INVESTIGACIONES MOLECULARES EN EL ECUADOR: ENFERMEDADES CONGÉNITAS
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pérdida progresiva de la fuerza muscular y sobreviven hasta los 30 ó 40 años (Paz-yMiño et al., 1999b). 3.1. Gen DMD Esta enfermedad, en todas sus variedades, se debe a mutaciones en el gen DMD, las cuales constituyen principalmente deleciones (60% de todos los casos) que comprometen a los exones 2-20 y más frecuentemente a los exones 44-53 y las duplicaciones (6% de todos los casos) constituyen la mayoría de mutaciones detectables, localizadas en dos regiones específicas del gen a una distancia de 0,5 y 1,2 Kb del promotor. El DMD es uno de los genes más largos caracterizado y representa cerca del 0,1% de todo el genoma humano. Está constituido por 79 exones, repartidos en 2200 Kb de ADN (Tabla X.5) (Paz-y-Miño et al., 1999b). Tabla X.5. Características del gen DMD Características Símbolo oficial Nombre Otros alias Cromosoma Localización # Acceso NCBI Gen ID Tamaño secuencia Tamaño proteína Localización subcelular
Información DMD Distrofina BMD X Xq21,2 NC_000023,1 1756 2224919 bases 3685 aa; 426750 Da Membrana celular
Estructura proteica
(Norwood et al., 2000)
El gen DMD se encuentra localizado en el cromosoma X, en la región Xq21,2 del humano, como se observa en la Figura X.7.
FIGURA X.7. CROMOSOMA X HUMANO. Ubicación del gen DMD (GeneCards, 2014).
El ARNm mide 14 Kb, por lo cual la mayor parte del gen distrofina está ocupada por largos intrones. El gen codifica la proteína distrofina, de 3685 aminoácidos con un peso molecular de 427 KDa, que normalmente está asociada al sarcolema de las células musculares estriadas, esqueléticas y cardíacas. Se expresa en un número limitado de tejidos que incluyen: músculo esquelético, cardíaco, liso y en bajos niveles en cerebro. En la DMD la proteína falta totalmente (< 3% de las proteínas musculares) y en la DMB hay formas mutantes de la proteína que son disfuncionales (Paz-y-Miño et al., 1999b). Las pruebas moleculares han mostrado que las mutaciones detectadas en este gen son principalmente deleciones grandes, miles de bases implicadas, seguidas de duplicaciones. Usualmente, las deleciones son detectadas por medio de hibridización con sondas de ADNc o por amplificación por PCR de las regiones calientes (hot spots).