Định lượng đồng thời paracetamol, Chlorpheniramine maleate và Phenylephrine hydrochloride trong thuố

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

NGUYỄN HỮU TRUNG

ĐINH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, ̣ CHLORPHENIRAMINE MALEATE VÀ PHENYLEPHRINE HYDROCHLORIDE TRONG THUỐC DECOLGEN FORTE BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VÀ PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60.44.01.18

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT

Hướng dẫn khoa học: PGS.TS MAI XUÂN TRƯỜNG

THÁI NGUYÊN - NĂM 2016

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này

H

Ó H Í-L ÁN TO ÀN

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

NGUYỄN HỮU TRUNG

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

Tác giả luận văn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Thái Nguyên, tháng 06 năm 2016

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc.

Ơ

cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã được cảm

N

là trung thực và chưa hề được sử dụng trong bấ t cứ mô ̣t công trình nào. Tôi xin

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN i Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

LỜI CẢM ƠN Trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tác giả đã nhận được

N

rất nhiều sự quan tâm, động viên và giúp đỡ của các thầy giáo, cô giáo,

Ơ

bạn bè và gia đình.

ẠO

Tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Mai Xuân

G N

nghiên cứu, thực hiện và hoàn thành luận văn.

Đ

Trường người đã tận tình hướng dẫn chỉ bảo và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình

H Ư

Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè và

TR ẦN

đồng nghiệp những người đã luôn bên tôi, động viên và khuyến khích tôi trong quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu của mình.

10 00

B

Với khối lượng công việc lớn, thời gian nghiên cứu có hạn, khả năng nghiên cứu còn ha ̣n chế, chắc chắn luận văn không thể tránh khỏi những thiếu sót. Tác giả rất mong nhận được các ý kiến đóng góp từ thầy giáo, cô giáo và

A

bạn đọc.

Thái Nguyên, tháng 6 năm 2016

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

Xin chân thành cảm ơn !

D

IỄ N

Đ

ÀN

Tác giả

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

nghiên cứu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

giảng dạy đã cung cấp những kiến thức giúp tôi trong suốt quá trình học tập và

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

Tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Khoa Hóa ho ̣c, Phòng Đào tạo Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên, các thầy cô giáo tham gia

Nguyễn Hữu Trung

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN ii Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

1.1. Tổng quan về phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ...................... 2 1.1.1. Khái niệm và nguyên tắc của phương pháp HPLC ........................... 2 1.1.2. Một số đại lượng đặc trưng trong phân tích sắc ký .......................... 3 1.1.3. Hệ thống máy HPLC. ................................................................................ 6 1.1.4. Pha tĩnh ...................................................................................................... 7 1.1.5. Pha động .................................................................................................... 7 1.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử ............................................ 8 1.2.1. Định luật Bughe - Lămbe – Bia................................................................. 8 1.2.2. Định luật cộng tính .................................................................................... 9 1.2.3. Phương pháp lọc Kalman ……………………………………….............10 1.3. Tổng quan về các chất phân tích trong thuốc Decolgen forte ....................................11 1.3.1. Paracetamol.............................................................................................. 11 1.3.2. Phenylephrine hydrochloride................................................................ ...12 1.3.3. Chlorpheniramine maleate....................................................................... 12 1.4. Kết quả xác định một số chất theo phương pháp HPLC và theo phương pháp UV-Vis .............................................................................. 13 1.4.1. Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử .................................................................................................. 13 1.4.2. Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ............................................................................................................. 16 Chương 2. THỰC NGHIỆM .......................................................................... 23

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ẠO

Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ............................................................... 2

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

Trang Lời cam đoan ........................................................................................................ i Lời cảm ơn ........................................................................................................... ii Mục lục ............................................................................................................... iii Danh mục các từ viết tắt của luận văn ................................................................ iv Danh mục các bảng của luận văn ........................................................................ v Danh mục các hình của luận văn ........................................................................ vi MỞ ĐẦU ............................................................................................................. 1

2.1. Đối tượng nghiên cứu ....................................................................... 23 2.2. Phương pháp nghiên cứu .................................................................. 23 2.2.1. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ................................................. 23

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN iii Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

3.1. Phương pháp HPLC .......................................................................... 32 3.1.1. Xây dựng điều kiện để xác định đồng thời 3 chất PRC, CPM và PNH .. 32 3.1.2. Đánh giá phương pháp định lượng .......................................................... 36 3.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử .......................................... 43 3.2.1. Khảo sát phổ hấp thụ phân tử của paracetamol, chlorpheniramine maleate và phenylephrine Hydrochloride ....................................................... ...44 3.2.2. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH vào môi trường các axit ở giá tri pH ̣ khác nhau………………………………………..46 3.2.3. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo thời gian ............................................................................................................. 47 3.2.4. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo nhiệt độ .............................................................................................................. 48 3.2.5. Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia của PRC, CPM và PNH. Xác định chỉ số LOD và LOQ ........................................... 50 3.2.6. Khảo sát và đánh giá độ tin cậy của phương pháp nghiên cứu trên các mẫu tự pha ......................................................................................................... 57 3.2.7. Xác định hàm lượng PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phương pháp thêm chuẩn .......... 64 KẾT LUẬN....................................................................................................... 67

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

2.2.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử ................................................ 24 2.3. Phương pháp xử lý số liệu ................................................................ 25 2.3.1. Các phương pháp để xử lý kết quả phân tích. ......................................... 25 2.3.2. Các đại lượng đặc trưng để xử lý kết quả phân tích. ............................... 25 2.4. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất ............................................................ 27 2.4.1. Thiết bị ..................................................................................................... 27 2.4.2. Dụng cụ .................................................................................................... 27 2.4.3. Hóa chất ................................................................................................... 27 2.4.4. Chế phẩm thuốc Decolgen forte .............................................................. 28 2.5. Chuẩn bị các dung môi để hò a tan mẫu ............................................ 28 2.6. Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp HPLC ................... 28 2.7. Chuẩn bị dung dịch thuốc Decolgen forte cho phương pháp HPLC ..30 2.8. Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp UV-Vis ................. 30 2.9. Chuẩn bị dung dịch thuốc Decolgen forte cho phương pháp UV-Vis 31 Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN........................... 31

TÀI LIỆU THAM KHẢO............................................................................... 69 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Viết tắt

Paraxetamon

Paracetamol

PRC

Clopheninamin maleat

Chlorpheniramine maleate

Phenylephin hidrocloric

Phenylephrine hydrochloride

Giới hạn phát hiện

Limit Of Detection

Giới hạn định lượng

Limit Of Quantity

Độ thu hồi

Recovery

Sai số tương đối

Relative Error

Độ lệch chuẩn

Độ hấp thụ quang

Rev RE SD HPLC Abs

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

Absorption

LOQ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

Chromatography

LOD

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

B

High Performance Liquid

PNH

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

U Y

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

.Q

CPM

Standard Deviation

Sắc ký lỏng hiệu năng cao

Ơ

Tiếng Anh

H

Tiếng việt

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CỦA LUẬN VĂN

iv Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC BẢNG CỦA LUẬN VĂN

D

v Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

Bảng 3.1. Giá trị các đại lượng đặc trưng.......................................................... 36 Bảng 3.2. Kết quả khảo sát thời gian lưu .......................................................... 36 Bảng 3.3. Kết quả khảo sát diện tích pic ........................................................... 37 Bảng 3.4. Mối tương quan giữa nồng độ và diện tích pic của PRC, CPM và PNH ................................................................................................................... 38 Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại ................................................................ 41 Bảng 3.6. Kết quả phân tích thuốc Decolgen forte ........................................... 43 Bảng 3.7. Kết quả khảo sát độ đúng .................................................................. 42 Bảng 3.8. Kế t quả đô ̣ hấ p thu ̣ quang tại thời điể m 30 phút sau khi pha của PRC, CPM và PNH ở các giá tri ̣pH.................................................................. 46 Bảng 3.9. Sự phu ̣ thuô ̣c độ hấp thụ quang theo thời gian ................................. 47 Bảng 3.10. Sự phu ̣ thuô ̣c độ hấp thụ quang theo nhiệt độ ................................. 49 Bảng 3.11. Đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dịch PRC ở các giá tri ̣nồng độ .......... 50 Bảng 3.12. Kết quả xác đinh ̣ LOD và LOQ của PRC ....................................... 52 Bảng 3.13. Sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang của CPM theo nồng độ.............. 53 Bảng 3.14. Kết quả tính LOD và LOQ của CPM.............................................. 54 Bảng 3.15. Sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang của PNH theo nồ ng độ ................. 55 Bảng 3.16. Kết quả tính LOD và LOQ của PNH .............................................. 57 Bảng 3.17. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p PRC và CPM ................................ 57 Bảng 3.18. Kế t quả tin ́ h nồ ng đô ̣, sai số của PRC và CPM trong hỗn hơ ̣p....... 58 Bảng 3.19. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p PRC và PNH ................................ 59 Bảng 3.20. Kế t quả tin ́ h nồ ng đô ̣, sai số của PRC và PNH trong hỗn hơ ̣p ....... 60 Bảng 3.21. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p CPM và PNH ............................... 61 Bảng 3.22. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của CPM và PNH trong hỗn hơ ̣p ...... 62 Bảng 3.23. Pha các dung dịch chuẩ n PRC, CPM, PNH và hỗn hơ ̣p ................ 63 Bảng 3.24. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của PRC, CPM và PNH .................... 63 Bảng 3.25. Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc Decolgen forte. .................................................................................................. 65 Bảng 3.26. Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc Decolgen forte. ........................................................................................ 66

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

DANH MỤC CÁC HÌNH CỦA LUẬN VĂN Hình 1.1.Thờig ian lưu của cấu tử phân tích. ..................................................... 3

N

Hình 1.2. Sơ đồ hệ thống máy HPLC .................................................................. 6

H

Ơ

Hình 1.3. Hình ảnh máy HPLC trong phòng thí nghiệm .................................... 6

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

Hình 3.4. Sắc kí đồ của PRC (3), CPM (2) và PNH (1) ................................... 35

H Ư

N

G

Hình 3.5. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của PRC ....................................................................................................... 39

TR ẦN

Hình 3.6. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của CPM ...................................................................................................... 39

10 00

B

Hình 3.7. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của PNH ....................................................................................................... 40

A

Hình 3.8. Phổ hấp thụ quang của các dung dịch chuẩn PRC(1), CPM(2) và PNH(3)... ............................................................................................................ 45

Ó

Hình 3.9. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang theo thời gian .................................. 48

-L

Í-

H

Hình 3.10. Sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang theo nhiê ̣t đô ................................

49 ̣ Hình 3.11. Phổ hấp thụ quang của PRC ở các nồng độ 1,0 50,0 g/mL ........ 50

ÁN

Hình 3.12. Đường hồ i quy tuyế n tính biể u diễn sự phu ̣ thuô ̣c của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng đô ̣ của PRC.............................................................................. 51

D

IỄ N

Đ

ÀN

Hình 3.13. Phổ hấp thụ quang của CPM ở các nồng độ 150 g/mL .............. 52 Hình 3.14. Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang vào nồng độ CPM ................................................................................... 53

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Hình 3.3. Sắc kí đồ của PNH (10 µg/mL) ........................................................ 35

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Hình 3.2. Sắc kí đồ của CPM (4 µg/mL) .......................................................... 34

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

Hình 3.1. Sắc kí đồ của PRC (500 µg/mL) ....................................................... 34

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Hình 1.4. Mô hình hoạt động của bộ lọc Kalman ............................................. 10 Hình 2.1. Chế phẩm thuốc Decolgen forte ........................................................ 28

Hình 3.15. Phổ hấp thụ quang của PNH ở các nồng độ 1,0 50,0 g/mL ........ 55 Hình 3.16. Đường hồ i quy tuyế n tính biể u diễn sự phu ̣ thuô ̣c của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng đô ̣ PNH .................................................................................... 56

vi Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

MỞ ĐẦU Ngày nay, cùng với sự phát triển mạnh mẽ của khoa học kỹ thuật, ngành

Ơ

dược phẩm đã áp dụng nhiều phương thức sản xuất và chế biến tiên tiến để

N

công nghệ dược phẩm cũng phát triển một cách nhanh chóng. Các nhà sản xuất

U Y

hợp như cảm cúm, hạ sốt, nhức đầu, ho… Với những thành phần khác nhau

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

cũng có thể ảnh hưởng đến sức khỏe của hàng nghìn, hàng triệu người. Do đó

G

để đánh giá đúng chất lượng sản phẩm một cách nhanh chóng, chính xác, an

H Ư

N

toàn và hiệu quả thì công tác kiểm nghiệm để xác định các thành phần của thuốc bằng các phương pháp hiện đại có độ chính xác cao ngày càng được quan

TR ẦN

tâm. Nhiều phương pháp có độ lặp và độ chính xác cao đã được ứng dụng. Sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, phương pháp quang phổ hấp thụ

10 00

B

phân tử dùng phổ toàn phần kết hợp với kỹ thuật tính toán và ứng dụng phần mềm máy tính đã được nghiên cứu và cho nhiều ưu điểm như độ nhạy, độ lặp,

A

độ chính xác, độ tin cậy của phép phân tích cao, phân tích nhanh, tiện lợi.

Í-

H

Ó

Xuấ t phát từ những lý do trên chúng tôi chọn đề tài: "Định lượng đồng thời paracetamol, Chlorpheniramine maleate và Phenylephrine hydrochloride

TO

ÁN

-L

trong thuốc Decolgen forte bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử ".

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

quan trọng vì chỉ cần thay đổi một lượng nhỏ thành phần hoạt tính của thuốc

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

hoạt chất trong các loại thuốc hỗn hợp theo tiêu chuẩn của nhà sản xuất là rất

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

ngày càng được sản xuất và sử dụng rộng rãi ở nước ta. Việc định lượng các

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

tổng hợp ra nhiều loại dược phẩm có tính năng vượt trội. Nhiều loại thuốc hỗn

1 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 1

Ơ

N

TỔNG QUAN TÀI LIỆU

H

1.1. Tổng quan về phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

1.1.1.2. Nguyên tắc Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp tách một hỗn hợp chất lỏng dựa trên sự phân bố chúng giữa hai pha, một pha đứng yên gọi là pha tĩnh, một pha di chuyển gọi là pha động. Do ái lực hấp thu và giải hấp thu khác nhau của các hợp phần có trong mẫu phân tích với pha tĩnh và pha động mà chúng di chuyển dọc theo pha tĩnh (cột sắc ký) tốc độ khác nhau nên lần lượt đi ra khỏi cột. Pha tĩnh là một yếu tố quan trọng quyết định bản chất của quá trình sắc ký và loại sắc ký. Nếu pha tĩnh là chất hấp phụ thì ta có sắc ký hấp phụ pha thuận hoặc pha đảo. Nếu pha tĩnh là chất trao đổi ion thì ta có sắc ký trao đổi ion. Nếu pha tĩnh là chất lỏng thì ta có sắc ký phân bố.

2

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

1.1.1.1. Khái niệm Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp chia tách trong đó pha động là chất lỏng và pha tĩnh chứa trong cột là chất rắn đã được phân chia dưới dạng tiểu phân hoặc một chất lỏng phủ lên một chất mang rắn, hay một chất mang đã được biến đổi bằng liên kết hoá học với các nhóm chức hữu cơ.

Quá trình sắc ký lỏng dựa trên cơ chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion hay phân loại theo kích cỡ (Rây phân tử).

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

1.1.1. Khái niệm và nguyên tắc của phương pháp HPLC

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

HPLC là chữ viết tắt của 04 chữ cái đầu bằng tiếng Anh của phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (High Performance Liquid Chromatography) trước kia gọi là phương pháp sắc ký lỏng cao áp (High Pressure Liquid Chromatography). Phương pháp này ra đời từ năm 1967-1968 trên cơ sở phát triển và cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển. Hiện nay phương pháp HPLC ngày càng phát triển và hiện đại hoá cao nhờ sự phát triển nhanh chóng của ngành chế tạo máy phân tích. Hiện nay nó được áp dụng rất lớn trong nhiều ngành kiểm nghiệm đặc biệt là ứng dụng cho ngành kiểm nghiệm thuốc. Máy HPLC hiện là công cụ đắc lực trong phân tích các thuốc đa thành phần cho phép định tính và định lượng.

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.1.2. Một số đại lượng đặc trưng trong phân tích sắc ký Trong quá trình sắc ký luôn có sự phân bố của chất tan giữa pha động

H

Ơ

và pha tĩnh. Sự phân bố này đặc trưng bởi cân bằng phân bố với hệ số phân bố

N

1.1.2.1. Hệ số phân bố

,

chất thì: t R =

thời gian lưu trữ của một

tR - t 0

t R, là thời gian lưu thực

A

trong đó:

B

t R là

10 00

Nếu gọi

TR ẦN

khi chất đó ra khỏi cột đạt giá trị nồng độ cực đại và cho ra pic trên sắc ký đồ.

H

Ó

(thời gian lưu hiệu chỉnh).

Í-

to là thời gian chết (thời gian không lưu

-L

trữ).

ÁN

Hình 1.1. Thời gian lưu

Đ

ÀN

TO

của cấu tử phân tích Trong cùng một điều kiện sắc ký đã chọn, thời gian lưu của mỗi chất là

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

Thời gian lưu của một chất là thời gian tính từ lúc tiêm mẫu vào cột đến

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

G

1.1.2.2. Thời gian lưu và thể tích lưu

Đ

và pha động ở thời điểm cân bằng.

ẠO

là nồng độ của chất phân tích tương ứng trong pha tĩnh

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

trong đó: K là hệ số phân bố.

IỄ N D

(1.1)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

K=

U Y

N

được tính theo công thức sau:

hằng định và các chất khác nhau thì thời gian lưu khác nhau tùy thuộc vào bản chất, cấu tạo vào tính chất của chất đó. Vì vậy thời gian lưu là đại lượng định tính các chất. Khi pha động chảy qua cột với một tốc độ không đổi thì thời gian lưu có thể thay thế bằng thể tích lưu. Thể tích lưu là thể tích pha động thu được sau cột trong khoảng thời gian tương ứng với thời gian lưu.

3

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.1.2.3. Thừa số dung lượng VS = VM

(1.2)

N H

Ơ

trong đó : VS, VM là thể tích của pha tĩnh và pha động lúc cân bằng

N

k’ là thừa số dung lượng

ẠO

1.1.2.4. Hệ số chọn lọc

=

=

=

(1.3)

TR ẦN

α=

H Ư

N

lọc cho biết hiệu quả tách của hệ thống sắc ký.

G

Đ

Hai chất chỉ được tách ra khi chúng có giá trị k' khác nhau, hệ số chọn

Ở đây ta quy ước chất B bị lưu giữ mạnh hơn chất A như vậy  luôn lớn hơn 1,  càng lớn thì khả năng tách của 2 chất càng rõ. Thường phân tích

10 00

B

trong điều kiện  trong khoảng 1,5 đến 2.

1.1.2.5. Số đĩa lý thuyết và chiều cao đĩa lý thuyết

Ó

A

Hiệu lực cột thường biểu thị qua hai thông số: Số đĩa lý thuyết (N) hoặc

H

chiều cao đĩa lý thuyết (H). Cột sắc ký được coi như có N tầng lý thuyết, ở

Í-

mỗi tầng sự phân bố chất tan vào 2 pha lại đạt đến một trạng thái cân bằng

-L

mới. Mỗi tầng được giả định như một lớp pha tĩnh có chiều cao H. Đĩa lý

ÁN

thuyết được định nghĩa như một khu vực của hệ thống phân tách mà trong

TO

đó thiết lập một cân bằng nhiệt động giữa nồng độ trung bình của chất tan

D

IỄ N

Đ

ÀN

trong pha tĩnh và trong pha động.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

năng tù và k’ lý tưởng là từ 2 - 5.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

lại. Nếu k’ lớn thì tR lớn chất ở trong cột lâu thời gian phân tích lâu mũi pic có khả

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

Nếu k’→ 0 thì tR→ t0 chất ra rất nhanh và cột không có khả năng giữ chất

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

k’ = K.

- Số đĩa lý thuyết N được tính theo các công thức: hoặc 5,54×

N = 16×

(1.4)

trong đó: W là chiều rộng pic ở đáy pic. là chiều rộng pic đo ở nửa chiều cao của pic.

4

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Chiều cao của đĩa lý thuyết được tính theo công thức: L N

(1.5)

N

H=

H

Ơ

trong đó: L là chiều cao cột sắc kí.

U Y

G

Đ

trong điều kiện sắc ký đã cho. Độ phân giải của hai pic cạnh tranh được tính

=

trong đó:

=

×

(1.6)

TR ẦN

=

H Ư

N

theo công thức sau:

là thời gian lưu tương ứng của chất A, chất B.

,

là chiều rộng pic đo ở nửa chiều cao pic của chất A, chất B.

B

,

là chiều rộng pic ở đáy pic.

10 00

,

α là hệ số chọn lọc.

Ó

A

1.1.2.7. Hệ số đối xứng (T)

Í-

H

Cho biết mức độ cân đối của pic sắc ký, nó được tính theo công thức:

ÁN

-L

T=

WX 2A

(1.7)

Đ

ÀN

TO

trong đó: WX là độ rộng đáy pic đo ở 1/20 chiều cao của pic.

A là khoảng cách từ đường vuông góc hạ từ cực đại của pic đến chân đường cong phía trước ở tại 1/20 chiều cao của pic.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Độ phân giải là đại lượng biểu thị độ tách của các chất ra khỏi nhau

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP ẠO

1.1.2.6. Độ phân giải ( RS )

1.1.2.8. Phương trình Van – Deemter

IỄ N D

.Q

đĩa lý thuyết (N) là hằng định đối với mỗi chất phân tích.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Với một điều kiện sắc ký nhất định, chiều cao đĩa lý thuyết (H) và số

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H là chiều cao đĩa lý thuyết.

H=A+

B +C.u u

(1.8)

trong đó: H là Chiều cao đĩa lí thuyết.

U là tốc độ dòng.

A, B, C là hệ số thay đổi phụ thuộc vào từng cột sắc ký.

5

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Cột tách (pha tĩnh).

- Detector.

10 00

B

- Máy ghi tín hiệu hoặc máy vi tính.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

- Máy in.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

- Bộ tiêm mẫu: tiêm vào cột một thể tích mẫu nhất định.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

H Ư

- Bơm cao áp: đẩy pha động qua cột sắc ký.

N

G

- Bộ khử khí.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ

- Bình chứa dung môi (pha động).

ẠO

Hệ thống máy HPLC có các bộ phận chính sau:

.Q

Hình 1.2. Sơ đồ hệ thống máy HPLC

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

1.1.3. Hệ thống máy HPLC

Hình 1.3. Hình ảnh máy HPLC ở phòng thí nghiệm

6

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.1.4. Pha tĩnh

U Y

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

Phải trơ và bền vững với các điều kiện của môi trường sắc ký. Có khả năng tách chọn lọc một hỗn hợp chất tan nhất định trong điều kiện sắc ký nhất định. Tính chất bề mặt phải ổn định (đặc biệt là đặc trưng xốp của nó). Cân bằng động học của sự tách phải xảy ra nhanh và lặp lại tốt. Cỡ hạt phải tương đối đồng nhất.

TO

1.1.5. Pha động

D

IỄ N

Đ

ÀN

1.1.5.1. Khái niệm

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

Đ

G

N

H Ư

TR ẦN

B

10 00

1.1.4.3. Điều kiện đối với một pha tĩnh

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Căn cứ theo bản chất chính của quá trình sắc ký trong cột tách, người ta chia nó thành nhiều loại như hấp phụ, phân bố, trao đổi ion và rây phân tử.

Tương ứng với loại chất nhồi như thế người ta có một loại sắc ký riêng trong kĩ thuật HPLC. Căn cứ theo trạng thái rắn lỏng của pha tĩnh, người ta chia nó thành hai loại, nếu pha tĩnh là chất rắn ta có sắc ký lỏng rắn (LSC), nếu pha tĩnh là chất lỏng ta có sắc ký lỏng-lỏng (LLC). Căn cứ theo độ phân cực của pha tĩnh và pha động, có các loại: Sắc ký pha thuận (pha tĩnh phân cực còn pha động ít phân cực), sắc ký pha đảo (pha tĩnh ít phân cực còn pha động thì phân cực), sắc ký pha đảo tạo cặp ion và sắc ký trao đổi ion. Căn cứ theo cấu trúc xốp của pha tĩnh là các hạt rắn, người ta chia nó thành 2 loại là xốp toàn phần hạt và xốp bề mặt hạt (xốp chỉ lớp vỏ ngoài).

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1.1.4.2. Phân loại

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

Pha tĩnh là chất nhồi cột để làm nhiệm vụ tách 1 hỗn hợp chất phân tích. Nó là những chất rắn, xốp, kích thước hạt rất nhỏ, đường kính cỡ hạt từ 3-10  m, diện tích bề mặt thường từ 50-500 m 2 /g.

N

1.1.4.1. Khái niệm

Pha động là dung môi dùng để rửa giải chất tan (chất cần phân tích) ra khỏi cột tách để thực hiện quá trình sắc ký. Đây là một yếu tố rất linh động và dễ dàng thay đổi. Nó có thể là một dung môi hoặc hỗn hợp nhiều dung môi trộn lẫn với nhau theo những tỉ lệ nhất định. Nó có thể là dung dịch hoặc các muối có chứa các chất đệm, chất tạo phức... Nói chung mỗi loại sắc ký sẽ có các hệ dung môi rửa giải riêng để có được hiệu quả phân tách tốt nhất.

7

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.1.5.2. Quá trình rửa giải giải. Rửa giải gradient pha động liên tục thay đổi (do tỉ lệ tạo nên các thành

H

Ơ

phần pha động thay đổi) trong suốt quá trình rửa giải. Lúc này độ phân cực

N

Rửa giải đẳng dòng pha động không thay đổi trong suốt quá trình rửa

G

1.1.5.4. Điều kiện đối với một pha động

H Ư

N

Phải trơ đối với pha tĩnh, hòa tan được chất cần phân tích, bền vững

TR ẦN

theo thời gian. Có độ tinh khiết cao, phải nhanh đạt các cân bằng trong sắc ký.

Phù hợp với các loại detector dùng để phát hiện các chất phân tích. Có tính kinh tế và không khan hiếm. Pha động là một trong những yếu tố quyết định

10 00

B

hiệu suất tách sắc ký của một hỗn hợp mẫu. Nó quyết định thời gian lưu giữ các chất mẫu và hiệu quả sự tách sắc ký. Pha động có thể ảnh hưởng đến:

Ó

A

- Độ chọn lọc của hệ pha, thời gian lưu giữ của chất tan .

H

- Độ phân giải các chất trong một pha tĩnh.

-L

Í-

- Độ rộng và sự cân đối của sắc ký đồ. Tất cả các dung môi dùng trong

ÁN

HPLC (kể cả pha động) đều được đuổi khí bằng cách đun nóng, hút chân không, lắc siêu âm... Vì không khí hòa tan trong dung môi sẽ tạo bọt khí trong

TO

detector và gây nhiễu tín hiệu.

D

IỄ N

Đ

ÀN

1.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ký trao đổi ion và sắc ký cặp ion).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ẠO

ra pha động, tốc độ dòng pha động và pH của pha động (đặc biệt chú ý ở sắc

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y .Q

Bản chất của dung môi lựa chọn làm pha động, thành phần các chất tạo

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

1.1.5.3. Các yếu tố chính cần chú ý trong lựa chọn pha động

N

của pha động cũng sẽ bị biến đổi và thường là tăng hiệu quả tách.

1.2.1. Định luật Bughe - Lămbe – Bia Khi chiếu một chùm tia sáng có năng lươ ̣ng nhấ t định vào mô ̣t dung dịch chứa cấu tử hấp thụ ánh sáng thì cấu tử đó sẽ hấp thụ chọn lọc một số tia sáng. Độ hấp thụ quang của cấu tử tỷ lệ thuận với nồng độ của chất trong dung dịch và bề dày lớp dung dịch mà ánh sáng truyền qua.

8

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Phương trình toán học biểu diễn định luật Bughe - Lămbe - Bia : A = . b. C

trong đó: A là độ hấp thụ quang của dung dịch ở bước sóng  (A không có

10 00

B

cấu tử tại bước sóng  bằng phương trình toán học: n

A λ =A1,λ +A 2,λ +...+A i,λ +...+A n,λ =  A i,λ

(1.10)

A

i=1

H

Ó

trong đó: A là độ hấp thụ ánh sáng của dung dịch hỗn hợp chứa n cấu

Í-

tử ở bước sóng .

ÁN

-L

A i, là độ hấp thụ ánh sáng của cấu tử thứ i ở bước sóng  n là số cấu tử hấp thụ ánh sáng có trong hỗn hợp (i = 1n).

Đ

ÀN

TO

Vì A =   .b.C nên ta có: n

A λ = ε1,λ .b.C1 +ε 2,λ .b.C2 +...+ε n,λ .b.Cn =  ε i,λ .b.Ci i=1

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Biểu diễn tính cộng tính về độ hấp thụ quang của dung dịch hỗn hợp chứa n

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

H Ư

N

Bản chất của định luật cộng tính là sự độc lập của đại lượng độ hấp thụ quang của một chất riêng biệt khi có mặt của các chất khác có sự hấp thụ ánh sáng riêng.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

Đ

ẠO

Định luật cộng tính là một sự bổ sung quan trọng cho các định luật hấp thụ ánh sáng. Định luật cộng tính là cơ sở định lượng cho việc xác định nồng độ của hệ trắc quang nhiều cấu tử.

IỄ N D

TP

1.2.2. Định luật cộng tính

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

C là nồng độ của cấu tử trong dung dịch (mol/lít).

U Y

b là bề dày lớp dung dịch (cm).

N

 là hệ số hấp thụ mol phân tử của cấu tử tại bước sóng .

H

Ơ

thứ nguyên).

N

(1.9)

(1.11)

Định luật cộng tính được phát biểu như sau: “Ở một bước sóng đã cho độ hấp thụ quang của một hỗn hợp các cấu tử không tương tác hóa học với nhau và bằng tổng độ hấp thụ quang của các cấu tử riêng biệt ở cùng bước sóng này”.

9

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.2.3. Phương pháp lọc Kalman nhằm loại bỏ các tín hiệu "nhiễu" và sau đó được ứng dụng vào hoá học trắc

N

Thuật toán lọc Kalman đầu tiên được nghiên cứu trong vật lý vô tuyến

H

Ơ

quang. Thuật toán lọc Kalman hoạt động trên cơ sở các file dữ liệu phổ ghi được

.Q

kết quả tính toán liên tiếp sẽ càng tiến gần đến giá trị thực. Trong thực tế, người

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

toán là lý tưởng khi phổ của hỗn hợp trừ đi phổ nhân tạo được tính bởi lọc

N

G

Kalman sẽ tạo ra một đường thẳng có độ lệch không đáng kể. Độ đúng của phép

H Ư

xác định phụ thuộc vào độ nhiễu của nền, vào việc tách các đỉnh phổ hấp thụ của

TR ẦN

các cấu tử và sự tương tác giữa các cấu tử. Hỗn hợp có càng ít cấu tử, các đỉnh hấp thụ càng cách xa nhau thì sai số của phép tính toán sẽ càng nhỏ.

Việc tính toán sẽ được thực hiện trên toàn bộ khoảng bước sóng được

10 00

B

chọn. Nếu kết thúc quá trình tính toán, độ lệch chuẩn tương đối của giá trị nồng độ các cấu tử trong hỗn hợp vẫn lớn hơn giá trị sai số cho phép thì nồng

A

độ của cấu tử đó sẽ phải xác định lại. Khi đó, cần phải tăng giá trị sai số mặc

Í-

H

Ó

định hoặc giảm số giá trị nồng độ mặc định để tính giá trị nồng độ trung bình.

TO

ÁN

-L

Tín hiệu cần đo

Đ IỄ N

Bộ lọc

Giá trị đo được

D

Các nguồn nhiễu

Bộ phận tiếp nhận tín hiệu

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

hợp với phổ nhân tạo được dự đoán bởi phương pháp lọc Kalman. Kết quả tính

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

ta sử dụng phương pháp bình phương tối thiểu để giảm sai số giữa phổ của hỗn

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

của từng cấu tử trong hỗn hợp tại các bước sóng. Khi chương trình chạy, những

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

của từng cấu tử riêng rẽ và của hỗn hợp các cấu tử, xác định sự đóng góp về phổ

Hin ̀ h 1.4. Mô hình hoạt động của bộ lọc Kalman

10

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.3. Tổng quan về các chất phân tích trong thuốc Decolgen forte 1.3.1. Paracetamol

.Q

Đ

acetanilit.

N

G

Công thức cấu tạo

H Ư

1.3.1.2. Tính chất [8]

TR ẦN

Paracetamol là chất bột kết tinh màu trắng, không mùi, vị đắng nhẹ.

Khối lượng riêng: 1,263 g/cm 3 và nhiệt độ nóng chảy: 169 0 C. Độ tan trong nước: 0,1÷0,5g/100mL nước tại 22 0 C. Ngoài ra còn có khả năng tan trong

10 00

B

etanol, dung dịch kiềm, dung dịch axit... Đặc tính phổ hấp thụ tử ngoại: Trong môi trường axit, paracetamol có cực đại hấp thụ tại 245nm, trong môi trường

H

Ó

A

kiềm, paracetamol có cực đại hấp thụ tại 257nm. Tính chấ t hóa ho ̣c của paracetamol do nhóm -OH, nhóm chức axetamit và tính chất của nhân thơm

Í-

quyết định. Sự có mặt của 2 nhóm hydroxyl và axetamit làm cho nhân benzen

-L

được hoạt hóa có thể phản ứng được với các hợp chất thơm có ái lực electron.

ÁN

Sự liên kết giữa nhóm axetamit, hydroxyl với vòng benzen làm giảm tính

TO

bazơ của nhóm amit và làm tăng tính axit của nhóm hydroxyl. Nhóm - OH

D

IỄ N

Đ

ÀN

làm cho chế phẩm có tính axit và khi tác du ̣ng với dung dịch muối sắt (III) cho màu tím. Đun nóng với dung dịch HCl thì bi ̣ thủy phân, thêm nước thì

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

p-hydroxy acetanilit hoặc 4-hydroxy

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N-(4-hydroxyphenyl) acetamit hoặc

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

- Tên IUPAC công thức cấu tạo là:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

- Tên quốc tế: Paracetamol (tên khác là Acetaminophen).

H

- Công thức phân tử: C8H9O2N khối lượng mol phân tử: 151,17 (g/mol).

Ơ

N

1.3.1.1. Giới thiệu chung[2]

không có kết tủa vì p-aminophenol tạo thành tan trong axit. Thêm thuốc thử kali đicromat thì có kết tủa màu tím khác với phenacetin là không chuyển sang đỏ. Quá trình xảy ra chủ yếu là: HO

NHCOCH3

HCl tO

HO

NH2

11

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

K2Cr2O7 [O]

O

NH

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.3.2. Phenylephrine hydrochloride 1.3.2.1. Giới thiệu chung[2]

Ơ

N

- Công thức phân tử: C9 H13NO2 . HCl

N

G

alcohol hydrochloride hay còn gọi là phenylephrine hydrochloride.

H Ư

1.3.2.2. Tính chất [8]

TR ẦN

Phenylephrine hydrochloride là một loại thuốc giảm sung huyết trong điều trị bệnh viêm mũi dị ứng theo mùa và cảm. Phenylephrine hydrochloride có

B

tác dụng giãn phế quản và có trong một số thuốc dùng trong điều trị bệnh hen phế

10 00

quản và viêm phế quản mạn. Thuốc kích thích chọn lo ̣c trên alph1-adrenner gây co mạch tăng huyế t áp và có tác du ̣ng kéo dài hơn adrennergic do ít bi ̣phân hủy.

Ó

A

Trong dạng thuốc nhỏ mắt, phenylephrine hydrochloride được dùng để làm giãn

Í-

H

đồng tử lúc khám (soi đáy mắt) hay phẫu thuật mắt .

-L

1.3.3. Chlorpheniramine maleate

ÁN

1.3.3.1. Giới thiệu chung[2] - Công thức phân tử là:C16H19ClN2.C4H4O4.

- Công thức cấu tạo

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

- Khối lượng mol phân tử: 390,87 (g/mol).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

- Tên hóa học: (-) - m -Hydroxy-á-[(methyl-amino) metyl] benzyl

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ẠO

- Công thức cấ u tạo:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

- Khối lượng mol phân tử: 203,67(g/mol)

- Tên IUPAC: 3-(4-clorophenyl)- N , N -dimethyl- 3 - (4-clorophenyl) - N, N-dimethyl- 3-pyridin-2-yl-propan-1-amine 3-pyridin-2-YL-propan-1amin.

12

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

1.3.3.2. Tính chất [8] etanol 96 %, cloroform; ít tan trong ete, benzen. Nhiệt độ nóng chảy là

N

Là bột tinh thể trắng, không mùi, tan trong nước (pH = 4-5);

H

Ơ

132-1350C và độ tan trong nước: 0,55 g/100 mL ở 200C. Chlorpheniramine

U Y

TP

.Q

nhiều chất trong số đó có hoạt tính.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Ở trên thế giới và nước ta, phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

H Ư

N

(HPLC) và theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV- Vis) được ứng

TR ẦN

dụng nhiều trong phân tích các chế phẩm về dược cũng như hỗn hợp các chất vô cơ, hữu cơ. Các kết quả đều cho thấy phương pháp có độ tin cậy cao.

B

1.4.1. Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp quang phổ

10 00

hấp thụ phân tử

Năm 2005, Thái Duy Thìn và cộng sự [11] đã định lượng đồng thời

Ó

A

paracetamol và Ibuprofen trong viên nén Dibulaxan bằng phương pháp trắc

Í-

H

quang trong dung dịch đệm photphat có pH= 7, khoảng bước sóng quét phổ từ

-L

200 – 300 nm. Ibuprofen hấp thụ cực đại ở 222nm với độ hấp thụ quang cực

ÁN

đại paracetamol tại λmax=243 nm. Độ đúng của phương pháp được chấp nhận với cả hai chất. Tỷ lệ tìm thấy của ibuprofen từ 97,2% đến 99,2% và

D

IỄ N

Đ

ÀN

paracetamol từ 100,1% đến 101,2 %

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ẠO

phương pháp UV- Vis

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

1.4. Kết quả xác định một số chất theo phương pháp HPLC và theo

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

didesmethyl- chlorpheniramine và một số chất chưa được xác định, một hoặc

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

maleate chuyển hóa nhanh và nhiều. Các chất chuyển hóa gồm có desmethyl -

Năm 2011, tác giả Lê Ngọc Anh [1] đã xác định thành công

paracetamol, loratadin và dextromethophan HBr trong thuốc viên nén hapacol-CF bằng phương pháp trắc quang. Điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, loratadin và detromethophan HBr trong hỗn hợp: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 210-285 nm, bước sóng ứng với độ hấp

13

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

thụ quang cực đại của dung dịch paracetamol λmax=244 nm, loratadin

Ơ

HCl 0,1M độ hấp thụ quang của paracetamol, loratadin và dextromethophan

N

λmax=273 nm và dextromethophan HBr λmax=278nm; trong môi trường axit

H

HBr ổn định và đạt cực đại; khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm

.Q

Đ

92,9% đến 99,45%, dextromethophan HBr từ 99,78% đến 102,24%.

N

G

Năm 2012, Siladitya Behera và các cộng sự [22] xác định thành công

H Ư

paracetamol trong thuốc viên nén sử dụng phương pháp UV-Vis. Điều kiện

TR ẦN

tối ưu để xác định paracetamol: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 200-400 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch

B

paracetamol λmax = 243 nm. Khoảng thời gian tố i ưu để tiến hành thí nghiệm

10 00

đo quang là trong khoảng 8 giờ ở nhiêṭ đô ̣ phòng. Kết quả thu được: khoảng

A

tuyến tính độ hấp thụ quang của paracetamol là 0,0 đến 150,0 μg/mL, độ thu

H

Ó

hồi của paracetamol từ 98,54% đến 99,13%.

Í-

Năm 2013, tác giả Mai Xuân Trường [14] đã xác định thành công

-L

dextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin trong thuốc viên

ÁN

methophan bằng phương pháp trắc quang. Điều kiện tối ưu để xác định đồng

TO

thời dextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin trong hỗn

D

IỄ N

Đ

ÀN

hợp: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 210 - 285 nm, bước sóng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

μg/mL. Độ thu hồi của paracetamol từ 101,08% đến 102,08%, loratadin từ

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

1,3÷25 μg/mL, loratadin: 1,3÷80 μg/mL, dextromethophan HBr: 0,6÷100

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

được: xác định được LOD, LOQ và khoảng tuyến tính của paracetamol:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

đo quang là 30 đến 60 phút sau khi pha và tại nhiệt độ 25 0C. Kết quả thu

ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch dextromethophan HBr λ max = 278nm, clopheninamin maleat λmax = 264nm và guaifenesin λmax = 273nm; trong môi trường axit HCl 0,1M độ hấp thụ quang của dextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin ổn định và đạt cực đại; khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là 30 đến 60 phút sau khi pha và tại

14

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

nhiệt độ phòng. Kết quả thu được: xác định được LOD, LOQ và khoảng tuyến

96,60% đến 101,08%, clopheninamin maleat từ 98,70% đến

H

U Y

N

102,03%, guaifenesin từ 99,01% đến 103,00%.

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

maleat và phenylephin hydroclorit trong hỗn hợp: Khoảng bước sóng thích

N

G

hợp để quét phổ từ 210-290 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại

H Ư

của dung dịch paracetamol λmax = 244 nm, clopheninamin maleat λmax = 264

TR ẦN

nm và phenylephin hydroclorit λmax = 273 nm trong môi trường axit HCl 0,1M. Khoảng thời gian tố i ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là từ 20 đến

B

90 phút sau khi pha và có thể tiế n hành thí nghiê ̣m ở nhiêṭ đô ̣ phòng. Kết quả

10 00

thu được: khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang của paracetamol là 0,2 đến

A

30,0 μg/mL, clopheninamin maleat là từ 0,2 đến 40,0 μg/mL và phenylephin

H

Ó

hydroclorit là từ 1,0 đến 40,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ 99,8%

Í-

đến 100,2%, của phenylephin hydroclorit là từ 99,1% đến 99,6% và của

-L

clopheninamin maleat là từ 98,1% đến 100,7%.

ÁN

Năm 2015, tác giả Nguyễn Thị Thuỳ Thương [12] đã xác định thành

công đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat trong thuốc Coldamin và

D

IỄ N

Đ

ÀN

Pacemin. Điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, clopheninamin

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

TIFFY . Điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, clopheninamin

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

Năm 2014, tác giả Vũ Duy Long [8] xác định thành công đồng thời

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

HBr từ

Ơ

0,2÷50μg/mL, guaifenesin: 0,1÷50μg/mL. độ thu hồi của dextromethophan

N

tính của dextromethophan HBr: 0,5÷100μg/mL, clopheninamin maleat:

maleat trong hỗn hợp: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 210-290 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch paracetamol λmax = 243 nm, clopheninamin maleat λmax = 273 nm trong môi trường axit HCl 0,1M. Khoảng thời gian tố i ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là từ 30 đến 40 phút sau khi pha và có thể tiế n hành thí nghiê ̣m ở nhiê ̣t đô ̣ phòng. Kết

15

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

quả thu được: khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang của paracetamol là 0,2 đến 30,0 μg/mL, cafein 0,2 đến 30,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ 96,3%

Ơ

N

đến 99,1%, của clopheninamin maleat là từ 95,5% đến 98,3%.

N

H

Năm 2015, tác giả Trần Quốc Chính [4] đã xác định thành công đồng

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

λmax = 210 nm trong môi trường axit HCl 0,1M. Khoảng thời gian tố i ưu để

N

G

tiến hành thí nghiệm đo quang là từ 30 đến 40 phút sau khi pha và có thể tiế n

H Ư

hành thí nghiê ̣m ở nhiêṭ đô ̣ phòng. Kết quả thu được: khoảng tuyến tính độ

TR ẦN

hấp thụ quang của paracetamol là 0,2 đến 30,0 μg/mL, cafein 0,2 đến 30,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ 99,3% đến 101,1%, của codein là từ

10 00

B

98,5% đến 100,3%.

1.4.2. Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp sắc ký lỏng

A

hiệu năng cao

H

Ó

Năm 2005, bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC), tác

Í-

giả Thái Duy Thìn [11] và cộng sự đã sử dụng phương pháp HPLC: Nghiên

-L

cứu định lượng paracetamol, bromhexin hydroclorit, pseudoephedrine

ÁN

hydroclorid, clorpheniramin maleat bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột Lichrosorb Si 60 (5μm, 250mm x 4mm), pha động là hỗn hợp metanol -

D

IỄ N

Đ

ÀN

dung dịch đệm amoninirat pH=9,5 (45 : 55), tốc độ dòng là 1,5 và 1 mL/phút,

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch paracetamol λ max = 243 nm, codein

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 210-290 nm, bước sóng ứng với

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

ưu để xác định đồng thời paracetamol, codein phot phat trong hỗn hợp:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

thời paracetamol, codein phot phat trong thuốc Actadol codein. Điều kiện tối

detector UV đặt ở bước sóng 257nm, thể tích tiêm mẫu 20 μL. Kết quả thu được: sai số tương đối của ibuprofen và paracetamol là 0,23% và 2,07%; độ thu hồi của ibuprofen và paracetamol là 98,4% và 99,1%. Định lượng paracetamol, axit mefenamic bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột Lichrosorb RP18 (10 μm, 250 mm x 4,6 mm). Pha động là hỗn hợp

16

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

axetonitril- nước- tetrahydrofuran (tỉ lệ 3:8:9 về thể tích). Tốc độ dòng là 1 mL/phút. Detector UV đặt ở bước sóng 279 nm. Thể tích tiêm mẫu 20 μL.

Ơ

N

Kết quả thu được: sai số tương đối của paracetamol, axit mefenamic là 0,51%

H

và 1,42%; độ thu hồi của paracetamol, axit mefenamic là 98,16% và 99,16%.

.Q

Đ

đối của paracetamol, cafein là 0,54% và 1,07%; độ thu hồi của paracetamol,

N

G

cafein là 98,8% và 99,5%. Nghiên cứu định lượng paracetamol, ibuprofen

H Ư

bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột Richrosorb RP18(10μm, 250mm

TR ẦN

x 4mm), pha động là hỗn hợp axetonitril và dung dịch axit photphoric 0,1% (tỉ lệ 60: 40 về thể tích), tốc độ dòng là 1 mL/phút, detector UV đặt ở bước

B

sóng 214 nm, thể tích tiêm mẫu 20 μL. Kết quả thu được: sai số tương đối của

10 00

ibuprofen và paracetamol là 0,81% và 1,03%; độ thu hồi của ibuprofen và

A

paracetamol là 98,4% và 98%. Định lượng paracetamol, quinine sunfat bằng

H

Ó

phương pháp HPLC với điều kiện: Cột Lichrosorb RP18 (5μm, 250mm x

Í-

4,6mm). Pha động là hỗn hợp metanol- axit axetic- dietylamin (tỉ lệ 650:350:1

-L

về thể tích). Tốc độ dòng là 1 mL/phút. Detector UV đặt ở bước sóng 235 nm.

ÁN

Thể tích tiêm mẫu 20 μL. Kết quả thu được: sai số tương đối của paracetamol,

TO

quinine sunfat là 1,16% và 1,887%; độ thu hồi của paracetamol, quinine

D

IỄ N

Đ

ÀN

sunfat là 99,0% và 99,3% . Định lượng paracetamol, phenylpropaolamin HCl,

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

bước sóng 279 nm. Thể tích tiêm mẫu 20 μL. Kết quả thu được: sai số tương

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

nước (tỉ lệ 35:65 về thể tích). Tốc độ dòng là 1 mL/phút. Detector UV đặt ở

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Lichrosorb RP18 (10μm, 250mm x 4,6mm). Pha động là hỗn hợp metanol-

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Định lượng paracetamol, cafein bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột

clorphenylamin maleat bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột C18 (5μm, 250mm x 4,6mm). Pha động là hỗn hợp nước- axetonitril- trietylamin (tỉ lệ 968:30:2 về thể tích). Tốc độ dòng là 1,2 mL/phút. Detector UV đặt ở bước sóng 216 nm đo phenylpropanolamin HCl và clorphenylamin maleat 244 nm đo acetaminophen. Thể tích tiêm mẫu 20 μL. Nhiệt độ cột ở nhiệt độ

17

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

phòng. Kết

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

quả thu được: sai

số tương đối

của

paracetamol,

phenylpropaolamin HCl, clophenylamin maleat là 0,47% và 0,67% và 1,19%;

Ơ

N

độ thu hồi dao động từ 99,61% đến 100,65% .

N

H

Năm 2009, bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC),

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

lưu của piroxicam và paracetamol tương ứng là 2,52 và 5,48 phút. Phương

N

G

pháp này đã có độ chính xác, độ tuyến tính, độ tin cậy, giới hạn phát hiện,

H Ư

giới hạn định lượng theo tiêu chuẩn ICH và USP. Các nghiên cứu khảo

TR ẦN

nghiệm cho thấy độ thu hồi paracetamol và piroxicam trong phạm vi 99-101% thu được ở các nồng độ khác nhau. Phương pháp này được áp dụng thành

B

công với việc xác định xác định đồng thời cả hai chất trong phòng thí nghiệm

10 00

cũng như trong dược phẩm thương mại.

A

Năm 2011, Lohar V.R và các cộng sự [19] đã định lượng thành công cafein,

pseudouphedrin

hydroclorit,

dextromethophan

H

Ó

paracetamol,

Í-

hydrobromit và loratadin trong thuốc viên bằng phương pháp RP-HPLC.

-L

Phương pháp sử dụng pha động gồm dung dịch đệm natri heptan sunphonat

ÁN

và axetonitril (tỷ lệ 95: 5 về thể tích), tốc độ dòng chảy là 1 mL/phút. Hệ thống HPLC Shimadzu LC 2010 với cột Inertsil ODS 3V (4,6 mm x 5 cm, 3

D

IỄ N

Đ

ÀN

μm), bước sóng đo quang là 205 nm. Thời gian lưu của paracetamol là 3,5

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

tích). Tốc độ dòng 1,0 mL/phút và bước sóng đo quang ở 227 nm. Thời gian

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

thước hạt 5 μm, với pha động là hỗn hợp metanol: nước (tỉ lệ 70:30 về thể

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

trong thuốc viên. Sử dụng cột Eurosphere- 100 C18, 250 x 4,6 mm, kích

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Fegade và cộng sự [16] đã định lượng đồng thời paracetamol và piroxicam

phút; caffein là 5,5 phút; pseudoephedrin HCl là 8 phút, dextromethophan HBr là 14 phút; loratadin là 15 phút. Độ thu hồi của paracetamol, caffein, pseudoephedrin hydrochlorit, dextromethophan hydrobromid và loratadin nằm trong khoảng 98% đến 102%. Đây là phương pháp đơn giản, chính xác,

18

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

độ lặp lại cao do đó phù hợp cho phân tích thường xuyên các loại thuốc ở

Ơ

Năm 2011, tác giả Đỗ Thị Thu Hường [6] định lượng thành công

N

dạng bào chế viên nén.

N

H

paracetamol, dextromethophan HBr và loratadin bằng phương pháp sắc ký

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

được: thời gian lưu của paracetamol, dextromethophan HBr và loratadin lần

N

G

lượt là 3,5; 6,62 và 11,29 phút.

H Ư

Năm 2013, tác giả Nguyễn Thành Lộc [9] đã định lượng đồng thời

TR ẦN

paracetamol và ibuprofen bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột RP-18 (5 µm, 220 mm x 4,4 mm). Pha động là hỗn hợp axetonitril : H 3PO4 0,1 M

B

(tỷ lệ 97:3 về thể tích). Tốc độ dòng là 0,7 mL/phút . Detector UV đặt ở bước

10 00

sóng 224 nm. Thể tích bơm mẫu là 20 µL. Kết quả thu được: độ thu hồi của

A

paracetamol và ibuprofen là 96,03% và 94,48%.

H

Ó

Năm 2013 tác giả Vũ Duy Long [8] đã sử dụng phương pháp sắc ký

Í-

lỏng hiệu năng cao để xác định đồng thời paracetamol, clopheniramin maleat

-L

và phenylephrin HCl trong các dược phẩm nói chung và thuốc TIFFY nói

ÁN

riêng bằng cách sử dụng pha động là hỗn hợp đệm NaH 2PO4 0,05 M : axetonitril (tỉ lệ 93:07 về thể tích); Thể tích bơm mẫu là 20 µL với tốc độ

D

IỄ N

Đ

ÀN

dòng chảy pha động là 1,5 mL/phút, sử dụng loại cột C18, bước sóng đo

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Thể tích bơm mẫu là 20 µL. Nhiệt độ cột đo ở nhiệt độ phòng. Kết quả thu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

tích). Tốc độ dòng là 1,4 mL/phút. Detector UV đặt ở bước sóng 215 nm.

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

là hỗn hợp axetonitril: đệm kali dihydrophotphat pH=2,9 (tỷ lệ 25:75 về thể

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

lỏng hiệu năng cao với cột pha đảo C18 (5 µm, 150 mm x 4,6 mm). Pha động

quang 215 nm và ở nhiệt độ là 30oC. Các chất paracetamol, clopheniramine maleate và phenylephrine HCl trong thuốc TIFFY đã được xác định thành công với thời gian lưu của acetaminophen là 8,62 phút, thời gian lưu của clopheniramin maleat là 2,78 phút và thời gian lưu của phenylephrin HCl là

19

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3,27 phút. Độ thu hồi của paracetamol là 99,7%; độ thu hồi của clopheniramin maleat là 99,5% và độ thu hồi của phenylephrine HCl là 98,8%.

Ơ

N

Năm 2013, Husen Al-Akraa và cộng sự [18] bằng phương pháp HPLC

N

H

đã định lượng đồng thời paracetamol, pseudcephodrin HCl, clorpheniramin

dextromethophan

hydrobromit

sử

dụng

ẠO

chlordiazepoxit, sử dụng đầu dò photo-diode tại 203 nm. Sử dụng cột BDS

Đ

Hypersil C18 (250 × 4,6 mm; 5 μm). Pha động gồm axetonitril : nước (tỉ lệ

N

G

60:40 về thể tích), nước có chứa sodium dodecyl sunfat và trietylamine

H Ư

hydrochlorit, điều chỉnh pH = 2,5 với axit orthophotphoric 0,01M và kali

TR ẦN

dihydrogenphotphat 0.01M. Tốc độ dòng chảy 1,0 mL/phút. Phạm vi tuyến tính của nồng độ là 20-2000; 6-2400; 2-160 và 15-1200μg/mL với (R2>

B

0,9991) tương ứng pseudoephedrin hydrochlorit, clorpheniramin maleat, và

10 00

dextromethophan hydrobromit và độ thu hồi 97,0-102,4%. Giới hạn phát hiện

A

(LOD) 0,33; 0,09; 0,12 và 0,03μg/ L, và giới hạn định lượng (LOQ) 1,10;

H

Ó

0,30; 0,40 và 0,10 μg/mL tương ứng cho pseudoephedrin hydrochlorit,

Í-

clorpheniramin maleat và dextromethophan hydrobromit. Các phương pháp

-L

RP-HPLC đề xuất đã được áp dụng thành công cho việc xác định các hợp

ÁN

chất khác nhau trong các chế phẩm dược không bị ảnh hưởng bởi các tá dược.

TO

Năm 2014, tác giả Parag Bhortake [20] đã định lượng đồng thời

D

IỄ N

Đ

ÀN

paracetamol, doxylamin succinat và dextromethophan hydrobromi trong dược

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

và

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

maleat

.Q

clorpheniramin

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

và thuốc kháng histamin như paracetamol, pseudoephedrin hydrochlorit,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

maleat trong các chế phẩm dược có chứa thuốc thông mũi, thuốc ho an thần

phẩm bằng phương pháp HPLC. Việc tách được thực hiện bằng cách sử dụng một pha động gồm dung dịch đệm

(muối natri của axit butan

sulphonic):axetonitril. Tốc độ dòng là 1,5 mL/phút. Phương pháp được thực hiện trên cột Shimadzu LC 2010 HPLC có detector UV phát hiện ở bước sóng 272 nm. Pha tĩnh được sử dụng là Inertsil C-18, đường kính bên trong 4,6 mm, chiều dài 250 mm và kích thước hạt của 5 μm, nhiệt độ cột được duy trì

20

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

ở 30°C. Thời gian lưu giữ đã được tìm thấy là 5 phút cho paracetamol, 3 phút hydrobromit. Các đỉnh pic đẹp, tách rời nhau và không bị ảnh hưởng bởi các

hồi của paracetamol, phenylephrin hydrochlorit và

H

Ơ

tá dược. Độ thu

N

cho phenylephrine hydrochlorit và 15 phút cho dextromethorphan

.Q

sự [17] dùng để xác định đồng thời pseudoephdrin HCl, pheniramin maleat,

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

cột Nucleodur C18 cột (250 x 4,0 mm, 5μm). Pha động gồm metanol: hỗn

N

hợp đệm (tỉ lệ 38:62 về thể tích) ở nhiệt độ phòng, với tốc độ dòng chảy là

H Ư

0,75 mL/phút. Bước sóng phát hiện ở 210 nm. Tuyến tính trên một phạm vi

TR ẦN

nồng độ của 0,2-250 μg/mL cho paracetamol; 0,5-250 μg/mL cho pseudoephdrin HCl và pheniramin maleat, 1-250 μg/mL cho guaifenisin; 2,5maleat

và

diphenhydramin

10 00

pyrilamin

B

250 μg/mL cho clorpheniramin maleat và triprolidin HCl; 5-250 μg/mL cho HCl;

10-20

μg/mL

cho

dextromethophan HBr với hệ số tương quan lớn hơn 0,9993. Độ lệch chuẩn

Ó

A

tương đối đều nhỏ hơn 4%. Phương pháp này đã được áp dụng thành công

Í-

H

cho các chất trên trong nhiều thuốc ho khác nhau và các chế phẩm như xi rô

-L

và viên nén.

ÁN

Phương pháp dò HPLC-UV được tác giả Alagar Raja [15] ứng dụng để

tách và định lượng paracetamol, dextromethophan hydrobromit và doxylamin

ÀN

succinat trong dược phẩm. Máy RP-HPLC sử dụng cột Waters C18

D

IỄ N

Đ

(250x4.6mm, 5μm), pha động gồm dung dịch đệm kali dihydrogen photphat

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

HCl, dextromethophan HBr, diphenhydramin HCl trong dược phẩm. Sử dụng

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

paracetamol, guaifenisin, maleat pyrilamin, clorpheniramin maleat, triprolidin

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao đã được Hatice Caglar và cộng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

dextromethophan hydrobromit đều nằm trong giới hạn 98,0% đến 102,0%

pH được điều chỉnh đến 3,5 ± 0,05 với axit o-photphoric (A) và Axetonitril (B). A:B tỉ lệ là 85: 15 về thể tích trong 15,0 phút đầu, và sau đó nó đã được duy trì ở tỉ lệ 70: 30 về thể tích cho mười phút tiếp theo và cuối cùng trong mười phút cuối cùng nó được duy trì ở mức 85: 15 về thể tích; tốc độ dòng chảy là 1,2 mL/phút. Cột nhiệt độ được đặt ở nhiệt độ môi trường, bước sóng

21

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

UV-phát hiện cố định tại 270 nm. Paracetamol tuyến tính trên một khoảng 162,5μg/mL đến 487,5μg/mL và dextromethophan hydrobromit trong phạm

H

Ơ

Phương pháp chính xác để xác định khảo nghiệm là dưới 2,0% RSD. Độ thu

N

vi 5-15μg/mL và doxylamin succinat trong phạm vi của 3,125-9,375μg/mL.

U Y

Đ

phẩm, phương pháp đã được thực hiện bằng kỹ thuật isocratic trên một pha

G

đảo ngược: với cột ODS C18 (250mm X 4.6 mm; 5 mm kích thước hạt) và

H Ư

N

detector UV phát hiện ở bước sóng 234 nm, pha động gồm hỗn hợp đệm

TR ẦN

photphat (pH 4,5): metanol (tỉ lệ 55: 45 về thể tích), tốc độ dòng chảy 1,0 mL/phút. Thời gian lưu trung bình cho dextromethophan hydrobromit và quinidin sunphat tương ứng là 3,6 và 5,5 phút. Khoảng nồng độ tuyến tính là

10 00

B

10-30 μg/mL và 5-15μg/mL tương ứng cho dextromethophan hydrobromit và quinidin sunphat. Sự tương quan hợp tác hiệu quả đã được tìm thấy là 0,995

Ó

A

và 0,997 cho dextromethophan hydrobromit và quinidin sunphat tương ứng.

Í-

H

Có nghĩa là khảo nghiệm đã được phát hiện là 99,5% và 97,00% cho

-L

dextromethophan hydrobromit và quinidin sunphat tương ứng. Các phương

ÁN

pháp phát triển đã được xác nhận theo chuẩn ICH, LOD & LOQ và các kết

TO

quả được tìm thấy là thỏa đáng, do đó phương pháp này có độ nhạy tốt cho

ÀN

định lượng dextromethophan hydrobromit và quinidin sunfat. Các phương

D

IỄ N

Đ

pháp phân tích cũng được áp dụng trong các phòng thí nghiệm thông thường.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

định lượng dextromethophan hydrobromit và quinidin sunphat trong dược

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Tác giả Zahid A.Chaudhary [22] đã ứng dụng phương pháp HPLC để

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

soát chất lượng của dược phẩm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

hồi dao động từ 98%-102%. Phương pháp này rất hữu ích trong việc kiểm

Nó cũng có thể được áp dụng cho kiểm tra, kiểm soát chất lượng cho các loại thuốc ở dạng viên nang

22

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 2

Ơ

N

THỰC NGHIỆM

N

H

2.1. Đối tượng nghiên cứu

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

2.2.1. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

H Ư

N

2.2.1.1. Chỉ tiêu nghiên cứu

Lựa chọn điều kiện và đánh giá quy trình sắc ký đã xây dựng được:

TR ẦN

- Chuẩn bị các dung dịch cần phân tích.

- Khảo sát độ tuyến tính của thành phần cần phân tích: Nồng độ của

10 00

B

mỗi chất phân tích đều có mối quan hệ tuyến tính với diện tích hay chiều cao của pic sắc ký (Trong một khoảng nồng độ nhất định nào đó).

Ó

A

- Khảo sát tính thích hợp của hệ thống: Kiểm tra xem các điều kiện sắc

Í-

H

ký ta đã lựa chọn có phù hợp không? Ta chạy một mẫu phân tích với điều

-L

kiện sắc ký đã chọn nếu các pic tách khỏi nhau hoàn toàn, pic nhỏ gọn là

ÁN

được.

- Khảo sát độ chính xác của phương pháp: Độ chính xác thường được

D

IỄ N

Đ

ÀN

xác định thông qua độ lặp của phương pháp (Cách thông thường là xác định

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

2.2. Phương pháp nghiên cứu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

đồng thời PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte trên thị trường.

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) để xây dựng quy trình xác định

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Áp dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương

độ lệch chuẩn tương đối của kết quả phân tích RSD).

- Khảo sát độ đúng của phương pháp: Được xác định thông qua khả năng thu hồi của kết quả phân tích khi dùng phương pháp thêm chuẩn.

- Xác định đồng thời PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte theo phương pháp HPLC.

23

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.2.1.2. Xác định các chỉ tiêu nghiên cứu cho phương pháp HPLC Lựa chọn các thông số của máy HPLC:

N

- Detector, có thể gặp một số detector sau : Detector hấp thụ tử ngoại -

H

Ơ

khả khiến (UV-Vis), detector hấp thụ tử ngoại (UV)…

G

- Tốc độ dòng pha động.

H Ư

N

2.2.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

TR ẦN

- Tiến hành quét phổ từ 200 nm đến 900 nm để kiểm tra lại bước sóng hấp thụ quang cực đại của các dung dich ̣ PRC, CPM và PNH. - Khảo sát sự ổn định độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo

10 00

B

môi trường nền, pH, thời gian, nhiệt độ để lựa chọn khoảng thời gian, nhiệt độ và pH thích hợp khi thực hiện các phép đo quang.

A

- Khảo sát khoảng tuyến tính của PRC, CPM và PNH từ đó xác định

H

Ó

giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ).

Í-

- Định lươ ̣ng đồng thời PRC, CPM và PNH trong các mẫu tự pha để

-L

xác đinh ̣ các sai số khi tỷ lệ hàm lươ ̣ng PRC, CPM và PNH nhau.

ÁN

- Xây dựng quy trình phân tích mẫu thuốc, từ đó đánh giá độ tin cậy của

Đ

ÀN

TO

phương pháp thông qua việc tính toán độ đúng và độ lặp lại của phép đo.

- Định lượng đồng thời PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

- Pha động: Thành phần, tỷ lệ các thành phần của pha động, pH ...

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q ẠO

- Bước sóng thích hợp để phát hiện đồng thời các thành phần.

IỄ N D

TP

- Nhiệt độ cột tách.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

- Cột tách.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

- Thể tích bơm mẫu.

- Đánh giá độ tin cậy của phương pháp thông qua xác đinh ̣ độ thu hồi.

- Pha chế dung dich ̣ chuẩn PRC, CPM và PNH và hỗn hợp của chúng.

- Xác định các điề u kiê ̣n tố i ưu cho phép đo quang PRC, CPM và PNH - Tiế n hành xác đinh ̣ đồ ng thời 3 chấ t trong các mẫu giả tự pha.

- Tiế n hành xác đinh ̣ đồ ng thời 3 chấ t trong mẫu thuốc Decolgen forte.

24

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.3. Phương pháp xử lý số liệu Đánh giá phương pháp phân tích và các kết quả phân tích: Sử dụng các

N

2.3.1. Các phương pháp để xử lý kết quả phân tích

H

Ơ

phương pháp thống kê, sử dụng công cụ hỗ trợ là Microft Excel, máy tính bỏ

U Y

i=1

k

RSD =

i

i=1

=

k

G 2

TR ẦN

S=

  C -C  n

2

N

  Ci -μ 

H Ư

n

Đ

(S) hoă ̣c đô ̣ lê ̣ch chuẩ n tương đố i (RSD).

S .100 (%) C

(2.1) (2.2)

10 00

B

trong đó: Ci là các giá tri ̣nồng độ (µg/mL) của dung dich ̣ PRC, CPM và PNH tính được lần thứ i;  là giá trị nồng độ thực của mẫu; C là giá trị nồng độ trung bình

A

tính được sau n lần xác định; k là số bậc tự do.

H

Ó

- Đánh giá độ đúng của phương pháp đối với các hỗn hơ ̣p PRC, CPM

Í-

và PNH tự pha chế thông qua sai số tương đối RE. Sai số tương đối của các

-L

phép phân tích đối với mẫu chuẩn tự pha chế thông qua việc tính tỷ số giữa độ

TO

ÁN

sai lệch của nồng độ tính toán được với nồng độ thực đã biết của mẫu theo công

Đ

ÀN

thức:

RE% =

CTinh toan - C0 C0

.100%

(2.3)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- Độ lặp lại của phương pháp được đánh giá thông qua độ lệch chuẩn

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

ẠO

2.3.2.1. Đánh giá độ tin cậy của phương pháp

IỄ N D

TP

2.3.2. Các đại lượng đặc trưng để xử lý kết quả phân tích

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

đánh giá chất chuẩn và mẫu.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

túi. Sử dụng phương pháp hồi qui tuyến tính và thuật bình phương tối thiểu để

trong đó: RE% là sai số tương đối của phép xác định nồng độ các cấu tử.

CTinh toan (µg/mL) là nồng độ tính toán được.

C o (µg/mL) là nồng độ đa ̃ biế t của dung di ch ̣ PRC, CPM và PNH trong hỗn hợp.

25

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

- Đánh giá độ đúng của phương pháp đối với các mẫu thuố c nghiên cứu thông qua độ thu hồi bằng phương pháp thêm chuẩn. Độ thu hồi (Rev) được

trong đó: CT là nồng độ của dung dich ̣ PRC, CPM và PNH xác định

U Y

được trong mẫu sau khi thêm chuẩn.

Ơ

N

(2.4)

Đ

2.3.2.2. Giới hạn phát hiện (LOD)

TR ẦN

H Ư

N

G

- LOD được coi là nồng độ thấp nhất của chất nghiên cứu mà hệ thống phân tích cho tín hiệu phát hiện phân biệt với tín hiệu nền. Trong phân tích trắc quang LOD tính theo phương trình hồi quy có công thức như sau: LOD =

3.SD B

(2.5)

B

trong đó: SD là độ lệch chuẩn của tín hiệu y trên đường chuẩn.

10 00

B là độ dốc của đường chuẩn chính là độ nhạy của phương pháp trắc quang.

Ó

A

- LOQ được coi là nồng độ thấp nhất của chất nghiên cứu mà hệ thống phân tích định lượng được với tín hiệu phân tích khác, có ý nghĩa định lượng với tín hiệu

LOQ =

10.SD B

(2.6)

ÁN

-L

Í-

H

nền và đạt độ tin cậy tối thiểu  95%, thông thường người ta sử dụng công thức:

TO

2.3.2.3. Đánh giá kết quả phép phân tích theo thống kê

ÀN

Khoảng tin cậy của phép xác định nồng độ được tính theo công thức:

Đ

X ±ε=X ±

t P,k .S n

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

a là nồng độ của PRC, CPM và PNH chuẩ n thêm vào mẫu (đã biết).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

được trong mẫu khi chưa thêm chuẩ n.

IỄ N D

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ca là nồng độ của dung dich ̣ PRC, CPM và PNH xác định

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

CT - Ca .100% a

H

Re v =

N

tính theo công thức sau:

(2.7)

Với tP, k là hệ số phân bố chuẩn Student ứng với xác suất P và bậc tự do k được tra trong bảng (t0,95; 3 = 3,18; t0,95; 4 = 2,78; t0,95; 5 = 2,57 ). X là giá tri ̣ trung bin ̀ h của tâ ̣p số liêụ các kế t quả nghiên cứu; S là độ lệch chuẩn, được tính theo công thức (2.1); n là số phép đo.

26

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.4. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất 2.4.1. Thiết bị

H

Ơ

L-2420 của Khoa Hóa học, Trường Đa ̣i ho ̣c Sư pha ̣m – Đại học Thái Nguyên.

N

- Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao Hitachi L-2000 với detector UV-Vis

G

- Máy rung siêu âm và máy đo pH.

H Ư

N

2.4.2. Dụng cụ

- Chương trình lọc Kalman tính toán đồng thời nồng độ các cấu tử [13].

TR ẦN

- Cốc thủy tinh, phễu thủy tinh, ống nghiệm...

- Bình định mức dung dịch: 10 mL; 25 mL; 50 mL; 100 mL; 1000mL.

10 00

B

- Pipet các loại: 1 mL; 2 mL; 5 mL; 10 mL; 20 mL; 25 mL. - Màng lọc 0,45µm và một số dụng cụ khác.

Ó

A

2.4.3. Hóa chất

H

- HCl, H2SO4, HNO3, H3PO4, KH2PO4, CH3CN, axetonitril ... dùng để

-L

Í-

pha chế các dung dịch đều thuộc loại tinh khiết của Merck.

ÁN

- Nước cất 2 lần -

Chất

chuẩn

paracetamol,

phenylephrine

hydrochloride

và

Đ

ÀN

TO

chlorpheniramine maleate nguyên chất do viện kiểm nghiệm dược sản xuất.

- Thuốc viên Decolgen forte sản xuất bởi Công ty TNHH United intera

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

- Cân điện tử có độ chính xác 0,0001g.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP ẠO

- Bộ cuvet thạch anh.

IỄ N D

.Q

bước sóng 190nm – 900 nm, có kết nối máy tính.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

học Sư phạm – Đại học Thái Nguyên, có khả năng quét phổ trong khoảng

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

- Máy quang phổ UV – 1700 Shimadzu của Khoa Hóa học Trường Đa ̣i

tionl pharma who-gmp, GSP- Số 16 VSIP II, Đường số 7, Khu liên hợp công nghiệp-Dịch vụ- Đô thị Bình Dương, Phường Hoà phú, TP Thủ Dầu Một, Tỉnh Bình Dương, Việt Nam-ĐT: 0839621000. Đăng ký nhãn hiệu: United Laboratoris, Inc. Số lô SX Lot 507911. Ngày sản xuất: 18/06/2015; Hạn sử dụng: 17/06/2017.

27

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.4.4. Chế phẩm thuốc Decolgen forte Thành phần mỗi viên nén chứa:

Ơ

N

Paracetamol : 500 mg

H

Phenylephrine hydrochloride: 10 mg

-L

Í-

Để hòa tan các mẫu và thuốc nghiên cứu dùng để tiến hành khảo sát theo phương pháp UV- Vis chúng tôi đã sử dụng các dung môi sau.

ÁN

Lấy một ống chuẩn HCl pha loañ g bằ ng nước cấ t 2 lầ n thành 1000 mL

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

thu được dung dịch HCl 0,1M (pH = 1), sau đó pha thành HCl 0,01M và 0,001M có pH = 2 và 3.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

2.5. Chuẩn bị các dung môi để hòa tan mẫu và thuốc Để hòa tan các mẫu và thuốc nghiên cứu dùng để tiến hành khảo sát theo phương pháp HPLC chúng tôi đã sử dụng các dung môi sau: Dung dịch đệm được chuẩn bị bằng cách hòa tan 2,45 g KH2PO4 trong 950 ml nước cất 2 lần.

Thêm 2 ml triethylamin, điều chỉnh về pH = 2-3 bằng axit photphoric (H3PO4) loãng với nước cất 2 lần định mức thành 1000 mL và trộn đều, dung siêu âm lọc qua màng lọc 0,45µm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Hình 2.1. Chế phẩm thuốc Decolgen forte

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

Chlorpheniramine maleate: 2 mg

Lấy một ống chuẩn H2SO4 pha loañ g bằ ng nước cấ t 2 lầ n thành 1000 mL thu được dung dịch H2SO4 0,1M (pH = 1). Sau đó pha thành H2SO4 0,05M và 0,005M có pH = 2 và 3 Lấy ống chuẩn HNO3 pha loañ g bằ ng nước cấ t 2 lầ n thành 1000 mL thu được dung dịch HNO3 0,1M (pH = 1). Sau đó pha thành HNO3 0,01M và 0,001M có pH = 2 và 3. Các dung dịch pha được chuẩn độ lại xác định nồng độ.

28

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.6. Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp HPLC Dung dịch PRC: Cân chính xác 100 mg PRC cho vào bình định mức 100

Ơ

N

mL đem hòa tan và định mức bằng dung dịch đệm. Sau đó đi rung siêu âm trong

H

10 phút. Thu được dung dịch PRC có nồng độ là 1000 µg/mL (gọi là dung dịch

.Q

Đ

Dung dịch CPM: Cân chính xác 50 mg CPM cho vào bình định mức

N

G

100 mL đem hòa tan và định mức bằng dung dịch đệm. Sau đó đi rung siêu

H Ư

âm trong 10 phút thu được dung dịch CPM có nồng độ 500 µg/mL (gọi là

TR ẦN

dung dịch CPM1). Pha loãng bằng dung dịch đệm thu được dung dịch CPM có nồng độ là 50 µg/mL (gọi là dung dịch CPM2). Tiếp tục pha loãng dung dịch

B

CPM2 bằng dung dịch đệm thu được các dung dịch CPM có nồng độ 2

10 00

µg/mL, 4 µg/mL, 6 µg/mL, 8 µg/mL.

A

Dung dịch PNH: Cân chính xác 50 mg PNH cho vào bình định mức

H

Ó

100 mL đem hòa tan và định mức bằng dung dịch pha động. Sau đó đi rung

Í-

siêu âm trong 10 phút thu được dung dịch PNH có nồng độ 500 µg/mL ( gọi

-L

là dung dịch PNH1). Pha loãng bằng dung dịch pha động thu được dung dịch

ÁN

PNH có nồng độ là 100 µg/mL (gọi là dung dịch PNH2). Pha loãng dung dịch

TO

PNH2 bằng dung dịch pha động thu được các dung dịch PNH có nồng độ

D

IỄ N

Đ

ÀN

10µg/mL, 20 µg/mL, 30 µg/mL, 50 µg/mL.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

dung dịch đệm.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

lấy 3 mL, 5 mL, 7 mL, 9 mL cho vào bình định mức 10 mL và định mức bằng

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

PRC có nồng độ 900 µg/mL, 700 µg/mL, 500 µg/mL, 300 µg/mL. Bằng cách

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

PRC1). Pha loãng dung dịch PRC1 bằng dung dịch đệm thu được các dung dịch

Dung dịch mẫu giả: Lấy lần lượt 25 mL dung dịch PRC1; 2 mL dung

dịch CPM2 và 5 ml dung dịch PNH2 cho vào bình định mức 50 mL và định mức bằng dung dịch pha động tới vạch 50 mL được dung dịch chuẩn có nồng độ: PRC: CPM: PNH = 500: 2 : 10 (µg/mL). Các dung dịch sau khi pha song được lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 µm.

29

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

2.7. Chuẩn bị dung dịch thuốc Decolgen forte cho phương pháp HPLC Cân chính xác 10 viên thuốc Decolgen forte (mỗi viên có chứa 500 mg

Ơ

N

PRC; 2 mg CPM và 10 mg PNH ). Sau đó tính khối lượng trung bình của viên

N

H

m = 0,62755g và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác 125,5 mg bột thuốc

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

lần dung dịch bằng dung dịch đệm thu được dung dịch chứa PRC 500 µg/mL;

N

G

CPM 2 µg/mL và PNH 10 µg/mL sau đó lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 µm

H Ư

2.8. Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp UV-Vis

TR ẦN

Cân chính xác lần lượt là 100 mg PRC, 100mg CPM và 100mg PNH và cho vào ba bình định mức 100 mL khác nhau. Đem hòa tan và định mức bằng

10 00

B

dung dịch HCl 0,1M, sau đó đem rung siêu âm trong 10 phút. Thu được các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 100 µg/mL. Pha loãng các dung dịch trên

A

thành các có nồng độ là 1µg/mL, 2 µg/mL, 3 µg/mL, 4 µg/mL, 5µg/mL, 10

H

Ó

µg/mL,12 mL,15 mL ,16 mL,18 mL, 20 µg/mL, 30 µg/mL, 40µg/mL, 50 µg/mL

Í-

bằng dung dịch HCl 0,1M. Bằng cách lấy lần lượt 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL; 0,4

-L

mL; 0,5 mL; 1 mL; 1,5 mL; 1,6 mL; 1,8 mL; 2 mL; 3 mL; 4 mL; 5 mL của các

ÁN

dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 100 µg/mL vào bình định mức 10 mL và định mức thì thu được các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ như

D

IỄ N

Đ

ÀN

trên để tiến hành khảo sát.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

µg/mL và PNH 20 µg/mL. Lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 µm. Pha loãng 2

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

rung siêu âm trong 15 phút ta được dung dịch chứa PRC 1000 µg/mL; CPM 4

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

mức 100 mL. Đem hòa tan và sau đó định mức bằng dung dịch đệm rồi đi

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

tương đương với 100 mg PRC; 0,4 mg CPM và 2 mg PNH cho vào bình định

Lấy các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 10 µg/mL để pha

loãng thành các dung dịch có nồng độ là 0,1µg/mL, 0,2 µg/mL, 0,3 µg/mL, 0,4 µg/mL, 0,5µg/mL, 0,6 mL. Bằng cách lấy lần lượt 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL; 0,4 mL; 0,5 mL của các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 10 µg/mL vào bình định mức 10 mL và định mức.

30

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Cân chính xác lần lượt là 100 mg PRC, 100mg CPM và 100mg PNH và cho vào ba bình định mức 100 mL khác nhau. Đem hòa tan và định mức lần lượt

Ơ

N

bằng các dung dịch HCl, H2SO4, HNO3 và lần lượt có HCl, H2SO4, HNO3 lần

H

lượt có pH=1, pH=2, pH=3 sau đó đem rung siêu âm trong 10 phút. Thu được

.Q

Đ

µg/mL, 9 mẫu dung dịch CPM có nồng độ 10 µg/mL và 9 mẫu dung dich ̣

N

G

PNH có nồ ng đô ̣ 10 µg/mL, trong các môi trường axit HCl, H2SO4, HNO3 có

H Ư

lần lượt là pH=1, pH=2, pH=3 để tiến hành khảo sát.

TR ẦN

2.9. Chuẩn bị dung dịch thuốc Decolgen forte cho phương pháp UV-Vis Xử lý mẫu thuốc: Cân 10 viên thuốc và tính khối lượng trung bình mỗi

10 00

B

viên ( m = 0,62755g). Đem nghiền nhỏ thành bột mịn rồi lấy chính xác một lượng bột tương đương 1/10 viên (chứa 50 mg PRC, 0,2 mg CPM và 1,0 mg

A

PNH) cho vào bình định mức 100 mL. Đem hòa tan và định mức bằng dung

H

Ó

dịch HCl 0,1M sau đó rung siêu âm khoảng 15 phút. Đem lọc và bỏ khoảng

Í-

40 mL dung dịch đầu, lấy 10 mL dung dịch lọc đem định mức thành 100 mL

ÁN

-L

thu được dung dịch gốc chứa hàm lượng tương đương (PRC là 50g/mL,

TO

CPM là 0,2g/mL và PNH 1,0g/mL) gọi đó là dung dịch gốc. Sau đó tiếp tục lấy các thể tích của dung dịch gốc lần lượt là 1mL, 2mL, 3mL, 4mL, 5mL thu được các dung dịch có tỉ lệ nồng độ PRC: PNH: CPM từ 5: 0,1: 0,02 đến 25: 0,5: 0,1 như bảng 3.25 để tiến hành khảo sát.

D

IỄ N

Đ

ÀN

vào bình định mức 10 mL và định mức tới vạch bằng dung dịch HCl 0,1M,

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

µg/mL thành 3 daỹ dung dich ̣ gồ m 9 mẫu dung dich ̣ PRC có nồng độ 10

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

pH=3. Tiếp tục pha loãng các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 100

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

trường axit HCl, H2SO4, HNO3 và có pH khác nhau lần lượt là pH=1, pH=2,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 100 µg/mL trong các môi

31

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Chương 3

Ơ

N

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

H

3.1. Phương pháp HPLC

TO

ÁN

3.1.1.2. Lựa chọn bước sóng Việc lựa chọn bước sóng dựa trên cơ sở các tài liệu tham khảo kết hợp với khảo sát thực nghiệm tại 2 bước sóng λ = 216 nm , λ = 244 nm.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Tại λ = 244 nm là bước sóng PNH, PRC và CPM có độ hấp thụ quang cao. Tuy nhiên kết quả thực nghiệm cho thấy đường nền không mịn và thời gian tách các píc không rõ hai pic CPM và PNH có thời gian xuất hiện gần như trùng nhau.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

3.1.1.1. Khảo sát lựa chọn pha động Để chọn được pha động thích hợp, chúng tôi đã tiến hành khảo sát tỉ lệ thành phần pha động là dung dịch đệm KH2PO4 0,018M : axetonitril ở các tỷ lệ về thể tích lần lượt là: 87:13 cho đến 93:7 với tốc độ dòng là 2 mL/phút , 1,3 mL/phút, 1 mL/phút và ở nhiệt độ 35oC, 30oC tại 2 bước sóng λ = 216 nm , λ = 244 nm. Các dung dịch được lọc qua màng lọc 0,45 µm sau đó rung siêu âm để khử bọt khí. Sự thay đổi tỉ lệ thành phần pha động làm thay đổi đáng kể kết quả sắc ký. Tuy nhiên tỷ lệ dung dịch đệm : axetonitril 93:7 cho kết quả tốt nhất với thời gian lưu của PRC là 7,73 phút, CPM là 3,397 phút và PNH là 2,72 phút. Vì vậy chúng tôi chọn pha động để xác định đồng thời 3 chất là dung dịch đệm : axetonitril với tỷ lệ thể tích là 93:7.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

G

Đ

ẠO

kết hợp với tài liệu tham khảo và điều kiện sẵn có của phòng thí nghiệm, chúng tôi lựa chọn kiểu sắc ký hấp phụ pha đảo (RP-HPLC), sử dụng cột silica C18, thể tích bơm mẫu là 20 µL để tiến hành khảo sát tìm các điều kiện tối ưu.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

3.1.1. Xây dựng các điều kiện để xác định đồng thời 3 chất PRC, CPM và PNH Qua việc nghiên cứu tính chất lý hóa của 3 chất PRC, CPM và PNH

Tại λ = 216 nm: PRC,CPM và PNH có độ hấp thụ quang tốt. Kết quả thực nghiệm cho thấy đường nền thẳng, xuất hiện cả 3 pic với thời gian lưu phù hợp. Vì vậy, chúng tôi lựa chọn bước sóng λ = 216 nm để phân tích.

32

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.1.1.3. Lựa chọn tốc độ dòng Để lựa chọn được tốc độ dòng thích hợp, chúng tôi tiến hành sắc ký với

Ơ

N

các điều kiện ở trên nhưng với các tốc độ dòng là 1mL/phút, 1,3 mL/phút và

H

2mL/phút.

N

G

3.1.1.4. Lựa chọn nhiệt độ

TR ẦN

H Ư

Để lựa chọn được nhiệt độ thích hợp, chúng tôi tiến hành sắc ký với các điều kiện ở trên nhưng ở nhiệt độ là 300 và 350. Ở nhiệt độ là 350 thì chân đường pic CPM và PNH không mịn và CPM có nhiều đỉnh pic cao như nhau.

10 00

B

Ở nhiệt độ 300 thì kết quả thực nghiệm cho thấy đường nền thẳng, xuất hiện cả 3 pic với thời gian lưu phù hợp và kết quả tách tốt, các pic tách rời

Ó

A

nhau. Vì vậy, chúng tôi lựa chọn nhiệt độ là 300 để tiến hành phân tích sắc ký.

H

3.1.1.5. Kết luận chung

-L

Í-

Từ các kết quả trên, chúng tôi lựa chọn điều kiện tối ưu cho phương

ÁN

pháp xác định đồng thời PRC, CPM và PNH là: Pha động hỗn hợp đệm

TO

(H3PO4 - KH2PO4 0,018M với pH= 2-3): axetonitril với tỷ lệ thể tích là 93:7.

Đ

ÀN

Detector UV-Vis: λ = 216 nm.

Cột: sử dụng cột C18 (250mm x 4,6).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

chúng tôi lựa chọn tốc dộ dòng là 1,3 mL/phút để tiến hành phân tích sắc ký.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q ẠO

Với tốc độ dòng 1 mL/phút các pic có đỉnh nhọn và chân pic hẹp. Vậy

IỄ N D

TP

thời gian chạy sắc ký phù hợp.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Với tốc độ dòng 1,3 mL/phút, kết quả tách tốt, các pic tách rời nhau và

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

Với tốc độ dòng 2 mL/phút, đỉnh của các pic bị tù và chân pic bị dãn.

Tốc độ dòng: 1,3 mL/phút.

Thể tích bơm mẫu: 20 µL. Nhiệt độ phân tích: 30oC. Với các điều kiện trên, chúng tôi đã tiến hành phân tích sắc ký và kết

quả được thể hiện ở các hình 3.1; 3.2; 3.3; 3.4.

33

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN

34

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

Í-

-L A

Ó

H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

ẠO

Đ

TP

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ÁN

TO Hình 3.1. Sắc kí đồ của PRC (500 µg/mL)

U Y

.Q

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

Đ

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Ơ

H

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Hình 3.2. Sắc kí đồ của CPM (4 µg/mL)

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

Hình 3.3. Sắc kí đồ của PNH (10 µg/mL)

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Hình 3.4. Sắc kí đồ của PRC (3), CPM (2) và PNH (1) Tỉ lệ PRC: CPM: PNH = 500: 2 : 10 (µg/mL).

Nhận xét: Kết quả sắc kí đồ ở hình 3.4 cho thấy 3 pic đều được tách ra hoàn toàn, các pic gọn và cân đối, thời gian lưu của 3 chất là hợp lý với thời gian lưu của PRC là 7,73 phút; CPM là 3,397 phút và PNH là 2,72 phút.

35

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.1.2. Đánh giá phương pháp định lượng 3.1.2.1. Kiểm tra tính thích hợp của hệ thống

N

Chúng tôi tiến hành khảo sát các đại lượng đặc trưng như: Số đĩa lý

H

Ơ

thuyết, độ phân giải, thời gian lưu, diện tích pic qua việc bơm lặp lại 4 lần dung

TR ẦN

2684

3340

10 00

B

PRC

29,88

H

Ó

A

Bảng 3.2. Kết quả khảo sát thời gian lưu CPM

Thời

Đ

ÀN

TO

bơm

PNH

Thời

Thời

gian

Số liệu thống

gian

Số liệu thống

gian

Số liệu thống

lưu

kê

lưu

kê

lưu

kê

ÁN

Lần

-L

Í-

PRC

(phút)

(phút)

(phút)

1

7,730

3,397

2,720

2

7,729

X = 7,730

3,400

X = 3,397

2,719

X = 2,720

3

7,731

S = 0,001

3,397

S = 0,00212

2,720

S = 0,001

4

7,730

RSD = 0,01

3,394

RSD= 0,06

2,721

RSD= 0,036

36

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G N

H Ư

19,34

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

3076

Độ phân giải ( RS )

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP CPM

ẠO

Số đĩa lý thuyết ( N )

Đ

Hoá chất

PNH

IỄ N D

.Q

Bảng 3.1. Giá trị các đại lượng đặc trưng

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

bảng 3.1; 3.2 và 3.3.

U Y

N

dịch chuẩn (pha như ở mục 2.6) để tiến hành sắc ký. Kết quả được chỉ ra ở

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.3. Kết quả khảo sát diện tích pic

Số liệu

Diện

Số liệu

Diện

pic

thống kê

tích pic

thống kê

tích pic

RSD= 0,11

S = 962,15

1655620

RSD= 0,208

463807

N

X =1640256,2

S = 11438,62 RSD= 0,697

1624479

N H Ư

Nhận xét: Kết quả ở bảng 3.1, 3.2 và 3.3 cho thấy các thông số hệ

TR ẦN

thống như số đĩa lý thuyết và độ phân giải nằm trong giới hạn cho phép. Chỉ số RSD của diện tích pic và thời gian lưu được tìm thấy đều nhỏ hơn 1%. Vì

10 00

B

vậy hệ thống sắc ký đảm bảo tính thích hợp với cả 3 chất phân tích.

3.1.2.2. Khảo sát độ tuyến tính của phương pháp

Ó

A

Độ tuyến tính được khảo sát trên dung dịch các chất chuẩn với các nồng

H

độ khác nhau: Các dung dịch PRC có nồng độ từ 200 µg/mL - 1000 µg/mL.

-L

Í-

Các dung dịch CPM có nồng độ từ 1 µg/mL - 8 µg/mL. Các dung dịch PNH có

ÁN

nồng độ từ 10 µg/mL - 50 µg/mL (pha như ở mục 2.6).

TO

Tiến hành chạy sắc ký lần lượt từng dung dịch theo điều kiện sắc ký đã

ÀN

chọn ở trên. Xác định được sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích sát độ tuyến tính của 3 chất được trình bày ở bảng 3.4.

D

IỄ N

Đ

pic bằng phương trình hồi quy tuyến tính và hệ số tương quan R2. Kết quả khảo

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

54625288

461803

1636086

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

4

S = 63617,19

X =462230,75

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

54474531

462090

U Y

3

X =54555833,5

.Q

54715828

thống kê

1644840

TP

2

461223

ẠO

54407687

Số liệu

H

Diện tích

1

N

PNH

Ơ

CPM

G

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

bơm

PRC

Đ

Lần

37

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.4. Mối tương quan giữa nồng độ và diện tích pic

N

của PRC, CPM và PNH

Ơ

1

2

3

Nồng độ (µg/mL)

300

500

700

54555288

75257154

Nồng độ (µg/mL)

2

Diện tích (mAuxphút)

196312

H Ư

2

G

1

N

Dung dịch

Đ

CPM

TR ẦN

4

462218

3

4

6

8

774625

1068611

10 00

B

Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 14646 x – 10688 với R2 = 0,999

Ó

Nồng độ (µg/mL)

1

2

3

4

10

20

30

50

1641840

2638996

3456039

5204057

A

Dung dịch

Í-

H

Diện tích (mAuxphút)

PNH

ÁN

-L

Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 88236x + 80873 với R2 = 0,999

TO

Từ kết quả ở bảng 3.4 ta tiến hành biểu diễn sự phụ thuộc của diện tích

và 3.7.

D

IỄ N

Đ

ÀN

pic PRC, CPM và PNH theo nồng độ và kết quả được thể hiện ở hình 3.5; 3.6

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 10385x - 249240 với R2 = 0,999989

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

95868841

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

U Y 900

.Q

Diện tích (mAuxphút) 33534431

4

H

Dung dịch

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

PRC

38

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

D

IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

giữa nồng độ và diện tích pic của PRC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Hình 3.5. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

Hình 3.6. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của CPM

39

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

B

3.1.2.3. Khảo sát độ lặp lại của phương pháp sắc ký

10 00

Tiến hành khảo sát độ lặp lại của phương pháp với các dung dịch mẫu giả (pha như ở mục 2.6). Đo các dung dịch mẫu giả trên trong điều kiện sắc ký

Ó

A

đã chọn, so sánh diện tích pic từ phương trình đường chuẩn và dung dịch mẫu

Í-

H

giả trong cùng điều kiện. Kết quả thu được thể hiện ở bảng 3.5.

-L

Nhận xét: Từ bảng kết quả ở bảng 3.5 cho thấy độ lệch chuẩn tương

ÁN

đối RSD của cả 3 chất phân tích đều nhỏ hơn 1% ( PRC: 0,062%; CPM:

TO

0,55%; PNH: 0,5%) và sai số tương đối nhỏ. Như vậy, phương pháp sắc ký

D

IỄ N

Đ

ÀN

định lượng đồng thời cả 3 chất có độ lặp lại cao.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

giữa nồng độ và diện tích pic của PNH

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Hình 3.7. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

40

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại

Diện tích

Hàm

Diện tích

Hàm

pic

lượng

pic

lượng

pic

lượng

mAuxphút

µg/mL

mAuxphút

Chuẩn

54555288

500

196321

2,0

1641840

10

1

54543427

499,89

197314

2,01

1638557

9,98

2

54611012

500,51

195340

1,99

1635273

9,96

3

54542211

499,88

195399

1,99

1648408

10,04

4

54520423

499,68

194358

1,98

1625422

9,90

H

X = 9,97

S = 0,011

S = 0,05

Sx = 0,0055

Sx = 0,025

RSD = 0,062

RSD = 0,55

RSD = 0,5

µ = 499,99  0,43

µ = 1,99  0,015

µ = 9,97  0,07

S = 0,312

liệu

Sx = 0,156

H

Ó

A

10 00

thống kê

-L

Í-

3.1.2.4. Xác định PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte Đo các dung dịch dung dịch chứa PRC 500 µg/mL; CPM 2 µg/mL và

ÁN

PNH 10 µg/mL trong thuốc Decolgen forte (pha như ở mục 2.7) tại điều kiện

TO

sắc ký đã chọn, so sánh diện tích pic với dung dịch chuẩn (bảng 3.5) trong

D

IỄ N

Đ

ÀN

cùng điều kiện.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

X = 1,99

Số

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

U Y

H Ư

N

Đ

ẠO

TP

.Q

µg/mL mAuxphút µg/mL

TR ẦN

X = 499,99

Ơ

Hàm

G

N

PNH

Diện tích

B

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mẫu

CPM

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

PRC

41

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.6. Kết quả phân tích thuốc Decolgen forte

mg/viên

500

196231

2,0 1,96

499,52

192307

2

125,0

54409828

498,67

189363

3

126,5

54602213

500,43

197303

4

125,8

54531283

499,78

194358

S = 0,63

kê

H Ư

N Ơ 9,95

1,93

1628705

9,92

2,01

1656617

10,09

1,98

1615571

9,96

X = 9,98

S = 0,018

S = 0,065

RSD = 0,9

RSD = 0,65

10 00

B

RSD = 0,126

1633630

X = 1,97

TR ẦN

X = 499,6

Số liệu thống

10

Đ

54503427

G

125,5

N

1

mg/viên

1641840

ẠO

54555288

lượng

Ó

A

Nhận xét: Từ kết quả ở bảng 3.6 cho thấy độ lệch chuẩn tương đối

H

RSD của cả 3 chất phân tích đều nhỏ hơn 1% (PRC: 0,126% ; CPM:0,90%;

-L

Í-

PNH: 0,65%). Điều đó chứng tỏ - Thuốc viên Decolgen forte sản xuất bởi

ÁN

Công ty TNHH United intera tionl pharma who-gmp, GSP- Số 16 VSIP II,

TO

Đường số 7, Khu liên hợp công nghiệp-Dịch vụ- Đô thị Bình Dương, Phường Hoà phú, TP Thủ Dầu Một, Tỉnh Bình Dương, Việt Nam-ĐT: 0839621000. xuất: 18/06/2015; Hạn sử dụng: 17/06/2017 đáp ứng được các yêu cầu chất lượng theo tiêu chuẩn dược phẩm Việt Nam.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Đăng ký nhãn hiệu: United Laboratoris, Inc. Số lô SX Lot 507911. Ngày sản

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

mg/viên

pic

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

lượng

tích pic

Hàm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

lượng

Diện tích

H

pic

Hàm

Diện

N

mg

Hàm

U Y

Diện tích

PNH

.Q

cân

Chuẩn

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

STT

CPM

TP

PRC

Lượng

42

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.1.2.5. Khảo sát độ đúng của phép xác định PRC, CPM và PNH theo

Ơ

Độ đúng của phương pháp được xác định bằng phương pháp thêm

N

phương pháp thêm chuẩn

N

H

chuẩn. Thêm vào mẫu thử một lượng dung dịch chất chuẩn đã biết nồng độ.

ẠO

Đem các dung dịch sắc ký trong cùng điều kiện với dung dịch chuẩn,

Đ

lặp lại thực nghiệm với 4 lần cân khác nhau. Dựa vào hàm lượng các chất đã

N

G

biết trong mẫu thử, lượng các chất chuẩn thêm vào và căn cứ diện tích pic của

H Ư

dung dịch thử và dung dịch chuẩn tính được lượng chất chuẩn tìm thấy so với

TR ẦN

lượng thêm vào và kết quả khảo sát được thể hiện ở bảng 3.7. trong đó: CK là hàm lượng chất chuẩn xác định được trước khi thêm chuẩn.

B

C là hàm lượng chất chuẩn thêm vào mẫu.

10 00

CT là hàm lượng chất xác định được sau khi thêm chuẩn.

A

Nhận xét: Từ kết quả ở bảng 3.7 cho thấy, độ thu hồi của PRC từ 99,6%

H

Ó

÷ 100,1 %, CPM từ 95,4%÷ 99,6% và PNH là 99,4%÷99,8%. Do đó, chúng tôi

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

kết luận là phương pháp sắc ký đạt yêu cầu về độ đúng.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

dịch PRC1; CPM2; và PNH2 (pha như ở mục 2.6).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

chuẩn thêm vào. Các dung dịch chuẩn và dung dịch thử được pha từ các dung

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

Dựa vào diện tích pic của các dung dịch này tính tỷ lệ thu hồi lượng chất

43

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CK (µg/mL)

C (µg/mL)

CT (µg/mL)

Rev(% )

1

499,68

100,0

599,30

99,6

2

500,40

100,0

600,20

3

499,95

100,0

599,66

99,7

4

500,21

100,0

600,35

100,1

1

1,97

0,5

2,45

96,2

2

1,95

0,5

2,43

95,8

3

1,98

0,5

2,47

99,6

4

1,94

0,5

2,42

95,4

1

9,97

5

14,95

99,6

2

9,96

5

14,93

99,4

9,99

5

14,98

99,8

9,98

5

14,96

99,6

TO

H

N U Y

Đ

ÀN

Để xác định được paracetamol, chlorpheniramine maleate và phenylephrine hydrochloride bằng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử thì paracetamol, chlorpheniramine maleate và phenylephrine hydrochloride phải hấp thụ quang trong khoảng bước sóng khảo sát. Do đó chúng tôi tiến hành khảo sát phổ hấp thụ phân tử trong khoảng bước sóng từ 200 nm đế n 900 nm của các dung dịch PRC, CPM và PNH có nồng độ là 10 mL (pha như ở mục 2.8).

44

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

.Q

TP

ẠO Đ

ÁN

3.2.1. Khảo sát phổ hấp thụ phân tử của paracetamol, chlorpheniramine maleate và phenylephrine hydrochloride

IỄ N D

G

-L

3.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Ó

Í-

H

4

A

3

99,8

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

10 00

PNH

B

CPM

N

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

PRC

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Mẫu

Ơ

chuẩn

H Ư

Chất

TR ẦN

Bảng 3.7. Kết quả khảo sát độ đúng

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Kế t quả phổ hấp thụ quang phân tử của PRC, CPM và PNH ở bước sóng từ 200 - 300 nm đươ ̣c thể hiê ̣n ở hình 3.8.

N

Abs

A

PRC (1), CPM (2) và PNH (3)

H

Ó

Nhận xét: Từ kết quả thu được cho thấy PRC có độ hấp thụ quang cực

Í-

đại tại λ = 244 nm, CPM có độ hấp thụ quang cực đại tại λ = 265 nm và

-L

PNH có độ hấp thụ quang cực đại tại bước sóng λ = 275 nm. Phổ hấp thụ

ÁN

quang của PRC, CPM và PNH xen phủ nhau gần như hoàn toàn, do đó gây

TO

khó khăn cho việc xác định đồng thời PRC, CPM và PNH trong hỗn hợp.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Trên cơ sở khảo sát trong khoảng bước sóng 200 - 900 nm nhận thấy PRC, CPM và PNH gần như không hấp thụ ánh sáng. Mặt khác ở 200 – 215 nm thì

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

Hin ̀ h 3.8. Phổ hấp thụ quang của các dung dịch chuẩn

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN



B

TR ẦN

H Ư

(3)

N

G

(2)

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

(1)

độ hấp thụ quang của 3 chất lại rất lớn và không ổn định. Vì vậy, chúng tôi lựa cho ̣n khoảng bước sóng từ 215 - 300 nm để tiế n hành các nghiên cứu tiế p theo.

45

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.2. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH Lấy các dung dịch (pha ở mục 2.8). Đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang ở bước sóng

H

Ơ

cực đa ̣i của PRC là 244 nm, của CPM là 265 nm và của PNH là 275 nm ở

N

vào môi trường các axit ở giá tri pH khác nhau ̣

U Y

.Q

nhau thu được ở bảng 3.8.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

H2SO4

HNO3

H Ư

HCl 1

2

3

pH

1

2

3

4

5

6

7

8

9

1

2

3

1

2

3

B

Mẫu

TR ẦN

trường

10 00

PRC 0,637 0,636 0,635 0,599 0,597 0,598 0,518 0,496 0,496 CPM 0,198 0,199 0,198 0,191 0,187 0,189 0,188 0,185 0,186

A

A

-L

Í-

H

Ó

PNH 0,090 0,089 0,091 0,086 0,084 0,085 0,087 0,085 0,084

ÁN

Nhận xét: Từ kết quả thu được ở bảng 3.8 chúng tôi nhận thấy: đối với PRC, CPM và PNH đô ̣ hấp thụ quang tương đối ổ n đinh ̣ trong môi trường axit. Tuy nhiên, kế t quả nghiên cứu sơ bô ̣ cho thấ y khoảng tuyế n tính và đô ̣

D

IỄ N

Đ

ÀN

tan cũng như độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH ổn định và đạt cực đa ̣i

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Môi

N

G

Đ

ẠO

PNH vào môi trường các axit ở giá tri pH khác nhau ̣

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Bảng 3.8. Kế t quả sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

thụ quang của PRC, CPM và PNH vào môi trường axit ở các giá tri ̣pH khác

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

nhiệt độ phòng trong các môi trường axit và pH khác nhau. Kết quả độ hấp

trong môi trường axit HCl 0,1M. Do đó, chúng tôi chọn môi trường để nghiên cứu cho cả PRC, CPM và PNH là dung dịch HCl 0,1M và kết quả khảo sát phù hợp với các nghiên cứu trước đây.

46

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.3. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo thời gian

Ơ

N

Để khảo sát ảnh hưởng của thời gian đế n đô ̣ hấp thu ̣ quang của PRC,

U Y

và PNH trong khoảng thời gian 90 phút sau khi pha.

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

G

Đ

CPM (265 nm) và PNH (275 nm). Kết quả thu đươ ̣c trình bày ở bảng 3.9.

Thời gian

5

(phút)

15

20

25

30

35

40

45

0,636 0,634 0,635 0,637 0,636 0,636 0,635 0,637 0,636

CPM

0,198 0,197 0,199 0,198 0,196 0,198 0,197 0,196 0,197

PNH

0,09

10 00

A

Ó 50

55

60

65

70

75

80

85

90

PRC

0,635 0,636 0,635 0,637 0,635 0,636 0,637 0,635 0,636

CPM

0,198 0,197 0,199 0,197 0,199 0,201 0,199 0,197 0,196

PNH

0,089 0,088 0,086 0,087 0,085 0,086 0,088 0,087 0,084

TO

ÁN

-L

(phút)

0,101 0,089 0,091 0,088 0,086 0,085 0,087 0,088

H

Thời gian

B

PRC

Í-

A

10

TR ẦN

H Ư

N

Bảng 3.9. Sư ̣ phu ̣ thuô ̣c độ hấp thụ quang theo thời gian

A

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Lấy giá trị trung bình ( 3 lần đo ) ở bước sóng cực đại của PRC (244 nm),

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

thu ̣ quang của các dung dich ̣ ở bước sóng 200 - 300 nm; cứ 5 phút đo 1 lầ n.

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

Pha các dung dich ̣ PRC, CPM và PNH (pha như mục 2.8). Đo đô ̣ hấ p

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

CPM và PNH chúng tôi tiế n hành khảo sát đô ̣ hấ p thụ quang của PRC, CPM

Từ kế t quả bảng 3.9, tiến hành xây dựng đươ ̣c đường biểu diễn sự phu ̣ thuô ̣c của độ hấ p thu ̣ quang theo thời gian thu được ở hiǹ h 3.9.

47

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ó

A

10 00

khoảng thời gian 90 phút sau khi pha độ hấp thụ quang của các dung dịch PRC, CPM và PNH tương đố i ổ n đinh. ̣ Sự thay đổ i chủ yế u ở khoảng thời gian 525 phút sau khi pha và sự thay đổi đó là không đáng kể. Như vậy, có

H

thể nói các dung dịch PRC, CPM và PNH có độ hấp thụ quang ổn định trong

-L

Í-

khoảng thời gian từ 2090 phút sau khi pha. Kết quả khảo sát phù hợp với các

TO

ÁN

nghiên cứu đã có. Do đó, chúng tôi lựa cho ̣n thời gian tố i ưu cho phép đo quang là 20  90 phút sau khi pha.

3.2.4. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH

D

IỄ N

Đ

ÀN

theo nhiệt độ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

B

Nhận xét: Từ kết quả ở bảng 3.9 và hình 3.9 chúng tôi nhận thấy trong

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Hình 3.9. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang theo thời gian

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q Thời gian

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

Abs

Pha các dung dich ̣ chuẩ n PRC, CPM và PNH (pha như mục 2.8). Sau đó đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của các dung dich ̣ ở bước sóng 200 – 300 nm, trong khoảng nhiêṭ đô ̣ từ 25-50 0 C. Độ hấp thụ quang trung bình (3 lần đo) ở bước sóng cực đại của PRC (244 nm), CPM (265 nm) và PNH (275 nm) đươ ̣c trình bày ở bảng 3.10. Từ bảng 3.10 xây dựng đồ thi biể ̣ u diễn sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang của PRC, CPM và PNH theo nhiê ̣t đô ̣ và kế t quả được thể hiêṇ ở hiǹ h 3.10.

48

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.10. Sư ̣ phu ̣ thuô ̣c độ hấp thụ quang theo nhiệt độ 35

40

45

50

PRC

0,636

0,635

0,637

0,635

0,636

0,637

CPM

0,198

0,199

0,198

0,197

0,198

0,199

PNH

0,09

0,089

0,091

0,090

0,089

0,091

Í-

H

Ó

A

Nhiệt độ

-L

Hin ̀ h 3.10. Sư ̣ phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang theo nhiêṭ đô ̣

ÁN

Nhận xét: Từ kế t quả bảng 3.10 và hình 3.10 ta thấy đô ̣ hấ p thu ̣ quang

TO

của dung dich ̣ PRC, CPM và PNH ổn định trong khoảng nhiê ̣t đô ̣ từ 25 đến

D

IỄ N

Đ

ÀN

500C. Do đó chúng tôi lựa chọn nhiệt độ thích hợp để tiến hành thí nghiệm là

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

Abs

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U Y

N

H

Ơ

N

30

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

25

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nhiệt độ (0C)

ở nhiệt độ phòng (25 ÷ 300C).

Kế t luận: Dựa trên các kế t quả khảo sát các điề u kiêṇ tố i ưu cho phép đo quang ta thấy các thí nghiệm tiế n hành thuâ ̣n lợi trong môi trường HCl 0,1M; thời gian đo quang sau khi pha là 20-40 phút và ở nhiêṭ đô ̣ phòng (25  350C), khoảng bước sóng đo quang là 210  300 nm.

49

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.5. Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia của PRC, CPM và PNH và xác định chỉ số LOD và LOQ

N

3.2.5.1. Khảo sát khoảng tuyế n tính của PRC

H

Ơ

Pha 1 daỹ dung dich ̣ PRC (pha như mục 2.8). Tiế n hành đo đô ̣ hấ p thu ̣

ÁN

-L

Bảng 3.11 là kế t quả đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dịch PRC ở các nồng độ 1,050,0 (g/mL) tại bước sóng cực đại là 244 nm. Các giá tri ̣ ghi

TO

trong bảng là giá tri trung biǹ h của 4 lầ n đo. ̣

D

IỄ N

Đ

ÀN

Bảng 3.11. Đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dịch PRC ở các giá tri nồng độ ̣ CPRC (g/mL) A(λ = 244

nm)

CPRC (g/mL) A(λ = 244

nm)

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

0,061

0,135

0,205

0,271

0,316

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

0,636

1,28

1,89

2,51

3,16

50

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Í-

H

Hình 3.11. Phổ hấp thụ quang của PRC ở các nồng độ 1,0 40,0 g/mL

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Ó

A



MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q 10 00

B

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Abs

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

quang của các dung dich ̣ ở bước sóng tố i ưu là 210 - 300 nm, thời gian 30 phút sau khi pha tại nhiệt độ phòng và kết quả thu được ở hình 3.11.

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

10 00

B

Nhận xét: Từ kế t quả ở bảng 3.11, hình 3.11 và 3.12 cho thấy khi nồng độ PRC trong khoảng từ 1,0 ÷ 30,0 (g/mL) thì độ hấp thụ quang A< 2 và

A

phụ thuộc tuyến tính tố t với nồng độ. Khi nồ ng đô ̣ PRC lớn hơn 40g/mL thì

H

Ó

đô ̣ hấ p thụ quang A>2, sai số đo quang là lớn nhưng vẫn phụ thuộc tuyế n tính

-L

Í-

vào nồ ng đô ̣. Vì vậy có thể kế t luận rằng độ hấp thụ quang của PRC tuân theo định luật Bughe - Lămbe - Bia trong khoảng nồng độ 1,030,0 (g/mL).

ÁN

3.2.5.2. Xác đinh ̣ LOD và LOQ của PRC

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Từ kế t quả thực nghiê ̣m ở bảng 3.11 và hình 3.12 ta thấ y trong khoảng nồ ng đô ̣ của PRC 1,0  50,0 µg/mL đô ̣ hấ p thu ̣ quang phu ̣ thuô ̣c tuyế n tính vào

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng đô ̣ của PRC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Hin ̀ h 3.12. Đường hồ i quy tuyế n tính biể u diễn sư ̣ phu ̣ thuô ̣c

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

Từ kế t quả đo quang ở bảng 3.11, tiế n hành xây dựng đường biể u diễn sự phu ̣ thuộc của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng độ PRC thu được hình 3.12.



nồ ng đô ̣ với R=0,9999, đô ̣ nha ̣y lớn nhấ t (B=0,062). Mă ̣t khác có thể thấ y ta ̣i nồ ng đô ̣ 1µg/mL đô ̣ hấ p thu ̣ quang bé (A= 0,061) gầ n với tiń hiêụ nề n. Do đó có thể cho ̣n đường chuẩ n có khoảng nồ ng đô ̣ 1,0  5,0 µg/mL làm phương triǹ h tiń h LOD và LOQ theo công thức (2.5) và (2.6). Kế t quả tính LOD và LOQ của PRC đươ ̣c trình bày ở bảng 3.12.

51

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.12. Kết quả xác đinh ̣ LOD và LOQ của PRC SD

LOD

LOQ

0,062

4,9.10-3

0,23 (g/mL)

0,76 (g/mL)

.Q

G

g/mL(pha như mục 2.8). Tiến hành đo độ hấp thụ quang của các dung dịch

H Ư

N

đó ở bước sóng 210-300 nm sau khi pha 30 phút tại nhiệt độ phòng. Kế t quả

TR ẦN

độ hấp thụ quang của một số dung dịch đươ ̣c thể hiện ở hình 3.13.

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

Abs

Đ

ÀN

TO

ÁN



Hình 3.13. Phổ hấp thụ quang của CPM ở các nồng độ 1,050,0 g/mL

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

Pha một dãy dung dịch CPM có nồng độ tăng dần từ 1,050,0

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

ẠO

3.2.5.3. Khảo sát khoảng tuyến tính của CPM

IỄ N D

TP

1,0  30,0 µg/mL, giá trị LOD là 0,23(g/mL) và LOQ là 0,76(g/mL).

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Nhận xét: Khoảng tuyến tính của PRC trong môi trường HCl 0,1M là

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

H

Ơ

N

B

Bảng 3.13 là kế t quả đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dịch CPM ở các nồng độ 1,0 – 50,0 g/mL tại bước sóng cực đại là 265 nm. Các giá tri ̣ ghi trong bảng 3.13 là giá tri trung bình của 3 lầ n đo. ̣

52

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

4,0

5,0

A(λ = 265 nm)

0,021

0,041

0,064

0,081

0,107

CCPM(g/mL)

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

A(λ = 265 nm)

0,199

0,394

0,593

0,775

U Y

N

3,0

Ơ

2,0

Hình 3.14. Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn sự phụ thuộc

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Đ

G N H Ư TR ẦN B 10 00 A Ó H Í-L ÁN TO ÀN Đ

C(g/mL)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

0,984 MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

N

H

1,0

Từ kế t quả ở bảng 3.13, tiến hành xây dựng đường biể u diễn sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng đô ̣ CPM. Kế t quả đươ ̣c thể hiê ̣n ở hiǹ h 3.14.

IỄ N D

CCPM(g/mL)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Bảng 3.13. Sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang của CPM theo nồng độ

của độ hấp thụ quang vào nồng độ CPM

Nhận xét: Từ kế t quả ở bảng 3.13, hình 3.14 cho thấ y trong khoảng nồng độ từ 1,0 ÷ 50,0 g/mL thì độ hấp thụ quang của CPM phụ thuộc tuyến tính tố t với nồng độ. Vì vâ ̣y có thể kế t luâ ̣n độ hấp thụ quang của CPM tuân theo định luật Bughe - Lămbe - Bia trong khoảng nồng độ từ 1,050,0 g/mL.

53

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

3.2.5.4. Xác định LOD và LOQ của CPM Từ kế t quả ở bảng 3.13 và hiǹ h 3.14 nhâ ̣n thấ y, ở khoảng nồ ng đô ̣ thấ p

N

1,050,0 g/mL, đô ̣ hấ p thu ̣ quang phu ̣ thuô ̣c tuyế n tính tố t vào nồ ng đô ̣ CPM

SD

LOD

0,019

1,5810-3

H Ư

N

B

0,83 (g/mL)

TR ẦN

0,25 (g/mL)

LOQ

Nhận xét: Khoảng tuyến tính của CPM trong môi trường HCl 0,1M là

10 00

B

1,050,0 g/mL, giá trị LOD là 0,25 (g/mL) và LOQ là 0,83(g/mL).

3.2.5.5. Khảo sát khoảng tuyến tính của PNH

H

Ó

A

Pha một daỹ dung dich ̣ PNH có nồ ng đô ̣ tăng từ 1,0  50 µg/mL(pha như mục 2.8) tiế n hành đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của các dung dich ̣ trong khoảng

-L

Í-

bước sóng tố i ưu từ 200 - 300 nm sau khi pha 30 phút tại nhiệt độ phòng. Kế t quả độ hấp thụ quang của một số dung dịch đươ ̣c thể hiện ở hình 3.15 và bảng

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

3.15.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

Đ

Bảng 3.14. Kết quả tính LOD và LOQ của CPM

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

hiêụ của đường nề n. Do đó, chúng tôi cho ̣n đường chuẩ n trong khoảng nồ ng đô ̣ CPM từ 1,04,0g/mL làm phương trình tính LOD và LOQ theo công thức (2.5) và (2.6). Kế t quả thu đươ ̣c thể hiện ở bảng 3.14.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

với (R = 0,9999); đô ̣ nha ̣y lớn nhấ t (B = 0,019). Mă ̣t khác đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dich ̣ CPM tại nồ ng đô ̣ 1,0g/mL rấ t nhỏ (A = 0,021) gầ n với tiń

54

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

nồng độ 1,0 – 50,0 g/mL tại bước sóng cực đại là 275 nm. Các giá tri ̣ ghi

10 00

B

trong bảng 3.15 là giá tri trung bình của 3 lầ n đo. ̣

2,0

3,0

4,0

5,0

A(λ = 275nm)

0,009

0,018

0,028

0,037

0,048

CPNH(g/mL)

-L

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

0,091

0,184

0,263

0,363

0,445

Í-

H

CPN H(g/mL)

Ó

1,0

ÁN

A

Bảng 3.15. Sự phu ̣ thuô ̣c đô ̣ hấ p thu ̣ quang của PNH theo nồ ng độ

Từ kế t quả đo quang ở bảng 3.15, tiế n hành xây dựng đường biểu diễn sự phu ̣ thuô ̣c của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồng độ PNH. Kế t quả đươ ̣c thể hiêṇ ở hiǹ h 3.16.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

A(λ = 275 nm)

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TR ẦN

Bảng 3.15 là kế t quả đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của dung dịch PNH ở các

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

G N

H Ư

Hình 3.15. Phổ hấp thụ quang của PNH ở các nồng độ 1,0 50,0 g/mL

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q 

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

Abs

55

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

10 00

Nhận xét: Qua hình 3.16 và bảng 3.15 ta thấy khi nồng độ PNH nằm trong khoảng 1,0 50,0 g/mL thì độ hấp thụ quang phụ thuộc tuyến tính với

Ó

A

nồng độ. Vì vâ ̣y có thể kế t luận rằng độ hấp thụ quang của PNH tuân theo

Í-

H

định luật Bughe - Lămbe - Bia trong khoảng nồng độ 1,0 50,0 (g/mL).

-L

3.2.5.6. Xác đinh ̣ LOD và LOQ của PNH

ÁN

Từ kế t quả ở bảng 3.15 và hiǹ h 3.16 nhâ ̣n thấ y trong khoảng nồng độ

TO

của PNH từ 1,050,0 g/mL độ hấp thụ quang vẫn phụ thuộc tuyến tính vào

D

IỄ N

Đ

ÀN

nồng độ với R= 0,9996; độ nhạy lớn nhất (B= 0,0089). Mặt khác có thể thấy

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

B

sư ̣ phu ̣ thuô ̣c của đô ̣ hấ p thu ̣ quang vào nồ ng đô ̣ PNH

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Hin ̀ h 3.16. Đường hồ i quy tuyế n tính biể u diễn

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q C(g/mL)

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

tại nồng độ 1 g/mL độ hấp thụ quang của PNH rất nhỏ (A=0,009), gần với tín hiệu nền. Vậy có thể chọn đường chuẩn trong khoảng nồng độ 1,03,0 g/mL làm phương trình tính LOD và LOQ theo công thức (2.5) và (2.6).

Kế t quả đươ ̣c trình bày ở bảng 3.16.

56

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.16. Kết quả tính LOD và LOQ của PNH SD

LOD

LOQ

0,008

7,1.10-4

0,266 (g/mL)

0,89 (g/mL)

G

3.2.6.1. Xác đinh ̣ hàm lượng PRC và CPM trong hỗn hợp tự pha

H Ư

N

Tiế n hành pha các dung dịch hỗn hợp PRC và CPM trong HCl 0,1M theo

TR ẦN

tỷ lê ̣ CPRC /CCPM từ 1/1 đế n 1/100, các thể tích VPRC và VCPM được lấy như bảng 3.17 và định mức bằng dung dịch HCl 0,1M trong bình định mức 25 mL.

A

CPRC

CCPM

VPRC(1) VPRC(2) VPRC(3)

VCPM

H

Ó

Mẫu CPRC/CCPM

10 00

B

Bảng 3.17. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p PRC và CPM

-L

10,0

-

-

-

10,0

1

10,0

-

-

10,0

10,0

3

1/20

0,5

10,0

-

-

6,0

10,0

4

1/40

0,3

12,0

-

-

6,0

12,0

5

1/50

0,4

20,0

-

5,0

-

20,0

6

1/60

0,2

12,0

-

3,0

-

12,0

7

1/80

0,2

16,0

-

3,0

-

16,0

8

1/100

0,2

20,0

3,0

-

-

20,0

D

IỄ N

Đ

ÀN

ÁN

1/10

10,0

TO

2

1/1

Í-

1

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ

các mẫu tự pha

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

ẠO

3.2.6. Khảo sát và đánh giá độ tin cậy của phương pháp nghiên cứu trên

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nhận xét: Khoảng tuyế n tính của PNH trong dung môi HCl 0,1M là 1,050,0 g/mL, giá trị LOD là 0,266 (g/mL) và LOQ là 0,89(g/mL).

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

N

H

Ơ

N

B

57

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

trong bảng 3.17 thì: VPRC(1), VPRC(2), VPRC(3) là thể tích dung dịch PRC tương ứng VCPM là thể tích dung dịch CPM có nồng độ 20 µg/mL.

U Y

TP

CCPM

1

1/1

10,0

2

1/10

1,0

3

1/20

0,5

4

1/40

5

1/50

6 7

CCPM

RE%

RE%

CPRC

CCPM

9,98

10,01

-0,2

0,1

10,0

1,01

10,01

1,0

0,1

10,0

0,499

9,99

-0,2

-0,1

12,0

0,31

11,99

3,3

-0,1

0,4

20,0

0,38

20,03

-5,0

0,15

1/60

0,2

12,0

0,18

11,98

-10,0

-0,17

0,2

16,0

0,23

15,96

15,0

-0,25

0,2

20,0

0,162

19,8

-19,0

-1,0

10 00

B

10,0

-L

H Ư

N

CPRC

Í-

H

Ó

A

0,3

ÁN

1/80

Đ

ÀN

TO

8

1/100

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

CPRC

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

CPRC/CCPM

G

Mẫu

TR ẦN

Đ

ẠO

Bảng 3.18. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của PRC và CPM trong hỗn hơ ̣p

IỄ N D

.Q

xác đinh ̣ hàm lươ ̣ng PRC và CPM được trình bày ở bảng 3.18.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

hành tính hàm lượng PRC, CPM theo chương trình lọc Kalman [13]. Kết quả

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

H

Ơ

Thực hiêṇ phép đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của các hỗn hợp trong khoảng bước sóng 200  300 nm; cứ 0,5 nm lấy 1 giá trị. Từ số liệu đo quang tiến

N

với các nồng độ là 1 µg/mL, 3 µg/mL, 5 µg/mL.

Nhận xét: Kết quả thu được ở bảng 3.18 cho thấy khi hàm lượng PRC

lớn hơn CPM 60 lần thì phương pháp lo ̣c Kalman [13] mắ c sai số lớn (hơn 10%) đố i với cấ u tử có nồ ng đô ̣ nhỏ trong khi cấu tử có nồng độ lớn mắc sai số nhỏ (nhỏ hơn 1%).

58

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Tiế n hành pha các dung dịch hỗn hợp PRC và PNH trong HCl 0,1M theo tỷ lê ̣ CPRC/CPNH từ 1/1 đế n 1/100, các thể tích VPRC và VPNH được lấy

H

Ơ

như bảng 3.19 sau đó định mức bằng dung dịch HCl 0,1M trong bình định

N

3.2.6.2. Xác đinh ̣ hàm lượng PRC và PNH trong hỗn hợp tự pha

VPRC(1)

1

1/1

10,0

10,0

-

2

1/10

1,0

10,0

3

1/20

1,0

20,0

4

1/40

0,5

5

1/50

0,4

6

1/60

7

1/80

8

1/100

Đ

VPNH 10,0

-

-

10,0

-

20,0

20,0

20,0

-

1,0

20,0

20.0

2,5

-

20,0

0,2

12,0

2,5

-

12,0

0,2

16,0

2,5

-

16,0

0,2

20.0

2,5

-

20,0

B

TR ẦN

H Ư

N

G

-

10 00

A

Ó

VPRC(2)

Í-

ÀN

TO

ÁN

-L

trong bảng 3.19 thì: VPRC(1), VPRC(2) là thể tích dung dịch PRC tương ứng với các nồng độ 1 µg/mL, 5µg/mL. VPNH là thể tích dung dịch PNH nồng độ 20 µg/mL.

Thực hiêṇ phép đo độ hấ p thu ̣ quang của các hỗn hợp trong khoảng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

CPNH

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q CPRC

TP

CPRC/ CPNH

ẠO

Mẫu

H

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

Bảng 3.19. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p PRC và PNH

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

mức 25 mL.

hành tính hàm lượng PRC và PNH theo chương trình lọc Kalman [13]. Kết quả được trình bày ở bảng 3.20.

D

IỄ N

Đ

bước sóng 200 – 300 nm; cứ 0,5 nm lấy 1 giá trị. Từ số liệu đo quang tiến

59

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

RE%

CPRC

CPNH 0,10

Ơ

RE%

10,0

10,0

9,98

10,01

-0,2

2

1/10

1,0

10,0

0,99

10,01

-1,0

3

1/20

1,0

20,0

1,02

19,99

4

1/40

0,5

20,0

0,48

19,9

5

1/50

0,4

20.0

0,36

20,14

6

1/60

0,2

12,0

0,179

7

1/80

0,2

16,0

8

1/100

0,2

20.0

-0,05

-4,0

-0,50

-10,0

0,70

11,91

-10,5

-0,75

0,234

15,89

17,0

-0,69

0,16

19,79

-20,0

-1,05

TR ẦN

H Ư

N

G

Đ

ẠO

2,0

10 00

trong bảng 3.20 thì: C0PRC và C0PNH (μg/mL) là hàm lượng PRC, PNH tự pha trong

A

các hỗn hợp.

H

Ó

CPRC và CPNH (μg/mL) là hàm lượng PRC, PNH xác định

-L

Í-

được theo phương pháp lọc kalman [13].

RE% CPRC và RE% CPNH là sai số phép xác định hàm lượng.

ÁN

Nhận xét: Kết quả thu được ở bảng 3.20 cho thấy khi hàm lượng

ÀN

TO

PRC lớn hơn PNH 50 lần thì phương phá p lọc Kalman [13] mắc sai số lớ n (hơn 10%) đố i vớ i cấu tử có nồ ng đô ̣ nhỏ , trong khi cấu tử có nồng độ lớn

D

IỄ N

Đ

mắc sai số nhỏ (nhỏ hơn 1%).

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

.Q

0,10

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

1/1

U Y

1

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

CPNH

H

CPRC

N

C0PNH

TP

C0 PRC

B

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mẫu CPRC/ CPNH

N

Bảng 3.20. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của PRC và PNH trong hỗn hơ ̣p

3.2.6.3. Xá c đi nh ̣ hàm lượng CPM và PNH trong hỗ n hợp tự pha Tiế n hà nh pha cá c dung dịch hỗn hợp CPM và PNH trong HCl 0,1M theo tỷ lê ̣ CCPM/ CPNH từ 1/1 đế n 1/50, các thể tích V CPM và VPNH được lấy như bảng 3.21 sau đó định mức bằng dung dịch HCl 0,1M trong bình định mức 25 mL.

60

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CCPM

CPNH

VCPM

VPNH

1

1/1

10,0

10,0

10,0

1,0

2

1/5

4,0

20,0

10,0

3

1/10

1,0

10,0

10,0

4

1/15

1,0

15,0

10,0

4,0

5

1/20

1,0

20,0

8,0

5,0

6

1/30

0,6

18,0

5,0

8,0

7

1/40

0,5

20,0

5,0

10,0

8

1/50

0,4

20,0

5,0

10,0

N

CCPM/ CPNH

H

10 00

VPNH là thể tích dung dịch PNH với nồng độ 20 µg/mL.

Ó

A

Thực hiêṇ phép đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang của các hỗn hợp trong khoảng bước sóng 200 – 300 nm, cứ 0,5 nm lấy một giá trị. Từ số liệu đo quang tiến

Í-

H

hành tính hàm lượng CPM và PNH theo chương trình lọc Kalman [13] và kết

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

quả được trình bày ở bảng 3.22.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

B

trong bảng 3.22 thì: VCPM là thể tích dung dịch CPM với nồng độ 20 µg/mL.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

3,0

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

U Y .Q

2,0

TP

Đ G N

H Ư

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Ơ

Mẫu

ẠO

Bảng 3.21. Pha chế các dung dich ̣ hỗn hơ ̣p CPM và PNH

61

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

CCPM

CPNH

10,01

-0,2

0,10

3,98

20,01

-0,5

10,0

0,99

10,03

-1,0

0,30

1,0

15,0

1,02

14,95

2,0

-0,33

1/20

1,0

20,0

0,98

20,09

-2,0

0.45

6

1/30

0,6

18,0

0,63

18,30

G

5,0

1,60

7

1/40

0,5

20,0

0,47

20,5

-6,0

2,50

8

1/50

0,4

20,0

0,43

20,7

7,5

3,50

2

1/5

4,0

20,0

3

1/10

1,0

4

1/15

5

Đ

N

H Ư

0,10

10 00

B

trong bảng 3.22 thì: CoPNH và CoCPM (μg/mL) là hàm lượng CPM và PNH tự pha trong các hỗn hợp.

A

CPNH và CCPM (μg/mL) là hàm lượng CPM và PNH xác

H

Ó

định được theo phương pháp lọc kalman [13].

Í-

RE% CPNH và RE% CCPM là sai số phép xác định hàm lượng.

-L

Nhận xét:

Kết quả thu được ở bảng 3.22 cho thấy khi hàm

ÁN

lượng CPM/PNH từ 1/1 đến 1/20 lần thì phương pháp lọc Kalman [13]

TO

mắc sai số đều (<5%).

D

IỄ N

Đ

ÀN

3.2.6.4. Xác đinh ̣ hàm lượng PRC, CPM và PNH trong các hỗn hợp tự pha

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

9,98

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10,0

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

10,0

H

1/1

N

1

U Y

CPNH

.Q

CCPM

TP

CoPNH

ẠO

CoCPM

N

RE%

CPM/PNH

Ơ

RE%

Mẫu

TR ẦN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Bảng 3.22. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của CPM và PNH trong hỗn hơ ̣p

Tiến hành lấy các thể tích PRC, CPM và PNH như bảng 3.23 pha loãng bằ ng HCl 0,1M và đinh ̣ mức thành 25 mL, ta được các hỗ n hơ ̣p PRC, CPM, và PNH có tỷ lê ̣ CPRC/ CPNH/CCPM trong bảng 3.23. Thưc̣ hiê ̣n phép đo đô ̣ hấ p thụ quang của các hỗn hơ ̣p trong khoảng bước sóng 200  300 nm; cứ 0,5 nm lấy 1 giá trị.

62

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.23. Pha các dung dịch chuẩ n PRC, CPM, PNH và hỗn hợp VCPM (1)

VCPM(2)

VCPM(3)

20

20

5

20

3

1

μg/mL

μg/mL

μg/mL

μg/mL

μg/mL

-

-

10,0

2

10:2:1

10,0

2,0

-

1,0

3

50:2:1

10,0

-

5,0

-

4

80:4:1

8,0

-

5,0

5

100:4:1

10,0

-

1,5

Ơ H N

-

5,0

-

-

ẠO

2,5

-

-

-

3,0

G

TP

-

Đ

-

H Ư

TR ẦN

dung dịch PRC; PNH và CPM tương ứng với các nồng độ ghi ở bảng.

Đo đô ̣ hấ p thụ quang của các hỗn hợp trong khoảng bước sóng

10 00

B

200 – 300 nm, cứ 0,5 nm lấy 1 giá trị. Từ kết quả đo quang tiến hành tính hàm

A

lượng PRC, CPM và PNH theo chương trình lọc Kalman [13]. Kế t quả được trình bày ở bảng 3.24.

-L

Í-

H

Ó

Bảng 3.24. Kế t quả tính nồ ng đô ̣, sai số của PRC, CPM và PNH RE% RE% RE% CPRC

CPNH

CCPM

TO

Đ

CPNH CCPM

1:1:1

10,0 10,0 10,0

9,99

9,90 10,1

-0,1

-1,0

1,0

2

10:2:1

10,0

2,0

1,0

10,01

1,94 0,96

0,1

-3,0

-3,6

3

50:2:1

10,0

0,4

0,2

10,05

0,37 0,22

0,5

-6,5

11,5

4

80:4:1

8,0

0,4

0,1

8,08

0,37 0,02

1,0

-7,5

-80,0

5

100:4:1

10,0

0,4

0,1

10,08

0,35 0,02

0,8

-10

-95,0

ÀN

1

ÁN

Mẫu PRC: PNH : CPM CoPRC CoPNH CoCPM CPRC

63

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

10,0

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10,0

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

1:1:1

.Q

1

μg/mL

U Y

PRC:PNH: CPM

N

VPNH(2)

trong đó: VPRC; VPNH(1); VPNH(2); VCPM(1); VCPM (2); VCPM(3) lần lượt là thể tích của

IỄ N D

VPNH(1)

N

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mẫu

VPRC

Tỷ lê ̣

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

trong bảng 3.24 thì: C0 là nồng độ PRC, CPM và PNH pha chế đã biết.

C là nồng độ PRC, CPM và PNH tính được theo phương

N

pháp lọc kalman [13].

H

Ơ

RE% là sai số phép xác định hàm lượng.

N

G

Đ

dưới 1% với cấu tử có nồ ng đô ̣ lớn). Như vâ ̣y, phương pháp lọc Kalman chủ yế u mắ c sai số lớn đố i với cấ u tử có nồ ng độ nhỏ.

H Ư

3.2.7. Xác định hàm lượng PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen

TR ẦN

forte và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phương pháp thêm chuẩn

B

Tiế n hành đinh ̣ lươ ̣ng đồ ng thời PRC, CPM và PNH trong thuốc viên

10 00

Decolgen forte sản xuất bởi Công ty TNHH UNITED INTERATIONAL PHARMA WHO-GMP, GSP- Số 16 VSIP II, Đường số 7, Khu liên hợp công

Ó

A

nghiệp-Dịch vụ- Đô thị Bình Dương, Phường Hoà phú, TP Thủ Dầu Một,

Í-

H

Tỉnh Bình Dương, Việt Nam-ĐT :0839621000. Đăng ký nhãn hiệu: United

-L

Laboratoris, Inc. Số lô SX Lot 507911. Ngày sản xuất: 18/06/2015; Hạn sử

ÁN

dụng: 17/06/2017. Các dung dịch thuốc đem do quang được (pha như mục

TO

2.9). Từ kết quả đo đô ̣ hấ p thu ̣ quang, sử du ̣ng chương trình lọc Kalman để

D

IỄ N

Đ

ÀN

tính toán chúng tôi thu đươ ̣c kết ở bảng 3.25.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

mắ c sai số nhỏ (<1%).Trong khoảng nồ ng đô ̣ CPRC:CPNH:CCPM = 1:1:1 đến 10:2:1 thì kế t quả đo có sai số nhỏ (<5% đố i với cấu tử có nồng độ nhỏ và

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

số lớn, đối với cấu tử có nồ ng đô ̣ nhỏ (>10%) trong khi cấ u tử có nồ ng đô ̣ lớn

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

PRC: PNH: CPM từ 50: 2: 1 trở lên thì phương pháp lọc Kalman [13] mắc sai

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

Nhận xét: Kết quả thu được ở bảng 3.24 cho thấy khi tỷ lệ hàm lượng

64

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.25. Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, CPM và PNH

RE% RE%

CPRC

CPNH CCPM

10,0 -25,0

Ơ

RE%

H

0,1

0,02

5,05

0,11

0,015

1,0

2

10,0

0,2

0,04

9,92

0,23

0,013

-0,80

3

15,0

0,3

0,06

15,06

0,24

0,099

0,40

-20,0 65,0

4

20,0

0,4

0,08

19,96

0,28

0,15

-0,20

-30,0 87,5

5

25,0

0,5

0,10

24,98

0,64

-0,08

28,0 -90,0

H Ư

TR ẦN

Đánh giá độ đúng của phương pháp bằ ng cách thêm vào dung dich ̣ mẫu phân tích mô ̣t lươ ̣ng chính xác PRC, CPM và PNH đã biế t nồ ng đô ̣. Đo

10 00

B

phổ và tính độ thu hồi PRC, CPM và PNH trong mẫu qua đó đánh giá đô ̣ tin câ ̣y của phép phân tích. Đo phổ ở bước sóng từ 200-300 nm. Từ kế t quả đo

H

Ó

A

đô ̣ hấ p thu ̣ quang, tính toán xác đinh ̣ hàm lươ ̣ng PRC, CPM và PNH theo phương pháp lọc Kalman [13] và qua đó tính đô ̣ thu hồ i. Kết quả được thể hiện ở bảng 3.26. và PNH trong thuốc Decolgen forte trước khi thêm chuẩn.

CPRC, CPNH và CCPM (μg/mL) là hàm lượng PRC, CPM và PNH xác định được sau khi thêm chuẩn.

Rev(%) CPRC, Rev(%) CPNH, Rev(%) CCPM là độ thu hồi.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Í-

trong bảng 3.26 thì: CoPRC, CoPNH và CoCPM (μg/mL) là hàm lượng PRC, CPM

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

ẠO

Đ

0,01

15,0 -67,5

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

5,0

.Q

1

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

CCPM

N

CPNH

U Y

CPRC

G

CoPRC CoPNH CoCPM

N

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mẫu

N

trong mẫu thuốc Decolgen forte

65

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Bảng 3.26. Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CPM

CPRC

CPNH

Rev%

Ơ

Rev%

H

Rev%

0,02

-

-

3,96

-

-

97,8

2

10,0

0,1

0,02

-

-

6,01

-

-

100,5

3

10,0

0,1

0,02

-

-

8,01

-

100,1

4

10,0

0,1

0,02

-

6,08

-

-

98,1

-

5

10,0

0,1

0,02

-

8,02

-

-

99,1

-

6

10,0

0,1

0,02

-

10,11

-

-

99,6

-

7

10,0

0,1

0,02

11,01

-

-

100,1

-

-

8

10,0

0,1

0,02

11,96

-

-

98,9

-

-

ẠO Đ

N

H Ư

TR ẦN

-

10 00

Nhận xét: Qua bảng 3.26 cho thấy độ thu hồi của PRC từ 98,9% đến

Ó

A

100,1%, của PNH là từ 98,1% đến 99,6% và của CPM là từ 97,8% đến

H

100,5%. Độ thu hồi của PRC, CPM và PNH đều mắc sai số nhỏ (<5%). Vì

-L

Í-

vậy chúng tôi kết luận có thể dùng phương pháp thêm chuẩn để tính hàm

ÁN

lượng của PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc Decolgen forte.

TO

Kế t luận: Từ các kết quả xác đinh ̣ hàm lươ ̣ng PRC, CPM và PNH

ÀN

trong các mẫu tự pha chế cũng như trong mẫu thuố c Decolgen forte chúng tôi

D

IỄ N

Đ

nhận thấy, phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử có đô ̣ đúng, độ lă ̣p la ̣i tố t

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

0,1

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

10,0

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

U Y

1

CCPM

.Q

CCPM

TP

CPNH

G

CPRC

B

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

Mẫu CoPRC CoPNH CoCPM

N

và PNH trong mẫu thuốc Decolgen forte

và đô ̣ thu hồ i cao. Điề u đó cho phép chúng ta ứng du ̣ng phương pháp này vào phân tích kiể m tra chất lươ ̣ng, thành phầ n thuốc mô ̣t cách đơn giản và nhanh chóng.

66

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

Ơ

Sau một thời gian thực hiện luận văn. Chúng tôi đã thu được một số kết

N

KẾT LUẬN

N

H

quả như sau:

Đ

tích là 93:7.

N

G

- Detector UV-VIS: λ = 216 nm.

H Ư

- Tốc độ dòng: 1,3 mL/phút.

TR ẦN

- Thể tích bơm mẫu: 20 µL. - Nhiệt độ phân tích: 30oC.

B

Thời gian lưu của các chất lần lượt là: với PRC là 7,73 phút; CPM là

10 00

3,397 phút và PNH là 2,72 phút.

2. Đã xác định được PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte

Ó

A

theo phương pháp HPC với độ chính xác và độ thu hồi của PRC từ 99,5% đến

Í-

H

99,9%, CPM từ 98,8% đến 99,8% và PNH từ 99,3% đến 99,9%.

-L

3. Đã khảo sát, xác đinh ̣ điều kiện tối ưu cho phép đo quang đố i với các

ÁN

dung dich ̣ hỗn hơ ̣p PRC, CPM và PNH, gồm có:

ÀN

TO

- Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ 200-300 nm, PRC λmax = 244 nm, CPM λmax = 265 nm và PNH λmax = 275 nm trong môi trường

D

IỄ N

Đ

axit HCl 0,1M.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

- Pha động: Dung dịch đệm KH2PO4 0,018 M : axetonitril với tỷ lệ thể

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TP

- Cột sắc ký: sử dụng cột C18 (250mm x 4,6).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

hợp 3 thành phần PRC, CPM và PNH theo phương pháp HPLC.

U Y

1. Đã khảo sát được điều kiện tối ưu cho phép xác định đồng thời hỗn

- Khoảng thời gian tố i ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là từ 20 đến

90 phút sau khi pha và có thể tiế n hành thí nghiê ̣m ở nhiêṭ đô ̣ phòng.

- Khảo sát, xá c đi nh ̣ khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang của PRC là 1,0 đến 50,0 μg/mL, CPM là từ 1,0 đến 50,0 μg/mL và PNH là từ 1,0 đến 50,0 μg/mL.

67

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

4. Đã xác định đồng thời PRC, CPM và PNH trong hỗn hợp 2 và 3 cấu tử cho thấy có thể xác định được PRC trong hỗn hợp tương đối chính xác,

Ơ

N

phải sử dụng phương pháp thêm chuẩn để xác định hàm lươ ̣ng CPM và PNH

N

H

trong mẫu thuốc Decolgen forte.

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

6. Kết quả xác định PRC, CPM và PNH trong thuốc Decolgen forte

TO

ÁN

-L

Í-

H

Ó

A

10 00

B

H Ư

TR ẦN

chương trình lọc Kalman là như nhau.

N

G

theo phương pháp HPLC và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử sử dụng

D

IỄ N

Đ

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

100,5%

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

100,1%, của PNH là từ 98,1% đến 99,6% và của CPM là từ 97,8% đến

ÀN

http://daykemquynhon.ucoz.com

trong mẫu thuốc Decolgen forte với độ thu hồi của PRC từ 98,9% đến

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

5. Sử dụng phương pháp thêm chuẩn xác định PRC, CPM và PNH

68

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Ơ

1. Lê Ngọc Anh (2011), “Xác định đồng thời acetaminophen, loratadin và

N

Tiếng Việt:

H

dextromethorphan hydrobrommit trong thuốc viên nén hapacol-CF bằng

Đ

4. Trần Quốc Chính (2015), “Ðịnh lượng đồng thời paracetamol, codein

G

trong thuốc panadol extra và hapacol extra bằng phương pháp HPLC và

H Ư

N

phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử’’, Luận văn thạc sĩ khoa học hóa học, Trường đại học Sư phạm- Đại học Thái Nguyên.

TR ẦN

5. Trầ n Tứ Hiế u (2003), Phân tích trắ c quang phổ hấ p thụ UV-Vis, NXB ĐHQG Hà Nội.

10 00

B

6. Đỗ Thị Thu Hường (2011), “Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời paracetamol, dextromethorphan hydrobromid, loratadin trong chế phẩm

A

bằng HPLC’’, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội.

H

Ó

7. Phạm Luận (1997), Sổ tay pha chế hóa chất, Trường ĐHKHTN–Đại Học

Í-

Quốc Gia Hà Nội.

-L

8. Vũ Duy Long (2014), “Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin

ÁN

maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc TIFFY bằng phương pháp sắc

TO

ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

ÀN

(UV-Vis)’’, Luận văn thạc sĩ khoa học hóa học, Trường Đại học Sư phạm- Đại

D

IỄ N

Đ

học Thái Nguyên.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

3. Bộ Y tế (2012), Dược thư Việt Nam, NXB Y học.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q TP

2. Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

học Sư phạm- Đại học Thái Nguyên.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U Y

N

phương pháp trắc quang’’, Luận văn thạc sĩ khoa học hóa học, Trường đại

9. Nguyễn Thành Lộc (2013), “Xác định đồng thời acetaminophen và ibuprofen trong chế phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng caoHPLC’’, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh.

10. Đào Thị Lan Phương (2013), “Ðịnh lượng đồng thời dextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin trong thuốc viên methophan bằng

69

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

phương pháp trắc quang’’, Luận văn thạc sĩ khoa học hóa học, Trường Đại 11. Thái Duy Thìn, Thái Phan Quỳnh Như, Trần Việt Hùng, Võ Thu Hà,

N

học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên.

H

Ơ

Nguyễn Tuấn Anh, Hoàng Văn Đức (2005), “Nghiên cứu ứng dụng phương

ẠO

12. Nguyễn Thị Thuỳ Thương đã “Định lượng đồng thời paracetamol,

Đ

clopheninamin maleat trong thuốc Coldcmin và Pacemin bằng phương pháp

N

G

HPLC và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử”, Luận văn thạc sĩ khoa

H Ư

học hóa học, Trường đại học Sư phạm- Đại học Thái Nguyên.

TR ẦN

13.Mai Xuân Trường (2008), “ Nghiên cứu phương pháp hấp thụ quang phân tử xác định đồng thời các chất có phổ hấp thụ xen phủ nhau dựa trên thuật

B

toán lọc Kalman’’, Luận án Tiến sĩ hóa học, Đại học KHTN–ĐHQG Hà Nội.

10 00

14. Mai Xuân Trường (2014), “Xác định dextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin trong thuốc viên methophan thep

Ó

A

phương pháp phổ hấp thụ phân tử UV-Vis sử dụng thuật toán lọc Kalman”,

H

Tạp chí phân tích Hóa, Lý và Sinh học, Tập 19, Số 1/2014, tr. 32 - 37.

-L

Í-

Tiếng Anh:

ÁN

15 . Alagar Raja .M, Samatha .M David Banji , Rao.K.N.V , Sujitha , Vinod.

TO

J, Selva Kumar.D (2013), “Analytical method development and validation of acetaminophen, dextromethorphan hydrobromide and doxylamine succinate

D

IỄ N

Đ

ÀN

in soft gel capsule dosage form by using RP-HPLC’’, World journal of

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

TP

Dược Hà Nội.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

.Q

phần”, Báo cáo tổng kết đề tài nghiên cứu khoa học cấp bộ - Trường Đại học

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

http://daykemquynhon.ucoz.com

U Y

lượng các hoạt chất trong thành phần một số thuốc có từ 2 đến 5 thành

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao và đo quang phổ UV-Vis để định tính, định

pharmacy and pharmaceutical sciences Volume 2, Issue 6, pp. 5852-5862.

16. Fegade, J. D, Bhole, R. P, Shaikh I, Chaudhari, R. Y, Patil, V. R (2009), “Development and Validation of Reverse Phase High Performance Liquid Chromatographic Method for Simultaneous Estimation of Acetaminophen and Piroxicam in Tablet”, International Journal of PharmTech Research, Vol.1, No.2, pp. 184-190.

70

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon http://daykemquynhon.blogspot.com

17. Hatice Caglar, Saliha Ebru Buyuktuncel (2014), “HPLC method development and validation: Simultaneous

determination of active

N

ingredients in cough and cold pharmaceuticals’’, International Journal of

H

Ơ

Pharmacy and Pharmaceutical Sciences ISSN- 0975-1491 Vol 6, Issue 10,

for

simultaneous

determination

U Y

method

of

some

TP

RP-HPLC

.Q

rapid

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Đ

19. LoharV.R, ManeAruna, Chavanjaykar, PalledM.S, BhatA.R(2011),

N

G

“Simultaneous Estimation of Acetaminophen , Caffeine, Pseudoephedrine

H Ư

Hydrochloride, Dextromethorphan Hydrobromide and Loratadine in Tablet

TR ẦN

Dosage form by RP-HPLC’’, Asian Journal of Research in Chemistry Year 2011, Volume 4 Issue, pp. 1141-1147.

Phenylephrine

10 00

Acetaminophen,

B

20. P.G. Bhortake, R.S. Lokhande(2014), “Simultaneous Determination of Hydrochlorit

and

Dextromethorphan

Hydrobromide in Liquicap Dosage form by RP-HPLC’’, International Journal

Ó

A

of Pharma Research & Review, Sept 2014; 3(9), pp. 9-14.

H

21. Siladitya Behera, Subhajit Ghanty, Fahad Ahmad, Saayak Santra, and

Í-

Banerjee

(2012),

“UV-Visible

Spectrophotometric

Method

-L

Sritoma

ÁN

Development and Validation of Assay of Paracetamol Tablet Formulation, Analytical & Bioanalytical Techniques Behera, J Anal Bioanal Techniques 2012, pp. 3-6’’.

D

IỄ N

Đ

ÀN

22. Zahiad A.Chaudhary, Jignasha Derasari(2014), RP-HPLC method

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ẠO

Pharmaceutical Sciences ,vol. 5, pp. 234-241.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

decongestants and coygh-sedativex’’, International Journal of Pharmacy and

TO

http://daykemquynhon.ucoz.com

18. Hussen Al-akraa, Nazira Sarkis, Mohannad Allshehaby(2013), “ New

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

N

2014, pp. 421-428.

development and validation for simultaneous estiation of dextromethorphan hydrobromide and quinidine sulphate, International Bulletin of Drug Research, 4(7),pp. 66-83, 2014.

71

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

http://www.lrc.tnu.edu.vn www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial