KIỂM NGHIỆM THUỐC BỘT PHA TIÊM PENICILLIN, VIÊN NANG PARACETAMOL, VIÊN NÉN SULFAGUANIDIN

HỒ SƠ PHÂN TÍCH KIỂM NGHIỆM THUỐC

vectorstock.com/27117080

Ths Nguyễn Thanh Tú eBook Collection

KIỂM NGHIỆM THUỐC BỘT PHA TIÊM PENICILLIN, VIÊN NANG PARACETAMOL, VIÊN NÉN SULFAGUANIDIN, THUỐC TIÊM VITAMIN B12, DÀNH DÀNH (QUẢ), ĐỊNH LƯỢNG DICLOFENAC TRONG VIÊN NÉN PPT VERSION | 2022 EDITION ORDER NOW / CHUYỂN GIAO QUA EMAIL TAILIEUCHUANTHAMKHAO@GMAIL.COM Tài liệu chuẩn tham khảo Phát triển kênh bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đơn vị tài trợ / phát hành / chia sẻ học thuật : Nguyen Thanh Tu Group Hỗ trợ trực tuyến Fb www.facebook.com/DayKemQuyNhon Mobi/Zalo 0905779594

ƠN

OF

L

FI CI A

TỔNG LIÊN ĐOÀN LAO ĐỘNG VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

QU Y

NH

BÁO CÁO KIỂM NGHIỆM THUỐC GVHD: TS. Nguyễn Trường Huy ThS. Nguyễn Trần Vân Anh

DẠ

Y

KÈ

M

Sinh viên: Nguyễn Quỳnh Như

THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, THÁNG 05 NĂM 2020

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

PHIẾU PHÂN TÍCH (Dùng cho kiểm nghiệm viên trả lời nội bộ)

FI CI A

L

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

Số: ________/2020

: Thuốc bột pha tiêm Penicillin G 1000000 IU.

Đơn vị sản xuất

: Công ty cổ phần Hóa – Dược phẩm MEKOPHAR.

Số lô

: 19006TN.

Số đăng ký phân tích

:………………………………………………………..............

Người giao mẫu

: Nguyễn Trần Vân Anh.

Người nhận mẫu

: Nguyễn Quỳnh Như.

Ngày giao mẫu

: 05/05/2020.

Yêu cầu kiểm nghiệm

: Tính chất, độ trong, màu sắc, độ đồng đều khối lượng, pH,

NH

ƠN

OF

Mẫu kiểm nghiệm

mất khối lượng do làm khô. : Tiêu chuẩn cơ sở.

Tình trạng mẫu khi nhận

: Mẫu nguyên vẹn, vẫn còn nguyên niêm phong.

QU Y

Tiêu chuẩn hoặc tài liệu áp dụng Chỉ tiêu 1. Tính chất

Mức chất lượng

Kết quả

Chế phẩm có dạng bột kết tinh trắng có mùi vị

Đạt

KÈ

M

đặc biệt, vị đắng, không lẫn tạp chất, được đựng trong chai thủy tinh đậy kín bằng nút cao su có kiềng nhôm kẹp chặt.

Dung dịch chế phẩm trong và không màu.

3. Độ đồng đều khối lượng

± 10 % so với khối lượng trung bình của thuốc

DẠ

4. pH

Y

2. Độ trong và màu sắc

Đạt Đạt (P = 0,6037 g)

trong chai.

Dung dịch 10 % chế phẩm trong nước không có

Đạt (6,8)

carbon dioxyd có pH từ 5,5 đến 7,5.

5. Mất khối lượng do làm khô Không được quá 1,0 %.

Đạt (0,3 %)

L

KẾT LUẬN: Mẫu thuốc bột pha tiêm Penicillin G 1000000 IU của Công ty cổ phần Hóa –

FI CI A

Dược phẩm MEKOPHAR, số lô 19006TN, hạn dùng 18/02/2022, đạt yêu cầu kiểm tra chất lượng về chỉ tiêu tính chất, độ trong, màu sắc, độ đồng đều khối lượng, pH, mất khối lượng do làm khô theo tiêu chuẩn cơ sở.

Ngày 11 tháng 05 năm 2020

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

ƠN

OF

KIỂM NGHIỆM VIÊN

Nguyễn Quỳnh Như

L

HỒ SƠ PHÂN TÍCH

FI CI A

BÀI 1. THUỐC BỘT PHA TIÊM PENICILLIN G 1.000.000 IU 1. Tính chất

– Đánh giá: Chế phẩm có dạng bột kết tinh trắng có mùi đặc biệt, vị đắng, không lẫn tạp chất, được đựng trong chai thủy tinh đậy kín bằng nút cao su có niềng nhôm kẹp chặt.

OF

– Kết luận: Đạt.

2. Độ trong – Cách tiến hành thí nghiệm

ƠN

+ Pha chuẩn đục: Pha loãng 15 ml hỗn dịch đục gốc thành 1000 ml với nước cất trong bình định mức 1000 ml. Chỉ pha trước khi sử dụng (bảo quản trong thời gian ngắn, tối đa 24 giờ).

NH

+ Pha hỗn dịch đối chiếu I, II:

 Hỗn dịch đối chiếu I: 5 ml dung dịch chuẩn đục + 95 ml nước cất trong bình định mức 100 ml, lắc đều.

QU Y

 Hỗn dịch đối chiếu II: 10 ml dung dịch chuẩn đục + 90 ml nước cất trong bình định mức 100 ml, lắc đều. + Pha mẫu thử: Trộn đều bột chế phẩm từ 5 lọ. Cân 6 g bột chế phẩm cho vào bình định mức 100 ml và thêm nước cất vừa đủ đến vạch để được dung dịch

M

chứa 60 mg/ml.

+ Tiến hành so sánh: Lấy 4 ống nghiệm sạch khô. Cho vào ống 1 hỗn dịch đối

KÈ

chiếu I, ống 2 hỗn dịch đối chiếu II, ống 3 là dung dịch mẫu thử, ống 4 là nước chất. So sánh bằng cách quan sát chất lỏng trong các ống nghiệm từ trên xuống, trên nền đen, dưới ánh sáng khuếch tán ban ngày.

DẠ

Y

– Đánh giá: Độ trong của dung dịch mẫu thử trong ống 3 tương đương với độ trong của nước cất trong ống 4 trong những điều kiện như đã mô tả.

– Kết luận: Đạt.

L

3. Màu sắc

FI CI A

– Cách tiến hành thí nghiệm + Pha dung dịch màu đối chiếu N9:

 Pha dung dịch màu chuẩn N (nâu): 30 ml dung dịch gốc màu vàng + 30 ml dung dịch gốc màu đỏ + 24 ml dung dịch gốc màu xanh + 16 ml dung dịch hydrochloric acid 1 %.

OF

 Pha dung dịch N9: Cho 1 ml dung dịch màu chuẩn N (nâu) và 99 ml dung dịch hydrochloric acid 1 % vào bình định mức 100 ml, lắc đều.  Lưu ý: Chỉ nên pha trước khi sử dụng vì dung dịch màu không bền,

ƠN

dễ bị phân hủy, để lâu sẽ mất màu, khó quan sát chính xác. + Tiến hành so sánh: Lấy 2 ống nghiệm sạch khô. Cho vào ống 1 dung dịch màu đối chiếu N9, ống 2 là dung dịch mẫu thử (dung dịch đã pha để tiến

NH

hành kiểm nghiệm độ trong ở mục 2). So sánh 2 ống nghiệm bằng cách quan sát chất lỏng trong các ống nghiệm trên nền trắng, đèn sáng.

– Đánh giá: Dung dịch mẫu thử ở ống 2 không màu và trong hơn dung dịch màu đối – Kết luận: Đạt.

QU Y

chiếu N9 ở ống 1.

4. Độ đồng đều khối lượng

– Cách tiến hành thí nghiệm

+ Đánh số các lọ thuốc từ 1-20. Loại bỏ nắp nhôm và làm khô bên ngoài. Cân

M

lần lượt khối lượng cả vỏ và thuốc của từng lọ chế phẩm (mvỏ + bột thuốc). + Lấy hết thuốc trong lọ ra, rửa sạch các lọ thuốc với nước và ethanol 96 %.

KÈ

+ Đem sấy các lọ thuốc trong tủ sấy ở nhiệt độ 100-105 °C trong 1 giờ. Sau đó, lấy các lọ thuốc ra để nguội ở nhiệt độ phòng, và đem cân lại từng lọ

thuốc (mvỏ).

DẠ

Y

+ Hiệu số giữa hai lần cân mvỏ + bột thuốc – mvỏ là khối lượng của thuốc trong lọ. + Tính khối lượng trung bình của bột thuốc trong lọ và đánh giá kết quả.

– Kết quả

STT

15,6204

15, 0143

0,6061

02

15,8015

15,1930

03

15,4699

14,8595

04

15,7900

15,1942

05

15,6094

15,0098

06

15,7620

15,1555

07

15,6635

15,0646

08

15,4891

14,8853

09

15,4876

14,8799

0,6077

10

15,4285

14,8156

0,6129

11

15,6676

15,0557

0,6119

12

15,7185

13

15,6814

14

16,3238

15

FI CI A

01

0,6085 0,6104 0,5958

OF

0,5996 0,6065 0,5989

NH

ƠN

0,6038

0,6030

15,1023

0,5791

15,7181

0,6057

15,8505

15,2261

0,6244

16

15,5844

14,9868

0,5976

17

15,5810

14,9834

0,5976

18

15,3348

14,7335

0,6013

19

15,7338

15,1323

0,6015

14,8149

0,6009

M

QU Y

15,1155

15,4158

KÈ

20

L

Khối lượng bột thuốc trong 20 lọ chế phẩm mvỏ + bột thuốc (g) mvỏ (g) Khối lượng bột thuốc m (g)

Khối lượng bột thuốc trung bình của 20 đơn vị chế phẩm là:

DẠ

Y

P=

∑20 i=1 𝑚𝑖 20

=

0,6061 + 0,6085 + … + 0,6015 + 0,6009 20

Ta thấy: P + P 𝑥 10 % = 0,6641 (g) và P – P 𝑥 10 % = 0,5433 (g)

Suy ra : 0,5433 (g) ≤ m (g) ≤ 0,6641 (g).

= 0,6037 (g)

L

– Đánh giá: Khối lượng bột thuốc của 20 đơn vị chế phẩm đều nằm trong khoảng

FI CI A

± 10 % so với khối lượng trung bình của thuốc trong chai.

– Kết luận: Đạt.

5. pH – Cách tiến hành thí nghiệm

+ Cho khoảng 100 ml nước cất vào becher rồi đun sôi → nước sôi thì đun tiếp

OF

trên bếp 10 phút để loại bỏ hết CO2. Nhấc becher ra khỏi bếp và để nguội đến nhiệt độ phòng.

+ Pha dung dịch thử: Cân 1 g chế phẩm cho vào bình định mức 10 ml, thêm

ƠN

tiếp nước cất đã loại bỏ CO2 vừa đủ đến vạch, lắc đều cho bột thuốc hòa tan hoàn toàn. Đem dung dịch đã pha đi đo pH.

– Kết quả: pH = 6,8 (giá trị pH nằm trong khoảng từ 5,5 – 7,5).

6. Mất khối lượng do làm khô – Cách tiến hành thí nghiệm

NH

– Kết luận: Đạt.

+ Cân khối lượng bì: mbì = 11,4721 (g).

QU Y

+ Cân 1,0018 g bột thuốc cho vào bì → sấy ở 100 °C trong vòng 1 giờ. + Lấy ra để nguội trong bình hút ẩm đến nhiệt độ phòng. Đem cân ta được khối lượng bột thuốc và bì lần 1 là m1 = 12,4709 (g). + Bỏ tiếp vào tủ sấy, sấy khoảng 10-15 phút. Lấy ra để nguội trong bình hút

M

ẩm đến nhiệt độ phòng và đem cân lần 2 ta được m2 = 12,4707 (g). + Chênh lệch khối lượng giữa 2 lần cân sau khi sấy là m1 – m2 = 0,0002 (g).

KÈ

Giá trị này nằm trong khoảng chênh lệch cho phép là ≤ 0,5 mg.

– Kết quả

Y

Khối lượng bột thuốc sau khi sấy là: m2 – mbì = 12,4707 – 11,4721 = 0,9986 (g)

DẠ

Hàm lượng nước có trong bột thuốc là:

→ Không vượt quá 1,0 %.

– Kết luận: Đạt.

1,0018−0,9986 1,0018

𝑥 100 = 0,3 %

L

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

PHIẾU PHÂN TÍCH (Dùng cho kiểm nghiệm viên trả lời nội bộ)

FI CI A

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

Số: ________/2020

: Viên nang cứng Paracetamol 500 mg.

Đơn vị sản xuất

: Công ty cổ phần Hóa – Dược phẩm MEKOPHAR.

Số lô

: 18002TN.

Số đăng ký phân tích

:………………………………………………………..............

Người giao mẫu

: Nguyễn Trần Vân Anh.

Người nhận mẫu

: Nguyễn Quỳnh Như.

Ngày giao mẫu

: 12/05/2020.

Yêu cầu kiểm nghiệm

: Tính chất, độ đồng đều khối lượng, định tính, tạp chất liên

NH

ƠN

OF

Mẫu kiểm nghiệm

quan, định lượng.

: Tiêu chuẩn cơ sở.

Tình trạng mẫu khi nhận

: Mẫu nguyên vẹn, vẫn còn nguyên niêm phong.

QU Y

Tiêu chuẩn hoặc tài liệu áp dụng Chỉ tiêu

Mức chất lượng

Kết quả

1. Tính chất

Nang cứng bên trong chứa bột thuốc màu trắng, không mùi.

Đạt

2. Độ đồng đều

± 7,5 % so với khối lượng trung bình của bột thuốc chứa trong Đạt (P = 0,5187 g) Phản ứng hóa học: Phải có phản ứng đặc trưng của

KÈ

3. Định tính

một nang.

M

khối lượng

Đúng

paracetamol.

Sắc ký lớp mỏng: Vết chính thu được trên sắc ký đồ của dung

Đúng

Y

dịch thử phải tương ứng về vị trí, kích thước, màu sắc với vết

DẠ

4. Tạp chất liên quan

chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu.

4-aminophenol: Trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch thử, pic tương ứng với 4-aminophenol không được có diện tích

Đạt

L

lớn hơn diện tích pic 4-aminophenol thu được trên sắc ký đồ

FI CI A

của dung dịch chuẩn (0,001 %).

4’-chloroacetanilid: Trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu

Đạt

(2) có 2 vết tách ra rõ ràng, vết tương ứng với 4’chloroacetanilid phải có giá trị Rf lớn hơn. Bất kỳ vết nào có

trên sắc ký đồ của dung dịch thử (1) tương ứng với vết của

OF

4’-chloroacetanilid không được đậm hơn vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1). Bất kỳ vết phụ nào có trên sắc ký đồ của dung dịch thử (2), có giá trị Rf thấp hơn giá trị Rf

của vết 4’-chloroacetanilid không được đậm hơn vết trên sắc 5. Định lượng

ƠN

ký đồ của dung dịch đối chiếu (1).

Chế phẩm phải chứa paracetamol, C8H9NO2, từ 95,0 % đến

Đạt (97,0 %)

NH

105,0 % so với lượng ghi trên nhãn trong một nang.

KẾT LUẬN: Mẫu viên nang cứng Paracetamol 500 mg của Công ty cổ phần Hóa – Dược phẩm MEKOPHAR, số lô 18002TN, hạn dùng 10/07/2021, đạt yêu cầu kiểm tra chất lượng về

QU Y

chỉ tiêu tính chất, độ đồng đều khối lượng, định tính, tạp chất liên quan, định lượng theo tiêu

Ngày 16 tháng 05 năm 2020 KIỂM NGHIỆM VIÊN

DẠ

Y

KÈ

M

chuẩn cơ sở.

Nguyễn Quỳnh Như

FI CI A

BÀI 2. VIÊN NANG PARACETAMOL 500 mg

L

HỒ SƠ PHÂN TÍCH 1. Tính chất

– Đánh giá: Nang cứng bên trong chứa bột thuốc màu trắng, không mùi.

– Kết luận: Đạt.

2. Độ đồng đều khối lượng

OF

– Cách tiến hành thí nghiệm: Cân lần lượt 20 nang thuốc (cả vỏ và thuốc). Sau đó, lấy hết bột thuốc ra, dùng bông gòn lau sạch vỏ nang. Cân vỏ nang rỗng. Khối trung bình của bột thuốc trong nang.

– Kết quả

ƠN

lượng của bột thuốc trong từng nang là hiệu của 2 lần cân. Xác định khối lượng

mvỏ (g)

Khối lượng bột thuốc m (g)

0,0950

0,5076

0,1038

0,5179

0,6303

0,0962

0,5341

04

0,6317

0,1012

0,5305

05

0,6362

0,0983

0,5379

06

0,5983

0,0992

0,4991

07

0,6188

0,0961

0,5227

08

M

NH

Khối lượng bột thuốc trong 20 nang thuốc

0,6141

0,0985

0,5156

0,6086

0,0989

0,5079

0,6125

0,0967

0,5158

0,6371

0,0983

0,5388

12

0,6010

0,0968

0,5042

13

0,6263

0,0988

0,5275

14

0,6219

0,0966

0,5253

mvỏ + bột thuốc (g)

01

0,6026

02

0,6217

03

10

DẠ

Y

11

KÈ

09

QU Y

STT

0,0980

0,4984

16

0,6286

0,0969

0,5317

17

0,6096

0,0978

18

0,6047

0,0990

19

0,6049

0,1026

20

0,6405

0,1016

L

0,5964

FI CI A

15

0,5118 0,5057 0,5023

OF

0,5389

Khối lượng bột thuốc trung bình của 20 đơn vị chế phẩm là: P=

∑20 i=1 𝑚𝑖 20

=

0,5076 + 0,5179 + … + 0,5023 + 0,5389 20

= 0,5187 (g)

ƠN

Ta thấy: P + P 𝑥 7,5 % = 0,5576 (g) và P – P 𝑥 7,5 % = 0,4798 (g) Suy ra : 0,4798 (g) ≤ m (g) ≤ 0,5576 (g).

NH

– Đánh giá: Khối lượng bột thuốc của 20 đơn vị chế phẩm đều nằm trong khoảng ± 7,5 % so với khối lượng trung bình của bột thuốc chứa trong một nang.

– Kết luận: Đạt.

3. Định tính

QU Y

A. Phản ứng hóa học

– Cách tiến hành thí nghiệm

+ Cân khoảng 0,5 g bột thuốc paracetamol cho vào becher. Thêm 10 ml aceton vào khuấy kỹ và lọc.

M

+ Làm bay hơi dịch lọc tới cắn. Đun sôi 0,1 g cắn với 1 ml hydrochloric acid trong 3 phút, thêm 10 ml nước cất, để nguội.

KÈ

+ Thêm 1 giọt kali dichromat 5 % và quan sát hiện tượng.

– Kết quả và phương trình hóa học của phản ứng

DẠ

Y

+ Hiện tượng: Xuất hiện màu tím, không chuyển sang màu đỏ → có phản ứng đặc trưng của paracetamol.

+ Phương trình hóa học:

L FI CI A OF

– Kết luận: Đúng.

B. Sắc ký lớp mỏng

+ Bản mỏng: Silica gel F254.

ƠN

– Cách tiến hành thí nghiệm

+ Dung môi khai triển: Methylen chlorid – methanol (4:1).

NH

+ Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 10 mg paracetamol chuẩn trong 10 ml methanol.

+ Dung dịch thử: Hòa tan một lượng bột thuốc trong nang tương ứng với 10 mg paracetamol trong 10 ml methanol. Lọc.

QU Y

Tính toán lượng bột thuốc cần phải cân P = 0,5187 g bột thuốc → chứa 500 mg hoạt chất paracetamol. m (g) bột thuốc => m =

10 𝑥 0,5187 500

← chứa 10 mg hoạt chất paracetamol.

= 0,0104 (g)

DẠ

Y

KÈ

– Kết quả

M

Thực tế cân được 0,0105 g bột thuốc.

Tính toán:

9,0 cm

7,7 cm

RfT = RfC =

7,7 9 7,7 9

FI CI A

C: dung dịch chuẩn.

L

Chú thích: T: dung dịch thử.

= 0,85

= 0,85

OF

Nhận xét: Vết chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thử tương ứng về vị trí kích thước và màu sắc với vết chính thu được trên sắc ký đồ

Quan sát bản mỏng dưới ánh sáng tử

– Kết luận: Đúng.

4. Tạp chất liên quan A. Xác định 4-aminophenol

KÈ

M

QU Y

– Kết quả

NH

ngoại ở bước sóng 254 nm

ƠN

của dung dịch đối chiếu

DẠ

Y

Sắc ký đồ của dung dịch chuẩn (chứa 0,001 % tạp chất chuẩn 4-aminophenol)

Sắc ký đồ của dung dịch thử (chứa bột chế phẩm paracetamol)

L FI CI A OF ƠN

Sắc ký đồ khi kết hợp cả 2 dung dịch chuẩn và thử – Đánh giá : Nhìn vào cả 3 sắc ký đồ ta nhận thấy, trên sắc ký đồ thu được từ dung

NH

dịch thử không chứa pic của 4-aminophenol như sắc ký đồ thu được từ dung dịch chuẩn → viên nang cứng paracetamol 500 mg không chứa tạp chất 4-aminophenol.

– Kết luận: Đạt.

QU Y

B. Xác định 4’-chloroacetanilid

– Tính toán khối lượng bột thuốc cần dùng để pha dung dịch thử P = 0,5187 g bột thuốc → chứa 0,5 g hoạt chất paracetamol. m (g) bột thuốc

1 𝑥 0,5187 0,5

M

=> m =

← chứa 1,0 g hoạt chất paracetamol.

= 1,0374 (g)

Thực tế cân được 1,0375 g bột thuốc.

DẠ

Y

KÈ

– Kết quả khi quan sát bản sắc ký dưới ánh sáng UV ở bước sóng 254 nm

Chú thích: T1 : dung dịch thử (1)

L

T2: dung dịch thử (2)

FI CI A

C2: dung dịch đối chiếu (2)

Tính toán: RfT1 =

6,7 cm

RfC1 =

4 9

= 0,44

6,7 9

RfT2 =

= 0,74

RfC2 vết thấp =

4 9

= 0,44

Nhận xét:

4 9

= 0,44

RfC2 vết cao =

OF

9 cm

C1: dung dịch đối chiếu (1)

6,7 9

= 0,74

 Trên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) có 2 vết tách ra rõ ràng,

ƠN

vết tương ứng với 4’-chloroacetanilid có giá trị Rf lớn hơn 4 cm

(RfC2 vết cao = 0,74).

NH

 Vết của 4’-chloroacetanilid trên sắc ký đồ của dung dịch thử (1) không đậm hơn vết của 4’-chloroacetanilid trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1).  Vết phụ trên sắc ký đồ của dung dịch thử (2), có giá trị Rf thấp

QU Y

hơn giá trị Rf của vết 4’-chloroacetanilid (RfT2 = 0,44 < 0,74) và không đậm hơn vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1).

– Kết luận: Đạt.

M

5. Định lượng

KÈ

– Chứng minh công thức định lượng paracetamol H%=

𝑨𝒙 𝟕𝟏𝟓

𝒙

𝟏𝟎𝟎𝟎 (𝒎𝒈) 𝒙 𝟏𝟎𝟎𝟎𝟎 (𝒎𝒍) 𝟏𝟎𝟎 (𝒎𝒍)

𝒙

𝒎 𝒑

𝒙

𝟏𝟎𝟎 𝟓𝟎𝟎 (𝒎𝒈)

DẠ

Y

Với: m: khối lượng bột thuốc trung bình trong 1 viên nang (g). p: lượng bột thuốc đã cân (g).

Ax: giá trị đo được của mẫu thử ở bước sóng 257 nm.

715: A (1 %; 1 cm) của paracetamol ở bước sóng 257 nm. + Khối lượng bột thuốc cần dùng để có được khoảng 0,0500 g paracetamol.

L

P = m = 0,5187 g bột thuốc → chứa 0,5000 g hoạt chất paracetamol.

=> p =

0,0500 𝑥 0,5187

FI CI A

← chứa 0,0500 g hoạt chất paracetamol.

p (g) bột thuốc

= 0,0519 (g)

0,5000

+ Hàm lượng paracetamol thực tế có trong 0,0519 g bột thuốc:

𝑝 𝑥 500 𝑚

(mg).

theo lý thuyết: Clý thuyết 1 =

𝑝 𝑥 500 𝑚 𝑥 100

(mg/ml)

OF

+ Pha lượng bột trên thành 100 ml. Nồng độ paracetamol trong dung dịch này

+ Lấy 5 ml dung dịch trên pha thành 50 ml dung dịch A (pha loãng 10 lần).

Lấy 5 ml dung dịch A pha thành 50 ml dung dịch B (pha loãng 10 lần). Vậy

ƠN

từ dung dịch mẹ pha thành dung dịch B (pha loãng 100 lần) → Nồng độ paracetamol trong dung dịch B đem đo quang là: 𝑝 𝑥 500

𝑚 𝑥 100

: 100 (mg/ml) =

NH

Clý thuyết =

𝑝 𝑥 500 𝑚 𝑥 10000

+ Nồng độ paracetamol thực tế trong dung dịch đêm đo quang là: 𝐴𝑥

715

QU Y

Cthực tế =

𝑥

1 (𝑔)

100 (𝑚𝑙)

=

𝐴𝑥

𝑥

715

1000 (𝑚𝑔) 100 (𝑚𝑙)

+ Hàm lượng paracetamol trong chế phẩm là 𝑚 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế

H%=

– Kết quả

𝑚 𝑙ý 𝑡ℎ𝑢𝑦ế𝑡 𝐴𝑥 𝑥 1000 715 𝑥 100

𝑥

𝐶 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝐶 𝑙ý 𝑡ℎ𝑢𝑦ế𝑡

𝑚 𝑥 10000 𝑝 𝑥 500

𝑥 100 =

𝑥 100 𝐴𝑥 715

𝑥

1000 𝑥 10000 100 𝑥 500

𝑥

𝑚 𝑝

𝑥 100

M

=

𝑥 100 =

KÈ

+ Khối lượng bột thuốc thực tế cân được: p = 0,0519 (g). + Đo được Ax = 0,347 ở bước sóng 257 nm.

Y

→H%=

0,347 715

𝑥

1000 𝑥 10000 100 𝑥 500

𝑥

0,5187 0,0519

𝑥 100 = 97,0 %

DẠ

→ Vậy chế phẩm chứa 97,0 % paracetamol (C8H9NO2) so với lượng ghi trên nhãn trong một nang.

– Kết luận: Đạt.

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

PHIẾU PHÂN TÍCH (Dùng cho kiểm nghiệm viên trả lời nội bộ)

FI CI A

L

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

Số: ________/2020

: Viên nén Sulfaganin 500.

Đơn vị sản xuất

: Công ty cổ phần Hóa – Dược phẩm MEKOPHAR.

Số lô

: 19003AN.

Số đăng ký phân tích

:………………………………………………………..............

Người giao mẫu

: Nguyễn Trần Vân Anh.

Người nhận mẫu

: Nguyễn Quỳnh Như.

Ngày giao mẫu

: 19/05/2020.

Yêu cầu kiểm nghiệm

: Tính chất, độ đồng đều khối lượng, định tính.

Tiêu chuẩn hoặc tài liệu áp dụng

: Tiêu chuẩn cơ sở.

Tình trạng mẫu khi nhận

: Mẫu nguyên vẹn, vẫn còn nguyên niêm phong.

QU Y

NH

ƠN

OF

Mẫu kiểm nghiệm

Chỉ tiêu

Mức chất lượng

1. Tính chất

Viên màu trắng.

2. Độ đồng đều khối lượng ± 5% so với khối lượng trung bình của thuốc trong

Kết quả Đạt Đạt (P = 0,5949 g)

viên.

Phản ứng hóa học: Phải có phản ứng đặc trưng của

M

3. Định tính

Đúng

DẠ

Y

KÈ

sulfaguanidin.

Sắc ký lớp mỏng: Vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải phù hợp về vị trí, màu sắc và kích thước với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu.

Đúng

L

KẾT LUẬN: Mẫu viên nén Sulfaganin 500 của Công ty cổ phần Hóa – Dược phẩm

FI CI A

MEKOPHAR, số lô 19003AN, hạn dùng 29/03/2023, đạt yêu cầu kiểm tra chất lượng về chỉ tiêu tính chất, đồ đồng đều khối lượng và định tính theo tiêu chuẩn cơ sở.

Ngày 25 tháng 05 năm 2020

OF

KIỂM NGHIỆM VIÊN

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

ƠN

Nguyễn Quỳnh Như

L

HỒ SƠ PHÂN TÍCH

FI CI A

BÀI 3. VIÊN NÉN SULFAGUANIDIN 500 mg

OF

1. Tính chất – Đánh giá cảm quan: Viên màu trắng.

– Kết luận: Đạt.

ƠN

2. Độ đồng đều khối lượng – Kết quả

01

m (g) 0,5928 STT

11

m (g) 0,5978

02

03

04

05

06

07

08

09

10

0,6016 0,5891 0,5919 0,5944 0,5922 0,6043 0,6041 0,5862 0,5968 12

13

14

15

16

17

18

19

20

0,5865 0,6031 0,5979 0,5923 0,5941 0,6020 0,5763 0,5930 0,6013

QU Y

STT

NH

Khối lượng m (g) khi cân lần lượt 20 viên nén Sulfaganin 500

Khối lượng trung bình của 20 đơn vị chế phẩm là: P=

∑20 i=1 𝑚𝑖 20

=

0,5928 + 0,6016 + … + 0,5930 + 0,6013 20

= 0,5949 (g)

M

Ta thấy: P + P 𝑥 5 % = 0,6246 (g) và P – P 𝑥 5 % = 0,5652 (g)

KÈ

Suy ra : 0,5652 g ≤ m (g) ≤ 0,6246 g.

– Đánh giá: Khối lượng của 20 viên nén Sulfaganin 500 đều nằm trong khoảng ± 5% so với khối lượng trung bình của thuốc trong viên.

Y

– Kết luận: Đạt.

DẠ

3. Định tính A. Phản ứng hóa học tạo amoniac

– Tính toán khối lượng bột viên cần dùng cho thí nghiệm

FI CI A

sulfaguanidin, thêm 5 ml dung dịch natri hydroxyd 10 % (TT), đun sôi.

L

– Cách tiến hành thí nghiệm: Lấy một lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,2 g

P = 0,5949 g bột thuốc → chứa 500 mg = 0,5 g hoạt chất sulfaguanidin. mcần cân (g) bột thuốc => mcần cân =

← 0,2 g hoạt chất sulfaguanidin.

0,2 𝑥 0,5949 0,5

≈ 0,2380 (g)

OF

– Kết quả và phương trình hóa học

+ Hiện tượng: Có hơi amoniac (mùi khai nhẹ) bay lên.

+ NaOH

ONa

+ NH3 ↑

NH

– Kết luận: Đúng.

to

ƠN

+ Phương trình hóa học

B. Phản ứng hóa học tạo tủa đỏ thẫm

– Cách tiến hành thí nghiệm: Lấy một lượng bột viên tương ứng với khảng 50 mg

QU Y

sulfaguanidin, thêm 2 ml dung dịch hydrochloric acid 10 % (TT), lắc kỹ, lọc. Làm lạnh dịch lọc trong nước đá, thêm 4 ml dung dịch natri nitrit 1 % (TT), lắc đều.

Lấy 1 ml dung dịch thu được, thêm 5 ml dung dịch 2- naphtol trong kiềm (TT).

– Tính toán khối lượng bột viên cần dùng cho thí nghiệm

M

P = 0,5949 g bột thuốc → chứa 500 mg hoạt chất sulfaguanidin.

KÈ

mcần cân (g) bột thuốc => mcần cân =

← 50 mg hoạt chất sulfaguanidin.

50 𝑥 0,5949 500

≈ 0,0595 (g)

– Kết quả và phương trình hóa học

Y

+ Hiện tượng: Xuất hiện phức hợp màu da cam – tủa đỏ thẫm.

DẠ

+ Phương trình hóa học:

+ NaNO2

0-5 oC

L FI CI A

2-naphtol trong kiềm (TT)

+ Cl- + NaCl + 2H2O

HCl [N ≡ N]

OF

+

ƠN

0-5 oC

+ NaCl

NH

↓ tủa đỏ thẫm ⁕ Lưu ý: phản ứng được thực hiện trong điều kiện nhiệt độ thấp (0-5 oC) vì muối diazo không bền, dễ bị phân hủy ở nhiệt độ cao.

– Kết luận: Đúng.

QU Y

C. Sắc ký lớp mỏng

– Cách tiến hành thí nghiệm

+ Bản mỏng: Silica gel GF254. + Dung môi khai triển: Dicloromethan – methanol – acid formic khan (70 : 20 : 10).

M

+ Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 10 mg sulfaguanidin chuẩn trong 5 ml aceton (TT). + Dung dịch thử: Lấy một lượng bột viên tương ứng với 20 mg sulfaguanidin, thêm

KÈ

10 ml aceton (TT), lắc kỹ, lọc, dùng dịch lọc để chấm sắc ký.

DẠ

Y

Tính toán lượng bột thuốc cần phải cân

– Kết quả:

P = 0,5949 g bột thuốc → chứa 500 mg hoạt chất sulfaguanidin. mcần cân (g) bột thuốc => mcần cân =

← 20 mg hoạt chất sulfaguanidin.

20 𝑥 0,5949 500

≈ 0,0238 (g)

Tính toán:

RfC =

9 cm

7 cm

RfT =

7 9 7 9

FI CI A

C: dung dịch chuẩn.

L

Chú thích: T: dung dịch thử.

= 0,78

= 0,78

OF

Nhận xét: Vết chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thử tương ứng về vị trí kích thước và màu sắc với vết chính thu được trên sắc ký đồ

Quan sát bản mỏng dưới ánh sáng tử

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

– Kết luận: Đúng.

NH

ngoại ở bước sóng 254 nm

ƠN

của dung dịch đối chiếu

L

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

PHIẾU PHÂN TÍCH (Dùng cho kiểm nghiệm viên trả lời nội bộ)

FI CI A

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

Số: ________/2020

: Thuốc tiêm vitamin B12 Kabi 1000 mcg.

Đơn vị sản xuất

: Công ty cổ phần Fresenius Kabi Việt Nam.

Số lô

: 86MKA029.

Số đăng ký phân tích

:………………………………………………………..............

Người giao mẫu

: Nguyễn Trần Vân Anh.

Người nhận mẫu

: Nguyễn Quỳnh Như.

Ngày giao mẫu

: 19/05/2020.

Yêu cầu kiểm nghiệm

: Tính chất, độ trong, độ đồng đều thể tích, pH, định tính,

NH

ƠN

OF

Mẫu kiểm nghiệm

định lượng.

: Tiêu chuẩn cơ sở.

Tình trạng mẫu khi nhận

: Mẫu nguyên vẹn, vẫn còn nguyên niêm phong.

QU Y

Tiêu chuẩn hoặc tài liệu áp dụng Chỉ tiêu

Mức chất lượng

Kết quả

1. Tính chất

Dung dịch trong, màu từ hồng đến đỏ.

Đạt

2. Độ trong

Chế phẩm phải trong suốt và không có các tiểu phân

Đạt

M

không tan khi kiểm tra bằng mắt thường ở điều kiện

KÈ

quy định.

3. Độ đồng đều thể tích

Thể tích của 5 ống phải từ 100 – 115 % thể tích ghi

Đạt (110 %)

trên nhãn.

Dung dịch chế phẩm phải có pH trong giới hạn

Y

4. pH

DẠ

5. Định tính

Đạt (4,7)

4,0 – 6,0.

Phổ tử ngoại của dung dịch thử có các hấp thu cực

Đúng

đại ở 278 nm; 361 nm và ở khoảng 547 – 559 nm. Tỷ A278/A547-559 = 3,26

A361/A278 = 1,82

L

số độ hấp thu ở cực đại ở 361 nm so với độ hấp thu

FI CI A

ở cực đại trong khoảng 547 – 559 nm từ 3,15 đến 3,45. Tỷ số độ hấp thu ở cực đại ở 361 nm so với độ hấp thu ở cực đại 278 nm từ 1,70 đến 1,90.

6. Định lượng

Hàm lượng của cyanocobalamin, C63H88CoN14O14P

Đạt (113 %)

trong 01 ống phải đạt từ 95 – 115 % so với lượng ghi

OF

trên nhãn.

KẾT LUẬN: Mẫu thuốc tiêm vitamin B12 Kabi 1000 mcg của Công ty cổ phần Fresenius Kabi

ƠN

Việt Nam, số lô 86MKA029, hạn dùng 24/10/2021, đạt yêu cầu kiểm tra chất lượng về chỉ tiêu tính chất, độ trong, độ đồng đều thể tích, pH, định tính, định lượng theo tiêu chuẩn cơ sở.

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

Ngày 25 tháng 05 năm 2020 KIỂM NGHIỆM VIÊN

Nguyễn Quỳnh Như

L

HỒ SƠ PHÂN TÍCH 1. Tính chất – Đánh giá cảm quan: Dung dịch trong, có màu hồng.

– Kết luận: Đạt.

2. Độ trong

OF

– Cách tiến hành thí nghiệm

FI CI A

BÀI 4. THUỐC TIÊM VITAMIN B12 1000 mcg

+ Lấy 20 đơn vị chế phẩm ngẫu nhiên. Lắc nhẹ, tránh tạo bọt khí. + Quan sát các ống thuốc tiêm trước bảng màu trắng, sau đó quan sát tiếp dưới

ƠN

bảng màu đen và ghi nhận kết quả.

– Đánh giá: Chế phẩm trong suốt và không có các tiểu phân không tan khi kiểm tra – Kết luận: Đạt.

3. Độ đồng đều thể tích – Cách tiến hành thí nghiệm

NH

bằng mắt thường ở điều kiện quy định.

QU Y

+ Lấy 06 đơn vị chế phẩm (01 ống tráng bơm tiêm, 05 ống để đo thể tích). + Dùng kim tiêm khô sạch để đo thể tích của 05 đơn vị chế phẩm thuốc tiêm.

– Kết quả STT

V2

V3

V4

V5

1,1

1,1

1,1

1,1

1,1

M

Thể tích V (ml)

V1

𝑉 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế đ𝑜 đượ𝑐

KÈ Ta có:

𝑉 𝑔ℎ𝑖 𝑡𝑟ê𝑛 𝑛ℎã𝑛

𝑥 100 =

1,1 1,0

𝑥 100 = 110 %

→ Thể tích của 05 ống nằm trong giới hạn 100 – 115 % thể tích ghi trên nhãn.

Y

– Kết luận: Đạt.

DẠ

4. pH

– Cách tiến hành thí nghiệm: Lấy khoảng 10 ml dung dịch chế phẩm cho vào 1 ống nghiệm sạch khô. Đo pH bằng pH kế với cặp điện cực Calomel – thủy tinh.

L

– Kết quả: pH = 4,7 (giá trị pH nằm trong khoảng từ 4,0 – 6,0).

FI CI A

– Kết luận: Đạt.

5. Định lượng – Chứng minh công thức: C % =

𝑨𝒕 𝟐𝟎𝟕

𝒙 1000 𝒙 50

(207 là giá trị A (1%; 1 cm) ở bước sóng 361 nm).

cyanocobalamin hay 1 mg cyanocobalamin.

OF

+ Ta có: 1 ml chế phẩm thuốc tiêm vitamin B12 Kabi chứa 1000 µg + Từ 1 ml chế phẩm pha loãng với nước để được 50 ml dung dịch có nồng độ

→ Clý thuyết =

1 50

ƠN

cyanocobalamin khoảng 20 µg/ml.

(mg/ml)

+ Ta lại có: 207 là giá trị A (1%; 1 cm) của cyanocobalamin ở λ = 361 nm.

1 (𝑔) 100 (𝑚𝑙)

Cthực tế 𝐴𝑡 207

𝑥

1000(𝑚𝑔) 100 (𝑚𝑙)

1000 100

→

A = 207

←

At: độ hấp thu đo được

(mg/ml)

QU Y

→ Cthực tế =

=

NH

C=1%=

+ Hàm lượng % cyanocobalamin có trong 1 ml dung dịch thuốc tiêm so với lượng ghi trên nhãn: 𝐶 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế

𝐶 𝑙ý 𝑡ℎ𝑢𝑦ế𝑡

M

C%=

𝑨𝒕 𝟐𝟎𝟕

𝐴𝑡 207

𝑥

1000 100

𝑥 50 𝑥 100

𝒙 1000 𝒙 50

KÈ

→C%=

𝑥 100 =

– Kết quả

Đo được độ hấp thu của dung dịch có nồng độ cyanocobalamin khoảng 20 µg/ml

Y

ở bước sóng 361 nm là At = 0,466.

DẠ

→C%=

0,466 207

𝑥 1000 𝑥 50 = 113 % (hàm lượng này nằm trong khoảng từ 95 %

đến 115 % so với lượng ghi trên nhãn).

– Kết luận Đạt.

L

6. Định tính

FI CI A

– Kết quả

+ Sử dụng dung dịch đã pha ở phương pháp định lượng. Đo dung dịch ở ba

NH

ƠN

OF

bước sóng 278 nm, 361 nm, 551 nm.

+ Kết quả đo được được thể hiện trong bảng dưới đây.

278

361

551

Độ hấp thu A

0,254

0,463

0,142

𝐴 361 𝐴 278 𝐴 361

=

M

→

QU Y

λ (nm)

→

𝐴 551

DẠ

Y

KÈ

– Kết luận: Đúng.

=

0,463 0,254

0,463 0,142

= 1,82 (nằm trong giới hạn từ 1,70 đến 1,90).

= 3,26 (nằm trong giới hạn từ 3,15 đến 3,45).

L

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

PHIẾU PHÂN TÍCH (Dùng cho kiểm nghiệm viên trả lời nội bộ)

FI CI A

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA DƯỢC

Số: ________/2020

: Bột quả Dành dành.

Đơn vị sản xuất

:………………………………………………………..............

Số lô

:………………………………………………………………..

Số đăng ký phân tích

:………………………………………………………..............

Người giao mẫu

: Nguyễn Trần Vân Anh.

Người nhận mẫu

: Nguyễn Quỳnh Như.

Ngày giao mẫu

: 26/05/2020.

Yêu cầu kiểm nghiệm

: Định tính, độ ẩm, định lượng.

Tiêu chuẩn hoặc tài liệu áp dụng

: Dược điển Việt Nam V.

Tình trạng mẫu khi nhận

: Mẫu nguyên vẹn, vẫn còn nguyên niêm phong.

QU Y

NH

ƠN

OF

Mẫu kiểm nghiệm

Chỉ tiêu 1. Định tính

Mức chất lượng

Kết quả

Phản ứng hóa học: phải có phản ứng đặc trưng của geniposide.

Đúng

Sắc ký lớp mỏng: trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có các

Đúng

vết có cùng màu sắc, kích thước và giá trị Rf với các vết trên

M

sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu.

Không quá 8,5 %.

KÈ

2. Độ ẩm 3. Định lượng

Dược liệu phải chứa không ít hơn 3,0 % geniposid (C17H24O10)

Đạt (8,2 %) Đạt (5,8 %)

Y

tính theo dược liệu khô kiệt.

KẾT LUẬN: Mẫu bột quả Dành dành đạt yêu cầu kiểm tra chất lượng về chỉ tiêu định tính,

DẠ

độ ẩm, định lượng theo tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam V.

L

Ngày 01 tháng 06 năm 2020

FI CI A

KIỂM NGHIỆM VIÊN

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

ƠN

OF

Nguyễn Quỳnh Như

1. Định tính A. Phản ứng hóa học

FI CI A

BÀI 5. DÀNH DÀNH (QUẢ)

L

HỒ SƠ PHÂN TÍCH

– Cách tiến hành thí nghiệm: Lấy 0,2 g bột dược liệu, thêm 5 ml nước, đun cách thủy trong 3 phút, lọc. Bốc hơi 5 giọt dịch lọc đến khô trên đĩa sứ, nhỏ 1 giọt sulfuric

OF

acid (TT) lên cặn.

– Hiện tượng: Xuất hiện màu lục xanh lơ rồi nhanh chóng chuyển sang màu nâu tía.

– Giải thích hiện tượng

ƠN

+ Thành phần chính của Dành dành là các iridoid glycoside, gardoside, shanzhiside,… còn có các sắc tố màu đỏ gạch α-crocetin, monoterpenoid glycoside,…

NH

+ Iridoid glycoside dễ tan trong môi trường nước, cồn loãng,… và dễ bị thủy phân bởi acid, kiềm hay enzyme.

→ Xuất hiện màu lục xanh lơ, nhanh chóng chuyển sang nâu tía do có các

QU Y

sắc tố màu đỏ gạch.

– Kết luận: Đúng.

DẠ

Y

KÈ

M

B. Sắc ký lớp mỏng

Tính toán:

RfC =

9 cm

7 cm

RfT =

7 9 7 9

FI CI A

C: dung dịch đối chiếu.

L

Chú thích: T: dung dịch thử.

≈ 0,78

≈ 0,78

OF

Nhận xét: Vết chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thử tương ứng về vị trí kích thước và màu sắc với vết chính thu được trên sắc ký đồ

ƠN

của dung dịch đối chiếu – Kết luận: Đúng.

NH

2. Độ ẩm

– Tính toán độ ẩm của bột quả Dành dành

+ Cân khối lượng bì: mbì = 2,6276 (g).

+ Cân 2,0046 g bột Dành dành cho vào bì → bỏ vào tủ sấy ở 100-105 °C trong

QU Y

vòng khoảng 5 giờ.

+ mbì + bột sau sấy = 4,4678 (g)

→ Khối lượng bột sau sấy là: m’ = 4,4678 – 2,6276 = 1,7880 (g). + Độ ẩm của bột quả Dành dành là:

2,0046 − 1,8402 2,0046

𝑥 100 = 8,2 %.

M

→ Độ ẩm không vượt quá 8,5 %.

KÈ

– Kết luận: Đạt.

3. Định lượng

– Cách tiến hành thí nghiệm

DẠ

Y

+ Phương pháp sắc ký lỏng. Dùng đầu dò DAD, bước sóng 240 nm, rửa giải đẳng dòng.

+ Pha động: Acetonitril – nước (15 : 85), điều chỉnh tỷ lệ nếu cần thiết.

FI CI A

dung dịch chuẩn có nồng độ chính xác khoảng 0,1 mg/ml.

L

+ Dung dịch chuẩn: Hòa tan geniposid chuẩn trong methanol (TT) để được

+ Dung dịch thử:  Rây bột Dành dành qua rây 250.

 Cân 0,2031 g bột Dành dành cho vào bình nón nút mài, thêm chính xác 50 ml methanol, đậy nút bình. Cân khối lượng bình m1 =

OF

130,9203 (g).

 Siêu âm trong 1 giờ, lấy bình ra cân lại m2 = 129, 7123 (g).  Bổ sung thêm methanol để khối lượng bình trở về m1.

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

ƠN

– Sắc ký đồ của dung dịch chuẩn và dung dịch thử

Sắc ký đồ của dịch chiết Dành dành chuẩn

L FI CI A OF ƠN NH QU Y

Sắc ký đồ dịch chiết Dành dành

⁕ Nhận xét sắc ký đồ:

+ Peak có diện tích lớn nhất là chất chính geniposide. Các peak còn lại là chất

M

phụ và tạp chất.

KÈ

+ Số đĩa lý thuyết của cột tính trên peak geniposide của dịch chiết Dành dành chuẩn là N = 4126 (nhỏ hơn số đĩa lý thuyết yêu cầu là ≥ 8000).

→ Hiệu năng của cột sắc ký kém.

Y

– Xây dựng công thức tính hàm lượng geniposide

DẠ

+ Nồng độ của geniposide trong dịch chiết Dành dành chuẩn theo lý thuyết là Cchuẩn lý thuyết = 0,1 mg/ml = 10-4 g/ml.

L

+ Tuy nhiên độ tinh khiết của chuẩn Dành dành là 99,46%. Do đó, nồng độ

FI CI A

thực tế của geniposide trong dịch chiết Dành dành chuẩn là: Cchuẩn thực tế = 10-4 𝑥 99,46% = 9,946 𝑥 10-5 (g/ml) 𝐶 𝑐ℎ𝑢ẩ𝑛 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝐶 𝑡ℎử

trong đó :

=

𝑆𝑐 𝑆𝑡

=> Cthử =

𝐶 𝑐ℎ𝑢ẩ𝑛 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝑥 𝑆𝑡 𝑆𝑐

(g/ml)

Sc

: diện tích peak geniposide của dịch chiết chuẩn.

St

: diện tích peak geniposide của dung dịch thử.

Cthử

: nồng độ geniposide trong dung dịch thử.

OF

+ Ta có:

+ Dựa vào kết quả sắc ký đồ ở trên ta có thể thấy St = 2112,37720 (mAu⁕s) Suy ra: Cthử = 9,946 𝑥 10-5 𝑥

ƠN

Sc = 978, 52228 (mAu⁕s) 2112,37720 978,52228

= 2,147 𝑥 10-4 (g/ml)

NH

+ Ở mục 2, ta tính được độ ẩm của bột Dành dành là 8,2 %. Cân 0,2031 g bột Dành dành → Khối lượng của bột Dành dành khô kiệt là: mbột khô kiệt = 0,2031 – (0,2031 𝑥 8,2%) ≈ 0,1864 (g)

QU Y

+ Hàm lượng geniposide có trong 0,1864 g bột Dành dành khô kiệt là: % geniposide =

𝑚 𝑔𝑒𝑛𝑖𝑝𝑜𝑠𝑖𝑑𝑒 𝑚 𝑑ượ𝑐 𝑙𝑖ệ𝑢

= 2,147 𝑥 10-4 𝑥

𝑥 100 =

𝐶 𝑡ℎử 𝑥 𝑉 𝑑𝑑 𝑡ℎử 𝑚 𝑑ượ𝑐 𝑙𝑖ệ𝑢

𝑥 100

50 𝑥 100 = 5,8 % 0,1864

→ Dược liệu Dành dành chứa 5,8 % (không ít hơn 3,0 %) geniposide

M

(C17H24O10) tính theo dược liệu khô kiệt.

DẠ

Y

KÈ

– Kết luận: Đạt.

L

BÀI 6. THẨM ĐỊNH QUI TRÌNH PHÂN TÍCH I.

FI CI A

ĐỊNH LƯỢNG DICLOFENAC TRONG VIÊN NÉN DICLOFENAC KALI 50 mg XÂY DỰNG CÔNG THỨC TÍNH TOÁN HÀM LƯỢNG TRUNG BÌNH CỦA DICLOFENAC

– Tiến hành bằng phương pháp quang phổ hấp thu tử ngoại và khả kiến (Phụ lục 4.1).

– Dung dịch thử: Loại bỏ lớp bao của 20 viên, cân khối lượng 20 viên và tính khối lượng

OF

trung bình MTB (mg) của bột thuốc trong viên và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác mt (mg) bột thuốc tương ứng A’ (mg) diclofenac cho vào bình định mức 100 ml. Thêm khoảng 70 ml nước cất, lắc siêu âm trong 30 phút. Để nguội, thêm nước cất vừa đủ đến

ƠN

vạch định mức và lắc đều. Lọc qua giấy lọc. Lấy chính xác 1 ml dịch lọc cho vào bình định mức 10 ml, thêm nước cất vừa đủ đến định mức (pha loãng 10 lần). + Ta có: MTB (mg) bột thuốc → chứa A (mg) hoạt chất diclofenac. ← chứa A’ (mg) hoạt chất diclofenac.

NH

mt (mg) bột thuốc

→ Vậy mt (mg) bột thuốc chứa A’ =

𝑚𝑡 𝑥 𝐴 𝑀𝑇𝐵

(mg).

QU Y

+ Theo lý thuyết nồng độ diclofenac có trong dung dịch thử là: Cthử lý thuyết =

𝐴′ 𝑉1

: 10 =

𝑚𝑡 𝑥 𝐴 𝑀𝑇𝐵 𝑥 100 𝑥 10

(mg/ml)

– Dung dịch chuẩn: Cân chính xác một lượng chuẩn mc (mg) diclofenac kali tương ứng A’ (mg) diclofenac cho vào bình định mức 100 ml. Thêm khoảng 70 ml nước, lắc siêu

M

âm trong 30 phút. Để nguội. Thêm nước cất đến định mức, lắc đều. Lọc qua giấy lọc.

Lấy chính xác 1 ml dịch lọc cho vào bình định mức 10 ml, thêm nước cất đến định

KÈ

mức, lắc đều (pha loãng 10 lần).

DẠ

Y

+ Theo lý thuyết nồng độ diclofenac có trong dung dịch chuẩn là: Cchuẩn lý thuyết =

𝑚𝑐 𝑉2

: 10 =

𝑚𝑐 100 𝑥 10

(mg/ml)

L

+ Tuy nhiên, độ tinh khiết của chuẩn diclofenac potassium là Cc (%) (hay là hàm

có trong dung dịch chuẩn là: Cchuẩn thực tế =

𝑚𝑐 𝑥 𝐶𝑐 100 𝑥 10

FI CI A

lượng của diclofenac trong chuẩn đối chiếu). Suy ra, nồng độ diclofenac thực tế (mg/ml)

– Đo độ hấp thụ của dung dịch chuẩn (Ac) và dung dịch thử (At) ở bước sóng 242 nm.

Dùng nước cất làm mẫu trắng. 𝐶𝑐ℎ𝑢ẩ𝑛 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝐶 𝑡ℎử 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế

=> 𝐶𝑡ℎử 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế

=

=

𝐴𝑐 𝐴𝑡

𝐶𝑐ℎ𝑢ẩ𝑛 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝑥 𝐴 𝐴𝑐

𝑡

𝑚𝑐 𝑥 𝐶𝑐 = 100 𝑥 𝑥 10

=> C (%) =

𝐶𝑡ℎử 𝑡ℎự𝑐 𝑡ế 𝐶 𝑡ℎử 𝑙ý 𝑡ℎ𝑢𝑦ế𝑡 𝐴𝑡 𝐴𝑐

𝑥

𝑥 100 =

𝑚𝑐 𝑥 𝐶𝑐

100 𝑥 10

𝑀 𝑚𝑐 𝑥 𝑇𝐵 𝑥 Cc 𝑥 100 𝐴 𝑚𝑡

𝑥

𝐴𝑡

𝐴𝑐

𝑥

𝑀𝑇𝐵 𝑥 100 𝑥 10 𝑚𝑡 𝑥 𝐴

𝑥 100

NH

C (%) =

𝐴𝑡 (mg/ml) 𝐴𝑐

ƠN

– Hàm lượng trung bình của diclofenac trong viên là:

OF

+ Ta có:

– Vậy công thức tính hàm lượng trung bình của diclofenac trong viên nén bao

Trong đó:

𝑨𝒕 𝑨𝒄

𝒙

𝑴 𝒎𝒄 𝒙 𝑻𝑩 𝒙 Cc 𝒙 100 𝑨 𝒎𝒕

QU Y

C (%) =

C (%): Hàm lượng % trung bình của diclofenac có trong viên.

At : Độ hấp thu của dung dịch thử.

Ac: Độ hấp thu của dung dịch chuẩn. mt (mg): Lượng cân bột thuốc thử.

M

mc (mg): Lượng cân chất chuẩn.

KÈ

MTB (mg): Khối lượng trung bình bột thuốc trong viên.

A (mg): Hàm lượng nhãn của diclofenac trong viên.

DẠ

Y

Cc (%): Hàm lượng của diclofenac trong chuẩn đối chiếu.

L

II. THẨM ĐỊNH QUI TRÌNH PHÂN TÍCH BẰNG ĐO QUANG PHỔ TỬ NGOẠI - KHẢ

FI CI A

KIẾN (UV - VIS) 1. Tính đặc hiệu – Cách tiến hành thí nghiệm và kết quả

+ Mẫu 1: mẫu placebo là nước cất, có độ hấp thu UV A1 = 0,000.

+ Mẫu 2 : mẫu dung dịch chuẩn có C = 20 µg/ml, có độ hấp thu A2 = 0,389.

Yêu cầu

OF

– Đánh giá

Nhận xét

Kết quả định lượng của mẫu 1 không

Ta có:

quá 2 % hàm lượng của mẫu 2.

𝐶1 𝐶2

=

𝐴1 𝐴2

=

0,000 0,389

=0

ƠN

→ Hàm lượng của chất cần phân tích trong mẫu 1 là 0 % so với mẫu 2 → Đạt yêu cầu

cầu về tính đặc hiệu.

2. Độ tuyến tính

NH

– Kết luận: Quy trình định lượng diclofenac bằng đo quang phổ UV – Vis đạt yêu

QU Y

– Cách tiến hành thí nghiệm: Từ một dung dịch chuẩn gốc có nồng độ diclofenac 40 µg/ml pha loãng thành 10 ml các dung dịch có nồng độ lần lượt là 16 µg/ml, 18 µg/ml, 20 µg/ml, 22 µg/ml và 24 µg/ml. Mẫu trắng là nước cất. Tiến hành đo quang các mẫu trên.

Bảng kết quả khảo sát tuyến tính Nồng độ (% kl/tt) Vchuẩn (ml) Nồng độ (µg/ml)

KÈ

STT

M

– Kết quả

1

80

4,0

16

0,318

2

90

4,5

18

0,351

3

100

5,0

20

0,389

4

110

5,5

22

0,433

5

120

6,0

24

0,469

Y DẠ

Độ hấp thu UV

FI CI A

pha thành một dãy 10 ml dung dịch có nồng độ từ 16 – 24 µg/ml.

L

+ Cách tính thể tích cần lấy của dung dịch chuẩn gốc có nồng độ 40 µg/ml để Ta có C1 𝒙 V1 = C2 𝒙 V2

với C1 : nồng độ dung dịch chuẩn gốc (µg/ml).

C2 : nồng độ cần pha loãng (µg/ml).

V1 : thể tích dung dịch chuẩn gốc (ml).

V2 : thể tích dung dịch cần pha loãng (ml).

OF

 Ở mẫu 1 từ dung dịch chuẩn gốc pha loãng thành 10 ml dung dịch có nồng độ 16 µg/ml.

Ta tính C1 𝑥 V1 = C2 𝑥 V2 => 40 𝑥 V1 = 16 𝑥 10

ƠN

=> V1 = 4 (ml)

→ Vậy cần dùng 4 ml dung dịch chuẩn gốc có nồng độ 40 µg/ml để pha loãng thành 10 ml dung dịch có nồng độ 16 µg/ml.

NH

 Tính toán tương tự cho các nồng độ còn lại.

0,5 0,45 0,4 0,35 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0

QU Y

y = 0,0192x + 0,008 r² = 0,9979

M

Độ hấp thu UV

Diclofenac

KÈ

0

5

10

15

20

Nồng độ (µg/ml)

Đồ thị khảo sát độ tuyến tính

DẠ

Y

+ Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 0,0192x + 0,008 Với: x: nồng độ (µg/ml).

– Đánh giá

y: độ hấp thu UV. r: hệ số tương quan.

25

30

Nhận xét

+ r ≥ 0,998

FI CI A

+ r = 0,9989 → Đạt yêu cầu.

L

Yêu cầu

+ Nếu r nằm ngoài khoảng này cần phải có + Nhận xét: Có sự tương quan tuyến tính thuyết minh về sự phù hợp của việc chấp

giữa nồng độ diclofenac với độ hấp thu UV

nhận giá trị này.

trong khoảng nồng độ từ 16 – 24 µg/ml,

OF

với hệ số tương quan r = 0,9989.

– Kết luận: Quy trình định lượng diclofenac bằng đo quang phổ UV – Vis đạt yêu cầu về độ tuyến tính.

ƠN

3. Khoảng xác định – Cách tiến hành thí nghiệm

+ Khoảng xác định cho phép so với nồng độ thử khi thẩm định quy trình (khoảng tuyến tính).

NH

định lượng là 80 – 120 %. Được lấy từ kết quả nghiên cứu độ tuyến tính + Khảo sát ở 5 nồng độ 16 µg/ml, 18 µg/ml, 20 µg/ml, 22 µg/ml, 24 µg/ml.

Với 20 µg/ml là nồng độ thử (100 %), 16 µg/ml là 80 % so với nồng độ

QU Y

thử, và 22 µg/ml tương ứng với 120 % so với nồng độ thử.

– Đánh giá: Dựa vào kết quả ở mục 2 ta thấy, có sự tuyến tính trong khoảng nồng độ tương ứng với 80 – 120 % so với nồng độ thử (từ 16 – 24 µg/ml).

4. Độ đúng

M

– Kết luận: Khoảng xác định là từ 16 – 24 µg/ml.

– Cách tiến hành thí nghiệm: Khảo sát ở 3 nồng độ 18 µg/ml, 20 µg/ml và 22 µg/ml,

KÈ

tương ứng với 90, 100, 110 % so với hàm lượng theo công thức bào chế.

DẠ

Y

– Kết quả

0,352

182,9

101,6

180,0

0,353

183,4

101,9

3

180,0

0,347

180,3

100,2

4

200,0

0,391

203,2

101,6

200,0

0,389

202,2

101,1

6

200,0

0,396

7

220,0

0,433

220,0

0,433

220,0

0,435

90,0

5

100,0

110,0

8 9

OF

2

FI CI A

180,0

ƠN

1

L

Bảng kết quả khảo sát độ đúng STT % ban đầu Lượng thêm vào (µg) Độ hấp thu Lượng tìm lại (µg) % tìm lại

205,8

102,9

225,1

102,3

225,1

102,3

226,1

102,8

NH

– Giải thích kết quả tìm được ở bảng trên + Tính toán lượng tìm lại (µg)

 Dựa vào phương trình hồi quy tuyến tính y = 0,0192x + 0,008 ở mục 2, ta tính được lượng tìm lại của hoạt chất diclofenac (µg).

QU Y

 Ví dụ ở mẫu 1, ta có: 0,352 = 0,0192x + 0,008 => x = 18,29 (µg/ml).

Vì ta pha loãng thành 10 ml nên khối lượng tìm lại là 182,9 µg.  Tính toán tương tự cho các mẫu còn lại. + Tính toán tỷ lệ % tìm lại

M

 % tìm lại =

𝑙ượ𝑛𝑔 𝑡ì𝑚 𝑙ạ𝑖 (µ𝑔)

𝑙ượ𝑛𝑔 𝑡ℎê𝑚 𝑣à𝑜 (µ𝑔)

KÈ

 Ví dụ mẫu 1, ta có: % tìm lại =

𝑥 100

182,9 180,0

𝑥 100 ≈ 101,6 %.

DẠ

Y

 Tính toán tương tự cho các mẫu còn lại.

L

– Đánh giá Nhận xét

Tỷ lệ tìm lại (%): 97,0 – 103,0 %.

Nhìn vào bảng kết quả ta thấy 9 mẫu có tỷ lệ tìm lại (%)

FI CI A

Yêu cầu

đều nằm trong khoảng 97,0 – 103,0 %.

– Kết luận: Quy trình định lượng diclofenac bằng đo quang phổ UV – Vis đạt yêu 5. Độ chính xác

OF

cầu về độ đúng.

– Lấy ngẫu nhiên 20 viên nén diclofenac kali 50 mg và cân khối lượng.

02

m (g) 0,2321 STT

03

05

06

07

08

09

10

0,2379 0,2335 0,2321 0,2325 0,2322 0,2319 0,2350 0,2351 0,2338

11

12

m (g) 0,2353

04

ƠN

01

13

14

15

16

17

18

19

20

0,2317 0,2343 0,2320 0,2307 0,2328 0,2350 0,2276 0,2320 0,2329

NH

STT

Khối lượng trung bình của 20 đơn vị chế phẩm là: 20

=

0,2321 + 0,2379 + … + 0,2320 + 2329

QU Y

MTB =

∑20 i=1 𝑚𝑖

20

= 0,2333 (g)

→ Khối lượng trung bình của 20 viên nén bao diclofenac kali có hàm lượng diclofenac 50 mg là 0,2333 (g) hay 233,3 (mg).

– Tính toán khối lượng bột viên cần dùng cho thí nghiệm

M

MTB = 0,2333 g bột thuốc → chứa 50 mg hoạt chất diclofenac.

KÈ

mcần cân (g) bột thuốc => mcần cân =

20 𝑥 0,2333 50

← 20 mg hoạt chất diclofenac. ≈ 0,0933 (g)

5.1. Độ lặp lại

Y

– Cách tiến hành thí nghiệm: Tiến hành tối thiểu 6 phép định lượng với cùng một

DẠ

mẫu thử đã được làm đồng nhất.

– Bảng kết quả khảo sát độ lặp lại

Độ hấp thu

Hàm lượng %

L

STT Lượng cân (g) 93,1

0,387

99,7

2

93,5

0,392

100,6

3

93,9

0,397

101,4

4

93,5

0,392

100,6

5

93,4

0,390

100,2

6

93,9

0,395

100,9

OF

FI CI A

1

Trung bình 𝐶 (%)

100,6 0,58

ƠN

RSD (%) – Giải thích kết quả tính được ở bảng trên

+ Công thức tính hàm lượng trung bình của diclofenac trong viên: 𝑨𝒕

𝒙

𝑴 𝒎𝒄 𝒙 𝑻𝑩 𝒙 Cc 𝒙 100 𝑨 𝒎𝒕

NH

C (%) =

𝑨𝒄

Với: A = 50 (mg)

MTB = 233,3 (mg)

QU Y

mc = 20 (mg)

→ Ví dụ với mẫu 1, ta được: C (%) =

Cc = 100 % 0,387 0,389

𝑥

Ac = 0,389

20 233,3 𝑥 𝑥 100% 𝑥 100 = 99,7 %.

93,1 20

+ Hàm lượng trung bình của diclofenac trong viên là: 𝐶 = 6

2

6

∑6𝑖=1 𝐶𝑖 6

= 100,6 %.

2

M

∑ ∑ (𝐶𝑖 − 𝐶 ) (𝐶𝑖 − 100,6 ) + Độ lệch chuẩn: SD = √ 𝑖=1 = √ 𝑖=1 = 0,58.

+ Độ lệch chuẩn tương đối: RSD =

KÈ

5

𝑛−1

𝑆𝐷 𝐶

𝑥 100 = 0,58 %.

– Đánh giá

Y

Yêu cầu

DẠ

RSD ≤ 2%

Nhận xét RSD = 0,58 % < 2% → Đạt yêu cầu.

– Kết luận: Quy trình định lượng diclofenac bằng đo quang phổ UV – Vis đạt yêu cầu về độ lặp lại.

Độ chính xác trung gian

L

5.2.

FI CI A

– Cách tiến hành thí nghiệm: Thực hiện các phép định lượng trên cùng một lô sản phẩm với kiểm nghiệm viên khác nhau. Mỗi kiểm nghiệm viên định lượng 6 lần.

– Kết quả khảo sát độ chính xác trung gian Lượng cân mẫu (mg)

Độ hấp thu

Hàm lượng (%)

1

93,5

0,397

101,9

2

93,4

0,392

100,7

3

93,2

nén bao phim

4

93,9

diclofenac kali 50 mg

5

93,4

Như – Tên nguyên liệu: Viên

– Ngày định lượng:

0,390

100,4

0,402

102,7

0,391

100,4

0,397

101,8

TB

0,395

101,3

S

0,005

0,954

RSD

1,171

0,942

93,1

0,387

99,7

93,5

0,392

100,6

3

93,9

0,397

101,4

4

93,5

0,392

100,6

5

93,4

0,390

100,2

6

93,9

0,395

100,9

TB

0,392

100,6

S

0,004

0,583

RSD

0,904

0,580

ƠN

– KNV: Nguyễn Quỳnh

6

93,6

– Thiết bị: Máy đo quang phổ UV-Vis 1

Phương – Tên nguyên liệu: Viên nén bao phim diclofenac kali 50 mg

02/06/2020

KÈ

– Thiết bị: Máy đo

M

– Ngày định lượng:

QU Y

2

NH

02/06/2020

– KNV: Nguyễn Thị

quang phổ UV-Vis

Y

Kết quả thống kê: Ftn = 2,68 < Fc (α = 95%, 5, 5) = 5,05 + Các công thức sử dụng để tính toán

DẠ

OF

Thử nghiệm

KNV

 Trung bình: 𝑋 =

∑6𝑖=1 𝑋𝑖 6

L

∑6𝑖=1 (𝑋𝑖 − 𝑋 )2 𝑛−1

 Độ lệch chuẩn tương đối: RSD =

𝑆 𝐶

𝑥 100

FI CI A

 Độ lệch chuẩn: S = √

+ Dùng chuẩn F-Fisher với độ tin cậy α = 95%. Tính toán Ftn (F thực nghiệm) và so sánh với Fc (F tra bảng). 𝑆2 2

=

0,9542 0,5832

= 2,68 > 1.

OF

 Kết quả thống kê: Ftn =

𝑆1 2

Trong đó: 𝑆1 2 , 𝑆2 2 : các phương sai của kết quả của hai KNV, quy ước 𝑆1 2 > 𝑆2 2 .

ƠN

 Tra bảng phân phối F-Fisher, ta có Fc (α = 95%, 5, 5) = 5,05.  Suy ra: Ftn = 2,68 < Fc (α = 95%, 5, 5) = 5,05. Vậy hai kiểm nghiệm – Đánh giá Yêu cầu

Nhận xét

Ftn = 2,68 < Fc (α = 95%, 5, 5) = 5,05 → Đạt yêu cầu.

QU Y

Ftn ≤ Fc (α = 95%, n1-1, n2-1)

NH

viên có độ lặp lại giống nhau.

– Kết luận: Quy trình định lượng diclofenac bằng đo quang phổ UV – Vis đạt yêu cầu về độ chính xác trung gian.

Không làm.

M

6. Giới hạn phát hiện (LOD)

7. Giới hạn định lượng (LOQ)

KÈ

Không làm.

⁕ Tại sao không cần kiểm tra lại giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng khi thẩm định quy trình phân tích định lượng diclofenac trong viên nén diclofenac kali 50 mg?

DẠ

Y

– Theo ICH 2005, khi thẩm định quy trình phân tích định lượng thì không cần thiết phải xác định chỉ tiêu LOD và LOQ, mà chỉ cần kiểm tra các chỉ tiêu về tính đặc hiệu, độ tuyến tính, khoảng xác định, độ đúng, độ chính xác.

L

– LOQ và LOD thường được dùng để định lượng các chất có nồng độ thấp trong

FI CI A

mẫu thử như tạp chất, sản phẩm phân hủy).

DẠ

Y

KÈ

M

QU Y

NH

ƠN

OF

– Vậy nên ta không cần thiết phải thử giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng.