Báo cáo thực hành sinh hóa (Nhóm 2 - 7 Bài)

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

MỤC LỤC

3

HOẠT ĐỘNG CỦA ENZYM

19

4

LIPID, ENZYM DỊCH VỊ VÀ DỊCH TỤY

23

U

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư TR ẦN B 10 00 A Ó -H Ý -L ÁN

31

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

29

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

XÉT NGHIỆM HÓA SINH NƯỚC TIỂU

26

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

MÁU

http://daykemquynhon.ucoz.com

.Q

Đ ẠO

XÉT NGHIỆM PROTEIN VÀ BILIRUBINE TRONG

TP

UREA MÁU

N

7

XÉT NGHIỆM GLUCOSE, CHOLESTEROL VÀ

G

6

Ơ

12

Y

ĐỊNH TÍNH PROTEIN VÀ ACI AMIN

N

2

PHÒNG THÍ NGHIỆM SINH HÓA

2

5

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

TRANG

H

1

NỘI DUNG CÁC KỸ THUẬT VÀ KỸ NĂNG CƠ BẢN TRONG

N

BÀI

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 1 CÁC KỸ THUẬT VÀ KỸ NĂNG CƠ BẢN TRONG PHÒNG THỰC TẬP SINH HÓA Mục tiêu học tập: Sau khi học xong bài này sinh viên phải: 2. Trình bày được các nguyên tắc cấp cứu cơ bản trong phòng thí nghiệm

Y

N

3. Sử dụng thành thạo một số dụng cụ cơ bản trong phòng xét nghiệm sinh hóa

H

Ơ

N

1. Trình bày được 8 nội qui trong phòng thí nghiệm sinh hóa

Sinh viên (SV) phải đến đúng giờ, vắng mặt phải có giấy xin phép. SV đến trễ quá

H Ư

-

SV không được tự ý đổi nhóm thực tập

-

Trước khi vào PTN, SV phải đọc kỹ lý thuyết và thực hành cho buổi thực tập

-

Trong khi thực tập SV phải:

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

10 phút không được vào phòng thí nghiệm (PTN).

G

-

10 00

B

▪ Mặc áo blouse có đeo bảng tên.

▪ Giữ gìn trật tự.

A

▪ Kiểm tra dụng cụ (thiếu, bể), báo cho cán bộ kỹ thuật trong 15 phút đầu.

-H

Ó

▪ Sử dụng dụng cụ của đúng nhóm mình.

▪ Không rời PTN trong lúc thực tập, không ra về trước giờ quy định.

-L

Ý

▪ Thực tập xong, SV rửa sạch sẽ dụng cụ, ký trả và do ̣n vệ sinh nơi thực tập.

ÁN

▪ Nếu dụng cụ bị mất mát hay hư bể, nhóm thực tập chịu trách nhiệm làm tờ tự

TO

kiểm (xử lý sẽ tùy trường hợp cụ thể).

IỄ N

Đ

ÀN

▪ Mỗi sinh viên thực tập làm bài tường trình kết quả học tập và nộp lại cuố i buổ i.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

1. NỘI QUI PHÒNG THỰC TẬP SINH HÓA

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

5. Hiểu nguyên tắc của phương pháp đo quang để áp dụng trong việc định lượng chất

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

4. Lấy và bảo quản được mẫu bệnh phẩm đúng quy định

▪ Kết quả kỳ thi thực tập được tính trên: điểm chuyên cần, thao tác thực tập, kết quả bài tường tình thực tập và điểm kiểm tra cuối kỳ thực tập.

D

▪ Không tự ý khởi đô ̣ng các thiế t bi,̣ máy móc trong PTN. ➢ Chú ý: Để đảm bảo an toàn cần nhớ: -

Không được đổ nước vào acid đậm đặc

-

Không được hút hóa chấ t bằng miệng.

1

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Không được tự sử du ̣ng thiế t bi, má y móc và hóa chấ t khi chưa được phép của cán

-

bộ phụ trách.

2. CÁC KỸ THUẬT CẤP CỨU CƠ BẢN TRONG PTN SINH HÓA Áp dụng tạm thời khi chuyển bệnh nhân đến bệnh viện hoặc cho các trường hợp nhẹ

Ơ

Phỏng da vật nóng

H

-

N

2.1. Phỏng ở da

Y

N

- Phỏng nhẹ: Dùng gạc tẩm dung dịch acid piric bão hòa đắp lên.

G

nước lớn hoặc để dưới vòi nước chảy nhẹ. Sau đó dùng hóa chấ t trung hòa.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

- Phỏng do acid: đắp vải mùng tẩm dung dịch Natri bicarbonate 8%.

- Phỏng do kiềm: đắp vải mùng tẩm dung dịch acid piric 3%. ❖

TR ẦN

➢ Phỏng ở mắt

Acid hay Brom: Tắm mắt tức khắc trong ly nước đầy hoặc 2 bàn tay

10 00

B

chụm lại vố c nước. Sau đó tắm mắt trong dung dịch Natri bicarbonate 1%. ❖

A

Chất kiềm vào mắt: Tắm mắt trong nước như trên, xong tắm tiếp trong

➢ Ngộ độc

Ý

Chất độc vào miệng:

-L

❖

-H

Ó

dung dịch acid boric 1%.

Acid: súc miệng nhiều lần bằng dung dịch Natri bicarbonate 1%.

❖

Đ

ÀN

TO

ÁN

-

Kiềm: súc miệng nhiều lần bằng dung dịch acid boric 1%.

-

Các hóa chất khác: súc miệng nhiều lần bằng nước lạnh.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Trước tiên là làm trôi hóa chất khỏi da bằng cách ngâm vết phỏng vào trong chậu

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Phỏng do hóa chất

Đ ẠO

-

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

bệnh viện. Tránh băng chặt và tránh dùng vaselin hay thuốc mỡ.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

- Phỏng nặng: Đắp nhẹ gạc tẩm dung dịch acid piric lên vết phỏng, sau đó đưa đến

Nhiễm hơi độc: Mang nạn nhân để nơi thoáng khí. Cho uống 1 ly café đen hay 1

IỄ N

-

D

muỗng súp siro cafein.

Hô hấp nhân tạo (nếu cần) trong lúc chuyển đến bệnh viện.

➢ Điện giật -

Trước hết ngắt cầu dao điện ở bất cứ nơi nào có cầu dao điện, nới rộng quần áo nạn nhân khi đem ra nơi thoáng.

2

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Hô hấp nhân tạo khi chuyển đến bệnh viện ( trường hợp nặng)

-

➢ Hỏa hoạn -

Ngọn lửa nhỏ: dập tắt bằng khăn, vải bố ướt hay cát.

Lửa bắt cháy quần áo: lăn vài vòng dưới đất sẽ dập tắt ngon lửa trong

-

Ơ

Tránh việc chạy hoảng loạn.

H

-

N

khi các bạn lấy vải bố trùm lên chỗ cháy và ép sát cho đến khi tắt lửa.

Y

N

Tóm lại: khi bị ngộ độc, phỏng … SV nên báo với nhân viên phụ trách PTN để được

Ống nghiệm thường được dùng làm phản ứng (nên phân biệt với ống ly tâm).

–

Khi đun ống trên ngọn lửa đèn cồn cần chú ý:

N

H Ư

▪

Ống nghiệm chỉ được chứa 1/3 ống nghiệm.

▪

Ống nghiệm được kẹp bằng gỗ hay kẹp kim loại và cầm nghiêng 1 góc 45 0.

Luôn lắc nhẹ ống nghiệm khi đun.

Miệng ống phải quay vào chỗ không có người (tránh bắn, phỏng người khác).

▪

Không đun trực tiếp ở đáy ống nghiệm mà đun ở nửa phần trên.

10 00

B

▪

A

3.2. Cốc có mỏ (Becher)

-H

Ó

- Cốc có mỏ dùng để đựng dung dịch trong PTN hay để đun, khi đun phải lót lưới cách nhiệt ở phía dưới, đun xong không để trực tiếp lên vật lạnh (vỡ).

-L

Ý

- Nhiều hình da ̣ng và kích thước (5 ml - 5 lít) khác nhau, chia vạch hoă ̣c không.

ÁN

3.3. Bình cầu (Ballon)

TO

- Có nhiều loại và dung tích khác nhau, nhưng đều làm bằng thủy tinh chịu nhiệt.

IỄ N

Đ

ÀN

- Đáy có thể tròn hay đáy bằng. Loại đáy tròn thường được dùng đun hoặc lắp vào

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

–

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Thường là ống hình trụ, làm bằng thủy tinh, thường được đặt trong giá để.

G

–

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

3.1. Ống nghiệm

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q TP

3. CÁCH SỬ DỤNG MỘT SỐ DỤNG CỤ THƯỜNG DÙNG

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

U

chăm sóc kịp thời.

các hệ thống chưng cất, đáy bằng dùng chiết tách các chất rắn ra khỏi chất lỏng.

- Loại bình có vạch để chỉ thể tích chính xác mà dung dịch chiếm được gọi là bình định mức. Bình định mức có nhiều thể tích khác nhau: 25ml, 50ml, 100ml..bình định mức được dùng để pha nồng độ theo thể tích của dung dịch.

3.4. Ống đong - Dùng để đong một lượng dịch gần đúng. Có dung tích từ 5ml đến 2 lít.

- Thường được làm bằng thủy tinh hay polythylen.

3 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

3.5. Ống hút (Pipette) - Pipette được làm bằng thủy tinh - Trên pipette thường có chia vạch để chỉ thể tích dung dịch chứa bên trong (vd: 5ml, 1ml) hoặc loại pipette thể tích (pipette volume) có bầu ở giữa để chỉ lượng dung

Ơ

N

dịch chứa bên trong.

N

H

- Khi sử dụng chú ý xem đầu pipette có vạch nhám hay không (vạch nhám có thể

Y

nhám, không màu hay được sơn bằng các màu vàng, đỏ, xanh…)

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

chỉnh thể tích muốn lấy, chú ý phải để ống hút ngang với tầm nhìn của mắt. ➢ Hiện nay, ngoài loại pipette thường có loại Micropipette (pipette tự động): Có thể dùng để hút chính xác một lượng dung dịch rất nhỏ (μl).

▪

Có thể điều chỉnh thể tích dung dịch cần lấy một cách nhanh chóng, dễ

TR ẦN

▪

3.6. Bình nón (Erlenmeyer)

10 00

B

dàng và ít sai số do thao tác.

Bình thủy tinh, hình nón, ùng để chứa dung dịch, hay dùng để chuẩn độ thể tích.

-

Có nhiều kích thước khác nhau: 50ml, 100ml, 200ml.

3.7. Ball cao su

-H

Ó

A

-

Thường được làm bằng cao su.

-

Dùng cùng với pipette thủy tinh để tránh hút bằng miệng.

ÁN

-L

Ý

-

IỄ N

Đ

ÀN

TO

3.8. Một số dụng cụ khác: ▪

Cọ ống nghiệm.

▪

Lưới tráng Amiant.

▪

Phễu lọc.

▪

Đũa khuấy bằng thủy tinh hay polyethylen.

▪

Kẹp ống nghiệm.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

- Khi sử dụng nhớ dùng pipette thẳng đứng, dùng ngón trỏ để, dùng ngón trỏ để điều

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

- Dùng ball cao su để hút (không hút bằng miệng).

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Đ ẠO

- Trước khi hút, kiểm tra lại thể tích và tên dung dịch cần hút.

TP

▪ Không vạch nhám: khi hút ta không thổi giọt cuối cùng.

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

D

U

▪ Có vạch nhám: khi hút ta thổi giọt cuối cùng.

4. CÁCH LẤY VÀ BẢO QUẢN MẪU BỆNH PHẨM 4.1. Chuẩn bị dụng cụ

4 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Mẫu máu lấy để phân tích các chỉ số hóa sinh thường là máu tĩnh mạch, có khi là máu động mạch hoặc mao mạch. Dụng cụ để lấy máu gồm: Bơm, kim tiêm (loại dùng một lần)

-

Dây thắt (bằng cao su mềm, độ đàn hồi tốt).

-

Ống đựng bệnh phẩm: ống nghiệm 5 - 10ml, nút phải sạch và khô.

-

Chất chống đông sử dụng: Heparin, Natri citrat, Natri oxalat. Sự lựa chọn chất

N

H

Ơ

N

-

Y

chống đông tùy thuộc vào mục đích xét nghiệm.

G

lấy máu để bệnh nhân yên tâm khi tiến hành lấy máu. Nhất là trong một số xét nghiệm như

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

phân tích các rối loạn thăng bằng acid base, tránh tăng thông khí, dẫn đến kiềm hô hấp, dẫn đến thông số định lượng sẽ bị sai lệch.

TR ẦN

4.3. Cách lấy máu

Lấy máu tinh ̃ mạch

4.3.1.

10 00

B

Thường lấy máu ở khủy tay. Bệnh nhân có thể nằm hoặc ngồi, tay duỗi thoải mái trên vật cứng. Dùng dây thắt ở khủy tay 2-3cm, tiêm kim vào tĩnh mạch, kéo nhẹ bơm tiêm ra

A

kiểm tra xem kim đã vào tĩnh mạch chưa (nếu có khi kéo bơm sẽ có máu). Bỏ dây thắt rồi

-H

Ó

mới lấy máu để tránh hiện tượng ứ máu, có thể làm tăng lượng CO 2, O2 và thay đổi thành

Ý

phần máu.

-L

4.3.2.

Lấy máu động mạch

ÁN

Lấy máu động mạch phức tạp, có thể gây nguy hiểm cho bệnh nhân, vì vậy cần những

TO

bác sĩ, kỹ thuật viên có kinh nghiệm. Khi lấy máu động mạch nên để máu tự động chảy

ÀN

vào bơm tiêm (do áp lực động mạch). Nên tráng bơm tiêm bằng heparin.

Đ IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Chuẩn bị lấy máu, bệnh nhân nghỉ khoảng 15 - 20 phút, giải thích cho bệnh nhân cách

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

ánh trung thực thông số thực của bệnh nhân, tránh các yếu tố có thể gây sai số.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Lấy máu vào lúc sáng sớm, đã nhịn đói 12 tiếng vì nồng độ các chất trong máu phản

4.3.3.

D

U

4.2. Chuẩn bị bệnh nhân

Lấy máu ở trẻ em

Thường lấy máu toàn phần hoặc máu mao mạch. Vị trí lấy máu thường là ở gót chân.

Dùng khăn ẩm và ấm lau vị trí lấy máu, sát khuẩn rồi dùng kim vô khuẩn để lấy máu. Bỏ giọt máu đầu tiên, những giọt tiếp theo nên hứng vào ống thủy tinh chứa heparin.

Máu xét nghiệm sinh hóa gồm ba loại: Máu toàn phần, huyết tương, huyết thanh. Máu sau khi lấy ra khỏi cơ thể sẽ bị đông lại do trong thành phần có ion Ca2+. Loại bỏ ion Ca2+ 5

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

thì máu sẽ không đông. Các chất loại bỏ ion Ca2+ gọi là chất chống đông máu. Có nhiều loại chất chống đông như EDTA (muối ethylen diamin tetraacetic acid), kali oxalat, natri citrat. EDTA thường được dùng cho các xét nghiệm huyết học (15mg/ml). Kali oxalat ngày

Ơ

chống đông (dung dịch 3.28%). Heparin (0,01-0,1ml/ml máu) có chứa chất kháng thrombin

N

nay y học ít sử dụng, natri citrat thường dùng cho các xét nghiệm phân tích các yếu tố

H

và kháng các yếu tố Xa. Heparin thường được sủ dụng khi làm các xét nghiệm sinh hóa

Y

N

máu như: phân tích khí máu, phân tích hóa sinh, lâm sàng và cấp cứu.

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

là huyết tương có chứa các yếu tố đông máu. Khi máu không chứa chất đông cục máu đông

Cách lấy huyết thanh

G

4.3.4.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Lấy máu vào ống nghiệm, đậy ống nghiệm bằng nút cao su hoặc bông mỡ (bông gòn không thấm nước) rồi để ở nhiệt độ phòng trong vài giờ. Nếu ta cần có huyết thanh nhanh

TR ẦN

để phân tích thì có thể cầm ống nghiệm trong lòng bàn tay hoặc có thể để ống nghiệm trong tủ ấm để cục huyết thanh hình thành một cách tự nhiên, tiết ra huyết thanh nhiều nhất. Khi

10 00

B

cục máu đã đông, dùng que thủy tinh nhỏ sợi bạch kim nhẹ nhàng tách phần cục huyết dính vào thành ống. Cục huyết sẽ co lại và nhanh tiết ra huyết thanh. Gạn lấy huyết thanh trong

A

hoặc dùng pipette để hút huyết thanh. Nếu huyết thanh lẫn hồng cầu, đem ly tâm lại (300

-H

Ó

vòng/ phút trong 5 phút) lấy phần huyết thanh. Một số xét nghiệm cần lấy huyết thanh ngay (định lượng kali, natri) thì li tâm khi cục máu đông hình thành và tách cục huyết khỏi dính

-L

Ý

vào thành ống, thời gian không nên quá 1 giờ.

Cách lấy máu toàn phần hay huyết tương

ÁN

4.3.5.

TO

Xét nghiệm máu toàn phần hay huyết tương để tránh hoặc loại trừ sai số cso thể gặp do hoại huyết và ngăn ngừa các chất khuếch tán từ hồng cầu vào huyết tương.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

thanh.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

lại và hình thành theo cơ chế đông máu tự nhiên. Ly tâm lấy phần dịch ở trên là huyết

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

Máu có chứa chất chống đông gọi là máu toàn phần, ly tâm lấy phần dịch ở trên gọi

lắc đều liên tục để tránh máu đông lại. Ly tâm lấy phần dịch ở trên.

D

IỄ N

Đ

ÀN

Thường chất chống đông được cho sẵn vào ống đựng mẫu máu, khi cho máu vào cần

4.3.6.

Bảo quản mẫu máu

Thời gian bảo quản cho phép với các mẫu huyết thanh và huyết tương khoảng 4h ở nhiệt độ phòng và trên 1-2 ngày ở nhiệt độ 2 – 80C. Muốn giữ lại mẫu lâu hơn thì cần để ở 6 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

nhiệt độ 00C. Đối với mẫu để định lượng enzym cần tuân theo các quy địnhcụ thể của phương pháp định lượng. Thực tế có những chất tương đối bền vững ở nhiệt độ 200C trong khoảng thời gian dài hơn như Cl, K, Na, Mg, Fe, hemoglobin, acid uric, cholesteron, tryglycerid, phosphotid.

Ơ

Chuẩn bị dụng cụ

H

➢

N

5. LẤY NƯỚC TIỂU

Y

N

Bình chứa nước tiểu, thường dùng bình thủy tinh có chia độ theo ml, lít…hoặc ống

G

đầu (dễ có tạp nhiễm bởi dịch nhầy, tế bào bong, vi khuẩn). Một số trường hợp nên lấy vào

N H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

thời gian thích hợp như:

o Viêm tiết niệu thì nên lấy nước tiểu lúc ngủ dậy.

TR ẦN

o Nghi ngờ glucose niệu thì lấy nước tiểu sau bữa ăn 2 giờ. o Urobilinogen dễ phát hiện khoảng 14-16 giờ.

10 00

B

- Với các xét nghiệm định lượng:

Thường thu góp nước tiểu 24h. Thường cho thêm vào mỗi bình vài giọt thymol trong

A

rượu hoặc 5ml xyanua 4%. Đến giờ ấn định cho bệnh nhân tiể u hết, bỏ phần nước tiểu đó.

-H

Ó

Trong 24 giờ tiếp theo thu tất cả nước tiểu bệnh nhân vào 1 bình sạch, chú ý lấ y cả phần nước tiểu khi bệnh nhân đi đại tiện. Ngày hôm sau vào giờ thứ 24, cho bệnh nhân tiể u lần

-L

Ý

cuối cùng vào bình. Đo thể tích nước tiểu 24h và lấy 0.5 lít gửi đến phòng thí nghiệm kèm

ÁN

theo các thông tin sau: thể tích nước tiểu 24h, tên, tuổi, giới tính, chế độ ăn, khối lượng

TO

nước uống, những thuốc đã dùng, trạng thái nghỉ ngơi hay hoạt động của bệnh nhân, chẩn đoán.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Dùng nước tiểu bất kỳ thời gian nào trong ngày, lấy nước tiểu giữa dòng, bỏ phần

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

- Với các xét nghiệm định tính thông thường:

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Cách lấy nước tiểu

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

➢

U

nghiệm thủy tinh 10ml-15ml, được rửa sạch sấy khô và có nút.

D

IỄ N

Đ

ÀN

- Bảo quản mẫu nước tiểu: Khi phân tích nước tiểu nên dùng nước tiểu tươi, để ở nhiệt độ phòng. Nếu chưa phân

tích mấu ngay có thể để mẫu ở 2 – 80C trong vòng 3 ngày, đối với mục đích phân tích hormon hoặc nồng độ thuốc, ở điều kiện không bị phân hủy. Nếu cần giữ mẫu hơn 3 ngày thì để mẫu dưới 00C. Nói chung không dùng hóa chất để bảo quản.

6. LẤY VÀ BẢO QUẢN MỘT SỐ DỊCH KHÁC 6.1. Lấy dịch vị 7

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Mục đích là để chẩn đoán các bệnh trong dạ dày, phát hiện vi khuẩn gây bệnh. Dịch vị lấy sau khi bệnh nhân nhịn đói 12 giờ. Khi bị hẹp môn vị hay hang vị thì phải rửa dạ dày từ chiều hôm trước. Các thuốc ảnh hưởng đến sự bài tiết dịch vị phải được ngừng sử dụng

Ơ

Einhorn. Dịch vị để chẩn đoán tế bào, nghiên cứu tác dụng của HCl, pepsin trong dịch vị.

N

ít nhất 24 giờ trước khi làm các nghiệm pháp. Trước đây, dịch vị được lấy bằng ống hút

H

Ngày nay chẩn đoán bệnh dạ dày thường được dùng kỹ thuật nội soi. Kỹ thuật này cho

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

6.2. Lấy dịch não tủy

G

chấn. Mỗi thương tổn dù nhỏ của não tủy đều ảnh hưởng đến tính chất của dịch não tủy.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Phân tích những biến đối đó có thể chẩn doánđược một số bệnh về thần kinh, theo dõi sự tiến triển của bệnh. Lấy dịch não tủy phức tạp đòi hỏi bác sĩ có kinh nghiệm. Khi chọc dịch

TR ẦN

não tủy nên hứng bệnh phẩm vào hai ống nghiệm có nút cao su. Trong tường hợp xuất huyết màng não hai ống đều lẫn máu. Trong tường hợp dịch não tủy có lẫn máu nhưng do

10 00

B

chọc phải mạch máu thì chỉ ở 1 có máu, ống hai không có. Nên tiến hành phân tích mẫu ngay.

A

6.3. Cách lấy sữa

Ó

Cần lấy 3 mẫu sữa với thời gian khác nhau.

-H

• Mẫu đầu đươc lấy vào buổi sáng sớm trước lúc cho con bú bữa đầu trong ngày.

-L

Ý

• Mẫu thứ hai được lấy lúc đang cho con bú giữa trưa.

ÁN

• Mẫu thứ ba lấy vào buổi tối sau khi cho bú xong bữa tối.

TO

Khi lấy mẫu nên ghi tuổi của sữa (như lấy sữa vào tháng thứ mấy). Có thể lấy mẫu

ÀN

sữa cùng một lúc: mẫu đầu lấy trước khi cho bú, mẫu thứ hai khi đang cho bú, mẫu thứ ba

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

ống nội tủy, naõ thất, bảo vệ cho trung ương thần kinh đối với các biến đổi về áp lực, sang

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

Là lớp dịch trong các khoang dưới màng nhện bao bọc xung quanh não tủy, ở trong

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

lấy mẫu niêm mạc dạ dày để phân tích. Mẫu dịch vị nên phân tích sau khi lấy.

Y

N

phép bác sĩ quan sát niêm mạc dạ dày, tình trạng bài tiết dịch vị và lấy dịch vị cũng như

D

IỄ N

Đ

lấy sau khi cho bú, khối lượng 3 lần bằng nhau.

Bảo quản sữa có thể để ở nhiệt độ 0-40C trong 24 giờ.

7. NGUYÊN TẮC PHƯƠNG PHÁP ĐO QUANG 7.1. Định luật cơ bản về sự hấp thu ánh sáng: Định luật Beer – Lambert Chiếu 1 chùm tia đơn sắc có bước sóng λ, cường độ Io vào 1 dung dịch màu đồng nhất có nồng độ C, chiều dày lớp dung dịch mà ánh sáng đi qua là 1. Khi đi qua dung dịch,

8 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

một phần ánh sáng bị hấp thu (Ih), một phần bị phản xạ (Ip), phần còn lại I đi qua dung dịch: Io = Ih + Ip + I

Ơ

Trên thực nghiệm, Bongueur và Lambert đã chứng minh và nêu ra định luật “Những

N

Vì Ip rấ t nhỏ nên: Io = Ih + I

H

lớp chất dày đồng nhất trong điều kiện khác nhau, luôn luôn hấp thu một tỉ lệ như nhau

Y

N

của chùm tia rọi vào những lớp chất đó”.

Io

G

Với k = hệ số hấp thu, phụ thuộc vào bản chất của chất màu và dung môi, bước sóng

H Ư

N

của chùm tia và nhiệt độ.

I

TR ẦN

= T (Transmittance) = Độ truyền quang, độ thấu quang ( %) Io I

10 00

B

= D (OD = Densite optique) = Mật độ quang của dung dịch

Log Io

D = klC

A

D = Log 100%T

Ý

-H

Ó

Chú ý: Định luật Beer – Lambert chỉ đúng với chùm tia đơn sắc.

-L

Theo công thức trên, trong cùng một điều kiện, khi k và l không đổi, ta nhận thấy mật

ÁN

độ quang tỷ lệ thuận với nồng độ dung dịch. Do đó, nếu so sánh nồng độ chưa biết của một

IỄ N

Đ

ÀN

TO

dung dịch với nồng độ mẫu, ta có: D = klC Do = klCo

D

C

C C =

=

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

= klC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

log

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

hay

Io

http://daykemquynhon.ucoz.com

D

I = 10-klC

TP

I

Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

sau:

.Q

U

Beer – Lambert mô tả sự liên hệ giữa các yếu tố trên bằng một định luật biểu diễn

Co

Do Do Co Nếu biết được mật độ quang của ống đo (thử - D), mật đọ quang ống mẫu (chuẩ n -

Do) và nồng độ của ống mẫu (chuẩ n - Co), ta tính được nồng độ C của ống muốn đo.

7.2. Phương pháp định lượng đo quang: Dựa trên cơ sở mật độ đo quang của dung dịch của một chất phụ thuộc vào nồng độ của chất đó, ta dùng máy quang phổ kế (photometre) để đo mật độ quang của chất mà ta cần xác định nồng độ.

9

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Chuyển chất X cần xác định nồng độ, không màu thành hợp chất có màu đặc biệt RX bằng thuốc thử thích hợp:

R+X

RX

(X không màu, muốn đo; RX có màu) Đặc điểm: ánh sáng sau khi đi qua dung dịch, được chiếu lên tế bào quang điện để

Ơ

N

chuyển thành dòng điện mà cường độ của nó đo nhờ 1 điện kế nhạy.

H

Trong các phép định lượng đo quang, người ta thường đo OD (mật độ quang) của các

Y

N

dung dịch màu đối chiếu với ống trắng (ống chứng). Ống trắng là ống chứa thuốc thử như

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

ống đo, trừ chất ta cấn xác định.

10 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 2 ĐỊNH TÍNH PROTEIN VÀ ACIDE AMIN MUC ̣ TIÊU

Ơ

2. Thực hiện một số phản ứng hóa học dựa trên các tính chất hóa học và vật lý của acid

N

1. Trình bày được các nguyên tắc của phương pháp định tính protein và acid amin.

N

H

amin, peptid, protein đã học.

.Q TP

NỘI DUNG: gồm 7 phản ứng 2. Phản ứng Biuret

N

G

3. Phản ứng tủa protein bởi nhiệt với môi trường acid yếu

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

4. Phản ứng tủa protein bởi acid mạnh và không đun nóng

TR ẦN

5. Tìm protein trong nước tiểu bằng 2 phương pháp: đông kết và Heller.

THÍ NGHIỆM 1: Phản ứng Ninhydrin

10 00

B

1. Nguyên tắc

Dung dịch protein, peptid hoặc acid amin khi đun nóng với Ninhydrin 0,2 % sẽ ta ̣o

A

thành phức chấ t có màu xanh tím.

-H

Peptid

t0

+ Ninhydrin 0,2%

Xanh tím

Ý

Dung dịch

Ó

Protid

-L

Acid amin

ÁN

Ninhydrin là một chất oxy hóa, tạo nên phản ứng khử carboxyl oxy hóa của acid amin

TO

với H2O, ta ̣o thành CO2, NH3 và một aldehyd ngắn đi một carbon so với acid amin ban đầ u

ÀN

và ninhydrin bị khử. Sau đó, Ninhydrin bị khử tiế p tu ̣c tác dụng lại với NH3 vừa phóng

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

1. Phản ứng Ninhydrin

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

4. Nhận định, biện luận và giải thích kết quả.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

3. Áp dụng tìm protein trong nước tiể u bằng phương pháp acid Sulfosalicylic 3%.

Đ

thích và kết hợp với một phân tử Ninhydrin thứ hai, tạo thành sản phẩm ngưng kết có màu

D

IỄ N

xanh tím. Đây là phản ứng chung cho các protid và acid amin tự do. Phản ứng này cho phép nhận dạng tất cả các acid amin có nhóm -NH2 và -COOH tự do. Ngoại trừ prolin, có nhóm -OH tác dụng với Ninhydrin cho màu vàng.

2. Tiến hành 11

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Dung dịch

Ống 1

Ống 2

1 ml

-

-

1 ml

1 ml

1 ml

Nước cấ t DD lòng trắng trứng

Ơ

N

Ninhydrin 0,2%

H

Đun sôi - quan sát, nhận xét và giải thích kết quả

Ý

aldehyd và ninhydrin bị khủ. Sau đó, ninhydrin bị khử ngưng tụ với ninhydrin không bị

-L

khử tạo nên sản phẩm màu xanh tím

ÁN

Thí nghiê ̣m 2: Phản ứng Biuret (xác nhận các liên kết peptid)

TO

1. Nguyên tắc:

ÀN

Protein tác dụng với Cu2+ trong môi trường kiềm tạo phản ứng màu tím hồng, phản

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

-H

Ó

Ninhydrin tác dụng với acid amin trong điều kiện đun nóng tạo thành CO 2, NH3,

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

A

4. Biện luận

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

- Ống 2 màu xanh tím.

10 00

- Ống 1 không có hiện tượng

2

B

1

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

3. Kết quả

D

IỄ N

Đ

ứng xảy ra do các liên kết peptid.

Sở dĩ gọi phản ứng Biuret (có nhóm CO-NH, giống như một liên kết peptid) cũng

cho phản ứng tương tự, tạo phức hợp có màu giống như protein.

Sự tạo thành biuret:

12 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

NH2

+

C

O

C

O

NH2

NH2

NH

C

O

O

NH2

NH2

+ NH3

C

Ơ

Ure

N

NH2

10 00

Nước cấ t

1 ml

-

-

1 ml

0.5 ml

0.5 ml

3 gio ̣t

3 gio ̣t

Ó

A

DD lòng trắng trứng NaOH 40 %

Ý

-H

DD CuSO4 1 %

Ống 2

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

3. Kết quả

-L

Lắ c đề u - quan sát màu, nhận xét và giải thích kết quả

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ống 1

B

Dung dịch

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

2. Tiến hành: Cho vào ống nghiệm

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Biure

1

2

- Ống 1: màu xanh nhạt

13 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

- Ống 2: màu tím hồng.

4. Biện Luận - Ống 1: có màu xanh nhạt là màu của Cu(OH)2.

- Ống 2: dung dịch có màu tím hồng là do dung dịch có protein tác dụng với Cu 2+

Ơ

N

trong môi trường kiềm tạo phức chất màu tím hồng.

Y

N

1. Nguyên tắc:

H

Thí nghiê ̣m 3: Phản ứng tủa protein bởi nhiê ̣t và môi trường acid yế u

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

mang lớp áo nước (hydrat hóa). Nhờ tích điện cùng dấu nên các tiểu phân protein đẩy nhau

H Ư

N

a. Làm mất điện tích của protein -

Thêm chất điện giải: NaCl, (NH4)2SO4….

-

Đưa pH của môi trường chứa protein về pHi đẳng điện của protein.

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

vào nhau thành những hạt to và kết tủa.

b. Làm mất lớp áo nước của protein

Thêm chất khử nước: alcohol, aceton, (NH4)2SO4 ...

-

Biến tính protein: đun sôi, acid, kiềm mạnh hoặc muối kim loại nặng.

10 00

B

-

A

2. Thuốc thử:

Dung dich ̣ Acid acetic 1 % và 10 %

-

Dung dich ̣ NaCl bão hòa

-

Dung dich ̣ NaOH 10 %

-L

Ý

-H

Ó

-

ÁN

3. Tiến hành: cho vào 5 ống nghiệm: 2

3

4

5

1ml

1 ml

1ml

1ml

1ml

Acid acetic 1%

-

2 giọt

-

-

-

Acid acetic 10%

-

-

5 giọt

5 giọt

-

NaCl bão hòa

-

-

-

2 giọt

-

NaOH 10%

-

-

-

-

2 giọt

TO

1

ÀN Đ IỄ N

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Nếu làm mất 2 yếu tố trên thì các tiểu phân protein do chuyển động sẽ gặp nhau, dính

Long trắng trứng đã thẩm tích

D

Đ ẠO

và nhờ có lớp áo nước nên chúng ngăn cách nhau, vì vậy dung dịch keo được bền vững.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

Protein hòa tan trong nước hình thành dung dịch keo, protein tích điện cùng dấu và

Đun sôi cách thủy 900 trong 5 phút Nhận xét, ghi kết quả từng ống và giải thích hiê ̣n tươ ̣ng.

14 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

4. Kế t quả:

2

3

4

5

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

cùng dấu và tạo tủa

H Ư

- Ống 2: mất lớp áo nước của protein tích điện cùng dấu và tạo tủa

TR ẦN

- Ống 3: acid acetid không đủ làm mất lớp áo nước của protein tích điện cùng dấu và không tạo tủa

B

- Ống 4: vừa mất điện tích vừa mất lớp áo nước nên tạo tủa nhiều

10 00

- Ống 5: không tủa vì lượng kiềm không đủ mạnh làm biến tính protein và lớp áo nước của protein

Ó

A

Thí nghiê ̣m 4: Phản ứng tủa bởi acid mạnh và không đun nóng

-H

1. Nguyên tắc

-L

2. Hóa chấ t

Ý

Acid vô cơ mạnh và acid hữu cơ có tác dụng làm biến tính và kết tủa đại đa số protein.

Acid hữu cơ:

- HNO3 - H2SO4

- Acid trichloracetic - Acid sulfosalicylic

- HCl

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

Acid vô cơ:

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- Ống 1: bị nhiệt đun làm biến tính protein, mất lớp áo nước của protein tích điện

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ ẠO

5. Biện luận:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

1

3. Tiến hành 1 Lòng trắng trứng

2

3

4

2 ml

2 ml

2 ml

15 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Để nghiêng ống nghiệm 450, nhỏ từ từ các acid đậm đặc lên thành ống nghiệm HCl đâ ̣m đă ̣c

3 gio ̣t

HNO3 đâ ̣m đă ̣c

3 gio ̣t

H2SO4 đâ ̣m đă ̣c

3 gio ̣t Lắc đề u

N

H

Để yên

Y

Quan sát hiện tượng – Giải thích

N Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

-H

5. Biện luận

Ý

- Ống 1: tạo tủa trắng ít.

-L

- Ống 2: tạo tủa trắng ít.

ÁN

- Ống 3: tạo tủa trắng nhiều.

ÀN

TO

- Ống 4: tạo tủa trắng đục.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

4

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

3

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

2

G

1

Đ ẠO

TP

.Q

U

4. Kết quả Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

N

1 ml

Ơ

Acid sulfosalicylic 3%

Thí nghiê ̣m 5: Tìm protein trong nước tiểu

D

IỄ N

Đ

1. Phương pháp đông kết: tủa protein bằng acid yếu + đun nóng.

- Cho vào ống nghiệm 2 ml nước tiể u, đun sôi trong 2 phút - Sau đó thêm vào khoảng 3 - 5 giọt acid acetic 1%.

- Nếu trong nước tiểu có protein thấy trầm hiện (tủa).

2. Phương pháp Heller: tủa protein bằng acid mạnh và không đun - Cho vào ống nghiệm 2 ml nước tiểu.

16 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

- Nghiêng ống nghiệm và cho vào từ từ 1 ml HNO3 đậm đặc.

- Quan sát ở mặt phân cách 2 chất lỏng thấy protein kết tủa như một đám mây mờ.

Chú ý: Nếu nước tiể u quá cô đặc hoặc có acid uric cũng cho kết quả như trên (dương tính giả). Trường hợp này có thể tránh được bằng cách pha loãng nước tiể u 3 - 4 lần.

2

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

- Ống 2: âm tính

A

- Ống 1: dương tính

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

1

N

H

Ơ

N

3. Kết quả:

17 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 3 HOẠT ĐỘNG CỦA ENZYM S.G.O.T (Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase).

N

S.G.P.T (Serum Glutamic Pyruvic Transaminase).

H

Ơ

Được tổng hợp từ gan và tim, thuộc nhóm phân hoá tố chuyển nhóm amin.

N

Xét nghiệm GOT và GPT giúp ta chẩn đoán, theo dõi các bệnh về gan, tim

GOT

L . Glutamat + Oxaloacetat

Oxaloacetat + NADH + H+

MDH

L . Malat + NAD+

α . Cetoglutarat + L . Alanin

N

H Ư

TR ẦN

xảy ra theo phản ứng sau đây:

GPT

GPT

Pyruvat + NADH + H+

L . Lactat + NAD+

10 00

MDH

L . Glutamat + Pyruvat

B

http://daykemquynhon.ucoz.com

G

α - cetoglutarat + L . Aspartat

A

2. MẪU THỬ

-H

Ó

Huyết thanh hay huyết tương (kháng đông Heparin).

Ý

3. THUỐC THỬ: Dạng KIT pha sẵn, gồm các hoá chất sau đây: -

α - cetoglutarat

TO

▪

L. Aspartate (GOT) hoặc L. Alanin (GPT)

ÁN

▪

-L

Reagent 1: Tris buffer pH 7.5

-

Đ

ÀN

Reagent 2: Enzym/ Coenzym

▪

Malat dehydrogenase/ NADH,H+

▪

Lactat dehydrogenase/ NADH,H+

4. KỸ THUẬT

D

IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

xảy ra theo phản ứng sau đây:

GOT

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

1. NGUYÊN TẮC

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

U

Y

Phương pháp ENZYMATIC (U.V Test)

U Reagent 1

800 µl

Reagent 2

200 µl

18 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Huyết thanh (hay huyết tương)

100 µl

Trộn đều – Đọc Abs sau 1 phút.

Kế tiếp đọc Abs sau 1 phút – 2 phút – 3 phút (sau đó lấy ∆Abs tính kq).

UI/L < 31 UI/L

B

Nữ

-

10 00

- Kết quả thí nghiệm: GOT: 18 UI/L; GPT: 27 UI/L

GPT:

Nam < 40

UI/L Nữ

< 31 UI/L

Bình thường

Ý

( PP. WOHLGEMUTH ) :

-L

1. Nguyên tắc

-H

Ó

A

XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘNG AMYLASE TRONG NƯỚC TIỂU

ÁN

Dùng phương pháp pha loãng dần nước tiểu để tìm lượng enzym tối thiểu phân hủy hết 2ml dd hồ tinh bột 0,1% ở 370C trong 30 phút.

ÀN

TO

Kiểm soát độ phân hủy của hồ tinh bột bằng iod. Tính hoạt độ của Amylase theo đơn vị Wholgemuth.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Nam < 37

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

GOT:

TR ẦN

-

H Ư

- Tri số ̣ biǹ h thường

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

http://daykemquynhon.ucoz.com

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

5. KẾT QUẢ

D

IỄ N

Đ

Định nghĩa 1 đơn vị Wholgemuth: là lượng Amylase có khả năng thủy phân 1ml dd hồ tinh bột 1%o ở nhiệt độ 37oC trong 30 phút.

2. Thuốc thử : - Dung dịch NaCl 9%.

- Dung dịch hồ tinh bột 1%o : Cân chính xác 1g tinh bột, hòa tan trong nước sôi cho tan.

Thêm nước cất vừa đủ 1 lít , bảo quản với acid benzoic. Để trong tủ lạnh.

- Dung dịch iod N/50.

19

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

3. Tiến hành : Lấy 8 ống nghiệm đánh số từ 1 đến 8 : - Cho vào mỗi ống nghiệm 1ml dd NaCl 9%

Ơ

N

- Cho vào ống 1 : 1ml nước tiểu. Tráng ống hút bằng cách hút lên hút xuống 1- 2 lần.

Trộn đều.

N

H

- Hút 1ml của ống 1 cho sang ống 2. Cũng tráng và trộn đều như trên.

Ống 6

1/2

1/4

1/8

1/16

1/32

1/64

Tỉlệnướctiểu

Ống 7 1/128

Ống 8 0

N

G

- Thêm nhanh vào mỗi ống đúng 2ml hồ tinh bột 1%o, lắc đều. Để cách thuỷ 37oC trong 30 phút.

TR ẦN

- Quan sát màu của các ống ở ngay thời điểm trên.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

- Lấy ra, cho nhanh vào mỗi ống 1 giọt dd iod N/50. Lắc đều.

+ Các ống nào mà tinh bột bị thuỷ phân hoàn toàn thành maltose, glucose thì không màu.

10 00

B

+Các ống tinh bột bị thuỷ phân dở dang thì dextrin có màu trung gian. + Ống còn tinh bột có máu xanh dương.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

4. Kết quả :

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ống 5

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Ống 4

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ống 3

.Q

Ống 2

TP

Ống 1

Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

U

Y

- Hút 1ml của ống 2 sang ống 3. Tiếp tục làm như vậy đến ống 7. Đến ống số 7 hút ra 1 ml bỏ đi. Như vậy nước tiểu ở các ống theo thứ tự đã được phân pha loãng theo tỉ lệ :

- Chọn ống để biểu thị kết quả : Chọn ống có màu trung gian hay không màu ngay trước ống có màu xanh dương trước hiện ra.

Thí dụ : ống 5 là ống đầu tiên có màu xanh. Ống biểu diễn kết quả là ống số 4. Ống 4 có chứa 1/16 ml nước tiểu 1/16 ml nước tiểu có khả năng thuỷ phân 2ml dd hồ tinh bột 1%. Vậy 1 ml nước tiểu sẽ thuỷ phân 2 x 16 = 32 ml hồ tinh bột.

20

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Nước tiểu có hoạt độ Amylase là 32 đợn vị Wohlgemuth.

Hoạt độ Amylase theo đơn vị Wohlgemuth = Độ pha loãng nước tiểu

N

của ống biểu diễn kết quả x2

Ơ

5. Biện luận :

N

H

* Bình thường : từ 16 đến 32 đơn vị.

10 00

B

TR ẦN

Trong viêm tuỵ cấp, amylase niệu có thể tăng quá 200 đv, đôi khi lên tới 4.0005.000 đv. Trị số tối đa vào lúc 12 - 24 giờ, sau khi xuất hiện những triệu chứng đầu và trở lại bình thường sau 2- 3 ngày. Vì trị số amylase trong nước tiểu rất hay thay đổi, nên nếu chỉ định lượng trong mẩu nước tiểu thì kết quả sẽ ít chính xác hơn khi kết hợp với amylase huyết thanh.

A

Trường hợp có suy thận, định lượng amylase (huyết thanh và nước tiểu ) đều không có giá trị chuẩn đoán.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

Amylase giảm có ý nghĩa rất ít.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Amylase huyết thanh có nguồn gốc chính từ các tuyến tuỵ và tuyến nước bọt, được lọc ở cầu thận và bài tiết qua nước tiểu. Vì vậy, hoạt độ amylase trong nước tiểu cũng có phản ánh hoạt độ amylase huyết thanh.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

Amylase là một nhóm enzym thuỷ phân tinh bột hoặc glycogen, cắt đứt liên kết glycosid 1-4, tạo thành các sản phẩm trung gian gọi là dextrin và cuối cùng là maltose, glucose. Dextrin này cũng có màu sắc khác nhau khi tác dụng với iod.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

( Có thể thay đổi từ 8 – 64 đơn vị Woglgemuth )

21 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 4 LIPID, ENZYM DỊCH VỊ VÀ DỊCH TỤY A. ĐẠI CƯƠNG

Ơ

cực, dễ tan trong các dung môi hữu cơ (không phân cực) như : Cloroform, methanol, ether,

N

Lipid thuộc nhóm các hợp chất không tan hoặc ít tan trong nước & dung môi phân

N

H

benzen…

Lipid đóng vai trò quan trọng trong việc tham gia cấu tạo các mô động vật, cung

N

G

cấp năng lượng cho cơ thể.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

Lipid thức ăn đưa vào cơ thể (chủ yếu là Triglycerid) nhờ các men tiêu hóa: Lipase

TR ẦN

& các men khác được thủy phân để tạo thành những chất: acid béo, glycerol, sphingozin, cholesterol cùng 1 số sản phẩm thủy phân không hoàn thành như mono & diglycerid.

Những sản phẩm trên lại được tổng hợp lại thành Lipid tại tế bào ruột vào hệ tuần hoàn,

10 00

B

phần lớn đi theo đường bạch huyết dưới dạng kết hợp Lipoprotein – chất này ở máu, dưới tác dụng của men Lippoprotein lipase lại được phân hủy thành các sản phẩm glycerol, acid

Ó

A

béo… Acid béo được thoái hóa theo con đường  oxy hóa tạo thành những mẫu acetyl

-H

coenzym A. Quá trình này xảy ra chủ yếu ở gan. Một phần acetyl coenzym A vào chu trình

Ý

Krebs tạo thành CO2 & H2O. Trong điều kiện rối loạn chuyển hóa, acetyl coezym A cũng

-L

có thể tích tụ lại để tạo thành những sản phẩm acid aceto acetic, acid  hydroxy butyric &

ÁN

aceton; 3 chất này có tên chung là Cetonic (thể Ceton). Sự gia tăng của các chất Ceton

TO

trong máu gây hiện tượng nhiễm acid đồng thời kéo theo sự bài xuất các chất này qua nước

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

xà phòng & glycerol (gọi là sự xà phòng hóa).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Thủy phân chất béo trong môi trường kiềm mạnh như: NaOH, KOH đun nóng cho

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

tương hóa như: xà phòng, muối mật, protein… sẽ được nhũ tương bền.

Y

Nhũ tương dầu trong nước là một nhũ tương không bền, khi cho thêm 1 chất nhũ

ÀN

tiểu.

THÍ NGHIỆM 1: KHẢO SÁT TÍNH HÒA TAN

Cho vào 2 ống nghiệm:

D

IỄ N

Đ

B. CÁC THÍ NGHIỆM: 4 thí nhiệm

Dầu ăn Nước cất

Ống 1

Ống 2

5 giọt

5 giọt

1ml

22 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Ethar (hay alcol)

1ml

Aceton Lắc kỹ

10 00

B

- Ống 2: Dầu tan trong các dung môi hữu cơ tạo thành nhũ tương bền.

THÍ NGHIỆM 2: SỰ NHŨ TƯƠNG HÓA

A

Nhũ tương hóa trong nước là 1 nhũ tương không bền, khi cho thêm 1 chất làm nhũ

-H

Ó

tương hóa như: xà phòng, muối mật, protein, Na 2CO3, lecithin… sẽ được nhũ tương bền.

-L

Ý

Cho vào 3 ống nhiệm:

TO

ÁN

Nước cất Dầu ăn Na2CO3 10% Xà phòng

Ống 1 10ml 1 giọt 10 giọt

Ống 2 10ml 1 giọt 10 giọt

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

- Ống 1: Dầu có tỉ trọng nhỏ hơn nước, nên nổi trên mặt nước.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

TR ẦN

Biện luận:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

N

2

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

1

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

Kết quả:

D

IỄ N

Đ

ÀN

Lắc mạnh – Để yên trong 5 phút - Nhận xét các ống và giải thích các hiện tượng xảy ra.

23 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Kết quả:

2

−

phức chất có màu tím

B

2. Thuốc thử:

OH

10 00

- Sodium nitroprussiat 10% trong nước – Bảo quản trong tối nhưng dung dịch này cũng

Ó

- NH4OH đậm đặc.

-H

- Acid acetic kết tinh.

A

mau chuyển sang màu xanh ve, khi đó phải pha lại.

-L

Ý

3. Tiến hành: Cho vào ống nghiệm:

ÁN

- Nước tiểu: 10 giọt.

- Acid acetic đậm đặc: 2 giọt.

TO

- Sodium nitrioprussiat 10% : 2 giọt.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Ceton + Na nitroprussiat

TR ẦN

ứng này xảy ra trong môi trường kiềm.

H Ư

1. Nguyên tắc: Sodium nitroprussiat tác dụng với chất ceton cho phức chất màu tím, phản

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

THÍ NGHIỆM 3: TÌM THỂ CETON TRONG NƯỚC TIỂU

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

N

H

Ơ

N

1

ÀN

Trộn đều, hút 0,5 ml NH4OH đậm đặc – nghiêng ống nghiệm 450 – nhỏ cẩn thận từng giọt

D

IỄ N

Đ

theo thành ống.

Quan sát: sau vài phút nếu có ceton sẽ thấy vòng tím ở mặt phân cách hai dung dịch.

4. Kết quả:

24 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

Đ ẠO

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Bình thường không có các thể ceton trong nước tiểu.

TP

Y

U

.Q

N

Ơ

H

N

1

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

Báo cáo thực hành hoá sinh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com nhóm 2

2

25

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 5 XÉT NGHIỆM GLUCOSE, CHOLESTEROL, UREA TRONG MÁU

Ơ

.Q

H2O2 + Phenol + 4-aminoantipyrin

Gluconic acid + H2O2

Peroxidase

Red quinone + 4 H2O

10 00

B

2. MẪU THỬ: 2.1 Huyết thanh không tiêu huyết – Mới lấy.

2.2 Có thể dùng Huyết tương (lấy với kháng đông Heparin Fluoride).

2.3 Dịch não tuỷ.

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

3. THUỐC THỬ: Dạng KIT có sẵn. Bao gồm: - Reagent 1 (R1) • Phosphate Buffer pH 7.4 • Phenol • Glucose Oxidase • Peroxidase • 4-aminoantipyrin - Glucose standard: 100 mg% - 1 g/L – 5.56 mmol/L

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Glucose oxidase

H Ư

Glucose + O2 + H2O

TR ẦN

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

1. NGUYÊN TẮC Glucose trong huyết thanh bị oxy hoá bởi phân hoá tố Glucose Oxydase cho ra Gluconic Acid và H2O2 sẽ hợp với Phenol và 4-aminoantipyrine có sự hiện diện của Peroxidase sẽ cho ra một màu đỏ tím.

Phản ứng được tóm tắt như sau:

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

Phương pháp ENZYMATIC (End point)

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

N

H

Glucose có nguồn gốc từ thức ăn hoặc được tân tạo từ các acid amin và các sản phẩm thoái hoá của Lipid do gan đảm nhiệm tổng hợp.

Mục đích của việc xét nghiệm Glucose giúp ta chẩn đoán và theo dõi bệnh tiểu đường.

N

A. ĐỊNH LƯỢNG GLUCOSE TRONG MÁU

D

IỄ N

Đ

4.KỸ THUẬT: Nước cấ t Reagent 1 Glucose standard Huyết thanh

Blank 1000 µl

Reagent blank

Standard blank

Sample

1000 µl

1000 µl 10 µl

1000 µl 10 µl

26 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

Phương pháp Enzymatic: 75 - 115 mg% hay (4,2 – 6,4 mmol/L) TRỊ SỐ BÌNH THƯỜNG

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

5. KẾT QUẢ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

Y

N

H

Ơ

Trộn đều – Đọc kết quả ở máy quang phổ kế sau 30 phút (nếu để ở tº 20ºC - tº 25ºC) và sau 10 phút (nếu để ở tº 37ºC) – Dùng ống B = ED để chỉnh máy. Màu bền trong vòng 60 phút (bước sóng = 500 nm hoặc 490 nm).

Có thể đo %T – Abs – C. Nếu đo %T or Abs: Ta dùng công thức tính kết quả: Au x n = mg% (hoặc g/L hoặc mmol/L) As *GHI CHÚ: Nếu tính ra mg% thì n sẽ là 100 Nếu tính ra g/L thì n sẽ là 1 Nếu tính ra mmol/L thì n sẽ là 5.56

N

nhóm 2

27 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

D

IỄ N

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

1. Nguyên tắc Trong mội trường kiềm , Biuret có nhóm CO – NH, giống như một liên kết peptid) sẽ kết hợp với Cu2+ để cho phức chất màu tím hồng.

Tương tự trường hợp protein cũng vậy.

Cường độ của màu tỉ lệ thuận với nồng độ protein có trong dung dịch (huyết thanh). Do đó, ta có thể định lượng protein bằng cách đọc mật độ quang bằng máy quang phổ kế ở bước sóng λ = 530nm.

2. Thuốc thử - DD protein mẫu 6,25 g/l (0,625g): cân 6,25g Albumin trứng pha nước cất vừa đủ 100ml.

- Thuốc thử Gornall (Biuret): CuSO4 : 1,5g Tartrat Kalium và Natrium: 6g Nước cất: 500ml Lắc cho tan, rồi thêm vào 300ml dd NaOH 2,5 N – lắc đều. Thêm 1g Kali Iodua lắc cho tan, thêm nước cất vào cho đủ 1000ml.

3. Tiến hành Dùng 3 ống ngiệm: Ống R Ống S Ống U Mono Reagent 1000µl 1000µl 1000µl Huyết thanh 20 µl Standard 20 µl 0 ủ 37 trong 30 phút Trộn đều và để ở nhiệt độ PTN trong 20 phút. Đọc mật độ quang (D) ở bước sóng λ = 530nm.

4. Kết quả - Tính nồng độ protein toàn phần trong huyết thanh (g/l) :

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

PHƯƠNG PHÁP SO MÀU (PHẢN ỨNG BIURET)

U

Y

N

H

Ơ

A. XÉT NGHIỆM PROTEIN TRONG MÁU Protein có nguồn gốc ngoại sinh là từ thức ăn và nguồn gốc nội sinh là từ gan và hệ thống nội mạc võng mô.

Trong cơ thể Protein giữ 4 nhiệm vụ chính là nhiệm vụ: Dinh dưỡng – Chuyên chở - Đặc biệt – Sinh lý.

Xét nghiệm Protein total và tỉ số A/G giúp ta trong việc chẩn đoán và theo dõi các trường hợp mất nước, các bệnh về gan và thận.

N

BÀI 6 XÉT NGHIỆM PROTEIN VÀ BILIRUBIN TRONG MÁU

D (thử)

1 X 6,25 x

D0 (chuẩn)

=

g/l

0,1

28 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

IỄ N

D

ÀN

Đ

http://daykemquynhon.ucoz.com

A

Ó

-H B

10 00 TR ẦN G

N

H Ư

Đ ẠO

Biện luận : Giá trị bình trường của protein toàn phần trong huyết thanh là : 65 – 85 g/l.

Như vậy, kết quả là bình thường.

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Ý

-L

TP

Y

U

.Q

N

Ơ

H

N

Báo cáo thực hành hoá sinh

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

ÁN

TO

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com nhóm 2

29

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

BÀI 7 XÉT NGHIỆM HÓA SINH NƯỚC TIỂU Nước tiểu là một dịch bài tiết quan trọng của cơ thể, có nhiệm vụ đào thải những chất

Ơ

Sự thay đổi tính chất lý hoá và những thành phần hoá học của nước tiểu phản ảnh rõ

N

độc, những cặn bã trong quá trình chuyển hoá các chất của cơ thể ra ngoài.

N

H

sự rối loạn chuyển hoá các chất và các hoạt động của các cơ quan nội tạng như GAN –

Y

THẬN.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

• Ăn uống.

TR ẦN

I. TÍNH CHẤT VẬT LÝ 1. THỂ TÍCH

B

1.1 Bình thường: từ 600 đến 2000 ml.

10 00

(Thay đổi theo khí hậu, hoạt động và ăn uống).

1.2 Trị số tăng: trong bệnh tiểu đường, đái tháo nhạt (do di truyền).

Ó

A

1.3 Trị số giảm: trong tiêu chảy ói mửa, mất máu, sốt xuất huyết, viêm thận do

-H

ngộ độc cấp Hg, suy tim nặng…

-L

Ý

2. MÀU SẮC

2.1 Bình thường: có màu vàng nhạt (vàng rơm hay vàng chanh).

ÁN

2.2 Bệnh lý:

TO

• Màu đỏ trong tiểu máu, tiểu ra Hb, sạn.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

N

G

• Các kích thích tố.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

(nước tiểu nhiều, nước tiểu ít).

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

• Huyết áp

Đ ẠO

Lượng nước tiểu bài tiết ra ngoài tuỳ thuộc vào yếu tố:

.Q

TUYẾN NỘI TIẾT, các trường hợp nhiễm trùng, thai nghén…

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

U

Xét nghiệm nước tiểu giúp ta chẩn đoán và theo dõi các bệnh của GAN – THẬN –

D

IỄ N

Đ

ÀN

• Vàng đậm trong viêm gan, vàng da tắc mật.

• Đỏ nước rửa thịt trong viêm cầu thận cấp.

• Trắng đục, lợn cợn trong nhiễm trùng tiểu.

• Trắng sữa do tiểu ra dưỡng chấp.

3. PH NƯỚC TIỂU 3.1 Bình thường: 4.7 đến 8 (Trung bình 6).

Thay đổi theo chế độ ăn: nhiều thịt

acid, nhiều rau

kiềm.

30 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

3.2 Bệnh lý: • pH acid: trong bệnh tiểu đường nặng vì có nhiều Ketone.

• pH kiềm: trong nhiễm trùng tiểu, viêm bàng quang.

4. TỈ TRỌNG

Ơ

N

4.1 Bình thường: 1.003 đến 1.030

N

H

(Thay đổi tuỳ thuộc vào chất hoà tan).

Y

4.2 Tăng: trong bệnh tiểu đường hoặc các trường hợp mất nước.

1.2 K+ , Ca++ , Mg++ .

N

http://daykemquynhon.ucoz.com

G

1.3 Phosphat: (anion chính quyết định pH của nước tiểu).

TR ẦN

2. NHỮNG CHẤT HỮU CƠ Bình thường

B

15 - 35g/ nước tiểu 24 giờ.

10 00

2.1 Ure:

H Ư

1.4 Sulfate: 2.5 g/ nước tiểu 24 giờ.

2.2 Ammoniac: (bài tiết dưới dạng muối Ammonium)

Ó

A

( trong bệnh suy gan và nhiễm trùng nặng)

-H

2.3 Creatin và Creatinin: 1.6 - 2g/ nước tiểu 24 giờ.

Ý

2.4 Uric acid: 0.5 - 0.8g/ nước tiểu 24 giờ.

-L

2.5 Acid amin: (chứa đủ 20 acid amin của cơ thể)

TO

ÁN

Mỗi ngày bài tiết khoảng 3g.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

1.1 NaCl: 5 – 11g/ nước tiểu 24 giờ.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

1. NHỮNG CHẤT VÔ CƠ

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U .Q

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

II. THÀNH PHẦN HOÁ HỌC

ÀN

3. NHỮNG CHẤT HỮU CƠ

D

IỄ N

Đ

Bất thường 3.1 Protein: 30 - 200 mg/ nước tiểu 24 giờ.

(Thay đổi do đứng lâu, lao động nặng) • Tăng trong các bệnh về thận: nhiễm mỡ, viêm cấp hay mạn, viêm do ngộ độc Hg, Pb – Trong các bệnh nhiễm trùng, tim mạch, u não – Trong sốt nhiễm trùng, động kinh, sỏi…

3.2 Glucose: 100 mg/ nước tiểu 24 giờ.

31

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

(Thay đổi theo chế độ ăn nhiều chất ngọt) • Tăng trong bệnh tiểu đường tuỵ và tiểu đường thận.

3 - 15 mg/ nước tiểu 24 giờ.

3.3 Ketone (Aceton):

• Tăng trong bệnh tiểu đường, nhịn đói lâu ngày.

N

H

3.5 Máu và Hb: xuất hiện trong viêm cầu thận cấp, sỏi, chấn thương đường tiểu.

Ơ

N

3.4 Bilirubin: tăng trong vàng da do viêm gan, tắc mật.

Y

(Hb xuất hiện trong vàng da tiêu huyết, sốt rét)

-

Biết cách vận hành máy để đo mẫu nước tiểu của bệnh nhân.

-

Đánh giá kết quả sau khi PTNT bằng máy.

N

TR ẦN

NGUYÊN TẮC HOẠT ĐỘNG CỦA MÁY PTNT 1. Nguyên tắc hoạt động chung của máy PTNT

A

10 00

B

Máy PTNT tự đông là một máy quang kế được sử dụng để đo bán định lượng 10 thông số trong nước tiểu bằng cách sử dụng thanh nhúng nước tiểu. Các bóng đèn được phát ra ánh sáng được sử dụng như nguồn sáng và thời gian đo được tối ưu hóa để phản ứng hóa học và sựu tạo màu xảy ra trong các vùng phản ứng của thuốc thử.

-L

Ý

-H

Ó

Đầu đo trong máy chứa 3 bóng đèn có 3 bước sóng khác nhau. Que thử được đặt ở một vị trí cố định và đầu đo di chuyển trên mỗi miếng đệm thuốc thử, bắt đầu từ vị trí “ tham chiếu” – nơi hệ thống quang học bắt đầu hoạt động.

ÁN

Trong quá trình đo, máy kiểm tra vị trí thanh thử thử dưới đầu đo bằng cách thực hiện sự kiểm tra một cách chính xác dòng ánh sáng khúc xạ được đo.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

Nếu que thử được đặt thiếu chính xác dưới đầu đo, máy sẽ thông báo một tín hiệu lỗi “ Strip problem – rest”.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

Đ ẠO

Trình bày được nguyên tắc hoạt động chung của máy PTNT.

G

-

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

III. PHÂN TÍCH NƯỚC TIỂU 10 THÔNG SỐ

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

hạch bạch huyết, ung thư máu, bệnh Hodgkin.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

.Q

U

3.6 Bence Jone Protein: xuất hiện trong các trường hợp u tuỷ xương, ung thư

2. Nguyên nhân phản ứng của từng xét nghiệm riêng biệt trên thanh thử:

Que thử 10 thông số cung cấp những testh thử glucose, bilirubin, ceton, tỷ trọng, máu, pH, protein, urobilinogen, nitrit, bạch cầu trong nước tiểu.

Test này cung cấp những thông tin liên quan tới tình trạng chuyển hóa đường, chức năng gan, thận, thằng bằng kiềm toan và sự nhiễm trùng đường tiểu.

Các vùng phản ứng của que thử đã sẵn sàng để sử dụng để khi được lấy ra từ trong chai đựng que thử. Sau khi sử dụng, que thử phải được bỏ đi. Thao tác phải được tuân thủ 32

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

một cách chính xác, thời gian chính xác cần thiết để cho một kết quả khách quan. Que thử phải được giữ trong chai đậy nắp, nước tiểu phải mới lấy – lắc đều và không quay ly tâm.

N

H

Ơ

- Tỷ trọng: với sự có mặt cảu các cation, các proton sẽ được giải phóng bởi một thuốc thử hỗn hợp, tạo nên sự thay đổi màu của chất chỉ thị Bromothylmol có màu xanh da trời sang màu xanh lá cây rồi sang màu vàng.

N

- pH: dựa trên sự có mặt của chất chỉ thị màu: đỏ methyl và xanh bromothymol. Màu thay đổi từ cam, vàng, xanh lá.

TR ẦN

H Ư

- Bilirubin : nguyên tắc của xét nghiệm này dựa trên sự kết hợp của bilirubin với diazodtizedbdichcholoroanilin trong môi trường acid mạnh.

10 00

B

- Urobilinogen: xét nghiệm này dựa trên nguyên tắc là muối diazonium phản ứng tức thì với urobilinogen để tạo nên một chất azo có màu đỏ. Sẽ không có màu hoặc màu nhạt hơn màu của nồng độ urobilinogen bình thường là 1mg% (17µmol/L) thấy trong những mẫu bình thường.

-H

Ó

A

- Máu: hoạt động của Hemoglobin giống peroxydase, phân giải disopropybenzen dihydroperoside. Phản ứng xảy ra cho màu thay đổi từ cam cho tới xanh lá.

ÁN

-L

Ý

- Nitrit: phản ứng thể hiện sự có mặt của nitrit, vì vậy có thể phát hiện một cách gián tiếp các vi khuẩn tạo nên nitrit có trong nước tiểu bằng sự đổi màu từ hồng đến đỏ của thanh thử. Ngay cả màu hồng nhạt cũng là chỉ dẫn có ý nghĩa về sự có mặt của vi khuẩn trong nước tiểu.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

- Bạch cầu: xét nghiệm thể hiện sự có mặt của men esterase có trong bạch cầu hạt. Các enzym esterase có tác dụng thủy phân este của indoxyl và indoxyl được giải phóng sẽ phản ứng với muối diazonium để cho một sản phẩm màu tím.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

- Ceton: phản ứng giữa acetoacetic acid với Nitroprusside cho màu hồng.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

G

Đ ẠO

- Protein: xét nghiệm này dựa trên nguyên tắc sự thay đổi nồng độ protein phụ thuộc vào một chất chỉ thị về pH. Với môt pH hằng định, sự xuất hiện bất cứ màu xanh lá chứng tỏ có sự hiện diện của protein.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

Y

- Glucose: test này xảy ra nhờ 2 enzym là glucose và peroxydase. Xét nghiệm này không bị ảnh hưởng bởi tỷ trọng, pH nước tiểu và sự hiện diện của thể ceton. Sản phẩm tạo ra là một phức màu thay đổi từ màu xanh cho tới màu nâu.

* Độ nhạy của các vùng thử: Glucose 4 – 7 mmol/L (75 – 125 mg/dl).

Bilirubin 7 – 14 µmol/L (0,4 – 0,8mg/dl).

Ceton 0,5 – 1mmol/L (5 – 10mg/dl).

Máu 150 – 620tg/L (0,015 – 0,062 mg/dl).

Protein 0,15 – 0,3g/L (15 – 30 mg/dl).

33

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

Nitrit 13 – 22 umol/L (0,06 – 0,1mg/dl).

Bạch cầu 5 -15 TB/uL.

Ơ

1 Bật công tắc máy, thử nghiệm chỉ thực hiện được khi màn hình hiện lên chữ READY FOR TEST ( Lưu ý: loại que thử phải phù hợp với máy).

N

CÁCH SỬ DỤNG: 8 BƯỚC

N

H

2. Lấy 1 que thử ra từ chai đựng que thử và đậy nắp lại ngay.

Y

3. Nhúng sâu que thử vào trong mẫu nước tiểu cần thử và lấy lên ngay.

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

Chú ý bước 5 và 6 thao tác nhanh trong vòng 10 giây.

TR ẦN

7. Khi thử nghiệm kết thúc, bỏ que thử đã sử dụng, lau khay thử nếu thấy cần bằng giấy mềm.

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

8. Ghi kết quả.

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

G

6. Đặt que thử lên bàn thử theo đúng hướng và vị trí. Khay thử tự động kéo vào bên trong máy PTNT.

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

Đ ẠO

TP

5. Đồng thời thấm giọt nước tiểu còn dư bằng cách dựng nghiêng que thử lên trên giấy thấm mềm.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

.Q

U

4. Ấn nút xanh trên máy bằng một ngón tay trái.

34 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

https://twitter.com/daykemquynhon plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn

www.facebook.com/daykem.quynhon https://daykemquynhon.blogspot.com

Báo cáo thực hành hoá sinh

nhóm 2

TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Các kỹ thuật cơ bản trong phòng thí nghiệm.

2. Hướng dẫn sử dụng máy CLINITEK 50 – BAYER. 3. Hướng dẫn sử dụng máy đo đường máu – ROCHE.

Ơ

N

4. Hóa sinh lâm sang, ĐH Y Dược TP.HCM, 2005.

N

H

5. Giáo trình hóa sinh, ĐH Y Dược TP.HCM, 2005.

.Q

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)

D

IỄ N

Đ

ÀN

TO

ÁN

-L

Ý

-H

Ó

A

10 00

B

TR ẦN

H Ư

http://daykemquynhon.ucoz.com

N

G

Đ ẠO

TP

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 / Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định

7. Thực tập sinh hóa học – ĐH Y Dược TP.HCM.

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN

U

Y

6. Thực tập Hóa sinh học, ĐH Y Dược Hà Nội, 2003.

35 Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú

www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial