Appendix #2 SpanishREV
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Reactivos y misceláneas Coloración de Gram (Modificación de Hucker) reactivos La coloración de Gram (modificación de Hucker) requiere el uso de dos colorantes (por ejemplo, el cristal violeta y la safranina o carbol fuchina), la solución de yodo de Gram y un agente decolorante (alcohol etílico). Los reactivos individuales y el estuche de colorante de Gram están disponibles, comercialmente, de muchas fuentes de suministros de laboratorio. Alternativamente, siga los métodos para la preparación de los reactivos individuales (como se presentan debajo en los pasos de a–d). a) Cristal violeta-oxalato de amonio, contiene dos soluciones (solución a y solución b). Solución a Cristal violeta (certificado) 2,0 g Disolver en alcohol etílico al 95% 20,0 ml Solución b Oxalato de amonio 0,8 g Agua destilada 80,0 ml 1. Mezcle las soluciones a y b. 2. Déjela reposar toda la noche. 3. Fíltrela antes de utilizarla utilizando papel de filtro. b) La solución de yodo de Gram debe ser protegida de la luz. Yodo (cristales) 1g Yoduro de potasio 2g Agua destilada 300 ml 1. Combine los cristales de yodo, el potasio y el agua destilada para preparar una solución de yodo. • Puede ser muy útil para preparar la solución de yodo triturar las sustancias químicas secas en un mortero, agregándole agua destilada. 2. Guarde la solución de yodo de Gram en un frasco oscuro y protéjalo de la luz para que no se degrade. c) La decoloración es comúnmente con alcohol etílico. (Algunos estuches utilizan acetona o la combinación de alcohol acetona.) 95% de alcohol etílico d) El contraste es comúnmente tanto con safranina o carbol fuchina. La carbol fuchina de Ziehl-Nielsen es considerada por muchos, como un colorante de contraste más efectivo que la carbol fuchina.
220 | Manual de Laboratorio para la Identificación y Prueba de Susceptibilidad a los Antimicrobianos