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BIOLOGÍA CELULAR
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Figura 6.6. Micrografías obtenidas de fibroblastos en cultivo sometidos a un procedimiento de extracción con detergente, fijación, secado por el método del punto crítico y aplicación de sombreado metálico. A: Redes de microfilamentos de actina en un lamelipodio X20 000. B: Haces de microfilamentos (estrella) en fibras de estrés X30 000. C: Moléculas de miosina organizadas formando cortos filamentos bipolares, que varían de un par de moléculas (cabezas de flecha) a unas pocas moléculas (flechas blancas), siempre con polaridad opuesta X25 000. D: Fibras de estrés en las que la actina ha sido decorada con puntas de flecha (cabezas de meromiosina pesada) X70 000. E: Detalle de un filamento de actina decorado. Las flechas apuntan hacia el extremo (–) de los microfilamentos e indican la dirección del deslizamiento. X155 000. (Tomado de Svitkina T M, Verkovsky AB, Borisy GG. Electrón Microscopy of the Cytoskeleton of Cultured Cells. En: Motta PM (ed.) Recent Advances in Microscopy of Cells, Tisues and Organs Roma. Antonio Delfino, 1997; pp. 93-100.)
se entrecruzan formando una doble hélice. Se extrae con ClK 1M. Según las proteínas asociadas, los haces pueden diferenciarse en contráctiles y no contráctiles.
Haces contráctiles. Miosina II La miosina II es necesaria para la formación de haces contráctiles, como los de las fibras de tensión (fibras de estrés). La GTPasa Rho facilita esta formación (Figs. 6.5 y 6.6.C). La miosina II representa el 2.5% de todas las proteínas de los fibroblastos, es decir, la tercera o cuarta parte
de la actina. Se extrae con ClK 0.3 M. Cada molécula de miosina II pesa 530 kDa, y consiste en dos cadenas pesadas, de 225 kDa cada una, y cuatro cadenas ligeras (Fig. 6.7.A). Estas últimas comprenden una cadena de 25 kDa, dos de 20 kDa y una de 16 kDa. Las dos cadenas pesadas forman una doble hélice de 150 × 2 nm y se repliegan en un extremo para formar, junto con las cadenas ligeras, dos cabezas globulares que confieren a la molécula una forma de bastón. La tripsina divide la miosina en dos partes: 1. Meromiosina ligera (LMM). Comprende algo más de la mitad de la porción recta que queda en el extremo opuesto a las cabezas (Fig. 6.7.A).