Bảng 7 Kết quả định tính các chất có trong cao dược liệu nấm Linh Chi

2.2.2.4. Định tính

Đối với cao đặc Linh chi ta cần định tính các thành là polysaccharide, triterpenes là chất có hoạt tính sinh học chính trong nấm Linh Chi.

a. Định tính triterpenoids

Lấy 0,5 g chế phẩm, thêm 50 ml ethanol 90 % (TT), lắc đều, đun hồi lưu trong cách thủy 30 phút, để nguội và lọc, bay hơi dịch lọc trên cách thủy đến còn khoảng 10 ml, chuyển vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 2 ml dịch chiết để làm các phản ứng sau đây: Ống 1: thêm 3-4 giọt axit H2SO4, sau 5 phút cho thuốc thử anthron 1%, phản ứng tạo tủa màu xanh. Ống 2: Thêm 1ml dung dịch phenol 5%, sau đó thêm 5ml dung dịch H2SO4 đặc, phản ứng sẽ xuất hiện màu vàng.

b. Định tính tính triterpenes

Lấy 0.5 gam chế phẩm hòa 20ml diethylether sau đó đun trong bình hồi lưu 30 phút. Lấy 5 ml dịch chiết cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn. Hòa tan cắn với 0,5 ml anhydrid acetic, thêm vào dung dịch 0,5 ml chloroform. Thêm 1 - 2 ml H2SO4 đậm đặc lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy từ từ xuống đáy ống nghiệm. Nơi tiếp xúc giữa 2 lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ đến tím, lớp dung dịch phía trên dần dần chuyển thành màu xanh lục hay tím. c. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4). Bản mỏng: Silica gel G. Dung môi khai triển: Ether dầu hỏa (60 °C đến 90 °C) – ether ethylic – acid formic (1 5: 5: 1 ) . Dung dịch thử: Lấy 2g bột thô dược liệu, thêm 30 ml methanol (TT), đun hồi lưu trong 30 min, lọc. Bốc hơi dịch lọc trên cách thủy đến cạn. Hòa cắn trong 2 ml methanol (TT). Dung dịch đối chiếu: Lấy 2 gam bột thô Linh chi (mẫu chuẩn) tiến hành chiết như mẫu thử. Cách tiến hành Chấm riêng biệt lên bản mỏng 5 µl mỗi dung dịch trên. Triển khai sắc ký đến khi dung môi đi được 10 cm đến 12 cm, lấy bản mỏng ra, để khô trong không khí, quan sát dưới sáng từ ngoại ở bước sóng 366 nm. Trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có các vết cùng màu sắc và giá trị Rf với các vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (có ít nhất 4 vết phát quang màu vàng