã đánh dấu, sau đó hơ khô. Làm như vậy cho đến khi mỗi vòng hết 0,5ml dịch chiết. Hơ 1 khoanh tròn có dịch chiết lên miệng lọ amoniac, đối chiếu với khoanh tròn còn lại không hơ.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả: khoanh tròn hơ amoniac có màu vàng đậm hơn khoanh không

Ơ

N

hơ.

U Y .Q

H Ư

N

Kết luận: phản ứng dương tính.

TR ẦN

3.1.3 Định tính tanin Chiết xuất:

B

Lấy 2g bột đậu tương cho vào bình nón, thêm 10ml nước cất, đun cách

10 00

thủy 5 phút. Lọc lấy dịch chiết qua giấy lọc. Dịch thu được dùng để tiến hành

H

Ó

Tiến hành:

A

thử phản ứng.

-L

Í-

● Phản ứng với chì acetat 10%

ÁN

Lấy 1ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm vào vài giọt chì acetat

Đ

ÀN

TO

10%.

Kết quả: không có tủa.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Đ

Kết quả: cho màu xanh đen.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

5%.

IỄ N D

TP

Lấy 1ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm 5 giọt dung dịch FeCl3

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

● Phản ứng với thuốc thử (TT) FeCl3 5%

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Kết luận: phản ứng dương tính.

Kết luận: phản ứng âm tính. ● Phản ứng với gelatin 1% Lấy 1ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm vào vài giọt gelatin 1%.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả: không có tủa.

H

Ơ

N

Kết luận: phản ứng âm tính.

.Q

N

G

Tiến hành:

H Ư

Lấy 1ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, cô cách thủy đến khô. Cho vào

TR ẦN

0,5 ml anhydrid acetic, lắc kỹ. Nghiêng thành ống nghiệm 45o, nhỏ từ từ H2SO4 đặc theo thành ống nghiệm để dịch lỏng trong ống nghiệm chia thành

B

2 lớp.

10 00

Kết quả: mặt phân cách có màu hồng.

Ó

A

Kết luận: phản ứng dương tính.

Í-

H

3.1.5 Định tính caroten

-L

Chiết xuất

ÁN

Lấy 5g bột đậu tương cho vào bình cầu, thêm 20ml ether ethylic, đun hồi

Đ

ÀN

TO

lưu cách thủy 10 phút. Lọc lấy dịch chiết để tiến hành thử định tính.

Tiến hành:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

Đ

định tính.

IỄ N D

ẠO

cách thủy trong 5 phút, lọc lấy dịch chiết. Dùng dịch chiết này để tiến hành

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Lấy 2g bột đậu tương cho vào bình nón, thêm vào 10ml ether dầu hỏa, đun

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Chiết xuất:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

3.1.4 Định tính Sterol

Lấy 3ml dịch chiết vào ống nghiệm, cô cách thủy cho bốc hơi hết dung môi. Nhỏ vào cắn vài giọt H2SO4 đặc.

Kết quả: dịch có màu xanh.

Kết luận: phản ứng dương tính.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.1.6 Định tính polysaccharid

10 00

B

3.1.7 Định tính đường khử

TR ẦN

Kết luận: phản ứng âm tính.

Chiết xuất:

A

Cho vào bình nón 2g bột dược liệu, thêm 10ml nước cất, đun cách thủy

H

Ó

trong 10 phút, lọc lấy dịch chiết để thử phản ứng định tính.

-L

Í-

Tiến hành:

ÁN

Lấy 5ml dịch chiết, thêm vào 5 giọt thuốc thử Fehling A và 5 giọt

Đ

ÀN

TO

thuốc thử Fehling B, lắc đều. Đun sôi trong vài phút Kết quả: có tủa đỏ gạch ở đáy ống nghiệm.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

Kết quả: màu sắc 2 ống như nhau.

N

G

- ống 2: lấy 5ml nước cất, thêm vào 3 giọt thuốc thử Lugol

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ

- ống 1: lấy 5ml dịch chiết, thêm vào 3 giọt thuốc thử Lugol

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

Lấy 2 ống nghiệm:

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Tiến hành:

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

U Y

thủy trong 10 phút. Lọc bằng giấy lọc lấy dịch chiết để thử phản ứng.

H

Lấy 5g bột đậu tương cho vào bình nón, thêm vào 15ml nước cất đun cách

Ơ

N

Chiết xuất:

Kết luận: phản ứng dương tính.

3.1.8 Định tính acid amin Chiết xuất:

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Lấy 5g bột đậu tương cho vào bình nón, thêm 10ml nước cất, đun cách

Ơ

N

thủy trong 10 phút. Lọc nóng lấy dịch chiết để thử phản ứng.

H

Tiến hành:

Đ

Kết luận: phản ứng dương tính.

N

G

3.1.9 Định tính chất béo

H Ư

Chiết xuất:

TR ẦN

Lấy 5g bột đậu tương cho vào bình nón, thêm vào 10ml CHCl3, đun cách thủy trong vài phút. Lọc lấy dịch chiết để thử định tính.

10 00

B

Nhỏ 1 giọt dịch chiết này lên một tờ giấy lọc và hơ nóng cho bay hơi hết dung môi.

H

Ó

A

Kết quả: có vết trong mờ trên giấy lọc.

-L

Í-

Kết luận: phản ứng dương tính.

ÁN

3.1.10 Định tính acid vô cơ

TO

Chiết xuất:

tiếp vài phút. Lọc lấy dịch chiết, để nguội. Dùng dịch này để thử phản ứng.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Lấy 1g bột đậu tương cho vào ống nghiệm, thêm 10ml nước, đun sôi trực

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

TP

Kết quả: dịch cho màu tím.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

0,1% . Đun sôi khoảng 2 phút.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Lấy 5ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm 5 giọt thuốc thử Ninhydrin

Cho dịch chiết vào ống nghiệm. Thêm vào ống nghiệm một ít bột Na2CO3.

Kết quả: không thấy có bọt khí bay lên.

Kết luận: phản ứng âm tính.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kết quả định tính các nhóm chất hữu cơ có trong hạt đậu tương bằng

phản ứng hóa học được thể hiện ở bảng 3.1.

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.1 Kết quả định tính sơ bộ các nhóm chất trong hạt đậu tương Kết quả

_

ẠO

Flavonoid

Đ

2

++

++

H Ư

Phản ứng với FeCl3 5%

N

G

Phản ứng với hơi NH4OH

Có

Phản ứng với FeCl3 5%

_

Phản ứng vớichì acetat 10%

_

TR ẦN

3

B

Tanin

_

Phản ứng Libermann

+

Có

Phản ứng với H2SO4 đặc

+

Có

Phản ứng với TT Lugol

_

Không

10 00

Sterol

5

Caroten

6

Polysaccharid

-L

Đường khử

Phản ứng với TT Fehling

+++

Có

8

Acid amin

Phản ứng với TT Ninhydrin0,1%

+++

Có

9

Chất béo

Tạo vết trên giấy lọc

+++

Có

10

Acid vô cơ

Phản ứng với Na2CO3

_

Không

Đ

ÀN

TO

ÁN

7

Í-

H

Ó

Không

Phản ứng với dung dịch gelatin

A

4

++

Chú thích: - phản ứng âm tính ++ phản ứng dương tính rõ

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

N https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Phản ứng Cyanidin

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

_

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Phản ứng với H2SO4 đặc

U Y

Không

Phản ứng với NaOH 10%

IỄ N D

Saponin

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1

_

N

Phản ứng tạo bọt

Kết luận

Ơ

Phản ứng

H

Tên nhóm chất

.Q

STT

+ phản ứng dương tính +++ phản ứng dương tính rất rõ

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

U Y

thấy hạt đậu tương có một số thành phần cơ bản: flavonoid, sterol, caroten,

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

nhóm isoflavon nên khi định tính nhóm chất này với các phản ứng chung của

H Ư

N

flavonoid thì cho kết quả dương tính, nhưng khi thực hiện phản ứng Cyanidin thì phản ứng âm tính. Điều này phù hợp với tài liệu của R.R Paris và H.

10 00

3.2 Chiết xuất isoflavonoid

B

nghiên cứu có chứa flavonoid.

TR ẦN

Moyse [14]. Do vậy có thể sơ bộ kết luận là trong hạt đậu tương mà chúng tôi

A

3.2.1 Chiết xuất isoflavonoid bằng phương pháp hồi lưu

H

Ó

3.2.1.1 Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết

-L

Í-

- Quy trình chiết xuất isoflavonoid bằng phương pháp hồi lưu được tiến

ÁN

hành với 3 dung môi là MeOH, EtOH 90% và ethylacetat.

- Cân 40 g bột đậu tương (độ ẩm 3,65%), làm ẩm dược liệu bằng dung

chiết xuất. Tiến hành chiết hồi lưu trong 3 giờ.

D

IỄ N

Đ

ÀN

môi chiết xuất. Cho dược liệu vào bình chiết hồi lưu (500 ml) và dung môi

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- Theo nhiều tài liệu nghiên cứu thì flavonoid trong hạt đậu tương thuộc

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

acid amin và chất béo là những chất cho phản ứng dương tính rõ nhất.

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

đường khử, acid amin và chất béo. Trong các thành phần này thì đường khử,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

- Kết quả định tính các nhóm chất hữu cơ bằng phản ứng hóa học cho

Ơ

N

*Nhận xét:

- Các mẫu dược liệu với mỗi dung môi được tiến hành 3 lần. Kết quả thu được là trị số trung bình cộng của 3 lần chiết.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Bảng 3.2. trình bày hàm lượng cắn và hiệu suất chiết bằng 3 dung môi

H

Bảng 3.2: Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết hồi lưu bằng 3 dung

0,96

2,49

3,19

1,05

2,72

3,37

0,98

2,54

1

1,66

4,31

1,39

3,61

2

1,56

4,05

1,28

3

1,81

4,70

N TR ẦN

4,35

3,39

2,58

10 00

B

TB

1,30

H

Ó

A

*Nhận xét:

Í-

- Khi chiết xuất isoflavonoid bằng 3 dung môi MeOH, EtOH 90% và

-L

EtOAc thu được khối lượng cắn rất khác nhau. Chiết bằng MeOH cho hàm

ÁN

lượng cắn lớn nhất chiếm 4,35 %. Chiết bằng dung môi ethylacetat cho hàm

Đ

ÀN

TO

lượng cắn thấp nhất là 2,58%.

3.2.1.2 Định tính dịch chiết MeOH, EtOH và EtOAc

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

(%)

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Hiệu suất

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

.Q

TP

mcắn (g)

(%)

H Ư

(%)

Hiệu suất

ẠO

mcắn (g)

Dung môi EtOAc

Đ

Hiệu suất

mcắn (g)

IỄ N D

Dung môi EtOH 90%

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

STT

N

môi MeOH, EtOH 90% và EtOAc Dung môi MeOH

Ơ

N

MeOH, EtOH 90% và ethylacetat.

Để khảo sát các nhóm chất thu được khi chiết xuất hạt đậu tương bằng 3 dung môi khác nhau, chúng tôi đã tiến hành định tính 4 nhóm chất cho phản ứng dương tính rõ nhất khi tiến hành định tính các nhóm chất hữu cơ có trong hạt đậu tương, đó là isoflavonoid, chất béo, acid amin và đường.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Cân 0,1 g cắn mỗi loại dịch chiết thu được ở trên, hòa trong 5 ml EtOH

Ơ

H

đường như mục 3.1. Kết quả định tính isoflavonoid, chất béo, acid amin và

N

90%. Tiến hành định tính 4 nhóm chất isoflavonoid, chất béo, acid amin và

.Q

Chất béo +

Đường

Isoflavonoid

2

MeOH

++

3

EtOAc

+ +

++

++

++

+++

+

+

++

kết quả dương tính rõ

kết quả dương tính rất rõ

H

Ó

A

+++

*Nhận xét:

+++

kết quả dương tính

10 00

Ghi chú:

++

H Ư

++

TR ẦN

EtOH 90%

B

1

N

G

Acid amin

Đ

Dịch chiết

-L

Í-

- Dung môi chiết là EtOH thì cho phản ứng dương tính rõ nhất đối với

ÁN

nhóm isoflavonoid.

TO

- Dung môi MeOH cho phản ứng dương tính với isoflavonoid kém hơn

dung môi MeOH hòa tan nhiều nhóm chất hơn dung môi EtOH.

D

IỄ N

Đ

ÀN

so với dung môi là EtOH nhưng lại cho lượng cắn nhiều nhất, do vậy có thể

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

STT

ẠO

Nhóm chất

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

đường của 3 dịch chiết EtOH 90%, MeOH và EtOAc từ hạt đậu tương

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Bảng 3.3: Kết quả định tính isoflavonoid, chất béo, acid amin và

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

đường của 3 dịch chiết được trình bày ở bảng 3.3.

- Từ kết quả định tính bằng phản ứng hóa học và hiệu suất chiết cho thấy các isoflavonoid trong hạt đậu tương có khả năng tan tốt trong các dung môi phân cực là EtOH, MeOH, kém tan trong các dung môi ít phân cực hơn như

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

EtOAc. Do vậy, chúng tôi sơ bộ kết luận là dung môi EtOH 90% có khả năng

Ơ

N

chiết tốt nhất trong 3 dung môi đã khảo sát.

U Y .Q

dung môi có độ phân cực tương đương là MeOH; EtOH dễ kiếm, rẻ tiền hơn

G

Đ

các dung môi khác; EtOH thân thiện, ít gây độc hại. Do vậy, chúng tôi lựa

H Ư

N

chọn dung môi EtOH để tiến hành nghiên cứu chiết xuất.

TR ẦN

Để khảo sát khả năng tan của các isoflavonoid trong hạt đậu tương cũng như khả năng hòa tan các nhóm chất khác, đặc biệt là 3 nhóm có hàm lượng lớn theo các nồng độ cồn khác nhau. Chúng tôi tiến hành khảo sát chiết

10 00

B

xuất với 3 độ cồn khác nhau là EtOH 40%, 70% và 90%.

Tiến hành: lấy 100 g bột đậu tương (độ ẩm 3,65%), làm ẩm với dung

Ó

A

môi chiết, để yên trong 30 phút. Cho vào bình chiết ngấm kiệt, thêm 250ml

Í-

H

EtOH, ngâm trong 24h ở nhiệt độ phòng (25oC) rồi rút dịch chiết lần 1. Thêm

-L

tiếp 130 ml EtOH ngâm trong 24 h rồi rút dịch chiết rồi rút dịch chiết lần 2.

ÁN

Tiếp tục thêm 120ml EtOH, ngâm trong 24h rồi rút dịch chiết lần 3. Gộp cả 3

TO

dịch chiết thu được đem cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm ở 50ºC. Cắn

Chúng tôi đã tiến hành khảo sát chiết xuất 2 lần với 3 độ cồn như trên.

Kết quả được trình bày ở bảng 3.4.

D

IỄ N

Đ

ÀN

được làm khô trong bình hút ẩm.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

một số ưu điểm: khi chiết bằng EtOH cho lượng isoflavonoid lớn hơn so với

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Từ các kết quả trên, chúng tôi thấy việc sử dụng dung môi EtOH có

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.2.1.1 Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

3.2.2 Chiết xuất isoflavonoid bằng phương pháp ngấm kiệt

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.4: Hàm lượng cắn và hiệu suất chiết bằng phương pháp

(%)

Hiệu suất (%)

16,83

17,47

7,55

7,84

2

18,02

18,70

16,32

16,94

ẠO

7,31

G

Đ

7,04

18,85

17,20

TR ẦN

H Ư

7,55

* Nhận xét:

10 00

B

- Khi chiết bằng phương pháp ngấm kiệt với 3 độ cồn khác nhau thì lượng cắn thu được khi chiết bằng EtOH 40% và EtOH70% không khác nhau

Ó

A

nhiều, còn dung môi EtOH 90% thì cho lượng cắn ít nhất.

Í-

H

3.2.1.2 Định tính dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90%

-L

4 nhóm chất là: chất béo, đường, acid amin và isoflavonoid được định

Cân 0,1 g cắn mỗi loại, hòa tan với 5 ml EtOH cho tan hết, dùng dịch

này định tính 4 nhóm chất như mục 3.1. Kết quả định tính được trình bày ở bảng 3.5.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

tính bằng phản ứng hóa học với 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90%.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

19,01

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

18,32

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

mcắn (g)

1

TB

H

N

Hiệu suất

N

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

(%)

mcắn (g)

U Y

Hiệu suất

mcắn (g)

DM EtOH 90%

.Q

STT

DM EtOH 70%

TP

DM EtOH 40%

Ơ

N

ngấm kiệt với dung môi EtOH

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.5: Kết quả định tính 4 nhóm chất chính của 3 dịch chiết

Ơ

N

EtOH 40%, 70% và 90% từ hạt đậu tương

EtOH 70%

++

+

++

3

EtOH 90%

+++

++

Đ

+

+++ ++

+++

kết quả dương tính

kết quả dương tính rất rõ

TR ẦN

++ kết quả dương tính rõ

N

+

H Ư

- kết quả âm tính

*Nhận xét:

10 00

B

Theo kết quả định tính cho thấy:

- Ở 3 độ cồn khác nhau, khả năng chiết xuất các nhóm chất chính là acid

Ó

A

amin, chất béo, đường và flavonoid là khác nhau.

H

- Chỉ có dung môi EtOH 40% không chiết được chất béo, còn 2 dung

-L

Í-

môi có độ cồn cao hơn đều chiết chất béo. Dung môi EtOH 40% cho

ÁN

phản ứng dương tính với đường rõ nhất và phản ứng dương tính yếu

TO

với nhóm flavonoid.

Đ

ÀN

- Dung môi EtOH 90% cho phản ứng dương tính với acid amin và chất béo rõ nhất.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

2

+

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

+++

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

-

TP

+

Flavonoid

ẠO

EtOH 40%

N

Đường

U Y

Chất béo

.Q

Acid amin 1

Ghi chú:

IỄ N D

Mẫu dịch chiết

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

STT

H

Nhóm chất

- Cắn từ dịch chiết EtOH 70% cho phản ứng rõ nhất với nhóm chất flavonoid. Tuy nhiên nhóm chất acid amin và đường cũng cho phản ứng dương tính rõ trong dịch chiết này.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Để làm giàu nhóm chất isoflavonoid trong dịch chiết EtOH, chúng tôi

Ơ

N

tiến hành loại tạp chất béo, acid amin và đường.

N

G

Tiến hành: Hòa tan cắn 2 dịch chiết EtOH 70% và 90% với 100ml

H Ư

nước cất đun ấm, khuấy đều. Dịch này cho vào bình chiết, mỗi lần chiết với

TR ẦN

50ml n-hexan. Chiết nhiều lần cho đến khi hết chất béo.

Dịch chiết n-hexan được thử xem có còn chất béo không bằng cách như

B

sau: nhỏ một vài giọt dịch chiết n-hexan lên tờ giấy lọc, đem hơ nóng và quan

10 00

sát tờ giấy lọc. Nếu tờ giấy lọc có vết trong mờ thì dịch chiết có chất béo.

A

Tiếp tục chiết tiếp với n-hexan đến khi tờ giấy lọc không còn vết như thế nữa.

H

Ó

Dịch chiết đã loại chất béo với n-hexan được cất loại dung môi dưới áp

Í-

suất giảm ở nhiệt độ dưới 60oC, thu được cắn, cắn được sấy khô trong bình

-L

hút ẩm. Lượng cắn thu được sau khi sấy khô của dịch chiết EtOH 90% là

TO

ÁN

mEtOH90 = 6,36g, của dịch chiết EtOH 70% là mEtOH70 = 15,95g.

Đ

ÀN

3.2.3.2 Loại đường và acid amin

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

chúng tôi không tiến hành loại chất béo.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ẠO

70% và 90% thu được ở trên. Dịch chiết EtOH 40% không có chất béo nên

IỄ N D

U Y .Q

Chúng tôi tiến hành loại chất béo bằng n-hexan với dịch chiết EtOH

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.2.3.1 Loại chất béo

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

3.2.3 Quy trình loại chất béo, acid amin và đường

Chúng tôi tiến hành đồng thời loại đường và acid amin bằng dung môi MeOH có điều chỉnh pH bằng HCl 10%.

Cách tiến hành: Cắn của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và 90% sau khi loại chất béo, được hòa tan trong 100 ml MeOH và điều chỉnh về pH = 6 bằng

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

dung dịch HCl 10%, khuấy đều. Lọc, thu dịch lọc. Cất thu hồi dung môi

Ơ

N

MeOH thu được cắn. Cắn được làm khô trong bình hút ẩm.

H

Cắn thu được sau khi làm khô có khối lượng mEtOH40 = 3,26g, mEtOH70 =

Bảng 3.6: Hàm lượng cắn của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và

N

G

Đ

90% sau khi loại chất béo, acid amin và đường

H Ư

Khối lượng (g)

trước khi loại tạp

Sau khi loại

(g)

chất béo (g)

TR ẦN

Dịch chiết

EtOH 40%

2

EtOH 70%

3

EtOH 90%

Sau khi loại đường, acid amin (g)

18,85

-

3,26

16,32

15,95

5,46

7,55

6,36

4,65

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

1

10 00

B

TT

Sau đó chúng tôi kiểm tra 4 nhóm chất isoflavonoid, chất béo, acid

90% sau khi đã loại tạp chất béo, acid amin và đường. Kết quả định tính được trình bày ở bảng 3.7.

D

IỄ N

Đ

ÀN

amin và đường bằng phản ứng hóa học với 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

TP

90% sau khi loại chất béo, acid amin và đường.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Bảng 3.6 trình bày hàm lượng cắn của 3 dịch chiết EtOH 40%, 70% và

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

5,46g và mEtOH90 = 4,65g.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.7: Kết quả định tính 4 nhóm chất chính của 3 dịch chiết EtOH

N

40%, 70% và 90% từ hạt đậu tương sau khi đã loại chất béo, acid amin

H

Ơ

và đường

++

2

EtOH 70%

+

-

ẠO

3

EtOH 90%

+

-

+++

+

++

G

Đ

++

+++

kết quả dương tính kết quả dương tính rất rõ

10 00

B

*Nhận xét:

N

H Ư

++ kết quả dương tính rõ

+

- Chất béo trong 2 cắn từ dịch chiết EtOH 70% và 90% đã được loại

Ó

A

hết.

H

- Nhóm acid amin vẫn còn trong dịch chiết, tuy nhiên với thuốc thử cho

-L

Í-

màu tím rất nhạt chứng tỏ phần lớn acid amin đã được loại bỏ.

ÁN

- Dịch chiết EtOH 70% cho phản ứng dương tính rõ nhất với nhóm

Đ

ÀN

TO

isoflavonoid tuy nhiên vẫn còn đường.

- Dịch chiết EtOH 90% có chứa ít đường hơn cả nhưng lượng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

+

+

Flavonoid MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

EtOH 40%

- kết quả âm tính

U Y

Đường

.Q

Chất béo

TP

Acid amin 1

Ghi chú:

IỄ N D

Mẫu dịch chiết

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

STT

N

Nhóm chất

isoflavonoid không nhiều như dịch chiết EtOH 70%.

Qua quá trình kiểm tra dịch chiết bằng cách tiến hành định tính bằng phản ứng hóa học 4 nhóm chất chính có trong hạt đậu tương là isoflavonoid,

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

chất béo, acid amin và đường trước và sau khi loại tạp, chúng tôi đã giám sát

Ơ

N

được quá trình chiết xuất và làm giàu isoflavonoid.

H

Kết quả cho thấy sử dụng cồn EtOH 70% để chiết xuất isoflavonoid là

N

G

Đ

môi EtOH 70% là có ưu điểm hơn cả:

H Ư

- Lượng isoflavonoid chiết ra là nhiều nhất.

với chiết bằng EtOH 90%.

TR ẦN

- Lượng chất béo và acid amin hòa tan trong dịch chiết này thấp hơn so

10 00

B

- Lượng đường ít hơn so với dịch chiết EtOH 40%.

Do vậy chúng tôi xây dựng quy trình chiết xuất isoflavonoid toàn phần

H

Ó

A

bằng dung môi EtOH 70%.

-L

Í-

- Quy trình chiết xuất

ÁN

Lấy 100 g bột đậu tương (hàm ẩm 3,65%), làm ẩm với EtOH 70%, để yên trong 30 phút. Cho vào bình chiết ngấm kiệt, thêm 250ml dung môi,

Đ

ÀN

TO

ngâm trong 24 h ở nhiệt độ phòng (25oC), rút dịch chiết lần thứ nhất. Thêm

tiếp 130ml dung môi, ngâm trong 24h rồi rút dịch chiết lần 2. Tiếp tục thêm

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Từ các kết quả trên, chúng tôi nhận thấy khả năng chiết xuất của dung

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

tương

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.3. Xây dựng quy trình chiết xuất và làm giàu isoflavonoid từ hạt đậu

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

hợp lý nhất trong 3 độ cồn được khảo sát chiết xuất.

120ml dung môi, ngâm trong 24h rồi rút dịch chiết lần 3. Gộp cả 3 dịch chiết thu được lọc qua giấy lọc, đem cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm ở 50ºC đến 1/3 thể tích. Tiến hành loại chất béo bằng n-hexan đến khi thử không còn vết dầu. Dịch chiết tiếp tục được cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm cho

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

đến cắn. Cắn thu được hòa tan trong 50 ml MeOH, điều chỉnh pH bằng HCl

H

Ơ

thu được cắn. Cắn được rửa với nước cất nhiều lần. Cắn thu được, được làm

N

10% tới pH = 6. Lọc, thu lấy dịch lọc. Loại bỏ dung môi MeOH của dịch lọc,

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

từ hạt đậu tương.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Hình 3.1 trình bày tóm tắt quy trình chiết xuất và làm giàu isoflavonoid

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

khô bằng bình hút ẩm.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ơ H

TR ẦN

H Ư

N

2. Chiết với n-hexan đến khi hết chất béo

Dịch chiết EtOH đã loại chất béo

Cắn EtOH

A

10 00

B

Loại dung môi EtOH

Cắn isoflavonoid toàn phần

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

1. Hòa tan cắn với MeOH 2. Điều chỉnh pH = 6 với HCl 10% 3. Lọc thu dịch chiết 4. Cất thu hồi thu được cắn 5. Rửa cắn với nước 6. Làm khô cắn

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Đ

1. Cất thu hồi dung môi đến V=1/3

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Dịch chiết EtOH

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Bã dược liệu

ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U Y

N

Ngấm kiệt, to = 25oC 24h x 3 lần

EtOH 70% 500ml

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Bột đậu tương 100g

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Hình 3.1: Sơ đồ quy trình chiết xuất và làm giàu isoflavonoid từ hạt đậu tương

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.4 Phân lập và nhận dạng isoflavonoid

Ơ

N

Chúng tôi sử dụng cắn isoflavonoid toàn phần thu được theo quy trình

H

chiết xuất với EtOH 70% ở trên để tiến hành phân lập và nhận dạng các

Đ

làm dịch chấm sắc ký.

CHCl3 – MeOH [9 : 1]

N

G

- Hệ dung môi khai triển:

H Ư

- Bản mỏng được khai triển theo chiều từ dưới lên trong bình sắc ký đã

TR ẦN

bão hòa dung môi.

B

- Sắc ký đồ được quan sát ở ánh sáng thường, UV 254 và UV 365nm.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

Kết quả sắc ký đồ được trình bày ở hình 3.2 và bảng 3.8.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

- Dịch chấm sắc ký: cân 0,1g cắn EtOH 70% hòa tan trong 1 ml MeOH

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.4.1. Định tính bằng sắc ký lớp mỏng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

isoflavonoid có trong hạt đậu tương.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.8: Giá trị Rf của các vết trên

0,81

2

Ơ

1

H

Rf

0,55

N

0,49

6

0,42

B

TR ẦN

H Ư

5

Í-

H

Nhận xét:

Ó

A

10 00

Hình 3.2: Sắc ký đồ dịch chiết EtOH70% đã loại tạp (UV 254 nm)

-L

Trên sắc ký đồ của dịch chiết hạt đậu tương trong EtOH 70% khi quan

TO

ÁN

sát dưới UV 254 nm thấy có 6 vết màu xanh đen.

Chúng tôi sử dụng 2g cắn dịch chiết EtOH 70% đã loại tạp ở trên để tiến hành phân lập các isoflavonoid.

D

IỄ N

Đ

ÀN

3.4.2. Phân lập isoflavonoid

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

0,71

G

4

ẠO

3

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

0,75

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Vết

4 5 6

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1 2 3

.Q

N

sắc ký đồ hình 3.4

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chuẩn bị cột sắc ký: Cột thuỷ tinh có khoá và nút mài, đường kính

N

4cm, chiều dài 35cm, rửa sạch, sấy khô, cố định trên giá theo chiều thẳng

H

Ơ

đứng.

- Nhồi cột: Cho một lượng vừa đủ hỗn hợp dung môi rửa giải vào

G

Đ

silicagel đã hoạt hóa, phân tán đều silicagel trong cốc có mỏ, loại hết bọt

H Ư

N

khí rồi đổ thành dòng từ từ vào thành cột vừa đổ vừa gõ nhẹ. Rửa thành cột bằng dung môi rửa giải. Ổn định cột bằng cách vừa mở khoá cột cho dung

TR ẦN

môi chảy vừa dùng bơm áp lực dồn dịch xuống cho đến khi lượng silicagel trên cột nén xuống ở mức không đổi. Cho lượng dịch chảy đến khi cách bề

10 00

B

mặt silicagel khoảng 3mm, khoá cột và nhồi cắn.

- Đưa cắn lên cột: hòa tan 2g cắn bằng một lượng tối thiểu dung môi

Ó

A

rửa giải, cho một ít silicagel đã được hoạt hóa vào trộn đều, bốc hơi hết

H

dung môi đến khi bột cắn đều, khô mịn và tơi. Nhồi cắn lên cột và cho thêm

ÁN

môi.

-L

Í-

một ít cát sạch (dày khoảng 3mm) để cắn không bị xáo trộn khi cho dung

TO

- Rửa giải: Dùng bơm áp lực nén dịch rửa giải xuống. Dung dịch rửa

D

IỄ N

Đ

ÀN

giải được hứng vào các ống nghiệm 10ml và được kiểm tra bằng sắc ký lớp mỏng, khai triển với bản mỏng silicagel GF254 hệ dung môi CHCl3 - MeOH

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

TP

Dung môi rửa giải: CH2Cl2 : MeOH (100 : 5)

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

110oC trong 1h. Nhồi cột theo phương pháp nhồi cột ướt.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Chất nhồi cột: 50g silicagel (Merck,cỡ hạt 60µm) được hoạt hoá ở

[9:1].

- Kết quả: Dịch rửa giải trong các ống nghiệm có số vết có Rf giống nhau được gộp lại với nhau thành một phân đoạn, kết quả thu được 2 phân đoạn như sau:

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

+ PĐ1: m = 0,15 g, gồm 3 vết có Rf > 0,7 (Rf = 0,81; 0,75 và 0,71).

U Y

365 nm có huỳnh quang xanh sáng, do đó chúng tôi sơ bộ nhận định đây là

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

H Ư

N

là ĐT4.

TR ẦN

- Thử độ tinh khiết bằng sắc ký lớp mỏng

Tiến hành thử độ tinh khiết của các chất phân lập được bằng sắc ký lớp

10 00

B

mỏng với 2 hệ dung môi có độ phân cực khác nhau: [8:2]

Hệ 2 EtOAc : CHCl3 : HCOOH

[4:5:1]

H

Ó

A

Hệ 1 CHCl3 : MeOH

Í-

Các chất phân lập được khi thử bằng sắc ký lớp mỏng với 2 hệ dung

-L

môi trên thì đều cho một vết duy nhất. Do đó chúng tôi sử dụng các chất này

TO

ÁN

để tiến hành nhận dạng bằng đo phổ khối.

3.4.3 Nhận dạng các isoflavonoid

Đ IỄ N D

G

Đ

ĐT1, ĐT2 và ĐT3. Ở phân đoạn PĐ2 chúng tôi phân lập được 1 chất, ký hiệu

Nhận dạng chất ĐT1

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Kết quả ở phân đoạn PĐ1 chúng tôi phân lập được 3 chất, ký hiệu là

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

TP

và PĐ2 bằng sắc ký cột lần 2 kết hợp với sắc ký lớp mỏng chế hóa.

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

các vết chất isoflavonoid (có hệ nối đôi liên hợp), và tiến hành phân lập PĐ1

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Phân đoạn PĐ1 và PĐ2 khi hơ hơi amoniac và soi dưới ánh sáng UV

Ơ

N

+ PĐ2: m = 0,12 g, gồm 3 vết có Rf = 0,55; 0,49 và 0,42 tương ứng.

Tính chất: - Tinh thể hình kim nhỏ, màu trắng ngà.

- Dễ tan trong MeOH, EtOH, CHCl3.

- Không tan trong nước.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Cho màu vàng đậm với kiềm.

Ơ

H

tương ứng với công thức phân tử là C15H10O4 (M = 254). Tra cứu với dữ liệu

N

Phổ khối (MS – EI) chất ĐT1 (Hình 3.3) cho pic phân tử M+ = 254 m/z,

OH

Hình 3.4: Công thức cấu tạo của Daidzein

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Í-L

O

ÁN TO ÀN Đ

IỄ N D

O

H

Ó

HO

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

A

Hình 3.3: Phổ khối chất ĐT1

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q 10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

phổ các hợp chất tự nhiên, chất ĐT1 được nhận dạng là Daidzein (Hình 3.4).

Nhận dạng chất ĐT2 Tính chất: - Bột vô định hình, màu trắng - Dễ tan trong EtOH, MeOH, khó tan trong Chloroform, n-hexan.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- ĐT2 trong môi trường kiềm cho màu vàng đậm.

N

- Trên sắc ký đồ ĐT2 có huỳnh quang màu xanh sáng dưới ánh sáng

H

Ơ

tử ngoại 365 nm.

D

O

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP ẠO Đ G N H Ư TR ẦN B 10 00 A Ó H Í-L ÁN TO ÀN

HO

CH3O O

IỄ N

Đ

Hình 3.5: Phổ khối chất ĐT2

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

hợp chất tự nhiên, chúng tôi sơ bộ kết luận chất ĐT2 là Glycitein (hình 3.6).

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

với công thức phân tử là C16H12O5 (Hình 3.5). Tra cứu trong thư viện phổ các

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Phổ khối (MS-EI) chất ĐT2 cho pic phân tử M+ = 284 m/z, tương ứng

OH

Hình 3.6: Công thức cấu tạo của Glycitein

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Nhận dạng chất ĐT3

.Q

Đ

Phổ khối (MS-EI) chất ĐT3 cho pic phân tử M+ = 270 m/z, tương ứng

G

với công thức phân tử là C15H10O5 (Hình 3.7). Chúng tôi dự đoán chất ĐT3

H Ư

N

cũng là dẫn chất isoflavonoid vì thực tế trên sắc ký đồ ĐT2 và ĐT3 có Rf rất gần nhau. Do vậy, chúng tôi sơ bộ nhận dạng chất ĐT3 là Genistein (Hình

TR ẦN

3.8). Genistein và Glycitein có cùng khung cấu trúc isoflavonoid, chỉ khác nhau ở vòng A, Genistein có nhóm thế OH ở vị trí C5, còn Glycitein có nhóm

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

thế methoxy (OCH3) ở vị trí C6. Hình 3.8 là cấu trúc của Genistein.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

tử ngoại 365 nm.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

- Trên sắc ký đồ ĐT3 có huỳnh quang màu xanh sáng dưới ánh sáng

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

- ĐT3 trong môi trường kiềm cho màu vàng đậm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

- Dễ tan trong EtOH, MeOH, khó tan trong Chloroform, n-hexan.

N

- Bột vô định hình, màu trắng

H

Ơ

N

Tính chất:

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Hình 3.7: Phổ khối chất ĐT3

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

O

H Ư

N

- Dễ tan trong EtOH, MeOH, khó tan trong Chloroform, n-hexan.

- ĐT4 trong môi trường kiềm cho màu vàng đậm.

TR ẦN

- Phổ khối (ESI-MS) chất ĐT4 có cho pic phân tử [M+H]+ = 417 và [M+Na]+= 439 đơn vị khối, tương ứng với công thức cấu tạo C21H20O9 (M

10 00

B

= 416). Trong các dẫn chất isoflavonoid có trong hạt đậu tương, có chất Daidzin (daidzein glucosid) có cùng khối lượng phân tử và công thức cấu

A

tạo như trên. Kết hợp tính chất lý hóa của daidzin có huỳnh quang màu

H

Ó

xanh đen dưới ánh sáng tử ngoại 254nm, huỳnh quang sáng lên khi hơ bản

Í-

mỏng với amoniac và soi dưới ánh sáng tử ngoại bước sóng 365nm, chúng

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

tôi sơ bộ kết luận chất ĐT4 là daidzin (Hình 3.10).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

- Bột vô định hình, màu trắng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

TP Đ

ẠO

Tính chất:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Nhận dạng chất ĐT4

N

OH

Hình 3.8: Công thức cấu tạo của Genistein

http://daykemquynhon.ucoz.com

H

O

.Q

OH

Ơ

N

HO

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

OH

O

OH

-L

Í-

H

Ó

OH

Đ

ÀN

TO

ÁN

Hình 3.10: Công thức cấu tạo của Daidzin (Daidzein glucosid)

3.6 Hoạt tính chống oxi hóa in vitro của dịch chiết hạt đậu tương theo

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

O

A

10 00

CH2OH O O OH

B

Hình 3.9: Phổ khối chất ĐT4

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

M=439

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q ẠO

M=417

IỄ N D

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

phương pháp DMA - Chuẩn bị dịch thử: chúng tôi sử dụng cắn toàn phần của o Dịch chiết EtOH 40% o Dịch chiết EtOH 70%

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

o Dịch chiết EtOH 70% đã loại chất béo, đường và acid amin như

N

quy trình ở mục 3.3.

H

Ơ

o Dịch chiết EtOH 90%

Mẫu trắng

2 ml Tween 80 2 ml nước cất

1%

1%

TR ẦN

H Ư

N

2 ml Tween 80 2 ml nước cất

0,2 ml FeSO4 10- 0,2 ml FeSO4 10- 0,2 ml FeSO4 10- 0,2 ml FeSO4 103

M

M

3

M

3

M

B

3

2

M

0,6 ml dịch chiết

M

0,6 ml nước cất

2

M

0,6 ml nước cất

-L

Í-

H

Ó

0,6 ml dịch chiết

2

M

A

2

10 00

0,2ml ascorbic10- 0,2ml ascorbic10- 0,2ml ascorbic10- 0,2ml ascorbic10-

ÁN

Tiến hành như trình bày ở phần phương pháp nghiên cứu. Kết quả hoạt

trình bày ở bảng 3.9.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

độ chống oxy hóa của 4 dịch chiết theo phương pháp định lượng MDA được

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Mẫu chứng

Đ

Mẫu trắng

G

Mẫu thử

Mẫu chứng

ẠO

Mẫu thử

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

hỗn hợp gồm 4 mẫu như sau:

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

- Tiến hành thí nghiệm: trong các lọ kín màu nâu cùng loại, cho vào đó

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Cả 4 dịch chiết đều được pha ở nồng độ 1mg/ml.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.9: Kết quả hoạt độ chống oxy hóa của 4 dịch chiết EtOH

Ơ

N

40%, EtOH 70%, EtOH 70% đã làm giàu isoflavonoid và EtOH 90%

EtOH 70% EtOH 90%

0,105

0,145

0,115

0,150

0,119

0,115

0,140

0,119

0,095

0,145

0,185

0,111

0,110

0,140

0,183 ±

0,113 ±

0,107 ±

0,143 ±

0,008

0,006

0,009

0,004

3,68

40,52

43,68

24,73

2

0,195

0,180

0,105

3

0,185

0,185

0,115

4

0,190

0,180

5

0,190

0,175

6

0,190

Giá trị

0,190 ±

thực

0,004

0,100

Đ

0,111

G

0,195

Ó

H

Í-

* Nhận xét:

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Hoạt độ %

A

B

TR ẦN

H Ư

N

0,190

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

0,140

1

10 00

ẠO

TP

isoflavonoid

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

đã làm giàu

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

EtOH 70%

U Y

EtOH 40%

.Q

Chứng

STT

H

MDA. 10-5M

Hoạt độ chống oxy hóa của dịch chiết EtOH 70% làm giàu isoflavonoid là cao nhất, sau đó lần lượt đến dịch chiết ethanol 70%, 90% và thấp nhất là 40%.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.7 Bàn luận

Ơ

N

3.7.1 Về định tính các thành phần chính trong hạt đậu tương

U Y

chất béo, đường, acid amin, sterol, caroten và flavonoid. Trong đó nhóm chất

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

dương tính rõ. Riêng phản ứng Cyanidin chúng tôi thực hiện nhiều lần nhưng

N

G

kết quả đều cho là âm tính. Theo nhiều tài liệu đã nghiên cứu thì các

H Ư

flavonoid trong hạt đậu tương thuộc nhóm isoflavone, mà nhóm chất này có

TR ẦN

kết quả âm tính với phản ứng Cyanidin nên kết quả phản ứng chúng tôi đã tiến hành là phù hợp [14]. Dựa trên định tính bằng phản ứng hóa học và sắc

10 00

B

ký lớp mỏng, chúng tôi kết luận trong hạt đậu tương có chứa các isoflavonoid.

3.7.2 Về chiết xuất isoflavonoid toàn phần

Ó

A

Chúng tôi đã tiến hành khảo sát chiết xuất isoflavonoid toàn phần từ hạt

H

đậu tương bằng 2 phương pháp là chiết hồi lưu và chiết ngấm kiệt. Mỗi

-L

Í-

phương pháp này đều có những ưu nhược điểm riêng. Với mục đích có thể áp dụng kết quả vào thực tế nên đầu tiên chúng tôi lựa chọn phương pháp chiết

ÁN

nóng để khảo sát dung môi cho khả năng chiết các isoflavonoid từ hạt đậu

TO

tương tốt nhất trong số các dung môi đã lựa chọn và dùng dung môi này để

Đ IỄ N D

khảo sát chiết bằng phương pháp ngấm kiệt với khả năng có thể làm trên quy

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

NaOH, NH4OH, FeCl3, và phản ứng Cyanidin thì kết quả là 3 phản ứng đầu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

đặc trưng của nhóm flavonoid mà chúng tôi tiến hành gồm phản ứng với

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

béo, đường, acid amin cho phản ứng dương tính rõ nhất. Với các phản ứng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Theo kết quả định tính cho thấy trong hạt đậu tương có các thành phần:

mô lớn với trang và kỹ thuật đơn giản hơn, dung môi ít bay hơi hơn nên ít độc hại hơn với môi trường.

Chúng tôi tiến hành khảo sát chiết xuất bằng phương pháp ngấm kiệt do phương pháp này có một số ưu nhược điểm:

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

*Ưu điểm:

H

H Ư

N

*Nhược điểm:

TR ẦN

+ Lượng dung môi dùng lớn hơn so với chiết hồi lưu. + Thời gian chiết xuất dài hơn.

10 00

B

Từ kết quả khảo sát của phương pháp chiết hồi lưu cho thấy: các isoflavonoid trong hạt đậu tương tan tốt hơn trong các dung môi có tính phân

A

cực cao là ethanol và methanol. Với dung môi có tính phân cực kém hơn là

H

Ó

ethyl acetat thì khả năng tan của isoflavonoid kém hơn nhưng đồng thời tạp là

Í-

chất kém phân cực như chất béo thì lại có nhiều hơn so với 2 dung môi trên.

-L

Điều này là hoàn toàn phù hợp với nhiều nghiên cứu trước đây đã chỉ ra là các

ÁN

isoflavonoid trong hạt đậu tương tồn tại chủ yếu dưới dạng glycosid có tính

Đ

ÀN

TO

phân cực.

Kết quả định tính bằng phản ứng hóa học cho thấy dung môi ethanol có

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Đ

hơn khi chiết nóng.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ẠO

+ Dung môi ít bị bay hơi ra môi trường nên ít độc hại với môi trường

IỄ N D

.Q

phương pháp chiết hồi lưu.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

+ Khả năng hòa tan của một số tạp chất sẽ ít hơn so với khi sử dụng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

U Y

+ Thiết bị và kỹ thuật chiết đơn giản hơn so với chiết hồi lưu.

Ơ

N

+ Phương pháp này có khả năng thực hiện trên quy mô lớn.

ưu điểm hơn hẳn so với dung môi methanol: khả năng chiết được lượng isoflavonoid lớn hơn, lượng tạp chất ít hơn. Đồng thời ethanol còn có một số ưu điểm hơn methanol là ít độc hại hơn, rẻ tiền hơn, có thể áp dụng cho chiết với khối lương dược liệu lớn. Do vậy chúng tôi đã quyết định lựa chọn dung

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

môi ethanol để tiến hành khảo sát chiết xuất isoflavonoid trong hạt đậu tương

H

Để khảo sát khả năng hòa tan của isoflavonoid và hạn chế các tạp chất

Ơ

N

bằng phương pháp ngấm kiệt.

.Q

Đ

isoflavonoid. Dung môi ethanol 90% thì cho hiệu suất chiết thấp hơn nhưng

G

cũng chứa nhiều chất béo và acid amin nhất. Dung môi ethanol 70% cho hiệu

H Ư

N

suất chiết cao nhất, cho phản ứng dương tính với TT nhóm isoflavonoid mạnh nhất, nhưng trong dịch chiết này lại cho phản ứng dương tính với đường

TR ẦN

nhiều hơn so với dịch chiết ethanol 90%. Như vậy trong 3 nồng độ ethanol lựa chọn để khảo sát thì nồng độ ethanol 70% là cho khả năng chiết tốt nhất.

10 00

B

Do vậy chúng tôi đã lựa chọn dung môi ethanol 70% để tiến hành xây dựng quy trình chiết xuất isoflavonoid toàn phần từ hạt đậu tương. Chúng tôi đã

H

Ó

định.

-L

Í-

Chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu làm giàu dịch chiết isoflavonoid

ÁN

toàn phần bằng cách loại chất béo, đường và acid amin. Quá trình loại 3 nhóm

TO

chất này được giám sát bằng phản ứng hóa học định tính các nhóm chất. Kết

Đ

ÀN

quả cho thấy có thể loại hoàn toàn chất béo bằng dung môi n-hexan; có thể

IỄ N D

A

tiến hành chiết xuất theo quy trình này 3 lần và thấy quy trình cho kết quả ổn

loại được phần lớn đường, acid amin bằng dung môi MeOH được acid hóa.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

40% cho nhiều nhóm chất nhất mà lại cho phản ứng dương tính yếu với nhóm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

như kết quả của quá trình làm giàu isoflavonoid cho thấy: dung môi ethanol

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

các độ ethanol khác nhau là 40%, 70% và 90%. Qua kết quả định tính cũng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

trong hạt đậu tương có thể vào dịch chiết, chúng tôi đã tiến hành khảo sát với

3.7.3 Về phân lập và nhận dạng isoflavonoid Chúng tôi đã phối hợp 2 phương pháp sắc ký phổ biến để phân lập isoflavonoid là sắc ký cột và sắc ký lớp mỏng chế hóa. Trong quá trình phân

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

lập isoflavonoid rất khó lựa chọn được hệ dung môi có khả năng tách các vết

Ơ

H

trúc rất gần nhau và tương tự các chất dạng glycosid cũng có cấu trúc tương

N

rõ, đẹp trên bản sắc ký lớp mỏng vì các chất dạng aglycon isoflavonoid có cấu

.Q

sắc ký cột cho thấy đó là vết gồm có 2 chất. Chính vì lý do đó mà lượng chất

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Quá trình làm giàu dịch chiết isoflavonoid để sau đó tiến hành phân lập

H Ư

N

các isoflavonoid là rất quan trọng. Ban đầu, chúng tôi sử dụng trực tiếp ngay dịch chiết MeOH toàn phần để phân lập bằng sắc ký cột nhưng chúng tôi đã

TR ẦN

không thể tách được isoflavonoid vì một lượng lớn đường, chất béo, acid

B

amin ảnh hưởng trực tiếp đến quá trình phân lập.

10 00

4 isoflavonoid phân lập được và được nhận dạng bằng phân tích phổ khối kết hợp với tính chất lý hóa không phải là các isoflavonoid mới. Đây là

Ó

A

các chất đã được biết, được phân lập từ đậu tương, sắn dây …. Việc phân lập

H

và nhận dạng các chất này quan trọng nhất là khẳng định tính đúng của quy

-L

Í-

trình chiết xuất isoflavonoid toàn phần của chúng tôi đưa ra. Đặc biệt là việc

ÁN

khảo sát dung môi chiết xuất để tìm ra được dung môi chiết xuất chọn lọc

TO

isoflavonoid; và quy trình loại chất béo, đường và acid amin những chất luôn đi kèm trong quá trình chiết xuất isoflavonoid từ hạt đậu tương

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ẠO

lập được.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

chúng tôi phân lập được rất ít chỉ đủ để đo phổ khối để nhận dạng chất phân

3.7.4 Về thử tác dụng chống oxy hóa in vitro

D

IỄ N

Đ

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

ĐT3 trên bản sắc ký đồ (hình 3.2) là 1 vết (vết số 1) nhưng sau khi tách bằng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

tự nhau, chỉ khác nhau ở dẫn chất hydroxyl hay methoxy … Chất ĐT2 và

Từ kết quả xác định hoạt độ chống oxy hóa in vitro với 4 dịch chiết cho thấy: hoạt độ của isoflavonoid trong dịch chiết ethanol 70% đã làm giàu isoflavonoid là cao nhất (43,68%), thấp nhất là dịch chiết ethanol 40%

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

(3,68%). Còn dịch chiết ethanol 70% cũng cho kết quả khá cao (40,52%),

Ơ

H

bước đầu cho chúng tôi thấy mối liên quan giữa dịch chiết có nhiều

N

dịch chiết ethanol 90% cho kết quả ở mức trung bình (24,73%). Kết quả này

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Dịch chiết giàu isoflavonoid có hoạt độ chống oxi hóa cao nhất.

.Q

làm giàu isoflavonoid và chưa làm giàu có hoạt độ chống oxi hóa khác nhau.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

cùng là dịch chiết isoflavonoid từ hạt đậu tương với dung môi ethanol 70% đã

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

isoflavonoid với hoạt độ chống oxi hóa. Kết quả này bước đầu cũng cho thấy

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

H

Ơ

N

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

N

2- Đã tiến hành khảo sát chiết ngấm kiệt với dung môi ethanol ở các nồng

H Ư

độ: 40%, 70% và 90% và lựa chọn được nồng độ ethanol tốt nhất để

TR ẦN

xây dựng quy trình chiết xuất là ethanol 70% với hiệu suất trung bình là 5,44%. Đã xây dựng quy trình chiết xuất và quá trình làm giàu

B

isoflavonoid từ hạt đậu tương.

10 00

3- Đã phân lập bằng sắc ký cột và sắc ký lớp mỏng chế hóa từ dịch chiết isoflavonoid toàn phần được 4 chất tinh khiết. Nhận dạng được 4 chất

Ó

A

đều là isoflavonoid: ĐT1 (daidzein), ĐT2 (genistein), ĐT3 (glycitein)

Í-

H

và ĐT4 (daidzin) bằng phân tích phổ khối kết hợp với tính chất lý hóa

-L

của các chất này.

ÁN

4- Đã xác định được hoạt độ chống oxy hóa của dịch chiết isoflavonoid MDA. Dịch chiết ethanol 70% đã làm giàu isoflavonoid có hoạt độ chống oxy hóa cao nhất (43,68%).

KIẾN NGHỊ

Đ

ÀN

TO

toàn phần từ hạt đậu tương in vitro bằng phương pháp định lượng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Đ

chiết ngấm kiệt là dung môi ethanol.

IỄ N D

ẠO

ethanol, ethyl acetat và lựa chọn được dung môi tối ưu cho khảo sát

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

1- Đã tiến hành khảo sát chiết hồi lưu với 3 dung môi là methanol,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Từ kết quả thu được của đề tài, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:

U Y

N

KẾT LUẬN

Tiếp tục khảo sát các dung môi khác (không độc hại và rẻ tiền) để loại đường và acid amin để làm giàu dịch chiết isoflavonoid toàn phần.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

TÀI LIỆU THAM KHẢO

U Y

dược liệu, tập 1, tr. 279 – 283.

.Q

Đ

sinh, tài liệu dùng cho sinh viên dược năm thứ 3, tr 5,7-8.

G

4. Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học

H Ư

N

5. Đào Đình Thức (2007), Một số phương pháp phổ ứng dụng trong hóa học, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội.

TR ẦN

6. Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương (2004), Viện dược liệu, Những cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, tập 1,

10 00

B

NXB Khoa học và Kỹ thuật, tr. 765 – 768.

7. Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương (2004), Viện

A

dược liệu, Những cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam tập 2,

H

Ó

NXB Khoa học và Kỹ thuật, tr.680-686.

Í-

8. Đỗ Tất Lợi(1999), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y

-L

học, tr. 930 – 932.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

9. Đỗ Trung Đàm (2003), Sử dụng Microsoft Excel trong thống kê sinh học, NXB Y học.

10. Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam – An Illustrated Flora of

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

3. Bộ môn hóa sinh (2006) Trường Đại học Dược Hà Nội, Thực tập hóa

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Dược liệu- Kiểm nghiệm Dược liệu bằng phương pháp hóa học, tr.18.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

2. Bộ môn Dược liệu (2006), Trường Đại học Dược Hà Nội, Thực tập

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

1. Bộ môn Dược Liệu (2006) Trường Đại học Dược Hà Nội, Bài giảng

Ơ

N

1.Tiếng Việt

Việt Nam, tập I. NXB Trẻ, tr.949 11. Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học cây thuốc, NXB Y học, tr. 256-262, 282, 283.

12. Nguyễn Xuân Phách, Nguyễn Thế Minh (1995), Toán thống kê và tin học ứng dụng trong sinh y, dược, NXB Quân đội nhân dân.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

13. Võ Văn Chi (1997), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr. 468.

N

14. R.R. Paris và H. Moyse (1977 ), Giản yếu dược liệu học, NXB Y học

H

Ơ

tr. 177.

U Y

Đ

genistin, Thesis, Wageninger University.

N

G

17. Carlos Hermenegildo (2005), “Effects of Phytoestrogens Genistein

H Ư

and Daidzein on Prostacyclin Production by Human Endothelial Forward, 315, 722-728.

TR ẦN

Cells”, Jounal of Pharmacology And Experimental Therapeutics Fast

B

18. CERHR (2006), NTP-CERHR expert panel report on the reproductive

10 00

and developmental toxicity of genistein, National Toxicity Program, p.

2-7.

H

Grynkiewicz,

Í-

20. G.

Ó

A

19. Genistein/ Phytochemicals data at http://www.phytochemicals.inf.

-L

Quantification

of

H.

Ksycinska

Isoflavones

(2005)

(Why

and

“Chromatographic How)”,

ACTA

ÁN

chromatographica, 15, 33-38.

Đ

ÀN

TO

21. Huang Yanhong, Yuan Peng, Zhang Quinghong, Xin Xiaoyan (2009), “Genistein sesitizes ovarian carcinoma cells to chemotherapy by switching the cell cycle progression in vitro”, Journal of Medical

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

16. Aukje Steensma (2006), Bioavailability of genitein its glycoside

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

2. Tiếng Anh

IỄ N D

.Q

Dược học số 3, tr. 23-26.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

xu hướng nghiên cứu thuốc gắn với quá trình peroxy hóa, Tạp chí

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

15. Nguyễn Quang Thường (1998), Các phương pháp xác định và một số

Colleges of PLA, 24, p. 125-135.

22. J.B. Harborne (1994), Phytochemical Method – A guide to morden techniques of Plant Analysis, Chapman and Hall, p.74-79.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

23. J.B. Harborne (1994), The Flavonoid advances in research, Chapman

H

Ơ

24. J R Udgata and S N Naik (2007), “Soybean isoflavones: remedial

N

and Hall, p.47-162.

U Y

.Q

25. Leigh A Solomon et al (2008), Sensitization of ovarian cancer cells to

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

26. Monika W. Hajnos, Joseph Sherma, Teresa Kowlska (2008), Thin

N

G

layer chromatography in phytochemistry, CRC, 407 – 408.

TR ẦN

Med., 69, p.589-599.

H Ư

27. Paul Cos & all (2003), “Phytoestrogen: recent development”, Planta.

28. Qiju Wu (2003), Purification and antioxidant activities of soybean

B

isoflavones, Thesis, Zhejiang University.

10 00

29. Teresa Cornwell, Wendie Cohick, Ilya Raskin (2004), “Review Dietary phytoestrogen and health”, Phytochemistry, 65, p. 995-1016.

Ó

A

30. USDA, Plant Database 2009.

Í-

H

31. Zhiming Mai et al (2007), “Genistein sensitizes inhibitory effect of

-L

tamoxifen on the growth of estrogen receptor-positive and HER2-

ÁN

overexpressing human breast cancer cells”, Mol Carcinog, 47(7), p.

TO

534-542.

32. Øyvind M. Andersen, Kenneth R. Markham (2006), Flavonoids -

D

IỄ N

Đ

chemistry, biochemistry and applications, Taylor & Francis, p. 371-388

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Research,1:9.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

cisplatin by genistein the role of NF-kappaB, Journal Ovarian

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Indutrial Research, 16, p. 11-18.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

nutraceutical in Indian perspective”, Journal of Sciencetific &

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Í-

-L A

Ó

H B

10 00

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

ẠO

Đ

Phụ lục 2: Phổ khối Glycitein

G

N

Phụ lục 3: Phổ khối Genistein

H Ư

Phụ lục 4: Phổ khối Daidzein

TR ẦN

Phụ lục 1: Phổ khối Daidzein

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

U Y

.Q

N

Ơ

H

N

PHỤ LỤC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

Phụ lục 1: Phổ khối Daidzein

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phụ lục 2: Phổ khối Glycitein

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO

Phụ lục 3: Phổ khối Genistein

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phụ lục 4: Phổ khối chất Daidzin

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial