Chapter 9 SPANISH
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agar no selectivo. El uso de crecimiento de agar tiosulfato, citrato, sales biliares, sacarosa (ATCBS) puede dar una reacción falsa negativa. Después de 5 a 6 horas de incubación, el crecimiento en la superficie de la cuña es casi siempre suficiente para realizar la prueba de aglutinación en lámina con el antisuero; si no, incube por un período más largo. Si el aislamiento no aglutina con el antisuero O1, pruebe con el antisuero O139. Si la reacción con el polivalente O1 o con el antisuero O139 es positiva, el aislamiento puede ser notificado presuntamente como de V. cholerae O1 u O139. Estos aislamiento presuntivos de V. cholerae O1 pueden probarse con antisueros monovalentes de Ogawa e Inaba (métodos que se presentarán a continuación). Una vez que una colonia de una placa ha sido identificada como V. cholerae O1 u O139, no es necesario seguir probando otras colonias de la misma placa. (Véase el Apéndice 2 para el análisis del control de calidad de los antisueros.) Confirmación de V. cholerae O1 con antisueros Inaba y Ogawa El serogrupo O1 de V. cholerae se ha dividido en otros tres serotipos: Inaba, Ogawa y Hikojima (el cual es muy raro). La identificación de serotipos se hace por aglutinación en antisueros monovalentes por tipo específico de antígenos O (Tabla 20). Una reacción positiva con cualquiera de los antisueros Inaba u Ogawa es suficiente para confirmar la identificación de un aislamiento de V. cholerae O1. Los aislamientos cuya aglutinación es débil o lenta con el antisuero del serogrupo O1 y que no aglutinan con el antisuero de Inaba o Ogawa, se consideran que no pertenecen al serogrupo O1. La identificación con estos antígenos es válida solamente para los aislamientos del serogrupo O1. Por esta razón, los antisueros Inaba y Ogawa nunca deben usarse con cepas que son negativas con el antisuero polivalente O1. Con frecuencia, las cepas de un serotipo producen una aglutinación lenta o débil con el antisuero de otro serotipo, dependiendo de lo bien que hayan sido absorbidos los antisueros específicos para el serotipo. Por esta razón, se deben examinar simultáneamente las reacciones de aglutinación con los antisueros de Inaba y Ogawa; debe usarse la reacción más fuerte y más rápida para la identificación del serotipo. Con antisueros adecuadamente absorbidos, son raras, si las hay, las cepas que aglutinan muy fuerte y similarmente con ambos antisueros TABLA 20: Reacciones de aglutinación en antisuero absorbido de serotipos de Vibrio cholerae serogrupo O1
V. cholerae serotipo O1
antisuero Ogawa
antisuero Inaba
Ogawa
+a
–b
Inaba
–
+
Hikojima c
+
+
a + indica una reacción de aglutinación positiva en el antisuero absorbido. b – indica una reacción de aglutinación negativa en el antisuero absorbido. c si existe una reacción positiva en ambos antisueros (Ogawa y Inaba) y se sospecha el serotipo Hikojima, envíe el aislamiento a un
laboratorio de referencia internacional, siguiendo las regulaciones de embalaje que se presentan en el Apéndice 12.
160 | Manual de Laboratorio para la Identificación y Prueba de Susceptibilidad a los Antimicrobianos