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Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Metódicas de determinación: Formación de fosfomolibdato-vanadato El fósforo inorgánico reacciona en ambiente ácido con molibdato y vanadato con formación de un compuesto de color amarillo. Metódica enzimática El fosfato inorgánico, en presencia de glucógeno y de la enzima fosforilasa, forma glucosa1-fosfato que produce a través de la enzima 6-fosfogluconato NADPH y que es medido a 340 nm. Formación de un complejo fosfomolibdato y procedimiento analítico El fosfato inorgánico reacciona en medio ácido con el molibdato, para dar fosfomolibdado que es reducido por el ácido ascórbico a azul de molibdeno, desarrollándose el color en medio arsenito/citrato. El arsenito/citrato se combina con el exceso de molibdato, impidiendo su reacción posterior con el fosfato liberado de los esteres labiles. El color obtenido se mide entre 620-650 nm. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.