Manual de Laboratorio para La Identificacion y Pruebas d Susceptibilidad

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Appendix #2 SpanishREV

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Guarde el Reactivo A de Nitrato a temperatura de la habitación (15˚C–30˚C) en la oscuridad. Los reactivos deben guardarse en frascos de cristal marrón oscuro o en frascos claros envueltos en papel de aluminio para asegurar la oscuridad. El Reactivo A de Nitrato es estable por un mes. Reactivo B de Nitrato ( solución de alfa-naftilamina): 0,6% en 5N de ácido acético* N,N-dimetil-1 naftilamina 0, 1g Agua destilada, hirviendo 100 ml Ácido acético, glacial 30 ml 1) Disuelva 0,1 g de N,N-dimetil-1 naftilamina en 100 ml de agua destilada hirviendo. Enfríe a temperatura ambiente. 2) Añada 30 ml de ácido acético glacial. 3) Filtre Guarde el Reactivo B de Nitrato a temperatura ambiente (15˚C–30˚C). Los Reactivos pueden guardarse en frascos de cristal marrón oscuros o en frascos claros envueltos en papel de aluminio para asegurar la oscuridad. El Reactivo B de Nitrato es estable por hasta una semana (7 días). Polvo de Zinc: grado reactivo. Guardar a temperatura ambiente. * Cuidado: El ácido acético 5 Normal (glacial) es corrosivo. El contacto con la piel puede causar flictenas y quemaduras. En caso de contacto, lavar los ojos y la piel inmediatamente con mucha agua corriente por lo menos durante 15 minutos.

Reactivo de nitrocefina para prueba de ß-lactamasa (penicilinasa) La prueba de nitrocefina se utiliza para detectar ß-lactamasa. Los reactivos deben calentarse a temperatura de la habitación antes de utilizarlos. Hay dos formulaciones del reactivo líquido para la prueba de nitrocefina: uno tiene una concentración de polvo de nitrocefina de 500 µg/ml y el otro de 25 µg/ml. El reactivo utilizado para la prueba en placa contiene 500 µg de polvo de nitrocefina/ml y se gotea en el medio de cultivo directamente sobre las colonias; en contraste, el reactivo utilizado para la prueba en tubo (en el que las células bacterianas son suspendidas en el reactivo) solamente contiene 25µg de nitrocefina/ml. Los discos de nitrocefina también están disponibles comercialmente. El reactivo de nitrocefina es costoso, por lo tanto este manual de laboratorio sugiere que se use el nitrocefina en disco, comercialmente disponible, para hacer la prueba, ya que en términos de costo-beneficio, es mejor utilizar el reactivo líquido (a menos que un laboratorio esté haciendo vigilancia de la resistencia de la penicilina en cepas de N. gonorrhoeae y vaya a llevar a cabo la prueba de nitrocefina en gran número de aislamientos). No obstante, si un laboratorio desea preparar su propio reactivo líquido de nitrocefina, las instrucciones están a Medios, Reactivos y Control de Calidad | 223


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