64 Atlas de la IASLC de Pruebas de ALK en Cáncer de Pulmón
pacientes de adenocarcinoma con información de la IHC de ALK disponible N=1099 100
ALK IHC– N=1030
Estudio de cohorte pareado de la IHC de ALK 1:2 N=207 factores coincidentes en orden de importancia: estadio, sexo/tabaquismo, centro/año de realización de la intervención quirúrgica/edad ALK IHC+ N=69* 38 FISH–
22 FISH+
*9, prueba FISH no realizada
ALK IHC– N=138 1 FISH+
137 FISH–
99,3%
93,5%
87,5%
9,5% 90,5%
80
porcentaje
ALK IHC+ N=69
60 40 20 0
12,5% 6,5% IHC resultado IHC resultado IHC resultado IHC resultado 0+ 1+ 2+ 3+
FISH ALK
FISH negativo
FISH positivo
Figura 1. Los resultados del proyecto ETOP Lungscape. Entre 1099 adenocarcinomas de pulmón, 69 se identificaron como ALK positivo en la IHC. La concordancia entre la IHC y la prueba FISH se analizó en un cohorte emparejado.
Molecular) por FISH: los anticuerpos ALK1 (Dako, un centro), clon 5A4 (Novocastra; 12 centros), el clon D5F3 (Cell Signaling Technology, un centro); y el sistema de tinción automática existente localmente disponibles (Dako, Leica Biosystems, o Ventana Medical Systems, Inc.). Se recogieron y analizaron los resultados propios de la IHC de 12 centros que evaluaron el anticuerpo 5A4 y los resultados de FISH en 11. El coeficiente de correlación intraclase (CCI) entre centros para IHC era 0,84. Tras el análisis inicial de los resultados de la IHC y una reunión de los patólogos participantes para revisar los cortes, cada laboratorio implementó los ajustes de protocolo pertinentes. Un segundo estudio se llevó a cabo con el mismo conjunto de muestras, y el CCI mejoró significativamente (0,94). El CCI para FISH fue de 0,68, y la sensibilidad y especificidad de los resultados de FISH entre centros fue del 88 % al 100 % y 100%, respectivamente. Los autores de este estudio concluyeron que se puede lograr la estandarización en los múltiples centros para las pruebas de ALK por la técnica de IHC y de FISH. Se detectaron todos los tumores que eran ALK-positivo por IHC y FISH, a excepción de un caso discrepante con resultados de la prueba FISH atípicos con una mutación desconocida e implicación clínica también desconocida. Sin embargo, los resultados también sugieren la posible aparición de resultados falsos negativos ocasionales en FISH. Japón Crizotinib fue aprobado por la Agencia de Productos Farmacéuticos y Sanitarios en Japón el 30 de marzo del 2012, pero este agente no se pudo utilizar en la práctica clínica hasta que fue incluido en la Lista de Precios de Medicamentos del Seguro de Salud Nacional. Tres meses antes de que se incluyera esta medicación, Pfizer Japón llevó a cabo un programa de pre-reembolso por razones éticas, en el que la compañía farmacéutica proporcionaba crizotinib a un instituto certificado cuando se determinaba que un tumor era ALK positivo. En el programa, se examinaron muestras FFPE simultáneamente con la prueba FISH (Vysis LSI ALK Break Apart FISH Probe Kit, Abbott Molecular) y la IHC (el anticuerpo clon 5A4 junto con el sistema EnVision FLEX + [ Dako ] y un kit de