IA L
Tiếp tục đem vi phẫu ngâm vào trong phẩm nhuộm lục iod 5-10 giây. Rửa sạch vi phẫu lại bằng nước cất (nước thường) cho đến khi dung dịch rửa hết màu. Kế đến ngâm lát cắt vào trong phẩm nhuộm son phèn 15 phút. Rửa sạch vi phẫu lại bằng nước cất (nước thường) cho đến khi dung dịch rửa hết màu.
IC
Vi phẫu sau khi nhuộm xong ta có thể đem ngâm vào nước cất hay dung dịch glycerin để bảo quản mẫu. Soi vi phẫu vừa chuẩn xong bằng nước cất, quan sát dưới kính hiển vi, chụp ảnh, vẽ hình mẫu vi phẫu.
OF F
Các lưu ý khi quan sát mẫu vi phẫu:
3.2. Kỹ thuật bóc tách biểu bì
NH ƠN
- Vi phẫu lá: quan sát hình dạng tổng quát của vi phẫu, độ lồi, lõm của gân lá; cấu tạo tế bào biểu bì, lông che chở, lồng tiết, cấu tạo bó libe gỗ của gân chính và gân phụ, tầng cutin mỏng hay dày, mô mềm giậu một tầng hay nhiều tầng, phiến lá cấu tạo đồng thể hay di thể,…. - Vi phẫu thân: quan sát tiết diện thân (tròn, vuông, đa giác,...), tỷ lệ của các thành phần, phân bố libe và gỗ, hình dạng các mô, vị trí các bộ máy tiết, vị trí đặc điểm của tầng phát sinh,... - Vi phẫu rễ và thân rễ: chú ý cấu tạo lớp bần, suberoid, tỷ lệ các thành, cách bố trí của các mạch gỗ, libe, tia tuỷ, hình dạng các mô, vị trí của các bộ máy tiết,... [34].
QU Y
Khi khảo sát các bộ phận của dược liệu như lá, thân hoặc rễ non người ta có thể tách riêng lớp biểu bì để quan sát. Để tách riêng lớp biểu bì người ta có thể xé dùng dao lam tách hay cạo lấy lớp ngoài cùng. Áp dụng với dược liệu tươi, dược liệu khô đã làm mềm. Các đặc điểm thường được quan sát của tế bào biểu bì lá là: Biểu bì:
KÈ
M
Lá của các cây khác nhau được đặc trưng bởi các dạng tế bào biểu bì xác định, ở một số cây tế bào biểu bì có dạng uốn khúc nhiều hoặc ít, một số có nhiều góc, có khi tế bào biểu bì bị kéo dài rõ rệt theo một hướng.
Y
Kích thước của tế bào biểu bì là một trong những yếu tố đặc trưng để xác định các cây. Tế bào biểu bì thường được bọc bởi một lớp màng mỏng cấu tạo từ cutin.
DẠ
Lớp cutin có bề mặt nhẵn song đôi khi tạo thành các nếp gấp gấp thẳng hoặc lượn sóng hay có những chỗ lồi dưới dạng u mấu, các đặc điểm của lớp cutin bao phủ biểu bì cũng như chiều dày của nó đặc trưng cho một số loại cây có ý nghĩa trong kiểm nghiệm dược liệu. Chiều dày của lớp cutin có thể xác định rõ khi nhuộm tiêu bản bằng lát cắt ngang bằng dung dịch Sudan III. 20