BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID SAPONIN LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC

BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU

vectorstock.com/27221078

Ths Nguyễn Thanh Tú eBook Collection DẠY KÈM QUY NHƠN PHARMACY PHÁT TRIỂN NỘI DUNG

BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID SAPONIN LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC WORD VERSION | 2020 EDITION ORDER NOW / CHUYỂN GIAO QUA EMAIL TAILIEUCHUANTHAMKHAO@GMAIL.COM Tài liệu chuẩn tham khảo Phát triển kênh bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đơn vị tài trợ / phát hành / chia sẻ học thuật : Nguyen Thanh Tu Group Hỗ trợ trực tuyến Fb www.facebook.com/DayKemQuyNhon Mobi/Zalo 0905779594

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ BỘ MÔN DƯỢC LIỆU- DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN

--

BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID

GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: ĐỖ NAM QUAN TIỂU NHÓM 2 – LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC 13A 1.

Nguyễn Lê Nhật Linh 4.

Hồ Linh Phương 2.

Trần Ngọc Thiên Vy 5. Đỗ Công Hậu 3. Đặng Thị Thùy Dung 6.

Dương Thị Ngọc Em

Cần Thơ, 2019

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID 1.

A. CƠ SỞ LÝ THUYẾT Khái niệm

Các alkaloid (alcaloid) là những base hữu cơ thường dễ tan trong các dung môi hữu cơ (như ether, benzen, cloroform, aceton, methanol và ethanol) Đa số các alkaloid base thự tế không tan trong nước Một vào alkaloid có cấu trúc amonium bậc IV tan được trong nước và kém tan trong dung môi hữu cơ.

Một số alkaloid không có oxy tồn tại duới trạng thái lỏng có thể tan ít trong nước.

Một số alkaloid dạng lỏng có thể bay hơi và lôi cuốn được theo hơi nước.

Một số alkaloid không có oxy ở dạng rắn có thể thăng hoa được ở áp suất thường.

Một số alkaloid có OH phenol có thể tan một phần trong dung dịch kiềm mạnh.

Dưới dạng muối, các alkoaloid thường tan được trong nước, cồn (ethanol, methanol), hay hỗn hợp cồn nước; chúng không tan hoặc rất kém tan trpng các dung môi hữu cơ kém phân cực (ether, benzen, cloroform).

2.

Tính chất

Alkaloid thường là những base yếu, tan trong cac dung môi hữu cơ, không tan trong nước. Khi cho alkaloid tác dụng với acid sẽ thu được alkaloid dạng muối.

Các muối của alkaloid thường dễ tan trong nước. Các muối này dễ bị các chất kiềm vô cơ (NH4OH, NaOH) thậm chí cả các muối khác (Na2CO3, đôi khi cả NaHCO3) đẩy ra khỏi muối cho lại các alkaloid base ban đầu.

Alkaloid phản ứng với các thuốc thử chung (thuốc thử tạo tủa) tạo thành các muối khó tan (dạng kết tinh hay dạng vô định hình) được ứng dụng trong định tính alkaloid.

Một số alkaloid hay nhóm alkaloid có thể cho màu sắc đặc trưng với một số thuốc thử gọi là thuốc thử đặc hiệu của alkaloid (thuốc thử tạo màu) ứng dụng trong định tính hoặc làm thuốc thử phát hiện trong sắc ký.

3.

Các phương pháp chiết xuất

Trong cây, các alkaloid thường tồn tại dưới dạng muối hòa tan với acid hữu cơ hoặc vô co hay dạng kết hợp với tanin. Người ta có thể chiết alkaloid ra khỏi nguyên liệu thực vật bằng nhiều cách nhưng nhìn chung có thể quy về 2 cách chính là: 1

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

• Chiết alkaloid ra khỏi dược liệu dưới dạng alkaloid base bằng dung môi hữu cơ.

• Chiết alkaloid ra khỏi dược liệu dưới dạng muối bằng dung môi phân cực (nước, cồn, hỗn hợp cồn nước đã bị acid hóa).

Với một vài alkaloid đặc biệt, người ta có thể chiết bằng: • Phương pháp cất kéo lôi cuốn theo hơi nước (chiết xuất nicotin từ Thuốc lá).

• Phương pháp thăng hoa (chiết xuất cfein từ Trà).

Dựa vào tính tan khác nhau của dạng base và dạng mưới alkaloid trong các dung môi, người ta có thể loại phần nào tạp chất ra khỏi dịch chiết trước khi địng tính, định lượng hay phân lập các alkaloid tinh khiết.

Các quy trình dưới đây thường được sử dụng trong chiết xuất alkaloid từ nguyên liệu thực vật dùng cho định tính alkaloid.

Chú ý: Thể tích dung môi chiết, thời gian chiết trong các phương pháp trên có thể thay đổi tùy thuộc vào dược liệu và phương tiện sử dụng.

B. THỰC HÀNH

I. ĐỊNH TÍNH ALKALOID TRONG DƯỢC LIỆU BẰNG PHẢN ỨNG HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ LỚP MỎNG Cân khoảng 3g bột dược liệu hạt Tâm sen cho vào erlen

Cho tiếp vào erlen 25 ml cồn Acetic 5% Đun cách thủy 10 phút và lọc qua bông vào chén

2

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Dịch chiết cồn acid vừa thu được đem đun cách thủy đến cắn

Thêm 10 ml nước nóng, lọc qua giấy lọc (2 lần x 10ml)

Thu được dịch nước acid chia làm 2 phần

PHẦN 1: Định tính alkaloid bằng thuốc thử chung Chuẩn bị 3 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dịch nước acid

+ Ống nghiệm 1 cho vào 03 giọt thuốc thử Bouchardat + Óng nghiệm 2 cho vào 03 giọt thuốc thử Valse Mayer + Óng nghiệm 3 cho vào 03 giọt thuốc thử Dragendorff

3

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Mô tả và nhận xét: + Ống nghiệm 1 (Thuốc thử Bouchardat): Xuất hiện tủa màu nâu, đục.

Dương tính, (++) + Óng nghiệm 2 (Thuốc thử Valse Mayer): Xuất hiện tủa màu trắng, đục.

Dương tính, (++) + Óng nghiệm 3 (Thuốc thử Dragendorff): Xuất hiện tủa màu cam, đục.

Dương tính, (++) Kết luận: Dược liệu Tâm sen có chứa Alkaloid.

PHẦN 2: Định tính bằng sắc ký lớp mỏng a. Chuẩn bị mẫu thử: Đem dịch chiết nước acid kiềm hóa bằng NH4OH đậm đặc (#03giọt) thử với pH = 10

4

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Cho dịch chiết vào bình lắng gạn, chiết bằng 10 ml CHCl3 (lắc mạnh) → thu dịch chiết lớp dưới. Đem đun cách thủy đến cắn

b. Chuẩn bị bản mỏng Dùng bản tráng sẵn silica gel, dùng bút chì 2B kẻ 2 đường thẳng cách mép dưới 11,5cm và 1 đường thẳng cách mép trên 0.5cm. Đánh dấu điểm cần chấm c. Chuẩn bị bình sắc ký và dung môi Bình sắc ký được rửa sạch và để thật khô. Lót 1 miếng giấy lọc quanh lòng bình sau cho có 1 khoảng trống dọc theo bình để có thể quan sát được bản sắc ký bên trong.

Cho hệ dung môi CHCl3 - MeOH – H2O (50:09:01) vào bình sắc ký sao cho lớp dung môi trong bình cao khoảng 0.5cm. Đậy nắp bình sắc ký, đặt ở nơi phẳng, để yên trong 15-30 phút cho bão hoà dung môi. d. Đưa mẫu lên bản mỏng và khai triển Dùng mao quản lấy mẫu, chấm lên bản mỏng thành từng vạch gọn cách mép dưới và mép trên của bản 1-1.5cm. (phải chắc chắn vết chấm cao hơn mức dung môi trong bình sắc ký).

5

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Chờ cho vết chấm bay hết MeOH, đưa bản mỏng vào bình sắc ký rồi đậy nắp bình.

Khi dung môi chạy còn cách mép trên khoảng 0.5cm thì lấy bản mỏng ra, để ở nhiệt độ phòng hoặc sấy nhẹ cho tới khô dung môi. e. Phát hiện - Soi đèn UV254nm

6

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

-

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Soi đèn UV365nm

1 2 3 4 5

-

Khi soi đèn UV ở bước sóng 254 và 365 ta thấy xuất hiện 5 vết sắc ký.

f.

Nhúng nhanh bản mỏng vào khai chứa thuốc thử Dragendorff

1 2 3 4

Tính Rf : -

Rf (1) = 5.8/7.5 = 0.77 Rf (2) = 5.3/7.5 = 0.71 Rf (3) = 5/ 7.5 = 0.66 Rf (4) = 4/ 7.5 = 0.53 7

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

với bất kỳ Rf của hỗn hợp thì có thể kết luận X có trong thành phần của hỗn hợp.

II. ĐỊNH TÍNH ALKALOID BẰNG THUỐC THỬ ĐẶC HIỆU 1.

Dược liệu hạt Mã Tiền

Cân khoảng 3g bột dược liệu hạt mã tiền vào erlen

Cho tiếp vào erlen 40 ml H2SO4 2% Đun cách thủy 15 phút và lọc qua bông vào cốc

Đem dịch chiết nước acid kiềm hóa bằng NH4OH đậm đặc (30 – 40 giọt) thử với pH = 10

8

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Tiếp tục cho dịch chiết vào bình lắng gạn (lăc nhẹ) và chiết bằng 20 ml CHCl3 (lấy lớp dưới)

Dịch CHCl3 thu được chia làm hai phần. Đun cách thủy cho đến cắn

PHẦN 1: Định tính strychnin Nhỏ vào chén thứ nhất khoảng 02 giọt H2SO4 đậm đặc dùng đũa khuấy cho tan, thả vào becher một vài hạt tinh thể K2Cr2O7, dùng đũa kéo hạt tinh thể K2Cr2O7 vào chỗ có acid.

Xuất hiện vệt màu tím rồi chuyển sang hồng vàng và biến thành nâu đen.

9

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

PHẦN 2: Định tính brucin Nhỏ một giọt HNO3 đậm đặc vào cắn trên chén thứ 2 và quan sát thấy xuất hiện màu đỏ cam

Kết luận: Dược liệu hạt Mã tiền có chứa Brucin và Strychnin

10

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B9_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

2. Dược liệu Vàng Đắng Cân khoảng 0,5 g bột dược liệu cho vào erlen 50ml

Thêm 10 ml H2SO4 0,5% trong vài phút.

Lọc lấy dịch chiết qua giấy lọc

Cho vào ống nghiệm khoảng 3 ml dịch chiết nước acid này và nhỏ từng giọt nước Javen, lắc nhẹ

Quan sát hiện tượng (định tính bererin) Dung dịch ban đầu có màu vàng, nhỏ từ từ nước Javen vào dung dịch chuyển sang màu đổ máu, cho đến khi thừa nước Javen dung dịch chuyển lại màu vàng.

Kết luận: Dược liệu Vàng đắng chứa bererin 11

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành dược liệu

B5_TN2_LTCDDHD13A

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ BỘ MÔN DƯỢC LIỆU- DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN

--

BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU DƯỢC LIỆU CHỨA SAPONIN

GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: ĐỖ NAM QUAN TIỂU NHÓM 2 – LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC 13A 1.

Nguyễn Lê Nhật Linh 4.

Hồ Linh Phương 2.

Trần Ngọc Thiên Vy 5. Đỗ Công Hậu 3. Đặng Thị Thùy Dung 6.

Dương Thị Ngọc Em

Cần Thơ, 2019

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành dược liệu

B5_TN2_LTCDDHD13A

DƯỢC LIỆU CHỨA SAPONIN I. 1.

CƠ SỞ LÝ THUYẾT Khái niệm Saponin:

Saponin là một nhóm glycosid có cấu trúc triterpen hoặc steroid, thường gặp trong thực vật và đôi khi gặp trong động vật.

SAPONIN = ĐƯỜNG + AGLYON TRITERPEN TETRACYCLIC 2.

STEROID PENTACYCLIC

Tính chất

Saponin có một số tính chất chung như tạo bọt bền khi lắc với nước, làm vỡ hồng cầu ở các nồng độ thấp, độc đối với cá, tạo phức với cholesterol hay với các chất B-hydroxy steriod. Các tính chất này được dùng để định tính và đánh giá saponin Các saponosid thường dễ tan trong ethanol, methanol, butanol, nước và các hỗn hợp cồn nước; khó tan hoặc không tan trong các dung môi kém phân cực.

Dạng aglycon (sapogenin) thì ngược lại, dễ tan trong các dung môi hữu cơ kém phân cực, kém tan trong nước. Các tính chất này thường được dùng để chiết xuất và tinh chế saponin.

Trong định tính, các saponin thường được chiết bằng cồn (EtOH, MeOH) với các độ cồn khác nhau, cô dịch chiết đến đậm đặc rồi kết tủa saponin bằng dung môi kém phân cực như ether, aceton,…Cũng có thể tinh chế saponin bằng cách phân bố giữa nước và n-BuOH bão hoà nước. Với thử nghiệm tính tạo bọt, tính phá huyết thì có thể sử dụng dung dịch chiết nước mà không cần tinh chế.

1

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành dược liệu

B5_TN2_LTCDDHD13A

Các thử nghiệm tạo bọt, phá huyết, độc đối với cá… thường được dùng để nhận định saponin. Các phản ứng hoá học cũng được sử dụng nhưng mức độ đặc hiệu thấp so với các nhóm hợp chất khác.

Sắc ký lớp mỏng Để định tính saponin người ta còn dùng phương pháp sắc ký lớp mỏng. Rf màu sắc với các thước thử đặc hiệu của các vết trên sắc ký đồ là những yếu tố để nhận định sự có mặt của một saponin, một nhóm saponin trong hỗn hợp phân tích.

Trong SKLM, Rf của chất A được định nghĩa là tỷ số giữa đoạn đường di chuyển của A(la ) và đoạn đường di chuyển của dung môi (l0 ) tính từ mức xuất phát của mẩu thử Rfa = la / l0 Trị số Rf luôn luôn < 1,00 và chỉ lấy đúng hai số lẻ Trong những điều kiện sắc ký nhất định, giá trị Rf của 1 chất là 1 trong những đặc trưng của chất đó trong hệ dung môi đã sử dụng. Tuy nhiên, giá trị Rf phụ thuộc vào nhiều yếu tố (bản chất, bề dày và độ hoạt hoá của pha tĩnh pha động, mức độ bão hoà dung môi, độ ẩm và nhiệt độ của môi trường…) Để đánh giá saponin trong dược liệu, chỉ số bọt (CSB), chỉ số phá huyết ( CSPH) hay được dùng Chỉ số bọt: là số pha loãng cần thiết của 1g dược liệu để tạo được một lớp bọt cao 1cm sau khi ngưng lắc 15 phút, tiến hành trong điều kiện quy định.

Chỉ số phá huyết: là số mililit dung dịch đệm cần thiết để hoà tan các saponin có trong 1g dược liệu gây ra sự phá huyết đầu tiên và hoàn toàn đối với một loại máu đã chọn, tiến hành trong điều kiện quy định.

II. NỘI DUNG THỰC HÀNH 1. Nguyên vật liệu thí nghiệm 1.1. Dụng cụ, hóa chất và thuốc thử - Cồn 70% - H2SO4 đậm đặc - Methanol - Dung dịch NaCl 0.9% - Ether ethylic - Thuốc thử vanillin sulfủic (VS) mới pha - Anhydrid acetic 1.2. Dược liệu - Đinh lăng (Polyscias fruticosa L, Araliaceae) - Bồ kết (Fructus Gleditschiae) là quả già của cây Bồ Kết (Gledítchia fera (Lour.) Merr., Fabaceae) 2. Thực hành 2.1. Định tính bằng tạo bọt Cho 1,0g dược liệu vào bình nón 50ml, thêm vào 20ml cồn 70%

1

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Đun nhẹ trên bếp cách thuỷ trong 5 phút rồi lọc nóng qua bông.

3

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Cho dịch chiết vào chén sứ, bốc hơi dung môi trên cách thuỷ cho đến còn khoảng 2-3 ml. Lấy 10 giọt dịch chiết đậm đặc này cho vào một ống nghiệm đã có sẳn 10ml nước cất.

4

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Dùng ngón tay bịt miệng ống nghiệm và lặc mạnh theo chiều đứng của ống nghiệm trong 1 phút (30 lần lắc).

5

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Để yên ống nghiệm, quan sát lớp bọt và đánh giá kết quả Sau 15 phút (+)

2.2.

Burchard)

Sau 30 phút (++)

Định tính bằng phản ứng hoá học (phản ứng Liebermann –

Tiếp tục dùng hai chén dược liệu trên, cô trên bếp cách thuỷ đến cắn thật khô. Để nguội.

Cho vào cắn này 1ml anhydrid acetic và 2ml CHCl3, khuấy kỹ cho tan nhầm cắt phần đường trong phân tử còn lại aglycon tan trong Cloroform. Lọc bằng pipet Pasteur bịt bông, cho dung dịch vào 1 ống nghiệm khô.

6

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Để ống nghiệm nghiên trên giá, dùng pipet cho thật nhẹ nhàng khoảng 1ml H2SO4 đậm đặc dọc theo thành ống nghiệm.

Mô tả: + Ống nghiệm có chứa dược liệu Đinh lăng: mặt ngăn cách giữa 2 lớp có màu từ nâu đậm lớp dung dịch phía trên có màu xanh rêu + Ống nghiệm có chứa dược liệu Bồ kết: mặt ngăn cách giữa 2 lớp có màu từ nâu đậm lớp dung dịch phía trên có màu nâu đỏ Nhận xét: Phản ứng dương tính Kết luận: mẫu dịch chiết Đinh lăng và Bồ kết có chứa saponin.

2.3. Định tính bằng sắc ký lớp mỏng 2.3.1. Chuẩn bị bản mỏng Dùng bản tráng sẵn silica gel, dùng bút chì 2B kẻ 2 đường thẳng cách mép dưới 1-1,5cm và 1 đường thẳng cách mép trên 0.5cm. Đánh dấu điểm cần chấm 2.3.2. Chuẩn bị bình sắc ký và dung môi 7

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Bình sắc ký được rửa sạch và để thật khô. Lót 1 miếng giấy lọc quanh lòng bình sau cho có 1 khoảng trống dọc theo bình để có thể quan sát được bản sắc ký bên trong.

Cho hệ dung môi CHCl3 - MeOH – H2O (65:35:10; lớp dưới) vào bình sắc ký sao cho lớp dung môi trong bình cao khoảng 0.5cm. Đậy nắp bình sắc ký, đặt ở nơi phẳng, để yên trong 15-30 phút cho bão hoà dung môi.

2.3.3.

Chuẩn bị mẫu thử

Cho khoảng 0.5g bột dược liệu và 5ml methanol vào 1 ống nghiệm, đun cách thuỷ trong vòng 10 phút.

Lọc qua phễu bằng bông cho dịch lọc vào một chén sứ, cô đến cắn.

8

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Hoà cắn vào vài giọt MeOH, dùng dung dịch này làm mẫu thử cho sắc ký lớp mỏng.

2.3.4.

Đưa mẫu lên bản mỏng và khai triển

Dùng mao quản lấy mẫu, chấm lên bản mỏng thành từng vạch gọn cách mép dưới và mép trên của bản 1-1.5cm. (phải chắc chắn vết chấm cao hơn mức dung môi trong bình sắc ký).

Chờ cho vết chấm bay hết MeOH, đưa bản mỏng vào bình sắc ký rồi đậy nắp bình.

Khi dung môi chạy còn cách mép trên khoảng 0.5cm thì lấy bản mỏng ra, để ở nhiệt độ phòng hoặc sấy nhẹ cho tới khô dung môi.

9

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

2.3.5. Phát hiện - Soi đèn UV254nm

10

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

-

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Soi đèn UV365nm

1 2

2 3 4

3

-

Với bước sóng 365nm ta quan sát được Đinh lăng có 3 vết. Bồ kết có 5 vết.

- Nhúng nhanh bản mỏng vào khai chứa thuốc thử vanillin-sulfuric (Thuốc thử vanillin-sulfuric là hốn hợp đồng thể tích của dung dịch: (a) dung dịch vanillin 1% trong cồn tuyệt đối và (b) dung dịch sulfuric 5% trong cồn tuyệt đối) và để đứng bản mỏng trên khay cho đến khi thật khô thuốc thử rồi sấy nhẹ

11

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

Sau đó hơi nóng bản mỏng ở 105 độ C trong vài phút

• Tính Rf :

ĐL

BK

- Đinh Lăng : + Rf (1) = 7.3/8 = 0.91 + Rf (2) = 6.8/8 = 0.85 + Rf (3) = 2/ 8 = 0.25 - Bồ Kết : + Rf (1) = 7.2 / 8 = 0.9 + Rf (2) = 6.8 /8 = 0.85 12

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com

Thực hành Dược liệu

B6_TN2_LTCĐ-ĐH D13A

+ Rf (3) = 5.2 / 8 = 0.65 + Rf (4) = 3.1 / 8 = 0.39

13

Phát hành PDF bởi Ths Nguyễn Thanh Tú Đăng ký Word doc qua Zalo 0905779594 Email thanhtuqn88@gmail.com