Técnicas de Inventario y Monitoreo de anfibios andinos

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Preparación y preservación de material científico

No obstante, no está comprobado que la solución buffer cumpla un papel relevante en la calidad y mantenimiento de las larvas preservadas. Dado que éstas se encuentran en medios líquidos, tienden a diluir la concentración de formol rápidamente después de que se han sacrificado. Por lo tanto, se recomienda sacrificarlas y fijarlas en una solución de formalina más concentrada (2 partes de formol por 8 de agua) y transferirlas posteriormente a la solución preservante de formol al 10% (de 4 a 12 horas después). Otras opciones de fijación y preservación son el alcohol etílico al 70%, el alcohol etílico al 96% (especialmente para el procesamiento posterior de tejidos) y un producto comercial denominado S.T.F.® (Streck Tissues Fixative, Laboratorios Streck, E.U.) que se promociona como una alternativa ambientalmente segura para la fijación de tejidos con aplicaciones histopatológicas, está libre de aldehído y alcohol, y se supone que preserva los ácidos nucleicos (www.streck.com/fixative). No obstante, las larvas preservadas en alcohol suelen encontrarse deshidratadas e inconsistentes, aunque se mantiene mejor su coloración original (McDiarmid & Altig 1999), mientras que la fijación con S.T.F.® no presenta mayores inconvenientes, salvo algunas diferencias en la consistencia de las larvas preservadas y tiene la ventaja de ser un compuesto menos restringido que el formol en cuanto a transporte y distribución (McDiarmid & Altig 1999).

3. Es ideal contar en un lote con larvas de diferentes estadios de desarrollo. Dado que no siempre se presentan así en el momento de la colección, si el tiempo, el tipo de muestreo y la logística lo permiten, se recomienda preservar los individuos en varias etapas. Para ello es necesario contar con un equipo mínimo, además del líquido fijador, consistente en frascos con tapa que se puedan llevar al sitio de colección (los recipientes para tomar muestras de orina o los envases de rollos fotográficos son una solución económica y práctica para el almacenamiento temporal), bolsas plásticas gruesas y una provisión de agua libre de cloro (lluvia o del curso de agua más cercano, preferiblemente sin sedimentos). La preservación por etapas comienza desde el momento mismo

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